MASTITIS AMBIENTALES: PROPUESTAS PARA

MEJORAR EL CONTROL Y TRATAMIENTO

Luis F. Calvinho

RESUMEN TEMAS

Introducción

Reseña etiología y epidemiología de

organismos ambientales

Respuesta de la vaca a patógenos ambientales

Tratamiento racional de casos clínicos

Medidas de prevención

INTA Rafaela

FCV UNL,

Esperanza

Investigación, extensión y docencia en mastitis bovina

3

4

RESEÑA PRODUCIÓN PRIMARIA

Alto número de lecherías en diversas cuencas

Cambios marcados en los sistemas de producción

en la última década

Aumento de productividad (Lt/Vo/día): 2001-2004 15,1

vs 2012-2013 19,2 (> 27,2%)

OCLA

RESEÑA PRODUCIÓN PRIMARIA

Reducción del número de

tambos: 1,9% anual (2002-

2015) (www.ocla.org.ar)

Aumento de tamaño de los

rodeos, mejora de

indicadores de eficiencia

productiva

Tendencia a “intensificación”

de la producción5

EFECTO DEL AMBIENTE

Influencia el estado de

bienestar, causando

stress y afectando las

respuestas inmunes

Influencia la

exposición, desarrollo

y sobrevivencia de

grupos bacterianos

PATÓGENOS AMBIENTALES

Cocos “ambientales” y coliformes

Streptococcus uberis,

dysgalactiae y spp.

Escherichia coli, Klebsiella

spp., Enterobacter spp. y

otras Gram negativas

EXPOSICIÓN A COCOS AMBIENTALES

Entre ordeños, durante el

ordeño, secado, preparto

¿En sistemas pastoriles?

sectores con sombras, época

de lluvia, sobre pastoreo, (?)

S. uberis aislado de cama, suelo,

forrajes, sitios anatómicos

extramamarios (MF, vulva, labios)

Materia orgánica cerca de

bebederos y comederos

MASTITIS POR COCOS AMBIENTALES

Duración: 12 a 38 días (SC) (en

pastoreo y estabulación)

50% cursan con signos clínicos

(grumos, dolor, hinchazón del cuarto)

15% tienen una duración mayor

a 90 días (subclínicas)

Eliminación espontánea

45-75%

Mayoría leche anormal (con o sin inflamación local)

Muy pocas (>10%) signos sistémicos

10

intensificación de la

producción: más vacas en

menos espacio

Barro y hacinamiento

favorecen la contaminación

de las glándulas mamarias

con organismos coliformes

EXPOSICIÓN A COLIFORMESFuentes: estiércol, agua

estancada, suciedad,

alimentos, camas, jeringas

MASTITIS POR COLIFORMES

Corta duración (más del 50%

menores a 10 días)

Desde casos leves a

sistémicos

Alrededor de 10% de casos

clínicos resultan en

peragudas (periparto)80-90% IIM en lactancia

dan signos clínicos

Mayoría causadas por cepas

no relacionadas, aunque hay

cepas adaptadas a GM

Curso clínico depende

de respuesta del

hospedador

MASTITIS AGUDAS POR COLIFORMES

Depresión,

deshidratación

Gran caída de la

producción,

secreción alterada

Diagnóstico no

siempre evidente

Durante período puerperal: aguda y

peraguda (endotoxemia)

Promediando lactancia: poco severa e

indistinguible de otros patógenos

RESPUESTA DE LA VACA A

LAS INFECCIONES POR

ORGANISMOS

AMBIENTALES

Tasa de

nuevas

IIM

Parto

Lactancia Período

seco

IIM subclínicas

existentes

Secado Parto

Primariamente

ambientales

(Cocos G+ y

coliformes)

TASA DE NUEVAS IIM DE ACUERDO A

PERÍODO DE LACTANCIA

14 Natzke

15

INGRESO

MICROORGANISMOS

DETECCIÓN PATÓGENOS

INICIO RESPUESTA

INFLAMATORIA

MOVILIZACIÓN

NEUTRÓFILOS DESDE

CIRCULACIÓN SISTÉMCA

MARGINACIÓN, MIGRACIÓN

FAGOCITOSIS

RESUMEN RESPUESTA INFLAMATORIA

RESPUESTA INNATA DIFIERE DE ACUERDO AL PATÓGENO

E. coli:

respuesta

rápida e

intensa

S. aureus:

moderada

y lenta

Str. uberis:

demorada y de

menor intensidad

RECUENTO CÉLULAS SOMÁTICAS POST INFECCIÓN

Diferente respuesta a E. coli, S. aureus y S. uberis

E. coli: rápido (16 hs) e intenso reclutamiento de PMN

Bannermann et al (2004)

¿LA VACA SIEMPRE RESPONDE IGUAL? ¿QUÉ OCURRE AL PERIPARTO?

Efecto acumulativo de varios factores

Niveles de

estrógenos y

progesterona

Endorfinas Cortisol

(±36 hs)

Balance

negativo de

energía y

proteína

Susceptibilidad

genética

Supresión

fisiológica del

sistema

inmune

INMUNOSUPRESIÓN

¿QUÉ OCURRE CON LOS NEUTRÓFILOS AL PERIPARTO?

Funciones disminuidas de PMN en mastitis

espontáneas

Ingestión

mediada por

FcR

Iodinación mediada

por MPO

Migración aleatoria

CONSECUENCIAS DE LA INMUNO-SUPRESIÓN AL PERIPARTO

Evidencia: mastitis, metritis, retención de placenta,

paratb, salmonelosis (todas con mayor incidencia

clínica en lactancia temprana)

Inmunosupresión:

convierte casos

subclínicos en

clínicos

Alta tasa de IIM

subclínicas

preparto, alta tasa

de clínicas

posparto

CONSECUENCIAS DE LA INMUNOSUPRESIÓN

Multiplicación

bacteriana

Diferencias

entre vacas al

periparto y en

mitad de

lactación

RESPUESTA INFLAMATORIA DESCONTROLADA

Típica Gram

negativas (E.

coli)

Migración PMN

demoradaDisminución

funciones PMN

Rápido

desarrollo

bacteriano

Producción

aumentada de

mediadores pro

inflamatorios

Respuesta

inflamatoria

exacerbada

Daño vascular

TERAPIA

ANTIBIÓTICA

RACIONAL DE

CASOS CLÍNICOS

TRATAMIENTO Y CONTROL

24

Probabilidad de

curación

relacionada al

patógeno

Distinta

ubicación en

el tejido

mamario

Determinante para

seleccionar el antibiótico

¿PORQUÉ ES IMPORTANTE SABER

QUÉ PATÓGENO PREDOMINA?

25

BLANCO DE TERAPIA ATM(Adaptado de Erskine, 2003)

LECHE/

DUCTOS

TEJIDO

MAMARIO

VACA

S. agalactiae +++ --- ---

S. No agalac-

tiae

+++ + ---

S. aureus + +++ ---

SCN +++ --- ---

Coliformes + -- +++

26

DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

10 – 40% muestras de

MC sin desarrollo

Nº organismos

debajo límite

detección Organismos no

cultivables en

medios

estándar

LIMITANTES

Eliminación del

agente causal al

momento de

tomar muestra

¿CUÁNTO DEBE DURAR EL TRATAMIENTO ATB?

27

DOSIFICACION

Aplicar 1 jeringa por cuarto infectado

cada 12 hs. Por tres aplicaciones

consecutivas (inicial,12 y 24 hs).

DOSIFICACION

Aplicar 1 jeringa aplicadora por cuarto

afectado luego del ordeñe, repetir a las

12 horas.

DOSIFICACION

Dosificación según el

grado de mastitis

DOSIFICACION

Aplicar una jeringa por cuarto

mamario cada 12 horas.

Se recomienda un mínimo de tres

dosis.

DOSIFICACION

Administrar el contenido de un inyector

por cuarto afectado después de cada

ordeñe. Continuar el tratamiento con

dos aplicaciones posteriores a la

remisión de los síntomas.

DOSIFICACION

Aplicar el contenido de una

jeringa (10 ml) por cuarto

mamario, inmediatamente

después del ordeño, con

intervalos de 12 horas durante 3

ordeños consecutivos.

Información de marbetes (Vademecum)

28

¿ESTAMOS DOSIFICANDO ADECUADAMENTE?

Nivel adecuado de atb por tiempo requerido

sobre la CIM (antibióticos tiempo dependiente)

Terapia usual frente a casos clínicos: 2 a 3 días

Subdosificar favorece aparición de fallas

Prolongar terapia aumenta tasas de curación

TERAPIA MASTITIS CLÍNICAS(cocos ambientales)

Terapia intramamaria con beta lactámicos de

espectro reducido

Posible combinación de terapia intramamaria y

parenteral (mismo compuesto) (efectividad

discutida) (Hillerton & Kliem., 2002)

Falta de beneficio de asociación con

aminoglucósidos (Taponen et al., 2003)

30

TERAPIA EN CASOS AGUDOS (coliformes)

Antibióticos: quinolonas, cefalosporinas. Prevención

de bacteriemias (ceftiofur)

Falta de riesgo de liberación masiva de endotoxina

(Dosogne et al., 2002)

AINES:

meloxicam,

flunixin

meglumine

Reposición

fluidos (sn

hipertónica 7,5%

ClNa, vía oral 20-

40 lts)

Casos leves: beneficio de uso de ATM discutido

GUÍA SELECCIÓN ANTIBIÓTICOS

31

Organismo Especie Droga de

elección

Droga de

elección

disponible en

Argentina

Comentarios

Streptoco-

ccus

dysgalac-

tiae

uberis

Penicilina G Cefalosporina

1era

Penetamato,

Cloxacilina,

amoxicilina

Tratamiento

intramamario

preferible

Coliformes Escheri-

chia coli

No antimicro-

bianos en

(casos leves

promediando

lactancia)

Fluoroquino-

lonas, cefalos-

porinas

Antimicro-

bianos en

casos

severos y

durante

periparto

Fuente: adaptado de Pyörälä (2009)

GENERACIÓN DE PROTOCOLO PARA EL ESTABLECIMIENTO

Considerar patógeno/s prevalente/s

Definición de caso clínico: leve, moderado, severo

Seleccionar antibióticos (1era y 2da opción)

Implementación: indicaciones y registro de tratamientos

Evaluación de curación: respuesta clínica, cultivo, RCS

MEDIDAS

PREVENTIVAS

FUNDAMENTOS DEL CONTROL

34

Disminuir la

exposición de los

pezones: higiene del

ambiente e higiene

preordeño

Aumentar resistencia a

de la vaca a las

infecciones mamarias

RESUMEN CAMBIOS PERÍODO SECO

Calvinho (Albéitar 2013)

RIESGOS SECADO TEMPRANO

Tapón de queratina

Formación

incompleta o

carencia del tapón

de queratinaGoteo de leche, permeabilidad a

contaminación bacteriana

Nickerson, 2013

RIESGOS DEL SECADO TARDÍO (periparto)

Vaca más susceptible a infecciones mamarias

Ambiente contaminado Inmunosupresión

Alta tasa de

IIM

subclínicas

preparto, alta

tasa de

clínicas

posparto

Inmunosupre-

sión convierte

casos

subclínicos en

clínicos

ORIGEN IIM EN LACTANCIA

Caso

s c

/100 v

acas

Mes de lactancia

IIM originadas en

el período seco

IIM originadas en

la lactancia

Green et al., 2002 JDS

SELLADORES INTERNOS DE PEZONES (SIP)

Análogos al tapón de

queratina natural (50% a los

10 días)

Desarrollado en Irlanda

(Meaney, 1977)

Subnitrato de bismuto al 25%

en base oleosa (parafina)

Genera un tapón en cisterna

del pezón

Meaney, Irish J. Agr. Res. 1977

SELLADORES INTERNOS

Fuente: Pfizer

(1) Administrar antibiótico

para vaca seca y (2) luego

administrar sellador interno

Precaución en la

aplicación

Con una mano colapsar parte

superior del pezón

SELLADORES INTERNOS EFICACIA

Inicio década 2000 estudios en rodeos con baja

prevalencia de infección (NZ y UK)

Con antibiótico + sellador interno al secado

Reducción de nuevas IIM dentro de los tres días

posparto (Cook et al., 2006)

Reducción reconocida de nuevas IIM (Rabiee &

Lean, JDS 2013) (Meta análisis)

VACUNACIÓN CONTRA COLIFORMES: VACUNA J5

Vacuna de antígeno

core (mutante

rugoso Rc)

Protección contra

múltiples serotipos

de E. coli y otras

Gram negativas

causantes de

mastitis42

¿CUÁL ES LA EFICACIA PRETENDIDA DE LA VACUNA J5?

No reduce el número de IIM subclínicas al parto

Reduce el número y severidad de casos de

mastitis clínicas (Hogan et al., 1992)

Análisis costo-beneficio positivo (deGraves &

Fetrow, 1991)

43

EFICACIA J5 REDUCCIÓN CASOS MC

ESTUDIO %REDUCCIÓN MC

Gonzáles et al. (1989) 80%

Cullor et al. (1991) 90%

Cullor et al. (1993) 65%

Hogan et al. (1992) 78%

Gonzáles et al. (1995) 72%

Nota: en todos los casos se usaron 3 dosis 44

Dosificación recomendada al secado, 30 días

antes parto y dentro de las 24 h parto SC

¿CUÁL ES EL MECANISMO DE ACCIÓN DE LA VACUNA?

¿Aumento de Ac

opsonizantes?

Relación entre título de Ac e

incidencia y severidad de

IIM no siempre establecido

Se considera más crítica la

rápida diapédesis de PMN

que el título elevado de Ac

para resolver la IIM por

coliformes

45

Incremento de IgG1 e IgG2

luego de vacunación

Mecanismo de acción propuesto

(Dosogne et al., 2002)

46

¿J5 genera una reversión del perfil tipo Th2 que predomina en periparto?

47

Rodeo comercial, 337

vacas

167

vacuna

170

control

EFICACIA DE VACUNA J5

Incidencia (%) Grupo RR

Control Vacunado

Morbilidad mastitis clínica 29,4 20,4 1,4

Morbilidad mastitis clínicas

severas

16,9 9,1 1,9

Mortalidad y venta 4,7 0,6 7,8

Pol et al., (2008)

INMUNOESTIMULANTES

Citocinas (ILs, IFN,

TNF-ɣ, GMC-SF)

Agentes

microbianos o sus

componentes (LPS,

lisados)

Derivados de plantas

medicinales (Aloe

vera, Panax ginseng)

Nutracéuticos

(vitaminas y

precursores)

Productos

farmacéuticos

(levamisol)

FACTOR ESTIMULANTE DE COLONIAS DE GRANULOCITOS

Rol primario: proveer PMN de

médula ósea

Activa molécula adhesión de

PMN, acelerando la respuesta

Aumenta actividad citotóxica de

PMN

Aumenta el número y

supervivencia de PMN

Es una citoquina

imnunoregulatoria

G-CSF

Funciones

G-CSF COMO BIOTERAPÉUTICO

Reducción de

mastitis

experimental por

S. aureus en 46,7%

(Nickerson et al.,

1989)

Reducción de mastitis

experimental por Klebsiella sp.

Controles IIM por 7 días, tratados

eliminaron organismo en 6 hs, sin

temperatura y recuperaron

producción láctea (Kherli et al., 1991)

ACTIVIDAD Y EFICACIA DE FORMA PEGILADA DE G-CSF

Kimura et al (2014)

Hassfurther et al (2015)

CONCLUSIONES

El control racional implica mejorar las

condiciones ambientales y aumentar la

resistencia de la vaca a las infecciones

El uso racional de los antimicrobianos y medidas

preventivas contribuyen a atenuar los efectos de

las infecciones por organismos ambientales

La selección de medidas a aplicar debe realizarse

a partir de la situación puntual de cada lechería

54

¡Muchas gracias!