Enzim Lipase kelompok 111

L/O/G/O ENZIM LIPASE

Enzimologi

Presented by:RATNA (F1C1 10 009)

ROSDIANA (F1C1 10 0 018)L.M.KAMAL (F1C1 10 019)

EKO WIBOWO (F1C1 10 020)JUMAING (F1C1 10 022)

http://en.wikipedia.org/wiki/File:1ALK.png

http://en.wikipedia.org/wiki/File:PDB_1alk_EBI.jpg

www.themegallery.com

ISI MATERIEnzim lipase

P E N D A H U L U A N

PENGERTIAN ENZIM LIPASE & LIPOKSIDASE

TATA NAMA, SPESIFIKASI DAN KLASIFIKASI ENZIM LIPASE

SUMBER ENZIM LIPASE

SIFAT-SIFAT/KARAKTERISTIK ENZIM LIPASE

FUNGSI ENZIM LIPASE

ISOLASI, KARAKTERISASI DAN AKTIVITAS ENZIM LIPASE

FAKOR YANG MEMPENGARUHI ENZIM LIPASE DAN APLIKASINYA




PENDAHULUAN

Reaksi Kimia

suhu, tekanan, waktu, dll

“Laboratorium Rumit”

Enzim lipase

LIPASELIPASE

Mahasiswa

Pengetahuan





ENZIM LIPASEEnzim lipaseLipase adalah kelas turunan dari enzim esterase enzim yang

mengkatalisis pemecahan lemak menjadi asam lemak dan gliserolwikipedia

Enzim lipase termostabil atau asilgliserol hidrolase (E.C 3.1.1.3) merupakan enzim yang dapat menghidrolisis rantai panjang trigliserida.

Tika, et.al., 2012

Lipase merupakan kelompok enzim yang secara umum berfungsi dalam hidrolisis lemak, mono-, di-, dan trigliserida untuk menghasilkan asam lemak bebas dan gliserol

Falony et. al., 2006




LIPOSIDASEEnzim lipase

Lipoksidase adalah enzim protein yang dapat dikristalkan secara

primer mampu mengkatalisis oksidasi dengan oksigen asam

lemak tak jenuh dan lemak tak jenuh , dan secara sekunder

mengoksidasi karotenoid sehingga menjadi senyawa tak

berwarna, terdapat dalam kedelai dan padi-padian

Kamus Kimia

Lipoksidase adalah enzim yang mengkatalsis penambahan oksigen pada ikatan rangkap dari asam lemak tak jenuh dan tumbuhan asal

Kamus Kimia




TATA NAMA, SPESIFIKASI DAN KLASIFIKASI ENZIM

LIPASE Enzim lipaseTATA

NAMATATA

NAMA

International Union of

Biochemistry

lipase termasuk kelompok enzim yang dikenal sebagai ester hidrolase dan

diklasifikasikan sebagai enzim kelas 3.1

Ester hydrolase (3.1)

Carboxyl ester hydrolase (3.1.1)

Glycerol ester hydrolase (3.1.1.3)

Ngom, 2000

Ngom, 2000





LIPASE Enzim lipaseSPESIFIKASIEkspresi kemampuan

suatu enzim untuk membedakan substrat-substratnya berdasarkan pada perbedaan afinitas substrat dalam berasosiasi dengan sisi aktif enzim untuk membentuk komplek enzim substrat dan akhirnya menghasilkan produk

Spesifisitas Gabungan

Spesifisitas Jenis Lipid

Spesifisitas Posisi

Spesifisitas Asam Lemak

Spesifisitas Alkohol





LIPASE Enzim lipaseKLASIFIKASI

Berdasarkan kemampuannya dalam mensintesis ikatan ester, lipase diklasifikasikan ke dalam

3 golongan menurut kekhasannya (deMan, 1997)

Lipase Yang Tidak Khas.

Lipase Yang Mempunyai

Kekhasan Posisi

Kekhasan Untuk Asam

Lemak Tertentu.




SUMBER ENZIM LIPASE Enzim

lipase

HEWAN

MIKROORGANISME

TANAMAN

Lipase hewan (mamalia) dikelompokkan

berdasarkan sumbernya, yaitu lipase

dalam sistem pencernaan seperti

lambung dan pankreas, lipase dalam jaringan

hati, paru-paru, jantung dan ginjal, serta lipase

dalam air susu

Lipase tanaman dibagi menjadi 4 kelompok yaitu :

lipase triasilgliserol

lipase asilhidrolase,

lipase fosfolipid dan lipase

lisofosfolipase

Lipase mikroorganisme dapat diproduksi dari golongan bakteri, khamir dan jamur (Falony, 2006) baik sendiri maupun bersama-sama dengan jenis lain dari family hydrolase, seperti esterase (Pera, 2006).




SIFAT / KARAKTERISTIK ENZIM LIPASE

Enzim lipaseEnzim ini dapat bekerja pada lapisan antar muka karena adanya perbedaan

kepolaran antara lipase dengan substrat yang dikatalisisnya. Lipase cenderung bersifat polar

Aktivasi pada lapisan antar muka dari lipase ini akan meningkat ketika substrat yang tersedia berada dalam bentuk emulsinya. Sebagai akibat dari karakteristik ini, maka kinetika dari lipase tidak mengikuti aturan klasik model Michaelis-Menten (Jaeger, et al, 1994).

Substrat dan produk yang dihasilkan dari katalitik lipase ini terkadang bersifat tidak dapat larut dengan baik dalam media air.

Lipase dapat stabil dan tetap aktif dalam suatu pelarut organik tanpa adanya penambahan senyawa penstabil

Aktivitas lipase tergantung pada sumber, jenis substrat, pH dan temperatur. pH dan temperatur optimum reaksi hidrolisis lipase tergantung pada jenis dan sumber substrat, larutan penyangga (bufer) dan pengujian yang digunakan.




FUNGSI ENZIM LIPASE Enzim

lipaseFUNGSI Sebagai biokatalisator dalam proses reaksi

Hidrolisis Sistesis

RCOOR’ + H2O RCOOH + R’OH

Esterifikasi

RCOOH + R’OH RCOOR + H2O

Interesterifikasi

RCOOR + R’COOR’’ RCOOR’’+ R’’ COOR’

Alkoolisis

RCOOR’ + R’’OH RCOOR’’+ R’ OH

Asidolisis

RCOOR’ + R’’COOH R’’COOR’+ RCOOH




Loading ...


ISOLASI DAN AKTIVITAS ENZIM LIPASE

Enzim lipase

ISOLASI “Isolasi Enzim Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Air Panas

Banyuwedang Kecamatan Gerogak, Buleleng Bali”

Identifikasi Bakteri Termofilik Dan Isolasi Enzim Lipase

Uji Aktivitas Lipase Termostabil

Penentuan Kadar Protein




PENDAHULUAN

Enzim lipase termostabil

Enzim yang dapat

menghidrolisis rantai

panjang trigliserida

Enzim ini memiliki potensi untuk digunakan

memproduksi asam lemak,

Latar Belakang

Jatropha curcas Linn

Enzim lipase termostabil dari bakteri termofilik merupakan enzim yang sangat potensial untuk mengatasi kendala teknis industri, namun masih ditemukannya kendala lain, dalam hal perolehan hasil (yield) enzim lipase termostabil dari mkroorganisme termofilik yang sangat rendah.


Mengatasi kendala itu beberapa pendekatan ditempuh :

Rekayasa genetika untuk menghasilkan enzim lipase termostabil dengan ekspresi tinggi.

Sumber baru enzim lipase termostabil dari mikroorganisme termofilik yang tumbuh dari habitat yang unik.

PENDAHULUAN Latar Belakang

Suhu fermentasi yang sesuai untuk menghasilkan lipase termostabil.


PROSEDUR KERJA

Koloni tunggal yang tumbuh pada media padat LB

• Ditumbuhkan pada media yang mengandung Rhodamin B

• Di inkubasi selama 2 x 24 jam pada suhu 50oC

• disinari dengan sinar UV • diukur halo yang terbentuk

Hasil

Identifikasi Bakteri Termofilik dan Isolasi Enzim Lipase


filtrat kultur (1 mL)

• dikocok dengan emulsi 2,5 mL (1:1,v/v) minyak olive (70% residu oleate

• Di tambahkan 20 µL CaCl 2 0,02 M yang dikocok 200 rpm dalam water bath.

water bath. Emulsi yang terbentuk

• dicampur minyak olive dan 50 mL bufer posfat.• Diinkubasi pada suhu 50°C.• dihentikan reaksi dengan penambahan 6 N HCl (1

mL) dan isooktan 5 mL,• ditambah isooktan 4 mL• dipindahkan ke tabung analisis dan ditambahkan

reagen Cu (tembaga) dan larutan tembaga II asetat 1-hidrat pH 6,1 yang mengandung piridin.

• diukur pada panjang gelombang 715 nm.

Hasil Pengamatan

UJI AKTIVITAS LIPASE TERMOSTABIL


Lokasi Banyuwedeng air panas 60-70 derajat Celsius, dan sering berubah karena bercampur dengan sumber air tawar yang juga digunakan oleh penduduk, serta adanya rembesan air payau dari pantai.

HASIL ISOLAT


TABEL DAN GRAFIK


KESIMPULAN

1. Enzim lipase yang dihasilkan oleh bakteri termofilik biasanya dihasilkan pada seluruh fase kehidupan mikroorganisme (Brockman, et al., 1988).

2. Enzim ini digunakan untuk memecah lemak menjadi komponen asam lemak, yang amat dibutuhkan dalam metabolisme mikroorganisme yang bersangkutan.

3. Ekspresi enzim lipase meningkat saat mikroorganisme memasuki fase kematian karena jumlah produk lemak dari sel-sel yang mati meningkat (Madigan, 1994).


Enzim lipase

Potensiometri

Metoda Titrimetri

Interfacial tensiometry,

Spectroscopy (photometry, fluorimetry, Infrared dan turbidimetri

Kromatografi immunochemistry

Konduktometri.

AKTIVITAS ENZIM LIPASE

AKTIVITAS




FAKTOR YANG MEMPENGARUH I AKTIVITAS ENZIM LIPASE DAN APLIKASINYA Enzim

lipaseFAKTOR

Aktivitas enzim lipase dipengaruhi oleh beberapa faktor, diantaranya adalah temperatur, air, pelarut organik, konsentrasi enzim dan substrat

APLIKASI

Enzim lipase memiliki banyak aplikasi di dalam berbagai bidang industri ( kosmetik, makanan, parfum, sintesis bahan organik, dll) maupun bioteknologi (biokatalis untuk reaksi reaksi hidrolisis, esterifikasi, alkoholisis, asidolisis and aminolisis.).



L/O/G/O


Terima Kasih…

Documents

Enzim Lipase kelompok 111