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Impiego di genotipi di salicacee per interventi di fitorimedio Pier Mario Chiarabaglio Nervo G., Facciotto G., Vietto L., Castro, G., Mughini G. CRA - Unità di ricerca per le Produzioni Legnose fuori Foresta (CRA-PLF) Workshop Capracotta (IS) - 6-7 giugno 2012 Biologia degli stress in Salicaceae: modelli di ricerca propedeutici a piantagioni multifunzionali

Impiego di genotipi di salicacee per interventi di fitorimedio Pier Mario Chiarabaglio Nervo G., Facciotto G., Vietto L., Castro, G., Mughini G. Pier Mario

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Impiego di genotipi di salicacee per interventi di fitorimedio

Impiego di genotipi di salicacee per interventi di fitorimedio

Pier Mario ChiarabaglioNervo G., Facciotto G., Vietto L., Castro, G., Mughini G.

Pier Mario ChiarabaglioNervo G., Facciotto G., Vietto L., Castro, G., Mughini G.CRA - Unità di ricerca per le Produzioni Legnose fuori Foresta (CRA-PLF)CRA - Unità di ricerca per le Produzioni Legnose fuori Foresta (CRA-PLF)

WorkshopCapracotta (IS) - 6-7 giugno 2012

Biologia degli stress in Salicaceae:modelli di ricerca propedeutici a piantagioni

multifunzionali

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aPremessaPremessa

… Sviluppa nuovi impieghi delle colture legnose a rapido accrescimento per la protezione delle acque di superficie dall’inquinamento, per la rinaturalizzazione e per la decontaminazione di aree inquinate da emissioni industriali (fitodepurazione e fitorisanamento) …

… Sviluppa nuovi impieghi delle colture legnose a rapido accrescimento per la protezione delle acque di superficie dall’inquinamento, per la rinaturalizzazione e per la decontaminazione di aree inquinate da emissioni industriali (fitodepurazione e fitorisanamento) …

Finalità del CRA-PLF:Finalità del CRA-PLF:

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aArchivi vegetali presso l’az.

Mezzi Archivi vegetali presso l’az.

Mezzi

altro 0tan22a566022

P. xcanadensis 202

P. alba 0tan21a566021

P. deltoides 0tan17a566117

Salix spp. 0tan27a566127

P. nigra 0tan8a56628

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a

Tipologia esperienze in corso

superficie totale [ha]

Fascia tampone boscate 20 (2) 150Micorrizazione 1 (1) 1Impiego acque reflue 1 (1) 1Salinità 1 (1) 1Fitorimedio 4 (4) 3

Stress idrico artificialeStrumenti disponibili

EsperienzeEsperienze

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a

Localitàanno di

impianto specie (cloni) Densità impianto Superficie Obiettivo

Frassineto Po AL

1996

Populus nigra,

Populus alba, Salix

alba

1100 2,5 ha

riduzione carichi N in presenza di

coltivazioni intensive

mais

Palazzolo vercellese VC

2005-2008

Populus nigra,

Populus alba285 15 ha

riduzione carichi N in presenza di coltivazioni intensive

riso

Fascia tamponeFascia tampone

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Fiume PoLanca di Rivarossa

N-NH4+ >0,50 mg/l

N-NO3- >1,87 mg/l

Fascia tampone a Frassineto Po

Fascia tampone a Frassineto Po

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a

P. nigra Gene Conservation Unit

P. alba seed stand

Buffer forest against flooding

Mesophilous forest

Fium

e Po

PO43– P >1,14 mg/l

N-NH4+ >0,80 mg/l

N-NO3- >0,83 mg/l

Fascia tampone a Palazzolo vercellese

Fascia tampone a Palazzolo vercellese

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a

Localitàanno di

impianto specie (cloni) Densità impianto Superficie Obiettivo

Caramagna Piemonte CN

az. Merlino2009

P. alba (60

genotipi) 1600 1,3 ha

valutare effetti micorrizazione su

resistenza allo stress idrico

Piante micorrizatePiante micorrizate

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aPioppi bianchi micorrizatiPioppi bianchi micorrizati

Micorrizazione con una combinazione di microrganismi del genere Glomus, di batteri appartenenti ai generi Pseudomonas e Bacillus, di Attinomiceti del genere Streptomyces e di  funghi saprofiti del genere Trichoderma mediante inzaffardatura delle radici.

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aPioppi bianchi micorrizatiPioppi bianchi micorrizati

P.albami cor r i zate; L S M eans

Cur r ent eff ect: F (1, 224)=76.270, p=.00000

si no

mi cor r i zate

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

70

75

Media

cir

conf

ere

nza

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aImpiego acque reflueImpiego acque reflue

Localitàanno di

impianto specieDensità impiant

oSuperficie Obiettivo

Mussomeli CL 2008

Populus spp., Robinia pseudacacia, Eucalyptus camaldulensis E. globulus, Acacia saligna

6600 0,5 ha

valutare potenzialità terreni sud per produzione biomassa irrigazione a goccia con acque reflue dopo depuratore

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specie SnD13

0 Ht DB DByA. saligna 2.5 30 321 24.812.4E. camaldulensis 1.7 30 298 10.6 5.3E. globulus 1.1 31 331 7.8 3.9Pioppi 1.4 22 272 5.8 2.9Robinia 1.6 17 227 2.9 1.4

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aImpianto di pioppi a

MussomeliImpianto di pioppi a

MussomeliMedia del n. di polloni per ceppaia (Sn), diametro mm (D130), altezza totale cm (Ht), biomassa Odt ha-1 (DB) per specie al 2° anno e per anno (DBy)

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aSalinitàSalinità

Localitàanno di

impianto specieDensità impiant

oSuperficie Obiettivo

Lentini SRAz. San Giovanni Arcimusa

2012P. xcanadensis (10 cloni)

1100 0,5 ha

Valutare stress per irrigazione con acqua con tenore di sale elevato

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aImpianto di pioppi a LentiniImpianto di pioppi a Lentini

Acqua con SAR = 4,5

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aFitorimedioFitorimedio

Localitàanno di

impianto specieDensità impiant

oSuperficie Obiettivo

Rocca Massima LT 2004 Populus nigra

var. italica 1300 0,12 haValutare capacità fitorimedio pioppo su reflui oleari

Scarlino GR 2006

Populus spp. (5 cloni), Salix spp. (5 cloni), Eucalyptus spp. (16 cloni)

- VasoValutare capacità fitoestrattiva delle foglie per Arsenico

Scarlino GR 2010P. xcanadensis (2 cloni Orion, Imola)

1100 0,2 haVerificare capacità estrattiva suolo - prova in corso

Alessandria 2012

P. xcanadensis (35 cloni) Salix spp. (10 cloni)

9000 0,02 haVerificare capacità estrattiva suolo - prova in corso

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aFitorimedio a Rocca MassimaFitorimedio a Rocca Massima

dic-05 mar-06 lug-06pH 4.7 6.7 7.6Conduttività (mS/cm) 10 7.7 3.7COD (mg/l) 37700 14600 550BOD5 (mg/l O2) 10800 3400 270Fenoli totali (mg/g) 249 147 5

Variazioni di alcune caratteristiche chimico-fisiche delle acque di vegetazione raccolte al secondo anno nell'impianto di fitodepurazione

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aFitorimedio a Rocca MassimaFitorimedio a Rocca Massima

0tan28a566028 0tan29a566029 0tan1a566010tan28a566028

0tan1a56601

0tan3a56603

0tan5a56605

0tan7a56607

0tan9a56609

0tan11a566011

0tan13a566013

0tan15a566015

0tan17a566017

0tan1a56601

0tan4a56604

0tan15a566015

Produzione di sostanza secca t ha-1

Anno dall'impianto

bio

ma

ssa

pro

do

tta

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aFitorimedio a Scarlino – in

vasoFitorimedio a Scarlino – in

vaso

pioppi salici eucalitti

1 anno di accrescimento in vasoValutazione assorbimento Arsenico

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aFitorimedio a Scarlino – in

campoFitorimedio a Scarlino – in

campo

Impianto di 2 cloni Orion e Imola nel 2010 – prova in corso

Substrato con presenza di Arsenico, altri metalli pesanti, ceneri di pirite

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aFitorimedio a Scarlino – in

campoFitorimedio a Scarlino – in

campo

Nel 2011 sostituzione fallanze

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aFitorimedio AlessandriaFitorimedio Alessandria

Impianto nel 2012 di P. xcanadensis (35 cloni) Salix spp. (10 cloni) – prova in corso

Substrato con presenza di metalli pesanti

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Stress artificialeStress artificiale

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IdrocambioIdrocambio

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dendrometro

Sensore umidità suolo

Stress idrico sull’accrescimentoStress idrico sull’accrescimento

IdrocambioIdrocambio

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-0,5

1,5

3,5

5,5

7,5

9,5

11,5

13,5

15,5

17,5

19,5

Time

Cu

mu

lativ

e ra

dia

l gro

wth

(mm

)

stress I214

stress dvina

control I214

control dvina

Variazioni radiali del fusto da marzo a novembre

Stress idrico sull’accrescimentoStress idrico sull’accrescimento

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Obiettivi:valutare l’influenza di condizioni di deficit o di surplus idrico su 9 cloni di pioppo nero provenienti da diverse latitudini del suo areale di distribuzione per evidenziare l’adattamento della specie a variazioni climatiche simulate attraverso regimi idrici differenti.

Populus nigra L. come caso di studio

per la valutazione degli effetti dei cambiamenti climatici

Populus nigra L. come caso di studio

per la valutazione degli effetti dei cambiamenti climaticiAzienda

Sperimentale

Mezzi

campo sperimental

e

Areale di diffusione di Populus nigra

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3 regimi idrici:

Ambient: soggetto a precipitazioni naturali

Dry: protetto dalle precipitazioni e irrigato artificialmente con 1/3 delle precipitazioni

Wet: soggetto alle precipitazioni e irrigato artificialmente con 2/3 in più delle precipitazioni

Regimi idriciRegimi idrici

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aParcelle “dry”Parcelle “dry”

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a

• Caratterizzazione stazionale• Rilevamento dati meteo in continuo• Monitoraggio in continuo dell’umidità del

suolo• Monitoraggio in continuo della crescita

radiale• Rilevamento dati biometrici e fisiologici

(temperatura fogliare, potenziale idrico fogliare, contenuto in clorofilla, fluorescenza fogliare, malattie, misurazioni radiometriche sulle foglie)

Attività svolta in campo …Attività svolta in campo …

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a… e nei cassoni… e nei cassoni

1. Sono stati realizzati 2 cicli di stress idrico

2. SWC è sceso a 10 % mentre capacità di campo al 36 %

3. PWP (predawn leaf water potential), RWC (Relative Water content) misurati al punto 0, alla fine del primo periodo di stress, dopo un periodo di reidratazione e alla fine del secondo periodo di stress

4. Alla fine di ogni periodo di stress è stato misurato potenziale osmotico a turgore massimo e l’elasticità della parete cellulare.

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aRisultatiRisultati

I 3 regimi idrici hanno permesso di differenziare il SWC ma non in modo così elevato

D at a*T r eat ment ; Avg M Q

L ug- 06 Ago- 06 S et - 06 Giu-07 L ug- 07 S et - 07

mont h

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Soi

l Wat

er C

onte

nt (

%)

W et Ambient D r y

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rest

aRisultatiRisultati

Solo il regime Dry ha ridotto l’accrescimento in modo significativo mentre quello Ambient e Wet non hanno prodotto differenze …

Y ear *T r eat ment ; Avg M Q

F(4, 363)=4,0497, p=,00317

Ver t ical bar s denot e 0,95 confi dence int er vals

d

c

a

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c

a

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b

2005 2006 2007

year

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

Vol

ume

(dm

3)

Am bien t Wet D ry

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aRisultatiRisultati

… i genotipi meridionali sono cresciuti meno di tutti gli altri mentre quelli centrali (autoctoni!) sono quelli che sono cresciuti di più in modo significativo

year * genotype; M edi e M Q

Eff . cor r ente: F (4 , 363)=21,530, p=,00000

L e bar r e ver t i cal i i ndi cano i nter vall i di confi denza al 0 ,95

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f

e

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10

Vol

[dm

3] genotype M i ddle

genotype N or ther n

genotype S outher n

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aRisultatiRisultati

Il Predawn Water Potential (PWP) è il parametro fisiologico che ci ha permesso di individuare il 7 % di SWC come valore soglia per un calo significativo del PWP:

S oi l W at er Cont ent ; L east S quar es M eansF (15, 476)=64,477, p=0,000

Point denot e st andar d er r or 0,95

0 5 10 15 20 25 30 35 40

S oi l W at er Cont ent (%)

-1,0

-0,9

-0,8

-0,7

-0,6

-0,5

-0,4

-0,3

-0,2

-0,1

0,0

Pre

daw

n W

ater

Pot

entia

l (M

Pa)

PW P = -0,7504+0,4319*log10(x)

St. Erro r +0 ,95 % PWP St. Erro r -0 ,95 %

sotto questo valore (con PWP compreso tra -0,4 e -0,8 Mpa) il pioppo comincia a perdere le foglie come reazione di difesa allo stress

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aRisultatiRisultati

Tra gli indici radiometrici calcolati il Red Edge Position mette in evidenza lo stress indotto dal regime idrico Dry. Lo stesso indice è anche in correlazione (r=0,74) con l’indice CCI (Chlorophyll Content Index)

T r eatment; L east S quar e M eans

F (2 , 225)=10,630, p=,00004V er t i cal bar s denote 0 ,95 confi dence i nter vals

a

b

a

A mbi ent Dr y W et

T r eatment

705

706

707

708

709

710

711

712

713

Red

Edge

Pos

itio

n (R

EP)

REP

Maximum first derivative

Nessun indice radiometrico sembra individuare una condizione precoce di stress

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aRisultati - cassoniRisultati - cassoni

Il clone N894 (nord) non reagisce al deficit idricoIl clone N068 (centro) ha un debole aggiustamento osmotico passivo con perdita acqua dal simplastoIl clone N354 (sud) mostra un adattamento osmotico significativo

Timing

O I max I rec II max

P

(M

Pa

)

0.0

0.1

0.2

0.3

A

(M

Pa

)

-0.2

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

068 (Central)

(M

Pa

)

-0.2

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

**

**

* *

Timing

O I max I rec II max

354 (Souhtern)

**

**

Timing

O I max I rec II max

894 (Northern)

DryWetDifferenza tra

predawn e midday water potential

Aggiustamento osmotico attivo

Aggiustamento osmotico passivo

N068 N354 N894

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aConclusioni Conclusioni

I genotipi provenienti dal nord e dal centro dell’areale del pioppo nero sembrano adattarsi meno allo stress idrico rispetto a quelli del sud. I cambiamenti climatici in atto con periodi siccitosi estremi durante la stagione vegetativa potranno aumentare il rischio di estinzione per il pioppo nero.

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aCollaborazioni in corsoCollaborazioni in corso

• ENEA Saluggia (Prove di combustione, monitoraggio ambientale, …)

• Università Piemonte Orientale (Analisi inquinanti)

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Dendrometri

FluorimetroCamera a pressione

Contenuto Clorofilla

Strumentazione CRA-PLFStrumentazione CRA-PLF

Sensore umidità suolo

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Naso elettronico

Radiometro NIR

Centralina trasmissione datiautoalimentata e

interrogabile via telefono

Strumentazione CRA-PLFStrumentazione CRA-PLF

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aStrumentazione CRA-PLFStrumentazione CRA-PLF

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aStrumentazione CRA-PLFStrumentazione CRA-PLF

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rest

aPiante trasformatePiante trasformate

Piante transgeniche (TRX450, TRX 550) e non trasformate (CTRL) dopo 6 settimane di allevamento in vitro su substrato contenente 120 µM di solfato di Cadmio

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Grazie dell’attenzioneGrazie dell’attenzione