Upload
rizkanoviar
View
267
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
1/27
LAPORAN BIOTEKNOLOGI
TEKNOLOGI PENYIMPANAN SPERMATOZOA
Oleh
1. Dita Aryanti (103244013)
2. Sulistyowati (103244024)
3. Rendi Pranata (103244025)
4. Dewi Ratna S. (103244026)
5. Bondan Surya Anggara (10324403)
6. !o"a#ad !usli" $i%ri (103244203)
UNIVERSITAS NEGERI SURABAYA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
JURUSAN BIOLOGI
2013
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
2/27
BAB I
PENDAHULUAN
A. L!" Bel#$%
&e'utu"an angan ada daging #auun telur sangatla" tinggi. &e'utu"an
aan daging aya# #auun telur teta di usa"aan ole" 'er'agai i"a. *sa"a
yang dilauan untu #eningatan rodusi daging teruta#a aya# daat
dilauan dengan #enggunaan tenologi +nse#inasi Buatan (+B). ,eni ini
#e#er#uda" -ertilisasi yang 'erda#a ada tingginya rodutiitas aya#
#eng"asilan telur #auun daging aya#. &e'er"asilan dala# #elasanaan
+nse#inasi Buatan sangat ditentuan ole" ualitas dan uantitas ser#ato/oa yang
digunaan se"ingga dierluan uaya untu #e#erta"anan #otilitas dan
#e#eranang daya ta"an "idu ser#ato/oa serta daat digunaan dala#
watu yang relati- la#a (,oeli"ere 15a).
+nse#inasi Buatan #eli'atan 'e'eraa roses yang diantaranya
ena#ungan se#en enilaian engeneran sa#ai enilaian "asil inse#inasi
'uatan (Ridwan 200). Se#en yang suda" dita#ung erlu di eneran dengan
sala" satu 'a"an engener. !enurut ardianto d (2010) engeneran
ser#ato/oa #e#ilii tuuan agar olu#e se#en #eningat dan daat disi#an
le'i" la#a ole" arena itu 'a"an engener yang 'ai "arus #e#erli"atan
e#a#uan dala# #e#ereil tingat enurunan #otilitas dan #e#eranang
la#a watu enyi#anan asa engeneran. Pada saat ini 'anya 'ere#'ang
tenologi enyi#anan ser#ato/oa dan engeneran.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
3/27
Penyi#anan ser#ato/oa ini daat dilauan ada te#eratur di atas titi
'eu (se#en air) disi#an dengan su"u 45o7 didala#Refrigerator. &ele'i"an
enyi#anan dala# 'entu se#en air yaitu tida #e#erluan nitrogen air dan
endistri'usiannya dengan ara di#asuan di dala# ota atau t"er#os 'erisi es
dan ditutu untu #e#erta"anan su"u dingin sa#ai ti'a di te#at tuuan
(,oeli"ere 15').
Se#en air se'elu# di si#an erlu dieneran engeneran ser#ato/oa
dia#ur dengan larutan engener yang #ena#in e'utu"an -isi dan
i#iawinya. Pada saat ini 'elu# ada 'a"an egener yang daat #enyediaan
se#ua unsurunsur yang daat #e#enu"i -ungsi dan syaratsyarat yang tela" di
tetaan seara se#urna. Pratis se#ua engener #engandung air susu atau
uning telur segar atau o#'inasi eduanya se'agai 'a"an dasar yang daat
#e#enu"i se'agian 'esar -ungsi dan ersyaratan terse'ut (,oeli"ere 15').
Salis'ury 8 9anDe#ar (15) 'a"an engener yang e-eti- untu
ser#ato/oa "arus #engandung /at/at #aanan ionion daya enggera dan
iatan i#ia yang dierluan untu #e#erta"anan roses ertuaran /at yang
sei#'ang dala# selsel yang sesuai dan teanan os#oti yang oti#u#.
:luosa atau -rutosa #eruaan o#onen yang "arus ada dala# suatu 'a"an
engener yang #e#'erian energi ada ser#ato/oa untu "idu dan ati-
'ergera. Aan tetai gluosa dan -rutosa 'elu# dieta"ui da#anya eada
ser#ato/oa se"ingga erlu diteliti.
Dala# enelitian ini digunaan engener dengan #edia dasar tris yang
dengan sule#entasi uning telur se"ingga daat diadian #edia enyi#anan
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
4/27
ser#ato/oa. !edia 'erua engener tris uning telur yang dita#'a"an dengan
-rutosa dan gluosa. !edia terse'ut e#udian disi#an ada Refrigeratordan
dia#ati ia'ilitas #ortalitas serta osentrasi setia "ari.
B. R&'&($ M(lh
Berdasaran ru#usan #asala" daat diru#usaan suatu ru#usan #asala"
se'agai 'eriut ;
1. Bagai#anaa" ualitas enyi#anan ser#ato/oa aya# yang disi#an ada
engener dengan e#'erian gluosa dan -rutosaes"ei# d 1) . +st"#us (anang 10 #)
'er-ungsi untu #e#'entu selaut #e#'ran telur 'agian dala# dan luar serta
#ena#'a"an seu#la" air e dala# uti" telur (Sturie 16). d. *terus atau
s"ell gland yang #e#unyai anang # se'agai te#at di'entunya ulit telur
(era'ang). e.9agina #eruaan eng"u'ung uterus dengan loaa dan tida
'ereran dala# roses e#'entuan telur #e#ilii anang 12 #. Sturie
(16) #elaoran 'a"wa antara uterus dan agina diisa"an ole" s"inter
yang dina#aan *tero 9aginal @untion (*9@) yang 'er-ungsi se'agai te#at
enyi#anan ser#ato/oa se#entara (Sturie16). +nse#inasi Buatan(+B)
dengan #etode deosisi se#en intra *terine ser#a dideositan ada daera"
*9@.
I$(e'$( B&!$ IB4 De$%$ Me!/e De-/(( Se'e$ I$!"
U!e"$e
Pada dasarnya dala# #eneraan teni +B dengan #etode deosisi
se#en intra uterine tida terlalu sulit aa'ila ingin tera#il dan 'er"asil untu
#enadi seorang inse#inator #aa yang dierluan adala" eteunan disilin
teliti dan selalu 'erlati". Ba"an dan alat yang dierluan untu #elauan "arus
#uda" didaat ratis se"ingga egiatan +B daat dilauan di#ana saa.
Th-$ #e%!$ IB
A. Pe'lh$ B5!
Me'lh $ &$! 55!
+ndu yang 'ai "arus #e#ilii syarat se'agai 'eriut ;
1. Se"at dan tida aat.
2. Berrodusi tinggi.
3. !ini#al suda" #engala#i eriode eneluran erta#a u#ur E 'ulan.
4. +ndu sedang 'ertelur.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
9/27
5. Pe#eli"araan indu se'ainya dala# andang 'aterei indiidu.
Me'lh -e*$!$ &$! 55!6
Pe*$!$ ,$% 5# h"&( 'e'l# (,"! (e5% 5e"#&!
1. Se"at tida aat lina" dan #e#ilii na-su awin yang tinggi.
2. *#ur 13 ta"un 'ertai dengan anang 050 E 150 #.
3. !e#ilii #utu geneti yang tinggi.
4. !e#unyai "u'ungan yang au" dengan indu yang aan di inse#inasi.
5. &andang e#eli"araan eantan "arus terisa" dengan indu.
B. Pe"(-$ $ $ -e*$!$
1. Paan untu eantan "arus yang 'ai #utunya dengan adar rotein #ini#al
1? dan dengan ta#'a"an e#'erian 1 'utir telur -ertil yang suda" #asu
#esin C 5 "ari. ,elur dioo "ingga rata e#udian di'erian eada 3 eor
eantan.
2. Pe#'erian anti stress uga daat di'erian eada indu dan eantan.
3.*ntu #erangsang 'anyanya telur daat uga digunaan raangan daun
#enguduFae yang dia#uran ada aan ( 10 gra#Feor).
4. *ntu #e#uda"an dala# #elasanaan +B 'ulu di seitar loaa "arus
digunting.
E. Te#$# Pe$%'5l$ Se'e$
Aya# eantan yang aan dia#'il se#ennya di'eri aan yang
#engandung rotein tinggi agar ualitas se#ennya 'enar'enar 'ai . Se'elu#
se#en dita#ung aya# antan diuasaan urang le'i" 10 a# . al ini 'ertuuan
agar se#en yang dia#'il tida tere#ar -ees . Pena#ungan se#en dilauan
dengan #etode engurutan atau #assage di#ana sangat di'utu"an ea"lian dan
etera#ilan seorang inse#inator dala# #elauan erangsangan . Dala#
#elauan ena#ungan seorang inse#inator #endaat 'antuan untu
#e#egang aya# eantan . *sa"aan suaya aya# antan dala# eadaan tenang
dengan ara #engendoran edua 'ela" a"anya . Pena#ungan se#en dilauan
dengan ara #engurut 'agian unggung #engara" e'elaang dengan tangan iri
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
10/27
dan ada eala dengan tangan anan . +ra#a engurutan dilauan dengan
teratur dan tida asar seara 'erulangulang .
Dengan engurutan yang teratur daat #erangsang eantan untu eresi
di#ana ditandai dengan adanya tonolan yang eluar #elalui loaa. Aa'ila
eantan suda" terangsang #aa ari telunu dan e#ol langsung #enean
loaa (seitar tulang u'is) se"ingga teradi eaulasi . Selanutnya se#en yang
eluar dita#ung dengan alat yang suda" diersiaan dan dilauan enguuran
olu#e se#en untu #e#er#uda" ena#'a"an 'a"an engener .
F. Pe$%e$e"$ Se'e$
Pengeneran se#en dierluan untu #e#er'anya olu#e se#en yang
aan diaai +B . 'a"an engener yang daat diaai adala" larutan >a7=
$isiologis 00? . Pena#'a"an 'a"an engener adala" 1 ;5 artinya ia olu#e
se#en "asil ena#ungan 06 #l #aa 'a"an engener yang daat dita#'a"an
adala" 3 #l se"ingga olu#e 'erta#'a" #enadi 36 #l . @ia dosis +B 01 #l
se#en "asil engeneran 'erarti satu ali ena#ungan daat diaai untu
#eng+B se'anya 36 eor aya# 'etina ('a'on) . Pelasanaan +B ada aya#
'etina Setela" se#en dieneran #aa se#en daat dideositan e saluran
rerodusi aya# 'etina . Dengan tu'erullin syringe uuran 1 #l ita sedot dulu
udara sa#ai anga 0 e#udian sedot se#en yang 'arn dieneran se'anya
01 #l. *ntu #e#uda"an elasaan +B se'ainya dilauan ole" dua orang .
Satu orang #eneit aya# 'etina di'awa" etia tangan anan sealigus
#e#egang edua ai aya# sedangan tangan iri #enari eor eatas se"ingga
loaa ta#a dengan elas . +nse#inator yang suda" sia dengan alat +B yang
'erisi se#en #enean 'agian yang =una di'awa" loaa dengan tangan iri
sa#ai agina ter'ua . Selanutnya syringe yang 'erisi se#en di#asuan
edala# agina yang letanya se'ela" iri sedala# 23 # se'elu# se#en
dise#rotan teanan ada lu'ang loaa diendoran agar se#en nantinya tida
eluar dari agina .
G.Te#$# Pe$,'-$$ Se'e$
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
11/27
,eni Penyi#anan Se#en atau yang dienal dengan teni
rioreserasi #eruaan suatu teni enyi#anan sel "ewan tu#'u"an
atauun #ateri genetia lain (ter#asu se#en) dala# eadaan 'eu #elalui
redusi atiitas #eta'olis#e tana #e#engaru"i organelorganel di dala# sel
se"ingga -ungsi -isiologis 'iologis dan #or-ologis teta ada. ,eni
rioreserasi #eruaan teni enyi#anan yang dilauan ada su"u yang
sangat renda" (16G7) dala# nitrogen air (Boediono 2003). ,eni
rioreserasi uga se'agai -ator enduung ta#'a"an yang sangat 'ai untu
onserasi in situ dan #ungin uga digunaan dala# rogra# selesi
(Dan"in'urge dan ie#stra 2003). Se#entara itu #enurut $ulton (2006).
rioreserasi las#a nut-a" aan #enadi alat yang sangat 'er"arga 'agi
industri unggas dan untu e'er"asilan elestarian su#'er daya geneti unggas
yang #asi" ada. Du#ala et al. (2006) #enyataan 'a"wa olu#e se#en aya#
sangat sediit se"ingga ena#'a"an olu#e ser#a se'elu# +B dan
enyi#anan atau e#'euan sangat dierluan dengan ara #ena#'a"an
engener se#en yang oo. Selain itu langa" enting dala# e'er"asilan
rioreserasi se#en unggas adala" dengan e#ili"an riorotetan yang teat
dan #etodefreezing-thawing (Suid/ina dan =uas/ewi/ 200).
Te#$# K"//-"e(e"( !& Te#$# P$,'-$$ Se'e$
,eni rioreserasi daat di'edaan atas teni rioreserasi
onensional (conventional slowfreezing) dan rioreserasi seara eat (rapid
freezing). ,eni rioreserasi onensional adala" teni rioreserasi yang
le'i" #eneanan ada roses e#'euan la#'at. Pada teni ini su"u
diturunan seara 'erta"a dengan #esin endingin yang daat dirogra#.
Dengan teni ini ristal es #asi" ter'entu 'ai estraseluler #auun
intraseluler se"ingga daat #enye'a'an teradinya erusaan sel. al ini
dise'a'an ole" eletrolit yang #enu#u aan #erusa dinding sel se"ingga
ada watu enairan e#'ali er#ea'ilitas #e#'rane las#a aan #enurun dan
sel aan #ati. Pe#'entuan ristal es e#unginan 'eraitan dengan eru'a"an
teanan os#oti dala# -rasi yang tida #engala#i e#'euan (atson 2000).
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
12/27
,eni ini selain #eli'atan roses e#aaran riorotetan 'ai ada
saat rae#'euan dan asathawing (enairan e#'ali) yang 'erta"a uga
roses e#'euan 'erta"a dengan #eneanan entingnya roses seeding.
Prosesseedingdi#asudan untu #enginisiasi e#'entuan &ristal es se'agai
inti es dengan #enurunan te#erature se'agian larutan agar de"idrasi teradi
dan #enean eleasan energi anas yang 'erle'i"an dari -usi &ristal es. +nisiasi
seara #endada ini dilauan ada te#eratur sediit di 'awa" titi 'eu
larutan se"ingga daat #enega" #e#'esarnya deraat supercooling atau
#e#erende selang supercooling. ,ana erlauan seeding inti es aan
ter'entu seara sontan ada te#eratur 10G7 sa#ai 15G7 (-eno#ena
supercooling) yang disertai dengan eleasan -usi anas se"ingga te#eratur
"a#ir #enaai titi 'eunya e#'ali. &ondisi ini aan #eni#'ulan suatu
-lutuasi te#eratur yang uu 'esar. ,eni rioreserasi onensional uga
dise'ut dengan teni e#'euan dua ta"a. ,eni e#'euan dua ta"a
#eliuti inu'asi sel dala# riorotetan dengan total onsentrasi 12 ! yang
#enye'a'an de"idrasi #oderat dan diiuti ole" e#'euan la#'at #isalnya
dengan eeatan 1G7F#enit "ingga su"u 35G7 lalu e#'euan dala# nitrogen
air dan thawing untu ealuasi. ,eni rioreserasi eat adala" roses
e#adatan onsentrasi riorotetan (estraseluler #auun intraseluler). Pada
teni ini se'agian 'esar air di dala# sel dieluaran se'elu# teradi e#'euan
intraseluler dan digantian dengan riorotetanse"ingga ada saat e#'euan
tida teradi ristal es(9alerdi et al. 200).
Prosesnya #eliuti (a)de"idrasi yaitu roses ergantian airan sitolas#a
dengan larutan riorotetan #elalui roses di-usi e dala# selH (') e#'euan
ta"aan ada saat sel atau organ dan larutan 'erada dala# nitrogen air (16G7)
#e#'entu adatan solid glassH () warming yaitu ta"a teradinya eru'a"an
e#'ali 'entu adatan #enadi airH serta (d) re"idrasi yaitu roses #asunya
e#'ali air e dala# sel untu #enggantian# eduduan riorotetan. Setia
teni rioreserasi #e#unyai ele'i"an dan eurangan. &ele'i"an dari
rioreserasi seara u#u# adala" (1) 'a"an atau #ateri daat disi#an dala#
watu tida ter'atasH (2) daat diolesi setia saatH (3) daat digunaan aan
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
13/27
saa 'ila di'utu"anH (4) #elestarian las#a nut-a" yang #endeati euna"anH
(5) tida erlu #engi#or atau #e#eli"ara eantan eantan unggulH (6) tida
#e#'utu"an ruangan yang 'esar arena ta'ung nitrogen air uu #e#adai
untu #enyi#an 'a"an dala# raga# dan u#la" yang 'anyaH dan () tida
#enye'a'an eru'a"an #aterial geneti yang disi#an. Se#entara itu
eurangannya adala" (1) 'iaya elasanaan uu #a"alH (2) #e#erluan
tenaga yang tera#il dan 'erengala#anH (3) nitrogen air erlu tersedia seara
ontinyuH dan (4) "anya se#en yang 'erualitas 'ai yang daat dan laya
di'euan (,oeli"ere 15).
F#!/" ,$% Me'-e$%"&h Ke5e"h(l$ #"/-"e(e"(
Seu#la" -ator yang #e#engaru"i e'er"asilan teni rioreserasi
onensional adala" (1) eeatan e#'euanH (2) enis dan onsentrasi
riorotetanH (3) su"u a"ir e#'euanH dan (4) tie dan eadaan -isiologis
'a"an yang aan disi#an. @ia dari sel untu #enaai esei#'angan otensial
i#iawi air intraseluler dan estraseluler serta teradi de"idrasi untu #eng"indari
e#'euan intraseluler. Aa'ila #edia engener didinginan di 'awa" tingat
endinginan #aa ristal es #enggu#al dan air aan #engala#i engristalan
eluar se'agai es (atson2000). @ia e#'euan terlalu eat #aa
esei#'angan otensial air aan terganggu dan air intraseluler aan #e#'eu.
Pada deraat enurunan su"u yang sangat eat aan ter'entu ristal es yang
"alus di dala# sel yang #e#unyai energi er#uaan yang 'esar dan tida sta'il
serta enderung #e#'entu ristal es yang 'esar. &ondisi ini aan
#engai'atan erusaan dan e#atian sel (Pars dan :ra"a#12).
Pena#'a"an riorotetan 'ertuuan untu #e#eli"ara eutu"an
#e#'ran dan #eningatan otensial os#oti #edia se"ingga airan di dala# sel
#engalir eluar dan teradi de"idrasi. &e#a#uan rotesi riorotetan
ter"ada #e#'ran sel #eruaan indiasi dari interasi yang 'eralan 'ai antara
riorotetan dan #e#'ran sel. +nterasi ini daat #engurangi erusaan
#e#'ran sel ada saat teradi eru'a"an eadaan dari relati- air e strutur
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
14/27
relati- adat dan uga ada saat e#'ali e strutur yang relati- air sela#a roses
enairan.
&riorotetan iala" /at i#ia noneletrolit yang 'ereran dala#
#engurangi engaru" #e#atian sela#a e#'euan 'ai 'erua engaru"
larutan #auun adanya e#'entuan ristal es se"ingga ia'ilitas sel daat
dierta"anan. Berdasaran ara eranya riorotetan dielo#oan #eadi
penetrating ('eera di dala# dan di luar sel) seerti etilen gliol dan roilen
gliol (7"en et al., 2005 =u/ et al., 200) dan non-penetrating ("anya di luar sel)
seerti surosa gluosa atau -rutosa (Die/ et al., 2001 Barelo$i#'es dan
Seidel 200).
Se#entara itu 'erdasaran 'a"an yang terandung di dala#nya
riorotetan dielo#oan #enadi dua golongan yaitu elo#o alo"ol
(etilen gliol gliserol dan lainlain) dan elo#o a#ida (di#etil-or#a#id
aseta#id #etil-or#a#id dan lainlain) (Alarenga et al. S%uires2005). Dasar
e#ili"an enis riorotetan untu e#'euan se#en #enurut S%uires et al.
(2004) dan Alarenga et al. (2005) selain #engandung 'a"an yang 'eera
#elindungi sel ada saat e#'euan uga "arus #e#unyai 'o'ot #oleul yang
eil agar le'i" #uda" dan eat enetrasi e dala# sel se"ingga #engurangi
tosisitas ai'at os#olaritas yang tinggiH dan #uda" larut dala# air. Pengaru"
riorotetan dala# #elindungi ser#ato/oa ada saat rioreserasi selain dari
ara eranya uga diengaru"i ole" enis dan onsentrasinya. &riorotean yang
u#u# digunaan ada e#'euan se#en unggas adala" dimethylsulfoxide
(D!S) dimethylformamide (D!$) dimethylacematide (D!A) dan gliserol
(,selutin et al. 1).
D!S adala" a#uran organosul-ur dengan ru#us i#ia (73)2S dan
#e#unyai 'erat #oleul se'esar 13. D!S adala" suatu 'a"an elarut olar
aroti yang enting. D!S uga dienal se'agai riorotetan onensional
yang dita#'a"an e#edia sel untu #enega" e#atian sel seanangroses
e#'euan. ,iti 'eu D!S tinggi ada su"ua#ar #eruaan suatu adatan
yang daat #e#'atasiegunaannya dala# 'e'eraa roses i#ia (seerti
ristalisasi ada watu cooling). Dosis D!S dala#engener se#en 'erariasi
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
15/27
di antara enis terna.Dosis oti#u# D!S dala# engener se#en itise'esar
10? (A> et al. 2005) aya# White LeghornOvambo, dan otchefstroom
!oe"oe" se'esar 5? (!a"alo-a" et al. 200).
&riorotetan D!$ #e#unyai 'erat #oleul310 dengan 'erat enis
05 gF#3 dan sangat sta'il ada larutan yang 'e'as asa#'asa serta sangat
#uda"larut dala# air. Dosis oti#u# D!$ dala# engenerse#en iti se'esar
? (A> et al. 2005) dan aya# &a#ung se'esar 5 E ? (Soiyana et al.
200). &riorotetan D!A #eruaan senyawa dengan 'erat #oleul 12 dan
'erat enis 04 gF#3 #eruaan larutan yang #uda" larut dala# air alo"ol
et"er aseton 'en/ena dan larutan lain #e#unyai e#a#uan enetrasi yang
'ai ada selsel dengan andungan lipid #e#'ran yang 'anya. Dosis oti#u#
D!A dala# engener se#en iti se'esar 10? (A> et al. 2005) entog se'esar
? (&usu#aningru# et al. 2002) dan aya# Ara' se'esar ? (+sandar et al.
2006). :liserol #a#u #engiat air yang uu uat arena adanya tiga gugus
"idrosil yang di#iliinya. :liserol daat #enggantian se'agian air yang 'e'as
dan #endesa eluar eletroliteletrolit se"ingga #enurunan onsentrasi
eletrolit intraseluler dan #engurangi daya #erusanya ter"ada ser#ato/oa
dengan alan #e#odi-iasi ristal es yang ter'entu (,oeli"ere 15). Di dala#
#e#'ran las#a riorotetan ini aan #engiat gugus usat -os-oliid
se"ingga #engatasi etidasta'ilan #e#'ran serta 'erinterasi dengan #e#'ran
untu #engiat rotein dan gliorotein se"ingga #enye'a'an artielartiel
intra#e#'ran teru#ul (Par dan :ra"a# 12).
Dosis oti#u# gliserol dala# engener iti se'esar ? (an et al.
2005) dan aya# &a#ung se'esar 5 E ? (Soiyana et al. 200). Pada teni
rioreserasi eat -ator yang #enentuan e'er"asilan rioreserasi
tergantung ada teni yang diteraan. Prosedur rioreserasi eat
#e#'erian endeatan yang seder"ana eono#is dan e#an-aatan watu
ter"ada roses e#'euan di'andingan dengan rosedur rioreserasi
onensional (7se" et al. 1). !enurut 9alerdi et al. (200) 'a"wa teni
rioreserasi eat adala" teni yang e-isien untu rioreserasi dengan
#e#'eriansurvival rate yang tinggi.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
16/27
Pe$%&*$ K&l!( Se'e$ U$%%( P( K"/-"e(e"(
&e'er"asilan e#'euan se#en seara in vitro daat dili"at dari u#la"
ser#ato/oa yang 'er"asil W#R$#%O# &ol. '( )o. * $h. '+((14 uli" dari
roses e#'euan yang dise'ut dengan recovery rate. Ber'agai teni tela"
die#'angan untu #eli"at ersentase ser#ato/oa #otil seara su'eti-
atauun #enggunaan 'antuan computerized assisted sperm analyzed (7ASA).
7ASA !ulai digunaan sea ta"un 10an. aluasi #engggunaan 7ASA
selain daat #engeta"ui ersentase total ser#ato/oa #otil dan rogresi- uga
#e#'erian in-or#asi arateristi ser#ato/oa #otil yang lenga seerti
dance average path velocity (DAP) dance curvilinear velocity (D7=) dance
straight line velocity (DS=) average path velocity (9AP) curvilinear velocity
(97=)straight line velocity (9S=)straightness (S,R) linearity (=+>)wobble
(B) amplitude lateral head displacement(A=) dan beat cross freuency
(B7$). Dari e13arateristi #otilitas ser#ato/oa terse'ut yangaling sering
dilaoran adala" total #otil rogresi-#otil dan 97=.
Selain dengan alat 'antu ealuasi ualitas se#en se'elu# dilauan
inse#inasi #eruaan uuran ualitas yang se'enarnya dan #e#'erian
ga#'aran tingat -ertilitas yang aan diaai. >a#un de#iian 'anya -ator
yang #e#engaru"i tingat -ertilitas ser#a 'euthawing di antaranya adala"
enis riorotetan (Donog"ue dan is"art 2000) tingat sensitiitas ter"ada
roses 'euthawing disa#ing -ungsi siste# transortasi dan enyi#anan
dala# saluran rerodusi 'etina (Bas et al. 14). asil enguian -ertilitas dari
'e'eraa se#en 'euunggas disaian ada ,a'el 2. Selain dili"at dari -ertilitas
ada rosedur lain yang digunaan untu #e#redisi e'er"asilan rioreserasi
dari se#en aya# yaitu dengan #eli"at eadaan #e#'rannya (Bles'ois et al.
200). Setia ser#ato/oa "arus #e#ilii #e#'ran las#a utu" arena tida
leas dari eranannya se'agai alat transortasi eluar #asunya /at/at #aanan
dan ionion yang dierluan untu roses #eta'olis#e. Ser#ato/oa yang
#e#ilii #e#'ran las#a utu" ditandai dengan eor #elingar atau
#engge#'ung arena roses transortasi air e dala# sel 'erlangsung 'ai.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
17/27
Se'alinya 'ila #e#'ran las#a rusa aanditandai dengan eor ser#a teta
lurus 'ila diaaran dala# larutan "ioos#oti arena roses ,ransortasi air
e dala# sel suda" rusa.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
18/27
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Je$( Pe$el!$
Penelitian ini #eruaan enelitian desriti- dengan #elauan
enyi#anan ser#a segar yang dierole" seara langsung e#udian di
si#an #enggunaan #edia tris dengan ena#'a"an gluosa dan -rutosa.
B. 7#!& $ Te'-! Pe$el!$
Penelitian dilauan di gedung 7 =a'oratoriu# &ultur @aringan @urusan
Biologi $!+PA *niersitas >egeri Sura'aya ada tanggal 11 24 !ei 2013.
). S("$ Pe$el!$
Sasaran dari enelitian ini adala" ser#ato/oa segar aya# yang dia#'il
seara langsung dan disi#an dala# serta ealuasi ser#ato/oa.
D. P"/(e&" Pe$el!$
1. Al! $ Bh$
a. Ba"an '. Alat
1. Se#en segar aya#
2. Alo"ol 0 ?
3. &aas
4. ,ris
5. Asa# sitrat
6. :luosa
. $rutosa
. Penisilinstreto#isin
. &uning telur segar
10. Deioni/e water
11. Pewarna eosin negrosin
1. :elas o'e dan enutu
2. ,a'ung sentri-use lasti
3. Alu#iniu# -oil
4. Piet steril
5. Sti gelas
6. !iroiet uuran dan #iroti
. e#osito#eter
. 7awan etri dan ra ta'ung reasi
. ater 'at" dan "and ounter
10. !iroso a"aya
11.Pe#'aar Bunsen dan ertas saring
12.:elas 'eer 50 100 250 #l
13.Syringe uuran 5 dan 10 #l
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
19/27
2. P"/(e&" -el#($$ -"#!#&'
1. Sterilisasi Peralatan
Bersi"an se#ua eralatan dari 'a"an'a"an yang #ene#el dengan
#enggunaan air #engalir
Renda#la" se#ua eralatan dengan sa'un tida 'er'au (teeol) se#ala#
:oso dan 'ilas dengan air #engalir se'anya 5I
Re'us dengan air anas se'anya 5 #enit
Bilas dengan DF a%uades steril se'anya 2I
&eringan
=auan sterilisasi ering untu eralatan dari gelas di dala# oen
=auaan sterilisasi 'asa" atau di *9 untu eralatan dari lasti
2. Pe#'uatan Pengener Dasar ,ris
,i#'ang ,ris 3025 g H asa# sitrat 1 g H gluosa 010 g H -rutosa 010
g H enisilin 01 g H streto#isin 01 g
7a#uran se#ua 'a"an i#ia e dala# gelas 'eaer ta#'"aan air D
se'anya n5 #l lalu goyanggoyangan gelas 'eaer untu #e#'antu
"o#ogenisasi.
@ia se#ua suda" larut ta#'"aan lagi air D sa#ai larutan
#enunuan olu#e 100 #l
Sterilisasi dengan #enggunaan #e#'rane #ilior di =A$
Si#an engener dasar tris dala# le#ari es
3. Sule#entasi &uning ,elur
&eluaran engener dasar tris dari le#ari es 'iaran dala# su"u ruang
suaya su"unya nai dan #uda" untu dia#ur dengan uning telur
A#'il telur yang #asi" 'aru 'ersi"an otoran yang #ene#el ada
angang dengan sa'un dan air #engalir
Sterilisasi telur dengan ara di se#rot dengan #enggunaan alo"ol 0
?
Pea"an telur ada 'agian tenga" dengan #enggunaan isau atau inset
A#'il 'agian uning telurnya saa usa"aan utu" tida ea" gulingan
ada ertas saring untu #eng"ilangan sisa uti" telur.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
20/27
!asuan uning telur ada awan etri steril
A#'il uning telur dengan ara di sedot #enggunaan aru# sunti
A#'il engener dasar tris se'anya 0 #l dengann #enggunaan
syringe #asuan dala# ta'ung reasi lasti steril
,a#'a"an uning telur se'anya 20 #l "o#ogenan dengan ara di
oooo
Si#an dala# le#ari es sela#a 3 "ari a#'il 'agian suernatant untu
engener
4. Proses Pengeneran Se#en
Siaan ta'ung reasi steril yang suda" di'ungus dengan alu#iniu# -oil
a#'il se#en segar dengan #enye#rotan larutan PBSFengener tris e
saluran eididi#is e#udian eididi#id di enet untu #engeluaran
se#en si#an dala# ta'ung reasi lasti steril dala# eadaan "angat
(su"u 307)
"itung segera onsentrasi ser#ato/oa dengan #enggunaan
"e#osito#eter
lauan enga#atan #otilitas ser#ato/oa dari se#en segar
lauan roses engeneran dengan #enggunaan rinsi engeneran
91 I !1J92 I !2
dala# roses engeneran terle'i" da"ulu a#'il se#en segar dengan
#enggunaan #iroiet sesuai uuran "asil "itungan e#udian
ta#'a"an engener sesuai dengan "asil "itungan lauan engeneran
ada su"u "angat
tentuan onsentrasi ser#ato/oa se'esar 1 I 106 setela" dilauan
engeneran
5. Penga#atan !otilitas Ser#ato/oa
=auan enga#'ilan ser#ato/oa dengan #enggunaan sti gelas
dengan terle'i" da"ulu di aduadu agar ser#ato/oa daat ter'awa
,etesan se#en ada gelas o'ye
Panasan se'entar dengan ara di lewatlewatan di atas Bunsen
A#ati #otilitas ser#ato/oa di 'awa" #iroso
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
21/27
6. Penga#atan 9ia'ilitas Ser#ato/oa
=auan enga#'ilan se#en dengan #enggunaan sti gelas
,etesan ada gelas o'ye
A#'il ewarna eosinnegrosin tetesan ada gelas o'ye yang sa#a
dengan se#en
A#'il gelas o'ye lain
7a#uran se#en dengan ewarna eosinnegrosin dengan #enggunaan
sala" satu uung gelas o'ye
Buat "ausan antara se#en dan ewarna eosinnegrosin dengan
#enggunaan uung gelas o'ye
A#ati di 'awa" #oroso ia'ilitas ser#ato/oa yang ditandai dengan
ser#ato/oa yang #asi" "idu tida 'erwarna ser#ato/oa yang suda"
#ati 'erwarna 'iru
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
22/27
BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN
1. H(l
T5el 1. Penga#atan !otilitas ser#ato/oa
N/
T$%%l $ h"
-e$%'!$
M/!l!( 84 R!9
"!L-$% -$$%
1 2 3 : ;
1 Ra'u 22 !ei 2013 30 30 25 20 25 26 ?
2 &a#is 23 !ei 2013 3 @u#at 23 !ei 2013
T5el 2. Penga#atan 9ia'ilitas ser#ato/oa
N/
T$%%l $ h"
-e$%'!$
V5l!( (-e"'!/
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
23/27
&onsentrasi se#en segar setela" dilauan er"itungan dierole" nilai 21 I
105 e#udian dilauan engeneran #enggunaan ru#us 91.!1J92.!2
dengan olu#e engeneran yang diinginan 3 I 103#l dan onsentrasi sela#a
enyi#anan 10 I 105 se"ingga dierole" olu#e ser#ato/oa yang "arus di
a#'il dengan #iroiet yaitu 132 Ll dan olu#e engener 162 Ll.
Penga#atan "ari erta#a setela" dilauan enyi#anan dierole" ratarata
##otilitas se'esar 26 ? dengan sel yang "idu se'anya 131 dan yang #ati
se'anya 6. Pada "ari edua dan etiga etia dilauan enga#atan #otilitas
ser#ato/oa tida ta#a ser#ato/oa yang #asi" "idu se"ingga tida
dilauan enga#tan ia'ilitas.
2. Pe'5h($
"asil analisis data #enunuan 'a"awa ser#ato/oa #a#u 'erta"an dala# 1
"ari saa. al ini diarenaan eurangan ratian dala# #elauan teni
enyi#anan ser#ato/oa.
Pada enelitian ini dilauan ena#'a"an gluosa dan -rutosa e dala#
engener ,ris untu #e#reserasi ser#ato/oa di"araan aan
#e#ini#alan erusaan ser#ato/oa sela#a reserasi se"ingga daya ta"an
"idunya daat dieranang. >a#un "al terse'ut tida sesuai dengan "araan.
Pada "ari erta#a dierole" rerata #otilitas se'anya 26 ?. &ondisi
ser#ato/oa yang 'ergera rogresi- #au edean "anya sediit. Dala# "al ini
ena#'a"an -rutosa dan gluosa #a#u #e#erta"anan #otilitas
ser#ato/oa. !enurut Ri/al (200) gluosa dan -rutosa #eruaan golongan
#onosaarida yang daat di#eta'olisir ole" ser#ato/oa #elalui gliolisisdanFatau silus &re's untu #eng"asilan energi 'erua adenosin tri-os-at (A,P).
Adenosintri-os-at di#an-aatan ole" ser#ato/oa se'agai su#'er energi dala#
roses ergeraan se"ingga daat teta #otil dan sealigus untu
#e#erta"anan daya "idunya.sedangan sule#entasi uning telur 'er-ungsi
#enaga ualitas ser#a arena uning telur 'er-ungsi untu #engiat loga# 'erat
teruta#a alsiu# yang #enye'a'an le#a dari uning telur #enadi 'entu 'utiran
le#a yang le'i" "alus dan 'ersa#a uning telur #e#'entu 'a"an engener yang
isotonis ter"ada se#en. =esitin uning telur di"araan aan #elindungi #e#'ran
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
24/27
las#a sel ser#ato/oa dari erusaan sela#a roses engola"an se#en
teruta#a saat endinginan ($ati#a" 2012).
9ia'ilitas saat enga#atan "ari erta#a dierole" ser#ato/oa "idu se'anya 131
dan ser#ato/oa #ati se'anya 6. Ser#ato/oa "idu tida 'erwarna arena
ser#ato/oa tida #enyera ewarna eosinnegrosin. Sedangan ser#ato/oa yang #ati
#e#ilii warna 'iru eunguan (idayat d. 2013)
Pada enga#atan "ari e2 tida didaatan ser#ato/oa yang #asi" "idu.
&e#unginan dise'a'an ole" atiitas seluler yang "a#ir oti#u# se"ingga
su'strat energy di dala# las#a se#en aya# eat "a'is dan terdaat au#ulasi
asa# latat se'agai sisa #eta'olis#e dengan onsentrasi le'i" tinggi yang
'ersi-at tosi ada ser#ato/oa. &arena ada "ari e2 tida terdaat
ser#ato/oa yang 'ergera #aa "ari e3 tida dilauan enga#atan.
Penye'a' lain ser#ato/oa #ati yaitu arena urang a"linya ratian dala#
#elauan roses enga#atan dan enyi#anan. Di#ana terdaat teniteni
tertentu serti "alnya eeatan dan eteatan dala# #enentuan #otilitas
ser#ato/oa. Selain "al terse'ut su"u sela#a enyi#anan "arus teta sta'il dan
tida 'eru'a"u'a" 'ai saat enyi#anan #auun etia #elauan
enga#atan se"ingga ser#ato/oa tida #engala#i eutan dingin ai'at su"u
yang 'eru'a". Dala# "al ini enyi#anan dilauan dala# ulas yang 'erisi
'er#aa##aa# isoal 'ateri dan su"u uga sering #engala#i eru'a"an.
&etia aan #enga#ati ada "ari e2 su"u ada ulas seitar 10 07 "al itula"
yang #enye'a'an ser#ato/oa yang disi#an #ati ai'at adanya eutan
dingin.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
25/27
BAB V
PENUTUP
1. Ke('-&l$
Ser#ato/oa aya# yang disi#an #enggunaan engener tris
sule#entasi uning telur dan ena#'a"an gluosaK-rutosa #e#ilii
ualitas yang 'uru dengan #otilitas se'esar 26 ? dan "anya #a#u
#e#erta"anan #otilitas dan ia'ilitas ser#ato/oa sela#a satu "ari.
2. S"$
S"$ &$! -"#!#$ (el$*&!$, ,!& 6
1. Peralatan yang digunaan untu #elauan engeneran dan enyi#anan
se"arusnya #enggunaan eralatan yang sesuai untu enyi#anan
ser#ato/oa
2. Partian sea"rusnya suda" #enguasai teni ena#ungan se#en segar dan
uga teni ealuasi ser#ato/oa se"ingga dierole" "asil yang 'ai.
3. &etia #elauan ealuasi lauan dengan eat arena ser#ato/oa sangat
sensitie dengan eru'a"an su"u.
7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
26/27
DAFTAR PUSTAKA
Ba"r@.! and !.R. Bast 1. Poultry in a-e/.S. Rerodution in -ar#Ani#al 5t" ed. =ea and $e'iger. P"iladel"ia . 335.
Diretorat @endral Peternaan . 12. Buu statisti eternaan . Diretorat Bina
Progra# . Ditenna @aarta.
$ati#a" siti. 2011. !otalitas dan resentase "idu ser#ato/oa sai $riesian
olstein ost t"awing dala# engener si# uning telur tris uning telur
dan andro#ed. Srisi MnlineN tersedia
"tt;FFwww.-".unair.a.idFartiel1F2011Fsiti?20-ati#a"..d- (,anggal 16
Dese#'er 2012)
ardianto Susilowati ernawati Sardito dan Surayogi. 2010. u"u #ar
/nseminasi uatan. Sura'aya ; Airlangga *niersity Press
&ingston. D.@ . 1. Peranan aya# 'ereliaran di +ndonesia. =aoran Se#inar
dan +ndustri Perunggasan ++ . Pusat Penelitian dan Penge#'angan ,erna
Bogor . ; 1320 .
=ae P.. and @.!.Stewart 1. Arti-iial +nse#ination in Poultry. !inistry o-
Agriulture $is"eris and $ood Bulletin. .!. Stationery o--ie =ondon. .
5 14
!ansyoer . S.S. 15. Pengaian si-atsi-at rodusi aya# a#ung serta
ersilangannya dengan aya# R"ode +sland Red. Desertasi Pasa Sarana
+PB . Bogor.
>eis"ei# !.7 R.. Austi and .7. =eislie 1. Poultry Prodution. 12 t" ed.
=ea and $e'iger. P"iladel"ia. . 16 E 5.
Rasya-!.13. Beterna Aya# &a#ung. Pener'it Swadaya @aarta.
Ridwan 200. Pengaru" Pengener Se#en ,er"ada A'nor#alitas dan Daya,a"an idu Ser#ato/oa &a#'ing =oal ada Penyi#anan Su"u 5 o7.
urnal agroland16 (2) ; 112
Ri/al !u"a##ad. 200. Daya idu Ser#ato/oa ididi#is Sai Bali yang
Direserasi ada Su"u 3E5o7 dala# Pengener ,ris dengan &onsentrasi
=atosa yang Ber'eda. @+,9 9ol. 14 >o. 2 ,". 200; 14214
Salis'ury :.. 8 9anDen#ar >.=. 14.0isiologi reprodu"si dan /nseminasi
uatan pada 1api. Ditere#a"an ole" Danuar R. 15. Oogyaarta ;
:ada" !ada *niersity Press
http://www.fkh.unair.ac.id/artikel1/2011/siti%20fatimah..pdfhttp://www.fkh.unair.ac.id/artikel1/2011/siti%20fatimah..pdf7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc
27/27
Su#antri 16. ,enologi awin sunti ada terna iti . Bulletin ,eni
Pertanian olu#e + no . 2 ta"un 16. Badan =it'ang Pertanian .
Sastrodi"ardo . S. S . +sandar ,. >ur#ala dan Paggi . 14. Daya ta"an "idu
ser#ato/oa aya# 'uras dala# 'er'agai engener se#en dengan enguian
Su"u a#ar . Prosiding Se#inar >asional Pengola"an dan &o#uniasi
asil"as. Su'Balitna &leu . Se#arang .
Sastrodi"ardo S 16. +nse#inasi Buatan Pada Aya# Buras. =ea-let 7etaan
&edua Balitna Puslit'ang Peternaan Bogor.
SturieP.D. 16. Aian P"ysiology. 3 rd ed. Sange 9erlag. >ew Oor.
302 E 330.
,oeli"ere!.R. 15. +nse#inasi Buatan Pada ,ernaPener'it Angasa Bandung.
; 265 21
,oeli"ere !R. 15a. 0isiologi reprodu"si pada terna". Bandung ; Pener'it
Angasa Bandung.
,oeli"ere !R. 15'. /nseminasi buatan pada terna". Bandung ; Pener'it
Angasa Bandung.