Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

Embed Size (px)

Citation preview

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    1/44

      Dra. Tertia Hutabarat

    Departemen Mikrobiologi FK UKI

    07 Juni 2010

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    2/44

    Digunakan untuk 2 tujuan :

    1. Mendeteksi antibodi yang belum diketahui dengan

    menggunakan antigen yang diketahui.

    2. Mengenali antigen (kuman) yang belum diketahui dengan

    menggunakan antibodi yang diketahui.

    Sifat antibodi 

    Bereaksi spesifik dengan antigen yang menimbulkannya

    REAKSI ANTIGEN – ANTIBODI IN VITRO 

    ( SEROLOGI )

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    3/44

     ANTIBODI ANTIGEN HASIL REAKSI 

    PRESIPITIN SOLUSI / LARUTAN PRESIPITASI / ENDAPAN  

     AGLUTININ SEL / PARTIKEL AGLUTINASI / GUMPALAN 

    LISIN SEL LISIS  

    OPSONIN SEL / PARTIKEL FAGOSITOSIS  

     ANTITOKSIN TOKSIN NETRALISASI 

     ANTIBODI KUMAN / VIRUS NETRALISASI 

    NETRALISASI INFEKTIF  

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    4/44

     Antibodi !eimbang Antigen

    antibodi

    antigen

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    5/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    6/44

    0,5 ml 0,5 ml0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml0,5 ml

    serum

     NaCl

    0,5 ml

    1/2 1/4 1/8 1/16 1/32

    Antigen

    Anti

    gen

    Buang

    1. Presipitasi pada taung

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    7/44

    Antigen

    1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 K  

     Na Cl

    Antiserum!

    Antiserum

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    8/44

    Presipitat

    1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 K  

    Titer antigen : ……..

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    9/44

    "#AK!I $"#!I$ITA!I

    2. DIFU!I %A&DA M#&U"UT 'U(HT#")'&*

     Ag A  Ag A

     Ab A

     Ag A( Ag A+

     Ab A(

     Ag A Ag (

     Ab A(

     Antigen A dan A

      ID#&TIK Antigen A( dan A+

    !#MI ID#&TIK

     Antigen A dan (

    &'& , ID#&TIK

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    10/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    11/44

    "#AK!I $"#!I$ITA!I

    ('&T'H. $#"('+AA& ELEK - OUCHTERLONY 

    KUMA& DIFT#"I

     A&TIT'K!I&

    DIFT#"I

    $"#!I$ITAT

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    12/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    13/44

    -. DIFU!I TU&%%A) "ADIA)

    !I&%)# "ADIA) IMMU DIFFU!I'&

    / !"ID

     A&TI+'DI

     A&TI%#&

    $"#!I$ITAT

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    14/44

    !"#S$ "%&'$"S$

    %U&A , D#T#"MI&A!I KUMA&

      , D#T#K!I A&TI+'DI DA)AM !#"UM

    (A"A MIK"'!K'$IK

    !U!$#&!I

    DA)AM &a(l

     A&TI+'DI

    /!#"UM

    !$#!IFIK

    $ K

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    15/44

    M"#*S#*+$# ( !"#S$ ,$D"& )

    +uang

    &a() 03 ml

    !erum 03 ml

    03 ml 03 ml 03 ml 03 ml 03 ml 03 ml

    1 2 - 4 3 5 76K

    Antigen a8 03 ml

    $engen9eran

     :erum

    ; < 16= 1615 16-2 1654

     $engen9eran

      ak>ir < 16= 1615 16-2 1654 1612=

      Ha:il 6 Titer , , ,

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    16/44

    -!$S "$%! H ' DA& ?i

    @#I) F#)I /1B17 Proteus

    ?I /?irulen:i

    ' /!omatik 6 badan

    H /Flagel

     Antigen H Antibodi H Aglutina:i :eperti aCan

     Antigen ' Antibodi ' Aglutina:i :eperti pa:ir 

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    17/44

      1 2 - 4 3 5 76K

    "%&'$"S$

    1620 1640 16=0 16150 16-20 16540

    "%&'$"S$ *

    Titer .. E

    Titer E

    1620 1640 16=0 16150 16-20 16540

      1 2 - 4 3 5 76K

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    18/44

    !"#S$ +*/*!

    1 2 - 4 3 5 76K

    1620 1640 16=0 16150 16-20 16540

    "'*"%&'$"S$

    1620 1640 16=0 16150 16-20 16540

    Titer . E

    Titer . E

    1 2 - 4 3 5 76K

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    19/44

    "#AK!I !I)A&%

    , dapat merugikan

    , dapat menguntungkan

     A+

    (D

    D

    #

    F

    !erum anti ter>adap kuman I / Antibodi A + ( D  +ereak:i :ilang

    dengan kuman II / ada antigen D .

    Untuk mengata:i >al ini   !erum monoalen / Antibodi monoklonal

    Detek:i RICKETTSIOSIS /inGek:i Rickettsia menggunakan antigen

    Proteus "eak:i @#I),F#)I

    I II

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    20/44

    !"#S$ #*"%&'$"S$

    $A"TIK#)

    /)AT#K! +#&T'&IT

     A&TI%#&

     A&TI+'DI

    "#AK!I A&TI%#& A&TI+'DI $'!ITIF A%)UTI&A!I

    /)AT#K! 6 +#&T'&IT

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    21/44

    H#MA%)UTI&A!I

     A%)UTI&A!I !#) DA"AH M#"AH

    DA$AT T#"JADI

    1. A&TI+'DI T#"HADA$ A&TI%#& $ADA $#"MUKAAA& !#) DA"AH M#"AH

    !DM !DM

    !DM !DM

     A&TI%#&

     A&TI+'DI

    ('&T'H $#&TUA& %'). DA"AH

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    22/44

    2. ?I"U! 6 "I(K#TT!IA

     M#M$U&*AI H#MA%)UTI&I& DA$AT M#&%%UM$A)KA&

    !#) DA"AH M#"AH.

    !DM !DM

    !DM !DM

    ?I"U!

    H#MA%)UTI&I&

    "#AK!I I&I DA$AT DIHAM+AT ')#H A&TI+'DI

    "#AK!I HAM+ATA& H#MA%)UTI&A!I

    ?I"U! A&TI+'DI

    !DM!DMHAM+ATA&

    H#MA%)UTI&A!I

    !#) DA"AH M#"AH

     A&TI+'DI

    !DM

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    23/44

    -. !#) DA"AH M#"AH !#+A%AI $#M+A@A A&TI%#&

    !DM

    !#) DA"AH M#"AH DA$AT DI)A$I!I D#&%A& A&TI%#&

    DI$#"MUKAA&&*A.

     A&TI%#&  A&TI+'DI *A&% !#!UAI

    H#MA%)UTI&A!I

    K#U&TU&%A& M#MUDAHKA& M#)IHAT HA!I) "#AK!I /$A"TIK#) +#!A".

    DI!#+UT JU%A H#MA%)UTI&A!I $A!IF

     Antigen

    !#) DA"AH M#"AH *A&%

    DI)A$I!I D%& A&TI%#&

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    24/44

     Ag  Antibodi (  Anti

    !DM

    !"#S$ +!%$#"" #*M+&!M!

    !I!TIM H#M')I!A

    !DM

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    25/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    26/44

    1 2 3 4 5 6 " 8 #/K1 10/K2

    $iter %em&lisin ' $aung (e 4

    1/4000 ) 1 unit

    *ntu( rea(si + diguna(an 2 unit ) 2 - 1/4000

      ) 1/ 2000

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    27/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    28/44

    1 2 3 4 5 6 " 8/K  

    -at unit ) taung (e 3

    *ntu( - pengi(atan (&mplemen diguna(an 2 ull unit

    ) 2 - 0,35 ) 0," ml

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    29/44

    "#AK!I $#&%IKATA& K'M$)#M#&

     A&TI%#& &a()

     !#"UM

    K'M$)#M#&

    !I!TIM H#M')I!A!DM A&TI !DM

    $K

    H#M')I!A

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    30/44

    $'!ITIF %ATIF

    "#MMI&%

    $ K $ K

    $ K

    li:i: li:i: li:i:

    tidak

    li:i:

    tidak

    li:i:

    tidak

    li:i:

    "S$& !"#S$ +!%$#"" #*M+&!M!

    $

    $

    $K K

    K

    "#AK!I $#&%IKATA& K'M$)#M#&

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    31/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    32/44

    Reaksi Flokulasi

    Partikel antigen (berupa lipid) dicampur dengan antibodi

    (Reagin) Flokulasi.

    Digunakan pada STS (Serology Test for Sypilis).

    Tes non-spesifik  pada sifilis.

    !. Tes "DR# ("enereal Disease Researc #aboratory)Antigenerum pasien NaCl

    P K P K 

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    33/44

    2. $es RPR  apid Plasma eagin. 

    $ntigen diikatkan dengan carcoal % serum&plasma pasien

    carcoal menggumpal ('arna itam).

    Antigenerum pasien NaCl

    P K P K 

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    34/44

    . Tes $*+ 

    ila(u(an dalam taung dengan 3 pengeneran'

    0,05

    Ag0,025 0,0125

    0,15

    erum

    3'1 6'1 12'1

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    35/44

    !

    ! !

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    36/44

    #&*M# )I&K#D IMMU&'!'"+#&T A!!A* #)I!A

     !olid p>a:e

     Antigen

    Human,Ig

     Anti, >uman Ig

    enim

     :ub:trat (>romogen

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    37/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    38/44

    IMU&'F)U'"#!#&!

    1. T#! )A&%!U&%

     Antigen

     Antibodi g dilabel

    dgn Gluore:ein

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    39/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    40/44

    2. T#! TIDAK )A&%!U&%

     Antigen

    Human Immunoglobulin

     Anti human Immunoglobulin

    ang dilabel dgn Gluore:ein

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    41/44

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    42/44

    -. T#! L!A&D@I(H

    !el pla:ma

     Antibodi di dalam

    !el pla:ma

     Antigen

     Antibodi ang dilabel

    dengan Gluore:ein

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    43/44

    Untuk diagno:a adana inGek:i pada pemerik:aan antibodi dari

    :erum penderita diperlukan dua kali pemerik:aan :erum aitu

    !erum pada ma:a akut dan :erum pada ma:a konale:en

    /ma:a penembu>an dengan interal Caktu 7 >ari atau lebi>

    dan ada kenaikan titer antibodi :ebanak 4N atau lebi>.

  • 8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610

    44/44