Upload
others
View
13
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
История изучение ДНК
ДНК
А=ТГ≡Ц
(в РНК А=У)
Биосинтез
Синтез ДНК
Репликативная вилка
Полимеразы• Виды
ДНК зависимая ДНК полимеразаДНК зависимая РНК полимеразаРНК зависимая ДНК полимераза
• Особенностинаправление движения толькодобавляет нуклеотида только кконцунекоторые обладаюткорректирующей активностью
ДНК полимераза
Транскрипция
движется по молекуле ДНК внаправлении →
Синтез белка Трансляция
При каждом движении рибосомы от кконцу мРНК считывается один кодон
Промотер
мРНК
Полицистронная мРНК
Стоп кодоны● УАГ● УГА● УАА
Перенос генов
Варианты переноса генов убактерий
Плазмиды
Джошуа Ледерберг
ПЦР
Открыта в году Кэри Муллисомлауреат
ПЦР
Применение• Секвенирование ДНК
КриминалистикаУстановление отцовстваМедицинская диагностикаПерсонализированная медицина
• Мутагенез• Клонирование
Стратегии молекулярного клонирования
Классический Вектор сВставкаРестриктазыЛигазы
РестриктазыЭндонуклеазы рестрикции
Рестриктазы го типаРестриктазы го типаРестриктазы го типа
Эндонуклеазы≠Экзонуклеазы
бактериофаги атакуюбактериальную клетку
Рестриктазы ого типа
Получили наибольшее применение в прикладной молекулярной биологии
Лигазы
T4 Бактериофаг
Электрофорез
Принцип метода
Физиотерапия
Двумерный гельэлектрофорез белков Электрофорез
ДНК
Электрофорезбелков в
П И Страховым и Ф Ф Рейссом вгоду
Ванночка дляэлектрофореза
Заливочныйстолик
Лабораторный блок питания
Электрофорез ДНК в Агарозном геле
Электрофорез ДНК в Агарозном геле
Загрузочныйбуффер имолекулярныйстандарт
Агароза
Движение плазмиды в агарозномгеле
Схема движения плазмиднойДНК в агарозном геле
Релаксированная форма
Линейная
Ковалентно связанная
Суперскрученная
Одноцепочечная
Линейная
До разрезания Порезанная
Необходимо● Вектор куда будет производиться клонирование● Вектор с интересующей последовательностью
или ПЦР фрагмент● Рестриктазы и● Лигаза● Антибиотик
Стандартное клонирование