LAPORAN RESMI PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK

PENETAPAN KADAR KARBOHIDRAT TOTAL

Metode Enzimatik

Tanggal : 23 April 2010

Golongan/Kelas : III/ FKK 08

Dosen Pembimbing : Adam Hermawan, M.Sc, Apt

Asisten Jaga : Ina Armandari

Dwi Ana Nawangsari

Nama/NIM :

1. Hivo Grashia Leony FA/08103

2. Candra Dwipayana H. FA/08104

3. Fitria Anggraini FA/08128

4. Dheny Cahyo Saputro FA/08129

5. Teng Thien Wun FA/08223

6. Mesa Sukmadani Rusdi FA/08143

7. Jasson Yohanes Jr. FA/08148

8. Rina Mai Saroh FA/08155

9. Dandiko Galanova FA/08156

10. Titis Janu Wiyamti FA/08157

11. Bakiyarathi Seridaran FA/08224

12. Anisa Ika Oktaviani FA/08169

13. Hela Putri Kusumo FA/08172

14. Hesti Prihastuti D. FA/08136

15. Kunthi Hari Pratiwi FA/08165

16. Husna Zainal FA/08217

17. Aimerul Asyraff Z. FA/08222

LABORATORIUM KIMIA FARMASI ANALISIS

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS GADJAH MADA

2010

I. TUJUAN PERCOBAAN

Agar mahasiswa mampu menetapkan kadar karbohidrat total dengan menggunakan

metode enzimatik dan menentukan GPT.

II. PRINSIP DASAR PERCOBAN

Metode enzimatis adalah metode tang lebih spesifik untuk menetukan kadar glukosa

tanpa intervensi dari senyawa- senyawa yang tidak diinginkan. Glukosa dioksidasi menjadi asam

glukonat dan H2O2 dengan enzim GOD. Kemudian, H2O2 direaksikan dengan peroksidase dan O-

dianisidin menghasilkan senyawa berwarna.

GPT (Glutamat Piruvat Transamniase) ialah sebuah enzim peroksidase yang terdapat pada liver.

III.  METODE SISTEMATIS

-          Preparasi sampel (plasma)

Ambil darah ± 3 ml

 

Sentrifuge (25oC, 1300 rpm, 10’)

 

-          Penetapan kadar karbohidrat total

Sampel(plasma 10μL) Blangko(Aquadest  10 μL) Standard(standard 10 μL

+ Reagen GOD PAP 1000μl

Campur, inkubasi 10 menit di waterbath, suhu 37 ̊C

Baca absorbansi di λ 500 nm

Replikasi 3x

-          Penetapan GPT

Plasma 100μl

+ Reagen I 1000μl

Campur, inkubasi 5 menit di waterbath, suhu 37 ̊C

+ Reagen II 250μl

Baca absorbansi pada λ 340 nm pada menit ke 1, 2, dan3

IV. HASIL PERCOBAAN (DATA DAN PERHITUNGAN)

a). Data Percobaan

Kelompok Baku (Abs) Puasa (Abs) Tidak Puasa (Abs)I 0.323 0.237 0.291 0.256 0.33 0.35 0.308II 0.341 0.229 0.214 0.234 0.333 0.329 0.321

III0.349 0.25 0.282 0.163 0.308 0.375 0.311 0.329

IV 0.361 0.228 0.247 0.259 0.238 0.268 0.228

b). Perhitungan

Kadar = x konsentrasi Baku ( )

1. Kelompok I

Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 90,09

Kadar 3 = x 100 = 79,26

Rata – rata = = 80,91

Tidak Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 108,36

Kadar 3 = x 100 = 95,36

Rata – rata = = 101,96

2. Kelompok II

Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 62,7566

Kadar 3 = x 100 = 68,6217

Rata – rata = = 66.1779

Tidak Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 96,4809

Kadar 3 = x 100 = 94,1349

Rata – rata = = 96,0899

3. Kelompok III

Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 80,8023

Kadar 3 = x 100 = 46,7049

Rata – rata = = 66,3801

Tidak Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 100,9740

Kadar 3 = x 100 = 106,8182

Rata – rata = = 109,8485

4. Kelompok IV

Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 68,42

Kadar 3 = x 100 = 71,74

Rata – rata = = 67,77

Tidak Puasa

Kadar 1 = x 100 =

Kadar 2 = x 100 = 74,24

Kadar 3 = x 100 =63,16

Rata – rata = = 67,78

C). Perhitungan GPT

Replikasi Menit ke-

0' 1' 2' 3'Orig 0.591 0.581 0.572 0.563

I 0.522 0.513 0.510 0.503II 0.494 0.486 0.472 0.463

GPT = [ ( Δ 0’-1’ ) + ( Δ 1’-2’ ) + ( Δ 2’-3’ ) ] X 2143

GPT1

= = 9,333 X 10 -3

GPT = 9,333 X 10 -3 X 2143 = 20.0013 IU/L

GPT2

= = 6.333 X 10 -3

GPT = 6,333 X 10 -3 X 2143 = 13.5723 IU/L

GPT1

= = 0,0103

GPT = 0.0103X 2143 = 22.1443 IU/L

= = 18.5726 IU/L

IV Daftar Pustaka

Christian, G.D.,1994,Analitycal Chemistry , John Wiley & Sons , Inc . , NY.

Stryer , L . , 1995 , Biochemistry , 4th Ed ., W .H Freeman & Company , NY