Upload
day-kem-quy-nhon-official
View
294
Download
9
Embed Size (px)
Citation preview
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 1/108
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN --- ---
NGUYỄN HỮU PHONG
ĐOÀN THỊ LY KHA
KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐỊNH
LƯỢNG FLAVONOID TOÀN PHẦN TRONG VỎTHÂN CÂY NÚC NÁC (OROXYLUM INDICUM (L.)
VENT.)
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
CHUYÊN NGÀNH CỬ NHÂN HÓA DƯỢC
Cần Thơ, tháng 12/2014
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 2/108
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN --- ---
NGUYỄN HỮU PHONG
ĐOÀN THỊ LY KHA
KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐỊNH
LƯỢNG FLAVONOID TOÀN PHẦN TRONG VỎTHÂN CÂY NÚC NÁC (OROXYLUM INDICUM (L.)
VENT.)
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
CHUYÊN NGÀNH CỬ NHÂN HÓA DƯỢC
HƯỚNG DẪN KHOA HOC TS. TÔN NỮ LIÊN HƯƠNG
Cần Thơ, tháng 12/2014
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 3/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLi- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
LỜI CẢM ƠN
Chúng tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến:
Ts. Tôn Nữ Liên Hương người cô hướng dẫn, một tấm gương nghiên cứukhoa học đã tận tình giảng dạy, hướng dẫn và quan tâm chúng tôi trong quátrình học tập ở trường.
Anh Nguyễn Đăng Khoa đã luôn động viên, giúp đỡ chúng tôi trong suốtquá trình làm luận văn.
Ts. Lê Thanh Phước, PGS. Ts. Bùi Thị Bửu Huê, Ts. Nguyễn TrọngTuân, CVHT. Phạm Bé Nhị, Bộ môn Hóa, Khoa Khoa Học Tự Nhiên, Trường
Đại Học Cần Thơ đã tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ chúng tôi hoàn thành tốtluận văn này.
Các anh chị học viên cao học, các bạn sinh viên lớp Hóa Dược K37 vàcác bạn sinh viên ở phòng thí nghiệm Bộ môn Hóa, Khoa Khoa Học Tự Nhiên,
Trường Đại Học Cần Thơ về sự giúp đỡ, quan tâm, động viên của mọi ngườitrong suốt quá trình chúng tôi làm luận văn.
Và cuối cùng là lòng biết ơn sâu sắc nhất đến Cha Mẹ, cũng như tất cả
những người thân yêu trong gia đình đã luôn tạo mọi điều kiện tốt nhất về vậtchất lẫn tinh thần giúp chúng con hoàn thành quá trình học tập của mình.
Xin chân thành cảm ơn.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 4/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Trường Đại Học Cần Thơ Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Khoa Khoa Học Tự Nhiên Độc lập - Tự do - Hạnh phúc
Bộ Môn Hóa Học
NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚ NG DẪN1. Cán bộ hướng dẫn: Ts. Tôn Nữ Liên Hương
2. Đề tài: “Khảo sát thành phần hóa học và định lượng flavonoid toàn phần trongvỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L.) Vent.)”
3. Sinh viên thực hiện: Nguyễn Hữu Phong MSSV: 2112068
Đoàn Thị Ly Kha MSSV: 2112031
Lớp: Hóa Dược – Khóa: 37
4. Nội dung nhận xét:
a) Nhận xét về hình thức của LVTN:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
b) Nhận xét về nội dung của LVTN (đề nghị ghi chi tiết và đầy đủ):
Đánh giá nội dung thực hiện của đề tài:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
Những vấn đề còn hạn chế:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
c) Nhận xét đối với sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nội dung chính do sinh viên nào chịu trách nhiệm thực hiện nếu có):
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
d) Kết luận, đề nghị và điểm: ............................................................................................................................................................................................................................................................
Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2014 Cán bộ hướng dẫn
Ts. Tôn Nữ Liên Hương
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 5/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLiii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Trường Đại Học Cần Thơ Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Khoa Khoa Học Tự Nhiên Độc lập - Tự do - Hạnh phúc
Bộ Môn Hóa Học
NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN1. Cán bộ phản biện: ……………………………………………………………
2. Đề tài: “Khảo sát thành phần hóa học và định lượng flavonoid toàn phần
trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L.) Vent.)”
3. Sinh viên thực hiện: Nguyễn Hữu Phong MSSV: 2112068
Đoàn Thị Ly Kha MSSV: 2112031
Lớp: Hóa Dược – Khóa: 37
4. Nội dung nhận xét: a) Nhận xét về hình thức của LVTN:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
b) Nhận xét về nội dung của LVTN (đề nghị ghi chi tiết và đầy đủ):
Đánh giá nội dung thực hiện của đề tài:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
Những vấn đề còn hạn chế:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
c) Nhận xét đối với sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nội dungchính do sinh viên nào chịu trách nhiệm thực hiện nếu có):
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
d) Kết luận, đề nghị và điểm:
..............................................................................................................................
..............................................................................................................................
Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2014 Cán bộ phản biện
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 6/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLiv- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
TÓM TẮT NỘI DUNG LUẬN VĂN
Nội dung luận văn gồm các phần sau đây:
Chương 1: MỞ ĐẦU Trình bày lý do chọn đề tài, mục tiêu nghiên cứu, nội dung và phạm vi
nghiên cứu, các phương pháp tiếp cận đề tài.
Chương 2: TỔNG QUAN
Giới thiệu đại cương về cây Núc nác, tác dụng dược lý theo y học dân gian,
hoạt tính sinh-hóa theo các phương pháp nghiên cứu hiện đại.
Lược khảo các công trình nghiên cứu thành phần hóa học về cây Núc nác
trên thế giới. Qua đó, đánh giá sơ bộ tình hình nghiên cứu thành phần hóa học trên loài Oroxylum indicum (L.) Vent.
Chương 3: THỰC NGHIỆM
Sử dụng các phương pháp chiết ngâm dầm, chiết siêu âm (chiết rắn-lỏng,chiết lỏng-lỏng,…) để điều chế cao thô (cao MeOH, cao n-Hexane, cao
Dichloromethane, cao Ethyl acetate) và flavonoid toàn phần từ vỏ cây Núc nác.
Sử dụng các phương pháp sắc ký cột, sắc ký lớp mỏng, sắc ký lớp mỏng
điều chế, kết tinh trong dung môi thích hợp,... để khảo sát cao Dichloromethanevà phân lập được 4 hợp chất tinh khiết.
Sử dụng phương pháp quang phổ UV-Vis để định lượng flavonoid toàn
phần trong vỏ thân cây Núc nác.
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Phân lập và nhận danh cấu trúc của 4 hợp chất có tên lần lượt là:
- ORI.K1 là 5,7-dihydroxy-2-phenylchroman-4-one (Pinocembrin).
- ORI.P1 là 5,7-dihydroxy-6-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one
(Oroxylin A).
- ORI.P2 là 5,7-dihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (Chrysin).
- ORI.P3 là 5,6,7-trihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (Baicalein).
Cấu trúc của các chất trên được xác định bằng các phương pháp phổ hiệnđại như: UV-Vis, ESI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HSQC, HMBC và kết
hợp so sánh với các tài liệu đã công bố.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 7/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLv- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Khẳng định các kết quả nghiên cứu nêu trên.
Kiến nghị tiếp tục phân lập các chất từ các cao n-Hexane, cao Ethyl
acetate, cao nước và thử hoạt tính sinh học.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 8/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLvi- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
LỜI CAM ĐOAN
Chúng tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu riêng của chúng tôi,
các số liệu có nguồn gốc rõ ràng, tuân thủ đúng nguyên tắc, k ết quả thu đượ ctrong quá trình nghiên cứu là trung thực và chưa từng được ai dùng cho bất cứ
luận văn cùng cấp nào khác.
Ngoài ra, các nội dung nghiên cứu của chúng tôi nằm trong phạm vi đề tài
“Khảo sát thành phần hóa học của vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L.)
Vent.)” của học viên Nguyễn Đăng Khoa, cao học Hóa Hữu Cơ K20, Khoa
Khoa học Tự nhiên, Trường Đại học Cần Thơ. Học viên có thể sử dụng kết quảcủa luận văn này để phục vụ cho luận văn tốt nghiệp thạc sĩ.
Cần Thơ , ngày…tháng…năm 2014
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 9/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLvii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
MỤC LỤC
TrangLỜI CẢM ƠN .............................................................................................................. i
NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚ NG DẪ N .......................................... ii
NHẬ N XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢ N BIỆ N ............................................iiiTÓM TẮT NỘI DUNG LUẬN VĂN ........................................................................ iv
LỜI CAM ĐOAN ....................................................................................................... vi
MỤC LỤC ................................................................................................................. vii
DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ....................................................... x
DANH MỤC CÁC BẢ NG ....................................................................................... xii
DANH MỤC CÁC HÌNH, SƠ ĐỒ ...........................................................................xiii
DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC .................................................................................. xiv
NỘI DUNG LUẬN VĂN Chương 1: MỞ ĐẦU
1.1 LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI .............................................................................. 1
1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨ U ....................................................................... 2
1.3 ĐỐI TƯỢ NG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨ U .............................................. 2
1.4 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰ C TIỄ N CỦA ĐỀ TÀI................................. 2
Chương 2: TỔNG QUAN
2.1 ĐẶC TÍNH THỰ C VẬT ............................................................................ 3
2.1.1 Giớ i thiệu cây Núc nác .................................................................. 3
2.1.2 Phân loại khoa học ......................................................................... 3
2.1.3 Mô tả thực vật ................................................................................ 3
2.2 CÁC NGHIÊN CỨ U VỀ MẶT DƯỢC TÍNH CỦA CÂY NÚC NÁC ........... 5
2.2.1
Theo kinh nghiệm dân gian .......................................................... 52.2.2 Các hoạt tính sinh học của Núc nác đã đượ c nghiên cứu .............. 5
2.2.3 Các nghiên cứu trong y học và thử nghiệm lâm sàng ................... 7
2.3 TỔ NG HỢP K ẾT QUẢ NGHIÊN CỨ U VỀ THÀNH PHẦ N HÓA HỌC CỦA
CÂY NÚC NÁC ........................................................................................................ 7
2.3.1 Các nghiên cứu trong nướ c ............................................................ 7
2.3.2 Các nghiên cứu ngoài nướ c ............................................................ 7
2.3.3 Tổng hợ p thành phần hóa học đã đượ c nghiên cứu trên loài Núc nác
(Oroxylum indicum (L.) Vent.) .................................................................. 8
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 10/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLviii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
2.4 NHÓM HỢP CHẤT FLAVONOID ................................................................. 17
2.4.1 Flavonoid ...................................................................................... 17
2.4.2 Hoạt tính dượ c lý của flavonoid ................................................... 18
2.4.3 Quy trình sinh tổng hợ p flavonoid ............................................... 18
Chương 3: THỰ C NGHIỆM
3.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ ..................................... 20
3.1.1 Nguyên liệu ................................................................................. 20
3.1.2 Xử lý mẫu nguyên liệu ................................................................ 20
3.1.3 Hóa chất sử dụng ......................................................................... 20
3.1.4 Thiết bị chính ............................................................................... 20
3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨ U ........................................................ 21
3.2.1 Phương pháp chiết xuất ............................................................... 21
3.2.2 Phương pháp phân lậ p các hợ p chất ............................................ 21
3.2.3 Phương pháp khảo sát và xác định cấu trúc các hợ p chất ........... 21
3.2.4 Phương pháp xác định độ ẩm dượ c liệu ....................................... 22
3.2.5 Phương pháp chiết flavonoid toàn phần có sự hỗ tr ợ của sóng siêu
âm ............................................................................................................ 22
3.2.6 Nguyên tắc định lượ ng flavonoid bằng phương pháp quang phổ UV-Vis .................................................................................................... 23
3.2.7 Phương pháp chọn bước sóng định lượ ng ................................... 23
3.2.8 Phương pháp xác định độ lặ p lại .................................................. 23
3.2.9 Phương pháp xây dựng đườ ng chuẩn .......................................... 23
3.2.10 Phương pháp xác định giớ i hạn định lượ ng ................................. 23
3.2.11 Xác định độ đúng của phương pháp ............................................ 24
3.2.12 Phương pháp định lượ ng flavonoid toàn phần ............................. 24
3.3 THỰ C NGHIỆM CHIẾT XUẤT, ĐIỀU CHẾ CAO THÔ TỪ VỎ THÂNCÂY NÚC NÁC ............................................................................................ 24
3.4 PHÂN LẬP, TINH CHẾ MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ VỎ THÂN CÂY
NÚC NÁC ..................................................................................................... 26
3.4.1 Khảo sát phân đoạn OD2 .............................................................. 28
3.4.2 Khảo sát phân đoạn OD8 .............................................................. 28
3.4.3 Khảo sát phân đoạn OD7 .............................................................. 28
3.5 ĐỊNH LƯỢ NG FLAVONOID TOÀN PHẦ N TRONG VỎ THÂN CÂY
NÚC NÁC THEO CHẤT ĐỐI CHIÊU BAICALEIN .................................. 29
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 11/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLix- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
3.5.1 Xác định độ ẩm của dượ c liệu ..................................................... 29
3.5.2 Chiết flavonoid toàn phần bằng phương pháp chiết tr ực tiế p có sự
hỗ tr ợ của sóng siêu âm ........................................................................... 29
3.5.3 Chọn bướ c sóng hấ p thụ thích hợ p .............................................. 30
3.5.4 Độ lặ p lại của phương pháp ......................................................... 303.5.5 Xây dựng đườ ng chuẩn ............................................................... 31
3.5.6 Giớ i hạn phương pháp ................................................................. 31
3.5.7 Độ đúng của phương pháp........................................................... 32
3.5.8 K ết quả định lượ ng flavonoid toàn phần của vỏ thân cây Núc nác
...................................................................................................... 33
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
4.1 XÁC ĐỊ NH CẤU TRÚC VÀ NHẬ N DANH CÁC HỢP CHẤT ........ 344.1.1 Hợ p chất ORI.K1 ......................................................................... 34
4.1.2 Hợ p chất ORI.P1 ......................................................................... 40
4.1.3 Hợ p chất ORI.P2 ......................................................................... 45
4.1.4 Hợ p chất ORI.P3 ......................................................................... 48
4.1.5 K ết quả định lượ ng flavonoid toàn phần ...................................... 51
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
5.1 K ẾT LUẬ N ........................................................................................... 525.1.1 Phân lậ p các hợ p chất .................................................................. 52
5.1.2 Cấu trúc hóa học của các hợ p chất đã phân lậ p ........................... 53
5.1.3 Hàm lượ ng flavonoid toàn phần ................................................... 53
5.2 KIẾ N NGHỊ .......................................................................................... 53
TÀI LIỆU THAM KHẢO ........................................................................................ xvi
PHỤ LỤC ..................................................................................................... PL1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 12/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLx- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
1D-NMR : One Dimension Nuclear Magnetic Resonance
2D-NMR : Two Dimensions Nuclear Magnetic Resonance
1H-NMR : Proton Nuclear Magnetic Resonance
13C-NMR : Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance
C:M : Chloroform:Methanol (CHCl3:MeOH)
C:M:W : Chloroform:Methanol:Nướ c (CHCl3:MeOH:H2O)
CDCl3 : CHCl3 đã thế hydro (H) bằng deuteri (D)
COSY : Correlation Spectroscopy
CTPT : Công thức phân tử
DEPT : Distortionless Enhancement by Polarization Transfer
DMSO : Dimethylsulfoxyde (Me2SO)
DPPH : 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl
EI : Electron Impact/Electron Ionization
ESI-MS : Electrospray Ionization Mass spectrometry
EtOAc : Ethyl acetate (CH3COOC2H5)
EtOH : Ethanol (C2H5OH)
E:M : Ethyl acetate:methanol (EtOAc:MeOH)
H:E : n-Hexane:Ethyl acetate
HMBC : Heteronuclear Multiple Bond Correelation
HSQC : Heteronuclear Single Quantum Coherence
Hz : Hertz (đơn vị đo tần số)IUPAC : International Union of Pure and Applied Chemistry
J : Hằng số ghép spin
M : Khối lượ ng phân tử
MHz : Mega Hertz (đơn vị đo tần số)
MeOH : Methanol (CH3OH)
mp : Melting point (điểm tan chảy)
MS : Mass Spectrum/Spectrometry (phổ khối lượ ng)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 13/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxi- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
NMR : Nuclear Magnetic Resonance
C : độ Cencius
Peak (pic) : Mũi tín hiệu
ppm : part per million (phần triệu)
R f : Retention factor
SKLM : Sắc ký lớ p mỏng
UV-Vis : Ultraviolet Visible Spectroscopy (phổ tử ngoại khả kiến)
δ : Chemical shift (độ dịch chuyển hay độ dờ i hóa học)
λ : Bướ c sóng
d : doublet (mũi đôi) dd : double of doublet (mũi đôi-đôi)
m : multiplet (mũi đa)
q : quarlet (mũi bốn)
s : singlet (mũi đơn)
t : triplet (mũi ba)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 14/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
DANH MỤC BẢNG Trang
Bảng 2.1 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học trên các bộ phận của Núc nác..6
Bảng 2.2 Thành phần hóa học đã công bố của loài Oroxylum indicum (L.)
Vent. ............................................................................................... 8
Bảng 3.1 Kết quả sắc ký cột nhanh khô ....................................................... 27
Bảng 3.2 K ết quả đo độ ẩm bột vỏ thân cây Núc nác .................................. 29
Bảng 3.3 Kết quả độ lặp lại của phương pháp ............................................. 30
Bảng 3.4 Kết quả xây dựng đường chuẩn theo chất đối chiếu Baicalein .... 31
Bảng 3.5 Kết quả xác định độ lệch chuẩn của mẫu trắng ............................ 31
Bảng 3.6 Kết quả xác định nồng độ giới hạn LOL của chất đối chiếuBaicalein ....................................................................................... 32
Bảng 3.7 Kết quả xác định độ đúng của phương pháp ................................ 32
Bảng 3.8 K ết quả định lượng flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác
...................................................................................................... 33
Bảng 4.1 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.K1 ............. 37
Bảng 4.2 Dữ liệu phổ 1H-NMR,13C- NMR, HSQC và HMBC của ORI.K1...38
Bảng 4.3 So sánh dữ liệu phổ của ORI.K1 và Pinocembrin ........................ 39
Bảng 4.4 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.P1 .............. 42
Bảng 4.5 Dữ liệu phổ 1H-NMR,13C- NMR, HSQC và HMBC của ORI.P1...43
Bảng 4.6 So sánh dữ liệu phổ của ORI.P1 và Oroxylin A .......................... 44
Bảng 4.7 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.P2 .............. 46
Bảng 4.8 So sánh dữ liệu phổ của ORI.P2 và Chrysin ................................ 47
Bảng 4.9 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.P3 .............. 49
Bảng 4.10 So sánh dữ liệu phổ của ORI.P3 và ORI.P1 ................................. 50
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 15/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxiii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
DANH MỤC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ Trang
HÌNH 2.1 Quả và lá Núc nác ......................................................................... 4HÌNH 2.2 Thân và hoa Núc nác ...................................................................... 4
HÌNH 2.3 Khung cơ bản của nhóm hợp chất flavonoid ............................... 18
HÌNH 3.1 Quét bướ c sóng phức flavonoid và AlCl3 .................................... 30
HÌNH 3.2 Đồ thị đườ ng chuẩn theo chất đối chiếu Baicalein ...................... 31
HÌNH 3.3 Đồ thị xác định nồng độ giới hạn LOL theo Baicalein ................ 33
HÌNH 4.1 Khung flavanone và số chỉ vị trí .................................................. 35
HÌNH 4.2 Cấu trúc của ORI.K1 (Pinocembrin)............................................ 39
HÌNH 4.3 Khung flavonone và số chỉ vị trí .................................................. 41
HÌNH 4.4 Cấu trúc của ORI.P1 (Oroxylin A) .............................................. 44
HÌNH 4.5 Cấu trúc của ORI.P2 (Chrysin) .................................................... 47
HÌNH 4.6 Cấu trúc của ORI.P3 (Baicalein).................................................. 50
HÌNH 5.1 Các hợp chất tinh khiết chiết tách từ vỏ thân cây Núc nác .......... 52
Sơ đồ 2.1 Quy trình sinh tổng hợ p flavonoid ............................................... 20
Sơ đồ 3.1 Tinh chế cao thô từ bột vỏ thân cây Núc nác ............................... 25
Sơ đồ 3.2 Tinh chế cao Dichloromethane .................................................... 28
Sơ đồ 3.3 Chiết flavonoid toàn phần dưới sự hỗ trợ của sóng siêu âm ........ 29
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 16/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxiv- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC
PHỤ LỤC 1 Trang
Phụ lục 1.1 Phổ ESI-MS của ORI.K1 ....................................................... PL1
Phụ lục 1.2 Phổ 1H-NMR của ORI.K1 ..................................................... PL2
Phụ lục 1.3 Phổ 1H-NMR giãn r ộng của ORI.K1 ..................................... PL3
Phụ lục 1.4 Phổ 13C-NMR của ORI.K1 .................................................... PL4
Phụ lục 1.5 Phổ 13C-NMR giãn r ộng của ORI.K1 .................................... PL5
Phụ lục 1.6 Phổ DEPT của ORI.K1 .......................................................... PL6
Phụ lục 1.7 Phổ DEPT giãn r ộng của ORI.K1.......................................... PL7
Phụ lục 1.8 Phổ HMBC của ORI.K1 ........................................................ PL8
Phụ lục 1.9 Phổ HMBC giãn r ộng của ORI.K1 ........................................ PL9
Phụ lục 1.10 Phổ HMBC giãn r ộng của ORI.K1 ...................................... PL10
Phụ lục 1.11 Phổ HSQC của ORI.K1 ....................................................... PL11
Phụ lục 1.10 Phổ HSQC giãn r ộng của ORI.K1 ....................................... PL12
PHỤ LỤC 2
Phụ lục 2.1 Phổ 1
H-NMR của ORI.P1 .................................................... PL13Phụ lục 2.2 Phổ 1H-NMR giãn r ộng của ORI.P1.................................... PL14
Phụ lục 2.3 Phổ 13C-NMR của ORI.P1 ................................................... PL15
Phụ lục 2.4 Phổ 13C-NMR giãn r ộng của ORI.P1 .................................. PL16
Phụ lục 2.5 Phổ DEPT của ORI.P1 ........................................................ PL17
Phụ lục 2.6 Phổ DEPT giãn r ộng của ORI.P1 ........................................ PL18
Phụ lục 2.7 Phổ HMBC của ORI.P1 ....................................................... PL19
Phụ lục 2.8 Phổ HMBC giãn r ộng của ORI.P1 ...................................... PL20
Phụ lục 2.9 Phổ HMBC giãn r ộng của ORI.P1 ...................................... PL21
Phụ lục 2.10 Phổ HSQC của ORI.P1 ........................................................ PL22
Phụ lục 2.11 Phổ HSQC giãn r ộng của ORI.P1........................................ PL23
PHỤ LỤC 3
Phụ lục 3.1 Phổ ESI-MS của ORI.P2 ..................................................... PL24
Phụ lục 3.1 Phổ 1H-NMR của ORI.P2 .................................................... PL25
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 17/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxv- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 3.2 Phổ 1H-NMR giãn r ộng của ORI.P2.................................... PL26
Phụ lục 3.3 Phổ 13C-NMR của ORI.P2 ................................................... PL27
Phụ lục 3.4 Phổ 13C-NMR giãn r ộng của ORI.P2 .................................. PL28
Phụ lục 3.5 Phổ DEPT của ORI.P2 ........................................................ PL29
Phụ lục 3.6 Phổ DEPT giãn r ộng của ORI.P2 ........................................ PL30
PHỤ LỤC 4
Phụ lục 4.1 Phổ 1H-NMR của ORI.P3 .................................................... PL31
Phụ lục 4.2 Phổ 1H-NMR giãn r ộng của ORI.P3.................................... PL32
Phụ lục 4.3 Phổ 13C-NMR của ORI.P3 ................................................... PL33
Phụ lục 4.4 Phổ 13C-NMR giãn r ộng của ORI.P3 .................................. PL34Phụ lục 4.5 Phổ DEPT của ORI.P3 ........................................................ PL35
Phụ lục 4.6 Phổ DEPT giãn r ộng của ORI.P3 ........................................ PL36
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 18/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL1- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Chương 1: MỞ ĐẦU
1.1 LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI
Y học cổ truyền và y học hiện đại ngày nay đã có sự kết hợp rất tốt trongviệc điều trị một số loại bệnh. Trong thế giới tự nhiên có nhiều loài thực vậtchứa các hoạt chất với công dụng chữa bệnh hữu hiệu, đã từng được y học hiệnđại xác thực và cũng có nhiều loài là ứng viên cần được nghiên cứu để bổ sungvào kho tàng dược liệu. Hơn nữa điều trị bằng thảo dược chứa các hoạt chất tựnhiên hiện nay đang là một hướng ứng dụng tích cực, được khuyến khích trong
y học Việt Nam cũng như thế giới vì khả năng chữa bệnh ít độc hại và chi phíkhông quá lớn.
Gần nửa thế kỷ nay, việc nghiên cứu các hợp chất thiên nhiên để làm thuốcđã có những bước phát triển mạnh mẽ nhờ những phương pháp mới, tiên tiếnhơ n r a đời. Các phương pháp sắc ký, sắc ký điện di, sắc ký lỏng cao áp…đã trởthành những công cụ đắt lực trong việc tách các hoạt chất từ sinh vật.
Các phương pháp phân tích hiện nay như quang phổ hồng ngoại (IR), khối phổ (MS), cộng hưởng từ hạt nhân (NMR), phổ hấp thụ quang (UV-Vis), nhiễuxạ tia X…đã giúp xác định được chính xác cấu trúc hóa học của các hợp chấtthiên nhiên một cách nhanh chóng. Nhờ vậy một số hợp chất mới từ sinh vật
ngày nay càng được phát hiện nên cung cấp cho y học nhiều loại thuốc mới cógiá trị trên cơ sở hiện đại hóa y học cổ truyền của ông cha.
Núc nác là một loài cây thân gỗ, cây có thể mọc hoang hoặc được trồngđể làm thuốc, có thể tìm thấy ở hầu khắp các tỉnh thành của nước ta. Từ xưa, nóđã được ông cha ta sử dụng như một vị thuốc để chữa trị các loại bệnh như vàngda, mẩn ngứa, ban sởi, viêm họng, ho, đau dạ dày. Ngày nay trên thế giới đã cómột số công trình nghiên cứu về thành phần hóa học của cây Núc nác, cho thấycác nhóm hợp chất hữu cơ chủ yếu của cây là các flavonoid, tannin, phenolic,
saponin và lượng vết alkaloid,... Ngoài ra các nghiên cứu về hoạt tính sinh họccủa hầu hết các bộ phận trên cây đã được công bố có các hoạt tính như khángviêm, kháng oxy hóa, kháng khuẩn, kháng giun, kháng các tác nhân gây đột
biến gen,...Vì những lý do trên, việc nghiên cứu, khảo sát thành phần hóa họccủa cây Núc nác ở Việt Nam là một vấn đề cần thiết, nên chúng tôi lựa chọn và
thực hiện đề tài tốt nghiệp “Khảo sát thành phần hóa học và định lượng
flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác Oroxylum indicum (L.)Vent.”.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 19/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL2- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
Phân lập được ít nhất 2 hợp chất tinh chế và xác định cấu trúc hợp chất.
Định lượng flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác.
1.3 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU
Đối tượng nghiên cứu: Vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L.)
Vent.) mọc ở huyện Thoại Sơn, tỉnh An Giang.
Phạm vi nghiên cứu: Cao Dichloromethane của vỏ thân cây Núc nác
(Oroxylum indicum (L.) Vent.).
1.4 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
Ý nghĩa thực tiễnTìm hiểu về công dụng của cây Núc nác trong y học cổ truyền Việt Nam.
Nghiên cứu nguồn nguyên liệu tự nhiên có tiềm năng ứng dụng làm thuốc.
Ý nghĩa khoa học
Cung cấp thêm thông tin về đặc điểm nhận dạng, khu vực phân bố, phương pháp tách chiết, thành phần hóa học của cây Núc nác.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 20/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL3- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Chương 2: TỔNG QUAN
2.1 ĐẶC TÍNH THỰC VẬT
2.1.1
Giới thiệu cây Núc nácHọ Bignoniaceae, còn gọi là họ chùm ớt, là một họ thực vật có hoa có
khoảng 116-120 chi, 650-750 loài. Các thành viên thuộc họ này thường là cácloài thân gỗ và cây bụi, rất hiếm các cây thân leo hay thân thảo. Chúng đượctìm thấy trên khắp thế giới, nhưng phân bố nhiều nhất ở vùng nhiệt đới và cận
nhiệt đới như Nam Mỹ, Tây Á, Nam Á, Đông Nam Á [1].
Núc nác có tên khoa học là Oroxylum indicum (L.) Vent. thuộc chi
Oroxylum, họ Bignoniaceae. Loài này được L. Vent miêu tả lần đầu tiên vào
năm 1877. Các bộ phận khác nhau của cây có các tên riêng như vỏ thân câyđược gọi là nam hoàng bá, hạt được gọi là mộc hồ điệp,... Nó được tìm thấy ởmột số quốc gia châu Á như Ấn Độ, Trung Quốc, Myanmar, Philippin, Thái
Lan, Đài Loan, Campuchia, Nepal, Indonesia, Malaysia, Nhật Bản. Ở Việt Nam
Núc nác có thể được tìm thấy ở hầu khắp các tỉnh thành từ bắc vào nam.
Tên nước ngoài: Tatelo, Karamkanda, saune tatal (Nepali); Ka-pa,
Sonapatha (Ấn Độ) [1].
2.1.2
Phân loại khoa học Giới: Plantae.
Ngành: Angiosperms.
Lớp: Eudicots.
Phân lớp: Asterids.
Bộ: Lamiales.
Họ: Bignoniaceae. Chi: Oroxylum.
Loài: O. indicum (L.) Vent.
2.1.3
Mô tả thực vật
Thân: là loài thân gỗ có kích cỡ trung bình cao khoảng 8-12 m. Thân nhẵn,
ít phân cành, vỏ cây màu xám tro, mặt trong màu vàng.
Lá: xẻ 2-3 lần lông chim.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 21/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL4- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Hoa: màu nâu đỏ sẫm mọc thành chùm dài ở ngọn thân. Đài hoa hình ống,
cứng, dày, có 5 khía nông. Tràng hình chuông, phình rộng, có 5 thùy họp thànhhai môi, 5 nhị, có chỉ nhị có lông ở gốc. Đĩa mật có 5 thùy rõ, cao 4-5 mm,
đườ ng kính 12-14 mm.
Quả: dài, dẹp, dạng lưỡi kiếm nhọn hai đầu, mở vách, van song song với
vách, dài 40-120 cm, rộng 5-10 cm.
Hạt: Hạt dài 4-9 cm, rộng 3-4 cm, kể cả cánh mỏng bao quanh.
Hoa nở về đêm, thụ phấn nhờ dơi, côn trùng. Mùa hoa tháng 2-4 (trướckhi ra lá), mùa quả tháng 10-11; có khi vẫn thấy hoa quả quanh năm. Các quảchín vẫn ở trên cây khá lâu vào mùa khô khi cây rụng hết lá.
HÌNH 2.1 Quả và lá Núc nác
HÌNH 2.2 Thân và hoa Núc nác
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 22/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL5- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
2.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ MẶT DƯỢC TÍNH CỦA CÂY NÚC NÁC2.2.1
Theo kinh nghiệm dân gian
Núc nác một loại dược liệu quan trọng trong y học cổ truyền của một số
nước Nam Á, Đông Nam Á, Trung Quốc. Nó là loại dược liệu thông dụng trong phương pháp Ayurveda của Ấn Độ. Ở Ấn Độ các bộ phận rễ, lá và vỏ thân cây
có thể được sử dụng riêng lẻ hoặc phối hợp với các vị thuốc khác để điều trị bệnh. Theo phương pháp Ayurveda dược liệu này dùng để điều trị một số loại bệnh rối loạn hoặc dùng như một loại thuốc bổ. Y học cổ truyền Trung Quốc sửdụng nó để điều trị các bệnh rối loạn đường tiêu hóa như tiêu chảy, kiết lỵ và
bệnh viêm khớp. Ở vùng phía Bắc và Tây Bắc Thái Lan, quả và hoa của câyđược sử dụng như một loại thực phẩm hằng ngày [1]. Trong Y học cổ truyềnnước ta hai bộ phận chính được sử dụng làm thuốc của Núc nác là vỏ thân cây
(tên dược liệu là nam hoàng bá) và hạt khô (tên dược liệu là mộc hồ điệp).
Nam hoàng bá :
+ Thu hái: vỏ Núc nác có thể thu hoạch gần như quanh năm, tốt nhất vào
mùa xuân, hạ. Thường đẽo vỏ trên cây còn sống, ít nơi hạ cây. Vỏ Núc nác màu
xám tro, mặt trong khi còn tươi có màu vàng nhạt, không mùi, vị đắng, hơi hắc.
+ Công dụng: thanh nhiệt lợi thấp, tiêu thũng giải độc. Chữa trị viêm gan
do nhiễm trùng, vàng da, viêm bàng quang, yết hầu sưng đau, ung nhọt lở loét.
Mộc hồ điệp :
+ Thu hái: thu hoạch hạt vào thời điểm cuối thu sang đông, hái lấy quảchín, phơi khô, mổ lấy hạt rồi tiếp tục phơi khô, sau đó bảo quản sử dụng dần.
Thường dùng những hạt khô, màu trắng, còn nguyên là tốt nhất.
+ Công dụng: mộc hồ điệp có công dụng nhuận phế, thanh phế nhiệt, lợiyết hầu, hòa vị, sinh cơ. Chữa trị ho do phong nhiệt, ho gà (bách nhật khái), ho
do lao, cổ họng sưng đau, khan tiếng, viêm phế quản cấp và mạn tính, viêm
amidan, đau vùng gan, dạ dày, vết thương không liền miệng, dị ứng ngoài da.
2.2.2
Các hoạt tính sinh học của Núc nác đã được nghiên cứu
Có nhiều thử nghiệm hoạt tính sinh học trên các bộ phận khác nhau của
cây đã được báo cáo (các thử nghiệm được trình bày cụ thể trong bảng 2.1).[2]
Hoạt tính kháng oxy hóa được thể hiện trên tất cả các bộ phận của cây. Các hoạt
tính kháng khuẩn được thử nghiệm thấy trên phần rễ và vỏ thân cây. Các nghiêncứu về hoạt tính kháng giun, kháng khối u, điều chỉnh hệ miễn dịch đã đượcthực hiện trên vỏ rễ. Hoạt tính kháng viêm được thực hiện trên lá và vỏ thân,trong k hi các hoạt tính kháng tác nhân gây độc gan và kháng các tác nhân gây
đột biến gen đã được nghiên cứu trên lá và quả. Hoạt tính ức chế enzym α-
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 23/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL6- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
glucosidase được thực hiện trên lõi thân cây [10]. Những nghiên cứu trên cho
thấy một tiềm năng to lớn về việc tách chiết các hợp chất có hoạt tính sinh họctrong cây có thể ứng dụng vào việc điều trị các loại bệnh sau này.
Bảng 2.1 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học trên các bộ phận của Núc nác [2, 10]
STT Hoạt tính nghiêm cứu Bộ phận thưc vật Cao chiết
1 Kháng oxy hóa(antioxidantion)
Vỏ thân Ethyl acetate
Chlorofrom
Methanol
Ethanol
Thân Methanol
Lá Methanol
Rễ Methanol
Hạt Ethanol
Nước
2 Kháng khuẩn (antimicrobial) Vỏ rễ Ethyl acetate
Methanol
Vỏ thân Ethyl acetate
Methanol
3 Kháng giun (anthelminthic) Vỏ rễ -4 Kháng tác nhân gây đột biến
(antiulcer)Vỏ thân Ethanol
Petroleum ether
n-Butanol
5 Kháng viêm
(anti-inflammtory)
Lá Nước
Vỏ thân Nước
Ethanol
6 Kháng tác nhân gây độc gan
(antihepatotoxic)
Lá Ethanol
7 Kháng ung thư (Anticancer) Quả
Vỏ thân
Methanol
Ethanol
Nước
8 Bảo vệ dạ dày(Gastroprotecttive)
Vỏ rễ n-Buthanol
9 Kháng đột biến(antimutagencity)
Quả Methanol
10 Ức chế α-glucosidase
(α-glucosidase inhibitory)
Lõi thân Methanol
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 24/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL7- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
2.2.3 Nghiên cứu trong y học và thử nghiệm lâm sàng
Theo mục 19, khoảng B, quyết định số 154-BYT/QG về việc “Bổ sungdanh mục thuốc, hóa chất dược dụng, hóa chất sát côn trùng, diệt côn trùng
dược liệu thống nhất trong toàn ng ành y tế hai năm 1974-1975” ngày 9/4/1974,
viên uống Núc nác (Nunaxin) 0,25 g được bào chế từ flavonoid toàn phần trong
vỏ thân cây Núc nác, chính thức được lưu hành trong hai năm 1974-1975 dướidạng thuốc thành phẩm để nghiên cứu, với các công dụng điều trị mày đay vàmẩn ngứa.
2.3 TỔNG HỢP KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓAHỌC CỦA CÂY NÚC NÁC2.3.1 Các nghiên cứu trong nước
Năm 2012 nhóm tác giả Nguyễn Thị Thanh Mai, Nguyễn Trung Nhân, Nguyễn Xuân Hải, Huỳnh Ngọc Nghiêm Thủy và Byung Sun Min đã có côngtrình nghiên cứu về thành phần hóa học của lõi thân cây Núc nác. Kết quả chothấy đã phân lập và nhận danh được 12 hợp chất là oroxylin A, oroxyloside,
hispidulin, apigenin, ficusal, balanophonin, salicylic acid, p-hydroxybenzoic
acid, protocatechuic acid, isovanillin, β-hydroxypropiovanillon và 2-(1-
hydroxymethylethyl)-4H,9H-naphtho[2,3-b] furan-4,9-dione [10].
Năm 2013 nhóm tác giả Nguyễn Thị Thu Hương, Nguyễn Tiến Công,
Nguyễn Vũ Mai Trang, Nguyễn Thị Minh Trang đã công bố 4 hợp chất tìmđược trong lá cây Núc nác bao gồm chrysin, hispidulin, baicalein, oroxylin A
[9].
2.3.2
Các nghiên cứu ngoài nước
Qua các tài liệu đã công bố từ năm 1992 cho tới nay (về thành phần hóahọc của loài Oroxylum indicum (L.) Vent.), các nhà hóa học trên thế giới đã tách
được hơn 41 hợp chất từ loài Oroxylum indicum (L.) Vent. Có thể tạm chia
thành 3 nhóm chính: flavonoid, glycoside và nhóm các hợp chất khác. Vỏthân cây và lá có chứa nhiều các flavonoid như chrysin, oroxylin A, baicalien,
oroxyloside methyl ester, chrysin-7-O-methyl glucoside. Trong hạt của câyđược báo cáo có chứa ellagic acid. Phần vỏ rễ được báo cáo có chứa chrysin,
baicalein, biochanin A và acid ellagic. Oroxylin A, chrysin, triterpene
carboxylic acid và ursolic acid được tìm thấy trong phần vỏ quả [2, 10].
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 25/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL8- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
2.3.3 Tổng hợp thành phần hóa học đã được nghiên cứu trên loài Núcnác (Oroxylum indicum (L.) Vent.)
Các hợp chất đã được chiết tách từ loài Oroxylum indicum (L.) Vent. được
trình bày ở Bảng 2.2.
Bảng 2.2 Thành phần hóa học đã công bố của loài Oroxylum indicum (L.) Vent [1, 2,10]
TT
Công thức, tên gọi CTPT(M amu)
Nhiệtđộ
nóngchảy(oC)
Flavonoid
1
Baicalein
C15H10O5
(M = 270,24
amu)
263,7
2
Chrysin
C15H10O4
(M = 254,24
amu)
286
3
Teocochrysin
C16H12O4
(M = 268 amu)-
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 26/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL9- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
4
Scutellarein
C15H10O6
(M = 297 amu)
300
5
Oroxylin A
C16H12O5
(M = 284 amu)197
6
Apigenin
C15H10O5
(M = 270 amu)-
7
Luteolin
C18H16O6
(M = 328 amu)-
8
Galangin
C15H10O5
(M = 270 amu)-
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 27/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 28/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL11- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
14
6 - Hydroxyluteolin
C15H10O7
(M = 302 amu)284
15
8,8-bisBaicalein
C30H18O10
(M = 538 amu) 238
Terpenoid
16
Ursolic acid
C30H48O3
(M = 456 amu)292
17
-Sitosterol
C29H50O
(M = 414 amu)142
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 29/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL12- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
18
Lupeol
C30H50O(M = 426 amu)
218
19
2 -Hydroxylupeol
C30H50O2
(M = 440 amu)-
20
Betulinic acid
C30H48O3
(M = 456 amu)281
21
Friedeli
C30H50O
(M = 426 amu)246
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 30/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL13- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Glycoside
22
Oroxyloside methy ester
C23H27O10
(M = 463 amu)201
23
Baicalein-7-O-diglucoside
C21H20O15
(M = 416 amu)-
24
Chrysin-7-O-diglucoside
C21H20O14
(M = 512 amu)-
25
Chrysin-6-C--D-glucopyranosyl-8-O--D-
glucopyranoside
C28H30O14
(M = 615 amu)-
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 31/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL14- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
26
Baicalein-7-O-D-glucuronopyranosyl-(1-3) [-
D-glucopyranosyl-(1-6)] --Dglucopyranoside
C32H37O21
(M = 769 amu)-
27
Baicalein-7-O-glucoside
C21H20O10
(M = 432 amu)-
28
Scutellarein-7-O-glucoside
C21H20O11
(M = 448 amu)-
29
Chrysin-7-O-glucuronide
C21H18O11
(M = 446 amu)-
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 32/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL15- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
30
Chrysin-6-C--D-glucopyranosyl-8-C- -L-
arabinopyranoside
C26H28O12
(M = 580 amu)-
31
Chrysin-6--D-glucopyranosyl-8-O--D-
glucoronopyranoside
C28H30O16
(M = 622 amu)-
Alkaloid
32
Adenisine
C10H13 N5O4
(M = 267 amu)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 33/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL16- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
33
Echinulin
C29H39 N3O2
(M = 461
amu)
-
Các hợp chất khác
34
2-Methyl-6-phynyl-4H-pyran-4-one
C12H10O2
(M = 186 amu)81,8
35
Methylsulfonylmethane
C2H6O2S
(M = 94 amu)109
36
Ellagic acid
C14H6O8
(M = 302 amu)>=350
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 34/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL17- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
37
Balanophonin
C20H22O6
(M = 358 amu)
38
Salicylic acid
C7H6O3
(M = 138 amu)-
39
Protocatechuic acid
C7H6O4
(M = 155 amu)-
40
Isovanillin
C8H8O3
(M = 153 amu)-
41
Mellin
C10H9O3
(M = 177 amu)-
2.4
NHÓM HỢP CHẤT FLAVONOID
Qua các tài liệu trên, nhận thấy nhóm hợp chất flavonoid là nhóm hợp chất
chính trong vỏ thân cây cũng như các bộ phận khác của Núc nác.
2.4.1 Flavonoid
Flavonoid (hoặc bioflavonoid) (bắt nguồn từ “flavus” tiếng Latin nghĩa
là màu vàng, màu của flavonoid trong tự nhiên) là 1 loại chất chuyển hóa trunggian của thực vật. Tuy nhiên một số flavonoid có màu xanh, tím đỏ và cũng có
một số khác lại không có màu.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 35/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL18- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Về mặt hóa học, flavonoid là những hợp chất có cấu trúc chung chứa môt
khung cơ bản có 15C, gồm 2 vòng phenyl (A và B) và một vòng pyran (C), có
thể viết tắt là C6-C3-C6:
HÌNH 2.3 K hung cơ bản của nhóm hợp chất flavonoid
2.4.2 Hoạt tính dược lý của flavonoid
Các chất flavonoid là những chất oxy hóa chậm, có thể ngăn chặn quá trìnhoxy hóa của các gốc tự do là nguyên nhân làm cho tế bào hoạt động khác thường.Các gốc tự do sinh ra trong quá trình trao đổi chất thường là các gốc tự do nhưOH•, ROO• là các yếu tố gây biến dị, huỷ hoại tế bào, gây ung thư, tăng nhanhsự lão hoá). Các flavonoid còn có khả năng tạo phức với các ion kim loại nêncó tác dụng như những chất xúc tác ngăn cản các phản ứng oxy hoá mà các kim
loại tạo ra.
Hyaluronidase là enzym làm tăng tính thấm của mao mạch, khi thừa
enzym này sẽ xảy ra hiện tượng xuất huyết dưới da. Flavonoid ức chế sự hoạtđộng của Hyaluronidase, vì thế các flavonoid có thể cải thiện tình trạng trên.
Những nhà nghiên cứu cũng đã chỉ ra những thực phẩm giàu flavonoid có
tác động tốt đối với những người có nguy cơ cao về tim mạch. Flavonoid làm bền thành mạch, được dùng trong các trường hợp rối loạn chức năng tĩnh mạch,
giảm hay suy yếu tĩnh mạch, rối loạn tuần hoàn võng mạc.
Flavonoid còn có tác dụng chống độc, làm giảm thương tổn gan, bảo vệ
chức năng gan. 2.4.3 Quy trình sinh tổng hợp flavonoid
Hầu hết các flavonoid đều chứa một dị vòng thơm được hình thành từ sựtác kích thân hạch theo kiểu phản ứng Michael của nhóm – OH phenol của vòng
A vào ketone bất bão hòa tạo ra flavanone. Flavanone có thể cho ra nhiều cácdẫn xuất dựa trên khung cơ bản đó, ví dụ: f lavone, flavonol, anthocyanidin và
catechin [1].
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 36/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL19- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Sơ đồ 2.1 Quy trình sinh tổng hợp f lavonoid
flavone synthase IIO2, 2-oxo-glutarate
flavone synthase IIO2, NADPH
R’ = H, R’’ = H : galagin R’ = H, R’’ = OH : kaempferol R’ = OH, R’’ = OH : quercetin
R’ = H, R’’ = H: chrysin R’ = OH, R’’ = OH: luteolin R’ = H, R’’ = OH: apigenin
O2, 2-oxo-glutarate
Flavone-3-hydroxylase
flavonol synthaseO2, 2-oxo-glutarate
R = H, R’= H: cinnamol CoA R = H, R’= OH: p-hydroxycinnamoyl CoAR = OH, R’= OH: 3,4-hydroxycinnamoyl CoA
3X
chalcone isomerase
Chalcone
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 37/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL20- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Chương 3: THỰC NGHIỆM
3.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ
3.1.1
Nguyên liệu Mẫu thực vật được dùng trong đề tài là vỏ thân cây Núc nác (trong đông
y gọi là Nam hoàng bá) được thu hoạch ở vùng núi Bà Thê thuộc xã Vọng Thê,huyện Thoại Sơn, tỉnh An Giang.
Thời gian thu mẫu: tháng 01/2014.
3.1.2
Xử lý mẫu nguyên liệu Mẫu nguyên liệu sau khi thu hoạch được rửa sạch, loại bỏ phần tạp, phơi
khô trong bóng râm, sau đó sấy lại ở 60C. Vỏ thân cây Núc nác sau khi sấy
được xay thành bột mịn. Đây là nguyên liệu dùng trong đề tài. 3.1.3 Hóa chất sử dụng
Dung môi hữu cơ : Methanol (MeOH), Chloroform (CHCl3), Ethanol
(EtOH), Dicloromethane (CH2Cl2), n-Hexane (Hex), Ethyl acetate (EtOAc),
Acetone. Các dung môi này đều là hóa chất công nghiệp của hãng Chemsol.
Hóa chất khác: dung dịch AlCl3 (5%) trong Ethanol, muối Na2SO4.
Silica gel 60 của hãng Merck .
3.1.4 Thiết bị chính
Máy cô quay chân không Heidolph.Bản silica gel 60 F254 Merck tráng sẵn.
Đèn UV.
Cân phân tích GR-200 và cân kỹ thuật GM 612.
Tủ sấy Ecocell.
Máy đo điểm chảy Electrothermal 9100 (U.K).
Bếp điện dùng để nướng bản mỏng Blacker®.
Bể cách thủy.
Các loại cột sắc ký.
Các thiết bị dùng để ly trích: Becher 100 mL, 250 mL, 500 mL, 1000 mL.
Bình lóng 500 mL, 1000 mL.
Ống đong 10 mL, 100 mL, 1000 mL.
Bình cô quay loại 50 mL, 250 mL, 500 mL, 1000 mL.
Phễu, đũa thủy tinh, giấy lọc.
Các thiết bị để ghi phổ:
Máy quang phổ UV-Vis_6800. Phổ MS ghi trên máy 1100 series LC/MS Tra p Agilent.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 38/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL21- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phổ 1H-NMR, 13C- NMR kết hợp với phổ DEPT- NMR 135 và 90, phổ
HSQC, HMBC ghi trên máy cộng hưởng từ hạt nhân Bruker Avance ở tần số500 MHz cho 1H-NMR và 125 MHz cho phổ 13C-NMR.
3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.1
Phương pháp chiết xuấtChiết là phương pháp dùng một dung môi (đơ n hay hỗn hợ p) để tách lấy
một chất hay một nhóm các chất từ hỗn hợ p cần nghiên cứu.
Các phương pháp chiết rắn-lỏng, lỏng-lỏng hoặc kết hợp cả hai thườngđược sử dụng.
Trong các phương pháp trên có thể ứng dụng kết hợp đun nóng (chiếtnhiệt độ cao, chiết tuần hoàn (sử dụng hệ thống soxhlet), chiết có sự trợ giúp
của vi sóng, sóng siêu âm, tùy nhu cầu cần lấy những hợp chất mà có thể dùng
phương pháp thích hợp.Phương pháp chiết rắn-lỏng sử dụng trong đề tài này là phương pháp
chiết ngâm dầm (maceration). Kỹ thuật này không đòi hỏi thiết bị phức tạp, có
thể dễ dàng thao tác với một lượng lớn mẫu cây. Ngâm nguyên liệu trong một bình chứa thủy tinh hoặc bằng thép. Ngoài ra để chiết flavonoid toàn phần vớihiệu suất chiết cao, đề tài còn sử dụng phương pháp chiết trực tiếp có sự trợgiúp của sóng siêu âm.
Phương pháp chiết lỏng-lỏng dùng điều chế các loại cao, sử dụng bình
lóng để lắc chiết. 3.2.2 Phương pháp phân lập các hợp chất Các phương pháp chung được áp dụng để phân lập những hợp chất sạch
chủ yếu là các phương pháp sắc ký bao gồm sắc ký cột nhanh khô, sắc ký cột
hở, sắc ký chớ p nhoáng với sự kết hợ p sắc ký lớp mỏng để theo dõi quá trình
sắc ký. Ngoài ra, đề tài còn sử dụng phương pháp sắc ký lớp mỏng điều chế và phương pháp kết tinh trong dung môi thích hợp.
3.2.3 Phương pháp khảo sát và xác định cấu trúc của các hợp chất Các chất tinh khiết phân lập ra sẽ được xác định những hằng số lý hoá đặc
trưng như: màu sắc, R f , nhiệt độ nóng chảy, tan tốt trong những dung môi nào…
Sau đó để xác định cấu trúc các hợp chất sẽ sử dụng các phương pháp
phổ hiện đại như: phổ khối lượng (Mass Spectroscopy), phổ cộng hưởng từ hạtnhân một chiều (Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy, 1D-NMR), phổcộng hưởng từ hạt nhân hai chiều (Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy,
2D-NMR) tùy theo từng hợp chất.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 39/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 40/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL23- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
3.2.6 Nguyên tắc định lượng flavonoid bằng phương pháp quang phổUV-vis
Rút chính xác 1 mL dung dịch mẫu cho vào ống nghiệm. Sau đó thêm 1
mL AlCl3/EtOH (5%) vào ống nghiệm chứa dung dịch mẫu, dung dịch lúc này
có màu xanh lục đậm, thêm 2 mL MeOH để pha loãng phức màu. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút sau đó tiến hành đo độ hấp thụ của phức màu.
Chú ý: bịt kín ống nghiệm trong quá trình ủ, vì MeOH dễ bay hơi trongquá trình ủ nên có thể làm sai lệch nồng độ.
3.2.7 Phương pháp chọn bước sóng định lượng Để xác định bước sóng thích hợp cho phương pháp, tiến hành quét bước
sóng (200-1000 nm) cho 6 mẫu dung dịch bao gồm 5 mẫu dung dịch của chất
đối chiếu đã được tạo phức với AlCl3/EtOH (5%) với nồng độ tăng dần và 1
mẫu dung dịch chất đối chiếu không tạo phức AlCl3/EtOH (5%) có nồng độ 500mg/L. Mẫu trắng để so sánh là dung dịch MeOH. Bước sóng thích hợp là bướcsóng mà ở đó dung dịch chất đối chiếu không hấp thụ ánh sáng, ngược lại dung
dịch phức hấp thụ tốt và có khoảng tuyến tính thích hợp giữa các nồng độ dungdịch.
3.2.8 Phương pháp xác định độ lặp lại Để xác định độ lặp lại của phương pháp tiến hành với 6 thí nghiệm, mỗi
thí nghiệm thực hiện theo quy trình chiết flavonoid toàn phần như trên để có
dung dịch flavonoid toàn phần. Tạo phức với AlCl3/EtOH (5%) và tiến hành đomật độ quang. Tính độ lệch chuẩn tương đối của các phép đo để đánh giá độ lặplại của phương pháp.
3.2.9 Phương pháp xây dựng đường chuẩn Tiến hành pha một dãy dung dịch đối chiếu đối chiếu với nồng độ chính
xác và có khoảng tuyến tính thích hợp. Tạo phức màu với dung dịch AlCl3/EtOH
(5%) tiến hành đo độ hấp thụ quang. Sử dụng phần mềm Excel để vẽ đồ thị
đường chuẩn và tính toán các thông số liên quan.
3.2.10 Phương pháp xác định giới hạn định lượng Xác định LOD Để tiến hành xác định LOQ tiến hành chuẩn bị các dung dịch mẫu trắng
bằng cách lấy vào 8 ống nghiệm: cho vào các ống nghiệm 3 mL MeOH + 1 mL
AlCl3/EtOH (5%), ủ khoảng 30 phút ở nhiệt độ phòng thì đem đi đo độ hấp thụ
quang của dãy dung dịch trên (với dung dịch so sánh là MeOH). Tính độ lệchchuẩn của 8 thí nghiệm, sau đó tính giới hạn định lượ ng bằng công thức sau:[7]
Công thức tính giớ i hạn định lượ ng:
LOQ = 10.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 41/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL24- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Trong đó:
SD : độ lệch chuẩn của các kết quả thí nghiệm trên. a: hệ số của phương trình đường chuẩn (y = ax + b).
Xác định LOL
Xác định bằng cách nới rộng nồng độ ở điểm trên của đường chuẩn chođến khi tương quan giữa nồng độ và độ hấp thụ quang không còn tuyến tínhnữa. Giới hạn LOL được xác định bằng giá trị nồng độ cao nhất của chất đốichiếu vẵn còn tuyến tính so với phương trình đường chuẩn.
3.2.11 Xác định độ đúng của phương pháp Để xác định độ đúng, thực hiện với một dung dịch mẫu đối chiếu có nồng
độ chính xác. Sau đó tiến hành tạo phức và đo độ hấp thụ quang lặp lại 6 lần.
Từ kết quả 6 lần lặp lại xác định hiệu suất thu hồi của phương pháp. Nếu hiệu
suất thu hồi nằm trong khoảng 100%5% thì phương pháp không mắc lỗi hệthống.
3.2.12 Phương pháp định lượng flavonoid toàn phần Hàm lượng flavonoid toàn phần được tính bằng cánh chiết dung dịch
flavonoid toàn phần theo quy trình chiết có sự hỗ trợ của siêu âm. Sau đó điềuchỉnh để nồng độ dung dịch vào khoảng tuyến tính, tạo phức với AlCl3/EtOH
(5%) và đo độ hấp thụ quang. Kết quả tính theo hàm lượng chất đối chiếu trong
1 gam khối lượng mẫu dược liệu khô tuyệt đối.
3.3
THỰC NGHIỆM CHIẾT XUẤT, ĐIỀU CHẾ CAO THÔ TỪ VỎTHÂN CÂY NÚC NÁC
Vỏ thân cây Núc nác phơi khô, xay nhuyễn thành bột (9,2 kg) được tậntrích với MeOH bằng phương pháp ngâm dầm, lọc bỏ bã, phần dịch chiết được
cô quay và thu hồi dung môi dưới á p suất kém. Thực hiện nhiều lần thu đượccao MeOH dạng sệt có khối lượng 1,6 kg. Cao MeOH hòa tan trong một lượng
nước vừa đủ, sau đó được chiết lần lượt với các dung môi theo thứ tự độ phâncực tăng dần: n-Hexane, Dichloromethane, Ethyl acetate.
Lọc lấy phần dịch tan sau khi chiết với n-Hexane đem cô quay thu hồidung môi dưới áp suất kém thu được cao n-Hexane có khối lượng 33,54 gam.
Phần không tan trong n-Hexane tiếp tục được chiết với Dichloromethane.
Lọc lấy phần dịch tan sau khi chiết đem cô quay thu hồi dung môi dưới áp suấtkém thu được cao Dichloromethane có khối lượng 110,85 gam.
Phần không tan trong Dichloromethane tiếp tục được chiết với Ethyl
acetate. Lọc lấy phần dịch tan sau khi chiết đem cô quay thu hồi dung môi dướiáp suất kém thu được cao Ethyl acetate có khối lượng 153,35 gam.
Phần dịch nước còn lại được đun cách thủy làm bay hơi nước thu được cao
nước có khối lượ ng 217,43 gam.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 42/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 43/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL26- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
3.4 PHÂN LẬP, TINH CHẾ MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ VỎ THÂN CÂYNÚC NÁC
Phân đoạn cao Dichloromethane được tiền hấp phụ với 100 gam silica gel,
sấy khô và nghiền mịn, sau đó tiến hành sắc ký cột nhanh khô trên caoDichloromethane với các thông số cột như sau:
- Đường kính cột sắc ký: d = 25 cm.
- Chiều dài cột sắc ký: l = 5 cm.
- Khối lượng silica gel nhồi cột: 400 gam.
- Khối lượ ng cao Dichloromethane: 100 gam.
- Dung môi ổn định cột: n-Hexane.
Hệ dung môi giải ly n-Hexane:Ethyl acetate (H:E) với các tỉ lệ thay đổitheo hướng tăng dần độ phân cực từ H:E (100:0) đến H:E (0:100), sau đó chạytiếp hệ Ethyl acetate:MeOH (E:M) với độ phân cực tăng dần và cuối cùng là
MeOH 100%.
Dung dịch giải ly được chứa trong các lọ có dung tích 250 mL và đượctheo dõi bằng SKLM (TLC), hiện vết bằng đèn UV và bằng cách nhúng vào
thuốc thử Vaniline trong MeOH và hơ nóng trên bếp điện. Các lọ cho kết quảSKLM giống nhau (về màu vết và R f ) được gom thành một phân đoạn.
Kết quả sắc ký cột trên cao Dichloromethane thu được 12 phân đoạn
chính (OD1-OD12). Trong đó các phân đoạn OD2, OD7, OD8 cho vết chính rõ,
đẹp nên đượ c chọn để khảo sát tiế p. Kết quả sắc ký cột được trình bày chi tiết ởBảng 3.1.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 44/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL27- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Bảng 3.1 Kết quả sắc ký cột nhanh khô
Hệ dung môigiải ly
Số lọ Các phân
đoạn Khối lượ ng
(gam)Màu phân đoạn
H:E ( 9:1) 1-18 OD1 0,15 Tinh thể nâu đỏ
H:E (8:2) 19-72 OD2 2.94 Tinh thể vàng tươi
H:E (7:3) 73-84 OD3 1,58 Tinh thể màu đỏ
H:E (6:4) 85-91 OD4 2,38 Tinh thể xanh lục nhạt
92-101 OD5 5,54 Tinh thể xanh lục
H:E (5:5) 102-112 OD6 9,58 Tinh thể vàng xanh
113-150 OD7 23,96 Tinh thể vàng nâu
H:E (3:7) 151-189 OD8 13,58 Tinh thể xanh lục
199-202 OD9 7,55 Nhựa màu nâu nhạt
H:E (2:8) 203-226 OD10 3,64 Nhựa màu nâu
E 100% 227-241
OD11 1,45
Nhựa màu nâu
E:M (9:1) 241-271 Nhựa màu nâu
MeOH 100% 271-275 OD12 7,44 Nhựa màu đen
Tổng cộng 79,79
Hiệu suất thu hồi cột 77,79%
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 45/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL28- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Sơ đồ 3.2 Tinh chế cao Dichloromethane
3.4.1 Khảo sát phân đoạn OD2Phân đoạn OD2 (2,94 gam) được tiếp tục sắc ký cột với hệ dung môi giải
ly CHCl3 đến CHCl3:MeOH (8:2) thu được 4 phân đoạn OD2.1-OD2.4. Tiếptheo, phân đoạn OD2.2 tiếp tục được tinh chế bằng phương pháp sắc ký lớpmỏng điều chế thu được tinh thể màu vàng nhạt ORI.K1 (5,3 mg). ORI.K1 giảily sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi CHCl3:MeOH (95:5) có giá trị R f = 0,86.
Hấp thụ bước sóng UV 254 nm. Bản mỏng được nhúng thuốc hiện hình vết làVaniline/H2SO4 (5%) và hơ nóng trên bếp điện cho một vết tròn màu đỏ cam.
3.4.2 K hảo sát phân đoạn OD8Phân đoạn OD8 (13,58 gam) tiếp tục được tinh chế bằng sắc ký cột nhanh
khô với hệ dung môi giải ly Hex:EtOAc (9:1) đến EtOAc 100% thu được 8 phân
đoạn từ OD8.1 – OD8.8. Phân đoạn OD8.3 (1,35 gam) được tinh chế bằng sắcký cột thườ ng với dung môi giải ly CHCl3 thu được 2 chất ORI.P1 (33,23 mg)
và ORI.P2 (23,92 mg) là hai tinh thể màu vàng. ORI.P1 và ORI.P2 được giảily sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi Chlorof or m 100% có trị số R f lần lượt 0,3
và 0,1. Hấp thụ bước sóng UV 254 nm. Bản mỏng được nhúng thuốc hiện hìnhvết là Vaniline/H2SO4 (5%) và hơ nóng trên bếp điện cho vết mờ màu vàng nhạt,nhúng vào thuốc hiện hình FeCl3/MeOH cho vết màu nâu.
3.4.3
Khảo sát phân đoạn OD7Phân đoạn OD7 (23,96 g) được sắc ký cột với hệ dung môi giải ly CHCl3
100% đến CHCl3:MeOH (8:2) cho ra 9 phân đoạn OD7.1-OD7.9. Phân đoạnOD2.6 để bay hơi dung môi tự nhiên có hiện tượng kết tinh. Lọc, rửa tinh thểvới CHCl3 thu được ORI.P3 (27,99 mg). ORI.P3 giải ly sắc ký lớp mỏng với
hệ dung môi CHCl3:MeOH (9:1) có R f = 0,67. Hấp thụ bước sóng UV 254 nm.Bản mỏng được nhúng thuốc hiện hình vết là Vaniline/H2SO4 (5%) và hơ nóng
ORI.P1ORI.P2
ORI.P3
OD1 OD2 OD3 OD4 OD5 OD6 OD7 OD8 OD9
Cao chiết Dichloromethane
Sắc ký cột nhanh khô (QCC) với hệdung môi Hex-EtOAc, EtOAc, MeOH.
OD12 OD11 OD10
ORI.K1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 46/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL29- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
trên bếp điện cho vết mờ màu vàng, nhúng vào thuốc hiện hình FeCl 3/MeOH
cho vết màu đen.
3.5 ĐỊNH LƯỢNG FLAVONOID TOÀN PHẦN TRONG VỎ THÂNCÂY NÚC NÁC THEO CHẤT ĐỐI CHIẾU BAICALEIN
3.5.1
Xác định độ ẩm của dược liệu Tiến hành xác định 3 mẫu song song thu được kết quả ở Bảng 3.2
Bảng 3.2 K ết quả đo độ ẩm bột vỏ thân cây Núc nác
m (g) m1 (g) m2 (g) Xi%
Mẫu 1 65,8997 75,8886 75,2278 6,6153
Mẫu 2 67,8768 78,87467 78,1433 6,6495
Mẫu 3 83,9768 94,9754 94,2432 6,6572
=̅X+X2+X3
3 =
6,653+6,6495+6,6572
3 = 6,6406%
Độ ẩm của dược liệu là 6,6406%.
3.5.2
Chiết flavonoid toàn phần dưới sự hỗ trợ của sóng siêu âm Quy trình chiết flavonoid toàn phần được tóm tắt ở sơ đồ 3.3.
Sơ đồ 3.3 Chiết flavonoid toàn phần dưới sự hỗ trợ của sóng siêu âm.
- Cô quay loại bỏ dung môi
Bột nguyên liệu (20 gam)
- Chiết dược liệu với 150 mL dungmôi MeOH:H2O (1:1) với sự hỗtrợ của sóng siêu âm trong 30
phút.- Lọc, cô quay dung môi.
- Thêm 100 mL HCl (10%).- Thủy phân dung dịch ở nhiệt độ
85ᴑC trong 3 giờ. - Chiết với Ethyl acetate (30 mL × 3)
Dịch chiết nước
Dịch chiết Ea Dịch chiết nước (bỏ)
Flavonoid toàn phần (1,2685 gam)(hiệu suất chiết thô 6,343%)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 47/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL30- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
3.5.3 Chọn bước sóng hấp thụ thích hợp Tiến hành pha 6 mẫu dung dịch bao gồm 5 mẫu dung dịch của chất đối
chiếu Baicalein đã được tạo phức với AlCl3/EtOH (5%) với nồng độ: 200, 250,
300, 350, 400 mg/L và 1 mẫu dung dịch chất đối chiếu Baicalein không tạo phức
AlCl3/EtOH (5%) có nồng độ 500 ppm. Tiến hành quét bước sóng hấp thụ từ200-1000 nm. Mẫu trắng để so sánh là dung dịch MeOH. Thu được kết quả nhưHÌNH 3.1.
HÌNH 3.1 Quét bước sóng phức flavonoid và AlCl3
Qua kết quả trên cho thấy ở bước sóng 600 nm dung dịch Baicalein không
tạo phức với AlCl3 không hấp thụ ánh sáng. Các dung dịch phức của Baicalein
và AlCl3 có hấp thụ ánh sáng và các khoảng tuyến tính thích hợp để tiến hànhđịnh lượng.
3.5.4 Độ lặp lại của phương pháp Kết quả xác định độ lặp lại được trình bày ở Bảng 3.3.
Bảng 3.3 Kết quả độ lặ p lại của phương pháp
Mẫu Khối lượng bột (gam) ABS (600 nm) Kết quả thống kê
1 20,003 0,3203
SD = 0,0144
RSD = 4,39%
2 20,002 0,3522
3 20,002 0,3298
4 20,003 0,3213
5 20,005 0,3252
6 20,002 0,3094
Kết quả ở Bảng 3.3 cho thấy phương pháp có độ lặp lại có thể chấp nhậnđược thông qua RSD = 4,39% (< 5%).
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 48/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL31- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
3.5.5 Xây dựng đường chuẩn Tiến hành pha một dãy dung dịch đối chiếu Baicalein với nồng độ chính
xác: 100, 200, 300, 400, 500 mg/L. Tạo phức màu với dung dịch AlCl3/EtOH
(5%) và tiến hành đo độ hấp thụ quang ở bước sóng 600 nm. Kết quả được trình
bày ở Bảng 3.4.
Bảng 3.4 Kết quả xây dựng đường chuẩn theo chất đối chiếu Baicalein
Nồng độ Baicalein (mg/L)
100 200 300 400 500
ABS (600 nm) 0,1102 0,1497 0,2163 0,2421 0,2921
HÌNH 3.2 Đồ thị đường chuẩn theo chất đối chiếu Baicalein
Từ kết quả ở Bảng 3.4 và Hình 3.2 cho thấy có sự tương quan tuyến tínhgiữa nồng độ và độ hấp thụ quang. Với nồng độ của chất đối chiếu Baicalein từ
100-500 mg/L phương trình đường chuẩn thu được y = 0,0005x + 0,0652 vớihệ số tương quan R 2 = 0,9867.
3.5.6
Giới hạn phương pháp a) Giới hạn định lượng LOQ
Kết quả xác định giới hạn định lượng LOQ được trình bày ở Bảng 3.5.
Bảng 3.5 Kết quả xác định độ lệch chuẩn của mẫu trắng
STT 1 2 3 4 5 6 7 8
ABS 0,0747 0,0670 0,0699 0,0677 0,0659 0,0693 0,0678 0,0667
K ết quả thống kê SD = 0,0028 RSD =4,06%
y = 0,0005x + 0,0652R² = 0,9867
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0 100 200 300 400 500 600
A B S ( 6 0 0 n m )
Nồng độ dung dịch Baicalein tạo phức với Al3+ (mg/L)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 49/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL32- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Giớ i hạn định lượ ng LOQ của phương pháp khi dùng chất Baicalein làm
chất đối chiếu:
LOQ = 10.
= 10.
,28
,5 = 55,7 (mg/L)
b)
Giới hạn LOL:Kết quả xác định giới hạn định lượng LOQ được trình bày ở Bảng 3.6.
Bảng 3.6 Kết quả xác định nồng độ giới hạn LOL của chất đối chiếu Baicalein
Nồng độ Baicalein (mg/L)
600 700 800 900
ABS (600 nm) 0,3095 0,3186 0,3298 0,3371
HÌNH 3.3 Đồ thị xác định nồng độ giới hạn LOL theo Baicalein
Kết quả Bảng 3.5 và HÌNH 3.3 cho thấy nồng độ giới hạn LOL là 600mg/L, tại nồng độ này trở đi thì đồ thị của độ hấp thụ quang theo nồng độ không
còn tuyến tính. Như vậy khoảng tuyến tính của phương pháp xác định theo chấtđối chiếu Baicalein là khoảng từ 55,7-600 mg/L.
3.5.7 Độ đúng của phương pháp
Pha một dung dịch đối chiếu Baicalein có nồng độ chính xác 150 mg/L.
Sau đó tiến hành tạo phức và đo độ hấp thụ quang lặp lại 6 lần. Kết quả được
trình bày ở Bảng 3.7.Bảng 3.7 Kết quả xác định độ đúng của phươ ng pháp
Mẫu 1 2 3 4 5 6
ABS (600 nm) 0,1411 0,1404 0,1405 0,1465 0,1408 0,1417
Hàm lượng thuhồi (mg/L)
151.8 150,4 150,6 150,9 151,1 152,9
Phần trăm thu hồi
(%) 101,2 100,3 100,4 100,6 100,7 101,9Kết quả thống kê SD = 0,9282 RSD = 0,61%
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
A B S ( 6 0 0 n m )
Nồng độ dung dịch phức Baicalein và Al3+ (mg/L)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 50/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL33- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Tỉ lệ thu hồi nằm trong giới hạn cho phép nên phương pháp có độ đúng
đạt yêu cầu → Phương pháp không mắc sai số hệ thống.
3.5.8 Kết quả định lượng flavonoid toàn phần của vỏ thân cây Núc nác
Lấy chính xác 5 mL dung dịch flavonoid toàn phần cho vào bình định mức10 mL, thêm dung dịch MeOH:nước (1:1) đến vạch (điều chỉnh nồng độ dungdịch flavonoid toàn phần vào khoảng tuyến tính). Dung dịch này được tạo phứcvới AlCl3/EtOH (5%) và đo độ hấp thụ quang ở bước sóng 600 nm.
Từ quy trình trên, suy ra công thức tính hàm lượng flavonoid toàn phần
của vỏ thân cây Núc nác như sau:
X (mg/g) =−
(%−ℎ)× 0,1
Trong đó:
X: là hàm lượng flavonoid toàn phần. A: là độ hấp thụ quang đo ở bước sóng 600 nm. a,b: là hệ số của phương trình đường chuẩn theo Baicalein (y = ax + b). h: là phần trăm độ ẩm của dượ c liệu.
K ết quả xác định đượ c lặ p lại 3 lần và trình bày ở Bảng 3.8 đượ c biểu diễn
X = ± SD (mg Baicalein/gam).
Bảng 3.8 K ết quả định lượng flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác.
Mẫu ABS (600 nm)Hàm lượng f lavonoid toàn phần
(mg Baicalein/gam)
1 0,1955 27,9135
2 0,1929 27,3565
3 0,1931 27.3993
Giá tr ị : = 27,5564 (mg Baicalein/gam).
Giá trị độ lệch chuẩn SD = 0,3099.
Vậy hàm lượng flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác là X =27,5564±0,3099 (mg Baicalein/gam) (2,76%).
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 51/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL34- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
4.1
XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ ĐỊNH DANH HỢP CHẤT 4.1.1 Hợp chất ORI.K1
4.1.1.1
Các đặc tính của ORI.K1- Tinh thể dạng mảng, màu vàng nhạt.- Tan tốt trong hệ dung môi CHCl3:MeOH (9:1).
- Nhiệt độ nóng chảy (mp): 193-195 C, k ết tinh trong dung môi CHCl3.
- SKLM giải ly bằng CHCl3:MeOH (95:5) cho vết tròn, với màu đỏ cam
trong thuốc thử Vaniline khi hơ nóng, hấp thụ UV bướ c sóng 254 nm, giá trị R f = 0,86.
4.1.1.2 Nhận danh cấu trúc ORI.K1
Phổ khối lượng ESI-MS (negative) (Phụ lục 1.1) cho mũi ion phân tử giả m/z
= 255 amu ứng với [M-H] – và các mảnh khác phù hợp với công thức phân tử
C15H12O4 (M = 256 amu, độ bất bão hòa là 10).
Phổ 1H-NMR (DMSO_ d 6 , δH ppm, 500 MHz) (Phụ lục 1.2-1.3) cho thấy:
Một tín hiệu proton nhóm hydroxyl (– OH) có độ dịch chuyển hóa học δH
12,20 ppm (1H, s).
Bốn tín hiệu của vòng benzen có độ dịch chuyển hóa học trong khoảng δH
5,67 – 7,49 ppm:
+ Một tín hiệu tại δH 7,48 ppm (2H, d, 3 J = 7,5 Hz) chứng tỏ 2 proton nàyghép cặp với các proton ở vị trí ortho với chúng.
+ Một tín hiệu tại δH 7,37 ppm (3H, m) 3 proton này có thể nằm kề nhauvà cùng nằm trên 1 vòng thơm.
+ Hai tín hiệu mũi đôi δH 5,72 ppm (1H, d , 4 J = 1,5 Hz) và δH 5,68 ppm
(1H, d , 4 J = 2 Hz) chứng tỏ 2 proton nằm ở vị trí meta với nhau trên cùng mộtvòng thơm.
Một tín hiệu proton mũi đôi đôi δH 5,48 ppm (1H, dd, 3 J ea = 3 Hz, 3 J aa =12,5 Hz) chứng tỏ proton này có ghép cặp với 1 proton ở vị trí trục-xích đạo và1 proton ở vị trí trục-trục với với nó.
Một tín hiệu proton mũi đôi đôi δH 3,11 ppm (1H, dd , 2 J gem = 17 Hz, 3 J aa
= 12,5 Hz) chứng tỏ proton này có ghép cặp với 1 proton ở vị trí gem và một proton ở vị trí trục-trục với nó.
Một tín hiệu proton mũi đôi đôi δH 2,68 ppm (1H, dd , 3 J ae = 3 Hz, 3 J ae =
17 Hz) chứng tỏ proton này có ghép cặp với 1 proton ở vị trí trục-xích đạo (hoặcxích đạo-xích đạo) và một proton ở vị trí gem với nó.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 52/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL35- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phổ 13C-NMR (DMSO_ d 6 , δC ppm, 125 MHz) (Phụ lục 1.4-1.5) kết hợp với
phổ DEPT (Phụ lục 1.6-1.7) cho thấy trong ORI.K 1 có 11 tín hiệu tương ứngvới 13 carbon (có 4 carbon vòng benzen đối xứng) và 1 tín hiệu carbon tứ cấprất yếu. Tuy nhiên phổ MS cho thấy ORI.K1 có 15 carbon, do đó có thể giải
thích rằng tín hiệu yếu của phổ 13C- NMR là 1 tín hiệu carbon tứ cấp và 1 tínhiệu carbon không hiển thị. Các tín hiệu 13C- NMR và DEPT của ORI.K1 cho
thấy:
Một tín hiệu carbon carbonyl liên hợp (>C=O) có độ dịch chuyển hóa họcδC 193,8 ppm.
Hai tín hiệu carbon tứ cấp của vòng thơm gắn trực tiếp với o xygen
(≥C – O – ) δC 163,6 ppm; 162,4 ppm.
Bảy tín hiệu carbon methine vòng thơm (–CH=) (có hai cặp carbon tươngđương) ở các δC 128,5 ppm (2C); 128,3 ppm; 126,5 ppm (2C); 96,8 ppm; 96,1
ppm.
Hai tín hiệu carbon tứ cấp của vòng thơm (=C<) tại δC 139,1 ppm và 1 tín
hiệu rất yếu ở δC khoảng 100,0 ppm
Môt tín hiệu carbon methine kề oxygen (– OCH –) tại δC 78,0 ppm.
Một tín hiệu carbon methylene ( – CH2 –) tại δC 42,0 ppm.
Từ dữ liệu phổ ESI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR và DEPT có thể dự đoán ORI.K1là một hợp chất thuộc nhóm flavanone, cấu trúc có 3 vòng: 1 vòng thơm 4 nhóm
thế, 1 vòng thơm mang 1 nhóm thế và 1 dị vòng thơm.
HÌNH 4.1 Khung flavanone và số chỉ vị trí
Vòng A: (vòng mang 4 nhóm thế)
Phổ 1H- NMR có 1 mũi tín hiệu proton hydroxyl kềm nối ở H 12,20 ppm,
đó là proton -OH gắn vào carbon C5 khung flavanone.
Phổ HSQC cho thấy proton H 5,72 ppm (1H, d , 4 J = 1,5 Hz) tương tác với
carbon methine δC 96,1 ppm, proton H 5,68 ppm (1H, d , 4 J = 2 Hz) tương tác
với carbon methine δC 96,8 ppm và hai proton đó ghép cặp meta với nhau, do
đó 2 proton này nằm ở vị trí H6 và H8. Mặt khác, do chịu ảnh hưởng của nhóm-OH tại C5 nên H6 cộng hưởng ở vùng từ trường mạnh hơn so với H8. Vì thế,
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 53/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL36- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
tín hiệu proton ở δH 5,72 ppm là tín hiệu H8 và δH 5,68 ppm là tín hiệu H6 và 2
carbon δC 96,1 ppm; 96,8 ppm lần lượt là C8 và C6.
Phổ HMBC cho thấy 2 proton H6 và H8 đều cho tương tác với carbon bậc
4 vòng thơm tín hiệu thấp không kề oxygen ở C 100,0 ppm, vậy nên carbon C 100,0 ppm là carbon C10. Proton H6 còn tương tác với 1 carbon bậc 4 vòng thơm
kề oxygen ở C 163,6 ppm suy ra carbon này là carbon C7. Proton H8 tương tác
với carbon tứ cấp kề oxygen ở C 162,4 ppm nên carbon này là C9.
Vòng C: (dị vòng chứa Oxygen)
Phổ 13C- NMR và DEPT cho thấy một mũi carbon ở C 193,8 ppm là tín
hiệu carbon carbonyl liên hợp của khung flavanone tương ứng với C4.
Hai proton ở H 3,11 ppm (1H, dd ,
2
J gem = 17 Hz,
3
J aa = 12,5 Hz) và H 2,68 ppm (1H, dd , 3 J ae = 3 Hz, 2 J gem = 17 Hz) ghép cặp với nhau với 2 J gem = 17
Hz và trong phổ HSQC cho thấy chúng tương tác với carbon methylene ở C
42,0 ppm vì thế 2 proton và carbon này liên kết trực tiếp với nhau. Mặt khác,
trong phổ HMBC cho thấy 2 proton này tương tác với carbon carbonyl C 4, do
đó 2 proton H 3,11 ppm và 2,68 ppm là 2 proton H3 ở vị trí trục và xích đạo. và
carbon ở C 42,0 ppm là carbon C3. Ngoài ra, proton H 3,11 ppm có tương tác
với carbon methine kề oxygen C 78,0 ppm, giúp xác thực carbon C2 tương ứng
với tín hiệu C 78,0 ppm. Trong phổ HSQC cho thấy proton H 5,48 ppm (1H,dd, 3 J ae = 3 Hz, 3 J aa = 12,5 Hz) gắn trực tiếp vào carbon C2 nên proton ở H 5,48
ppm là H2.
Phân tích độ chẻ mũi của proton H2 và 2 proton H3 cho thấy chúng có ghép
cặp lẫn nhau. Proton H2 có ghép cặp với proton H3 ở H 3,11 ppm có hằng số 3 J
= 12,5 Hz (đây là hằng số 3 J aa của 2 proton ở vị trí trục-trục) nên 2 proton này
đều phải nằm ở vị trí trục. Vì vậy proton H 3,11 ppm (H3a) là proton trục và
proton H 2,68 ppm (H3e) nằm ở vị trí xích đạo.
Vòng B: (vòng mang 1 nhóm thế) Phổ HSQC cho thấy 2 proton ở H 7,48 ppm (2H, d, 3 J = 7,5 Hz) tương
tác với 2 carbon tương đương ở C 126,5 ppm. Phổ HMBC cho thấy proton nàytương tác với carbon C2, ngoài ra nó còn tương tác với 2 carbon methine tươngđương ở 128,5 ppm, 1 carbon methine ở 128,3 ppm và tương tác với chínhcarbon C 126,5 ppm. Suy ra 2 proton này là 2 proton H2 H6, carbon ở C 126,5
ppm là 2 carbon tương đương C2 C6. Vậy tín hiệu ở 128,5 ppm là 2 carbon
tương đương C3 C5 và 128,3 ppm là carbon C4’
Trong phổ HSQC 3 proton δH 7,32 ppm (3H, m) tương tác trên 2 tín hiệucarbon ở C C3 C5 và C4, do đó 3 proton này là H3 H4 H5. Phổ HMBC cho thấy
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 54/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL37- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
3 proton H3 H4 H5 có tương tác với carbon C2 C6 và 1 carbon tứ cấp vòng thơm
ở 139,1 ppm nên carbon này là carbon C1.
Qua các dữ liệu trên nhận thấy tín hiệu carbon bị thiếu là 1 tín hiệu carbon
tứ cấp gắn trực tiếp với oxygen ở vị trí C5, có thể do cường độ thấp nên bị chelẫn.
Bảng 4.1 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.K1
Vị tríC/H
1H-NMRδH ppm
(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMRδC ppm
K ết luận
5-OH 12,20 (1H, s) - – OH
2 5,48 (1H, dd, 3 J= 3 Hz, 3 J = 12,5 Hz) 78,0 =HC – O –
3a 3,11 (1H, dd , 2 J = 17 Hz, 3 J = 12,5 Hz)42,0 – CH2 –
3e 2,68 (1H, dd , 3 J = 3 Hz, 3 J= 17 Hz)
4 - 193,8 >CO
5 - Mất ≥C – O –
6 5,72 (1H, d , 4 J = 1,5 Hz) 96,8 =CH –
7 - 163,6 ≥C – O –
8 5,68 (1H, d , 4 J = 2 Hz) 96,1 =CH –
9 - 162,4 ≥C – O –
10 - 100,0 =C<
1 - 139,1 =C<
2 7,48 (1H, d, 3 J = 7,5 Hz) 126,5 – CH=
6 7,48 (1H, d,
3
J = 7,5 Hz) 126,5 – CH=3 7,37 (1H, m) 128,5 – CH=
5 7,37 (1H, m) 128,5 – CH=
4 7,37 (1H, m) 128,3 – CH=
Phổ HSQC (Phụ lục 1.8-1.10) cho thấy có đủ các tương quan giữa các
proton và carbon nối trực tiếp với nhau (1 J CH): H2→C2; H3a, H3e→C3; H6→H6
H8→C8; H2→C2; H6→C6; H3→C3; H5→C5, H4→C4. Nhờ đó có thể xác định
vị trí các proton đi cùng theo từng nhóm =CH, >CH, CH2.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 55/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL38- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phổ HMBC (Phụ lục 1.11-1.12) cho thấy các mối tương quan giữa proton
và các carbon lân cận qua 2 hoặc 3 nối hóa trị ( 2 J CH hoặc 3 J CH), các tương quantiêu biểu như sau:
Ở vòng A: H6→C7 (2 J CH) và H6→C8, C10 (3 J CH); H8→C9, C7 (2 J CH) và
H8→C6, C10 (3 J CH).
Ở vòng B: H2 H6→ C3, C5 (2 J CH) và H2 H6→ C4, C2 (3 J CH); H3 H4
H5→C2 C6 (2 J CH) và H3 H4 H5→C1, (3 J CH).
Ở vòng C: H2→C2 C6 (3 J CH); H3a→C4, C2 và H3e→C4 (2 J CH).
Bảng 4.2 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR, HSQC và HMBC của ORI.K1
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-
NMRδC ppm HSQC HMBC
5-OH 12,20 (1H, s) - - -
2 5,48 (1H, dd, J= 3; 12,5 Hz) 78,0 C2 C2, C6
3a 3,11 (1H, dd , J = 17; 12,5 Hz)42,0 C3
C4, C2
3e 2,68 (1H, dd , J= 3; 17 Hz) C4
4 - 193,8 - -
5 - Mất - -
6 5,72 (1H, d , J = 1,5 Hz) 96,8 C6 C7, C8, C10
7 - 163,6 - -
8 5,68 (1H, d , J = 2 Hz) 96,1 C8 C6, C7, C9, C10
9 - 162,4 - -
10 - 100,0 - -
1 - 139,1 - -
2 7,48 (1H, d, J = 7,5 Hz) 126,5 C2 C3, C5, C4, C2
6 7,48 (1H, d, J = 7,5 Hz) 126,5 C6 C3, C5, C4, C2
3 7,37 (1H, m) 128,5 C3 C2, C6, C1’
5 7,37 (1H, m) 128,5 C5 C2, C6, C1’
4 7,37 (1H, m) 128,3 C4 C2, C6, C1’
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 56/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL39- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Các dữ liệu phổ đã phân tích trên đây được so sánh với dữ liệu phổ của
Pinocembrin trong tài liệu tham khảo[13] ở Bảng 4.3.
Bảng 4.3 So sánh dữ liệu phổ của ORI.K1 và Pinocembrin[13].
ORI.K1 Pinocembrin
Vị tríC/H
1H-NMRδH ppm
(tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
1H-NMRδH ppm
(tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
5-OH 12,20 ( s) - 12,00 ( s) -
2 5,48 ( dd, J= 3; 12,5 Hz) 78,0 5,43 (dd , J= 3; 13 Hz) 79,2
3a 3,11 (dd , J = 17; 12,5 Hz)42,0
3,10 (dd , J= 17; 13 Hz)43,3
3e 2,68 (dd , J = 3; 17 Hz) 2,83 (dd , J = 3; 17 Hz)
4 - 193,8 - 195,8
5 - Mất - 164,3
6 5,72 (d , J = 1,5 Hz) 96,8 6,00 (d , J = 1,5Hz) 96,7
7 - 163,6 164,6
8 5,68 (d , J = 2 Hz) 96,1 6,01 (d , 4 J = 2Hz) 95,5
9 - 162,4 - 163,5
10 - 100,0 - 103,2
1 - 139,1 - 138,2
2 7,48 (d, J = 7,5 Hz) 126,5
7,40-7,47 (5H, m)
126,1
6 7,48 (d, J = 7,5 Hz) 126,5 126,1
3 7,37 (m) 128,5 128,9
5 7,37 (m) 128,5 128,9
4 7,37 (m) 128,3 128,9
Từ các dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR kết hợp với DEPT, HSQC, HMBCvà so sánh với tài liệu đã công bố[13] giúp nhận danh được ORI.K1 là
Pinocembrin (IUPAC: 5,7-dihydroxyl-2-phenylchroman-4-one)
HÌNH 4.2 Cấu trúc của ORI.K1 (Pinocembrin)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 57/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL40- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
4.1.2 Hợp chất ORI.P1 4.1.2.1
Các đặc tính của ORI.P1- Tinh thể dạng mảng, màu vàng sáng.
- Tan tốt trong dung môi CHCl3:MeOH (9:1).
-
Nhiệt độ nóng chảy (mp): 198-200C, k ết tinh trong dung môi CHCl3.- SKLM giải ly bằng CHCl3 cho vết tròn, với màu vàng nhạt mờ trong
thuốc thử Vaniline khi hơ nóng và màu nâu nhạt trong thuốc thử Fe3+, hấp thụ
UV bước sóng 254 nm. Có giá trị R f = 0,3.
4.1.2.2 Nhận danh cấu trúc ORI.P1
Phổ 1H-NMR (DMSO d 6 , δH ppm, 500 MHz) (Phụ lục 2.1-2.2) cho thấy:
Một tín hiệu proton nhóm hydroxyl kềm nối (– OH) có độ dịch chuyển hóa
học δH 12,92 ppm (1H, s).Một tín hiệu proton methoxy (– OCH3) tại δH 3,76 ppm (3H, s).
Bốn tín hiệu của vòng benzen có độ dịch chuyển hóa học trong khoảng δH
6,63 – 8,07 ppm cường độ tích phân tương ứng 7 proton, cho thấy trong cấu trúc
có 2 vòng benzen:
+ Một tín hiệu tại δH 8,06 ppm (2H, dd , 4 J = 2 và 3 J = 7 Hz) của 2 proton
có ghép cặp với các proton ở vị trí ortho và meta với chúng.
+ Một tín hiệu tại δH 7,58 ppm (3H, m) 3 proton này có thể nằm kề nhauvà cùng nằm trên một vòng thơm.
+ Hai tín hiệu mũi đơn δH 6,95 ppm (1H, s) và δH 6,63 ppm (1H, s) chứng
tỏ 2 proton này không có proton kề cận chúng.
Phổ 13C-NMR (DMSO_ d 6 , δC ppm, 125 MHz) (Phụ lục 2.3-2.4) kết hợp vớiphổ DEPT (Phụ lục 2.5-2.6) cho thấy trong ORI.P1 có 16 carbon (có 4 carbon
vòng benzen đối xứng). Trong đó có:
Một tín hiệu carbon carbonyl liên hợp (>C=O) có độ dịch chuyển hóa họcδC 180,2 ppm.
Một tín hiệu carbon methoxy ( – OCH3) tại δC 59,9 ppm.
Năm tín hiệu carbon tứ cấp của vòng thơm gắn trực tiếp với oxygen(≥C – O – ) ở δC 163,2 ppm; 157,6 ppm; 152,7 ppm; 152,5 ppm; 131,5 ppm.
Bảy tín hiệu carbon methine vòng thơm (– CH=) (có hai cặp carbon tươngđương) ở δC 131,9 ppm; 129,1 ppm (2C); 126,3 ppm (2C); 104,6 ppm; 94,4
ppm.
Hai tín hiệu carbon tứ cấp vòng thơm (=C<) tại δC 130,7 ppm; 104,3 ppm.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 58/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL41- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Từ dữ liệu phổ 1H-NMR , 13C-NMR và DEPT cho thấy ORI.P3 là
flavonone, cấu trúc có 3 vòng: 1 vòng thơm mang 5 nhóm thế,1 vòng thơmmang 1 nhóm thế và 1 dị vòng thơm.
HÌNH 4.3 Khung flavonone và số chỉ vị trí
Vòng A: (vòng thơm 5 nhóm thế)
Phổ 1H- NMR cho thấy 1 tín hiệu proton hydroxyl kềm nối (proton -OH
gắn vào C5 khung flavone) ở H 12,92 ppm. Kết hợp phổ HMBC, cho thấy proton ở H 12,92 ppm tương tác với 2 carbon bậc 4 vòng thơm kề oxygen ở C
157,7 ppm, 131,5 ppm và 1 carbon bậc 4 vòng thơm không kề oxygen ở C
104,3 ppm nên 3 carbon này lần lượt là C5, C6 và C10.
Phổ HSQC cho thấy proton ở 6,63 ppm (1H, s) gắn trực tiếp vào carbonmethine ở δC 94,4 ppm. Đồng thời, phổ HMBC cho thấy proton này tương tác
với carbon C10, C6 và 2 carbon vòng thơm gắn với oxygen ở C 152,7 ppm, 163,2
ppm. Nên proton này là proton H8, carbon 94,4 ppm là carbon C8 và 2 carbon
vòng thơm kề oxygen lần lượt là C9 (C 152,7 ppm) và C7 (C 163,2 ppm).Trong phổ HMBC tín hiệu ở H 3,76 ppm của nhóm methoxy có tương tác
với carbon C6, nên nhóm methoxy sẽ nằm ở carbon C6.
Vòng C: ( dị vòng chứa Oxygen)
Phổ HSQC cho thấy proton ở 6,95 ppm (1H, s) gắn trực tiếp vào carbonmethine ở δC 104,6 ppm. Mặt khác trong phổ HMBC cho thấy proton này cótương tác với carbon C10 và 3 carbon khác bao gồm 1 carbon carbonyl δC 182,2
ppm, 1 carbon tứ cấp vòng thơm kề oxygen ở C 163,2 ppm và 1 carbon tứ cấp
vòng thơm không kề oxygen ở C 130,7 ppm. Từ các dữ kiện trên có thể kếtluận proton ở 6,95 ppm là proton H3. Car bon carbonyl ở C 182,2 ppm là carbon
C4, carbon ở C 163,2 ppm là carbon C2 và carbon ở C 130,7 ppm là carbon C1’
của vòng B.
Xét vòng B (vòng thơm mang 1 nhóm thế)
Phổ HSQC cho thấy 2 proton ở H 8,06 ppm (2H, dd , 4 J = 2 và 3 J = 7 Hz)
tương tác vớ i 2 carbon tương đương ở C 126,4 ppm. Phổ HMBC cho thấy
proton này tương tác với carbon C2, C1, ngoài ra nó còn tương tác với 1 carbon
methine ở C 131,9 ppm và có tương tác với chính carbon C 126,4 ppm. Suy ra
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 59/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL42- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
2 proton này là proton H2 H6, carbon ở C 126,3 ppm là carbon tương đương
C2 C6.
Trong phổ HSQC 3 proton δH 7,58 ppm (3H, m) tương tác trên 2 tín hiệu
carbon ở C 131,9 ppm và 130,7 ppm. Phổ HMBC cho thấy chúng có tương tác
với carbon C2, C6, C1. Suy ra nhóm 3 proton này là H3 H4 H5 và carbon ở C
131,9 ppm là C4’ và carbon ở C 130,7 ppm là carbon tương đương C3 C5.
Bảng 4.4: Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.P1
Vị tríC/H
1H-NMRδH ppm
(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMRδC ppm
K ết luận
5-OH 12,92 (1H, s) - – OH
2 - 163,2 ≥C – O –
3 6,95 (1H, s) 104,6 =CH –
4 - 182,2 >CO
5 - 152,5 ≥C – O –
6 - 131,5 ≥C – O –
7 - 157,6 ≥C – O –
8 6,63 (1H, s) 94,4 =CH – 9 - 152,7 ≥C – O –
10 - 104,3 =C<
1 - 130,7 =C<
2 8,06 (1H, dd , 4 J = 2 Hz và 3 J = 7 Hz) 126,3 – CH=
6 8,06 (1H, dd , 4 J = 2 Hz và 3 J = 7 Hz) 126,3 – CH=
3 7,58 (1H, m) 129,1 – CH=
5 7,58 (1H, m) 129,1 – CH=
4 7,58 (1H, m) 131,9 – CH=
-OCH3 3,76 (3H, s) 59,9 – OCH3
Phổ HSQC (Phụ lục 2.10-2.11) cho thấy có đủ các tương quan giữa các
proton và carbon nối trực tiếp với nhau (1 J CH): H3→C3; H8→C8; H2→C2;
H6→C6; H3→C3; H4→C4; H5→C5. Nhờ đó có thể xác định vị trí các protonđi cùng theo từng nhóm =CH– .
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 60/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL43- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phổ HMBC (Phụ lục 2.7-2.9) cho thấy các mối tương quan giữa proton
và các carbon lân cận qua 2 hoặc 3 nối hóa trị ( 2 J CH hoặc 3 J CH), các tương quantiêu biểu như sau:
Ở vòng A: –OH→C5 (2 J CH) và – OH→C6, C10 (3 J CH); H8→C9, C7 (2 J CH)
, H8→C6, C10 (3 J CH) và H8 →C4 (4 J CH), – OCH3 →C6 (3 J CH).
Ở vòng B: H2 H6→C1 (2 J CH) và H2 H6→C4, C2 (3 J CH); H3 H4 H5→C2,
C6 (2 J CH) và H3 H4 H5→C1(3 J CH).
Ở vòng C: H3→C2, C4 (2 J CH); H3→C1, C10 (3 J CH).
Bảng 4.5 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR, HSQC và HMBC của ORI.P1
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
HSQC HMQC
5-OH 12,92 (1H, s) - - C5, C6, C10
2 - 163,2 - -
3 6,95 (1H, s) 104,6 C3 C4, C2, C1’, C10
4 - 182,2 - -
5 - 152,5 - -6 - 131,5 - -
7 - 157,6 - -
8 6,63 (1H, s) 94,4 C8 C4, C6, C7, C9, C10
9 - 152,7 - -
10 - 104,3 - -
1 - 130,7 - -
2 8,06 (1H, dd , J = 2; 7 Hz) 126,3 C2 C1, C4, C2
6 8,06 (1H, dd , J = 2; 7 Hz) 126,3 C6 C1, C4, C2
3 7,58 (1H, m) 129,1 C3 C2, C6, C1’
5 7,58 (1H, m) 129,1 C5 C2, C6, C1’
4 7,58 (1H, m) 131,9 C4 C2, C6, C1’
-OCH3 3,76 (3H, s) 59,9 -OCH3 C6
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 61/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL44- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Các dữ liệu phổ đã phân tích trên đây được so sánh với dữ liệu phổ củaOroxylin A trong tài liệu tham khảo[12] ở Bảng 4.6.
Bảng 4.6 So sánh dữ liệu phổ của ORI.P1 và Oroxylin A[12]
ORI.P1 Oroxylin A
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
1H-NMRδH ppm
(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
5-OH 12,92 (1H, s) - 13,11 (1H, s) -
2 - 163,2 - 164,9
3 6,95 (1H, s) 104,6 6,79 (1H, s) 105,8
4 - 182,2 - 183,8
5 - 152,5 - 154,1
6 - 131,5 - 132,4
7 - 157,6 - 158,0
8 6,63 (1H, s) 94,4 6,67 (1H, s) 95,0
9 - 152,7 - 154,2
10 - 104,3 - 106,1
1 - 130,7 - 132,4
2, 6 8,06 (2H, dd, J = 2; 7 Hz) 126,3 8,07 (2H, dd ) 127,4
3, 5 7,58 (3H, m)
129,17,61-7,58 (3H, m)
130,1
4 131,9 132,8
-OCH3 3,76 (3H, s) 59,9 3,89 (3H, s) 60,8
Từ các dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR kết hợp với DEPT, HSQC,HMBC và so sánh với tài liệu đã công bố [12] giúp nhận danh được ORI.P1 là
Oroxylin A (UIPAC: 5,7-dihydroxy-6-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one).
HÌNH 4.4 Cấu trúc của ORI.P1 (Oroxylin A)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 62/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL45- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
4.1.3 Hợp chất ORI.P24.1.3.1
Các đặc tính của ORI.P2- Là tinh thể màu vàng nhạt, hình kim.
- Tan tốt trong hệ dung môi CHCl3 và MeOH.
-
Nhiệt độ nóng chảy (mp): 285-286oC, kết tinh trong dung môi CHCl3.- SKLM giải ly bằng CHCl3 cho vết tròn, với màu vàng nhạt mờ trong
thuốc thử Vaniline khi hơ nóng và màu nâu nhạt trong thuốc thử Fe3+ , hấp thụ
UV bước sóng 254 nm. Có giá trị R f = 0,1.
4.1.3.2 Nhận danh cấu trúc ORI.P2
Phổ khối lượng ESI-MS (negative) (Phụ lục 3.1) cho mũi ion phân tử giả m/z
= 253 amu ứng với [M-H] – và các mảnh khác phù hợp với công thức phân tử
C15H10O4 (M = 254 amu, độ bất bão hòa của phân tử là 11).
Phổ 1H-NMR (DMSO_ d 6 , 500 MHz, δH ppm, J Hz) (Phụ lục 3.1-3.2) cho thấy:
Một tín hiệu proton hydroxyl k ềm nối ( – OH) tại H 12,73 ppm (1H, s).
Năm tín hiệu đặc trưng của các proton trên vòng thơm ( – CH=) trong
khoảng δH 5,83-8,00 ppm, trong đó có:
+ Một tín hiệu ở H 7,99 ppm (2H, dd , 4 J = 2 Hz và 3 J = 8 Hz) chứng tỏ 2
proton này ghép cặp spin với các proton ở vị trí ortho và meta trên cùng một
nhân thơm.
+ Một tín hiệu proton ở H 7,54 ppm (3H, m) chứng tỏ 3 proton có thể nằm
kề nhau và nằm cùng 1 nhân thơm.
+ Ba tín hiệu tại H 6,71 ppm (1H, s), H 6,09 ppm (1H, s) và H 5,83 ppm
(1H, s) chứng tỏ có 3 proton này không kề với proton kế cận.
Phổ 13C-NMR (DMSO_ d 6 , C ppm, 125 MHz) (Phụ lục 3.4-3.5) k ết hợp với
phổ DEPT (Phụ lục 3.6-3.7) cho thấy ORI.P2 có 11 mũi tương đương với 14carbon (trong đó có 3 cặp carbon tương đương). Tuy nhiên phổ ESI-MS cho
thấy ORI.P2 có 15 carbon nên có thể giải thích rằng 1 tín hiệu carbon khônghiển thị trên phổ 13C-NMR của ORI.P2. Các tín hiệu phổ 13C-NMR và DEPT
cho thấy:
Một carbon carbonyl (>C=O) ở C 179,9 ppm.
Ba carbon tứ cấp của vòng thơm liên kết trực tiếp với oxygen (≥C – O – )
ở các C 161,3 ppm; 161,2 ppm; 158,0 ppm.
Tám carbon methine của vòng thơm (– CH=) ở C 131,3 ppm; 129,0 ppm
(2C); 126,0 ppm (2C); 104,6 ppm; 101,0 ppm; 95,3 ppm.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 63/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL46- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Hai carbon bậc 4 của vòng thơm (>C=) ở C 100,8 ppm và 131,3 ppm.
Tín hiệu carbon còn thiếu là 1 carbon tứ cấp vòng thơm kề oxygen(≥CO – ).
Từ dữ liệu phổ ESI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR và DEPT cho thấy ORI.P3là 1 hợp chất flavonone có 3 vòng: 1 vòng thơm mang 4 nhóm thế và 1 vòngmang 1 nhóm thế và 1 dị vòng thơm.
Bảng 4.7 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.P2
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppmK ết luận
5-OH 12,73 (1H, s) - – OH
2 - 161,3 ≥C – O –
3 6,71 (1H, s) 101,0 =CH –
4 - 179,9 >C – O
5 - 161,2 ≥C – O –
6 5,83 (1H, s) 104,6 =CH –
7 - Mất ≥C – O –
8 6,09 (1H, s) 95,3 =CH –
9 - 158,0 ≥C – O –
10 - 100,8 =C<
1 - 131,3 =C<
2 7,99 (2H, dd , 4 J = 2 Hz và 3 J = 8 Hz) 129,0 =CH –
6 7,99 (2H, dd , 4 J = 2 Hz và 3 J = 8 Hz) 129,0 =CH –
3 7,54 (3H, m) 126,0 =CH –
5 7,54 (3H, m) 126,0 =CH –
4 7,54 (3H, m) 131,3 =CH –
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 64/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL47- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Các dữ liệu phổ đã phân tích trên đây rất phù hợp với cấu trúc của Chrysin
(đã từng được công bố là tìm thấy trong cây Núc nác). Do đó các dữ liệu phổtrên được so sánh với dữ liệu phổ của Chrysin trong tài liệu tham khảo[12] và ghi
ở Bảng 4.8
Bảng 4.8 So sánh dữ liệu phổ của ORI.P2 và Chrysin[12].
ORI.P2 Chrysin[12]
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppm
5-OH 12,73 (1H, s) - 12,88 (1H, s) -
2 - 161,3 - 164,7
3 6,71 (1H, s) 101,0 6,76 (1H, s) 106,3
4 - 179,9 - 183,1
5 - 161,2 - 163,1
6 5,83(1H, s) 104,6 6,28 (1H, s) 100,0
7 - Mất - 165,9
8 6,09 (1H, s) 95,3 6,57 (1H, s) 95,1
9 - 158,0 - 159,1
10 - 100,8 - 105,7
1 - 131,3 - 132,5
2,6’ 7,99 (2H, dd , J = 2; 8 Hz) 129,0 8,05 (2H, dd, J = 8,1; 1,8 Hz) 127,4
3,5’ 7,54 (3H, m)
126,07,58-7,60 (3H, m)
130,1
4 131,3 132,8
Từ các dữ liệu phổ ESI-MS, 1H-NMR, 13C- NMR kết hợp với DEPT, và sosánh với dữ liệu phổ của Chrysin của tài liệu đã được công bố[12] giúp nhận danhđược ORI.P2 là Chrysin (UIPAC: 5,7-dihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-
one).
HÌNH 4.5 Cấu trúc của ORI.P2 (Chrysin)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 65/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL48- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
4.1.4 Hợp chất ORI.P34.1.4.1
Các đặc tính của ORI.P3 - Tinh thể hình kim, màu nâu đỏ.
- Tan tốt trong dung môi CHCl3:MeOH (9:1).
-
Nhiệt độ nóng chảy (mp): 263C, k ết tinh trong dung môi CHCl3.- SKLM giải ly bằng CHCl3:MeOH (9:1) cho vết tròn, với màu vàng nhạt
mờ trong thuốc thử Vaniline khi hơ nóng và màu đen trong thuốc thử Fe3+, hấpthụ ánh sáng UV bước sóng 254 nm. Có giá trị R f = 0,67.
4.1.4.2 Nhận danh cấu trúc ORI.P3
Phổ 1H-NMR (DMSO_ d 6 , δH ppm, 500 MHz) (Phụ lục 4.1-4.2) cho thấy:
Một tín hiệu proton nhóm hydroxyl (– OH) có độ dịch chuyển hóa học δH
12,64 ppm (1H, s)Bốn tín hiệu của vòng benzen có độ dịch chuyển hóa học trong khoảng δH
6,63 – 8,06 ppm. Cho thấy trong cấu trúc có 2 vòng benzen:
+ Một tín hiệu tại δH 8,05 ppm (2H, d , 3 J = 7,5 Hz,) chứng tỏ 2 proton nàyghép cặp với các proton ở vị trí ortho với chúng.
+ Một tín hiệu ở δH 7,58 ppm (3H, m) 3 proton này có thể nằm kề nhau vàcùng nằm trên vòng thơm.
+ Hai tín hiệu mũi đơn ở δH 6,91 ppm (1H, s) và δH 6,63ppm (1H, s) chứngtỏ 2 proton này không có proton kề cận.
Phổ 13C-NMR (DMSO_ d 6 , δC ppm, 125 MHz) (Phụ lục 4.3-4.4) kết hợp vớiphổ DEPT (Phụ lục 4.5-4.6) cho thấy trong ORI.P3 có 15 carbon (trong đó có
4 carbon đối xứng trên vòng benzen). Các tìn hiệu bao gồm:
Một tín hiệu carbon carbonyl liên hợp (>C=O) có độ dịch chuyển hóa họcδC 182,1 ppm
Năm tín hiệu carbon tứ cấp của vòng thơm gắn trực tiếp với oxygen
(≥C – O –) ở δC 162,9 ppm; 153,6 ppm; 149,8 ppm; 147,0 ppm; 131,0 ppm.
Bảy tín hiệu carbon methine vòng thơm (– CH=) (có hai cặp carbon tươngđương) ở δC 131,8 ppm; 129,1 ppm (2C); 126,3 ppm (2C); 104,5 ppm; 94,0
ppm.
Hai tín hiệu carbon tứ cấp của vòng thơm (=C<) ở δC 129,3 ppm; 104,3
ppm.
Từ dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR và DEPT cho thấy ORI.P3 là
flavonone, cấu trúc có 3 vòng: 1 vòng mang 5 nhóm thế 1 vòng mang 1 nhómthế và 1 dị vòng thơm.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 66/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL49- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Bảng 4.9 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C- NMR và DEPT của ORI.P3
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm
(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-NMR
δC ppmK ết luận
5-OH 12,64 (1H, s) - – OH
2 - 162,9 ≥C – O –
3 6,91 (1H, s) 104,5 =CH –
4 - 182,1 >CO
5 - 147,0 ≥C – O –
6 - 131,0 =CH –
7 - 153,6 ≥C – O –
8 6,63 (1H, d ) 94,0 – CH=
9 - 149,8 ≥C – O –
10 - 104,3 =C<
1 - 129,3 =C<
2 8,05 (2H, d , 4 J = 7,5 Hz) 126,3 – CH=
6 8,05 (2H, d , 4 J = 7,5 Hz) 126,3 – CH=
3 7,58 (3H, m) 129,1 – CH=
5 7,58 (3H, m) 129,1 – CH=
4 7,58 (3H, m) 131,8 – CH=
Từ dữ liệu phổ trên có thể thấy ORI.P1 và ORI.P3 là 2 hợp chất đồng đẳng
của nhau, chúng chỉ khác nhau nhóm thế ở vị trí C7 (nhóm – OCH3 đối vớiORI.P1 và nhóm –OH đối với ORI.P3). Các dữ liệu phổ đã phân tích trên của
ORI.P3 được so sánh với dữ liệu phổ của ORI.P1 được ghi ở Bảng 4.10.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 67/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL50- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Bảng 4.10 So sánh dữ liệu phổ của ORI.P3 và ORI.P1
ORI.P3 ORI.P1
Vị tríC/H
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-
NMRδC ppm
1H-NMR
δH ppm(số H, tín hiệu, J Hz)
13C-
NMRδC ppm
5-OH 12,64 (1H, s) - 12,92 (1H, s) -
2 - 162,9 - 163,2
3 6,91 (1H, s) 104,5 6,95 (1H, s) 104,6
4 - 182,1 - 182,2
5 - 147,0 - 152,5
6 - 131,0 - 131,5
7 - 153,6 - 157,6
8 6,63 (1H, d ) 94,0 6,63 (1H, s) 94,4
9 - 149,8 - 152,7
10 - 104,3 - 104,31 - 129,3 - 130,7
2, 6 8,05 (2H, d , J = 7,5 Hz) 126,3 8,06 (2H, dd, J = 2; 7 Hz) 126,3
3, 5 7,58 (3H, m)
129,17,58 (3H, m)
129,1
4 131,8 131,9
-OCH3 - - 3,76 (3H, s) 59,9
Từ các dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR kết hợp với DEPT, và so sánh vớidữ liệu phổ của ORI.P1 giúp nhận danh được ORI.P3 là Baicalein (UIPAC:
5,6,7-trihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one).
HÌNH 4.6 Cấu trúc của ORI.P3 (Baicalein)
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 68/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL51- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
4.1.5 K ết quả định lượ ng flavonoid toàn phần
Luận văn này chọn Baicalein là chất đối chiếu vì trong quá trình tinh chếhợp chất này nhận thấy có hàm lượng rất lớ n, Baicalein được tìm thấy ở hầu hết các phân đoạn chiết lỏng-lỏng và chạy cột nhanh phân cắt cao Dichloromethane.
Luận văn đã xây dựng và thẩm định quy trình định lượ ng flavonoid toàn
phần trong vỏ thân cây Núc nác tính theo Baicalein bằng quang phổ UV_Vis,
góp phần vào nguồn tài liệu tham khảo về cách thức định lượng flavonoid trongcác mẫu dược liệu.
Hàm lượng flavonoid toàn phần định lượng đượ c là 27,5564±0,3099 (mg
Baicalein/1gam bột Núc nác khô).
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 69/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL52- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
5.1 KẾT LUẬN
Quá trình nghiên cứu đề tài khảo sát thành phần hóa học và định lượng
flavonoid toàn phần của vỏ thân cây Núc nác Oroxylum indicum (L.) Vent., thu
hoạch tại huyện Thoại Sơn, tỉnh An Giang đã thu được một số kết quả sau.
5.1.1 Phân lặp các hợp chất
Vỏ thân cây Núc nác sấy khô, xay nhuyễn thành bột (9,2 kg) được tận trích
với MeOH bằng phương pháp ngâm dầm, lọc bỏ bã, phần dịch chiết đượ c cô
quay và thu hồi dung môi dưới áp suất kém. Thực hiện chiết kiệt nhiều lần thu
đượ c cao MeOH dạng sệt có khối lượng 1,6 kg. Cao MeOH hòa tan trong một
lượ ng nước vừa đủ, sau đó được chiết lần lượt với 3 dung môi theo thứ tự độ phân cực tăng dần thu được 4 cao phân đoạn tương ứng: n-Hexane (33,54 gam),
Dichloromethane (110,85 gam), Ethyl acetate (153,35 gam), cao nước (217,43
gam).
Tiến hành sắc ký cột trên cao Dichloromethane, thu được các hợp chất kýhiệu là ORI.K1, ORI.P1, ORI.P2, ORI.P3.
HÌNH 5.1 Các hợp chất tinh khiết chiết tách từ vỏ thân cây Núc nác
Sử dụng các phương pháp quang phổ hiện đại NMR, MS và các đặc trưngvật lý kết hợp so sánh với tài liệu tham khảo, đã xác định được cấu trúc hóa họccủa các hợp chất hữu cơ phân lập được từ vỏ thân cây Núc nác như sau:
- ORI.K1 là 5,7-dihydroxy-2-phenylchroman-4-one (Pinocembrin).
- ORI.P1 là 5,7-dihydroxy-6-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one
(Oroxylin A).
- ORI.P2 là 5,7-dihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (Chrysin).
- ORI.P3 là 5,6,7-trihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (Baicalein).
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 70/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL53- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
5.1.2 Cấu trúc hóa học của các chất đã phân lập
Pinocembrin Oroxylin A
Chrysin Baicalein5.1.3 Định lượng flavonoid toàn phần
Hàm lượng flavonoid toàn phần định lượng đượ c là 27,5564±0,3099 (mg
Baicalein/1 gam bột Núc nác khô).
5.2 KIẾN NGHỊ
Vì điều kiện thời gian và vật chất không cho phép nên trong phạm vinghiên cứu của luận văn chỉ khảo sát cao Dichloromethane. Trong thời gian sắp
tới, nếu có điều kiện nghiên cứu sẽ tiến hành khảo sát trên các phân đoạn caocòn lại, đặc biệt là cao Ethyl acetate, đồng thời nghiên cứu sẽ tiến hành thửnghiệm hoạt tính kháng oxy hóa, kháng khuẩn, cũng như hoạt tính kháng viêm
của các loại cao cũng như trên các hợp chất sạch.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 71/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxvi- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
TÀI LIỆU THAM KHẢO
[1] Saowanee Maungjunburee (2010). “Chemical constutient from the Stem
Bark of Oroxylum indicum (L.) Benth. ex Kurz ”. Prince of Songkla University.
[2] D C Deka, Vimal Kumar, Chandan Prasad, Kamal Kumar, B J Gogoi,Lokendra Singh, R B Srivastav (2013). “Oroxylum indicum – a medicinal plant
of North East India: An overview of its nutritional, remedial, and prophylactic
properties”. Journal of Applied Pharmaceutical Science. Vol 3. pp (S104-
S112).
[3] A. V. Raghu, Satheesh George, Renju Krishna V and Sindhu K. K
(2013).“ Bioactive properties of phenolics present in Oroxylum indicum – A
review”. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. pp 23-27.
[4] Lawania Rahul Dev, Mishra Anurag, Gupta Rajiv (2010). “Oroxylum
indicum: A Review”. PHCOG J. vol 2. Issue 9.
[5] Anupam Bisht, K. Zaman, Mamta Singh, Richa Gupta and Vinod Singh
(2011).“ Pharmacognostical studies on Oroxylum indicum (Linn.)Vent. sterm
bark ”. Indian Journal of Natural Products and Resources. Vol. 2(4). pp 472-
478.
[6] Talari Sammatha, Rudroju Shyamsundarachary , Penchala Srinivar and
Anna Rama Swany (2012).“Quantification of total phenolic and total flaconoidcontents in extracts of Oroxylum indicum (L.) Kurz ”. Asian Journal of
Pharmaceutical and Clinical Research. Vol 5. Suppl 4.
[7] Nguyễn Quốc Tuấn (2012). “ Xây dựng phương pháp định tính, định
lượng flavonoid trong lá và nụ vối”. Luận văn tốt nghiệp Cao học ngành Hóa
phân tích. Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Thành phố Hồ Chí Minh.
[8] Nguyễn Hữu Lạc Thủy, Phạm Thị Thanh Thúy, Phan Thanh Dũng, VõThị Bạch Huệ (2011). “ Định lương flavonoid toàn phần trong lá Trinh nữ hoàng
cung Crinum Latifolium (L.) (Amaryllidaeae) bằng phương pháp quang phổUV-Vis”. Y học T.P Hồ Chí Minh. Tập 15.
[9] Nguyễn Thị Thu Hương, Nguyễn Tiến Công, Nguyễn Vũ Mai Trang,
Nguyễn Thị Minh (2012). “Các hợp chất flavonoid từ lá Núc nác Oroxylumindicum”. Tạp chí Khoa Học ĐHSP TP. Hồ Chí Minh. Số 43.
[10] Nguyễn Thị Thanh Mai, Nguyễn Trung Nhân, Nguyễn Xuân Hải, Huỳnh Ngọc Nghiêm Thủy và Byung Sun Min (2013). “Screening of α-Glucosidase
Inhibitory Activity of Vietnamese Medicinal Plants: Isolation of Active
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 72/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PLxvii- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Principles from Oroxylum indicum”. Natural Product Sciences. Số 18. pp 47-
51.
[11] Sujuan Wu, Ailing Sun, Renmin Liu (2005). “Separation and
purification of baicalin and wogonoside from the Chinese medicinal plant
Scutellaria baicalensis Georgi high-speed counter-current chromatography”.
Science Direct. số 1066. pp 243 – 247.
[12] Soumia Mouffok, Hamada Haba, Catherine Lavaud, Christophe Long,
Mohammed Benkhaled (2012). “Chemical constituents of Centaureaomphalo
tricha Coss. & Durieu ex Batt. & Trab”. Supporting Information. pp 292-295.
[13] Tanasak Sae-Leaw, “ Effect of Drying on Phenolic Compounds and
Antioxidant Capacity of Fingerroot (Boesenbergia pandurata (Roxb.) Schltr.)” ,
the Graduate Studies - The University of Kansas.
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 73/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL1- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
PHỤ LỤC 1
Phụ lục 1.1 Phổ MS-ESI của ORI.K1
[ M ] = 2 5 6 a m u
[M-H]-
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 74/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL2- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.2 Phổ 1H- NMR của ORI.K1
H2H6 H8
5-HO
H2 H6 H3 H4 H5
H3a
H3e
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 75/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 76/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL4- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.4 Phổ 13C- NMR của ORI.K1
C4
C9 C7
C1
C3 C5 C2 C6
C10C6C8
C2
C3
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 77/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL5- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.5 Phổ 13C- NMR giãn rộng của ORI.K1
C4
C9
C7
C1
C3 C5 C2 C6
C10C6
C8
C2
C3
C4
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 78/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL6- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.6 Phổ DEPT của ORI.K1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 79/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL7- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.7 Phổ DEPT giãn rộng của ORI.K1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 80/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL8- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.8 Phổ HMBC của ORI.K1
H3a→C2
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 81/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL9- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.9 Phổ HMBC giãn rộng của ORI.K1
H8→C6
H6→C8
H2 H6→C2
H8→C10 H6→C10
H3 H4 H5→C1’
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 82/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL10- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.10 Phổ HMBC giãn rộng của ORI.K1
H6→C7
H8→C9
H3a→C4H3e→C4
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 83/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL11- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 1.11 Phổ HSQC của ORI.K1
H3a H3e→C3
H2→C2
H6→C6
H8→C8
H3 H4 H5 →C3 C4 C5
H2 H6→C2 C6
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 84/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL12- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phu lục 1.12 Phổ HSQC giãn rộng của ORI.K1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 85/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL13- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
PHỤ LỤC 2 Phụ lục 2.1: Phổ 1H- NMR của ORI.P1
5-HO
H2 H6
H3 H4 H5
H8H3
H3CO
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 86/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL14- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.2: Phổ 1H- NMR giãn rộng của ORI.P1
H2 H6
H3 H4 H5
H8
H3
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 87/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL15- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.3: Phổ 13C- NMR của ORI.P1
C3 C10
C4
C7
C4
C2
C5 C9
C3 C5 C2 C6
C8
H3CO
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 88/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL16- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.4: Phổ 13C- NMR giãn rộng của ORI.P1
C3C10
C4 C6 C1
C4
C2
C7
C9 C5
C3 C5
C2 C6
C8
H3CO
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 89/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL17- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.5: Phổ DEPT của ORI.P1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 90/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL18- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.6: Phổ DEPT giãn rộng của ORI.P1
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 91/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 92/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL20- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.8: Phổ HMBC giãn rộng của ORI.P1
H3→C10
H8→C10
H3→C1
H8→C6
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 93/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL21- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.9: Phổ HMBC giãn rộng của ORI.P1
H3→C4
H8→C4
H3→C2
H2 H6→C2
H8→C9
H8→C7
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 94/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL22- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.10: Phổ HSQC của ORI.P1
-OCH3→-OCH3
H3→C3
H8→C8
H2 H6→C2 C6
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 95/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL23- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 2.11: Phổ HSQC của ORI.P1
H3 H5 →C3 C5
H4→C4
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 96/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 97/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 98/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL26- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 3.3 Phổ 1H- NMR của ORI.P2
H2 H6
H3 H4 H5
H8
H3
H6
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 99/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL27- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 3.4 Phổ 13C- NMR của ORI.P2
C3 C10
C1 C4
C6
C4
C2C5 C9
C3 C5 C2 C6
C8
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 100/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL28- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 3.5 Phổ 13C- NMR giãn rộng của ORI.P2
C3
C1C4
C6
C4
C2C5
C9
C3 C5
C2 C6
C8
C10
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 101/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL29- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 3.6 Phổ DEPT của ORI.P2
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 102/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 103/108
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 104/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL32- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 4.2: Phổ 1H- NMR của ORI.P3
H2’H6’
H3’H4’H5’
H3
H8
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 105/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL33- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 4.3: Phổ 13C- NMR của ORI.P3
C4
C4
C2
C7C9
C5
C3 C5 C2 C6
C8
C6C1
C3 C10
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 106/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL34- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 4.4: Phổ 13C- NMR của ORI.P3
C10C3
C4 C6
C1
C4
C2
C7
C9
C5
C3 C5
C2 C6
C8
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 107/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
NGUYỄN HỮU PHONG -PL35- LUẬN VĂN ĐẠI HỌC ĐOÀN THỊ LY KHA
Phụ lục 4.4: Phổ DEPT của ORI.P3
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON
WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COMóng góp PDF bở i GV. Nguy ễ n Thanh Tú
8/17/2019 Khảo sát thành phần hóa học và định lượng Flavonoid toàn phần trong vỏ thân cây Núc nác (Oroxylum indicum (L…
http://slidepdf.com/reader/full/khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-dinh-luong-flavonoid-toan-phan 108/108
NÚC NÁC (OROXYLUM INDI CUM (L.) VENT.)
Phụ lục 4.5: Phổ DEPT giãn rộng của ORI.P3
WW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON