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LA GALERIE API 20E (travail de Roland FERRY CANNES)
1- Présentation de la galerie
Galerie de 20 microtubes prêts à l’emploi permettant de réaliser 23 tests biochimiques afin d’identifier des bacilles Gram – appartenant à la famille des ENTEROBACTERIACEAE.
cupule
microtube contenant le milieu déshydraté
La suspension bactérienne introduite dans le tube dissout les substrats déshydratés.
2- Préparation de l’inoculum
Prélèvement d’une souche pure
sur GNI
1 seule colonie sur GO
5 mL d’eau distillée stérile
isolement
Souche pure sur GNI
LA GALERIE API 20E
3- Ensemencement de la galerie API 20 E
Introduire la suspension bactérienne dans chaque tube à l’aide d’une pipette Pasteur stérile ouverte, pointe appuyée à l’intérieur et sur le côté pour éviter la formation de bulles
Pour certains caractères:
Remplir le tube de suspension puis recouvrir d’huile de paraffinePour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S, URE
LA GALERIE API 20E
Remplir de suspension le tube et la cupulePour les tests :
CIT VP GEL
LA GALERIE API 20E
4- Lecture de la galerie API 20 E
Après 24h d’incubation à 37°C, dans quelles cupules doit-on rajouter des réactifs ?
Napht-1-ol Naphtyl-1-amine
Chlorure de fer III
4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests
LA GALERIE API 20E
+ Réactif TDA
+ Réactif Kovacs
+ Réactifs VP 1 et 2
+ Réactif TDA
+ Réactif Kovacs
+ Réactifs VP 1 et 2
Tests négatifs
Tests positifs
Tests négatifs
Tests positifs
Après ajout des réactifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR (ici NR +)
LA GALERIE API 20E
4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests
TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISÉE API 20E
Microtube Substrat : Caractère recherché : RévélateurLecture directe ou indirecte
Test (si nécessaire)Résultat
-Résultat +
ONPGONPG = Ortho-Nitro-Phényl-Galactoside
ADHLDCODC
ArginineLysineOrnithine
CIT Citrate
H2SThiosulfate de sodium
URÉ Urée
TDA Tryptophane
IND Tryptophane
VPPyruvate de sodium
GEL Gélatine
GLU à ARA
= zymogramme
Substrat carboné (glucide)
NO2- / N2 Nitrates (NO3
-)
Beta galactosidase
Lecture directe
Arginine DihydrolaseLysine DécarboxylaseOrnithine Décarboxylase
BBT
Rouge de Phénol
Lecture directe
Lecture directe
Lecture directe
Lecture directe
Lecture directe
Utilisation du citrate
Production d’H2S
Uréase Rouge de Phénol
Tryptophane désaminase
Tryptophanase ou production d’indole
production d’acétoïne (3-hydroxybutanone
gélatinase
Utilisation de substrats carbonés (glucides)
Nitrate réductase
BBT
Lecture directe
Lecture indirecteAjouter une goutte de réactif chlorure de fer III Lecture indirecteAjouter une goutte de réactifKovacsLecture indirecteAjouter 1 goutte de VP1 et VP2 Attendre 10 minutes
Lecture indirecteAjouter 1 goutte de NIT1 et NIT2 et zinc éventuellement
5 2 1 5 7 7 3 5
+ +-
Code n°: 5 215 773 (55)
++
5
5- Identification de la souche
Se référer au catalogue pour identifier la souche à l’aide du code
Résultats de la galerie :
Résultats reportés sur la fiche d’identification
LA GALERIE API 20ELA GALERIE API 20E