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Amplification : Reagents and Plastics PCR /リアルタイムPCR 試薬・消耗品 セレクションガイド

セレクションガイド - Bio-Rad Laboratories...PCR /リアルタイムPCR 試薬・消耗品セレクションガイド PCR AND GENE EXPRESSION WORKFLOW ... 7326820B05 AurumトータルRNA

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Amplification:Reagents and Plastics

PCR /リアルタイムPCR 試薬・消耗品セレクションガイド

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2 Amplification:Reagents and Plastics

iScript 逆転写(cDNA合成)キット

Reliance Select cDNA Synthesis Kit

iTaq Universal One-Step qPCR Kit(SYBR Green/Probe)

PCR/リアルタイムPCR 試薬・消耗品セレクションガイド

PCR AND GENE EXPRESSION WORKFLOW

製品 INDEX

RNA / DNA ISOLATION

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

PCR PLASTICCONSUMABLES

REAL-TIME PCR SYSTEM

CELL LYSIS

1サンプル調製キット4-5ページ▪SingleShot Cell Lysis Kit▪SingleShot Cell Lysis RT-qPCR Kit

3逆転写キット8-11ページ▪Reliance Select cDNA Synthesis Kit▪iScript 逆転写(cDNA)合成キット

6プライマー&プローブ37-42ページ▪PrimePCR Assay▪PrimePCR plates

5 PCR/リアルタイムPCR消耗品25-36ページ▪qPCR/PCRプレート▪PCRチューブ▪ストリップ、キャップ▪シール▪プレートシーラー

7システム43ページ▪リアルタイム PCR解析システム

4 PCR/リアルタイム PCR試薬12-24ページ▪SsoAdvanced Universal シリーズ▪SsoFast EvaGreen Supermix▪Reliance One-Step Multiplex Supermix▪iTaq Universalシリーズ▪iQ シリーズ▪iTaq One-Step RT-qPCR キット▪High Fidelity/Standard PCR

2 RNA/DNA精製キット6-7ページ▪Aurum トータル RNA精製キット▪Quantum Prep プラスミド精製キット▪インスタジーンDNA精製マトリクス

1.サンプル調製 2.RNA/DNA精製 3.逆転写反応 4.リアルタイムPCR

SsoFast/iTaq/iQ Supermix

SsoAdvanced Universal Supermix

SingleShot Cell Lysis Kit

SingleShot Cell Lysis RT-qPCR Kit(One-Step/Two-Step)

Aurum トータルRNA精製キット

Reliance One-Step Multiplex Supermix

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3Amplification:Reagents and Plastics

iScript 逆転写(cDNA合成)キット

Reliance Select cDNA Synthesis Kit

iTaq Universal One-Step qPCR Kit(SYBR Green/Probe)

PCR/リアルタイムPCR 試薬・消耗品セレクションガイド

PCR AND GENE EXPRESSION WORKFLOW

製品 INDEX

RNA / DNA ISOLATION

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

PCR PLASTICCONSUMABLES

REAL-TIME PCR SYSTEM

CELL LYSIS

1サンプル調製キット4-5ページ▪SingleShot Cell Lysis Kit▪SingleShot Cell Lysis RT-qPCR Kit

3逆転写キット8-11ページ▪Reliance Select cDNA Synthesis Kit▪iScript 逆転写(cDNA)合成キット

6プライマー&プローブ37-42ページ▪PrimePCR Assay▪PrimePCR plates

5 PCR/リアルタイムPCR消耗品25-36ページ▪qPCR/PCRプレート▪PCRチューブ▪ストリップ、キャップ▪シール▪プレートシーラー

7システム43ページ▪リアルタイム PCR解析システム

4 PCR/リアルタイム PCR試薬12-24ページ▪SsoAdvanced Universal シリーズ▪SsoFast EvaGreen Supermix▪Reliance One-Step Multiplex Supermix▪iTaq Universalシリーズ▪iQ シリーズ▪iTaq One-Step RT-qPCR キット▪High Fidelity/Standard PCR

2 RNA/DNA精製キット6-7ページ▪Aurum トータル RNA精製キット▪Quantum Prep プラスミド精製キット▪インスタジーンDNA精製マトリクス

1.サンプル調製 2.RNA/DNA精製 3.逆転写反応 4.リアルタイムPCR

SsoFast/iTaq/iQ Supermix

SsoAdvanced Universal Supermix

SingleShot Cell Lysis Kit

SingleShot Cell Lysis RT-qPCR Kit(One-Step/Two-Step)

Aurum トータルRNA精製キット

Reliance One-Step Multiplex Supermix

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4 Amplification:Reagents and Plastics

・ RNA精製ステップによるロスがなく、微量RNAの定量におすすめ・ 少量の細胞からの定量PCRに最適(10-100,000細胞)・ RNA精製ステップを省略することによるコスト削減・ ゲノムDNA除去試薬により、非特異的な増幅を抑制・ ワンステップなので、コンタミの危険性が減り、実験時間も短縮・ オートメーション化に適しています  (One-step法、Two-step法、SYBRⓇGreen法、プローブ法にも利用可能)

HeLa細胞における遺伝子の定量例少量の細胞(10個、log1)から、100,000個(log5)の細胞を使って、内在性の発現量が異なる3つの遺伝子の発現量を確認した。コントロールRNAを使って、細胞数が多い場合にも反応の阻害が起こらないことを確認した(◆)。

ゲノムDNAの混入試験SingleShot SYBR Green Kitでは、他社同等品と比較した場合、ゲノムDNAの混入が少なく、Cq値が40となっている(●)。ゲノムDNA混入による非特異的な増幅がなく、より精度の高いRNA定量を行うことができる。

RNA精製キットで精製したRNAとの比較RNA精製キット(スピンカラムタイプ)で精製したRNAと、SingleShot Cell Lysis Kitで 調製したサンプルの定量PCRを行ったところ、ほぼ同じCq値であることが示された (R2=0.9964)。

サンプル作製はワンステップ接着細胞の場合、一度PBSで洗浄した後にSingleShot Cell Lysis Reagentを加え、室温で10分間静置して細胞を溶解。その後溶液をチューブに移し、37℃ 5分間、続いて75℃ 5分間インキュベーションする。サンプルは、-20℃で2ヶ月、-80℃で1年間保存可能。浮遊細胞の場合には、一度遠心等で細胞を回収し、同様に処理する。

適用細胞例(リスト以外にも適用可能)A549 HeLa HepG2 MCF-7 NCI-H1975 NIH3T3HEK293 Jurkat K562 PC-12 HepaRG 他

*浮遊細胞、接着細胞のどちらにも利用可能です。

Sin

gleS

hot

Cel

l Lys

is K

it (C

q)

Purified RNA (Cq)

SingleShot™ Cell Lysis Kit

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725080 SingleShot Cell Lysis Kit(50 µl×100反応)、SingleShot Cell Lysis Reagents(1×5 ml) -20℃ ¥48,0001725081 SingleShot Cell Lysis Kit(50 µl×500反応)、SingleShot Cell Lysis Reagents(5×5 ml) -20℃ ¥198,000

リアルタイムPCR用のRNAサンプルの調製は、時間と手間のかかる作業です。SingleShot Cell Lysis Kitを使えば、RNA精製をせずに細胞を溶解するだけです。手間とコストを大幅に削減可能です。

サンプル調製キット

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

サンプル調製キット

培養細胞からリアルタイムPCR用RNAサンプルをワンステップで調製

SingleShot Cell Lysis Reagent  (w/Proteinase K,DNase)

37℃ 5 min 75℃ 5 min

室温 10 min Washした培養細胞

RNAサンプル -20/-80℃で保存可能

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5Amplification:Reagents and Plastics

CELL LYSIS

Ordering Information製品タイプ カタログ番号 品名 キット構成品 保存温度 価格1ステップ 1725095 SingleShot SYBR® Green One-

Step Kit(50 µl×100反応)

・ SingleShot Cell Lysis Reagents(#1725080)・ iTaq Universal SYBR® Green One-Step Kit(#1725150) 20 µl×100反応

・ RNA control

-20℃ ¥90,000

1725070 SingleShot Probe One-Step Kit(50 µl×100反応)

・ SingleShot Cell Lysis Reagents(#1725080) 50 µl×100反応

・ iTaq Universal Probe One-Step Kit(#1725140) 20 µl×100反応

・ RNA control

-20℃ ¥88,000

2ステップ 1725085 SingleShot SYBR® Green Kit(50 µl×100反応)

・ SingleShot Cell Lysis Reagents(#1725080)・ iScript Advanced cDNA Sythesis Kit for RT-qPCR(#1725038)20 µl×100反応・ SsoAdvanced Universal SYBR® Green Supermix(#1725271)20 µl×500反応・ RNA control

-20℃ ¥142,000

1725090 SingleShot Probe Kit(50 µl×100反応)

・ SingleShot Cell Lysis Reagents (#1725080)・ iScript Advanced cDNA Sythesis Kit for RT-qPCR (#1725038) 20 µl×100反応・ SsoAdvanced Universal Probe Supermix (#1725281) 20 µl×500反応

・ RNA control

-20℃ ¥140,000

SingleShot™ One-Step/Two-Stepキットは、細胞を直接溶解してリアルタイムPCR(RT-qPCR)を行うのに必要な試薬から構成されています。One-Stepキットは高性能な逆転写酵素とiTaqポリメラーゼにより2時間以内に結果が得られます。

・ 10~100,000個の細胞を20分で処理し、サンプルとして利用・ ゲノムDNA除去試薬により、非特異的な増幅を抑制・ 遺伝子の偏りなく広いダイナミックレンジで増幅・ RNase阻害剤によりRNAの完全性を維持・ シンプルなプロトコールにより、オートメーション、ハイスループットにも対応・ RNA精製ステップによるロスがなく、微量RNAの定量におすすめ・ 精製したRNAを用いた結果と一致・ 高い正確性と高感度なRT-qPCR・ SingleShot RNAコントロールにより、細胞、溶解液の最適化が可能

SingleShot™ One-Step/Two-Step Kits (RT-qPCR)Cell Lysis Kit

培養細胞からの1ステップ/2ステップ リアルタイムPCR試薬キット

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6 Amplification:Reagents and Plastics

Aurumトータル RNA Miniキットは、培養細胞、細菌、酵母、および動物と植物組織を含む広範な出発物質から高品質の DNA フリーのトータル RNA を精製できます。キットには、ゲノムDNAの除去のためのDNase Iが含まれており、短時間で高品質のRNAを精製することが可能です。Aurumトータル RNA Fatty and Fibrous Tissueキットは、フェノールベース試薬との組み合わせにより、RNaseを多く含む菌類の他、脂肪組織および線維性組織などからのRNA精製に適しています。

仕様Aurum トータルRNA Mini キット

AurumトータルRNAFatty and Fibrous Tissueキット

精製法 シリカメンブレン シリカメンブレン&PureZOL

形式 カラム遠心または吸引

カラム遠心または吸引

適用サンプル 培養細胞 2×106個以下/カラム 1×107個以下/カラムバクテリア 2.4×109個以下/カラム 2.4×109個以下/カラム酵母 3×107個以下/カラム 3×107個以下/カラム動物組織 20-40 mg以下/カラム 100 mg以下/カラム植物組織 40 mg以下/カラム 100 mg以下/カラム

DNase I添付 有り 有り作業時間 <50-80min

(DNase処理を含む)<50-80min(DNase処理を含む)

メンブレン結合容量 >100 µg >100 µg精製度(A260/280) 1.9~2.1 1.9~2.1溶出容量 2×40 µl 2×40 µl収量(例) 20-40 µg/2×106 HeLa

35-55 µg/2.4×109 E.coli140-150 µg/1×107 293H20-30 µg/2.4×109 E.coli

Aurum トータル RNA Miniキット

Aurum トータル RNA Fatty and Fibrous Tissueキット

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格AurumトータルRNAキット7326820 AurumトータルRNA Miniキット(50回分) 室温 ¥35,000

構成内容:RNA binding カラム(50)、2 ml蓋なしwashチューブ(50)、1.5 ml蓋付遠心チューブ(50)、2.0 ml蓋付遠心チューブ(100)、DNaseⅠ(凍結乾燥品)、Lysis solution、Low stringency wash solution、High stringency wash solution、Elution solution、DNase dilution solution

7326820B03 AurumトータルRNA Miniキット(150回分) 50回分 3セット 室温 ¥90,0007326820B05 AurumトータルRNA Miniキット(250回分) 50回分 5セット 室温 ¥145,0007326820B10 AurumトータルRNA Miniキット(500回分) 50回分 10セット 室温 ¥279,0007326830JA AurumトータルRNA Fatty and Fibrous Tissueキット(50回分) 4℃ ¥49,000

 

構成内容:50 ml PureZOL RNA isolation reagent*、RNA bindingカラム(50)、2 ml蓋なしcollectionチューブ(50)、2 ml蓋付遠心チューブ(100)、1.5 ml蓋付遠心チューブ(50)、DNaseⅠ(凍結乾燥品)、Low stringency wash solution、Elution solution、DNase dilution solution

7326880 PureZOL RNA抽出試薬(50 ml) 4℃ ¥17,000

RNA精製

Aurum™トータルRNA Miniキット&Aurum™トータルRNA Fatty and Fibrous Tissueキット

バイオ・ラッドでは、各種RNA、DNAを精製するキットを用意しています。簡単な手順で、高純度かつ高い回収率で精製が可能です。用途に応じてキットを選択してください。

RNA/DNA精製キット

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

RNA/DNA精製キット

各種サンプルからのトータルRNA精製キット

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7Amplification:Reagents and Plastics

RNA / DNA ISOLATION

Quantum Prepプラスミド精製キットは、バクテリアからプラスミドDNAを精製するための試薬キットです。本キットは、バイオ・ラッド独自の珪藻土マトリクスを採用しているため、すぐれた回収量および精製度を得ることができます。高純度に精製されたプラスミドはそのままDNAシーケンシング、ジーントランスファー、DNAミュータジェネシス、クローニングおよび制限酵素処理に使用できます。また、本キットには溶菌から回収までに必要とされるほとんどの試薬が含まれています。操作も簡便であるため、プラスミド精製が短時間に行えます。

インスタジーン マトリクスはPCRの鋳型として使用するに十分な純度のゲノムDNAを1時間で迅速に調製するための製品です。特別に配合された6%w/vキレックス樹脂は、PCRを阻害する細胞溶解産物を吸着し、上清中にゲノムDNAが回収されます。上清のゲノムDNAはそのままPCRにすぐに使用することができます。用途:血液(全血)、哺乳動物細胞、バクテリア他   豊富な論文実績

DNA精製

Quantum Prepの優れた回収能プラスミドを保持した大腸菌DH5α培養液1.5 mlから、24 µgのプラスミドを回収。

Quantum Prep Miniキット

Quantum Prep Midiキット

入数 100回分 20回分

1カラムあたりの培養液量 1~2 ml 40~50 ml

1カラムあたりの回収量 (High copyプラスミド)

<40 µg 100~300 µg

0 5 10 15 20 25

Quantum Prep kit

Brand X

Brand Y

Phenol/chloroform

Plasmid yield in µg/1.5 ml culture

Quantum Prep Midiキット

Quantum Prep Miniキット

Add bacterial colony to water.PCR-ready

Spin; use supernatant for PCR.Add InstaGene matrix and incubate at 56℃ for 30 min. Vortex and incubate at 100℃ for 8 min.

Spin and remove supernatant.

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格7326100 Quantum Prep Miniキット(100回分) 室温 ¥29,0007326120 Quantum Prep Midiキット(20回分) 室温 ¥26,000

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格7326030 インスタジーンDNA精製マトリクス(100回分)20 ml 4℃ ¥15,000

Quantum Prep プラスミド精製キット

インスタジーンDNA精製マトリクス

優れた回収率 独自マトリクス採用の高性能プラスミド精製キット

実績豊富なDNA精製マトリクス

InstaGene Protocol

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8 Amplification:Reagents and Plastics

Reliance Select cDNA Synthesis Kit

バイオ・ラッドの逆転写試薬は、広いダイナミックレンジで効率の良い逆転写(cDNA合成)ができるように調製されています。

逆転写反応(cDNA合成)試薬

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

逆転写(cDNA合成)キット

独自開発のキメラ逆転写酵素 Reliance Reverse Transcriptaseを搭載した、高性能cDNA合成キットです。PCR阻害物質存在下や、FFPEサンプル、分解されたRNAサンプルからでも、正確で高感度な結果を得られます。このReliance逆転写酵素を採用した高性能ワンステップリアルタイムPCR試薬 Reliance One-Step Multiplex Supermixは20ページをご覧ください。

FFPEサンプル由来RNAや分解の進んだRNAに対しても高い処理性能、阻害に強い高感度cDNA合成キット

・ 100 fgからの微量サンプルに対応し、FFPEサンプルのような劣化したRNAからでもcDNAライブラリ構築が可能・ ホルマリンやヘパリン等のPCR阻害物質存在下でも高いパフォーマンスを発揮・ 熱安定性が高く50℃以上での反応が可能となり、2次構造による影響を低減・ プロトコール時間は20分と、短時間で処理可能・ プライマーは選択可能で、gDNA除去も可能

特長 RNA量 チューブ数 所要時間 プライマー

Reliance Select cDNA Synthesis kit

・ 阻害に強く、高感度に cDNA合成が可能

・ FFPEサンプルに対応0.1 pg – 2 µg 6 20分

選択式(Olido dT*/ random*/ gene specific primer) *製品付属

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格12012802 Reliance Select cDNA Synthesis Kit, 20 µl × 25反応

構成内容:5 × Reliance Select cDNA Synthesis Reaction buffer、Reliance Reverse Transcriptase、Oligo(dT)20 Primer mix、Reliance Select Random Primer Mix、Nuclease-free water、DNase、DNase buffer

-20℃ ¥36,000

12012801 Reliance Select cDNA Synthesis Kit, 20 µl × 100反応構成内容:5 × Reliance Select cDNA Synthesis Reaction buffer、Reliance Reverse Transcriptase、Oligo(dT)20 Primer mix、Reliance Select Random Primer Mix、Nuclease-free water、DNase、DNase buffer

-20℃ ¥108,000

Reliance Select Kitの高い阻害耐性子宮頸部腺癌細胞(HeLa-S3)由来の1 pgから2 µgの範囲の様々な量のtotal RNAに、既知のPCR阻害物質の添加の有無の条件下でReliance Select Kit(■)、またはSuperScript IV System(■)を使用して、オリゴ(dT)20を用いたcDNA合成を行いました。高発現および低発現ターゲット、GCリッチおよび様々な長さのアンプリコンを含むアッセイパネルを使用し、SsoAdvanced SYBR Green SupermixでPCR反応を行いました。その結果、Reliance Select Kit は、SuperScript IV Systemよりも、阻害物質による Cq値の遅れが少ない一貫性のある結果を示しました。SuperScript IV Systemは、阻害物質の存在下で Cq 値が遅延しました(ホルマリン存在下では 3 Cq 遅延)が、Reliance Select KitのCq値遅れはコントロールの 0.5 Cq 以内となりました。

Reliance Select Kitによる、低含量ターゲットの高感度検出ERCC RNA Spike-In Mixコ ン ト ロ ー ル(Thermo Fisher Scientific #4456740)を、ランダムプライマー、およびReliance Select KitまたはSuperScript IV Systemを用いて、バックグラウンドRNA(1 µgの子宮頸部腺癌(HeLa-S3)細胞由来のtotal RNA)の存在下または非存在下で、製品プロトコールに従ってcDNA合成しました。合成したcDNAを、ERCC-0034をターゲットとするqPCR反応に使用した結果、バックグラウンドRNAの存在下での低含量のERCCは、Reliance Select Kit使用時により高感度に検出されました。Reliance Select Kit を用いてcDNA合成した場合のバックグラウンド RNA の有無による Cq値のシフト量(< 1 Cq)と、SuperScript IV Systemを用いてcDNA合成した場合 (> 3 Cq)を比較すると明らかです。

DCq

= C

q(tr

eate

d) –

Cq

(unt

reat

ed) 4.00

3.50

3.00

2.50

2.00

1.50

1.00

0.50

0.00

Heparin,0.005 U/ml

Formalin,0.125%

Ethanol,7.5%

Trizol,0.3%

Guanidiniumisothiocyanate,

0.05 M

Ammoniumacetate,0.2 M

RFU

104

103

20 30 40Cycles

102

1 Reliance Select Kit No background RNA

2 1 μg background RNA

3 SuperScript IV System No background RNA

4 1 μg background RNA

12 34

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9

REVERSE TRANSCRIPTION

Amplification:Reagents and Plastics

・ 1 tube反応:単純化された反応溶液キットは、簡便なプロトコール及び調製ミス防止を実現従来のキットでは別々になっていた酵素とBufferを一本のチューブにまとめたことで、簡便なプロトコールを実現しました。・ 短時間:高性能なiScriptと簡便なプロトコールにより、従来の約半分の反応時間を実現・ 高感度:少量のRNAからも高感度な検出が可能

500 fg(0.5 pg)と少量のRNAからも高感度な検出が可能です。

TUBEHIGHRNAINPUT

CLASSIC

HIGHFIDELITY

iScript RT Supermix for RT-qPCR

iScript Advanced cDNA Synthesis Kit

iScript gDNA Clear cDNA Synthesis Kit

iScript cDNA Synthesis Kit

iScript Select cDNA Synthesis Kit

特長 1チューブで簡単 RNAインプット量大 ゲノムDNA除去可能 豊富な実績 プライマー選択式

RNA量 (20 μl反応) 1 pg – 1 µg 0.1 pg – 7.5 µg 1 pg – 1 µg 0.1 pg – 1 µg 1 pg – 1 µg

チューブ数 1 2 3 2 5

所要時間 26分 21分 36分 26分 40-90分

構成内容

・ 5 × iScript RT Supermix

・ No-RT control Supermix

 

・ iScript Reverse Transcriptase・ 5 × iScript

Advanced Reaction Mix

 

・ 5 × iScript RT Supermix

・ No-RT control Supermix・ DNase・ DNase buffer

 

・ iScript Reverse Transcriptase・ 5 × iScript

Reaction Mix

 

・ iScript Reverse Transcriptase・ 5 × iScript

Reaction Mix・ Oligo(dT)20 Primer

Mix・ Random Primer

Mix・ GSP enhancer

solution

RNaseH+活性 3 3 3 3 3

プライマー ミックス(Oligo dT+random)

ミックス(Oligo dT+random)

ミックス(Oligo dT+random)

ミックス(Oligo dT+random)

選択式(Oligo dT/random/gene specific primer)

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1708840 iScript RT Supermix for RT-qPCR(20 µl×25反応) -20℃ ¥14,5001708841 iScript RT Supermix for RT-qPCR(20 µl×100反応) -20℃ ¥45,000

iScript RT Supermix を用いたGAPDH遺伝子の増幅結果ヒトTotal RNAからGAPDH遺伝子を増幅した例。左から右へ、100 ng、10 ng、1 ng、100 pg、10 pg、0.5 pg。検出はSYBR Greenを用いた。Efficiency = 91.0%、R2 = 0.995

RT-PCRにおけるiScript RT Supermixの感度の確認結果42℃においてヒトTotal RNAからcDNAを合成し、iTaq DNAポリメラーゼによってGAPDH遺伝子を増幅した例。Lane M:EZ Load™ 100bp Molecular Ruler0.5 pgにおいてもバンドを確認できる

M 100 ng 10 ng 1 ng 100 pg 10 pg 0.5 pg

0 10 20Cycles

30 40

RFU

105

104

103

102

iScript™ RT Supermix for RT-qPCR

iScriptシリーズはiScript逆転写酵素を採用し、広いダイナミックレンジで再現性の高いcDNA合成を行うことができます。酵素のRNaseH+活性によってcDNA合成時にPCR時に不要となるRNAを除去するため、定量性の高いアッセイが可能となります。1チューブの簡単なスーパーミックスから、高収量タイプ、ゲノムDNA除去も可能なキット、プライマー選択式キットまで幅広くラインナップしています。

Amplification

1チューブで簡単、セットアップ時間最小で調製ミスを低減

TUBE

iScript 逆転写(cDNA合成)キットシリーズ

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10 Amplification:Reagents and Plastics

iScript™ Advanced cDNA Synthesis Kit

・ 7.5 µgと大量のRNAからのcDNA合成により、多数のターゲットを一挙に検出可能 7.5 µgと多量のRNAを使用できることから、多数のターゲットRNAを一挙に検出可能です。・ 使用前に酵素とサンプルを混ぜるだけの簡便なキット

i Sc r ip t Advanced cDNA Synthesis Kitを用いたα-tubulin遺伝子の増幅結果例HeLa細胞RNAからα-tubulin遺伝子 を増幅した。増幅曲線:左から右へ 7.5 µg, 5 µg, 2 µg, 1 µg, 100 ng, 1 ng, 100 pg, 10 pg, 1 pg。検出はHEX標識プローブを用いた。

-2 0-1 1 2 3 4Log Starting Quantity

Standard Curve

Cq(

Ct)

35

30

25

20

0 10 20 30 40Cycles

Amplification

RFU

103

102

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725037 iScript Advanced cDNA Synthesis Kit(20 µl×25反応) -20℃ ¥16,0001725038 iScript Advanced cDNA Synthesis Kit(20 µl×100反応) -20℃ ¥49,000

反応時間21分、大量のRNAを一度に処理可能

豊富な実績のあるcDNA合成キット

RT-PCRにおけるiScriptの感度の確認結果42℃においてcDNAを合成し、iTaq DNA ポリメラーゼによってβ-actin遺伝子を増幅した例。Lane M:EZ Load™ 100 bp Molecular RulerLane C:ネガティブコントロール0.01 pgにおいてもバンドを確認できる

1,000 bp

400

300

200

100

M 0.01 pg 0.1 pg 1 pg 10 pg 100 pg 1 ng 10 ng C

input total RNA

iScript cDNA Synthesis Kitによる広いダイナミックレンジRNAの 逆 転 写 に よ っ て 得 ら れ たcDNAをiQ SYBR Green Supermixで増幅した。Efficiency = 96.5%、R2 = 0.998

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

1 µg100 ng10 ng1 ng100 pg10 pg1 pg

1,000

100

10

Cycles

RFU

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1708890 iScript cDNA Synthesis Kit(20 µl×25反応分) -20℃ ¥21,0001708891 iScript cDNA Synthesis Kit(20 µl×100反応分) -20℃ ¥65,0001708891B04 iScript cDNA Synthesis Kit(20 µl×400反応分) -20℃ ¥160,0001708896 iScript Select cDNA Synthesis Kit(20 µl×25反応分) -20℃ ¥23,0001708897 iScript Select cDNA Synthesis Kit(20 µl×100反応分) -20℃ ¥67,000

iScript cDNA Synthesis Kitはプライマーのプレミックス、 iScript Select cDNA Synthesis Kitはプライマー選択型となっております。

・ 高感度:少量のRNAからも高感度な検出が可能 iScript の使用により、100 fg (0.1 pg) と少量のRNAからも高感度な検出が可能・ 選べる2つのプライマーシステム:   iScript cDNA Synthesis Kit;オリゴdTとランダムプライマーのブレンドタイプ  iScript Select cDNA Synthesis Kit:オリゴdT、ランダムプライマー、遺伝子特異的なプライマーが選択可能

iScript™ cDNA Synthesis Kit / iScript™ Select cDNA Synthesis Kit

CLASSIC

HIGHFIDELITY

HIGHRNAINPUT

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11

REVERSE TRANSCRIPTION

Amplification:Reagents and Plastics

逆転写反応前に、ゲノム由来のDNAを除去することで、リアルタイムPCR実施の際に非特異的な増幅を抑制します。

混入したゲノムDNAのリアルタイムPCRに与える影響RNAサンプル(1 µg)にHeLa細胞由来のゲノムDNA(300ng)を加えた後、各種キットを用いて逆転写反応を行い、リアルタイムPCRを行った(RT+)。コントロールとして、逆転写酵素を加えずに反応を行った(RT-)。A:Bio-Rad iScript gDNA Clear cDNA Synthesis Kit. B:Q社キット、C:Th社キット、D:Ta社キット。Bio-Radの製品(A)以外、残存するgDNAにより、逆転写酵素を加えない場合でも、シグナルが検出された。

・ ステップは2段階・ 効率の良いゲノムDNA除去・ 高い再現性・ 広いダイナミックレンジ (1pg-1 µg)・ ランダムプライマーとオリゴdTプライマーのブレンド

cDNA synthesis:26min

Mix iScript DNase and iScript DNase Buffer to

prepare DNase master mix

Add DNase master mix to RNA sample(s)

Incubate at 25°C for 5 min, then 75°C for 5 min

Incubate at 25°C for 5 min, then 46°C for 20 min, then

95°C for 1 min

Add iScript Reverse Transcription Supermix to DNase-treated

RNA sample

Incubbatte att 225°C C for 5 r 5 min, tthheen n 7755°°CC ffoor 5 r 5 min

IInnccuubbaate aatt 2255°CC ffoorr 5 min, then 4466°C for 20 min, then

Digest gDNA:10min

A

C

B

D

RFU

0 01 02 03 04 Cycles

6,000

5,000

4,000

3,000

2,000

1,000

RFU

0 01 20 30 04 Cycles

6,000

5,000

4,000

3,000

2,000

1,000

0

0

RFU

0 10 20 30 40

Cycles

6,000

5,000

4,000

3,000

2,000

1,000

0

RFU

0 10 20 30 40

Cycles

Bio-Rad

Th社

Q社

Ta社6,000

5,000

4,000

3,000

2,000

1,000

0

+RT

–RT

+RT

+RT –RT

–RT

+RT

–RT

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725034 iScript gDNA Clear cDNA Synthesis Kit(20 µl×25反応) -20℃ ¥24,0001725035 iScript gDNA Clear cDNA Synthesis Kit(20 µl×100反応) -20℃ ¥72,000

iScript™ gDNA Clear cDNA Synthesis kit

ゲノムDNAを除去して高い再現性を実現

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12 Amplification:Reagents and Plastics

PCR/リアルタイムPCR試薬

リアルタイムPCR試薬セレクションガイド

バイオ・ラッドのPCRおよびリアルタイムPCR用試薬は、先進的な酵素技術とバッファー組成により、効率よく遺伝子を増幅することが可能です。すべての試薬は、ロット間での再現性が得られるように、先進の設備で製造されています。

PCR/リアルタイムPCR試薬

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

リアルタイムPCR(DNA ➡ Cq)

ワンステップRT-qPCR(RNA ➡ Cq)

インターカレーション色素検出

プローブ検出

プローブ検出

インターカレーション色素検出

SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix高速・高阻害耐性・高感度、各社装置に対応

SsoAdvanced Universal Probes Supermix高速・高阻害耐性・高感度、各社装置に対応

iTaq Universal Probes Supermix各社装置対応のスタンダード試薬

iTaq Universal Probes One-Step Kit各社装置対応のスタンダード試薬

iTaq Universal SYBR Green One-Step Kit各社装置対応のスタンダード試薬

SYBR Green

2-plexまで

2-plexまで

SYBR Green

4-plexまで

5-plexまで

Eva Green

SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant SYBR Green Supermix高阻害耐性、各社装置に対応

iQ Multiplex Powermixマルチプレックス用

Reliance One-Step Multiplex Supermix高感度・高阻害耐性のハイパフォーマンス試薬

iTaq Universal SYBR Green Supermix各社装置対応のスタンダード試薬

iQ SYBR Green SupermixiQシリーズ用試薬

Precision Melt SupermixHigh Resolution Melt解析用試薬

SsoFast EvaGreen SupermixHigh Resolution Melt解析対応

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13

REAL-TIME PCR REAGENTS

Amplification:Reagents and Plastics

SsoAdvanced/SsoFastシリーズは、バイオ・ラッドの特許技術であるSso7d融合ポリメラーゼを使用したリアルタイムPCR試薬シリーズです。阻害物質に強く、高速かつ、多様なサンプルや低コピーのサンプルでも、感度よく再現性の高いリアルタイムPCRを実現することができます。

・ 特許技術Sso7d融合ポリメラーゼによる高速PCR反応Sso7dはDNA結合タンパク質のため、PCR中にポリメラーゼ酵素が鋳型DNAに強固に結合し、伸長反応の間にポリメラーゼが鋳型DNAから脱落することを防ぎます。このためPCR中に鋳型DNAからの脱落と再会合を繰り返して伸長反応が進む一般的なポリメラーゼよりも、高速に増幅することが可能です。* 米国特許6,627424; 7,541,170; 7,560,260

バイオ・ラッドのリアルタイムPCR試薬は、使いやすいスーパーミックスの形態で提供されています。またホットスタートに対応し、困難なテンプレートおよびターゲットシーケンスでも確実な増幅を実現するように、独自の酵素とバッファー組成で構成されています。すべてのスーパーミックスは、ゲノムDNA(gDNA)、相補的DNA(cDNA)、ならびにプラスミドDNA等、広範囲のテンプレートに対して幅広いダイナミックレンジを有し、信頼できる増幅を提供します。

Taq Pol Taq Pol

会合 脱落

一般的DNA ポリメラーゼSso7d融合ポリメラーゼ

Taq Pol

脱落しにくい!

伸長継続SsoFastSso7d

VS

Sso7d融合ポリメラーゼの反応模式図(左)と、一般的DNAポリメラーゼの反応模式図(右)の比較

リアルタイムPCR試薬

Sso7d融合ポリメラーゼの特長

リアルタイムPCR(DNA➡Cq) ワンステップRT-qPCR(RNA➡Cq)

SsoAdvanced Universal Supermix

SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant Supermix

iTaq Universal Supermix

Reliance One-Step Multiplex Supermix

iTaq Universal One-Step Kit

特長

SSo7d融合ポリメラーゼによる、難しいテンプレートや、反応条件においてもロバストな性能

SSo7d融合ポリメラーゼ採用、PCR阻害物質を含んだサンプルに対する優れたパフォーマンス

再現性のある高感度検出 Reliance逆転写酵素と、Sso7d融合ポリメラーゼを含んだ、最大5ターゲット検出対応の高性能試薬

iScript逆転写酵素とiTaq DNAポリメラーゼを採用した、利便性の高い1ステップRT-qPCRキット

低存在ターゲットの高感度検出 ●●●●●● ●●●●●● ●●●●●● ●●●●●● ●●●●●●

難しいターゲットの効果的な増幅 ●●●●●● ●●●●●● ●●● ●●●●● ●●●

ターゲットの特異的検出 ●●●●●● ●●●●●● ●●●●●● ●●●●●● ●●●●●

様々な条件下でのロバストなパフォーマンス ●●●●●● ●●●●●● ●●● ●●●●● ●●●

PCR阻害物質に対する耐性 ●●●●● ●●●●●● ●●● ●●●●● ●●●

Fastプロトコル 対応 対応 対応 対応 対応

検出方式 SYBR Green / プローブ SYBR Green SYBR Green / プローブ プローブ SYBR Green / プローブ

各社リアルタイムPCR装置対応

対応特許取得済み色素含有

対応特許取得済み色素含有

対応特許取得済み色素含有

対応特許取得済み色素含有

対応特許取得済み色素含有

サンプル

•血液•細胞ライセート•クルード抽出物•FFPE•LCM•植物抽出物•植物組織•プラスミド•精製gDNA・cDNA

•血液•細胞ライセート•クルード抽出物•FFPE•LCM•植物抽出物•植物組織•プラスミド•精製gDNA・cDNA

•細胞ライセート•精製gDNA

• 血液、血清、血漿を含むRNA• 組織や細胞株から精製したRNA• 細胞ライセート• PCR阻害物質が含まれた

RNAサンプル

• 組織や細胞株から精製したRNA• 細胞ライセート

ターゲット

•GCリッチ(>60%)•ATリッチ(>60%)•2次構造が多い•>250 bp

•GCリッチ (>60%)•ATリッチ (>60%)•2次構造が多い•>250 bp

•40-60% GCリッチ•50-250 bp

•GCリッチ (>60%)• インターナルコントロールRNAまたはDNA•70-250 bp

•GCリッチ (>60%)•ATリッチ (>60%)• 40-60% GCリッチ

(SYBR)•50-250 bp

*FFPE: formalin-fixed paraffin embedded, LCM: laser capture microdissection

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14 Amplification:Reagents and Plastics

SsoAdvanced Universal SYBR® Green / Probes SupermixSsoAdvanced Universal Supermixは、バイオ・ラッドの特許取得済みのSso7d融合タンパク質技術に基づいた、オールマイティーに使える高性能リアルタイムPCRスーパーミックスです。このスーパーミックスは、幅広いリアルタイムPCRの用途に合わせて、あらゆるリアルタイムPCRシステムと共に使用できるように設計されています。2x濃度のSupermixなので、テンプレートとプライマーを混ぜるだけで使用できます。SYBR Green 用、プローブ用をご用意しています。

・ 高阻害耐性dsDNA結合タンパク質であるSso7d融合ポリメラーゼの採用により、通常のポリメラーゼでは難しいPCR阻害物存在下での増幅反応が可能です。

・ 高速・高感度Sso7d融合ポリメラーゼは、DNA鎖からの脱落が起こりにくいため、高速サイクリングにおいても一貫した結果が得られます。抗体タイプのホットスタート試薬で、Fast/ 標準プロトコールの両方に対応します。

・ 装置を選ばないユニバーサル試薬特許取得技術により、ROX補正が必要な装置であっても、1種類の試薬でほとんどの装置に対応可能。各社のリアルタイムPCR装置で使用できます。

・ PrimePCR™アッセイで良好な結果が得られますPrimePCRアッセイは、結果が確実に得られるようにプライマー、プローブが専門的に設計され、バリデーションが行われています。(P.37参照)

SsoAdvanced™ Universal Supermixの用途・ リアルタイムPCR・ 遺伝子発現解析・ パスウェイ解析・ 絶対的定量・ クロマチン免疫沈降(ChIP)qPCR・ 突然変異の検出・ 病原菌の検出・ ウイルス検出(ウイルス量)・ 遺伝子組換え生物(GMO)の検出・ 遺伝的プロファイリング

13-0478 Sso7d Illustration Final02.20.13

ポリメラーゼ

Sso7d

SsoAdvanced試薬のSso7d融合DNAポリメラーゼdsDNA結合タンパク質であるSso7dが融合したポリメラーゼは、鋳型となるDNAに結合するため、伸長反応中の脱落が低減されます。このSso7d融合ポリメラーゼの特性が、高速反応と高阻害耐性を実現し、再現性の高い結果を導きます。そのためSsoAdvanced Universal SupermixはダイレクトリアルタイムPCR等の難しい用途でも優れた性能を発揮します。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725270 SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix、2 ml(1 mlバイアル×2本)、20 µl×200反応 -20℃ ¥25,0001725271 SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix、5 ml(1 mlバイアル×5本)、20 µl×500反応 -20℃ ¥55,0001725271B02 SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix、10 ml(1 mlバイアル×10本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥98,0001725271B05 SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix、25 ml(1 mlバイアル×25本)、20 µl×2,500反応 -20℃ ¥230,0001725271B10 SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix、50 ml(1 mlバイアル×50本)20 µl×5,000反応 -20℃ ¥450,0001725274 SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix、25 ml(5 mlバイアル×5本)、20 µl×2,500反応 -20℃ ¥230,0001725280 SsoAdvanced Universal Probes Supermix、2 ml(1 mlバイアル×2本)、20 µl×200反応 -20℃ ¥27,0001725280B02 SsoAdvanced Universal Probes Supermix、4 ml(1 mlバイアル×4本)、20 µl×400反応 -20℃ ¥48,5001725280B05 SsoAdvanced Universal Probes Supermix、10 ml(1 mlバイアル×10本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥99,5001725280B10 SsoAdvanced Universal Probes Supermix、20 ml(1 mlバイアル×20本)、20 µl×2,000反応 -20℃ ¥178,0001725284 SsoAdvanced Universal Probes Supermix、25 ml(5 mlバイアル×5本)、20 µl×2,500反応 -20℃ ¥220,000

SsoAdvanced™ Universal Supermix

広い条件下で高い増幅効率を維持する、高速・高感度のオールマイティーリアルタイムPCR反応試薬

SYBR Probe

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REAL-TIME PCR REAGENTS

Amplification:Reagents and Plastics

SsoAdvanced™ Universal Inhibitor-Tolerant SYBR® Green Supermixは、バイオ・ラッドの特許取得済みのSso7d融合タンパク質技術に基づいた高性能リアルタイムPCRスーパーミックスです。このスーパーミックスは、 夾雑物を含む粗抽出液など従来増幅が困難なサンプルにおいても、標的シーケンスを増幅できるように設計されています。

・ 粗抽出サンプルを使用することによりRNAおよびDNA抽出を省略します。植物、種子、細胞、細菌、あるいはホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)サンプルから得られる粗抽出物を使用して優れたデータが得られます。

・ PCR阻害物質に対して性能を発揮します。ヘパリン、多糖類、培地等よく知られたPCR阻害物質の存在下で比類のない性能を発揮します。

・ 幅広い条件を通じて高速サイクリングで高品質のデータが得られます。反応条件、プライマー濃度、ならびに温度が大きく変動しても安定した結果が得られます。

・ 高速の伸長スピードおよび短時間のポリメラーゼ活性化リアルタイムPCRのデータ品質を損なわずに結果を得るまでの時間を短縮します。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 通常価格1725016 SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant SYBR Green Supermix、2 ml(1 mlバイアル×2本)、20 µl×200反応 -20℃ ¥27,0001725017 SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant SYBR Green Supermix、5 ml(5 mlバイアル×1本)、20 µl×500反応 -20℃ ¥59,0001725018 SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant SYBR Green Supermix、10 ml(5 mlバイアル×2本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥106,000

SsoAdvanced™ Universal Inhibitor-Tolerant SYBR® Green Supermix

阻害に対する高い耐性 クルードサンプルや阻害物質の多いサンプルからのリアルタイムPCRに

サンプル 阻害物質SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant SYBR Gren Supermix

Quanta Bioscience’s PerfeCTa SYBR Green FastMix

Clontech’s Terra qPCR Direct SYBR Premix

胆汁酸塩 コール酸デオキシコール酸

0.5 µg/µl0.25 µg/µl

0.25 µg/µl0.125 µg/µl

0.5 µg/µl0.25 µg/µl

多糖類 ポリガラクツロン酸 0.625 µg/µl 0.1563 µg/µl 0.3125 µg/µl

脂質 Cholesterol hydrochloride 0.125 µg/µl 0.0625 µg/µl 0.01563 µg/µl

血液 ヘパリンヘマチンEDTA血清

5 ng/µl1.5625 µM0.7813 uM0.63%

0 ng/µl0.7813 µM0.7813 µM-

2.5 ng/µl0.7813 µM0.3907 mM-

土壌 フミン酸 0.625 ng/µl 0.1563 ng/µl 0.3125 ng/µl

織物 インディゴ 5 mM 5 mM 2.5 mM

ワイン タンニン酸 0.6250 ng/µl 0.3125 ng/µl 0.3125 ng/µl

植物 セルロース 2% 1% 1%

毛髪、皮膚 メラニン 20 ng/µl 10 ng/µl 10 ng/µl

骨、歯 CaCl2 1.25 mM 0.3125 mM 0.6250 mM

細胞ライセート MEM+FBSPBSTrypsin

5%10%0.000094%

5%10%0.000094%

5%5%0.00%

サンプル調製 NaAcNaClEtOHイソプロパノールTRIzolInstaGeneマトリクス

25 mM12.5 mM2.50%2.50%0.30%0.30%

25 mM6.25 mM1.25%1.25%0.30%0.15%

12.5 mM6.25 mM1.25%1.25%0.15%0.02%

その他 緑茶チョコレート塵SDSDMSODTT

0.50%0.13%0.18 µg/µl0.003%3%2 mM

---0.003%1.50%2 mM

---0.006%1.50%No amplification

体液 スペルミジン尿素

1.25 mM80 mM

1.25 mM80 mM

1.25 mM80 mM

SsoAdvanced Universal Inhibitor-Tolerant SYBR Green Supermixと他社試薬の阻害耐性の比較結果全てのqPCR反応は、ヒトゲノムDNA 5 ngを使用してGAPDHをターゲットとした難易度の高い長鎖(226 bp)のアッセイによって実施しました。示されている濃度およびパーセンテージは、Cq値の遅れが1以下である最大の値を示しています。1以上の Cq値の遅れは、反応阻害を示しているものとみなしました。-は未テストを示しています。

SYBR Probe

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16 Amplification:Reagents and Plastics

iTaq Universal SYBR Green/Probes SupermixiTaq Universal Supermixは、あらゆるリアルタイムPCR装置に対応する、スタンダードタイプのスーパーミックスです。2x濃度のSupermixなので、テンプレートとプライマーを混ぜるだけで使用できます。

・ 抗体タイプのホットスタート試薬抗体タイプのホットスタートiTaq DNAポリメラーゼは95℃ 30 秒で活性化します。最適化されたバッファー組成により優れた感度を示し、Fast /標準プロトコールの両方に対応可能。

・ 装置を選ばないユニバーサル試薬ROX補正が必要な装置であっても、1種類の試薬でほとんどの装置に対応し、各社リアルタイムPCR装置で使用できます。

・ 1ステップRT-qPCR用試薬もラインアップiScript シリーズの逆転写酵素と、iTaq Universal試薬を組み合わせた利便性の良い1ステップ試薬は21ページをご参照ください。

各社リアルタイムPCR機器における発現解析結果iTaq Universal SYBR Supermixとバイオ・ラッド CFX96(上図左)、およびABI 7500 fast(上図右)を使用して、β-actin遺伝子を増幅した結果。iTaq Universalは各社装置で優れた増幅効率と整合性を示します。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格iTaq Universal SYBR Green Supermix1725120 iTaq Universal SYBR Green Supermix (20 µl×200反応) -20℃ ¥13,0001725121 iTaq Universal SYBR Green Supermix (20 µl×500反応) -20℃ ¥28,0001725121B02 iTaq Universal SYBR Green Supermix (20 µl×1,000反応) -20℃ ¥50,0001725121B05 iTaq Universal SYBR Green Supermix (20 µl×2,500反応) -20℃ ¥110,0001725121B10 iTaq Universal SYBR Green Supermix (20 µl×5,000反応) -20℃ ¥210,000iTaq Universal Probes Supermix1725130 iTaq Universal Probes Supermix (20 µl×200反応) -20℃ ¥15,0001725131 iTaq Universal Probes Supermix (20 µl×500反応) -20℃ ¥31,0001725131B02 iTaq Universal Probes Supermix (20 µl×1,000反応) -20℃ ¥54,0001725131B05 iTaq Universal Probes Supermix (20 µl×2,500反応) -20℃ ¥125,0001725131B10 iTaq Universal Probes Supermix (20 µl×5,000反応) -20℃ ¥230,000

iQ™ SYBR® Green Supermix

・ 多種多様なリアルタイム PCR解析システムにおいて、最大限のSYBR® Greenの安定性とパフォーマンスが得られます。

・ 抗体タイプのホットスタートiTaq DNA ポリメラーゼにより、リアルタイムPCRにおける迅速な活性化と優れた特異性が得られます。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格iQ SYBR Green Supermix1708880 iQ SYBR Green Supermix (50 µl×100反応) -20℃ ¥30,0001708882 iQ SYBR Green Supermix (50 µl×500反応) -20℃ ¥120,0001708882B02 iQ SYBR Green Supermix (50 µl×1,000反応) -20℃ ¥210,0001708882B04 iQ SYBR Green Supermix (50 µl×2,000反応) -20℃ ¥400,0001708885 iQ SYBR Green Supermix (50 µl×2,000反応)ボトル(50 ml) -20℃ ¥390,000iQ Multiplex Powermix1725848 iQ Multiplex Powermix (50 µl×50反応) -20℃ ¥30,0001725849 iQ Multiplex Powermix (50 µl×200反応) -20℃ ¥93,000

iQ™ Multiplex Powermix

・ 高感度かつ高効率なマルチプレックスリアルタイムPCRのために調製されたスーパーミックス。・ 最大4ターゲット(ターゲット遺伝子間の発現レベルに最大106

倍の差が存在する場合)または最大5ターゲットに関する信頼性の高い定量性を実現します。

iTaq™ Universal Supermix

iQ™ Supermix

各社装置に対応したスタンダードリアルタイムPCR試薬

iQシリーズ用リアルタイムPCR反応試薬

SYBR Probe

SYBR Probe

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17

REAL-TIME PCR REAGENTS

Amplification:Reagents and Plastics

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格SsoFast EvaGreen Supermix1725200 SsoFast EvaGreen Supermix、2 ml(1 mlバイアル×2本)、20 µl×200反応 -20℃ ¥28,0001725201 SsoFast EvaGreen Supermix、5 ml(1 mlバイアル×5本)、20 µl×500反応 -20℃ ¥55,0001725201B02 SsoFast EvaGreen Supermix、10 ml(1 mlバイアル×10本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥98,0001725201B04 SsoFast EvaGreen Supermix、20 ml(1 mlバイアル×20本)、20 µl×2,000反応 -20℃ ¥178,0001725203 SsoFast EvaGreen Supermix、20 ml(20 mlボトル×1本)、20 µl×2,000反応 -20℃ ¥140,0001725210 SsoFast EvaGreen Supermix with Low ROX、2 ml(1 mlバイアル×2本)、20 µl×200反応 -20℃ ¥29,0001725210B02 SsoFast EvaGreen Supermix with Low ROX、4 ml(1 mlバイアル×4本)、20 µl×400反応 -20℃ ¥55,0001725210B05 SsoFast EvaGreen Supermix with Low ROX、10 ml(1 mlバイアル×10本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥118,0001725210B10 SsoFast EvaGreen Supermix with Low ROX、20 ml(1 mlバイアル×20本)、20 µl×2,000反応 -20℃ ¥208,000

SsoFast EvaGreen Supermix・ Sso7d融合ポリメラーゼにより、高速かつ、多様サンプル・低コピーサンプルを使用したリアルタイムPCRを実現することができます。

・ 検出にEvaGreen色素を使用することにより、HRM(High Resolution Melt)解析を行うことができます。(バイサルファイト処理DNAサンプルには適用しません)

SsoFast EvaGreen Supermix with ROX・ SsoFast EvaGreen Supermixを、ThermoFisher(旧Life

Technologies)社の一部のリアルタイムPCR機器 (7500Fast, ViiA 7等) においても使用できるようにした製品です。

SsoFast™ EvaGreen® Supermix

Diff

eren

ce R

FU

0.0

–0.1

–0.2

–0.3

–0.4

–0.5

–0.6

74 76 78 80 82 84Temperature, ℃

・ EvaGreen色素を含む当試薬により、HRM (High Resolution Melt) 解析を行うことができます。

・ 4種類の全SNPを高感度で効率的に識別します。・ エピジェネティクス研究のためのCpGメチル化の正確な検出。・ ハイスループットなHRM研究のための比類なき室温安定性。・ HRMが可能なあらゆるサーマルサイクラーでの信頼性の高いパフォーマンス。

Precision Melt Supermixを用いた正確なメチル化の検出メチル化/非メチル化状態が混合したヒトゲノムDNAのメチル化の比率を、HRM (High Resolution Melt) を使用してCFX384™リアルタイムPCR解析システムで解析した。異なるメチル化比率(■0%; ■2%; ■5%; ■50%; ■75%; ■95%;および■100%)を有するヒトRARB2遺伝子を解析した。ゲノム領域は7つのCpG部位を含み、長さは88塩基対である。融解曲線を含む合計ラン時間は190分。RFU, 相対蛍光単位。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725110 Precision Melt Supermix、2 ml(1 mlバイアル×2本)、20 µl×200反応 -20℃ ¥33,0001725110B05 Precision Melt Supermix、10 ml(1 mlバイアル×10本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥140,000

Precision Melt Supermix(HRM解析用)

HRM解析用リアルタイムPCR反応試薬

EvaGreen色素使用、Sso7d融合ポリメラーゼ採用のリアルタイムPCR反応試薬、HRM解析対応

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18 Amplification:Reagents and Plastics

SsoAdvanced PreAmp Supermixは、cDNAおよびゲノムDNA(gDNA)の偏りのない標的特異的な前増幅(PreAmp)に最適化した、2×スーパーミックスです。このスーパーミックスは、SYBR® Green、ならびにプローブアッセイ(5’ヌクレアーゼ)、TaqManアッセイ用のDNAテンプレートを前増幅します。

・ 偏りのない標的の前増幅が重要です。有効なリアルタイムPCRおよびエンドポイントPCRデータを、限られた試料から得るには、しばしば前増幅が必要になります。前増幅した試料と、していない試料を比較した場合、一部の方法ではトランスクリプトーム/ゲノムを通じて偏りが生じることがあります。SsoAdvanced PreAmp Supermixにより、反応溶液中の標的にかかわらず、偏りのない前増幅反応が可能となり、限られた試料からより多くのデータの収集が可能です。

・ 限られたテンプレートDNA-幹細胞、レーザーマイクロダイセクションサンプル、ホルマリン固定パラフィン包埋組織等の、貴重なあるいは限られた試料から得られる、わずか100 pgのcDNAまたはgDNAを用いてアッセイを開始することができます。

・ 様々なアッセイとの適合性-PrimePCR™、SYBR® Greenアッセイ、カスタムアッセイ、ならびにTaqManアッセイとの適合性があります。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725160 SsoAdvanced PreAmp Supermix、1.25 ml(1.25 mlバイアル1本)、50 µl×50反応 -20℃ ¥76,000

Perform preamplification PCRCombine components

Analyze dataPerform qPCR

Produce cDNA

Set up qPCR reaction

Extract RNA

Dilute sample

1

5

2

6

3

7

4

8

cDNA

Preamplified sample

Pooled primers

Reverse transcription with iScript™ Reverse Transcription Kits

Primers

SsoAdvanced PreAmp Supermix

SsoAdvanced Universal Supermix

10–20 cycles

1:5 to 1:50104

103

102

0 10 20 30 40

Cycles

RFU

Preamplification workflow.

SsoAdvanced™ PreAmp Supermix

前増幅試薬低バイアスのプレアンプが可能、Sso7dポリメラーゼ採用の前増幅反応試薬

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19

REAL-TIME PCR REAGENTS

Amplification:Reagents and Plastics

このキットを使用して、最大100ターゲットのバイアスのない特異的プレアンプを行うことができます。このキットにはゲノムDNA(gDNA)除去、逆転写およびプレアンプに必要なすべての試薬が含まれています。キットを使用する場合には、RNAとPreAmpAssay を加えるだけです。PrimePCR lncRNAアッセイについては、39ページをご参照ください。

iScript Explore One-Step RT and PreAmp Kit

低発現のlncRNAを低バイアスでプレアンプ可能、リアルタイムPCR用前増幅キット

iScript Explore Kit には、限られたサンプルからより多くのデータを得るために、反応溶液に存在するターゲットを正確にバイアスなくプレアンプする、特許取得済みのSso7d 融合ポリメラーゼが含まれています。

lncRNAを qPCRで検出する研究ニーズのために開発されています

gDNA除去目的のターゲットのみを増幅する

検証済PrimePCR lncRNA アッセイに使用するために開発並びにテストされています。

反応ブースター逆転写 (RT)性能を向上させる

gDNAのコンタミネーションを排除して、低発現の lncRNAを正確に検出できます。

試薬と lncRNAプライマーが高性能であることが検証されています。

シングルステップワンステップでRNAからcDNAのプレアンプ反応まで行えます。

RNA抽出・精製をスキップするSingleShot Cell Lysis Kitと一緒にご使用いただけます。

オール・イン・ワン キットgDNA除去、RTおよびプレアンプ試薬がすべて1つのキットになっています。

SingleShot Cell Lysis Kitを用いるとRNA精製作業を省略して、工程を簡素化することができます。

追加のピペッティング作業が不要でプレアンプ反応まで行うことができます。

PrimePCR lncRNA Assayと一緒に使用されるために設計およびQCされており、高い信頼性を提供することができます。

複雑な二次構造を有する lncRNAターゲットの検出をしやすくします。

RNA

cDNA

gDNA clearance

PreamplificationReverse transcription

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格12004856 iScript Explorer One-Step RT and PreAmp Kit、50 µl×50反応

構成内容:iScript DNase Enzyme, iScript DNase Buffer, iScript Advanced ReverseTranscriptase, iScript Explore Reaction Booster、SsoAdvanced PreAmp Supermix Nuclease-free water

-20℃ ¥98,000

17002826 iScript Explorer One-Step RT and PreAmp Kit、50 µl×250反応構成内容:iScript DNase Enzyme, iScript DNase Buffer, iScript Advanced ReverseTranscriptase, iScript Explore Reaction Booster、SsoAdvanced PreAmp Supermix Nuclease-free water

-20℃ ¥398,000

Cq

with

out p

ream

plifi

catio

n

35

30

25

20

1510 15 20 25 30

Cq with preamplification and dilution

R2 = 0.952

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20 Amplification:Reagents and Plastics

ワンステップRT-qPCR試薬

Reliance One-Step Multiplex Supermixは、ウイルス/病原体の検出や、ハイスループットを必要とするqPCR実験に適した1ステップRT-qPCR用スーパーミックスです。高感度で再現性の高い最大5-plex のマルチプレックス検出が可能なため、ウイルス検出やルーチン解析に最適です。

・ 便利な1チューブフォーマット・ RNAインプット量を増やせる4x濃度・ 新開発キメラ逆転写酵素による卓越した検出感度・ Sso7d融合DNAポリメラーゼを含む、最適に構成されたDNAポリメラーゼ・ ROX補正が必要な装置であっても、1種類ですべての装置に対応可能・ セットアップ後の溶液は室温下で最大24時間安定でオートメーション化にも対応

Reliance One-Step Multiplex Supermix

RNAサンプル添加後24時間安定、高感度マルチプレックス用1ステップRT-qPCR試薬

チューブフォーマット

濃度スーパーミックス

ターゲットマルチプレックス

対応

時間室温で安定

tube format

1concentrated

4xtargets

per sample

5hours of room temperature

stability

24

5-plex 1ステップRT-qPCRでのダイナミックレンジ直線性Reliance One-Step Multiplex SupermixおよびCFX96 Touch リアルタイムPCRシステムを使用して、7桁のダイナミックレンジで5ターゲットの増幅反応を行った。その結果、Reliance One-Step Multiplex Supermixは、優れた増幅効率と、1 pgのRNAインプット量からの幅広いダイナミックレンジで直線的に増幅が可能な、卓越した増幅性能を示した。

1ステップ反応で10コピーの合成RNAを検出Reliance One-Step Multiplex Supermixを使用して、合成RNA1種およびHeLa RNA中4種をターゲットとした5-plex検出を上記の希釈系列を作製して実施した。同時にddPCRによって定量された合成RNA10コピー(赤丸)の検出を53レプリケートで行った。この結果から、最小10コピーのRNAターゲットを高感度、かつ高い再現性で検出可能なことが示された。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格12010176 Reliance One-Step Multiplex Supermix、1 ml(1 ml×1本)、 20 µl×200反応 -20℃ ¥48,00012010220 Reliance One-Step Multiplex Supermix、5 ml(1 ml×5本)、20 µl×1,000反応 -20℃ ¥200,000

Qua

ntita

tion

cycl

e (C

q)

40

35

30

25

20

15

10

–3 –2 –1 0 1 2 3Log starting quantity, ng

Reporter Dye Assays Efficiency R2 Slope

— FAM ACTB 99.0% 1.000 –3.346

— HEX NGFRP 100.5% 0.999 –3.311

— Texas Red TBP 97.6% 0.997 –3.382

— Cy5 EF1a 96.6% 0.999 –3.406

— Cy5.5 GAPDH 96.9% 1.000 –3.397

Reporter Dye Assays Template Input Amount(s)

— FAM Control Synthetic RNA 10-copy per reaction

— FAM Control Synthetic RNA

Four 13.5-fold serial dilutions from 1 μg

— HEX NGFRP HeLa RNA

— Texas Red HSPA4 HeLa RNA

— Cy5 EF1a HeLa RNA

— Cy5.5 GAPDH HeLa RNA

RFU

104

103

102

0 10 20 30 40Cycles

SYBR Probe

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21

REAL-TIME PCR REAGENTS

Amplification:Reagents and Plastics

SYBR、Probeアッセイ用、スタンダードタイプのワンステップRT-qPCRキット

iTaq Universal One-Stepキットは、RNase H+ MMLV逆転写酵素、逆転写反応阻害物質抑制剤、hot-start iTaq DNAポリメラーゼという強力な組み合わせを用いた、利便性の高い1ステップRT-qPCRキットです。このキットは、PCRの効率も高く、広いダイナミックレンジを有し、かつ高速で優れた感度および特異性を提供します。また細胞溶解物がある場合でも性能に悪影響を与えずに高い阻害物質耐性を持ちます。

・ 感度、特異性、効率が高い。最適化されたバッファー、酵素等により、様々なサンプルの種類および標的シーケンスに対して頑健な性能が得られます。

・ あらゆるリアルタイムPCRシステムを使用可能。スーパーミックスに含まれるユニバーサルリファレンス色素により、 ROX依存性のリアルタイムPCRシステムで必要となるROXレベルにかかわらず、リアルタイムPCRデータのROXによる正規化を可能にします。

・ いかなる条件でも優れたリアルタイムPCRの結果が得られる。幅広い反応条件、プライマー濃度、温度範囲、高速サイクリングにおいても一貫した性能が得られます。

・ PrimePCR™アッセイで優れた結果。PrimePCRアッセイは、結果が確実に得られるようにプライマー、プローブが専門的に設計され、バリデーションが行われています。(P.37参照)

iTaq™ Universal One-Step Kitの用途・ RT-qPCR/リアルタイムPCR・ 遺伝子発現解析・ 絶対的定量・ 突然変異の検出・ 病原菌の検出・ ウイルス検出(ウイルス量)・ 遺伝子組換え生物(GMO)の検出・ 遺伝的プロファイリング

機器との適合性iTaq™ Universal One-Step Kitは、ROX補正が必要な装置を含むほとんどのリアルタイムPCRシステムと適合性があります。

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格iTaq Universal SYBR Green One-Step Kit1725150 iTaq Universal SYBR Green One-Step Kit、1 ml(20 µl×100反応分)、

2×one-step SYBR Green反応試薬、iScript逆転写酵素、ヌクレアーゼフリー水-20℃ ¥16,000

1725151 iTaq Universal SYBR Green One-Step Kit、5 ml(20 µl×500反応分)、 2×one-step SYBR Green反応試薬、iScript逆転写酵素、ヌクレアーゼフリー水

-20℃ ¥80,000

iTaq Universal Probe One-Step Kit1725140 iTaq Universal Probes One-Step Kit、1 ml(20 µl×100反応分)、

2×one-step反応試薬、iScript逆転写酵素、ヌクレアーゼフリー水-20℃ ¥20,000

1725141 iTaq Universal Probes One-Step Kit、5 ml(20 µl×500反応分)、 2×one-step反応試薬、iScript逆転写酵素、ヌクレアーゼフリー水

-20℃ ¥86,000

iTaq™ Universal One-Step Kit(RT-qPCRキット)

SYBR Probe

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22 Amplification:Reagents and Plastics

Precision Blue Real-Time Dyeは、リアルタイムPCRの反応液の視認性を高めるための調整済み色素です。既存のリアルタイムPCR用試薬に加えることによりチューブやプレートへの分注が容易に確認でき、より精度の高い実験を可能とします。特に384ウェルプレートなどを分注する際には視認性が高まり有用です。

・ qPCR実験の正確性と再現性の向上―分注作業に伴うミスを低減し、一定の量を分注することが可能となります。・ 容易なピペット作業の確認―チップの先から試薬が排出されたか、反応液が適量か容易に判断可能となります。・ セットアップ時間の短縮とqPCRデータ品質の向上―視認性の向上によりピペッティング作業の間違いを低減し、作業時間の短縮と正確な作業に貢献します。

Precision Blue Dyeは、バイオ・ラッドのUniversal Supermixシリーズ(蛍光プローブアッセイ、SYBR Greenアッセイ)のリアルタイムPCR試薬に加えて使用します。使用方法はとても簡単で2×スーパーミックスに加えるだけです。色素添加後の試薬は、PCRの特異性、反応性、感度に影響を与えず、また通常の保管温度で保存可能です。Precision Blue Dyeは、Passive Reference Dye(例えばROX)を使用する機器、使用しない機器においてもその使用において影響はありません。

いくつかのリアルタイムPCR機器* においては、ROX色素を使ってウェル間のシグナルの標準化を行っています。バイオ・ラッドのROX Passive Reference Dyeを添加することで、これらの機器でROXを含まないPCR試薬を使用することが可能となります。励起光は、リアルタイムPCR機器によって異なっているため、ROX Reference色素の濃度は、それぞれの機器にあった濃度にする必要があります。

以下のシステムでは、この色素を50×として使用します。・ ABI PRISM 7000、7300、7700、7900以下のシステムで580-585 nmの励起のPassive Reference Dyeとして使用する場合、本ROX Reference Dyeは、750倍として使用してください。・ Stratagene Mx4000、Mx3000P、Mx3005Pシステム・ ABI PRISM 7500

*Note:バイオ・ラッドのリアルタイムPCR機器には、補正用の色素としてROX Reference Dyeの添加は必要ありません。

Supermix

Precision Blue

Real-Time

Fig. 1. Pipetting a reaction mix into a PrimePCR assay plate.

Pipet1x qPCR master mix

Precision Blue 200x dye

Bio-Rad supermix

DNAPrimePCR assay plate

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725555 Precision Blue リアルタイムPCR用色素、55 µl (20 µl×500反応) -20℃ ¥4,0001725858 ROX Passive Reference Dye、0.5 ml -20℃ ¥8,000

Precision Blue™ リアルタイムPCR用色素

ROX Passive Reference Dye

反応液に加えるだけ、色を付けて分注ミスを低減する便利な色素

補正が必要な機器のためのROX色素

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23

REAL-TIME PCR REAGENTS

Amplification:Reagents and Plastics

Taqポリメラーゼ比較52倍の正確性、増幅困難なターゲットに対応したDNAポリメラーゼ

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1725301 iProof High-Fidelity DNAポリメラーゼ 100units

構成内容:iProofポリメラーゼ(50 µl, 2units/µl)、HFバッファー(1.5 ml)、GCバッファー(1.5 ml)、50 mM MgCl2(1.5 ml)、DMSO(500 µl)

-20℃ ¥11,000

1725302 iProof High-Fidelity DNAポリメラーゼ 500units構成内容:iProofポリメラーゼ(250 µl, 2units/µl)、HFバッファー(1.5 ml×4)、GCバッファー(1.5 ml×4)、50 mM MgCl2(1.5 ml×2)、DMSO(500 µl)

-20℃ ¥48,000

1725310 iProof HF Master Mix(100反応分)構成内容:2×iProof HF Master Mix(1.25 ml×2)、DMSO(500 µl)

-20℃ ¥20,000

1725320 iProof GC Master Mix(100反応分)構成内容:2×iProof GC Master Mix(1.25 ml×2)、DMSO(500 µl)

-20℃ ¥48,000

1725330 iProof High-Fidelity PCR Kit 50units構成内容:iProofポリメラーゼ(25 µl, 2units/µl)、HFバッファー(1.5 ml)、GCバッファー(1.5 ml)、dNTP Mix(100 µl, 10 mM each)、50 mM MgCl2(1.5 ml)、Control λ template(40 µl, 0.5 ng/µl)、1.3kbプライマーセット(50 µl)、10 kbプライマーセット(50 µl)、DNAスタンダード (200 µl)、DMSO(500 µl)

-20℃ ¥11,000

iProof High-Fidelity DNAポリメラーゼは、2本鎖DNA結合タンパク質Sso7dが結合したPyrococcus属由来の3'→5' proofreading活性を持つ耐熱性DNAポリメラーゼです。この画期的な技術(Bio-Rad特許取得)により、ターゲット遺伝子を正確、かつ高速に増幅することが可能です。iProofシリーズとして、酵素のみ、簡単調製のマスターミックス、コントロールを含むキットの3種類をご提供いたします。

・ High Fidelity-Taq DNA polymeraseの52倍の正確性・ High Speed-Sso7dテクノロジーによって15~30秒/kbの高速増幅を実現・ Long Length-長いターゲット遺伝子(最長37 kb)を少量の酵素量(0.25~1units/反応)にて増幅可能

2 3 4

Other iProof enzyme

5 6 7 8 9 20 21 22 23

iProof Other enzyme

iProof ポリメラーゼと他社Fast-PCR酵素の比較両酵素とも、メーカー推奨条件にてPCRを実行。左図:10 ngヒトゲノムDNAから1 kbフラグメントを標準的なランピング速度のサーマルサイクラーにて増幅した。レーン6-9は20U/mlのiProofにて増幅。レーン20-24は50U/mlの他社酵素にて増幅した結果。プロトコールはアニーリング/伸長反応ステップ30秒でトータル反応時間48分(レーン6, 7, 20, 21)。アニーリング/伸長反応ステップ15秒でトータル反応時間39分(レーン8-9)もしくは40分(レーン22-23)。レーン5はEZ Load™ 500bp Molecular Ruler。右図:100 ngヒトゲノムDNAより1kbフラグメントをFast-PCR対応のサーマルサイクラーにて増幅した。レーン3は50U/mlのiProofポリメラーゼを使用。レーン4は100U/mlの他社酵素を使用。アニーリング/伸長反応ステップは30秒でトータル反応時間は30分。レーン2はEZ Load™ 500bp Molecular Ruler。

PCR試薬

iProof DNAポリメラーゼの短時間にてターゲットを増幅した結果iProofおよび他社の2種類のDNAポリメラーゼの推奨プロトコールの反応時間を比較した結果。iProofは、1、8、15 kbのいずれの長さのターゲットも他社のDNAポリメラーゼよりも短時間にて増幅することができた。

iProof™ High-Fidelity DNAポリメラーゼ

High-FidelityPCR試薬、および標準PCR試薬の比較特長 iProof High-Fidelity DNAポリメラーゼ iTaq DNAポリメラーゼSso7d結合DNAポリメラーゼ ○ ×ホットスタート × ○(抗体)5’→3’ エクソヌクレアーゼ活性 × ○3’→5’ エクソヌクレアーゼ活性 ○ ×末端 平滑末端 3’-A末端正確性(vs. Taq) 52倍 -長鎖の増幅 ○ 最長37 kb -Fast プロトコル ○ ×

1 kb35 min

2 hr2 hr

8 kb1.5 hr

9.5 hr5.5 hr

15 kb2 hr 20 min

16.5 hr(Failed amplification)

Total protocol time

Tem

plat

e le

ngth

iProof high-fidelity polymeraseCommon high-fidelity polymeraseTaq polymerase

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24 Amplification:Reagents and Plastics

Ordering Informationカタログ番号 品名 保存温度 価格1708870 iTaq DNA ポリメラーゼ 250Unit

構成内容:iTaq DNAポリメラーゼ(50 µl, 5units/µl)、10×iTaqバッファー(1.25 ml)、MgCl2溶液(1.25 ml, 50 mM)

-20℃ ¥27,000

1708870B04 iTaq DNA ポリメラーゼ 1000Unit -20℃ ¥92,0001708870B12 iTaq DNA ポリメラーゼ 3000Unit -20℃ ¥239,0001708872 MgCl2溶液 50 mM 1.25 ml -20℃ ¥4,0001708874 dNTP Mix 200 µl

構成内容:10 mM各dNTP(dATP, dCTP, dGTP, dTTP)-20℃ ¥17,000

iTaq DNAポリメラーゼは幅広いターゲットにおいて、化学的に修飾したホットスタートDNAポリメラーゼをしのぐパフォーマンスを発揮300bp~4kbのヒトゲノムDNA断片を両ポリメラーゼで増幅した。レーンM:EZ Load™ 500bp Molecular Ruler

M iTaq

Supp

lier A

iTaq

iTaq

iTaq

iTaq

Supp

lier A

Supp

lier A

Supp

lier A

Supp

lier A

4.0

2.0

1.0

0.5

0.3

PC

R p

rodu

ct s

ize,

kb

iTaq DNAポリメラーゼは抗体を用いたホットスタートDNAポリメラーゼです。95℃で3分間のインキュベーションで活性化されます。感度と特異性に優れています。

・ 非抗体ベースのホットスタートDNAポリメラーゼに比べて産物の収量がアップ・ 幅広いターゲットの増幅に対応・ 室温での簡便な反応調製を実現

iTaq™ DNAポリメラーゼ

ホットスタートタイプのスタンダードDNAポリメラーゼ

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25

PCR PLASTIC CONSUMABLES

Amplification:Reagents and Plastics

種別 品名(カタログ番号) 品名(カタログ番号) 品名(カタログ番号)

プレート/シール&キャップ チューブ/キャップ

品名(カタログ番号)機器

T100 THERMAL CYCLER 96well Hard-Shell プレートセミスカート(標準高)/Clear well (HSS9601など)

96well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/Clear well (HSP9601など)

96well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/White well (HSP9655など)

0.2 ml low8連チューブ/ホワイト(TLS0851)

0.2 ml Optical 8連フラットキャップ (TCS0803)

0.2 ml thin-wallチューブ/ドームキャップ付き(TWI0201)

0.2 ml 8連ドームキャップ (TCS0801)

384well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/White well (HSP3805など)

qPCR

PCR

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

0.2 ml Optical 8連フラットキャップ(TCS0803)

種別 品名(カタログ番号) 品名(カタログ番号) 品名(カタログ番号)

プレート/シール&キャップ チューブ/キャップ

品名(カタログ番号)機器

CFX 96 Touch, CFX 96 Touch Deep Well, CFX Connect

CFX 384 Touch

C1000 Touch / S1000(96well, 96well Deep well, 2x48well)

C1000 Touch / S1000 (384well)

T100 THERMAL CYCLER 96well Hard-Shell プレートセミスカート(標準高)/Clear well (HSS9601など)

96well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/Clear well (HSP9601など)

96well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/White well (HSP9655など)

0.2ml low8連チューブ/ホワイト(TLS0851)

0.2ml Optical 8連フラットキャップ (TCS0803)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

0.2ml Optical 8連フラットキャップ(TCS0803)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

0.2ml low8連チューブ/ナチュラル(TLS0801)

0.2ml 8連ドームキャップ(TCS0801)

0.2ml 8連ドームキャップ (TCS0801)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

0.2ml 8連ドームキャップ (TCS0801)

0.2ml thin-wall 8連チューブ/ナチュラル(TBS0201)

0.2ml thin-wallチューブ/ドームキャップ付き(TWI0201)

0.2ml thin-wallチューブ/ドームキャップ付き (TWI0201)

0.2ml 8連ドームキャップ (TCS0801)

384well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/White well (HSP3805など)

384well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/Clear well (HSP3801など)

qPCR

PCR

0.2 ml thin-wallチューブ/ドームキャップ付き (TWI0201)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

0.2 ml 8連ドームキャップ (TCS0801)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

Microseal 'B' シーリングフィルム(MSB1001)

0.2 ml 8連ドームキャップ (TCS0801)

CFX Opus 384, CFX 384 Touch

0.2 ml low8連チューブ/ナチュラル(TLS0801)

0.2 ml 8連ドームキャップ(TCS0801)

C1000 Touch / S1000 (384well)

384well Hard-Shell プレート(Low Pofile)/Clear well (HSP3801など)

0.2 ml thin-wall 8連チューブ/ナチュラル(TBS0201)

C1000 Touch / S1000(96well, 96well Deep well, 2x48well)

CFX Opus 96, CFX 96 Touch, CFX 96 Touch Deep Well, CFX Connect

山路を登りながら

推奨組合せ(機器/チューブ・プレート/キャップ・シール)

バイオ・ラッドでは、サーマルサイクラーやリアルタイムPCRシステム用の消耗品をご用意しています。すべての製品の製造、検査、包装はClass 100,000もしくは10,000クリーンルームにて行っており、DNase-Free、RNase-Free、さらにヒトDNAフリーがテスト済みです。

PCR/リアルタイムPCR消耗品

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

PCR/リアルタイムPCR消耗品

*すべてのプレートのシールには、ヒートシールも利用可能です。アプリケーションに応じて選択してください(P.36参照)

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26 Amplification:Reagents and Plastics

PCR、リアルタイムPCR用チューブ、プレート、シール適合表Tubes Plates

チューブ・プレート種類 チューブ ストリップチューブ プレート

ウェル数 1 1 8 8 8 12 12 48 48 96 96 96 96 96 384カタログ番号

TBI0501TBI0201TFI0201TWI0201

TLS08xx TBS02xx TBC0802 TBS1201 TBC1202 MLL48xx MLP48xx MLL96xx MLP96xx HSS9xxx HSP9xxx HSL9xxx HSP3xxx

製品名 0.5 ml シングルPCRチューブ

0.2 ml シングルPCRチューブ

0.2 ml Low 8連チューブ

0.2 ml thin-wall 8連チューブ

0.2 ml thin-wall 8連チューブ&キャップセット

0.2 ml thin-wall 12連チューブ

0.2 ml thin-wall 12連チューブ&キャップセット

Microplate 48well PCRプレート(Low-

Profile)

Microplate 48well PCRプレート(Full-

Height)

Microplate 96well PCRプレート(Low-

Profile)

Microplate 96well PCRプレート(Full-

Height)

96wellHard-Shell セミスカート

96wellHard-Shell マイクロプレート

96wellHard-Shell セミスカート

384wellHard-Shell マイクロプレート

高さ(Full-Height/Low-Profile)

Full Full Low Full Full Full Full Low Full Low Full Full Low Low

スカート種類 スカート無し スカート無し スカート無し スカート無し セミスカート スカート付 セミスカート スカート付切り離し可能 ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Hard Shell ✓ ✓ ✓ ✓PCR可能volume 10-200 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 1-30 µl

最大ウェル volume 600 µl 300 µl 200 µl 250 µl 250 µl 250 µl 250 µl 200 µl 330 µl 200 µl 330 µl 330 µl 250 µl 50 µl

ウェルカラー 透明 透明 白色、透明 透明 透明 透明 透明 白色、透明 透明 白色、透明 透明 白色、透明 白色、黒色、透明 白色、透明 白色、黒色、透明適合シール・キャップ

ドームキャップ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓フラットキャップ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'A' シーリングフィルム ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'B' シーリングフィルム ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'C' シーリングフィルム ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'F' ホイル ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓

適合機種(Thermal Cycler)

Bio-Rad® C1000™, C1000 Touch™, S1000™ ▲* ▲ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ▲ ✓

Bio-Rad® T100™ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ▲ ▲ ✓Bio-Rad® DNA Engine®, DNA Engine Tetrad®, DNA Engine Tetrad2, DNA Engine Dyad®, Dyad Disciple™, PTC-100®

▲* ✓ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ✓

Bio-Rad® iCycler, MyCycler ▲* ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Except MyCycler

Bio-Rad® MJ Mini™ ✓ ▲ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ▲ ✓ ▲Applied Biosystems 0.2 ml Tube Cyclers (2720, 9700, Veriti) ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ▲ ▲ ✓

Applied Biosystems 0.1 ml Tube Cyclers (9800 Fast, Veriti Fast) ✓ ✓ ✓ ✓

384-well Cyclers (9700, Veriti) ✓Eppendorf Mastercycler series ▲ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ▲ ✓

適合機種(Real-time PCR system)

Bio-Rad® CFX96, CFX96 Touch™, CFX Connect™, CFX Opus 96 ✓ ▲ ▲ ✓ ▲

Bio-Rad® CFX384™, CFX384 Touch™, CFX Opus 384 ✓

Bio-Rad® CFX96 Touch Deep Well ✓ ▲ ✓Bio-Rad® iCycler iQ®, iQ™5, MyiQ™, MyiQ™2 ✓ ✓ ✓ ✓ ▲ ▲ ▲

Bio-Rad® Chromo4™ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓Bio-Rad® DNA Engine®, DNA Engine Opticon®, Opticon 2, MiniOpticon™ *

✓ ▲ ▲✓

Except MiniOpticon

Applied Biosystems Standard Systems (7300, 7500, 7900HT, QuantStudio system, ViiA 7)

✓ ✓ ✓ ✓▲

Except 7900HT, QuantStudio

✓ ✓

Applied Biosystems Fast Systems (7500 Fast, 7900HT Fast, StepOne, StepOnePlus, QuantStudio system, Viia 7 Fast)

✓▲

Except 7900HT Fast

✓Except StepOne,

StepOnePlus, 7900HT Fast

Eppendorf Mastercycler ep realplex ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓

適合機種(other instrument)

Applied Biosystems DNA Sequencers (3100, 3700, 3730)

▲ ▲ ✓ ✓

✓…推奨   ▲…適合

* Mini Optionは、白色チューブ、プレートを使ってキャリブレーションを行っています。最良の結果のために白色のチューブ、プレートの使用を推奨しています。

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27

PCR PLASTIC CONSUMABLES

Amplification:Reagents and Plastics

PCR、リアルタイムPCR用チューブ、プレート、シール適合表Tubes Plates

チューブ・プレート種類 チューブ ストリップチューブ プレート

ウェル数 1 1 8 8 8 12 12 48 48 96 96 96 96 96 384カタログ番号

TBI0501TBI0201TFI0201TWI0201

TLS08xx TBS02xx TBC0802 TBS1201 TBC1202 MLL48xx MLP48xx MLL96xx MLP96xx HSS9xxx HSP9xxx HSL9xxx HSP3xxx

製品名 0.5 ml シングルPCRチューブ

0.2 ml シングルPCRチューブ

0.2 ml Low 8連チューブ

0.2 ml thin-wall 8連チューブ

0.2 ml thin-wall 8連チューブ&キャップセット

0.2 ml thin-wall 12連チューブ

0.2 ml thin-wall 12連チューブ&キャップセット

Microplate 48well PCRプレート(Low-

Profile)

Microplate 48well PCRプレート(Full-

Height)

Microplate 96well PCRプレート(Low-

Profile)

Microplate 96well PCRプレート(Full-

Height)

96wellHard-Shell セミスカート

96wellHard-Shell マイクロプレート

96wellHard-Shell セミスカート

384wellHard-Shell マイクロプレート

高さ(Full-Height/Low-Profile)

Full Full Low Full Full Full Full Low Full Low Full Full Low Low

スカート種類 スカート無し スカート無し スカート無し スカート無し セミスカート スカート付 セミスカート スカート付切り離し可能 ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Hard Shell ✓ ✓ ✓ ✓PCR可能volume 10-200 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 5-125 µl 1-30 µl

最大ウェル volume 600 µl 300 µl 200 µl 250 µl 250 µl 250 µl 250 µl 200 µl 330 µl 200 µl 330 µl 330 µl 250 µl 50 µl

ウェルカラー 透明 透明 白色、透明 透明 透明 透明 透明 白色、透明 透明 白色、透明 透明 白色、透明 白色、黒色、透明 白色、透明 白色、黒色、透明適合シール・キャップ

ドームキャップ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓フラットキャップ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'A' シーリングフィルム ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'B' シーリングフィルム ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'C' シーリングフィルム ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Microseal 'F' ホイル ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓

適合機種(Thermal Cycler)

Bio-Rad® C1000™, C1000 Touch™, S1000™ ▲* ▲ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ▲ ✓

Bio-Rad® T100™ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ▲ ▲ ✓Bio-Rad® DNA Engine®, DNA Engine Tetrad®, DNA Engine Tetrad2, DNA Engine Dyad®, Dyad Disciple™, PTC-100®

▲* ✓ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ✓

Bio-Rad® iCycler, MyCycler ▲* ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ✓Except MyCycler

Bio-Rad® MJ Mini™ ✓ ▲ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ▲ ✓ ▲Applied Biosystems 0.2 ml Tube Cyclers (2720, 9700, Veriti) ✓ ✓ ✓ ✓ ✓ ▲ ▲ ✓

Applied Biosystems 0.1 ml Tube Cyclers (9800 Fast, Veriti Fast) ✓ ✓ ✓ ✓

384-well Cyclers (9700, Veriti) ✓Eppendorf Mastercycler series ▲ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓ ▲ ✓

適合機種(Real-time PCR system)

Bio-Rad® CFX96, CFX96 Touch™, CFX Connect™, CFX Opus 96 ✓ ▲ ▲ ✓ ▲

Bio-Rad® CFX384™, CFX384 Touch™, CFX Opus 384 ✓

Bio-Rad® CFX96 Touch Deep Well ✓ ▲ ✓Bio-Rad® iCycler iQ®, iQ™5, MyiQ™, MyiQ™2 ✓ ✓ ✓ ✓ ▲ ▲ ▲

Bio-Rad® Chromo4™ ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓Bio-Rad® DNA Engine®, DNA Engine Opticon®, Opticon 2, MiniOpticon™ *

✓ ▲ ▲✓

Except MiniOpticon

Applied Biosystems Standard Systems (7300, 7500, 7900HT, QuantStudio system, ViiA 7)

✓ ✓ ✓ ✓▲

Except 7900HT, QuantStudio

✓ ✓

Applied Biosystems Fast Systems (7500 Fast, 7900HT Fast, StepOne, StepOnePlus, QuantStudio system, Viia 7 Fast)

✓▲

Except 7900HT Fast

✓Except StepOne,

StepOnePlus, 7900HT Fast

Eppendorf Mastercycler ep realplex ✓ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ✓

適合機種(other instrument)

Applied Biosystems DNA Sequencers (3100, 3700, 3730)

▲ ▲ ✓ ✓

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28 Amplification:Reagents and Plastics

Low Profile Full Height

蒸蒸発発発少少少少

蒸蒸発発発多多多多

Low Profile は PCR溶液の蒸発量が少なくて済む

Low Profile は PCR中の濃度変化が起きにくい

特に少容量のリアルタイムPCRで、データがばらつきにくい

Low Profileチューブ、プレートの利点

Hard-Shellプレート、スカート付きプレートの利点

チューブサイズによる違い

ウェル周辺部での温度均一性が高い ウェル間の温度均一性が高い

Hard-Shell プレート (Low Profile)を使うことで、少量の反応液でも、安定したリアルタイムPCRの結果が得られます

スカート付きプレート スカート無しプレート

外気の影響を受けない 外気の影響を受ける

ウェル周辺部での温度均一性が高い ウェル間の温度均一性が高い

Hard-Shell プレート スカート無しプレート

Lidに接しない部分でサンプルが蒸発

↑ブロックから浮き出て熱伝導が不十分

変形が起きにくい 特にウェル側面が変形しやすい

データがばらつきにくい

↓ ↓

Low Profile Full Height(Standard)

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29

PCR PLASTIC CONSUMABLES

Amplification:Reagents and Plastics

96well Hard-Shell® マイクロプレート(Low-Profile)(HSP)

96wellのHSPは、 Hard shellスカート及びthin wallのlow profileウェルにより構成されています。Hard shellのスカート部分は温度均一性の向上に、Low Profileのウェルは少容量のサンプルでもばらつきの無い増幅に寄与します。Shellの色は6種類あり、サンプルや実験者の識別に便利です。

・ より正確なPCR/リアルタイムPCRが可能(P.28参照)強固なスカートがプレートの変形及び外気の影響を防ぐことで、ウェル間の温度均一性が増すため、全てのウェルで均一なデータを取得することができます。

・ 少容量PCR(P.28参照)Low Profileのため、少容量でもばらつきのない増幅を実現します。

・ 使いやすい形状・色スカート付きなので、チューブスタンドやプレートホルダー無しで分注を行うことができます。また、プレートが色分けされているため、サンプルや実験者の識別を容易に行うことができます。

・ 白色ウェルはリアルタイムPCRに適します白色ウェルは透明ウェルよりも蛍光強度を強く検出でき、かつブロックにおける蛍光物質のコンタミの影響を受けないため、リアルタイムPCRにおいて高感度のデータを取得することができます。

・ 形状が安定しておりオートメーションに適します熱によるゆがみが少なく、分注ロボット、ワークステーションによるオートメーション化に適します。バーコード付きプレートもご用意しています。

Hard-Shell®スカートとデッキが熱による反りや縮みを防ぎます

良好な熱伝導とサンプルリカバリーを実現するThin-wallポリプロピレン製Vウェル

盛り上がったウェルの縁がシーリング効果を高めます

Enhanced Real-Time PCR Sensitivity

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

0

Rel

ativ

e si

gnal

str

engt

h

Clear White Black

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格

96well Hard-Shellプレート/Clear well (Low Profile)HSP9601 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/white shell(50枚) ¥39,000HSP9611 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Red shell(50枚) ¥39,000HSP9621 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Yellow shell(50枚) ¥39,000HSP9631 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Blue shell(50枚) ¥39,000HSP9641 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Green shell(50枚) ¥39,000HSP9661 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Black shell(50枚) ¥39,00096well Hard-Shellプレート/White well (Low Profile)~リアルタイムPCR用HSP9655 96well Hard-Shell マイクロプレート White well/white shell(50枚) ¥39,000HSP9635 96well Hard-Shell マイクロプレート White well/Blue shell(50枚) ¥39,000HSP9645 96well Hard-Shell マイクロプレート White well/Green shell(50枚) ¥39,000HSP9665 96well Hard-Shell マイクロプレート White well/Black shell(50枚) ¥39,00096well Hard-Shellプレート/Black well (Low Profile)HSP9666 96well Hard-Shell マイクロプレート Black well/Black shell(50枚) ¥39,00096well Hard-Shell プレート/バーコード付き (Low Profile)HSP9901 96well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/white shell barcode (50枚) ¥42,000HSP9955 96well Hard-Shell マイクロプレート White well/white shell barcode (50枚) ¥44,000

White wellを使うことで、リアルタイムPCRの感度を上げることができます。また、バーコード付きのプレートもご用意しており、オートメーション用としてもご利用可能です。

Hard-Shell プレート(96well スカート付き)Shell Color Clear well White well

White HSP9601 HSP9655

Red HSP9611

Yellow HSP9621

Blue HSP9631 HSP9635

Green HSP9641 HSP9645

Black HSP9661 HSP9665White, バーコード付き(RowH, and Column 12) HSP9901 HSP9955

PCRプレート、ストリップチューブ、シングルチューブCFXシリーズ推奨製品 形状安定の高剛性ハードシェルプレート フルスカート・Low-Profileタイプ

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30 Amplification:Reagents and Plastics

384wellのHSPは、 Hard shellスカート及びthin wallのウェルにより構成されています。Hard shellのスカート部分は温度均一性の向上に寄与します。Shellの色は6種類あり、サンプルや実験者の識別に便利です。ANSI/SBS規格に対応しています。

・ より正確なPCR/リアルタイムPCRが可能(P.28参照)強固なスカートがプレートの変形及び外気の影響を防ぐことで、ウェル間の温度均一性が増すため、全てのウェルで均一なデータを取得することができます。

・ 使いやすい形状・色スカート付きなので、チューブスタンドやプレートホルダー無しで分注を行うことができます。また、プレートが色分けされているため、サンプルや実験者の識別を容易に行うことができます。

・ 白色ウェルはリアルタイムPCRに適します白色ウェルは透明ウェルよりも蛍光強度を強く検出でき、かつブロックにおける蛍光物質のコンタミの影響を受けないため、リアルタイムPCRにおいて高感度のデータを取得することができます。

・ 形状が安定しておりオートメーションに適します熱によるゆがみが少なく、分注ロボット、ワークステーションによるオートメーション化に適します。バーコード付きプレートもご用意しています。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格384well Hard-Shellプレート/Clear well (Low Profile)HSP3801 384well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Clear shell(50枚) ¥46,000HSP3811 384well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Red shell(50枚) ¥46,000HSP3821 384well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Yellow shell(50枚) ¥44,000HSP3831 384well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Blue shell(50枚) ¥44,000HSP3841 384well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Green shell(50枚) ¥44,000384well Hard-Shellプレート/white well (Low Profile)~リアルタイムPCR用HSP3805 384well Hard-Shell マイクロプレート White well/Clear shell(50枚) ¥49,000HSP3865 384well Hard-Shell マイクロプレート White well/Black shell(50枚) ¥44,000384well Hard-Shellプレート/white well (Low Profile)HSP3866 384well Hard-Shell マイクロプレート Black well/Black shell(50枚) ¥49,000384well Hard-Shell プレート/バーコード付き(Low Profile)HSP3901 384well Hard-Shell マイクロプレート Clear well/Clear shell barcode (50枚) ¥49,000HSP3905 384well Hard-Shell マイクロプレート White well/Clear shell barcode (50枚) ¥51,000プレート用シールMSB1001 Microseal 'B' シーリングフィルム(100枚) ¥31,000MSB1001B05 Microseal 'B' シーリングフィルム(500枚) ¥124,000

Hard-Shell プレート(384well)Shell Color Clear well White well

Clear HSP3801 HSP3805

Red HSP3811

Yellow HSP3821

Blue HSP3831

Green HSP3841

Black HSP3865Clear バーコード付き(RowP, and Column 24) HSP3901 HSP3905

384well Hard-Shell® マイクロプレート (HSP)

CFXシリーズ推奨製品 形状安定の高剛性ハードシェルプレート フルスカート・384wellタイプ

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31

PCR PLASTIC CONSUMABLES

Amplification:Reagents and Plastics

96well Hard-Shellのセミスカート付きは、プレートの歪みが少なく、またthin wall構造で温度均一性に優れています。標準高のタイプと、Low-Profile仕様の2種類があります。多くのPCR/リアルタイムPCRと適合します。オートメーション用にバーコード付きのプレートもご用意しています。

QX100/QX200およびAutoDG Droplet Digital PCRシステムのワークフロー用にデザインされたバリデーション済み96well セミスカートプレート。PCRの増幅効率、ドロップレットの安定性等全ての面において安定したパフォーマンスを約束します。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格96well Hard-Shellプレート セミスカート(Full-Height)HSS9601 96well Hard-Shell セミスカート Clear well/Clear shell 25枚 ¥17,000HSS9641 96well Hard-Shell セミスカート Clear well/Green shell 25枚 ¥17,000HSS9665 96well Hard-Shell セミスカート White well/Black shell 25枚 ¥19,000HSS9901 96well Hard-Shell セミスカート Clear well/Clear shell with Barcode 25枚 ¥19,00096well Hard-Shellプレート セミスカート(Low-Profile)HSL9601 96well Hard-Shell LowProfile Clear well/Clear shell 25枚 ¥17,000HSL9641 96well Hard-Shell LowProfile Clear well/Green shell 25枚 ¥17,000HSL9605 96well Hard-Shell LowProfile White well/Clear shell 25枚 ¥17,000HSL9645 96well Hard-Shell LowProfile White well/Green shell 25枚 ¥17,000HSL9901 96w Hard-Shell LowProfile Clear well/Clear shell w/barcode 25枚 ¥19,000HSL9905 96w Hard-Shell LowProfile Whtie well/Clear shell w/barcode 25枚 ¥19,000

Ordering Informationカタログ番号 品名 梱包 価格12001925 ddPCR Plates 96well セミスカート Clear well/Clear shell 25枚 ¥16,400

Hard-Shell プレート(96well、Full-Height、セミスカート)

Shell Color Clear well White well

Clear HSS9601

Green HSS9641

Black HSS9665

Clear, バーコード付き HSS9901

Hard-Shell プレート(96well、Low-Profile、セミスカート)

Shell Color Clear well White well

Clear HSL9601 HSL9605

Green HSL9641 HSL9645

Clear, バーコード付き HSL9901 HSL9905

Hard-Shell セミスカート(Full-Height ; HSS, Low-Profile ; HSL)

ddPCR™ Plates 96well  セミスカート(clear well/clear shell)

形状安定の高剛性ハードシェルプレート セミスカートタイプ

Droplet digital PCRワークフロー用にデザインされた96wellプレート

HSL9645, Low-Profile, White well

HSS9641, Full-Height, Clear well

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32 Amplification:Reagents and Plastics

96ウェル、および48ウェルのMultiplateは、スカートがなくプレートを切って使用することも可能です。ホワイトウェルはリアルタイムPCR装置での使用に適しています。

MLL9601Low-Profile, ナチュラル(96 well)

MLP9601Full-Height, ナチュラル(96 well)

MLL4851Low-Profile, ホワイト(48 well)

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格MLL9601 96well Low Multiplate(Low-Profile)/ナチュラル 25枚 ¥21,000MLL9601B05 96well Low Multiplate(Low-Profile)/ナチュラル 25枚×5セット ¥87,000MLL9651 96well Low Multiplate(Low-Profile)/ホワイト 25枚 ¥21,000MLL9651B05 96well Low Multiplate(Low-Profile)/ホワイト 25枚×5セット ¥87,000MLP9601 96well Multiplate(Full-Height)/ナチュラル 25枚 ¥19,000MLP9601B05 96well Multiplate(Full-Height)/ナチュラル 25枚×5セット ¥76,000MLL4801 48well Low Multiplate(Low-Profile)/ ナチュラル 50枚 ¥32,000MLL4851 48well Low Multiplate(Low-Profile)/ホワイト 50枚 ¥32,000MLP4801 48well Multiplate(Full-Height)/ナチュラル 50枚 ¥31,000

Multiplate(Full-Height ; MLP, Low-Profile ; MLL)

切って使える、手軽なスカートレスプレート

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33

PCR PLASTIC CONSUMABLES

Amplification:Reagents and Plastics

標準高(Full-Height)PCRチューブは、サーマルサイクリング中に、 キャップが開かないようにダブルロッキング方式になっています。PCR反応溶液量は、0.2 mlのチューブが5–125 µl、0.5 mlチューブが10–200 µlです。0.2 ml、0.5 mlチューブはラベル等が可能なフラットキャップになっています。(リアルタイムPCRには使用できません)複数ユーザーによる偶然の汚染を防止するために、キャップ付0.5 mlチューブは、100本単位でシール可能なビニール袋に入っています。

Low Profileストリップチューブは、少容量のPCRを可能にします(P.28参照)。白色ウェルのストリップチューブは透明ウェルのストリップチューブよりも蛍光強度を強く検出でき、かつブロックにおける蛍光物質の汚染の影響を受けないため、リアルタイムPCRにおいて高感度のデータを取得することができます。Low Profileストリップチューブは、8連ストリップでご用意しています。Full-Heightストリップチューブは、8連または12連ストリップでご用意しています。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格0.2 ml チューブ キャップ付TFI0201 0.2 ml thin-wallチューブ/ナチュラル フラットキャップ付 1,000個 ¥9,000TWI0201 0.2 ml thin-wallチューブ/ナチュラル ドームキャップ付 1,000個 ¥9,000TWI0201B05 0.2 ml thin-wallチューブ/ナチュラル ドームキャップ付 5,000個 ¥36,0000.2 ml チューブ キャップ無しTBI0201 0.2 ml thin-wallシングルチューブ/ナチュラル 1,000個 ¥12,0000.5 ml チューブ キャップ付TBI0501 0.5 ml thin-wallシングルチューブ/ナチュラル キャップ付 1,000個 ¥8,000

TWI0201

TBI0501

TFI0201

TBI0201

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格Low Profile 8連ストリップチューブ キャップ無しTLS0801 0.2 ml low 8連チューブ/ナチュラル 120個 ¥16,000TLS0851 0.2 ml low 8連チューブ/ホワイト 120個 ¥18,000TLS0851B05 0.2 ml low 8連チューブ/ホワイト 120個×5セット ¥72,000Full-Height ストリップチューブ キャップ無しTBS0201 0.2 ml thin-wall 8連チューブ/ナチュラル 125個 ¥12,000TBS0201B05 0.2 ml thin-wall 8連チューブ/ナチュラル 125個×5セット ¥48,000TBS1201 0.2 ml thin-wall 12連チューブ/ナチュラル 100個 ¥17,000Full-Height 0.2mlポリプロピレンストリップチューブ ドームキャップ付きTBC0802 0.2 ml 8連チューブ&ドームキャップセット/ナチュラル 240セット ¥24,000TBC1202 0.2 ml 12連チューブ&ドームキャップセット/ナチュラル 160セット ¥23,000フラットキャップ(リアルタイムPCR用)TCS0803 0.2 ml Optical 8連フラットキャップ 120個 ¥8,000TCS0803B05 0.2 ml Optical 8連フラットキャップ 120個×5セット ¥32,000ドームキャップ(PCR用)TCS0801 0.2 ml 8連ドームキャップ/ナチュラル 130個 ¥7,000TCS0801B05 0.2 ml 8連ドームキャップ/ナチュラル 130個×5セット ¥28,000TCS1201 0.2 ml 12連ドームキャップ/ナチュラル 200個 ¥15,000

0.2 ml、0.5 ml シングルPCRチューブ(Full-Height)

0.2 ml PCRストリップチューブ・キャップ

PCR/リアルタイムPCR用の便利な8連チューブとキャップ

密閉性に優れたシングルPCRチューブ

TCS0803, 0.2 ml Optical 8連フラットキャップ

TCS0801, 0.2 ml 8連ドームキャップTCS1201, 0.2 ml 12連ドームキャップ

TLS0801, 0.2 ml low 8連チューブ TBS0201, 0.2 ml thin-wall 8連チューブTBS1201, 0.2 ml thin-wall 12連チューブ

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34 Amplification:Reagents and Plastics

Microseal® 'A'シーリングフィルムMicroseal 'A' シールは、簡便かつ効果的に、ほとんどのバイオ・ラッドのPCRプレートを密閉します。フィルム内部層は、サーマルサイクリングの間、プレートを密閉し、エアロゾル形成やサンプルの相互汚染を防止します。このフィルムは、96well全てを使用しない場合にはサイズに応じて簡単に切ってご使用いただけます。ピールオフ式保護層付フィルムは、シール表面の汚染から保護します。オプションのシーリングローラーを使用すると全てのウェル上にしっかりとMicroseal 'A' フィルムを素早くシールすることができます(リアルタイムPCRには使用できません)。

Microseal® 'B' シーリングフィルム(Optically Clear)Microseal 'B' シールは、接着剤ベースのシールオプションです。Bシールの強力な接着材層は、PCR中に確実にサンプルを保存します(–40℃から 110℃まで)。この透明なポリエステルフィルムは、リアルタイムPCRのような光学測定時に効果的に光を透過します。密封面は、ピールオフ式保護層によって汚染から保護されています。シール両端は点線が入れられ、オートメーションのために簡単に両端の余ったタブを外すことができます。

リアルタイムPCR用コンプレッションパッド(96well)リアルタイムPCRでご使用時に、Microseal 'B' シール上に乗せることで、DNA Engine Opticon 2やChromo4システムで、96wellプレートのシーリングを強化します。

Microseal® 'F' ホイルアルミニウム処理されたホイル・シールは–70℃から105℃までサンプルを蒸発から守ります。ピペットの先で穴を空け、個々のウェルからサンプル回収することができます。またオートメーションシステムでの使用に適しています。冷蔵アプリケーションに加えて、サンプル容量が25 µl(96well)もしくは5 µl(384well)以上でPCRにご使用いただくことも可能です。

Microseal® 'C' シーリングフィルムMicroseal 'C' シーリングフィルムは、リアルタイムPCR等の光学分析用にデザインされた接着系のシールです。384well Hard-Shell 480 PCRプレートに適しています。

Microseal 'A' Film Sealing Roller

Optical Compression Pad

Microseal 'F' Foil

Microseal 'C' Optical Seal

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格MSA5001 Microseal 'A'シーリングフィルム 50枚 ¥21,000MSR0001 シーリングローラー/Microseal 'A' 'B' 'C'フィルム用 ¥6,000MSB1001 Microseal 'B'シーリングフィルム 100枚 ¥31,000MSB1001B05 Microseal 'B'シーリングフィルム 100枚×5セット ¥124,000ADR3296B05 リアルタイムPCR用コンプレッションパッド ¥9,000MSF1001 Microseal 'F'ホイル 100枚 ¥19,000MSC1001 Microseal 'C' シーリングフィルム  100枚 ¥42,000

Microseal 'B' Adhesive Seals

PCRシール

For More Information Web: www.bio-rad.com/pcrseals

フィルム及びフィルム関連製品

各種用途に合わせた、PCR/リアルタイムPCR用フィルム・フォイル・パッド

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PCR PLASTIC CONSUMABLES

Amplification:Reagents and Plastics

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格TRC0501 96-Placeラック&カバー/5色アソート 5個 ¥8,000ECT1000 Easy Cap Tool ¥4,000ECT2000 Strip Cap Tool ¥9,000TRC9601 PCRチューブラック 10枚 ¥3,000

96-Place PCRラック&カバーチューブ、スカートなしPCRプレート、セミスカートPCRプレート用の5色のラックです。PCR溶液調製時や遠心分離するためにご利用いただけます。

PCRチューブラックPCRチューブラックは、PCRチューブ及び96ウェルチューブの安定したプラットフォームになります。PCR溶液調製時や遠心分離の際にご利用いただけます。また、PCRチューブを氷上で操作する際に有用です。ANSI/SBS規格に対応しています。

Easy Cap™ Toolシングルチューブまたはストリップチューブをキャップするとき、Easy Capツールはチューブ1本ずつ強固なシールをするのに必要な圧力を提供します。細い方の先でしっかりとドームキャップを0.2 mlチューブまたは96ウェルPCRプレートに固定します。反対の幅広の先端ではThin-wall 0.5 mlチューブにシールすることが可能です。サイドスロットは、エアロゾルを生み出すことなく、きついキャップを簡単に外すことができます。

Strip Cap Toolこのツールは、PCRプレートまたはストリップチューブに迅速かつ容易に8連、12連キャップをシールすることができます。片面はFlatキャップをシールするように平らになっており、反対側は溝があり、ドームキャップのシール用に設計されています。確実にキャップをするために、チューブやプレートをサーマルサイクラーのブロックもしくは96-Placeラックに置いた状態でキャップに封をしてください。

96-Place ラック&カバー

Easy Cap Tool

Strip Cap Tool

PCRチューブラック

キャップツールとラック

PCR/リアルタイムPCRのセットアップを助ける、ツールとラック

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36 Amplification:Reagents and Plastics

PX1 PCR Plate Sealerは、マイクロプレート全体に均一な熱と圧力を加えることによりPCRプレートをシールします。このセミオートのヒートシーラーは、手技による実験間のシーリングの誤差を排除すると共に、サンプル蒸発を最小限に防ぐことにより信頼性の高いデータを得ることに役立ちます。PX1 PCR Plate Sealerは、使いやすく直感的なタッチスクリーンをインターフェースとしています。シーリングのプロトコールは、タッチスクリーン上のボタンにタッチすることにより、簡便にシーリング温度と時間を変更することができます。

・ 素早いスタートアップタイム─ウォームアップのための時間が短いです。・ 直感的な操作─プロトコールの作成時間を節約します。・ プロトコールへの迅速なアクセス─保存されたプロトコールを使用することでプログラム時間を節約できます。・ コンパクトな設置面積─実験台の貴重なスペースを節約できます。・ 信頼の性能─お客様のデータに信頼性を提供します。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格PX1 PCR Plate Sealer1814000J1 PX1 PCR Plate Sealer ¥380,000ヒートシール1814030 リアルタイムPCR用Optically Clearヒートシール (100枚) ¥15,0001814035 ウォーターバス用ヒートシール (100枚) ¥15,0001814040 ddPCR用ホイルヒートシール (100枚) ¥14,0001814045 低温保存用ホイルヒートシール (100枚) ¥14,000

PX1™ PCR Plate Sealer、ヒートシール

プレートシーラー、ヒートシール

高い光透過率を持ち、リアルタイムPCRに適します。

Optically Clearヒートシール ウォーターバス用ヒートシール ddPCR用ホイルヒートシール 低温保存用ホイルヒートシール

強力な接着性によりウォーターバスサイクリング耐性。高い溶媒耐性。

穴あけ可能なホイルヒートシール。Droplet Digital PCRシステムでの使用に適合。

80℃のフリーザーまたは液体窒素中で保存できながら、簡単に剥がすことも可能。

確実なシーリングを可能とする、デジタル設定のセミオートプレートシーラー

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PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

Amplification:Reagents and Plastics

リアルタイムPCR用のプライマーやプローブの設計に時間をかけていませんか? 最新のデータを利用したPrimePCRプライマー&プローブなら、購入してすぐに実験が開始できます。

プライマー&プローブ

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

プライマー&プローブ

PrimePCRアッセイは、デザイン済み、バリデーション済みのReady-to-useアッセイです。アッセイは次世代シーケンサー(NGS)により増幅産物の遺伝子配列を確認しており、さらにHuman、Mouse、Rat においては、感度・特異性・増幅効率等が検証されたWet-Lab バリデーションアッセイをご用意しています。

PrimePCRアッセイ

プライマーはウェット検証済み*

(Human、Mouse、Rat)

■プライマーの性能を保証 ■最適化実験の手間を減らします ■リアルタイムPCR実験の信頼性担保のためのMIQEガイドラインに対応

*ddPCRはHumanのみ

疾患パネルやパスウェイパネルなどの幅広いラインアップ

■生物学的に関連性の高い遺伝子ターゲットを含むよう選定 ■プレデザインプレートを変更してカスタムプレートを作成可能 ■CFX Maestroソフトウェアとの完璧な連携

一連のリアルタイムPCR実験ソリューションを提供

■Aurum total RNA抽出キット ■ iScript cDNA合成キット ■リアルタイムPCR用 Supermix ■PCRプレート・チューブ ■リアルタイムPCR機器 ■CFX Maestroソフトウェア

■PrimePCRアッセイデザインの特長とバリデーションデザインの特長 有用性

可能な限りイントロンを挟んだ配列 cDNAのみを検出しゲノムDNAのコンタミネーションによる増幅を防ぎます

cDNAの二次構造を考慮 cDNAの二次構造形成による増幅効率の低下を防ぎます

遺伝子多型(SNPs)を含む配列を避けたデザイン SNPを含まない配列により、個人差、系統差による増幅効率の差が生じません

アッセイの特異性 非ターゲット配列からの非特異的増幅を回避する設計が施されています

幅広い転写産物を検出可能とするデザイン アイソフォーム、スプライシングバリアントを検出できるよう設計されています

Wet-Lab バリデーション 有用性

7-Pointの段階希釈 検証済みの増幅効率、ダイナミックレンジ、高いリニアリティー

ゲノムDNA増幅の検証 ゲノムDNAのコンタミネーション配列からの増幅リスクを検証

融解曲線分析 目的PCR産物の融解曲線を確認し、非特異的な増幅産物がないことを確認

次世代シーケンサーによる配列検証 次世代シーケンサー(NGS)を用いて、増幅産物の配列を確認

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38 Amplification:Reagents and Plastics

PrimePCR Primer & ProbePrimePCR プライマー&プローブは、デザイン済み、バリデーション済みのReady-to-useアッセイです。SYBR® Green、またはプローブアッセイから選べます。

・ デザイン済みプライマー&プローブ・ リアルタイムPCR & Droplet Digital PCR対応・ 性能はウェット検証済み(Human、Mouse、Ratアッセイ。ddPCRは

Humanのみ)・ 13種の生物種のアッセイをご用意(Human, Mouse, Rat, Arabidopsis,

Rice, Chicken, Cow,Dog, Pig, Rabbit, Rhesus Monkey, Yeast, Zebrafish)・ プローブアッセイはFAM, HEX, TEX 615, Cy5, Cy5.5から選択可能

PrimePCRアッセイには逆転写反応(cDNA合成)としてiScriptシリーズ(P.9参照)、リアルタイムPCR反応試薬としてSsoAdvanced Universal SYBR Green/Probes Supermix(P.14参照)の使用を推奨しています。

検証の手間なし、デザイン済み・バリデーション済みのリアルタイムPCR用プライマー&プローブ

■PrimePCRアッセイ(リアルタイムPCR用チューブフォーマット)

■ddPCR用 PrimePCRアッセイ

デザイン済みSYBR® Greenアッセイトランスクリプトームを広く網羅したSYBR® Green発現解析用アッセイ。サイズは200、1,000、2,500反応用の3種類をご用意しています。

デザイン済みプローブアッセイトランスクリプトームを広く網羅したプローブ発現解析用アッセイ。サイズは500、1,000、2,500反応用の3種類をご用意しています。

リファレンス遺伝子アッセイSYBR® Greenおよびプローブアッセイのノーマライズに必要なリファレンス遺伝子(ハウスキーピング遺伝子)用のプライマー・プローブセット。

PreAmpアッセイ希少なサンプルから実験を行うための、ターゲット特異的な前増幅専用プライマーセット。

DNAテンプレートリアルタイムPCRのポジティブコントロールとして利用できる、各遺伝子用にデザインされた合成DNAテンプレート。

コントロールアッセイ逆転写効率、ゲノムDNAコンタミネーション、RNA品質、PCRパフォーマンス確認用に用意されたコントロールアッセイ。

ddPCR アッセイddPCR アッセイ用の変異解析、CNV(コピー数多型)解析、遺伝子発現解析用プライマーおよびプローブセット。カスタムアッセイにて遺伝子配列や遺伝子名よりアッセイを設計することも可能。

PrimePCR Assay Validation ReportProducts used to generate validation data

Real-Time PCR Instrument CFX384 Real-Time PCR Detection System

Reverse Transcription Reagent iScript™ Advanced cDNA Synthesis Kit for RT-qPCR

Real-Time PCR Supermix SsoAdvanced™ SYBR® Green Supermix

Experimental Sample qPCR Human Reference Total RNA

Data InterpretationUnique Assay ID This is a unique identifier that can be used to identify the assay in the literature and

online.

Detected Coding Transcript(s) This is a list of the Ensembl transcript ID(s) that this assay will detect. Details fo reach transcript can be found on the Ensembl website at www.ense mbl.org.

Amplicon Context Sequence This is the amplicon sequence with additional base pairs added to the beginningand/or end of the sequence. This is in accordance with the min imum information forthe publication of real-time quantitative PCR experiments (MIQE ) guidelines. Fordetails, please refer to the following publication, "Primer Seq uence Disclosure: AClarification of the MIQE Guidelines" (Bustin et al 2011).

Chromosome Location This is the chromosomal location of the amplicon context sequen ce within thegenome.

Assay Design Exonic: Primers sit within the same exon in the mRNA transcript and can potentiallyco-amplify genomic DNA. If performing gene expression analysis , it is suggested thatthe samples be treated with a DNase to eliminate potential unwa nted signal fromcontaminating genomic DNA.

Exon-exon junction: One primer sits on an exon-exon junction i n mRNA. Whenperforming gene expression analysis, this design approach will prevent unwantedsignal from contaminating genomic DNA.

Intron-spanning: Primers sit within different exons while spann ing a large intron in themRNA (intron is greater than 750bp). When performing gene expr ession analysis,this design approach should limit potential unwanted signal fro m contaminatinggenomic DNA.

Small intron-spanning: Primers sit within different exons with a short intron inbetween (intron is smaller than 750bp). Small introns may not prevent unwantedsignal from contaminating genomic DNA.

Efficiency Assay efficiency was determined using a seven-point standard curve from 20 copiesto 20 million copies. While an efficiency of 100% represents a perfect doubling oftemplate at every cycle and is ideal, typical ranges of good assay efficiency arebetween 90-110%. For difficult targets, assay efficiency outside of this range areaccepted and reported accordingly.

R2 The R2 represents the linearity of the standard curve and how well th e standard curvedata points fit the linear regression line. Acceptable values are >0.98.

y ped d R In

sccri

R S

SSam

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inng

nteex

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n

PrimePCR Assay Validation ReportGene Information

Gene Name breast cancer 1, early onset

Gene Symbol BRCA1

Organism Human

Gene Summary This gene encodes a nuclear phosphoprotein that plays a role in maintaining genomicstability and it also acts as a tumor suppressor. The encoded protein combines withother tumor suppressors DNA damage sensors and signal transducers to form a largemulti-subunit protein complex known as the BRCA1-associated gen ome surveillancecomplex (BASC). This gene product associates with RNA polymerase II and throug hthe C-terminal domain also interacts with histone deacetylase c omplexes. This proteinthus plays a role in transcription DNA repair of double-strande d breaks andrecombination. Mutations in this gene are responsible for appro ximately 40% ofinherited breast cancers and more than 80% of inherited breast and ovarian cancers.Alternative splicing plays a role in modulating the subcellular localization andphysiological function of this gene. Many alternatively spliced transcript variants someof which are disease-associated mutations have been described for this gene but thefull-length natures of only some of these variants has been described. A relatedpseudogene which is also located on chromosome 17 has been iden tified.

Gene Aliases BRCAI, BRCC1, BROVCA1, IRIS, PNCA4, PSCP, RNF53

RefSeq Accession No. NC_000017.10, NG_005905.2, NT_010783.15

UniGene ID Hs.194143

Ensembl Gene ID ENSG00000012048

Entrez Gene ID 672

Assay InformationUnique Assay ID qHsaCID0020613

Assay Type SYBR® Green

Detected Coding Transcript(s) ENST00000357654#ENST00000471181#ENST00000493795#ENST00000461574#ENST00000412061#ENST00000354071#ENST00000346315#ENST00000309486

Amplicon Context Sequence TGGAAGGGTAGCTGTTAGAAGGCTGGCTCCCATGCTGTTCTAACACAGCTTCTAGTTCAGCCATTTCCTGCTGGAGCTTTATCAGGTTATGTTGCATGGTATCCCTCTGCTGAGTGGTTAAAATGTCACTCTGAGAGGATAGCCCTGAGCAGTCTTCAGAGACGCTTGTTTCACTCTCACACCCAGATGCTGCTTCACCTAAGTTTGAATCCATGCTTTGCTCTT

Amplicon Length (bp) 195

Chromosome Location 17:41234484-41243478

Assay Design Intron-spanning

Purification Desalted

Validation ResultsEfficiency (%) 98

y ptionon

breast cancer 1, early onset

BRCA1

Human

This gene encodes a nuclear phosphoprotein that plays a role in maintaining genomiciistability and it also acts as a tumor suppressor. The encoded protein combines withppother tumor suppressors DNA damage sensors and signal transducers to form a largemulti-subunit protein complex known as the BRCA1-associated gen ome surveillancecccomplex (BASC). This gene product associates with RNA polymerase II and througsas hthe C-terminal domain also interacts with histone deacetylase c omplexes. This proteinthus plays a role in transcription DNA repair of double-strande d breaks andnnrecombination. Mutations in this gene are responsible for appro ximately 40% ofinherited breast cancers and more than 80% of inherited breast and ovarian cancers.Alternative splicing plays a role in modulating the subcellular localization adnnphysiological function of this gene. Many alternatively spliced transcript variants someof which are disease-associated mutations have been described for this gene but thefull-length natures of only some of these variants has been described. A relatedeepseudogene which is also located on chromosome 17 has been iden tified.

BRCAI, BRCC1, BROVCA1, IRIS, PNCA4, PSCP, RNF53

onn Noo. NC_000017.10, NG_005905.2, NT_010783.15

Hs.194143

D ENSG00000012048

672

atiionD qHsaCID0020613

SYBR® Green

g TTrannsccript(s) ENST00000357654#ENST00000471181#ENST00000493795#ENST000004615745757NST00000412061#ENST00000354071#ENST00000346315#ENST00000309486

xtt Sequence TGGAAGGGTAGCTGTTAGAAGGCTGGCTCCCATGCTGTTCTAACACAGCTTCTAGTTCAGCCATTTCCTGCTGGAGCTTTATCAGGTTATGTTGCATGGTATCCCTCTGCTGAGTGGTTAAAATGTCACTCTGAGAGGATAGCCCTGAGCAGTCTTCAGAGACGCTTGTTTCACTCTCACACCCAGATGCTGCTTCACCTAAGTTTGAATCCATGCTTTGCTCTT

h (bp)) 195

ocatioon 17:41234484-41243478

Intron-spanning

Desalted

suults98

PrimePCR Assay Validation ReportBRCA1, HumanAmplification PlotAmplification of cDNA generated from 25 ng of universal referenc e RNA

Melt PeakMelt curve analysis of above amplification

Standard CurveStandard curve generated using 20 million copies of template di luted 10-fold to 20 copies

バリデーションデータシートはWebサイトよりダウンロードできます。

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PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

Amplification:Reagents and Plastics

・ 疾患、代謝、タンパク質、各種パスウェイ、lncRNAなど、目的に応じた幅広い発現解析パネルをご用意・ インタラクティブなパスウェイマップを利用して簡単に関連遺伝子の検索が可能・ CFX Maestroソフトウェアと組み合わせると、より簡単に各種統計解析が可能

lncRNAの逆転写反応(cDNA合成)およびプレアンプには、iScript Explorer One-Step RT and PreAmp Kit(P.18参照)、リアルタイムPCR反応にはSsoAdvanced Universal SYBR Green/Probes Supermix(P.14参照)をお勧めします。

9,000種以上をラインアップ、各種疾患やパスウェイのアッセイをパネルにしたアレイ

lncRNA検出のために最適化された23,000種以上のアッセイと20種類のプレデザインアレイ

■PrimePCRアレイ(リアルタイムPCR用プレートフォーマット)

PrimePCR アレイ(プレデザイン&カスタム)

lncRNA PrimePCR アッセイ&アレイ

デザイン済みPrimePCRアレイ9,000種以上の各種パネルをご用意しています。プレートにプライマーを分注済みのため、セットアップが簡単です。また、各社リアルタイムPCR装置に対応したプレートで提供可能です。(アレイのラインアップは40ページをご覧ください。)

カスタムアレイカスタムアレイは、96/384 wellフォーマットを選択でき、ターゲット遺伝子を自由に設定できます。デザイン済みアレイを元にしてカスタムアレイを作成することも可能です。

パスウェイパネル300以上の代表的なパスウェイに基づいて設計された、パスウェイ解析に特化したパネルです。ランキング上位のターゲット遺伝子の発現量変化からパスウェイ全体を解析できます。

疾患パネル米国国立医学図書館(NLM)のMeSHデータベースを参照してデザインされた、疾患研究用パネルです。論文で報告され、かつ発現差が病理学的にも意義のある遺伝子を選択しており、網羅的な解析が可能です。スクリーニングに適します。

コレクションパネル代表的な生物学的プロセスに関連したパスウェイ群からランキング上位の遺伝子を集めた、広域ターゲット探索用パネルです。より広く遺伝子を調べたい際に有用です。

約3万種近くあると言われるLong non-coding RNA (lncRNA) は、疾患への関与も多く報告されています。バイオ・ラッドは、ヒトlncRNA発現データベースから約23,000 種類のlncRNA に対するアッセイを開発しました。

lncRNA アッセイ& アレイ約23,000種のlncRNAアッセイおよび20種類のデザイン済みアレイをご用意しています。癌、細胞パスウェイ、免疫学に関連したlncRNAを網羅的に解析できます。mRNAとのカスタムアレイを作成することも可能です。PrimePCR lncRNA アッセイはddPCRとも互換性があります。

ACGATGCATGCCGC ACATAGCACATCTCG CCTGCAGCATGCTA CGCTAGATGTCACG

lncRNA アッセイデザインlncRNAは他の転写産物と重複したゲノム位置にあることが多く、アッセイデザインおよび検証が困難になります。バイオ・ラッドはトランスクリプトーム解析を専門とするBiogazelle社と提携してlncRNAアッセイを開発しました。

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PrimePCRアレイデザインの特長

遺伝子ターゲットの選択各デザイン済みアレイの遺伝子ターゲットは、トムソン・ロイター社のMetaCoreデータベースを元に、下記の項目を考慮して選択されています。・トランスクリプトーム研究における遺伝子発現変化の程度・生物学研究全般における注目度・その遺伝子に対する近年の科学者の興味の度合い

優れたアレイデザイン各アレイは、代表的なパスウェイ、疾患、生物学プロセスに関連する遺伝子が含まれるようデザインされています。パスウェイパネルでは、一回の実験で網羅的にパスウェイのデータを取得できるようデザインされています。SAB(Qiagen社)と同じ遺伝子を載せたアレイもご用意しています。

デザイン済みPCRプレート疾患パネルパスウェイパネルコレクションパネル

疾患、パスウェイパネル例

Disease

細菌感染と真菌症がん、腫瘍心肥大先天性および遺伝性疾患濾胞性線維症消化器疾患内分泌系疾患眼疾患女性泌尿生殖器疾患および妊娠合併症血液リンパ系疾患免疫系疾患男性泌尿生殖器疾患精神疾患筋骨格系疾患神経系疾患栄養代謝疾患耳鼻咽喉疾患寄生虫感染症病的状態と兆候気道感染症皮膚および結合組織疾患口顎疾患ウイルス性疾患創傷

Processes

アポトーシスと生存血液凝固細胞接着細胞周期走化性細胞骨格再構成発生

DNA損傷低酸素応答免疫応答筋収縮神経生理学酸化ストレスタンパク質分解再生転写翻訳輸送

Metabolism

アミノ酸代謝

炭水化物代謝

脂質代謝

核酸代謝

脂質代謝制御

代謝制御

ステロイド代謝

ビタミン、補酵素代謝

異物代謝

Protein Function

サイトカイン、ケモカイン

Gタンパク質

成長因子

ホルモン

リン酸化酵素

脱リン酸化酵素

セカンドメッセンジャー

転写因子

パスウェイマップ:タンパク質間の関連を示しています。緑の矢印はポジティブな効果を、赤色の矢印は、ネガティブな効果を示しています。タンパク質間の結合(B)、分解(C)、リン酸化(+P)、輸送(Tn)などの情報が略号で記載されています。

PrimePCRデザイン済みアレイは、研究対象毎に関連した遺伝子を網羅的に発現解析できるようデザインされています。約9,000種の幅広いラインアップをご用意しているため、手軽かつ低コストで解析を行うことが可能です。

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PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

Amplification:Reagents and Plastics

PrimePCR ご注文方法

PrimePCR製品のご注文には、「マイ バイオ・ラッド」にユーザー登録の上(初回のみ)、Webサイトから専用注文書である オーダーフォームの発行が必要です。下図の流れに沿って、❶ユーザー登録、❷製品の検索、❸オーダーフォームの発行を行い、オーダーフォームを添付の上、販売店様にご注文ください。

お 客 様

バイオ・ラッド 販 売 店 様

オーダーフォームは製品が届くまで必ずお手元に保管してください。

詳細はPrimePCRサイトにてご確認ください。

製造

オーダーフォームの確認

製品確認

オーダーフォームによる受注(カタログ番号のみでは受注できません)

ご注文内容をご確認ください

オーダーフォーム発行(価格はWeb上の価格表をご覧ください)

PrimePCR

オーダーフォームを 添付して見積・発注

オーダーフォームを添付して発注

❶ ❷

PrimePCRサイト(bio-rad.com/primepcr)にて製品検索

マイ バイオ・ラッドユーザー登録(初回のみ)

納品 納品

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42 Amplification:Reagents and Plastics

PrimePCR価格、ご注文について

【ご注文時の注意】ご注文の際には、メールで受け取ったウェブ参照番号が記載されたオーダーフォームを必ず添付してください。カタログ番号、製品名だけでは、製品の詳細を特定できません。オーダーフォームに記載のある数量で製造を行うため、オーダーフォームに記載以外の数量でのご注文等はできませんので、ご了承ください。

【再注文の方法】ご購入いただいた製品と同じ製品を再度ご注文いただく場合は、Webサイトから再度オーダーフォームを発行してください。チューブに記載のカタログ番号(Cat.#)や、前回作製したオーダーフォームを再度使用することはできません。バイオ・ラッドWebサイト(bio-rad.com)にログイン後、Webサイト右上の「マイ バイオ・ラッド」から「注文履歴」を参照することで、前回のオーダーフォームを元に新規オーダーフォームを発行することが可能です。

【納期】製品の製造状況、製品タイプ(チューブ・プレートタイプ)、カスタム品、オーダー数量等により納期は変動いたします。おおよその日数は下記をご参照ください。

qPCR Control、SYBR® Greenアッセイ 1~4週間 qPCR プローブアッセイ 2~4週間

qPCR 96/384 プレートアレイ(カスタム含む) 1~4週間 ddPCR アッセイ 2~7週間

【PrimePCR 参考価格】下記メニュー以外にも多くのメニューがございます。詳細はPrimePCRサイト(bio-rad.com/primepcr)をご覧ください。

製品種別 反応数 参考価格

qPCR プライマーアッセイ (SYBR® Green)Wet-lab validated

200反応1,000反応

¥16,000¥48,000

qPCRプローブアッセイ(FAM)Wet-lab validated

200反応500反応

1,000反応

¥24,000¥44,000¥62,000

qPCR プローブアッセイ (HEX)500反応

1,000反応¥48,000¥68,000

qPCR アレイ (SYBR® Green)96 well

384 well¥26,000~34,000¥38,000~44,000

ddPCR アッセイ(アッセイ内容により異なります)

200反応1,000反応2,500反応

¥32,000~¥78,000~

¥124,000~

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Real-Time PCR System

Amplification:Reagents and Plastics

リアルタイムPCR解析システム セレクションガイド

CFX Opus 96 CFX Opus 384 CFX96 TouchCFX96 Touch

Deep Well CFX384 Touch CFX Connect

特長

温度制御性能、操作性、ネットワーク性能に優れた96ウェル、5波長検出モデル

温度制御性能、操作性、ネットワーク性能に優れた384ウェル、4波長検出モデル

温度制御性能に優れた96ウェル、5波長検出モデル

検査用途などの大容量サンプルに対応した96ウェル、5波長検出モデル

温度制御性能に優れた384ウェル、4波長検出モデル

コストパフォーマンスの高い96ウェル、2波長検出モデル

サーマルサイクラー部 一体型 一体型 C1000 Touch C1000 Touch C1000 Touch CFX Connect

ウェル数 96 wells 384 wells 96 wells 96 wells 384 wells 96 wells

サンプル量 3-50 µl(10-50 µl推奨)

1-30 µl(5-30 µl推奨)

3-50 µl(10-25 µl推奨)

10-125 µl(25-100 µl推奨)

1-30 µl(5-20 µl推奨)

3-50 µl(10-25 µl推奨)

光源 6 LED 5 LED 6 LED 6 LED 5 LED 3 LED

検出器 6フォトダイオード 5フォトダイオード 6フォトダイオード 6フォトダイオード 5フォトダイオード 3フォトダイオード

励起波長 450-684 nm 450-650 nm 450-684 nm 450-684 nm 450-650 nm 450-535 nm

検出波長 515-730 nm 515-690 nm 515-730 nm 515-730 nm 515-690 nm 515-580 nm

マルチプレックス検出 最大5色 最大4色 最大5色 最大5色 最大4色 最大2色

FRET対応 ● ● ● ● ● ●

最大温度制御速度 5℃ /秒 2.5℃ /秒 5℃ /秒 2.5℃ /秒 2.5℃ /秒 5℃ /秒

温度正確性 ±0.2℃ ±0.2℃ ±0.2℃ ±0.2℃ ±0.2℃ ±0.2℃

温度均一性 ±0.3℃ ±0.3℃ ±0.4℃ ±0.4℃ ±0.4℃ ±0.4℃

温度グラジェント機能 ● ● ● ● ● ●

温度グラジェント範囲 30-100℃ 30-100℃ 30-100℃ 30-100℃ 30-100℃ 30-100℃

ネットワーク接続 有線LAN, Wi-Fi 有線LAN, Wi-Fi 有線LAN 有線LAN 有線LAN -

操作方法 タッチパネル、 PC接続 タッチパネル、PC接続 タッチパネル、PC接続 タッチパネル、PC接続 タッチパネル、PC接続 PC接続

カタログ番号 12011319J1 12011452J1 1855196J1 1854095J1 1855484J1 1855201J1

CFX リアルタイムPCR解析システム

バイオ・ラッドのリアルタイムPCR解析システムは、長時間持続型LEDおよび光学シャトルを用いた革新的な光学テクノロジーを取り入れています。また独立したチャネルでそれぞれ別々の蛍光色素の波長をとらえるため、well to wellのクロストークの影響を排して、ターゲット遺伝子を高感度にかつ正確に定量・識別を行うことが可能です。バイオ・ラッドは、96ウェル、384ウェルのシステムを用意しています。下記ガイドをご覧いただき、最適の1台をお選びください。

リアルタイムPCR解析システム 

PrimePCR™ ASSAYS AND PANELS

CELL LYSIS

REVERSE TRANSCRIPTION

REAL-TIME PCR REAGENTS

RNA / DNA ISOLATION

REAL-TIME PCR SYSTEM

PCR PLASTICCONSUMABLES

システム

Page 44: セレクションガイド - Bio-Rad Laboratories...PCR /リアルタイムPCR 試薬・消耗品セレクションガイド PCR AND GENE EXPRESSION WORKFLOW ... 7326820B05 AurumトータルRNA

44 Amplification:Reagents and Plastics

バイオ・ラッドでは弊社リアルタイムPCR装置ユーザーの方を対象に、トレーニングコースをご用意しております。本コースは、実際に装置に触れながら、基本原理や操作方法、実験の組み立て方やトラブルシューティングなど、実践的な内容の習得を目的としています。はじめの1歩 リアルタイムPCRは、次のような方にお勧めです。

・ リアルタイムPCRの原理を知りたい方/実験の流れを知りたい方・ これから装置を使い始める方/基本操作を確かめたい方

*本コースの対象機種はCFXリアルタイムPCR解析システムになります。 その他機種の場合は別途ご相談ください。*Basicコースは、弊社で用意したサンプルのみを用いたウェット実習を含む半日のコースです。 お客様のサンプルを用いて条件検討を行う「ウェット実習を含む」コースも設定されています。*来所のほか、お客様先にて行う訪問トレーニングもお受けしております。

・ リアルタイムPCRの基礎原理(講義)・ 実験条件の検討方法(講義)・ 装置の概要と取扱方法(実機を用いた説明)・ 標準サンプルを用いた実習・ 解析方法説明、トラブルシューティング

【実施人数】・ 2~6名まで 最少催行人数2名・ 訪問トレーニングをご希望の場合は4名様、もしくは4名様料金からお受けいたします。別途、出張費が加算されます。

【申し込み方法】・ 弊社Webサイト(Google等の検索エンジンから「バイオ・ラッド トレーニング」で検索してください)にてお申し込みください。・ 同一のご所属で複数の方のお申し込みの場合も、1名ずつお申し込み願います。

トレーニング内容

Easy-to-Use Solutions Basicコースはじめの1歩 リアルタイムPCR

製品詳細、ご注文方法、学術的な内容についてご不明な点がございましたら、バイオ・ラッド テックコールまでお問い合わせください。

バイオ・ラッド ラボラトリーズ株式会社ライフサイエンス テックコール

Email life_ps_ [email protected] Tel 03-6404-0331

バイオ・ラッド ラボラトリーズ 株式会社 取扱店

ライフサイエンス www.bio-rad.com本   社 〒140-0002 東京都品川区東品川 2-2-24 TEL:03-6361-7000

大阪営業所 〒532-0025 大阪市淀川区新北野 1-14-11 TEL:06-6308-6568

                  ※学術的お問い合わせは TEL:03-6404-0331

※価格、仕様は予告なく変更になることがあります。※価格(税抜き)は2021年1月現在のもので、メーカー希望小売価格です。※本カタログに記載されている会社名、商品名は各社の商標または登録商標です。※本カタログに掲載されている製品は研究用であり、診断目的にはご利用いただけません。 C11284L 2101c

SYBR is a trademark of Thermo Fisher Scientific Inc. Bio-Rad Laboratories, Inc. is licensed by Thermo Fisher Scientific Inc. to sell reagents containing SYBR Green I for use in real-time PCR, for research purposes only. EvaGreen is a trademark of Biotium, Inc. Bio-Rad Laboratories, Inc. is licensed by Biotium, Inc. to sell reagents containing EvaGreen dye for use in real-time PCR, for research purposes only. Bio-Rad's thermal cyclers and real-time thermal cyclers are covered by one or more of the following U.S. patents or their foreing conterparts owned by Eppendorf AG: U.S. Patent Numbers 6,767,512 and 7,074,367. The use of SsoAdvanced PreAmp Supermix and PrimePCR PreAmp Assays is covered by one or more of the following U.S. patents and corresponding patent claims outside the U.S.: 5,804,375; 5,538,848; 5,723,591; 5,876,930; 5,994,056; 6,030,787; 6,171,785; and 6,258,569. The purchase of these products includes a limited, non-transferable immunity from suit under the foregoing patent claims for using only this amount of product for the purchaser ’s own internal research. No right under any other patent claim and no right to perform commercial services of any kind, including without limitation reporting the results of purchaser ’s activities for a fee or other commercial consideration, are conveyed expressly, by implication, or by estoppel. These products are for research use only. Diagnostic uses under Roche patents require a separate license from Roche. Further information on purchasing licenses may be obtained from the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.