Laporan Uji Kualitatif Protein

LAPORAN TETAP BIOKIMIA 1

Uji Kualitatif ProteinNama: Septi AndrianiNIM: 06101181320005Kelompok: 2Anggota: 1. Dess Kasturi 2. Eka Ranti Bendari 3.Hasanul Kamil Ridho 4.Nurul Hidayah 5.Yuliana Dosen Pembimbing : Diah Kartika Sari

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIAFAKULTAS KEEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKANUNIVERSITAS SRIWIJAYA2016

I. Percobaan ke: 3 dan 4II. Tanggal Percobaan: 29 dan 5 Febuari 2016III. Nama Percobaan: Uji Kualitatif ProteinIV. Tujuan Percobaan: Untuk mengidentifikasi atau menguji gugus fungsi yang terdapat dalam suatu protein melalui reaksi reagen.V. Dasar TeoriProtein adalah suatu polipeptida yang memiliki kira-kira 100 sampai 1.800 atau lebih residu asam amino.Protein alamiah memiliki 20 jenis asam amino. Untuk setiap protein tertentu, urutan dan jenis-jenis asam amino yang menyusunnya sangat spesifik. Suatu protein yang hanya tersusun atas asam amino dan tidak mengandung gugus kimia lain disebut protein sederhana.Protein disebut protein konjugasi. Bagian yang bukan asam amino dari jenis protein lain disebut gugus prostetik. Contohnya, lipoprotein mengandung lipid dan glikoprotein mengandung gula. (Amstrong,1995). Di dalam tubuh, protein mempunyai peranan yang sangat penting. Fungsi utamanya sebagai zat pembangun atau pembentuk struktur sel. misalnya untuk pembentukan kulit, otot, rambut, membran sel, jantung, hati, ginjal,dan beberapa organ penting lainnya. Kemudian,terdapat pula protein yang mempunyai fungsi khusus, yaitu protein yang aktif. Beberapa diantaranya adalah enzim yang berperan sebagai biokatalisator,hemoglobin sebagai pengangkut oksigen, hormon sebagai pengatur metabolisme tubuh dan antibody untuk mempertahankan tubuh dari serangan penyakit. Kekurangan protein dalam waktu lama dapat mengganggu berbagai proses metabolisme di dalam tubuh serta mengurangi daya tahan tubuh terhadap serangan penyakit. (Winarno, 1982). Protein dalam tubuh manusia diperoleh dari bahan makanan,baik yang berasal dari hewan maupun tumbuhan. Protein yang berasal dari hewan disebut protein hewani, sedangkan yang berasal dari tumbuhan disebut protein nabati. Sumber protein dari beberapa bahan makanan adalah daging, telur, susu, ikan, beras, kacang, dan buah-buahan. Protein dalam makanan yang dikonsumsi manusia akan dipecah menjadi asam-asam amino dalam proses pencernaan dengan dibantu oleh enzim seperti pepsin dan tripsin.Asamasam amino yang dihasilkan diserap oleh usus dan dibawa darah ke hati atau didistribusikan ke jaringan-jaringan yang membutuhkan. Selain untuk pembentukan sel-sel tubuh,protein dapat pula digunakan sebagai bahan bakar apabila keperluan energi tubuh kita terpenuhi oleh karbohidrat dan lemak. (Riawan,1990). Secara kimiawi, protein merupakan senyawa polimer yang tersusun atas satuan asam-asam amino sebagai monomer-nya. Asam-asam amino terikat satu sama lain melalui ikatan peptida, yaitu ikatan antara gugus karboksil (-COOH) asam amino yang satu dengan gugus amino (-NH2) dari asam amino yang lain dengan melepaskan satu molekul air, peptida yang terbentuk atas dua asam amino disebut dipeptida. Sebaliknya, peptide yang terdiri atas tiga, empat, atau lebih asam amino masing-masing disebut tripeptida, tetra peptide, dan seterusnya. (Amstrong, 199).Protein adalah blok bangunan kehidupan.Tubuh membutuhkan protein untuk memperbaiki dan mempertahankan dirinya.Struktur dasar dari protein adalah rantai asam amino. Protein adalah nutrisi yang dibutuhkan oleh tubuh manusia untuk pertumbuhan dan pemeliharaan.Selain air, protein adalah jenis yang paling melimpah dari molekul dalam tubuh.Protein dapat ditemukan di semua sel tubuh dan merupakan komponen struktural utama dari semua sel dalam tubuh, terutama otot.Ini juga termasuk organ tubuh, rambut dan kulit.Protein juga digunakan dalam membran, sepertiglikoprotein.Ketika dipecah menjadi asam amino, mereka digunakan sebagai prekursor untukasam nukleat, co-enzim, hormon, respon imun, perbaikan sel, dan molekul lain yang penting bagi kehidupan.[4]Selain itu, protein diperlukan untuk membentuk sel darah. Protein dapat ditemukan dalam berbagai makanan.Kombinasi terbaik dari sumber protein tergantung pada wilayah di dunia, akses, biaya, jenis asam amino dan keseimbangan gizi, serta selera diperoleh.Beberapa makanan yang tinggi asam amino tertentu, tapi cerna mereka danfaktor-faktor anti-nutrisihadir dalam makanan ini membuat mereka nilai terbatas dalam gizi manusia.Oleh karena itu, kita harus mempertimbangkan kecernaan dan profil gizi sekunder seperti kalori, kolesterol, vitamin dan kepadatan mineral penting dari sumber protein.[6]Pada dasar di seluruh dunia, makanan protein nabati berkontribusi lebih dari 60 persen dari pasokan per kapita protein, pada rata-rata.Di Amerika Utara, makanan yang berasal dari hewan berkontribusi sekitar 70 persen sumber protein. Daging, telur dan ikan merupakan sumber protein lengkap.Susu dan susu yang diturunkan makanan juga merupakan sumber protein yang baik. Ketika protein dicerna, asam amino yang tersisa.Tubuh manusia membutuhkan sejumlah asam amino untuk memecah makanan.Asam amino harus dimakan dalam jumlah cukup besar untuk kesehatan yang optimal. Asam amino yang ditemukan dalam sumber-sumber hewani seperti daging, susu, ikan, dan telur, serta sumber tanaman seperti kedelai, kacang-kacangan, kacang-kacangan, selai kacang, dan beberapa biji-bijian (seperti gandum).Anda tidak perlu makan produk hewani untuk mendapatkan semua protein yang Anda butuhkan dalam diet Anda. Asam amino diklasifikasikan menjadi tiga kelompok: Esensial Nonesensial Bersyarat Kekurangan protein dan kekurangan gizi dapat menyebabkan berbagai penyakit. termasukketerbelakangan mentaldan kwashiorkor.[9]Gejala kwashiorkor termasuk apatis, diare, tidak aktif, gagal tumbuh, kulit terkelupas, fatty liver, dan edema dari perut dan kaki.Edema ini dijelaskan oleh aksi lipoxygenase pada asam arakidonat untuk membentuk leukotrien dan fungsi normal dari protein dalam keseimbangan cairan dan transportasi lipoprotein.Meskipun malnutrisi energi protein lebih umum di negara-negara berpenghasilan rendah, anak-anak dari negara-negara berpenghasilan tinggi juga terpengaruh, termasuk anak-anak dari daerah perkotaan besar di lingkungan sosial ekonomi rendah.Hal ini juga dapat terjadi pada anak-anak dengan penyakit kronis, dan anak-anak yang dilembagakan atau dirawat di rumah sakit untuk diagnosis yang berbeda.Faktor risiko meliputi diagnosis utama cacat intelektual, cystic fibrosis, keganasan, penyakit jantung, penyakit ginjal tahap akhir, penyakit oncologic, penyakit genetik, penyakit saraf, beberapa diagnosa, atau rumah sakit yang berkepanjangan.Dalam kondisi ini, manajemen gizi menantang mungkin bisa diabaikan dan diremehkan, mengakibatkan penurunan kemungkinan untuk pemulihan dan memburuknya situasi.VI. Alat dan BahanA. Uji BiuretBahanAlat1. NaOH 2,5 N1. Tabung Reaksi2. Larutan Albumin2. Rak Tabung Reaksi3. Larutan Putih Telur 1%-5%3. Pipet Tetes4. Larutan Kuning Telur 1%-5%4. Gelas Ukur5. Larutan CuSO4 ,001 N5. Beeker GelasB. Pengendapan dengan LogamAlat Bahan1. Tabung reaksi1. Larutan Putih telur 1%-5%2. Rak tabung reaksi2. Larutan susu 1%-5%3. Pipet tetes3. Larutan Albumin4. Beeker gelas4. Larutan HgCl2 ,0,2 M5. Batang pengaduk5. Larutan Timbal Asetat 0,2 M6. Gelas ukurC. Uji Pengendapan dengan Alkohol Alat Bahan1. Tabung reaksi1. Larutan putih telur 1%, 3% 5%2. Rak tabung reaksi2. Larutan kuning telur 1%, 3% 5%3. Pipet tetes3. HCl 0,1 M4. Beeker gelas4. NaOH 0,1 M5. Batang pengaduk5. Buffer asetat pH 4,76. Gelas Ukur 6. Etil alkohol 95% (Etanol) 7. Akuadest 8. Larutan susu 1%, 3% 5%D. Uji Pengendapan dengan GaramBahan :Alat1. Larutan (NH4)2 SO41. Tabung Reaksi2. Larutan Putih Telur 1%, 3% dan 5%2. Tabung Sentrifuge3. Larutan Kuning Telur 1%,3% 5%3. Sentrifuge4. Larutan Susu 1%,3% 5%4. Waterbath5. Reagen Millon5. Beeker Gelas6. Akuadest6. Pipet Tetes dan Gelas Ukur

E. Uji KoagulasiBahan Alat 1. Asam asetat1. Batang pengaduk2. Larutan Albumin2. Pipet tetes3. Larutan ikan 1% - 5%3. Beeker gelas4. Larutan putih telur 1% -5%4. Tabung Reaksi5. Larutan kuning telur 1% -5 %5. Penjepit tabung reaksi6. Reagen Millon6. Rak tabung reaksi7. Akuadest (H2O)7. Waterbath8.Penangas air dan hotplate.VII. Prosedur PercobaanA. Uji Biuret1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan2. Ambil larutan sampel yang akan digunakan sebanyak 3 ml3. Tambahkan 1 ml NaOH 2,5 N ke dalam larutan sampel4. Aduk larutan sampel hingga homogen5. Tambahkan tiga tetes CuSO4 0,001 M, aduk dan lihat perubahan warna yang terjadi dan catatlah hasil pengamatan yang didapat

B. Pengendapan dengan Logam1. Siapkan alat dan bahan yang digunakan untuk percobaan ini2. Ambil masing-masing larutan sampel yang digunakan sebanyak 3 ml lalu masukkan ke dalam tabung reaksi. (setiap sampel digunakan untuk 2 kali percobaan jadi dibutuhkan 2 tabung reaksi untuk satu sampel dengan volume sampel yang sama)3. untuk tabung pertama : 3 ml larutan sampel yang diambil kemudian ditambahkan dengan 5 tetes larutan HgCl2 -untuk tabung kedua : 3 ml larutan sampel yang diambil kemudian ditambahkan dengan 5 tetes larutan timbal asetat4. amati perubahan yang terjadi dan catatlah di tabel hasil pengamatan.

C. Uji Pengendapan dengan Alkohol1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan untuk percobaan ini2. Ambil masing-masing sampel yang digunakan sebanyak 5 ml lalu masukkan kedalam tabung reaksi. (setiap sampel digunakan untuk 3 tabung reaksi,jadi total setiap1 sampel 15 ml untuk 3 tabung reaksi)3. untuk tabung pertama : 5 ml larutan sampel yang diambil kemudian ditambah 1 ml HCl 0,1 M, homogenkan larutan kemudian tambahkan lagi dengan etil alkohol 95% (etanol) sebanyak 6 ml. Lakukan untuk setiap sampel yang akan digunakan.-untuk tabung kedua : 5 ml larutan sampel yang diambil kemudian ditambah 1 ml NaOH 0,1 M, homogenkan larutan kemudian tambahkan lagi dengan etil alkohol 95% (etanol) sebanyak 6 ml. Lakukan untuk setiap sampel yang akan digunakan-untuk tabung ketiga : 5 ml larutan sampel yang diambil kemudian ditambah 1 ml buffer asetat, pH 4,7, homogenkan larutan kemudian tambahkan lagi dengan etil alkohol 95% (etanol) sebanyak 6 ml. Lakukan untuk setiap sampel yang akan digunakan.4. Lihat dan amati perubahan yang terjadi, kemudian jika larutan sampel berubah mempunyai endapan, maka pisahkan endapan dengan larutannya5. Uji endapan dengan air (akuadest), amati perubahan yang terjadi dan catatlah hasilnya.D. Uji Pengendapan dengan Garam1. Siapkan alat dan bahan (cuci bersih tabung reaksi dan keringkan)2. Ambil larutan sampel yang telah disiapkan sebanyak 1 ml 3. Tambahkan Ammonium Sulfat jenuh sedikit demi sedikit ke dalam tabung reaksi 4. Hitunglah berapa ml ammonium sulfat yang dimasukkan ke dalam tabung reaksi sampai terlihat banyaknya protein yang rusak terbentuk5. Ambil protein dengan menggunakan batang pengaduk atau saring dengan kertas saring atau untuk lebih mudah lakukanlah sentrifuge terhadap larutan tersebut6. Protein yang ada dibagi ke dalam 2 tabung. Tabung 1 untuk uji dengan reagen millon dan tabung 2 untuk uji dengan akuadest7. Untuk tabung yang diuji dengan reagen millon, protein ditetesi 3 tetes reagen millon dan lihat perubahan yang terjadi, jika belum terdapat perubahan maka masukkanlah ke dalam waterrbath. Catalah hasil pengamatan yang didapat8. Untuk tabung yang diuji dengan akuadest, protein ditetesi akuadest, amati perubahan yang terjadi dan catatlah hasil pengamatan yang didapat.

E. Uji Koagulasi1. Siapkan alat dan bahan, panaskan waterbath dan penangas air2. Ambil larutan sampel sebanyak 5 ml, masukkan kedalam tabung reaksi3. Tambahkan 2 tetes HOAc 1 M atau asam asetat 1 M ke dalam 5 ml larutan protein4. Masukkan sampel ke dalam waterbath untuk dipanaskan5. Amati perubahan yang terjadi kemudian pisahkan endapan menjadi 2 bagian dan uji masing-masing endapan dengan air dan reagen millon6. Ambil larutan sampel (5 ml) albumin, putih telur 5%, kuning telur 5%, ikan 5%7. Tambahkan 1 tetes larutan asam asetat 1 M8. Panaskan didalam penangas air, amati perubahan sampel yang terjadi9. Pisahkan endapan dengan batang pengaduk10. Bagilah endapan menjadi 2 bagian kemudian 1 tabung endapan di uji dengan air dan 1 tabung endapan diuji dengan reagen millon11. Amati dan catatlah perubahan yang terjadi.

VIII. Data Hasil Pengamatan Uji Biuret1Larutan Putih Telur 1% 3 ml + Larutan NaOH 1 ml + Larutan CuSO4 3 tetesLarutan berubah menjadi warna ungu

2Larutan Putih Telur 2% 3 ml + Larutan NaOH 1 ml + Larutan CuSO4 3 tetesLarutan berubah menjadi warna ungu




6Larutan Kuning Telur 1% 3 ml + Larutan NaOH 1 ml + Larutan CuSO4 3 tetesLarutan berubah menjadi warna ungu





11Larutan susu 1% 3 ml + Larutan NaOH 1 ml + Larutan CuSO4 3 tetesLarutan berubah menjadi warna ungu





Pengendapan dengan LogamPerlakuan Larutan Sampel dengan Larutan HgCl2 0,2 M

NoPerlakuan SampelHasil Pengamatan

1Larutan kuning telur 1% + 5 tetes Larutan HgCl2Larutan Keruh





6Larutan putih telur 1% + 5 tetes Larutan HgCl2Larutan Bening



9Larutan putih telur 4% + 5 tetes Larutan HgCl2Larutan Keruh

10Larutan putih telur 5% + 5 tetes Larutan HgCl2Larutan Keruh

11Larutan susu 1% + 5 tetes Larutan HgCl2Terdapat Endapan Putih





Perlakuan Larutan Sampel dengan Larutan Timbal Asetat 0,2 M

1Larutan putih telur 1% + 5 tetes Larutan Timbal Asetat Larutan Keruh

2Larutan putih telur 2% + 5 tetes Larutan Timbal AsetatLarutan Keruh




6Larutan susu 1% + 5 tetes Larutan Timbal Asetat Terdapat Endapan Putih

7Larutan susu 2% + 5 tetes Larutan Timbal AsetatTerdapat Endapan Putih




11Larutan kuning telur 1% + 5 tetes Larutan Timbal AsetatLarutan Bening



14Larutan kuning telur 4% + 5 tetes Larutan Timbal AsetatLarutan Agak Keruh

15Larutan kuning telur 5% + 5 tetes Larutan Timbal AsetatLarutan Keruh

Pengendapan dengan AlkoholNoSampelTabung I (HCl)Tabung II NaOHTabung III Buffer Asetat

1Putih Telur 1%Tidak ada endapan dan larutan beningTidak ada endapan dan larutan beningSedikit endapan

2Putih Telur 3%Tidak ada endapan dan larutan beningTidak ada endapan dan larutan beningSedikit endapan

3Putih Telur 5%Tidak ada endapan dan larutan beningTidak ada endapan dan larutan beningBanyak endapan

4Kuning Telur 1%Tidak ada perubahanTidak ada perubahanTerdapat sedikit endapan

5Kuning Telur 3%Tidak ada perubahanTidak ada perubahanTerdapat sedikit endapan

6Kuning Telur 5%Tidak ada perubahanTidak ada perubahanTerdapat sedkit endapan

7Susu 1%Terdapat endapanTerdapat endapanBanyak endapan



Pengendapan dengan GaramNoSampelPengamatan

Uji Kelarutan dengan AirUji Kelarutan dengan Reagen Millon

1Susu 1%Endapan larutTerbentuk warna merah bata



Uji KoagulasiNoSampelDipanaskanUji Kelarutan

Dengan AirDengan Millon

1Susu 1%Tidak ada endapanLarut-

2Susu 3%Ada endapanTidak larutMerah bata

3Susu 5%Ada endapanTidak larutMerah bata

4Putih telur 1%Tidak ada endapan--



7Kuning telur 1%Tidak ada endapan--



Pengamatan Uji Pengendapan dengan Alkohol

PT+HCl PT+Buffer PT+NaOH Susu+Buffer Susu +NaOH KT+NaOHPengamatan Uji Pengendapan dengan Garam

Pengamatan Uji Koagulasi

Pengamatan Uji Biuret dan Pengendapan dengan Logam

IX. Persamaan ReaksiA. Persamaan Reaksi Pengendapan dengan Alkohol Reaksi dengan HCl 0,1 M dan dilanjutkan dengan alkohol

Reaksi dengan NaOH 0,1 M dan dilanjutkan dengan alkohol

Reaksi dengan Buffer Asetat pH 4,7 dan dilanjutkan alkohol

B. Persamaan Reaksi Pengendapan dengan Garam

C. Persamaan Reaksi Koagulasi

D. Persamaan Reaksi Uji Biuret

E. Persamaan Reaksi Pengendapan dengan Logam Pengendapan dengan HgCl2 (Garam Netral Proteanat) Pengendapan dengan Pb-Asetat

X. Pembahasan Pada percobaan kali ini praktikan melakukan percobaan mengenai reaksi uji terhadap asam amino yaitu uji biuret, uji pengendapan dengan logam, pengendapan dengan garam, pengendapan dengan alkohol dan uji koagulasi.Untuk reaksi uji biuret yaitu pengujian larutan putih telur 1%-5%, kuning telur 1%-5% dan susu 1%-5% yang diambi sebanyak 3 ml dan kemudian ditambahkan larutan NaOH sebanyak 1 ml dan ditambahkan 3 tetes CuSO4 warna larutan akan berubah dari yang awalnya larutan berwarna bening berubah menjadi warna ungu. Disini terlihat jelas kepekatan warna yang terjadi yaitu semakin tinggi konsentrasi larutan yang akan diuji maka warna larutannya akan semakin menjadi ungu pekat (lebih ungu dari yang sebelumnya). Hal ini menunjukkan bahwa didalam larutan yang diuji terdapat ikatan peptida karena terjadinya perubahan warna menjadi warna ungu.Warna ungu pada asam amino ini berasal dari kompleks Cu2+ dengan gugus CO dan NH dari rantai peptida dalam suasana basa. Albumin memiliki gugus bagun yang kompleks dan mengikat dua atau lebih asam amino essensial sehingga terbentuk ikatan peptida dan menghasilkan warna ungu (violet). Semakin banyak ikatan peptida yang dimiliki maka warna ungu yang terbentuk semakin nyata (Gilvery : 1996).Sedangkan untuk percobaan pengendapan dengan garam, praktikan mendapatkan data bahwa dari tiga sampel yang ada hanya larutan susulah yang memiliki banya endapan (jika ditetesi Pb asetat dan HgCl2), sedangkan untuk larutan putih telur yang ditetesi dengan timbal asetat hanya berubah menjadi keruh saja dan ketika ditetesi HgCl2 tidak ada perubahan yang terjadi. Untuk larutan kuning telur yang ditetesi timbal asetat hanya larutan 4% dan 5% saja yang berubah menjadi keruh dan ketika ditetesi dengan HgCl2 larutannya berubah menjadi keruh semua tanpa adanya endapan. Dalam Poedjiadi (2006:118) di tuliskan bahwa ada ion-ion positif dan ion-ion negative yang dapat mengendapkan protein. Untuk ion-ion positif yang dapat mengendapkan protein antara lain Ag+ ,Ca++, Zn++,Hg ++, Cu++, dan Pb++, sedangkan ion-ion negative yang dapat mengendapkan protein ialah ion salisilat, trikloroasetat, pikrat, tanat, dan sulfosalisilat.Dari data yang telah praktikan dapatkan hampir semua larutan sampel yang memiliki banyak endapan ialah larutan sampel yang ditetesi dengan larutan HgCl2 (ditinjau dari larutan susu) hal demikian terjadi karena adanya perbedaan harga Ksp dari kedua logam yang terlarut dalam masing-masing larutanya tersebut, dimana Hg2+ mempunyai harga Ksp lebih kecil (misal Ksp dari Hg2Cl2 1,4 x1018) dibandingkan dengan timbal asetat (misal Ksp dari PbCl2 1,7 x 10-5)sehingga larutan yang direaksikan dengan suatu larutan yang mengandung Pb2+ lebih banyak larut dan sedikit membentuk endapan dan sebaliknya larutan protein yang direaksikan dengan ion Hg2+ lebih banyak mengendap. Berdasarkan sifat dari protein terhadap logam-logam inilah maka putih telur atau susu dapat digunakan sebagai antidotum atau penawar racun apabila orang keracunan logam berat seperti Hg dan Pb. Hal serupa dituliskan oleh poedjiadi(2006) dalam bukunya Dasar-Dasar Kimia halaman 118.Jumlah endapan yang dihasilkan juga dipengaruhi oleh kereaktifan logam berat yang ditambahkan. Logam Hg lebih reaktif daripada Pb kerena kedua logam tersebut merupakan logam transisi pada sistem periodik unsur. Karena itu seharusnya yang terjadi pada percobaan adalah endapan pada penambahan logam Hg lebih banyak dari logam Pb. Reaksi antara logam dengan protein dapat menyebabkan terputusnya rantai samping pada protein yang menyebabkan protein menjadi tidak aktif. Selain itu, logam tersebut dapat memutuskan ikatan disulfida dan ikatan pada jembatan garam. Protein yang terdenaturasi terlihat dari endapan putih yang terbentuk.Endapan yang terbentuk pada uji pengendapan dengan alkohol dipengaruhi oleh ph isoelektrik larutan. Ph isoelektik adalah kondisi dimana muatan positif dan negatif yang ada itu jumlahnya sama banyak. Dalam larutan asam (pH rendah), gugus amino bereaksi dengan H+, sehingga protein bermuatan positif. Sebaliknya, dalam larutan basa (pH tinggi) molekul protein akan bereaksi sebagai asam atau bermuatan negatif. Pada pH isolistrik muatan gugus amino dan karboksil bebas akan saling menetralkan sehingga molekul bermuatan nol.Untuk pengujian pengendapan dengan garam, larutan sampel ditambahan dengan larutan garan amonium (NH4)2 SO4 yang sebelumnya telah dijenuhkan, ammonium sulfat akan melarut dalam air atau pelarutnya dan akan terbentuk protein yang mengendap berwarna putih. Mengendapnya protein tersebut disebabkan karena adanya kompetisi antara ion-ion garam amonium dengan molekul protein untuk mengikat air. Karena ion-ion dari garam amonium lebih mudah dalam mengikat air, menyebabkan kelarutan protein dalam air berkurang. Dengan penambahan garam secara kontinyu, molekul air akan keluar dari larutan dan mengendap.Sedangkan terjadinya koagulasi pada larutan sampel disebabkan oleh ion H+ dari CH3COOH terikat pada gugus negatif yang ada pada protein. Pada saat ion H+ dari asam asetat masuk ke dalam larutan maka akan mempengaruhi keseimbangan dan pengutuban muatan dari molekul protein, perubahan keseimbangan dan pengutuban tersebut menyebabkan rusaknya konformasi alamiah protein seperti struktur tersier dan kuartener protein. Rusaknya konformasi alamiah protein akan menyebabkan terganggunya stabilitas dari larutan protein sehingga larutan protein tersebut mengalami atau menyebabkan terjadinya koagulasi atau sering disebut dengan penggumpalan. Protein akan mengalami koagulasi jika suhunya sudah mencapai 50 atau lebih, hal ini terjadi apabila larutan protein berada pada titik isoelektriknya.

XI. Kesimpulan 1. Pada uji biuret perubahan warna yang terjadi yaitu beruah menjadi warna ungu menandakan bahwa larutan sampel bereaksi positif2. Warna ungu yang terbentuk menandakan bahwa adanya ikatan peptida pada larutan sampel3. Semakin tinggi konsentrasi larutan sampel maka perubahan warnanya akan semakin pekat (lebih ungu dari yang sebelumnya)4. Logam-logam Hg dan Pb dapat mengendapkan protein5. Endapan yang banyak dihasilkan ialah endapan yang terdapat pada larutan sampel yang ditetesi dengan larutan HgCl26. Banyak sedikitnya endapan yang terbentuk antara larutan sampel yang ditetesi larutan HgCl2 dengan sampel yang ditetesi larutan timbal asetat diakibatkan oleh perbedaan Ksp dari kedua logam7. Hg2+ mempunyai harga Ksp lebih kecil dibandingkan dengan timbal asetat sehingga larutan yang direaksikan dengan suatu larutan yang mengandung Pb2+ lebih banyak larut dan sedikit membentuk endapan dan sebaliknya larutan protein yang direaksikan dengan ion Hg2+ lebih banyak mengendap.8. Koagulasi ini terjadi karena disebabkan oleh ion H+ dari CH3COOH terikat pada gugus negatif yang ada pada protein.9. Protein akan mengalami koagulasi apabila pada saat dipanaskan suhu yang digunakan mencapai 50 atau lebih hal ini terjadi apabila larutan protein berada pada titik isoelektriknya.10. Endapan protein yang terbentuk disebabkan ion garam lebih mudah untuk mengikat air (hidrasi) dibandingkan dengan molekul protein. Sehingga molekul protein kalah bersaing dalam hal mengikat air, akibatnya kelarutan protein dalam air berkurang dan protein membentuk endapan. 11. Putih telur bereaksi positif ketika ditetesi dengan reagen millon karena memberikan warna merah bata pada endapan protein12. Endapan protein yang mengalami perubahan warna menjadi merah bata itu menandakan bahwa terdapat asam amino didalamnya yaitu mengandung tirosin.13. Larutan yang paling banyak endapannya yaitu larutan pada penambahan buffer asetat ph 4,714. Adanya endapan protein ini dikarenakan gugus hidroksi dari alkohol lebih mudah mengalami hidrasi

XII. Daftar Pustaka

Darma Qua Rezkya Anastasya .2014.Koagulasi Protein. (online). darmaquarezkyaanastasya.blogspot.co.id/2008/04/amino-dan-protein.html (diakses pada tanggal 9 Febuari 2016)Frederica, Debrina . 2012. Protein (online) http://bio-protein.blogspot.com/ diakses pada 02 Febuari 2016.Khoiriah,Nisa.2012.UjiProtein;(online)(http://nissakhoiriah.blogspot.com/2012/03/laporan-praktikum-biokimia-reaksi-uji.html,(diakses pada tanggal 9 Febuari 2016)Ningsih,Ismi.2013.UjiReaksi;(online)(http://ismiariningsih.blogspot.com/2013/02/laporan-praktikum-biokimia-reaksi-uji.html,diakses pada tanggal 02 Febuari 2016Nurbi.2010.Uji protein;(online) http://nurbio08uh.blogspot.com/ (diakses pada tanggal 9 Febuari 2016)Poedjiadi, A. 1994.Dasar-dasarBiokimia.Universitas Indonesia. JakartaPuspita, Sari.2012. Uji Koagulasi Protein. (online). http://www.ilmukimia.org/2013 / 01/uji-koagulasi.html.(online) (dikases 9 Febuari 2016).Sukaryawan, Made dan Desi. 2014. Petunjuk Praktikum Biokimia I. Indralaya : Unsri

Documents

Laporan Uji Kualitatif Protein