4
Direct DNA sequence analysis of the PTEN gene, exons 1±9, revealed that the patient was heterozygous for a base insertion in exon 1 (Fig 1a), which normally encodes 26 amino acids (nucleotides 1±128). An insertion of an adenosine between nucleotides 40 and 41 results in a frameshift at codon 14. The mutation was con®rmed by BslI restriction enzyme analysis but was not found in any of the patient's kindred (Fig 1b). The absence of the mutation in the mother, father, and sister is consistent with the PTEN mutation being a spontaneous de novo mutation or alternatively nonpaternity. The PTEN 40Ã41insA mutation results in a frameshift at the 14th residue and truncation after a further 29 novel amino acids have been translated. To our knowledge this is the most 5¢ mutation reported in the PTEN gene. The mutation results in total loss of the phosphatase and 5¢ tensin domains. Although the clinical features in this patient are mostly typical of Cowden disease, it is interesting that this patient displays a large number of Cowden disease manifestations and, in particular, a large number of cutaneous lesions, i.e., ®broepithelial polyps and acanthosis nigricans. In contrast, three other local families that we have examined, who have only partial loss of the PTEN gene (Raizis et al, 1998), have very few skin lesions. Acanthosis nigricans is relatively uncommon in Cowden disease but is often observed in the isoallelic disease Bannayan-Riley±Ruvalcaba Syndrome (BRR syndrome) (Fargnoli et al, 1996). The propositus did not display clinical features pathognomonic of BRR. The 40 Ã41insA muta- tion, however, is a clear example of complete disruption of PTEN and it is of interest that none of three other local families that we have examined have such a wide range of Cowden disease-related features. This work was supported by the McClelland Trust fund, Christchurch, New Zealand. We would also like to thank Associate Professor Charis Eng for unpublished exon 1 primer sequences. Anthony M. Raizis,* Martin M. Ferguson,² David T. Nicholls,³ Derek W. Goodisson,² Peter M. George* Departments of *Clinical Biochemistry and ³Dermatology, Christchurch Hospital, Christchurch, New Zealand ²Department of Stomatology, University of Otago, Dunedin, New Zealand REFERENCES Fargnoli MC, Orlow SJ, Semel-Concepcion J, Bolognia JL: Clinicopathologic ®ndings in the Bannayan-Riley±Ruvalcaba syndrome. Arch Dermatol, 1996 132:1218±1218 Li J, Yen C, Liaw D, et al: PTEN, a putative protein tyrosine phosphatase gene mutated in human brain, breast, and prostate cancer. Science 275:1943±1947, 1997 Marsh DJ, Coulon V, Lunetta KL, et al: Mutation spectrum and genotype-phenotype analyses in Cowden disease and Bannayan±Zonana syndromes with germline PTEN mutation. Hum Mol Genet 7:507±515, 1998 Nelen MR, Padberg GW, Peeters EA, et al: Localization of the gene for Cowden disease to chromosome 10q22±23. Nature Genet 13:114±116, 1996 Raizis AM, Ferguson MM, Robinson BA, Atkinson CH, George P: Identi®cation of a novel PTEN mutation (L139X) in a patient with Cowden disease and Sjogren syndrome. J Clin Path 51:339±341, 1998 Steck PA, Pershouse MA, Jasser SA, et al: Identi®cation of a candidate tumour suppressor gene, MMAC1, at chromosome 10q23.3 that is mutated in multiple advanced cancers. Nature Genet 15:356±362, 1997 Expression of IL-18 in Human Keratinocytes To the Editor: We read the article ``Counterregulation of interleukin-18 mRNA and protein expression during cutaneous wound repair in mice'' by Ka Èmpfer et al (1999) with interest. The authors' observations throw new light on the relationship between healing and in¯ammation, and we concur with the concept that IL-18 is likely to be of major importance in epithelial biology; however, we feel uncomfortable about one observation in the paper, namely that keratinocyte IL-18 is constitutively and inducibly present as the processed 18 kDa molecule. Both of our groups have independently performed experiments that yield results fundamentally different from those contained in the paper by Ka Èmpfer et al. By use of immunodetection on western blot, we have demonstrated that intracellular IL-18 in all primary keratinocyte preparations and keratinocyte cell lines that we have studied occurs in the unprocessed 24 kDa form (Figs 1, 2). The unprocessed form was also released into the medium by HaCaT cells and primary keratinocytes. In our two laboratories we see a clear difference in molecular weight (MW) between recombinant human mature IL-18, which migrates at the expected 18 kDa MW, and both the intracellular and released IL-18, which migrate with a MW of approximately 24 kDa. This is not apparent in any of the authors' western blots and in none of them is recombinant IL-18 (rhuIL-18) run to serve as an appropriate sizing control. We suspect Manuscript received October 26, 1999; accepted for publication December 7, 1999. Reprint requests to: Dr. R.W. Groves, UCL Center for Dermatology, The Rayne Institute, 5 University Street, London WC1E 6JJ, UK. Email: [email protected] Figure 2. IL-18 protein expression in unstimulated primary human keratinocytes. Western blot was probed with a goat antihuman IL-18 polyclonal antibody (sc6177). Lane 1, unstimulated keratinocyte lysate; lane 2, rhuIL-18 (5 ng). Sizes indicated in kDa. Figure 1. IL-18 protein expression in unstimulated HaCaT cells. Detection on western blot with an anti-IL-18 speci®c monoclonal antibody (MAB318) on western blot. Lane 1, 1 ng rhuIL-18; lanes 2±7, respectively, 3, 6, 12, 24, 48 and 72 h of culture; lane 8, 1 ng rhuIL-18, omission of primary antibody; and lane 9, HaCaT cells 3 h of culture, omission primary antibody. Pro-IL-18: 24 kDa and mature IL-18: 18 kDa. 598 LETTERS TO THE EDITOR THE JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY

Expression of IL-18 in Human Keratinocytes

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Expression of IL-18 in Human Keratinocytes

��� �� �E/ � :� �� �������� �� >��E " � % .�� &<'%� � �� � ���� �� ���� �� ,�� � � �1�"�� � � !�� ��� ���� �� .� & � �! (��% ,���� ��$���� ��� � �0 �$�� ���������� ��� � &<&�(�* /� ��� ���� �� �� ���� ! �, ����� ��� � )? ��� )& � ����� �� � ��$ ��� � �� ��� &)* �� $������ ,�� ��8�$ � !� +�� � �������� �1�$ �������� !�� ,���� ��� �� ��� �� ���� ��2� ����� � � �! (��* �� �!� �� �� $������ �� �� $�� �% ��� �% ��� ���� � �� ������ �� ,��� �� >��E $������ ! ��" � ������ �� �� ���� $������ ���� ������ �� ����� �����*

�� >��E )?T)&���/ $������ � ����� �� � ��$ ��� � �� �� &)�� � ���� ��� ��������� � � � � ���� � �' �� � �$�� �������� ! � �������� �* � �� ��,� �" ���� �� �� $�� 6�$������ � ��� � �� �� >��E " � * �� $������ � ����� �� ������� �� ��������� ��� 6� � ���� �$����* /����"� �� �������� ���� � �� ���� ���� �� �� $���� ������� #,� � ��� �� % �� ����� � ����" ���� ���� ���� �� �������� � ���" ��$! � #,� ���� �� $��� ������� ���% �� ����������% � ���" ��$! � ����� �� � ����% �* *% 8!� ���� ���� ����� ��� �����������"������* � �������% ��� �� � ���� �$��� � ���� , ��� .�$�� �% ,� ��� ��� ������� ��� �� >��E " � ����1�� �� ��%&''(�% ��� � �� , ���� � ����* /�������� ��"������ �� � ����� �����$$� �� #,� � ��� �� !�� �� � � !� �� � �� �� ����� ��� ��� �� +����������� �<�������!� �����$ �+�������$ � �3��"��� �� ��% &''0�* �� �������� ��� �� ��������������� ���� � ����"�$��� +��* �� )?T)&���/ $�������% �, � �% �� � �� �� .�$�� �$�� � ��������� >��E��� �� �� ��� � �� ���� �� ��� �� � ���� �$��� � ���� , ��� .�$�� � ��� ���� � ,�� ���" #,� � ��� �� �� ��� � ���� �*

,��� %��� %�� ��������� �� ��� * �������� ,���� !���" ������ ��� �" #�%

-������) �� %���� ���� ���� �� ����� ���� ���� &��!����� ������ .� !��

����������� �(�� + ������ ��/��� ��)

/����� 4* ���1��%� 4����� 4* 3 �"���%� ����� �* E������%�� � � ;* B�����%� > � � 4* B �" �

� ����$ ��� �#������� +��� $����� ����� �$���"�% #����������� �������% #�����������% E , P �����

�� ����$ �� ��$���"�% L��� ����� ���"% ��� ���%E , P �����

��3���E#��

3��"��� 4#% ���, �J% � $ ��#�� ���� J% +�"��� J�� #����������"��8����"� �� �� +����������� �<�������!� �����$ * �� � �������% &''0&=��&�&(<&�&(

�� J% R � #% ���, �% �� ��� >��E% � ������� ��� �� ������ ��������� " � $���� � �� ��$�� !����% !� ���% ��� ������ ���� �* � ��� � �A6�&')=<&')A%&''A

4���� �J% #��� F% ��� ��� 9�% �� ��� 4������ �� ����$ ��� " ���� ��� ���� ������ � �� #,� � ��� �� ��� +�������<P���� �����$ � ,��� " �$��� >��E $������* ��� *�� ����� A�6?A<6&6% &''(

E � � 4�% >��! �" B;% > � �� �/% �� ��� �����1���� �� " � � #,� ���� �� � ���$�$ &?:��<�=* #����� ����� &=�&&)<&&0% &''0

���1�� /4% 3 �"��� 44% �!���� +/% /������ #�% B �" >� � ���8����� � �� � >��E $������ ��&='G� �� � ���� �� ,��� #,� � ��� �� ����C"� � �����$ * ���� &��� 6&�=='<=)&% &''(

�� �� >/% > ����� 4/% J��� � �/% �� ��� � ���8����� � �������� ��$������� ��� " � % 44/#&% �� ���$�$ &?:�=*= ���� �� $���� � �� $������ ������ � ���� ��* #����� ����� &6�=60<=0�% &''A

��������� �� ���(0 �� .��� :������������

� �� ������

; � �� �� ������ UU#��� �� "������ ��� �� �����&( $�E/��� ��� �� .�� ���� �����" ����� �� ,��� � ���� �� $�� 22 !�9�V$� � �� �� �&'''� ,��� ��� � ��* �� ������2 !� ������� ���,� , ��"�� � �� � ��������� ! �, � � ����" ��� ��5�$$����%��� , ����� ,��� �� ��� �� ���� ��&( �� ��� �� � ! $�C��$������ �� ���� ���� !��"�7 �, � �% , � ���$ ���!� �!�� � !� ������ �� �� ��� �% ��$ �� ���� � �������� ��&(�� ���������� �� ��� ������!�� �� � �� �� �� ��� �� � &( ���$� ��� *

+�� �� "���� ��� ��� � �� ���� � � �$ � .� ��$ ������� �� �� � ����� ����$ ������ �� � �� �$ ��� ������ � ���� ��� � !� 9�V$� � �� ��) +� �� �$$��� � ���� � , �� ��!��% , ��� � $������ � ���� ������ ������ ��&( �� ��� ���$���� �������� �� �������� ��� � �������� � �� ��� � ���� , ��� ����� � ����� �� �� ����� �� � �) ��� �$ � �!� (% ��* �� ����� �� � �$ ,�� ��� � � �� � ��� �� $ ���$ !� ��#��� ��� ��� ���$��� � �������� �* � �� �, ��!����� � , � ��� �� �� � �� �� $� ����� , �"�� �4;� ! �, � � �$!�������$�� $���� ��&(% ,���� $�"��� � �� �� .� �� � &( ��� 4;%��� !�� �� ������ ������ ��� � � �� � ��&(% ,���� $�"��� ,��� �4; ����.�$�� �� �) ���* ���� �� �� ����� �� �� ��� �� ������2 , �� �� !��� ��� �� �� �� $ �� � �$!����� ��&(������&(� ��� � � �� �� �� ��������� ��1��" �����* ; ���� ��

4��������� � � �� � ���! � �0% &'''7 ��� �� � � ��!�������� � $! � A% &'''*

� ����� � :� ��� �� ��* �*;* B�� �% L#� # �� � � � �$���"�%�� ���� ������� % 6 L��� ����� ��� �% ���� ;#&� 0JJ% L9* �$�����*"�� �N���*��*��

�!��� �+ ���(0 ������� ���������� �� ����������" ������ �����������������+ ; �� �� !�� ,�� ��! � ,��� � "�� ������$�� ��&(�������� ����!�� ���0&AA�* ���� +% �����$���� � � �������� ����� 7 ����0% �����&( �6 �"�* ��1 � ������� � �� ���*

�!��� (+ ���(0 ������� ���������� �� ����������" .���2 �����+� � ���� � , �� �� !�� ,��� �� �������&( �� ��8� $������ ����!���4/+=&(� � , �� �� !��* ���� +% & �" �����&(7 ����� 012% � �� ���� ��%=% 0% &�% �)% )( ��� A� � ������ 7 ���� 3% & �" �����&(% $����� ���$��� ����!��7 ��� ���� 4% ��#�� � ��� = � ������ % $����� ���$�������!��* >����&(� �) ��� ��� $���� ��&(� &( ���*

�)0 ������� �� ��� ����� ��� J�L�E/� �3 EF���B/�F� ���4/����BR

Page 2: Expression of IL-18 in Human Keratinocytes

���� , � �����&( �� � �� � �� !�� ��,� �� 9�V$� � �� ��2�3�" )�!�% �� ,��� ��� ���������� ��� � ���� �� !���� ��,�% �� ���! � � �� �� 8"�� � ! �,* /����"� �� ������ �� � �� � ��� ��� 3�" ���� ���� ��,� �, ��&( !���� �� � ��$�� ���� ����� % ������ ��"" �� ���� �� !��� ��! � � �� $���� ��&( � �� � ��� �� �) ��� �$ ��� �� ���" � !��� �� �� ��� ��� ���� , ��� !� �� � ,��� �$ ����!�� �*

���� ����� ����� ��� �$������ �$��������� � �����" � �� ��� ����" ��&( � ��� ����� % $���� �$* /����"� � �������� ������ ��1 ������ �& �P �� � �� ��% &''A�% �� �� ����� �� ���� ���� ������������ �� ����� �� � �� ���� �������� $���� ��&��,����% ��� ��&( �B����� �� ��% &''A�% � �� � � ������ �& ���� ����"� �� �� � � ���* ���� ���������������� ��� ����" !����&� ��� ��&( �� ��� �� � ! � � �$������ �� �� � "������ �� ��� �� � �, ���������� �� ����� ��1 � ������ � ��� �������� � ��� � :��� � ��"��� ��������*

/�C � �* #$���C �% ���� >� ��% J�� +* 4 %�������� ;* B�� ��

� ����$ �� $$���"�% ����$�� L��� ����� ��� ���$%�� E �� ������

�# ��� � � �$���"�% � ����$ �� 4 ����� %L��� ����� #�� " ����% L9

��3���E#��

B����� �% +�� �C �% ��"���� 4% �� ��� #����� �& ��� �� � 3E����������" ������� � "���� � �>������� � 3E�� ��������* #����� =(0�0&'<0�=% &''A

9�V$� � �% 9����� L% 4�V�� �% > ������ � � J% 3���� �� #��� �� "������ ��� �� �����&( $�E/ ��� ��� �� .�� ���� �����" ����� �� ,��� � ������ $�� * ������ ������� &&=�=0'<=A)% &'''

P �� � 9% ��V � � /% � �� �3% �� ��� ������� !��"������ ����� ��&����� ����" �1�$ ��� $���� ��&� �� ��$�� � �������� � !� ��5�$$������� �$$���"�� ���$���* ������� &6'�0�?=<0�?(% &''A

� ����

� ��"�� �� � �� � !� #$���C � �� �� , � � .�$�� � ��� ������� � ��$�� � �������� �* /� ��,� �� �! (% �� $����������!�� �� ��8����� � �"��1 � $���� � �$!����� ��$�� ��� ��� �����&( ���&(� ��� ��* $$��� �������� � �������� ��� ������� � ����� +� $�"��� � �� � ���"���� ��"� � $� ����� , �"���$��� � ,��� $���� � �$!����� ��$�� ��&( ����� 0�*�� � � % �� ��� ��� ���� �� � �"��1 � ��&(��� ��8� ��� �� ��

�! ( �� $�� ��� �� � � �� � �� �����&(* �� ���� ����% , �"� ,��� #$���C � �� ��*

�� ��� � ����� �% �, � �% ���� �� ��������� �������"$���� ��&( $�"�� $�"��� �� � ���� �$ �� � .�� �� � ��.� ���� ��� ���* /������"��% , � � �$ � ������ � ��� �� !��"���������� � �������� � �� ������ ��� ��������* �� �% , ����� � �� ��� � ���� �3E�����������" �������� � �������� �������� � ��� ��������* ���� �� �� ��� ,��� �� !� �� � � � �� !��"���� ����� ��&( �$ ���$��� ��$�� � ������� � �E����� ��% &'''�*

4� � �% �� � �� � ��� � � �"��1 ���� �� ��� ����� � ,�� ��� � � ��&( " � � "������ �����" ,��� � ����"�� ����% ��� � �������� � �� �����* �� ����$ ���� ��������% ��������� � �� ��� ��� ����� #$���C � �� ��% �� �� !� �� �UU#��� �� "������ ��&( $�E/ ��� ��� �� .�� ���������" ����� �� ,��� � ����22% � ,���� #$���C � �� �� � $� �"� �*

�� �� 3����������� �V� /��" $ �� >���$���"� ��� �.���"� %

3���� ��� �$ 4���% B �$���

��3���E#�

E��� �4% #���� B% +��!��� BJ% �� ��� ��$�� � �������� � ���������� �� .�� ����� �� �����&( ��� � �� � !��"������ ����� ��� �� �����&( � � � �� ��$ ��,��� �����5�$$���� $ ������ ��� ����������! �1 � * ������ �������&&=�A00<AA�% &'''

������ ����������;����� �� ��� %��������������"����" $����2��� ����� �� ������� ��4�����" �� ���2����!��������

� �� ������

� � ����% , ���!���� � � �.,������" ��� $�� ��� �=?)-+0� ��,���� �� �,�� � � ��$ �� � ���� $ �������� ! ��"� ��$���� $���"���� $ ���$� ��� ! !� �� � �9�� �� ��% &''(!�* ����� $�� $� � , � $������ � ���� �� � �!�� $ ����� ���

4��������� � � �� � ���! � �0% &'''7 ��� �� � � ��!�������� � $! � A% &'''*

� ����� � :� ��� �� ��* �� �� 3����% ������� �V� /��" $ �� >���$���"� ��� �.���"� % 9������$ � � J;B�L��� �����V� 3����� ���-4*% �� ����� ���9�� A% ��0?6'? 3���� ���-4*% B �$���* �$�����*3����N $*���� ���� ���*�

�!��� (+ <������ ��� �� �������������"���4�" ���(0 ��" �������������� ���� ���(0+ ��#�� � �������� � , � � �� � �:�� �� �� !� � ��$ ���������* / � � �) �% � ��� , � ���� �� � ��� ������� �� ��6�"� �$ ����� � �� � � ��� ,�� �����1 � !� �$$��!�����" � �� �� � �� ��&( ��� �� ����� +�* � �$!����� ��$�� $���� ��&( ��� �� �����&(% &? �"� ,�� �� � �� � ������ ����� ����� 0�*

� ����� � :� ��� �� ��* * E������$�% � ����$ ��� $$���"�%E�"�� L��� ����� ���� 4 ����� % 06 �����$�����% ��,����%E�"�� )00�(66?% J����* �$���� ��������N�����*$ �*��"����*��*C�

4��������� � � �� � � � $! � 0% &'''7 ��� �� � � ��!�������� � $! � &=% &'''*

F��* &&)% E�* = 4/�#� �??? ������� �� ��� ����� �))

Page 3: Expression of IL-18 in Human Keratinocytes

������ ��� �������$� ��� �����$ �������� ��� � $���"����$ ���$� ����"� � "������ ��� �� .�� ���� � � �� $����.$ ������� ���� �44>� ��� ��� ����!��� �9�� �� ��% &''(��* ; ����� ��� �� � � ���� �� ��������� $ ������$ �� ������ � ���� ����������$ ���� � �������$� ��* �� � ����� �� ���� � .� ��$ ��� ��"" �� � ���� �� �., ��" � ������,��� �� ��� � ��$���" ��" � ��� !�� ��� � �������"�������$� ��� ���� �$$����� �������� �� ��% &''67 9�� �� ��%&'''�* /� ��,� �� �!��� (���% "�,�� ���������� � � ���$��$� � ���% ,���� , � � ��� � �$ �� ��-�.,������" ���$�� �,�$� �� ��% &''&�% ,�� ����"�� ����� �� � ��� �$!����� � � ��� ����$$���1 �% !�� �� ����$$���1 �%" � ������� �$����!� � ���� �� $�� * ���� 8����" ��� ����� ��� �� ������ � ��� � 8����" � � ��� �� .�� �� � � ��$�������" �� � �������������� ��$� ����" � �������� �� ��% &''67 9���� ��% &'''�* ; � .� �$��� � �� .�� ���� � � �� � � ����" ��� ! ��"�% $���"����% ��� � �$���� ���" � $ �������� ��$��* /���,� �� �! (���% �� .�� ���� � � �� � � ���� �� � ���",��� ��"� ���� ��$� ���" �$ ! ��"� � $���"����*L� .� �� ���% �, � �% �� � � �� � � ��� �� .�� ���� , � � � � �� � ��� � �� �� � �$���� ���" � $��� �, � ���� ��� ���� $���"���� � ! ��"� ���" * �� � ����"��% ���� �, � � � � � .�� ���� �� �� � �$���� ���" ���$���� � � ��"� � � � 44>�' ��� �� .�� ���� ��� �, � � � ����� ����!��� �� $����.$ ������� ���� �� ��4>��� ��� �� .�� ���� � �!� (�% ��*�� � � ����� ��"" �� ���� �� �� �� 8���� � �� � � ����" ��$ ���� ���$� �$$����� � ,�� �� �� � �$���� ���" * �!��� ���� ��,� ���� ��8�$��" �� �������$� ��

��������� !� �� � ���" � ��$�� ��$! � ���� ! � �9�� �� ��% &''(��* �� � ����"��% � � ��� �� .�� ���� � � �� ��$�� �� ������������ �� � $�� , � ��"� � ���� ��� ��$�� �� ���� �� � $�� �� ! ��"�% $���"����% ��� � �$�������" � �� ��$�� � �! ���% ��� �� � ��� � � � .�� ������ �� � �$���� ���" ,�� ��������� � ��� �* �� � � ����� ��"" ��

���� �� �������$� �� ��������� ����� � �� ��$� � �� ������� � � ��� �� �� � ��$� ������������������" �% ,���� ��!�!�� � ��$ � ��� �� ������� ���� �� ���" ��� ��������* � ������ � � �� � ������ � � ��� �� .�� ����% .�� ���� � � �� � �� ���� ��� �� ���>��(0%,���� � �� �� � ���" ,��� ��"� ���� ��$� ���" % , � � ��� � !� ��������� �� ��$ �� � �! ���* �� ����������� ��$ �� ��� ���� �� � �� �� �,�� �, .�� ���� � � �� ��>��6 �� �� $���"���� ���" � �! ���* ��> , � � ��� � ����� � �� �� �� ��� ���� �$ ���� "������ � ������ ������� !� �����$ ���� ��� �� ���� �� �������� � ��"����������" � �� ��% &''6�% ,���� ��� ��$� ��$��" � ���* �����% �� � ����� ��"" �� �� .��� �� ���� � $ ������$ �� �������$� �� ��������� ����"� ��$��� �� �������� ��$����� ���� ��� ���*

,��� ����� %�� ��������� �� ���� �� ������$��$��� !�� ������ '! .( ����� �

5�'.6 ������ � !��� ��� *������� �! .�� ����� � ��� �" ������ ��� ������� �!

����" ��� 7��� !�� ������������� ������ � �� � �� ��� ������ !��� ���

*������� �! ������ ��� ���!��� �! ����" ��� ����� '8����� *�������

7���������" ��� ������ � !��� �! ��� ��������� �! 9���� *��� ��� 5����6" ���

��� �� �� ��� �� ������ � 7���������)

4������ 9��% 9 ������ �! % R�� ���% ; � ���%4������ ���������%� 1�$� E������$�

� ����$ ��� $$���"� ��� �>����"�%E�"�� L��� ����� ���� 4 ����� % E�"��% J����*

�!��� (+ ����4�������� �� ��� ������� �� � �������������4�����!�� ��" ��� ��"���" ���������� �� ����� �� ��� ������� ���!��� ��������!���� ���+ ��� � �$!����� � � ��� �� �9�� �� ��%&'''� �� �$�� � 3� ���2� ��C����� ,�� ��!����� ���� ��C �� � ���+#3& �#6A+�-0�+/�+-#� $�� �,�� �� &? � ��� ����� � �$$���1�����* 3�� ���� � � � �$$���1����% �� &?0 � � ��$��$� � ��� ���� ���! � ���!���� � �$ �� ��-�.,������" ��� $�� #6A+�-0�+/�+-# !���"���� �������� �� ��% &''6� , � ������ ���� ����������� � � �$$���1 � ��O)7 �� ��� ����$$���1 � ����� $�� ��O)7 ��* ���� ���� � ���$� ��,� �� $ ����� �� $�� * �� ���� � $��� � �� ��W?*?&� � � �� ��"��8������ �� � �� �$ ��� �� !� �� 4����;���� � L � ��* ��<� >�� �� .�� ���� � � �� � �%44>�'% ��� �4>�� �� ����� � ��$� � ��� , � $ ���� � !� , �� ��!�� �� � ����! � �� ������ �9�� �� ��% &''(�% !�* ���� +% ! ��"� ���" ���$� ���$ % &?? $$=�7 ���� 0% $���"���� ���" ���$� ���$ %&= A6? $$=�7 ���� :% � �$���� ���" ���$� ���$ % &?? ??? $$=�*

�!��� �+ ����� �� %����������� �������� �� ��� ������� ��" ��������� ������� ���������� ��4��� �� ����� ��� ��������!�������+ ��� ��$� ���$ � �$ ������ �� ��,� � ������������ �� � ��� �O0?� ��� ���� �� � ����� ��� �O0?� �����" ��� $�� � ���� � ���� * ���� ���� ��,� �� $ ����� 0? $�� * �� ���� � $��� ��� ��W?*?&� ��� � ��W?*?6� � � �� ��"��8������ �� � �� �$ ��� �� !� �� 4����;���� � L � ��* ��1� �� ��� �� .�� ���� � � �� � �% ��>�(0% ��� ��>��6 �� ��,� �� �� ! ��"� ����� +% &?? $$=7 ����0% '0 $$=�% $���"���� ����� :% &= A6? $$=7 ���� ;% &= A6? $$=�% ���� �$���� ���" � ����� <% &?? ??? $$=7 ���� =% &?� �6? $$=� ��$��� � �� � �� ������������ �� � �D7 ����� 0% ;% 0� ��� ���� �� � ������<7 ����� +% :% < � �.,������" ��� $�� * ��$���� � ����� �� ��� ���" , � ��� !���� � ,��� ��$�� �$ �� � ����� ��O)� ��� .� ��$ ������O)� $�� *

677 ������� �� ��� ����� ��� J�L�E/� �3 EF���B/�F� ���4/����BR

Page 4: Expression of IL-18 in Human Keratinocytes

��3���E#��

������� 4% ,�$� �% �! 9% �� ��� ���" � ����� � �� ���� �$$���� ���� �� �+ ��$��$� ������" �� ��-� � �����" ��� $�� * �� ��� �� A&�(?(<(&=% &''6

,�$� �% >� 4% � 4% �� ��� >� � ����� � � ��$ �� �� �+ ��$��$�� ,�������������� �,��� "���� � E�$�� �� �� ���� � �����" ��� $�� * .�� ��������&�&(?'<&(&)% &''&

9�� 4% ��� ;% R� �% �� ��� �� � �!�� $ ����� ��������� ����!��� "�,�� ���$ �������� $���"���� $ ���$� ���$����� � � �� � �� ���������" ��� $�� * ������ ������� &&&�0)?<0))% &''(�

9�� 4% ��������� 4% /����� //% �� ��� �����" ��� $�� $� � � ���� $���"����$ ���$�* '� � ��� &A�&((6<&(((% &''(!

9�� 4% ��� ;% /����� //% �� ��� �����" ! �, � $ �������� ��$�� � ��$ �� ��� ���� !���� � � ��� �� .�� ���� � �� ���� �������� �� $ �������� ���-� � �����" ��� $�� ��� �* '� � ��� &(�(=A<()�% &'''

�������" � 3% 9������4�"" % +����� +% E �� � >% 9�!� � �4� A���� � �� ������� �� �� � $ ����� � ������� � �������� � + ��"��* ������ �������&?6�&0?<&0�%&''6

F��* &&)% E�* = 4/�#� �??? ������� �� ��� ����� 67(