Equipos de inmunología¿QUE ES UN LABORATORIO CLÍNICO?

Es el lugar donde se realizan análisis clínicos que contribuyen al estudio, prevención, diagnóstico y tratamiento de los problemas de salud de los pacientes.

DOS TIPOS DE LABORATORIOS CLÍNICOS

LABORATORIOS DE RUTINA: tiene 4 departamentos básicos

Hematología Inmunología

Microbiología

Química Clínica

LABORATORIOS DE ESPECIALIDAD: se realizan estudios más especializados y sofisticados, que requieren equipo especializado y personal calificado. Participan también en programas de investigación.

Algunos ejemplos:

Estudios genéticos Cromatografías de alta resolución

Amplificación de ácidos nucléicos

Citrometría de flujo

Inmunología

1.- DEFINICIÓN:

Realiza pruebas sobre anticuerpos que revelan la actividad y presencia de microorganismos en el cuerpo.

2.-PRUEBAS

Miden la cantidad de inmunocomplejos (unión antígeno-anticuerpo), utilizando radioisótopos, colorantes fluorescentes o enzimas.

Radioinmunoanálisis (RIA)

ELISA

Inmunofluorescencia.

Serología

EL RADIOINMUNOANÁLISIS (RIA)

Técnica utilizada para determinar la concentración de un antígeno, anticuerpo u otra proteína del suero.

Diferencia del RIA y ELISA

RIA

Uso general medir los niveles de hormonas en sangre y líquidos de tejido.

ELISA

Utilizada con frecuencia en diagnósticos virales.

ELISA

Es una técnica de inmunoensayo se basa en la detección de un antígeno inmovilizado sobre una fase sólida mediante anticuerpos que directa o indirectamente producen una reacción, por ejemplo un colorante, puede ser medido espectrofotométricamente.

Se cuantifica con espectrofotómetro

Utilizada con frecuencia en diagnósticos virales.

Tipos de ensayos ELISA

ELISA directo

• Las placas ELISA se preparan recubriendo los pocillos con las soluciones en que se sospecha se encuentra el antígeno.

• Se incuban con anticuerpos marcados.

• Indican la presencia de antígeno en la solución analizada.

• Es necesario incluir controles negativos que serán muestras del mismo tipo de las analizadas (sangre, orina)

ELISA indirecto

• Los controles positivos y negativos son los mismos. • El sistema de detección emplea dos anticuerpos uno primario contra el

antígeno, el secundario marcado contra el primario.

ELISA sándwich

• Ensayo de captura de antígeno y detección mediante inmunocomplejos Se trata de un ensayo muy empleado en el que se recubre el pocillo con un primer anticuerpo anti-antígeno.

VENTAJAS DE ELISA

-El ensayo puede ser automatizado

-Es cuantitativa

-Técnica más sensible, detecta menor cantidad de anticuerpos

-Útil para estudiar cualquiera de los anticuerpos antinucleares

Pruebas de inmunoflurescencia

se utiliza inmunoglobulinas marcadas con sustancias fluorescentes como isotiosyanato de fluoresceínas, parecido a las enzimas empleadas en los de Elisa .Es un método muy sensible que requiere el uso un microscopio de Florencia, tiene y un campo muy amplio de aplicación y se utiliza para la detención de antígenos en los tejidos.

Estas pruebas son muy sensibles pero su interpretación, las pruebas de inmunoflurescencia, tiene dos variantes: Directa, Indirecta.

INMUNOFLURESCENCIA DIRECTA

Mediante este examen, se puede detectar la presencia de subespecies de T pallidum en tejidos, fluidos corporales, secreciones y exudados de lesiones.

Inmunoflurescencia Indirecta

Técnica de primera elección para detectar anticuerpos antinucleares (ANA)

Tinción de inmunoflurescencia

La tinción fluorescente de los cromosomas presenta 4 principales patrones de inmunoflurescencia del núcleo:

PATRÓN HOMOGÉNEO O DIFUSO:

El núcleo se tiñe de manera uniforme y sugiere la presencia de anticuerpos a ADN nuclear o histonas.

PATRÓN PERIFÉRICO O ANULAR:

El núcleo se tiñe predominantemente en la periferia e indica la presencia de anticuerpos contra los complejos ADN nuclear-histonas.

PATRÓN MOTEADO:

Presenta numerosos puntos uniformes y pequeños de fluorescencia. Es un patrón inespecífico que se aprecia en Artritis Reumatoide.

PATRÓN NUCLEOLAR:

Teñido intenso y homogéneo de los nucléolos, frecuentemente relacionado con fluorescencia homogénea débil del resto del núcleo. Relacionado con Esclerosis sistémica progresiva (ESP)

PRUEBAS SEROLÓGICAS

1.-DEFINICI0N:

Son formas de evaluación relativas, que detectan concentración comparativa de ciertas clases de inmunoglobulinas que podrían estar presentes en algunas alergias.

Son de dos tipos: no-treponémicas y treponémicas

PRUEBAS NO TREPONÉMICAS:

Consisten en baja sensibilidad en sífilis primaria temprana, con prueba de campo oscuro positiva, en sífilis tardía y la posibilidad de fenómeno de prozona o de resultados falsos positivos.

LAS PRUEBAS TREPONÉMICAS:

Emplean como antígeno al T. pallidum subespecie pallidum y detectan anticuerpos

específicos antitreponémicos

OBJETIVOS DE SEROLOGÍA

Identificación de problemas de salud.

Determinación de la distribución de una enfermedad.

Determinación de la incidencia y prevalencia de una enfermedad.

Evaluación del sistema inmune del individuo o de una población.

Programación de calendarios de vacunación.

Evaluación de programas o campañas de vacunación.

3.- equipos

Microscopio de inmunoflurescencia.

Espectrofotómetro.

Microscopia de inmunoflurescencia

En 1941 Coons intentó conjugar los anticuerpos con colorantes fluorescentes

En 1942 publicó la primera aplicación de esta técnica inmunológica

La microscopia de inmunoflurescencia es una técnica inmunohistoquímica que consiste en conjugar colorantes fluorescentes.

DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO DE INMUNOFLURESCENCIA

Consta de una fuente de luz (lámpara de mercurio o halógena) la cual debe emitir la mayor cantidad de luz ultravioleta.

un sistema de filtros, el de excitación o selección de luz ubicado entre la fuente de luz y el preparado, tiene por objeto permitir el paso de ondas de luz con longitud que caiga en el rango azul con el fin que el preparado sea alcanzado exclusivamente por la luz azul y produzca emisión de luz fluorescente.

Es segundo filtro es el de calor y está ubicado entre la fuente de luz y el filtro de excitación en los microscopios de luz transmitida y entre la fuente de luz y el espejo dicrómico en los microscopios de luz incidente.

El tercer tipo de filtro es de barrera, colocado antes del ocular para prevenir daños retinianos que podrían ser causados por rayos ultravioleta que escapan el espejo dicrómico.

FUNCIONAMIENTO La luz de una fuente de longitud de onda múltiple se mueve a través de un filtro excitador que solo permite que pase la radiación excitada de la longitud de onda deseada. Esta radiación es reflejada por el filtro dicromático y enfocada por la lente del objetivo sobre la muestra, las moléculas fluorescentes de la muestra se excitan y emiten luz (por fluorescencia) de una longitud de onda específica y mayor. Esta luz es enfocada por el objetivo y la mayor parte pasa a través del filtro dicromático y no se refleja. Un filtro de barrera final bloquea toda la luz residual con la frecuencia de la radiación de excitación.

Espectrofotómetro

Lector de Elisa

Disponen de sistemas de filtros que sólo permiten la lectura de una o pocas longitudes de onda. Son espectrofotómetros capaces de realizar lecturas seriadas de cada uno de los

pocillos de la placa ELISA. A diferencia de un espectrofotómetro convencional, con capacidad de leer todas las longitudes de onda del ultravioleta y el visible de manera continua, los lectores de ELISA disponen de sistemas de filtros que sólo permiten la lectura de una o pocas longitudes de onda. Son la que se corresponden con las necesarias para determinar la densidad óptica de los cromógenos más comúnmente utilizados.

Convencional

Con capacidad de leer todas las longitudes de onda del ultravioleta y el visible de manera continúa.

Referencias bibliográficas

http://www.lib.mcg.edu/edu/esimmuno/ch4/radassay.htm www.google.com.pe

www.wikipedia.com

Año de la consolidación económica y social del Perú

SERGIO BERNALES

Docente: ESQUECHE ÁNGELES, CARLOS

CURSO: INSTRUMENTACIÓN DE LABORATORIO

Tema: EQUIPOS DE INMUNOLOGÍA

Ciclo: III b

ESPECIALIDAD: laboratorio clínico

Integrantes: murrugarra angulo roger

Tirado zelada ruth