Upload
dt-dt
View
218
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 1/62
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ
ĐẠI HỌC Y DƢỢ C THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
TÔ NHƢ PHƢƠNG
NGHIÊN CỨ U BÀO CHẾ GEL NHŨ TƢƠNG DẦU TRONG
NƢỚ C CHỨ A ACID KOJIC 1% DÙNG TRÊN DA
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ ĐẠI HỌC
Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2015
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 2/62
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ
ĐẠI HỌC Y DƢỢ C THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
TÔ NHƢ PHƢƠNG
NGHIÊN CỨ U BÀO CHẾ GEL NHŨ TƢƠNG DẦU TRONG
NƢỚ C CHỨ A ACID KOJIC 1% DÙNG TRÊN DA
KHÓA LUẬ N TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ ĐẠI HỌC
Thầy hƣớ ng dẫn: ThS. NGUYỄ N CÔNG PHI
Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2015
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 3/62
i
MỤC LỤC
MỤC LỤC ................................................................................................................... i
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT................................................................................. iv
DANH MỤC BẢ NG ................................................................................................... v
DANH MỤC HÌNH ................................................................................................. vii
LỜI CẢM ƠN ......................................................................................................... viii
CHƢƠNG 1. ĐẶT VẤN ĐỀ ...................................................................................... 1
CHƢƠNG 2. TỔ NG QUAN TÀI LIỆU ..................................................................... 2
2.1. TỔ NG QUAN VỀ GEL CÓ CẤU TRÚC NHŨ TƢƠNG .................................. 2
2.1.1. Định nghĩa ......................................................................................................... 2
2.1.2. Phân loại ............................................................................................................ 2
2.1.3. Yêu cầu chất lƣợ ng ........................................................................................... 2
2.1.4. Ƣu nhƣợc điểm của dạng bào chế gel có cấu trúc nhũ tƣơng ........................... 2
2.2. TỔ NG QUAN VỀ ACID KOJIC ......................................................................... 3
2.2.1. Công thức .......................................................................................................... 3
2.2.2. Tính chất lý hóa ................................................................................................. 4
2.2.3. Tác dụng ............................................................................................................ 4
2.2.4. Cơ chế ............................................................................................................... 4
2.2.5. Định lƣợ ng acid kojic ........................................................................................ 4
2.3. TỔ NG QUAN VỀ MỘT SỐ TÁ DƢỢC TẠO GEL CARBOMER ................... 5
2.4. TỔ NG QUAN VỀ CÁC CHỈ TIÊU ĐÁNH GIÁ CÔNG THỨ C ....................... 6
2.4.1. Cảm quan .......................................................................................................... 6
2.4.2. pH ...................................................................................................................... 6
2.4.3. Độ dàn mỏng ..................................................................................................... 6
2.4.4. Kích thƣớ c tiểu phân ......................................................................................... 7
2.4.5. Khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng ......................................................... 7
2.5. CÁC NGHIÊN CỨ U VỀ ACID KOJIC .............................................................. 8
2.5.1. Các nghiên cứu .................................................................................................. 8
2.5.2. Các chế phẩm .................................................................................................... 9
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 4/62
ii
CHƢƠNG 3. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨ U ...................................................... 11
3.1. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ TRANG THIẾT BỊ ................................................ 11
3.1.1. Nguyên vật liệu ............................................................................................... 11
3.1.2. Trang thiết bị ................................................................................................... 12
3.2. NGHIÊN CỨ U CÔNG THỨ C VÀ XÂY DỰ NG QUY TRÌNH BÀO CHẾ
GEL CHỨ A ACID KOJIC 1% DÙNG TRÊN DA .................................................. 12
3.2.1. Công thức đề nghị ........................................................................................... 12
3.2.2. Xây dựng quy trình bào chế ............................................................................ 13
3.3. CÁC CHỈ TIÊU ĐÁNH GIÁ CÔ NG THỨ C. ................................................... 15
3.3.1. Cảm quan ........................................................................................................ 15
3.3.2. Xác định độ dàn mỏng .................................................................................... 15
3.3.3. pH .................................................................................................................... 15
3.3.4. Kích thƣớ c tiểu phân và phân bố kích thƣớ c tiểu phân .................................. 16
3.3.5. Khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng ....................................................... 16
3.4. XÂY DỰ NG TIÊU CHUẨN GEL NHŨ TƢƠNG dầu trong nƣớ c CHỨ A
ACID KOJIC 1% ...................................................................................................... 17
3.5. THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢ NG ACID KOJIC BẰNG PHƢƠNGPHÁP QUANG PHỔ UV-VIS.................................................................................. 17
3.5.1. Xác định tính đặc hiệu (tính chọn lọc) ............................................................ 17
3.5.2. Xác định tính tuyến tính .................................................................................. 17
3.5.3. Xác định độ lặ p lại (độ chính xác) .................................................................. 18
3.5.4. Xác định độ đúng ............................................................................................ 19
CHƢƠNG 4. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬ N ............................................................... 20
4.1. K ẾT QUẢ VỀ SỰ LỰ A CHỌ N CÔNG THỨC GEL NHŨ TƢƠNG DẦUTRONG NƢỚC CHỨ A 1% ACID KOJIC .............................................................. 20
4.1.1. Khảo sát công thức .......................................................................................... 20
4.1.2. Công thức lựa chọn ......................................................................................... 34
4.1.3. Quy trình điều chế công thức lựa chọn ........................................................... 34
4.2. XÂY DỰ NG TIÊU CHUẨ N GEL CHỨ A ACID KOJIC 1% .......................... 35
4.2.1. K ết quả đánh giá của 3 lô ................................................................................ 35
4.2.2. Xây dựng tiêu chuẩn ....................................................................................... 36
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 5/62
iii
4.3. THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢ NG ACID KOJIC BẰNG PHƢƠNG
PHÁP QUANG PHỔ UV-VIS.................................................................................. 38
4.3.1. Xác định tính đặc hiệu (tính chọn lọc) ............................................................ 38
4.3.2. Xác định tính tuyến tính .................................................................................. 41
4.3.3. Xác định độ lặ p lại (độ chính xác) .................................................................. 42
4.3.4. Xác định độ đúng ............................................................................................ 43
CHƢƠNG 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ................................................................ 44
5.1. K ẾT LUẬ N ........................................................................................................ 44
5.2. ĐỀ NGHỊ ........................................................................................................... 44
Tài liệu tham khảo ..................................................................................................... 45
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 6/62
iv
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
D/N: Dầu trong nƣớ c.
KA: Acid kojic.
HPLC: Sắc kí lỏng hiệu năng cao.
NF: Dƣợc điển Mỹ.
N/D: Nƣớ c trong dầu.
PA: Hóa chất tinh khiết..
Ph.Eur: Dƣợc điển Châu Âu.
TCCS: Tiêu chuẩn cơ sở .
UHPLC: Sắc kí lỏng siêu hiệu năng.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 7/62
v
DANH MỤC BẢNG
Bảng 3.1. Danh mục các nguyên vật liệu sử dụng. .................................................. 11
Bảng 3.2. Danh mục các thiết bị sử dụng. ................................................................ 12
Bảng 3.3. Các thành phần trong công thức đề nghị. ................................................. 13
Bảng 3.4. Các dung dịch xác định tính tuyến tính. ................................................... 18
Bảng 4.5. Thành phần các công thức khảo sát lần 1 CT1 đến CT5 ......................... 20
Bảng 4.6. Thành phần các công thức khảo sát lần 1 CT6 đến CT10 ....................... 21
Bảng 4.7. K ết quả đánh giá về cảm quan của các công thức CT1 đến CT10 .......... 22
Bảng 4.8. Thành phần các công thức khảo sát đợt 2 CT11 đến CT16. .................... 23
Bảng 4.9. Đánh giá về cảm quan các công thức 11 đến 16. ..................................... 23
Bảng 4.10. K ết quả đo độ dàn mỏng của các công thức 11, 14, 16.......................... 24
Bảng 4.11. K ết quả đo pH của các công thức 11, 14, 16. ......................................... 24
Bảng 4.12. K ết quả đo phân bố kích thƣớ c tiểu phân của các công thức 11, 14, 16.
................................................................................................................................... 25
Bảng 4.13. Đánh giá về cảm quan đối vớ i từng loại cánh khuấy. ............................ 26
Bảng 4.14. K ết quả đo độ dàn mỏng CT6 vớ i CK1, CK2 vớ i thờ i gian khuấy tƣơng ứng.
................................................................................................................................... 27
Bảng 4.15. K ết quả đo phân bố kích thƣớ c tiểu phân của CT16 vớ i hai loại cánh
khuấy và thờ i gian khuấy tr ộn khác nhau tƣơng ứng. ............................................... 28
Bảng 4.16. Thành phần các công thức khảo sát đợ t 5 từ CT23 đến CT26. .............. 29
Bảng 4.17. Thành phần các công thức khảo sát đợ t 5 từ CT27 đến CT30. .............. 30
Bảng 4.18. Đánh giá về cảm quan các công thức 23 đến 30. ................................... 30
Bảng 4.19. K ết quả đo độ dàn mỏng của các công thức 25, 26, 29 và 30. ............... 31
Bảng 4.20. K ết quả đo pH của các công thức 25, 26, 29 và 30. ............................... 31
Bảng 4.21. K ết quả phân bố kích thƣớ c tiểu phân của công thức 25, 26, 29 và 30. 32
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 8/62
vi
Bảng 4.22. Phần trăm hoạt chất khuếch tán qua màng theo thờ i gian của các công
thức 25, 26, 29 và 30. ................................................................................................ 33
Bảng 4.23. K ết quả đánh giá 3 lô về cảm quan. ....................................................... 35
Bảng 4.24. K ết quả đánh giá 3 lô về pH. .................................................................. 35
Bảng 4.25. K ết quả đánh giá 3 lô về phân bố kích thƣớ c tiểu phân. ........................ 35
Bảng 4.26. K ết quả khảo sát tính tuyến tính ............................................................. 42
Bảng 4.27. K ết quả khảo sát độ lặ p lại (độ chính xác). ............................................ 43
Bảng 4.28. K ết quả khảo sát độ đúng. ...................................................................... 43
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 9/62
vii
DANH MỤC HÌNH
Hình 2.1. Carbomer ở dạng acid (a) và dạng muối (b)............................................... 6
Hình 2.2. Tế bào khuếch tán ....................................................................................... 8
Hình 2.3. UNITONE 4 của Isis Pharma ................................................................... 10
Hình 2.4. MELA-D serum của La Roche-Posay ...................................................... 10
Hình 3.5. Sơ đồ bào chế gel chứa 1% acid kojic. ..................................................... 14
Hình 4.6. Đồ thị phân bố kích thƣớ c tiểu phân của CT16. ....................................... 25
Hình 4.7. Đồ thị phân bố kích thƣớ c tiểu phân khi dùng CK1 vớ i thờ i gian 4 phút.................................................................................................................................... 28
Hình 4.8. Đồ thị biểu diễn khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng của các công
thức 25, 26, 29 và 30. Mỗi mẫu đƣợ c lặ p lại 3 lần và lấy k ết quả trung bình. ......... 32
Hình 4.9. Phổ hấ p thu của mẫu chuẩn. ..................................................................... 38
Hình 4.10. Phổ hấ p thu của mẫu thử. ....................................................................... 39
Hình 4.11. Phổ hấ p thu của mẫu tự tạo. ................................................................... 39
Hình 4.12. Phổ hấ p thu của mẫu placebo. ................................................................ 40
Hình 4.13. Phổ hấ p thu của mẫu tr ắng. .................................................................... 40
Hình 4.14. Đƣờ ng thẳng biểu diễn sự phụ thuộc của độ hấ p thu và nồng độ. ......... 42
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 10/62
viii
LỜ I CẢM ƠN
Vớ i tấm lòng trân tr ọng và biết ơn sâu sắc, em xin gửi lờ i cảm ơn đến ThS. Nguyễn
Công Phi, ngƣờ i thầy đã luôn quan tâm hƣớ ng dẫn, truyền đạt nhiều kiến thức, k ỹ
năng và kinh nghiệm quý báu trong suốt quá trình thực hiện khóa luận tốt nghiệ p.
Em xin chân thành cảm ơn Thầy PGS.TS. Nguyễn Thiện Hải đã giành thời gian để
đọc và góp ý kiến quý giá để khóa luận của em hoàn thiện hơn.
Xin cảm ơn tất cả các thầy cô ở bộ môn Công nghiệp Dƣợ c, khoa Dƣợc đã tạo điều
kiện thuận lợi và giúp đỡ em trong suốt quá trình làm khóa luận.
Thân gửi lờ i cảm ơn đến chị Nhiễn đang làm việc tại bộ môn và các anh chị học
viên cao học.
Cuối cùng, xin gửi lờ i cảm ơn đến tất cả các bạn tổ 5, tổ 7 và các bạn cùng làm khóa
luận tại bộ môn Công nghiệp Dƣợ c đã giúp đỡ tôi trong suốt thờ i gian thực hiện
khóa luận.
Xin chân thành cảm ơn!
Tác giả
Tô Nhƣ Phƣơng
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 11/62
ix
Khóa luận tốt nghiệp Dƣợc sĩ Đại học - Năm học 2014-2015
NGHIÊN CỨ U BÀO CHẾ GEL NHŨ TƢƠNG DẦU TRONG NƢỚ C CHỨ A
ACID KOJIC 1% DÙNG TRÊN DATô Nhƣ Phƣơng
Thầy hƣớ ng dẫn: ThS. Nguyễn Công Phi
Đặt vấn đề
Acid kojic (5-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-4-pyron) là một trong những thành phần
làm tr ắng da phổ biến nhất đƣợ c sử dụng trong mỹ phẩm. Nghiên cứu bào chế gel
nhũ tƣơng cấu trúc dầu trong nƣớ c chứa 1% acid kojic dùng trên da đƣợ c thực hiện
vớ i mục tiêu bào chế sản phẩm an toàn, chất lƣợ ng.
Đối tƣợng và phƣơng pháp nghiên cứ u
Các công thức gel đƣợ c sàng lọc dựa trên các chỉ tiêu: cảm quan, pH, độ dàn mỏng,
phân bố kích thƣớ c tiểu phân và khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng. Hoạt chất
acid kojic đƣợc định lƣợ ng bằng phƣơng pháp quang phổ UV Vis ở bƣớ c sóng 305
nm. Xây dựng tiêu chuẩn gel trên cơ sở số liệu của 3 lô sản xuất thử nghiệm.
K ết quả và bàn luận
Đã lựa chọn đƣợ c công thức gel vớ i các thành phần: pha dầu (isopropyl myristat),
pha nƣớ c (propylen glycol), chất diện hoạt ( Tween, Span), chất tạo gel (Carbopol
940) và chất bảo quản (Nipagin M). Kiểm soát chất lƣợ ng sản phẩm bở i các tiêu
chuẩn cảm quan, pH, phân bố kích thƣớ c tiểu phân, định tính và định lƣợ ng.
K ết luận
Sản phẩm nghiên cứu đạt mục tiêu đặt ra.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 12/62
x
Final assy for the degree of BS Pharm - Academic year 2014 - 2015
FORMULATION OF 1% KOJIC ACID OIL IN WATER EMULGEL USED IN SKIN
Nhu Phuong ToSupervisor: M.S Cong Phi Nguyen
Introduction
Kojic acid (5-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-4-pyrone) is one of the most popular
whitening agents used in cosmetics. Research “ Fomulation of 1% kojic acid oil in
water emulgel used in skin” is aimed to formulate a safety and effective whitening
products.
Materials and methods
Various emulgel formulation were selected based on organoleptic properties, pH,
particle size distribution measurement, spreadability test and Franz cell diffusion
test. Kojic acid was quantified using UV spectrophotometry at 305 nm. Emulgel
standard distribution had been set up following measurement results of three lots.
Results and dicussionThe selective formulation of this research had been found with these components:
oil phase (isopropyl myristate), water phase (propylene glycol), surfactants (Tween
and Span), gelling agent (Carbopol 940) and preservative (Nipagin M). Product
quality control had been set up with characteristics of organoleptic properties, pH,
particle size distribution, qualitative and quantitative analysis.
Conclusion
Achived product reached targets of this research.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 13/62
1
CHƢƠNG 1. ĐẶT VẤN ĐỀ
R ối loạn tăng sắc tố da (nám, tàn nhang, đốm lão hóa, …) là một tình tr ạng phổ
biến, tuy không ảnh hƣởng đến sức khỏe con ngƣời nhƣng tác động r ất nhiều về mặt
tâm lý. Có r ất nhiều phƣơng thức điều tr ị tình tr ạng này, chủ yếu đƣợ c chia thành
hai nhóm: nhóm các tác nhân hóa học (hydroquinon, arbutin, acid kojic, acid
ascorbic và các dẫn xuất,…) và nhóm các phƣơng thức tr ị liệu vật lý (liệu pháp lạnh
với nitơ lỏng, phẫu thuật laser, lột da hóa học, mài da bề mặt, v.v…). Trong số các
phƣơng thức trên, can thiệ p bằng các tác nhân hóa học vẫn giữ vai trò chủ chốt
trong điều tr ị các r ối loạn tăng sắc tố da cũng nhƣ ứng dụng trong lĩnh vực mỹ phẩmđể làm tr ắng da [3].
Một làn da tr ắng mịn là tiêu chuẩn của vẻ đẹ p truyền thống Á Đông. Vì thế, nhu cầu
về các sản phẩm tr ắng da là khá lớn, đặc biệt ở thị trƣờ ng châu Á. Ngày nay, khi
công nghệ phát triển, những sản phẩm làm tr ắng da càng dễ tiế p cận ngƣờ i dùng
hơn. Tuy nhiên, tính an toàn và hiệu quả của các sản phẩm này không phải luôn đi
đôi vớ i những lờ i quảng cáo của các nhà sản xuất, nhất là đối vớ i các sản phẩm
không rõ nguồn gốc hiện đang tràn lan trên thị trƣờ ng Việt Nam nhƣ hiện nay.
Xuất phát từ mong muốn tìm đƣợ c công thức cho một sản phẩm làm tr ắng da dựa
trên các bằng chứng khoa học nhằm đảm bảo tính an toàn, hiệu quả khi sử dụng
đồng thờ i xây dựng đƣợ c tiêu chuẩn cơ sở rõ ràng để thuận tiện trong vấn đề kiểm
tra, kiểm soát chất lƣợ ng chế phẩm, chúng tôi đã thực hiện đề tài “Nghiên cứ u bào
chế gel cấu trúc nhũ tƣơng dầu trong nƣớ c chứ a acid kojic 1% dùng trên da”
vớ i mục tiêu nghiên cứu công thức và quy trình bào chế gel chứa 1% acid kojic.Đề tài đƣợ c thực hiện vớ i các nội dung:
- Nghiên cứu công thức và xây dựng quy trình bào chế gel chứa 1% acid kojic
bao gồm các thành phần: pha dầu, pha nƣớ c, chất diện hoạt, chất tạo gel và
chất bảo quản.
- Xây dựng tiêu chuẩn gel chứa acid kojic 1%.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 14/62
2
CHƢƠNG 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1. TỔNG QUAN VỀ GEL CÓ CẤU TRÚC NHŨ TƢƠNG
2.1.1.
Định nghĩa
Gel bôi da là những chế phẩm thể chất mềm, sử dụng tá dƣợ c tạo gel thích hợ p [1].
2.1.2. Phân loại
Gel thân dầu (oleogels): Trong thành phần sử dụng tá dƣợ c tạo gel, bao gồm dầu
parafin phối hợ p với các tá dƣợ c thân dầu khác, có thêm keo silic, xà phòng nhôm,
hoặc xà phòng k ẽm.
Gel thân nƣớ c (hydrogels): Trong thành phần bao gồm nƣớ c, glycerin, propylen
glycol, có thêm các tá dƣợ c tạo gel nhƣ polysaccarid (tinh bột, tinh bột biến tính,
acid alginic và natri alginat), dẫn chất cellulose, polymer của acid acrylic
(carbomer, carbomer copolymer, carbomer interpolymer, methyl acrylat) và các
chất vô cơ (magnesi - nhôm silicat) [1].
2.1.3. Yêu cầu chất lƣợ ng
Phải là hỗn hợp đồng nhất.
Thể chất mềm, mịn màng, không tan chảy ở nhiệt độ thƣờ ng, dễ bám thành lớ p
mỏng khi bôi lên da.
Không gây kích ứng, dị ứng đối vớ i da dùng sử dụng trong thờ i gian dài.
Bền vững (về lý, hóa và vi sinh) trong quá trình bảo quản.
Gây đƣợ c hiệu quả cao đúng vớ i mục đích và yêu cầu khi thiết k ế công thức.
Không gây bẩn quần áo, dễ r ửa sạch bằng nƣớ c và xà phòng [1].
2.1.4. Ƣu nhƣợc điểm của dạng bào chế gel có cấu trúc nhũ tƣơng
Ƣu điểm
Tránh đƣợ c sự chuyển hóa qua gan lần đầu và các bất lợi khác do thay đổi pH, hoạt
tính enzym, tốc độ làm r ỗng dạ dày,v.v… so vớ i các dạng bào chế dùng đƣờ ng
uống, tiêm, đặt dƣới lƣỡ i…
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 15/62
3
Cảm quan đẹ p, mềm mịn, dễ lấy, ít nhờ n rít, dễ tán ra trên da, dễ r ửa, thân thiện vớ i
môi trƣờ ng.
Thuận tiện về mặt bào chế đối vớ i hoạt chất sơ nƣớ c.
Tăng khả năng giải phóng hoạt chất, đặc biệt là đối vớ i các hoạt chất sơ nƣớ c, ngay
cả khi bào chế dạng gel nhũ tƣơng N/D.
Giải phóng hoạt chất nhanh hơn so vớ i các dạng bào chế truyền thống nhƣ kem,
thuốc mỡ .
Ổn định hơn so vớ i các dạng bào chế dùng ngoài khác nhƣ bột, kem, thuốc mỡ
Có khả năng chứa đƣợ c một lƣợ ng lớ n hoạt chất.
Đơn giản, dễ thực hiện, ít tốn kém.
Nhƣợc điểm
Có thể gây kích ứng da và viêm da tiế p xúc do hoạt chất hoặc tá dƣợ c [22].
2.2. TỔNG QUAN VỀ ACID KOJIC
Kojic acid (5-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-4-pyron) là một trong những thành phần
làm tr ắng da phổ biến nhất đƣợ c sử dụng trong các sản phẩm mỹ phẩm [11]. Kojic
acid đƣợ c phân lậ p lần đầu tiên năm 1907 từ nấm Aspergillus oryae [4]. Acid kojic
r ất kém bền. Nhiều chế phẩm trên thị trƣờ ng sử dụng dạng este kojic dipalmitat thay
cho acid kojic, tuy nhiên hiệu quả của sự thay thế này chƣa đƣợ c chứng minh
[Murad alam]. Acid kojic ức chế sự hình thành sắc tố da, nên có tác dụng làm tr ắng
da, tác dụng này đã đƣợ c chứng minh trên in vitro [6][16][17][27] và in vivo
[9][18][19].
2.2.1. Công thứ c
Công thức phân tử: C6H6O4.
Phân tử lƣợ ng: 142,11.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 16/62
4
2.2.2. Tính chất lý hóa
Điểm chảy: 152 °C - 154 °C [28].
pKa: 7,90 - 8,03
Tính tan: Tan trong nƣớ c, ethanol, aceton; ít tan trong ether, ethyl acetat,
chloroform, pyridin; không tan trong benzen [35].
2.2.3. Tác dụng
Nhiều nghiên cứu cho thấy kojic acid cho hiệu quả tƣơng đƣơng hydroquinon, chất
đƣợc coi là “tiêu chuẩn vàng” trong điều tr ị các vấn đề liên quan đến r ối loạn tăng
sắc tố da [13][25].
2.2.4. Cơ chế
Tƣơng tự nhƣ các chất làm tr ắng da hydroquinon và arbutin, acid kojic có tác dụng
ức chế enzym tyrosinase do tạo phức vớ i nguyên tố đồng [11]. Ngoài ra kojic acid
còn ức chế sự hỗ biến dopachrom thành 5,6-dihydroindol-2-carboxy acid [26][32].
Các nghiên cứu mới hơn trong những năm gần đây cho thấy acid kojic còn có tác
động làm giảm sắc tố da không liên quan đến sự ức chế enzym tyrosinase[7]. Ngoàira, đã có nghiên cứu chỉ ra r ằng acid kojic đóng vai trò cảm ứng làm tăng sản xuất
IL-6 và IL-8 trong các tế bào melanocyte/keratinocyte nằm ở lớ p nền biểu bì, trong
đó IL-6 có tác động ức chế tr ực tiế p quá trình hình thành sắc tố da melanin ở các tế
bào này [8].
2.2.5. Định lƣợ ng acid kojic
Có nhiều nghiên cứu về phƣơng pháp định lƣợng acid kojic đã đƣợ c tiến hành trongnhững năm qua nhƣ định lƣợ ng acid kojic bằng phƣơng pháp sắc kí lỏng hiệu năng
cao (HPLC) [20][21][37], sắc kí lỏng siêu hiệu năng (UHPLC) [10], sắc kí cặ p ion
[33], điện di mao quản [38], v.v…Trong số đó Roberto Pontarolo và các cộng sự đã
phát triển phƣơng pháp định lƣợ ng acid kojic bằng phƣơng pháp quang phổ UV -
Vis. Phƣơng pháp này đƣợc đánh giá là đơn giản, ít tốn kém, tiện lợ i và mang lại
hiệu quả cao.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 17/62
5
Kojic acid có khả năng phản ứng tạo phức với ion nhôm trong môi trƣờ ng acid.
Phản ứng xảy ra chủ yếu do liên k ết phối trí đƣợ c tạo thành giữa ion nhôm vớ i
nhóm hydroxy enol và nhóm carbonyl trên phân tử acid kojic. Phức chất tạo thànhcó bƣớ c sóng hấ p thu cực đại tại 305 nm. Định lƣợng acid kojic đƣợ c tiến hành
thông qua phé p đo quang phổ UV-Vis của phức chất nhôm - acid kojic tại bƣớ c
sóng 305 nm. Phƣơng pháp này đƣợ c áp dụng để định lƣợ ng acid kojic trong cả
nguyên liệu và thành phẩm [29].
2.3.
TỔNG QUAN VỀ MỘT SỐ TÁ DƢỢ C TẠO GEL CARBOMER
Carbomer là polymer tổng hợ p cao phân tử của acid acrylic liên k ết chéo vớ i allyl
sucrose (Carbopol 934) hoặc allyl ete của pentaerythritol (Carbopol 940), trong
phân tử chứa từ 52% đến 68% nhóm acid carboxylic (COOH).
Carbomer ở dạng r ắn là các phân tử có tính acid cuộn chặt vào nhau (Hình 2.1.a ).
Khi phân tán trong nƣớ c, các phân tử bắt đầu hydrat hóa và tháo cuộn một phần.
Cách phổ biến nhất để đạt đƣợc độ nhớ t tối đa là chuyển đổi carbomer có tính acid
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 18/62
6
Liên k ết dọc
thành dạng muối (Hình 2.1.b) bằng cách trung hòa carbomer bằng các base phổ biến
nhƣ natri hydroxyd (NaOH) hay triethanolamin (TEA).
(a) (b)
Hình 2.1. Carbomer ở dạng acid (a) và dạng muối (b).
Carbomer đƣợ c sử dụng phổ biến trong các chế phẩm dạng lỏng và dạng bán r ắn,
bao gồm các loại kem, gel, lotion và thuốc mỡ , sử dụng trong nhãn khoa, tại chỗ,
tr ực tràng và âm đạo. Nồng độ carbomer đƣợ c sử dụng từ 0,5 - 5%. Carbomer cũng
có thể tạo gel vớ i dung môi cồn, glycerin, propylen glycol. Dung dịch trong nƣớ c
0,5 - 1% (đã đƣợc trung hòa) có độ nhớ t từ 3000 - 6000 cps [1][30].
2.4. TỔNG QUAN VỀ CÁC CHỈ TIÊU ĐÁNH GIÁ CÔNG THỨ C
2.4.1. Cảm quan
Chế phẩm phải đạt yêu cầu về thể chất: mềm, mịn màng, độ đặc vừa phải, đồng
nhất; không tan chảy ở nhiệt độ thƣờ ng, dễ bám thành lớ p mỏng khi bôi lên da,
v.v…[1].
2.4.2. pH
Chế phẩm phải có pH phù hợ p vớ i pH tự nhiên của da, khoảng 4,0 đến 6,5 [23].
2.4.3. Độ dàn mỏng
Việc xác định thể chất của các dạng bào chế bán r ắn là r ất cần thiết. Trƣớ c kia
ngƣờ i ta chỉ đánh giá thể chất bằng cảm quan. Ngày nay đã có nhiều phƣơng pháp
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 19/62
7
dụng cụ để kiểm tra thể chất nhƣ đo độ xuyên sâu, đo độ dàn mỏng, đo độ dính, đo
khả năng chảy ra khỏi ống tuýp…
Độ dàn mỏng của thuốc mỡ đƣợ c biểu thị bằng diện tích tản ra của một lƣợ ng thuốc
mỡ nhất định khi cho tác dụng lên nó những tr ọng lƣợ ng khác nhau.
Dụng cụ dùng là giãn k ế [2].
2.4.4.
Kích thƣớ c tiểu phân
Sự đánh giá kích thƣớ c tiểu phân là cần thiết đối vớ i các dạng bào chế cấu trúc nhũ
tƣơng. Các thông số khi đo kích thƣớ c tiểu phân phản ánh đƣợ c mức độ hiệu quả
của quá trình nhũ hóa cũng nhƣ các thay đổi về độ bền của chế phẩm trong quá
trình bảo quản. Kích thƣớ c tiểu phân và sự phân bố kích thƣớ c tiểu phân có thể đo
đạc tr ực tiế p thông qua kính hiển vi điện tử. Tuy nhiên phƣơng pháp này đòi hỏi
nhiều thờ i gian, công sức và trình độ k ỹ thuật công nghệ nhất định, do đó chủ yếu
đƣợ c dùng làm tiêu chuẩn để đánh giá hiệu quả của các phƣơng pháp khác. Ngày
nay, phƣơng pháp tán xạ ánh sáng đƣợ c sử dụng r ộng rãi trong xác định kích thƣớ c
và phân bố kích thƣớ c tiểu phân. Các đo lƣờ ng phân bố kích thƣớ c tiểu phân dựa
trên nguyên tắc đo độ tán xạ của một hoặc một số bƣớ c sóng ánh sáng khi nó truyền
qua cuvet chứa một lƣợ ng mẫu đƣợ c pha loãng nhất định. Phƣơng pháp này đƣợ c
đánh giá là đơn giản, nhanh chóng, hiệu quả và đƣợ c áp dụng r ộng rãi [15].
2.4.5. Khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng
Khả năng giải phóng hoạt chất ra khỏi tá dƣợ c là một trong những yếu tố quyết định
mức độ và tốc độ hấ p thu hoạt chất qua da. Để đánh giá khả năng giải phóng dƣợ c
chất ra khỏi các tá dƣợc khác nhau, ngƣời ta thƣờ ng sử dụng phƣơng pháp khuếch
tán qua gel hoặc qua màng. Trong đó, phƣơng pháp khuếch tán qua màng đƣợ c áp
dụng r ộng rãi vớ i nhiều hoạt chất và có thể sử dụng để đánh giá một cách khá định
lƣợ ng mức độ và tốc độ giải phóng hoạt chất ra khỏi các hệ tá dƣợ c khác nhau. Trên
cơ sở đó có thể tiế p tục nghiên cứu in vivo và thiết k ết đƣợ c các công thức có tác
dụng điều tr ị đúng vớ i mục tiêu mong muốn.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 20/62
8
Màng dùng cho phƣơng pháp này có thể là màng nhân tạo (Celphan, dẫn chất
cellulose, silicon…), màng tự nhiên (da động vật để nguyên hoặc đã loại bớ t lớ p
sừng nhƣ da chuột nhắt, chuột cống, da thỏ…).
Môi trƣờ ng khuếch tán thƣờng là: Nƣớ c cất, dung dịch đệm, cũng có khi là dung
môi hoặc hỗn hợ p dung môi.
Hình 2.2. Tế bào khuếch tán
Để xác định lƣợ ng hoạt chất giải phóng đƣợ c trong từng khoảng thờ i gian có thể dùng phƣơng pháp quang phổ hoặc sắc kí lỏng hiệu năng cao. Từ các thông số đo
đạc và tính toán, vẽ đồ thị biểu diễn sự tƣơng qua giữa lƣợng dƣợ c chất giải phóng
theo thời gian đồng thờ i có thể tính đƣợ c hằng số tốc độ giải phóng dƣợ c chất [2].
2.5. CÁC NGHIÊN CỨ U VỀ ACID KOJIC
2.5.1. Các nghiên cứ u
(1997) Igaki T. và cộng sự đã thực hiện các thử nghiệm và đƣa ra các khuyến cáonhằm nâng cao tính bền của acid kojic và các dẫn xuất khi dùng trong bào chế: điều
chỉnh giá tr ị HLB của hỗn hợ p chất diện hoạt không quá 12 và nên có ít nhất một
chất diện hoạt thuộc nhóm không ion hóa; dạng bào chế thích hợp là nhũ tƣơng dầu
trong nƣớ c hoặc nƣớ c trong dầu và nên thực hiện việc gel hóa để cải thiện về mặt
cảm quan khi sử dụng, nhất là đối với nhũ tƣơng loại nƣớ c trong dầu [31] .
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 21/62
9
(2010) Draelos Z. D. và các cộng sự đã tiến hành đánh giá, so sánh hiệu quả làm
tr ắng da của công thức nghiên cứu chứa acid kojic, chiết xuất Emblica officinalis và
acid glycolic vớ i công thức chứa 4% hydroquinon. K ết quả cho thấy công thức
nghiên cứu cho hiệu quả tƣơng đƣơng và có thể đƣợ c dùng thay thế cho công thức
chứa 4% hydroquinon trong điều tr ị các r ối loạn sắc tố da ở mức độ nhẹ đến trung
bình [12].
(2010) Nhóm chuyên gia xét duyệt thành phần mỹ phẩm (The Cosmetic Ingredient
Review Expert Panel - CIREP) đã kết luận: tính nhạy cảm của da và hiệu quả tr ắng
da sẽ không đƣợ c thể hiện khi dùng acid kojic ở nồng độ thấp hơn 1%, do đó, acid
kojic đƣợ c coi là thành phần an toàn khi sử dụng đến mức nồng độ này [5].
(2013) Gonçalez và các cộng sự đã nghiên cứu sự vận chuyển qua da của hệ nano
mang acid kojic để điều tr ị lão hóa da. K ết quả nghiên cứu cho thấy các hệ nano,
điển hình là hệ tinh thể lỏng (liquid crystalline systems-LCSs) có ảnh hƣởng đến sự
thấm qua da, tăng hoạt tính của acid kojic và không gây độc tính tế bào [14].
(2014) Montra Srisayam và các cộng sự đã nghiên cứu ứng dụng phổ hồng ngoại
biến đổi Fourier để mô tả sự biến đổi của các phân tử sinh học trong các tế bào sắc
tố bị ung thƣ ở ngƣời đƣợc điều tr ị bằng sesamol và acid kojic. Nhóm nghiên cứu
đã kết luận: Cả sesamol và acid kojic cho thấy tác động tƣơng tự trên sự ức chế tổng
hợ p melanin [24].
(2014) Vớ i mục đích nâng cao hơn nữa khả năng ức chế enzym tyrosinase của acid
kojic, nhóm nghiên cứu từ trƣờng Đại học Sungkyunkwan, Hàn quốc đã nghiên cứu
tổng hợ p các dẫn xuất của acid kojic chứa các liên k ết thioether và ester đồng thờ iđánh giá hoạt tính ức chế tyrosinase của các dẫn xuất này [36].
2.5.2.
Các chế phẩm
Kojic acid là thành phần phổ biến trong các sản phẩm làm tr ắng da ở châu Á. Acid
kojic không đƣợ c sử dụng đơn trị trong điều tr ị nám da. Thông thƣờ ng, acid kojic
thƣờng đƣợ c sử dụng k ết hợ p vớ i các thành phần có tác động làm tr ắng da khác nhƣ
arbutin, acid ascorbic và dẫn xuất, chiết xuất trà xanh, chiết xuất r ễ cam thảo, v.v…
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 22/62
10
Bên dƣớ i là hình minh họa hai chế phẩm trong thành phần có chứa acid kojic (hiện
chƣa đƣợ c chính thức phân phối trên thị trƣờ ng Việt Nam).
Hình 2.3. UNITONE 4 của Isis Pharma
Hình 2.4. MELA-D serum của La Roche-Posay
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 23/62
11
CHƢƠNG 3. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨ U
3.1. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ TRANG THIẾT BỊ
3.1.1.
Nguyên vật liệu
Bảng 3.1. Danh mục các nguyên vật liệu sử dụng.
Tên nguyên liệu Tiêu chuẩn Nguồn gốc
Acid kojic TCCS Trung Quốc
Dầu parafin PA Mỹ
Acid oleic PA Đức
Isopropyl myristat PA Đức
Cetostearyl alcol TCCS Trung Quốc
Acid stearic TCCS Trung Quốc
Propylen glycol TCCS Trung Quốc
Glycerol TCCS Trung Quốc
Nipagin M TCCS Trung Quốc
Polysorbat 80 TCCS Trung Quốc
Sorbitan monooleat TCCS Trung Quốc
Carbopol 940 TCCS Trung Quốc
Hydroxy propyl methyl cellulose NF 32 Mỹ
Aerosil 200 Ph. Eur. Đức
Nhôm clorid PA Mỹ
Natri hydroxyd TCCS Trung Quốc
Acid nitric TCCS Trung Quốc
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 24/62
12
3.1.2. Trang thiết bị
Bảng 3.2. Danh mục các thiết bị sử dụng.
Tên thiết bị Mã số Nguồn gốc
Cân kĩ thuật Satorius TE412 Đức
Cân phân tích Satorius CPA224S Đức
Máy đo pH CyberScan pH 510 Hàn Quốc
Máy siêu âm Elma T840 DH Đức
Máy khuấy từ MIX 6 2Mag Đức
Máy khuấy Wisestir HS-120A Hàn Quốc
Máy lắc xoáy Top-mix 94323 Đức
Máy quang phổ UV Vis Shimadzu UV-1601 Nhật
Máy đo kích thƣớ c tiểu phân Malvern Mastersizer 3000E Anh
Tế bào khuếch tán Labfine Hàn Quốc
Màng lọc cellulose acetat M047-CA045 Hồng Kông
3.2. NGHIÊN CỨ U CÔNG THỨ C VÀ XÂY DỰ NG QUY TRÌNH BÀO
CHẾ GEL CHỨ A ACID KOJIC 1% DÙNG TRÊN DA
3.2.1. Công thức đề nghị
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 25/62
13
Bảng 3.3. Các thành phần trong công thức đề nghị.
Thành phần Nguyên liệu Tỉ lệ trong công thứ c (%)
Hoạt chất Acid kojic 1
Pha dầu
Mineral oil
5 - 20Isopropyl myristat (IPM)
Acid oleic
Chất diện hoạt
Tween 80
10 - 20Span 80
Chất tạo gel Carbopol 940 0,45 - 1,35
Chất bảo quản Nipagin M 0,05
Pha nƣớ c
Propypen glycol 10 - 20
Glycerin 0 - 10
Nƣớ c cất vđ. 100
3.2.2. Xây dự ng quy trình bào chế
Quy trình chung
Ngâm tá dƣợ c tạo gel trong nƣớ c.tạo hỗn hợ p gel sánh.
Hòa tan nipagin M trong hỗn hợ p propylen glycol và glycerin, phân tán tiế p acid
kojic vào, khuấy bằng máy khuấy từ đến tan hoàn toàn (hỗn hợ p A).
Thêm tá dƣợ c tạo gel vào hỗn hợ p A, khuấy đều.
Cho từ từ dung dịch natri hydroxyd vào, khuấy đều (hỗn hợ p B).
Cho chất diện hoạt và dầu vào hỗn hợ p B, khuấy tr ộn liên tục đến đồng nhất.
Bảo quản ở nhiệt độ phòng trong 24 giờ, sau đó tiến hành các thử nghiệm.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 26/62
14
Khảo sát sự khuấy trộn
Khảo sát trên 3 loại cánh khuấy: cánh khuấy chân vịt, cánh khuấy mái chèo bản và
cánh khuấy chữ U
Khảo sát thờ i gian khuấy: 4, 6, 8, 10 phút
Tốc độ khuấy: Tốc độ 1 (khoảng 200 vòng/phút), tốc độ 2 (khoảng 400 vòng/phút).
Sơ đồ bào chế
Hình 3.5. Sơ đồ bào chế gel chứa 1% acid kojic.
Để ổn định 24h ở nhiệt độ phòng
Gel acid kojic 1%
Tiến hành thử nghiệm
Khuấy đề u
Khuấ y bằ ng máy khuấ yđến đồng nhấ t
Chất tạo gel + Nƣớ c cất
Khuấ y bằ ng máy khuấ yt ừ đế n tan hoàn toàn
Ngâm 24h ở nhiệt độ phòng
Khuấy đề u
Dung dịch
Nipagin M +Propylen glycol + Glycerin
+ Acid kojic
Hỗn hợ p A Dung dịch NaOH
Hỗn hợ p B Pha dầu, chất diện hoạt
Hỗn hợ p sánh
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 27/62
15
3.3. CÁC CHỈ TIÊU ĐÁNH GIÁ CÔNG THỨ C.
Quá trình sàng lọc công thức dựa trên đánh giá các chỉ tiêu về cảm quan, độ dàn
mỏng, pH, kích thƣớ c tiểu phân và khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng. Số
lƣợ ng chỉ tiêu đƣợ c áp dụng tăng dần theo quá trình sàng lọc từ đơn giản đến phức
tạ p. Các công thức đƣợ c so sánh, sàng lọc lần lƣợ t qua từng loại chỉ tiêu đến lúc
chọn đƣợ c công thức phù hợ p.
3.3.1. Cảm quan
Tiến hành quan sát, ghi nhận về màu sắc và thể chất của các công thức gel. Các
công thức đạt yêu cầu về cảm quan khi có màu tr ắng; thể chất mịn, đồng nhất; r ất íthay không có bọt khí; độ đặc vừa phải; không gây cảm giác nhờ n rít sau 5 phút bôi
khoảng 0,2 g gel trên một diện tích da khoảng 10 cm2.
3.3.2. Xác định độ dàn mỏng
Dụng cụ: 2 tấm kính mỏng, nhẵn, đƣờng kính 6 đến 8 cm, có chia ô.
Tiến hành: Cân khoảng 1 g gel lên tấm kính dƣới. Đặt tấm kính còn lại lên trên. Đọc
đƣờng kính ban đầu. Lần lƣợt đặt lên tấm kính trên những quả cân theo thứ tự tr ọnglƣợng tăng dần, cứ sau 1 phút đọc lại đƣờ ng kính tản ra của gel [2].
Độ dàn mỏng đƣợ c xác định theo công thức: (cm2)
Vớ i d: đƣờ ng kính tản ra của gel (cm).
Dùng phép phân tích phƣơng sai (Anova) k ết hợ p vớ i tr ắc nghiệm F, tr ắc nghiệm t
để so sánh độ dàn mỏng của các công thức ở từng thời điểm.
3.3.3.
pH
Cân chính xác khoảng 0,5 g gel. Thêm 20 ml nƣớ c cất đun sôi để nguội, siêu âm
trong 30 phút. Chuyển hỗn hợp vào bình định mức 50 ml. Thêm nƣớ c cất đun sôi để
nguội đến vạch. Đo pH của mẫu bằng cặp điện cực Calomen - Thủy tinh.
Các công thức đạt yêu cầu khi có pH trong khoảng 5,5 - 6,5.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 28/62
16
3.3.4. Kích thƣớ c tiểu phân và phân bố kích thƣớ c tiểu phân
Cân khoảng 0,5 g gel vào ống falcon 15 ml. Thêm khoảng 10 ml nƣớ c cất. Phân tán
mẫu bằng máy lắc xoáy trong 10 phút. Để ổn định trong 10 phút. Đo phân bố kích
thƣớ c tiểu phân bằng máy Malvern Mastersizer 3000E.
Ghi nhận các thông số Dv (50), Dv (90), U (Uniformity - độ đồng nhất).
3.3.5. Khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng
Thiết bị
Tế bào khuếch tán là tế bào Franz có 2 khoang. Thể tích khoang nhận là 12,5 ml,
diện tích bề mặt khuếch tán là 3,14 cm2.
Tiến hành
Khoang cho: chứa khoảng 1 g gel acid kojic 1%.
Khoang nhận: chứa nƣớ c cất đƣợ c khuấy tr ộn bằng cá từ vớ i tốc độ 600 vòng/phút
và đƣợ c duy trì ở nhiệt độ 37 ± 0,5 0C.
Thời điểm lấy mẫu: Mẫu đƣợ c lấy trong 240 phút ở các thời điểm 5, 10, 15, 20, 25,
30, 60, 120, 180 và 240 phút.
K ết quả
Mẫu lấy ở từng thời điểm đƣợc định lƣợ ng bằng phƣơng pháp quang phổ UV-Vis.
Phần trăm hoạt chất khuếch tán qua màng X% ở thời điểm n đƣợ c tính theo công
thức:
( ∑
)
Trong đó:
An: Độ hấ p thu của dung dịch thử ở thời điểm lấy mẫu thứ n.
Ac: Độ hấ p thu của dung dịch chất đối chiếu.
Cc: Nồng độ của dung dịch chất đối chiếu (15 μg/ml)
a: Độ pha loãng.
V: Thể tích khoang nhận (12,5 ml).
m: Hàm lƣợ ng acid kojic trong chế phẩm cho vào khoang cho (khoảng 10 mg).
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 29/62
17
3.4. XÂY DỰ NG TIÊU CHUẨN GEL NHŨ TƢƠNG DẦU TRONG
NƢỚ C CHỨ A ACID KOJIC 1%
Tiến hành 3 lô nghiên cứu. Đo đạc các thông số của 3 lô từ đó xác định mức chất
lƣợ ng cụ thể cho từ chỉ tiêu. Tiêu chuẩn gel nhũ tƣơng D/N chứa acid kojic 1%
đƣợ c xây dựng vớ i 6 chỉ tiêu:
1. Cảm quan.
2. pH.
3. Kích thƣớ c tiểu phân.
4.
Định tính.5. Định lƣợ ng.
3.5. THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢ NG ACID KOJIC BẰNG
PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV-VIS.
3.5.1. Xác định tính đặc hiệu (tính chọn lọc)
Tiến hành quét phổ và xác định bƣớ c sóng hấ p thu cực đại của mẫu tr ắng
(methanol ), mẫu đối chiếu loãng (bình acid kojic 15 μg/ml trong mục xác định tínhtuyến tính), mẫu thử, mẫu tự tạo, mẫu placebo. Quan sát và so sánh phổ UV của
phức tạo thành trong các dung dịch.
Yêu cầu: Mẫu thử và mẫu tự tạo phải có đỉnh hấp thu (λmax) và độ hấ p thu gần giống
mẫu đối chiếu loãng. Mẫu tr ắng và mẫu placebo không cho đỉnh hấ p thu tại λmax.
3.5.2. Xác định tính tuyến tính
Pha dung dịch đối chiếu : Cân chính xác khoảng 15 mg acid kojic chuẩn (tƣơngđƣơng 15 mg acid kojic tinh khiết), cho vào bình định mức 100 ml. Thêm khoảng
25 ml methanol , lắc kĩ, đem siêu âm 15 phút. Thêm methanol đến vạch, lắc đều.
Dung dịch trong bình 1 có nồng độ khoảng 150 μg/ml. Pha các dung dịch chuẩn
theo bảng
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 30/62
18
Bảng 3.4. Các dung dịch xác định tính tuyến tính.
Nồng độ acid kojic (μg/ml) 1,5 3 9 15 21 27 30
Dung dịch đối chiếu (ml) 0,5 1 3 5 7 9 10
Dung dịch AlCl3 300 μg/ml (ml) 0,5 1 3 5 7 9 10
Dung dịch MeOH vđ (ml) 50
Mỗi dung dịch sau khi pha đƣợc đem đo quang phổ UV Vis ở 305 nm. Ghi lại độ
hấ p thu và tính toán k ết quả.
Dùng Excel để lập đƣờ ng thẳng biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa hàm lƣợ ng
và độ hấ p thu. Mối tƣơng quan tuyến tính đƣợ c thiết lậ p bằng cách xác định phƣơng
trình Y= aX + b; tính R 2. Sử dụng tr ắc nghiệm F và t để kiểm tra tính tƣơng thích
của phƣơng trình hồi quy và ý nghĩa của các hệ số trong phƣơng trình.
Yêu cầu: Độ hấ p thu của ít nhất 5 nồng độ khác nhau của mẫu đối chiếu để xác định
phƣơng trình hồi quy Y= aX+b. Hệ số tƣơng quan R 2 ≥ 0,998.
3.5.3. Xác định độ lặp lại (độ chính xác)
Pha dung dịch thử: Thêm 30 ml dung d ịch methanol vào một lƣợng gel đã đƣợ c tr ộnđều có chứa 15 mg acid kojic (khoảng 755 mg gel), siêu âm trong 15 phút, chuyển
hỗn hợp vào bình định mức 50 ml. Thêm dung dịch methanol đến vạch. Lắc đều,
lọc qua giấy lọc, bỏ 10 ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 5 ml dịch lọc vào bình định
mức 50 ml. Thêm 5 ml dung dịch AlCl3 300 μg/ml. Thêm dung dịch methanol đến
vạch. Lắc đều. Lọc qua màng lọc 0,45 μm. Đo độ hấ p thu của dung dịch thu đƣợ c ở
bƣớ c sóng 305 nm.
Thực hiện định lƣợ ng ít nhất 6 mẫu thử bằng cách đo các mẫu thử đã pha chế. Tính
hàm lƣợ ng trung bình ̅ (%) của acid kojic có trong gel. Tính SD và RSD (%) của
các k ết quả hàm lƣợ ng từ 6 lần đo đƣợ c.
Yêu cầu: Qua 6 lần thực hiện, hàm lƣợ ng acid kojic (%) có trong gel có RSD ≤ 2%
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 31/62
19
3.5.4. Xác định độ đúng
Sử dụng phƣơng pháp thêm chất chuẩn vào mẫu placebo. Tiến hành tƣơng tự nhƣ
khi pha dung dịch để xác định độ lặ p lại, nhƣng trƣớ c khi siêu âm trong 10 phút,
mẫu placebo đƣợ c thêm một lƣợ ng chất chuẩn bằng 80%, 100%, 120% hàm lƣợ ng
hoạt chất có trong công thức bào chế. Mỗi mức nồng độ đƣợ c tiến hành 3 mẫu.
Mỗi dung dịch đƣợc đo độ hấp thu, tính ra hàm lƣợ ng acid kojic r ồi tính ra hàm
lƣợ ng trung bình, % tỉ lệ phục hồi ở từng nồng độ thêm vào.
Yêu cầu: Tỉ lệ phục hồi ở từng nồng độ phải từ 97,0% - 103,0%.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 32/62
20
CHƢƠNG 4. K ẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
4.1. K ẾT QUẢ VỀ SỰ LỰ A CHỌN CÔNG THỨ C GEL NHŨ TƢƠNG
DẦU TRONG NƢỚ C CHỨ A 1% ACID KOJIC
4.1.1. Khảo sát công thứ c
Khảo sát đợ t 1
Khảo sát sơ bộ tỷ lệ pha dầu.
Mỗi công thức pha chế 50 g.
Bảng 4.5. Thành phần các công thức khảo sát lần 1 CT1 đến CT5
Thành phần CT1 CT2 CT3 CT4 CT5
KA (%) 1 1 1 1 1
Dầu khoáng (%) 20 15 15 - -
IPM (%) - - - 15 -
Acid oleic (%) - - - - 15
Carbopol (%) 1,35 1,35 1,35 1,35 1,35
NaOH (%) 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24
Propylen glycol (%) 10 10 10 10 10
Glycerin (%) 10 10 10 10 10
Tween 80 (%) 12 12 12 12 12
Span 80 (%) 8 8 8 8 8
Nipagin M (%) 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
Nƣớ c cất vđ. (%) 100 100 100 100 100
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 33/62
21
Bảng 4.6. Thành phần các công thức khảo sát lần 1 CT6 đến CT10
Thành phần CT6 CT7 CT8 CT9 CT10KA (%) 1 1 1 1 1
Dầu khoáng (%) 10 10 10 10 5
IPM (%) - - - - -
Acid oleic (%) - - - - -
Carbopol (%) 1,35 0,90 0,90 0,90 0,90
NaOH (%) 0,24 0,16 0,16 0,16 0,16Propylen glycol (%) 10 20 10 20 10
Glycerin (%) 10 - 10 - -
Tween 80 (%) 12 12 6 6 6
Span 80 (%) 8 8 4 4 4
Nipagin M (%) 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
Nƣớ c cất vđ. (%) 100 100 100 100 100
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 34/62
22
Bảng 4.7. K ết quả đánh giá về cảm quan của các công thức CT1 đến CT10
STT Đánh giá cảm quanMức độ đạt yêu cầu về
cảm quan (*)CT1 R ất đặc. -
CT2 Không cải thiện so vớ i CT1. -
CT3 Đặc, thể chất không thay đổi sau 2 tuần. -
CT4 Gần giống CT3. -
CT5 Đặc, thể chất có thay đổi đáng kể sau 2 tuần(bắt đầu tách pha)
-
CT6 Hơi đặc, có cải thiện so vớ i CT1 ++
CT7 Hơi đặc, có cải thiện đáng kể so vớ i CT1. ++
CT8 Độ đặc vừa phải, có cải thiện đáng kể so vớ iCT1.
+++
CT9 Gần giống CT8. +++
CT10 Lỏng. -
(*): Tối đa là +++++. (-): Không đạt. Nhận xét:
Các công thức CT6 CT7, CT8 và CT9 có thể chất chấ p nhận đƣợ c trong số 10 công
thức vừa khảo sát. Điều này đƣa ra gợ i ý về việc khảo sát đợ t 2 cần tiến hành tiế p
tục dựa trên việc thay đổi tỉ lệ carbopol, glycerin, propylen glycol và chất diện hoạt.
Công thức CT5 (pha dầu là acid oleic) thay đổi về thể chất đáng kể sau 2 tuần so
vớ i CT3 (pha dầu là dầu khoáng) và CT4 (pha dầu là isopropyl myristat) cho gợ i ý
về việc chỉ tiế p tục khảo sát vớ i dầu khoáng và isopropyl myristat, ngừng sử dụng
acid oleic làm pha dầu trong quá trình sàng lọc công thức.
Từ công thức CT6 đến CT10, thể chất gel chuyển từ đặc sang lỏng đƣa ra gợ i ý về
việc nên tiế p tục khảo sát ở tỉ lệ pha dầu 10%.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 35/62
23
Khảo sát đợ t 2
Tiế p tục khảo sát tỉ lệ carbopol, glycerin, propylen glycol và chất diện hoạt.
Mỗi công thức pha chế 50 g.
Bảng 4.8. Thành phần các công thức khảo sát đợ t 2 CT11 đến CT16.
Bảng 4.9. Đánh giá về cảm quan các công thức 11 đến 16.
STT Đánh giá về cảm quan
Mức độ đạt yêu
cầu về cảm quan
(*)
CT11 Tr ắng đục, hơi đặc, ngả vàng nhạt sau 2 tuần ++++
CT12 Tr ắng hơi trong, đặc, ngả vàng nhạt sau 1 tuần. ++
CT13 Giống CT 2. ++
CT14 Tr ắng đục , đặc vừa, ngả vàng nhạt sau 2 tuần. ++++
CT15 Tr ắng hơi trong, đặc vừa, ngả vàng nhạt sau 1 tuần. ++
CT16 Tr ắng hơi trong, đặc vừa, ngả vàng nhạt sau 2 tuần. ++++
Thành phần CT11 CT12 CT13 CT14 CT15 CT16
KA (%) 1 1 1 1 1 1
Dầu khoáng (%) 10 10 10 10 10 10
IPM (%) - - - - - -Carbopol (%) 1,35 1,35 0,90 1,35 1,35 0,90
NaOH (%) 0,24 0,24 0,16 0,24 0,24 0,16
Propylen glycol (%) 10 10 10 20 20 20
Glycerin (%) 10 10 10 - - -
Tween 80 (%) 6 9,6 9,6 6 9,6 9,6
Span 80 (%) 4 6,4 6,4 4 6,4 6,4 Nipagin M (%) 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
Nƣớ c cất vđ. (%) 100 100 100 100 100 100
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 36/62
24
(*): Tối đa là +++++ (-): Không đạt.
Nhận xét: Theo k ết quả đánh giá nhƣ trên, các công thức 11, 14, và 16 cho thấy sự
cải thiện cảm quan rõ r ệt nhất. Tiế p tục khảo sát và so sánh độ dàn mỏng, pH và
phân bố kích thƣớ c tiểu phân của các công thức trên.
Bảng 4.10. K ết quả đo độ dàn mỏng của các công thức 11, 14, 16.
Khối lƣợ ng
quả cân (g)
Độ dàn mỏng của các công thứ c (cm2)
CT11 CT14 CT16
0 9,0746 9,0746 9,0746
5 9,0746 9,6163 10,7467
10 9,6163 9,6163 11,9399
20 10,1736 10,1736 13,1959
50 11,3354 10,7467 15,1976
100 13,1959 13,1959 15,8963
Nhận xét: Các công thức trên có k ết quả đo độ dàn mỏng tƣơng tự nhau.
Bảng 4.11.
K ết quả đo pH của các công thức 11, 14, 16.
Lần đo pH của các công thứ c
CT11 CT14 CT16
1 6,36 6,23 6,37
2 6,32 6,25 6,39
3 6,33 6,22 6,35
Trung bình 6,34 6,23 6,37
Nhận xét: Các công thức trên đều có pH nằm trong khoảng mong muốn theo mục
tiêu thiết k ế công thức.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 37/62
25
Bảng 4.12. K ết quả đo phân bố kích thƣớ c tiểu phân của các công thức 11, 14, 16.
Công thứ c Dv (50) (μm) Dv (90) (μm) U
CT11 0,404 0,914 5,500
CT14 0,430 0,908 0,865
CT16 0,396 0,862 0,539
Nhận xét: Theo k ết quả trên, cả ba công thức đều có phần lớ n tiểu phân kích thƣớ c
nhỏ hơn 1 μm, trong đó công thức 16 cho thấy tính đồng nhất về kích thƣớ c tiểu
phân cao hơn so vớ i công thức 11 và 14. Do đó, công thức 16 (vớ i tỉ lệ 10% pha
dầu, 0,9% carbopol, 0% glycerin, 20% propylen glycol và 16% chất diện hoạt nhƣđã khảo sát) đƣợ c dùng làm công thức mẫu cho sàng lọc các công thức về sau.
Hình 4.6. Đồ thị phân bố kích thƣớ c tiểu phân của CT16.
Khảo sát đợ t 3
Mỗi công thức pha chế 50 g.
Lặ p lại khảo sát đợ t 2 và thay thế dầu khoáng bằng IPM và tiến hành đánh giá các
công thức từ 17 đến 22. K ết quả thu đƣợc tƣơng tự nhƣ khảo sát đợ t 2: Công thức22 cho k ết quả khảo sát về thể chất tốt nhất trong số 6 công thức. Nhƣ vậy cần làm
thêm khảo sát về sau để chọn đƣợ c pha dầu phù hợ p ở tỉ lệ 10% (IPM hoặc dầu
khoáng).
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 38/62
26
Khảo sát đợ t 4
Sử dụng các thành phần theo công thức 16 ở phần khảo sát đợ t 2 và tiến hành khuấy
tr ộn vớ i 3 loại cánh khuấy: cánh khuấy chân vịt (CK1), cánh khuấy mái chèo bản(CK2), cánh khuấy chữ U (CK3) trong thờ i gian 4, 6, 8 và 10 phút.
Bảng 4.13. Đánh giá về cảm quan đối vớ i từng loại cánh khuấy.
STT Đánh giá về cảm quan Mức độ đạt yêu cầu (*)
CK1 Gel mềm, mịn, ít bọt khí, thể chất đồng nhất +++++
CK2 Tƣơng tự nhƣ khi dùng CK1 +++++
CK3 Bọt khí r ất nhiều, gel tạo thành không mịn, thể chất không đồng nhất. -
(*): Tối đa là +++++. (-): Không đạt.
Theo đánh giá về cảm quan nhƣ trên, cần tiế p tục so sánh và đánh giá hiệu quả giữa
2 loại cánh khuấy CK1 và CK2.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 39/62
27
Bảng 4.14. K ết quả đo độ dàn mỏng CT6 vớ i CK1, CK2 vớ i thờ i gian khuấy tƣơng ứng.
Thờ i gian
khuấy
Khối lƣợ ng
quả cân (g)
Độ dàn mỏng (cm2)
CK1 CK2
4 phút
0 9,6163 9,0746
5 10,7467 9,0746
10 12,5600 10,7467
20 13,1959 11,9399
50 15,1976 13,1959
100 15,8963 14,5147
6 phút
0 9,6163 9,6163
5 11,3354 11,3354
10 11,9399 11,9399
20 13,1959 12,5600
50 14,5147 13,8474
100 16,6160 15,1976
8 phút
0 10,1736 9,0746
5 10,4767 10,7467
10 11,9399 11,3354
20 13,5147 11,9399
50 14,5147 13,1959
100 16,6160 15,1976
10 phút
0 9,6163 9,6163
5 10,7467 10,7467
10 11,9399 11,3345
20 12,5600 12,5600
50 14,5147 13,8474
100 15,8963 15,8963
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 40/62
28
K ết quả cho thấy: Độ dàn mỏng của công thức 16 khi dùng hai loại cánh khuấy
CK1 và CK2 tƣơng tự nhau; độ dàn mỏng của công thức 16 khi khuấy tr ộn trong
các khoảng thờ i gian 4, 6, 8 và 10 là tƣơng tự nhau. Do đó, tiế p tục tiến hành khảo
sát loại cánh khuấy và thờ i gian khuấy tr ộn dựa trên việc đo phân bố kích thƣớ c tiểu
phân.
Bảng 4.15. K ết quả đo phân bố kích thƣớ c tiểu phân của CT16 vớ i hai loại cánhkhuấy và thờ i gian khuấy tr ộn khác nhau tƣơng ứng.
Thờ i
gian
(phút)
CK1 CK2
Dv (50)
(μm)
Dv (90)
(μm) U
Dv (50)
(μm)
Dv (90)
(μm) U
4 0,803 1,16 0,223 0,859 7,89 3,808
6 0,781 1,11 0,217 0,604 6,41 1,838
8 0,768 1,08 0,212 0,572 6,53 2,372
10 0,763 1,07 0,210 68,8 387 1,815
Nhận xét: CK1 tạo đƣợ c sự đồng nhất về kích thƣớ c tiểu phân cao hơn hẳn so vớ i
CK2. Thờ i gian khuấy tr ộn thay đổi từ 4 đến 10 phút không gây ra sự thay đổi đáng
k ể đến phân bố kích thƣớ c tiểu phân. Do đó, các khảo sát về sau sẽ tiến hành vớ i
cánh khuấy chân vịt trong thờ i gian 4 phút.
Hình 4.7. Đồ thị phân bố kích thƣớ c tiểu phân khi dùng CK1 vớ i thờ i gian 4 phút.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 41/62
29
Khảo sát đợ t 5
Tiế p tục khảo sát tỷ lệ từng chất diện hoạt và loại dầu cụ thể cho công thức gel.
Mỗi công thức pha chế 50 g.
Bảng 4.16. Thành phần các công thức khảo sát đợ t 5 từ CT23 đến CT26.
Thành phần CT23 CT24 CT25 CT26
KA (%) 1 1 1 1
Dầu khoáng (%) 10 10 10 10
IPM (%) - - - -
Carbopol (%) 0,90 0,90 0,90 0,90
NaOH (%) 0,16 0,16 0,16 0,16
Propylen glycol (%) 20 20 20 20
Tween 80 (%) 6,4 8 9,6 11,2
Span 80 (%) 9,6 8 6,4 4,8
Nipagin M (%) 0,05 0,05 0,05 0,05
Nƣớ c cất vđ. (%) 100 100 100 100
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 42/62
30
Bảng 4.17. Thành phần các công thức khảo sát đợ t 5 từ CT27 đến CT30.
Bảng 4.18. Đánh giá về cảm quan các công thức 23 đến 30.
STT Đánh giá về cảm quan Mức độ đạt yêu cầu (*)
CT23 R ất lỏng, r ất nhiều bọt khí. +
CT24 Hơi lỏng, nhiều bọt khí. +
CT25 Đặc vừa, mịn, ít bọt khí ++++
CT26 Tƣơng tự 31 ++++
CT27 Tƣơng tự 29 +
CT28 Tƣơng tự 30 +
CT29 Tƣơng tự 31 ++++
CT30 Tƣơng tự 31 ++++
(*): Tối đa là +++++. (-): Không đạt.
Thành phần CT27 CT28 CT29 CT30KA (%) 1 1 1 1
Dầu khoáng (%) - - - -
IPM (%) 10 10 10 10
Carbopol (%) 0,90 0,90 0,90 0,90
NaOH (%) 0,16 0,16 0,16 0,16
Propylen glycol (%) 20 20 20 20
Tween 80 (%) 6,4 8 9,6 11,2
Span 80 (%) 9,6 8 6,4 4,8
Nipagin M (%) 0,05 0,05 0,05 0,05
Nƣớ c cất vđ. (%) 100 100 100 100
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 43/62
31
Nhận xét: Các công thức 25, 26, 29 và 30 đạt yêu cầu về cảm quan. Cần tiế p tục
đánh giá các công thức này trên các chỉ tiêu về độ dàn mỏng, pH và kích thƣớ c tiểu
phân.
Bảng 4.19. K ết quả đo độ dàn mỏng của các công thức 25, 26, 29 và 30.
Khối
lƣợ ng quả
cân (g)
Độ dàn mỏng của các công thứ c (cm2)
CT25 CT26 CT29 CT30
0 11,3354 9,0746 12,5600 10,7467
5 13,1959 10,7476 14,5174 12,5600
10 13,8474 11,9399 15,1976 13,1959
20 14,5147 13,1959 16,6160 14,5147
50 15,8963 13,8474 18,0864 15,8963
100 18,0864 15,8963 20,4179 18,0864
Nhận xét: Độ dàn mỏng của các công thức trên tƣơng tự nhau
Bảng 4.20. K ết quả đo pH của các công thức 25, 26, 29 và 30.
Lần đo pH của các công thứ c
CT25 CT26 CT29 CT30
1 6,18 6,11 5,80 5,95
2 6,08 6,31 6,01 6,22
3 6,16 6,33 6,24 5,90
Trung bình 6,14 6,25 6,01 6,02
Nhận xét: Các công thức trên đều có pH nằm trong khoảng mong muốn theo mục
tiêu thiết k ế công thức.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 44/62
32
Bảng 4.21. K ết quả phân bố kích thƣớ c tiểu phân của công thức 25, 26, 29 và 30.
Công thứ c Dv (50) (μm) Dv (90) (μm) U
CT25 1,11 1,76 0,298
CT26 1,12 1,74 0,288
CT29 1,02 1,61 0,298
CT30 1,02 1,62 0,301
Nhận xét: Các công thức trên đều cho thấy sự đồng nhất gần tƣơng tự nhau về phân
bố kích thƣớ c tiểu phân. Do đó, cần tiến hành đánh giá thêm chỉ tiêu khả năng
khuếch tán hoạt chất qua màng để đƣa ra k ết luận về công thức đƣợ c chọn và tỉ lệ các thành phần đã khảo sát.
Hình 4.8. Đồ thị biểu diễn khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng của các côngthức 25, 26, 29 và 30. Mỗi mẫu đƣợ c lặ p lại 3 lần và lấy k ết quả trung bình.
0.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
80.00
0 50 100 150 200 250 300
CT25
CT26
CT29
CT30 % K
h u ế c h t á n q u a
m à n g
Thời gian (phút)
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 45/62
33
Bảng 4.22. Phần trăm hoạt chất khuếch tán qua màng theo thờ i gian của các côngthức 25, 26, 29 và 30.
Thờ i gian(phút)
Tỉ lệ khuếch tán qua màng của các công thứ c (%)CT25 CT26 CT53 CT30
5 23,19 24,16 29,96 30,92
10 24,03 24,81 30,62 31,78
15 24,68 25,46 31,48 32,64
20 25,33 26,11 32,15 33,51
25 25,98 26,76 32,82 34,38
30 26,63 27,61 33,68 35,25
60 29,60 30,78 37,83 39,79
120 35,87 37,82 46,64 49,95
180 40,99 44,69 55,85 61,68
240 47,10 51,00 62,77 68,62
Nhận xét: Các công thức 25 và 26 khuếch tán hoạt chất qua màng chậm hơn, ít hơn
so vớ i công thức 29 và 30. Sau 240 phút, công thức 30 cho gần 70% hoạt chất
phóng thích qua màng, cao hơn so vớ i các công thức còn lại.
Nhƣ vậy, qua 5 đợ t tiến hành khảo sát, công thức 30 là công thức đạt các yêu cầunhƣ mục tiêu thiết k ế công thức.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 46/62
34
4.1.2. Công thứ c lự a chọn
Thành phần Tỉ lệ trong công thứ c (%)
Acid kojic 1
Propylen glycol 20
Isopropyl myristat 10
Tween 80 11,2
Span 80 4,8
Carbopol 940 0,9
NaOH 0,16
Nipagin M 0,05
Nƣớ c cất vđ. 100
4.1.3.
Quy trình điều chế công thứ c lự a chọn
Ngâm carbopol 940 trong nƣớ c trong 24 giờ cho trƣơng nở hoàn toàn (nồng độ
carbopol 940 trong nƣớ c khoảng 4,5%).Hòa tan hòa toàn nipagin M trong propylen glycol, phân tán tiế p acid kojic vào,
khuấy bằng máy khuấy từ đến tan hoàn toàn.
Thêm gel carbopol vào hỗn hợ p trên (hỗn hợ p A)
Cho từ từ từng giọt dung dịch natri hydroxyd vào hỗn hợ p A, khuấy đều.
Cho Tween 80, Span 80, isopropyl myristat vào hỗn hợ p trên, thêm nƣớ c cất vừa
đủ, khuấy tr ộn liên tục trong 4 phút vớ i cánh khuấy chân vịt (tăng tốc từ tốc độ 1 lên
tốc độ 2 trong 45 giây đầu tiên, sau đó khấy tr ộn ở tốc độ 2 đến thờ i gian 4 phút).
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 47/62
35
4.2. XÂY DỰ NG TIÊU CHUẨN GEL CHỨ A ACID KOJIC 1%
Điều chế 3 lô công thức đã chọn ở mục 4.1.2., mỗi lô 250 g. Tiến hành các đánh giá
cho từng lô theo các chỉ tiêu đã đặt ra khi khảo sát công thức. Từ các thông số đo
đạc của 3 lô, xác định các mức chỉ tiêu cho các tiêu chuẩn của gel chứa acid kojic
1%.
4.2.1. K ết quả đánh giá của 3 lô
Bảng 4.23. K ết quả đánh giá 3 lô về cảm quan.
STT Đánh giá về cảm quan Mức độ đạt yêu cầu (*)
Lô 1 Gel tr ắng mịn, đồng nhất, độ đặc vừa phải. +++++
Lô 2 Gel tr ắng mịn, đồng nhất, độ đặc vừa phải. +++++
Lô 3 Gel tr ắng mịn, đồng nhất, độ đặc vừa phải. +++++
(*): Tối đa là +++++. (-): Không đạt.
Bảng 4.24. K ết quả đánh giá 3 lô về pH.
Lần đo
pH của các lô
Lô 1 Lô 2 Lô 3
1 5,85 5,80 5,95
2 5,90 5,90 6,00
3 5,95 5,98 5,97
Trung bình 5,90 5,89 5,97
Bảng 4.25.
K ết quả đánh giá 3 lô về phân bố kích thƣớ c tiểu phân.
Lô Dv (50) Dv(90) U
1 1,02 1,61 0,298
2 1,02 1,62 0,301
3 1,02 1,62 0,301
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 48/62
36
4.2.2. Xây dự ng tiêu chuẩn
Cảm quan
Phƣơng pháp thử: Tiến hành theo mục 3.3.1.
Yêu cầu: Gel màu tr ắng; thể chất mịn, đồng nhất; r ất ít hay không có bọt khí; độ đặc
vừa phải; không gây cảm giác nhờ n rít sau 5 phút bôi khoảng 0,2 g gel trên một
diện tích da khoảng 10 cm2.
pH
Phƣơng pháp thử: Tiến hành theo mục 3.3.3.
Yêu cầu: 5,5 - 6,5.
Phân bố kích thƣớ c tiểu phân
Phƣơng pháp thử: Tiến hành theo mục 3.3.4.
Yêu cầu: Dv (50) ≤ 1,02; Dv (90) ≤ 1,61; U ≤ 0,298
Định tính
Phƣơng pháp thử:
Pha dung d ịch thử (dung d ịch A): Thêm 30 ml methanol vào một lƣợng gel đã đƣợ ctr ộn đều có chứa 15 mg acid kojic (khoảng 755 mg gel), siêu âm trong 15 phút,
chuyển hỗn hợp vào bình định mức 50 ml. Thêm dung dịch methanol đến vạch. Lắc
đều, lọc qua giấy lọc, bỏ 10 ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 5 ml dịch lọc vào bình
định mức 50 ml. Thêm 5 ml dung d ịch AlCl 3/ Methanol 300 μg/ml. Thêm methanol
đến vạch. Lắc đều. Lọc qua màng lọc 0,45 μm.
Pha dung d ịch chất đố i chiế u acid kojic: Cân chính xác một lƣợ ng chất đối chiếu
tƣơng đƣơng 15 mg acid kojic vào bình định mức 100 ml. Thêm dung dịch
methanol đến vạch. Lắc đều, lọc qua giấy lọc, bỏ 10 ml dịch lọc đầu. Hút chính xác
5 ml dịch lọc vào bình định mức 50 ml. Thêm 5 ml dung d ịch AlCl 3 300 μg/ml.
Thêm methanol đến vạch. Lắc đều. Lọc qua màng lọc 0,45 μm.
Tiến hành quét phổ dung d ịch A và dung d ịch chất đố i chiế u acid kojic trong vùng
250 - 350 nm.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 49/62
37
Yêu cầu: Dung dịch thử phải có phổ hấ p thu và λmax trùng vớ i phổ hấ p thu và λmax
của dung dịch chất đối chiếu acid kojic (cho phép chênh lệch ± 2 nm) khi đo quang
phổ UV Vis trong cùng điều kiện.
Định lƣợ ng
Phƣơng pháp thử: Pha dung d ịch thử và dung d ịch chất đố i chiế u acid kojic nhƣ
phần định tính. Tiến hành đo độ hấ p thu của các dung dịch trên tại λmax. Tính toán
hàm lƣợ ng phần trăm acid kojic có trong mẫu thử theo công thức sau:
Trong đó:
AT: Độ hấ p thu của dung d ịch thử .
AC: Độ hấ p thu của dung d ịch chất đố i chiế u acid kojic.
CC: Nồng độ của dung d ịch chất đố i chiế u acid kojic (15 μg/ml).
m: Lƣợ ng cân thực tế (mg).
p: Lƣợ ng cân tính theo lý thuyết (mg).
Yêu cầu: Chế phẩm phải chứa từ 95,0 đến 105,0% acid kojic so với hàm lƣợ ng ghi
trên nhãn.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 50/62
38
4.3. THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢ NG ACID KOJIC BẰNG
PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV-VIS
4.3.1. Xác định tính đặc hiệu (tính chọn lọc)
Phổ hấ p thu của mẫu thử (Hình 4.5.) và mẫu tự tạo (Hình 4.6.) có đỉnh hấ p thu
(λmax) và độ hấ p thu gần giống mẫu đối chiếu loãng (Hình 4.4.). Mẫu tr ắng và mẫu
placebo không cho đỉnh hấ p thu tại λmax.
K ết luận: Quy trình định lƣợng đạt tính đặc hiệu.
Hình 4.9. Phổ hấ p thu của mẫu chuẩn.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 51/62
39
Hình 4.10. Phổ hấ p thu của mẫu thử.
Hình 4.11. Phổ hấ p thu của mẫu tự tạo.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 52/62
40
Hình 4.12. Phổ hấ p thu của mẫu placebo.
Hình 4.13. Phổ hấ p thu của mẫu tr ắng.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 53/62
41
4.3.2. Xác định tính tuyến tính
K ết quả khảo sát sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và độ hấ p thu của acid kojic
cho thấy có sự tƣơng quan tuyến tính giữa nồng độ và độ hấ p thu của acid kojic
trong khoảng 1,5 - 30 μg/ml.
Vớ i R 2 = 0,9995; a = 0,0346; b = -0,0261
Trắc nghiệm t (phân phối Student)
Giả thuyết:
H0: Hệ số hồi quy không có ý nghĩa thống kê
HA: Hệ số hồi quy có ý nghĩa thống kê.
Hệ số a: t = 99,97 > t0,05(5) = 2,57 Chấ p nhận giả thuyết HA: Hệ số hồi quy a có
ý nghĩa thống kê.
Hệ số b: t = -4,09 < t0,05(5) = 2,57 Chấ p nhận giả thuyết H0: Hệ số hồi quy b
không có ý nghĩa thống kê.
Trắc nghiệm F (phân phối Fischer)
Giả thuyết:H0: Phƣơng trình hồi quy không tƣơng thích.
HA: Phƣơng trình hồi quy tƣơng thích.
Biện luận:
F = 9993,06 > F0,05(1,5) = 6,61 Chấ p nhận giả thuyết HA: Phƣơng trình hồi quy
tƣơng thích.
K ết luận: Quy trình định lƣợng đạt tính tuyến tính trong khoảng nồng độ acid kojic1,5 - 30 μg/ml.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 54/62
42
Bảng 4.26. K ết quả khảo sát tính tuyến tính
Nồng độ X (μg/ml) Độ hấp thu Y
1,5 0,0291
3 0,0794
9 0,2815
15 0,4814
21 0,7905
27 0,9195
30 1,0025
Đồ thị
Hình 4.14. Đƣờ ng thẳng biểu diễn sự phụ thuộc của độ hấ p thu và nồng độ.
4.3.3. Xác định độ lặp lại (độ chính xác)
K ết quả định lƣợ ng 6 mẫu thử có cùng nồng độ cho giá tr ị RSD = 0,37% < 2%.
K ết luận: Quy trình định lƣợng đạt độ lặ p lại (độ chính xác).
Đ ộ h ấ p t h u
Nồng độ (μg/ml)
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 55/62
43
Bảng 4.27. K ết quả khảo sát độ lặ p lại (độ chính xác).
4.3.4.
Xác định độ đúng
Bảng 4.28. K ết quả khảo sát độ đúng.
Mứ c nồng độ
lý thuyết (%)
Lƣợ ng chất chuẩn
thêm vào (mg)Độ hấp thu
Lƣợ ng tìm
lại (mg)
Tỷ lệ phục
hồi (%)
80 6,0 0,384 6,02 100,4
80 6,1 0,389 6,10 100,0
80 6,7 0,421 6,60 98,5
100 7,5 0,473 7,42 98,9
100 7,7 0,495 7,76 100,8
100 7,9 0,499 7,83 99,1
120 9,0 0,566 8,88 98,6
120 9,1 0,578 9,07 99,6
120 9,4 0,584 9,16 97,4
RSD% 1,05%
K ết quả định lƣợ ng 9 mẫu placebo thêm chuẩn vớ i 3 mức nồng độ (80%, 100%,
120%) cho tỉ lệ phục hồi nằm trong khoảng 97 - 103%.
K ết luận: Quy trình định lƣợng đạt yêu cầu về độ đúng.
Lần
Khối lƣợ ng cân
của gel (mg) Độ hấp thu
Hàm lƣợ ng
(%) Số liệu thống kê
1 755,0 0,4814 100,00
n = 6̅ 99,78
SD = 0,3670
RSD% = 0,37%
2 755,1 0,4818 100,07
3 755,0 0,4783 99,36
4 755,0 0,4779 99,27
5 755,3 0,4816 100,08
6 755,0 0,4809 99,90
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 56/62
44
CHƢƠNG 5. K ẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5.1. K ẾT LUẬN
Khóa luận “ Nghiên cứu bào chế gel chứa 1 % acid kojic dùng trên da” đã đạt đƣợ c
những k ết quả sau:
1. Đã nghiên cứu đƣợ c công thức và quy trình bào chế chế phẩm gel có cấu trúc
nhũ tƣơng D/N chứa 1% acid kojic.
2. Xây dựng và thẩm định quy trình định lƣợ ng hoạt chất acid kojic trong nguyên
liệu và chế phẩm bằng phƣơng pháp quang phổ UV - Vis.
3.
Đã xây dựng đƣợ c tiêu chuẩn cho gel chứa acid kojic 1%.
5.2. ĐỀ NGHỊ
Nghiên cứu trong khóa luận này cần đƣợ c tiế p tục các công việc sau:
- Tiến hành thử nghiệm khả năng khuếch tán hoạt chất qua màng vớ i màng
sinh học, thử tính kích ứng và độ bền của công thức gel đƣợ c chọn.
- Tiến hành thử nghiệm in vivo để chứng minh hiệu quả và sự an toàn của chế
phẩm.- Xây dựng quy trình bào chế trên qui mô lớ n.
- Xây dựng và thẩm định quy trình định lƣợ ng gel acid kojic bằng phƣơng
pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao (HPLC).
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 57/62
45
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng Việt
1. Bộ môn Bào chế (2010), “ Bào chế và sinh dượ c học T ậ p 2”, NXB Y học, TP
HCM, tr. 64-109.
2. Bộ y tế, “ K ỹ thuật bào chế và sinh dượ c học các d ạng thuố c”, NXB Y học, Hà
Nội, tr. 80-89.
Tiếng Anh
3. André O. B., Marc Paye, Howard I. M. (2014), “ Handbook of Cosmetic Science
and Technology”, 4th
ed.,CRC Press, US, pp. 423-438.4. Beelik A.(1956), “Kojic acid”, Adv Carbohydr Chem., 11, pp. 145-183.
5. Burnett CL., Bergfeld WF., Belsito DV. et al. (2010), “Final report of the safety
assessment of kojic acid as used in cosmetics”, Int J Toxicol ., 29(6), pp. 44-73.
6. Cabanes J. et al. (1994), “Kojic acid, a cosmetic skin whitening agent, is a slow -
binding inhibitor of catecholase activity of tyrosinase”, J. Pharm. Pharmacol .,
46(12), pp. 982-985.
7.
Cho JC. et al. (2012), “Depigmenting activities of kojic acid derivatives without
tyrosinase inhibitory activities”, Bioorg Med Chem Lett., 22(12), pp. 41-62.
8. Choi H., Kim K., Han J. (2012), “Kojic acid-induced IL-6 production in human
keratinocytes plays a role in its anti-melanogenic activity in skin”, J. Dermatol.
Sci., 66(3), pp. 207-215.
9. Cotellessa C., Peris K., Onorati M.T. et al. (1999), “The use of chemical
peelings in the treatment of different cutaneous hyperpigmentations”, Dermatol
Sur., 25(6), pp. 450 – 454.
10. Deconick E., Desmedt B., Rogiersb V. et al. (2013), “Development and
validation of a fast chromatographic method for screening andquantification of
legal and illegal skin whitening agents”, Journal of Pharmaceutical and
Biomedical Analysis, 83, pp. 82 – 88
11. Draelos ZD. (2011), “Cosmetics and dermatologic problems and solutions”, 3rd
ed, CRC Press, pp. 54-56.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 58/62
46
12. Draelos ZD., Yatskayer M., Bhushan P. et al. (2010), “Evaluation of a kojic
acid, emblica extract, and glycolic acid formulation compared with
hydroquinone 4% for skin lightening.”, Cutis., 86(3), pp. 153-158.
13. Garcia A., Fulton J. (1996), “The combination of glycolic acid and
hydroquinone or kojic acid for the treatment of melasma and related conditions”,
Dermatol Surg., 22(5), pp. 443-447.
14. Gonçalez M. L., Correa M. A., and M. Chorilli M. (2013), “Skin Delivery of
Kojic Acid-Loaded Nanotechnology-Based Drug Delivery Systems for the
Treatment of Skin Aging”, BioMed Research International , 13, pp. 105-113
15. Johan Sjoblom (2001), “ Encyclopedic handbook of emulsion technology”, CRC
Press, New York, pp. 214-216.
16. Kahn V. et al. (1995), “Effect of kojic acid on the oxidation of DL-DOPA,
norepinephrine, and dopamine by mushroom tyrosinase”, Pigm Cell Res. , 8(5),
pp. 234-240.
17. Kim D.H. et al. (2003), “Development of 5-([3-aminopropyl]phosphinooxy)-2-
(hydroxymethyl)-4H-pyran-4-one as a novel whitening agent”, Chem. Pharm.
Bull ., 51(2), pp.113-116.
18. Levy JL., Pons F., Agopian L., Besson R. (2005), “A double-blind controlled
study of a nonhydroquinone bleaching cream in the treatment of melasma”, J
Cosmet Dermatol., 4(4), pp. 272-276.
19. Lim JTJ. (1999), “Treatment of melasma using kojic acid in a gel containing
hydroquinone and glycolic acid”, Dermatol Surg., 25(4), pp. 282-284.
20.
Masse M.O., Duvallet V., Borremans M. et al. (2001), “ Identification and
quantitative analysis of kojic acid and arbutin in skin whitening cosmetic”,
International Journal of Cosmetic Science, 23, pp. 219-232.
21. Ming-Chuan Huang, Shou-Chieh Huang, Cheng-Chin Lin et al. (2004),
“Simultaneous determination of magnesium ascorbyl phosphate, ascorbyl
glucoside, kojic acid, arbutin and hydroquinone in skin whitening cosmetics by
HPLC”, Journal of Food and Drug Analysis, 12(1), pp. 13-18.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 59/62
47
22. Mohammed Haneefa K.P., Guru Prasad Mohanta, Chandini Nayar (2013),
“Emulgel: An Advanced Review”, J. Pharm. Sci. & Res., 5(12), pp. 254-258.
23.
Monika-Hildegard Schmid-Wendtner, Hans Christian Korting (2007), “ pH and
Skin care”, ABW Wissenschaftsverlag, pp. 73-76.
24. Montra Srisayamemail et al. (2014), “Application of FTIR microspectroscopy
for characterization of biomolecular changes in human melanoma cells treated
by sesamol and kojic acid”, J Dermatol Sci., 73(3), pp. 241-250.
25. Murad Alam (2012), “ Evidence-Based Procedural Dermatology”, Springer,
New York, pp. 325-327.
26. Murad Alam, Ashish Bhatia, Roopal Kundu, Simon Yoo, Henry Chan (2009),
“Cosmetic Dermatology for Skin of Color ”, 1st ed., McGraw-Hill Medical, pp.
116-121.
27. Noh J.M. et al. (2007), “Kojic acid tripeptide amide as a new tyrosinase
inhibitor”, Biopolymers., 88(2), pp. 300-307.
28. O’Neil MJ (2006), “The Merck Index”, 14th ed., Whitehouse Station, NJ:
Merck Research Laboratories; pp. 920-921.29. Roberto Pontarolo et al. (2013), “Development and validation of a UV
spectrophotometric method for kojic acid quantification based on its aluminium
complexes”, Asian J Pharm Clin Res., 6(1), pp.70-73.
30. Rowe R.C., Sheskey P.J., Quinn M.E. (2009), “ Handbook of Pharmaceutical
Excipients”, 6th ed., Pharmaceutical Press, London, pp. 180-185.
31. Patent US5599528 (1997).
32.
Pearl E. Grimes (2008), “ Aesthetics and cosmetics surgery for darker skin
types”, Lippincott Williams & Wilkins, UK, pp. 77-78.
33. Shih Y. (2001), “Simultaneous determination of magnesium L-ascorbyl-2-
phosphate and kojic acid in cosmetic bleaching products by using a microbore
column and ion- pair liquid chromatography”, Journal of AOAC International ,
84(4), pp. 1045-1049.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 60/62
48
34. Vikas Singla, Seema Saini, Baibhav Joshi (2012), “Emulgel: A new platform for
topical drug delivery”, International Journal of Pharma & Bio Sciences, 3(1),
pp. 480-485.
35. WHO (2001), “Some thyrotropic agents”, International agency for research on
cancer , 79, p.609.
36. Yeong Jin Choi, Ho Sik Rho (2014),“ Synthesis and Biological Evaluation of
Kojic acid Derivatives as Tyrosinase Inhibitors”, Bulletin- Korean Chemical
Society; 35(12), pp. 3647-3650.
37. Yeou-Lih Huang, Cheng-Hui Lin, Hsin-Lung Wu (2007), “Combining high-
performance liquid chromatography with on-line microdialysis sampling for the
simultaneous determination of ascorbyl glucoside, kojic acid, and niacinamide in
bleaching cosmetics”, Analytica Chimica Acta, 58(1), pp. 102 – 107.
38. Yi Hui Lin, Yi-Hsin Yang, Shou-Mei Wu (2007), “Experimental design and
capillary electrophoresis for simultaneous analysis of arbutin, kojic acid and
hydroquinone in cosmetics”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical
Analysis, 44(1), pp. 279 – 282.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 61/62
PHỤ LỤC
Phụ lục 1. COA của acid kojic.
7/23/2019 NGHIEN CUU BAO CHE GEL NHU TUONG DAU TRONG NUOC CHUA ACID KOJIC 1% DUNG TREN DA
http://slidepdf.com/reader/full/nghien-cuu-bao-che-gel-nhu-tuong-dau-trong-nuoc-chua-acid-kojic-1-dung-tren 62/62
XÁC NHẬN
Khóa luận này đã đƣợ c sửa theo yêu cầu của Hội đồng chấm khóa luận
Thầy hƣớ ng dẫn Chủ tịch Hội đồng
(Ký tên) (Ký tên)