1

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего

профессионального образования «УЛЬЯНОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»

МИКРОБИОТА КОЖИ В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ

Ульяновск УлГТУ

2014

2

УДК 612.79 ББК 52.525.52 М 59

Рецензенты: Доктор биол. наук, профессор кафедры зоологии Ульяновского

государственного педагогического университета им. И.Н. Ульянова Ильина Н.А. Доктор биол. наук, профессор, заведующий кафедрой биологии, экологии и

природопользования Ульяновского государственного университета С.М. Слесарев

Авторы:

Н.И. Потатуркина-Нестерова, О.Е.Фалова, И.С. Немова, Н.С. Онищенко

Научный редактор – доктор мед. наук, профессор Н.И. Потатуркина-Нестерова

Микробиота кожи в норме и при патологии / Н.И. Потатуркина-Нестерова, О.Е. Фалова, И.С. Немова, Н.С. Онищенко; под ред. Н.И. Потатуркиной-Нестеровой. – Ульяновск : УлГТУ, 2014. – 113 с.

ISBN 978-5-9795-1311-9 В монографии рассмотрены особенности формирования микробиоты кожи

человека при различных условиях. Приведены сведения об изменениях и структурных перестройках состава микробиоты кожи на фоне ряда социально-значимых хронических кожных патологий. Показана оценка воздействия на микробный состав кожи некоторых производственных факторов, в частности, условий мукомольного производства.

Книга рекомендована микробиологам, врачам, экологам, биологам, может быть полезна студентам биологических и медицинских факультетов, а также широкому кругу читателей.

УДК 612.79 ББК 52.525.52

© Потатуркина-Нестерова Н.И., Фалова О.Е.

Немова И.С., Онищенко Н.С., 2014. ISBN 978-5-9795-1311-9 © Оформление. УлГТУ, 2014.

М 59

3

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ (Н.И. Потатуркина-Нестерова) .................................................. 5

Глава 1. НОРМАЛЬНАЯ МИКРОБИОТА КОЖИ (О.Е. Фалова, И.С.

Немова) .................................................................................................................. 7

1.1. Общая характеристика нормальной микробиоты кожи ................ 7

1.2. Структура микробного консорциума кожи здоровых людей...... 16

Глава 2. МИКРОБИОТА КОЖИ ПРИ ПАТОЛОГИИ (Н.И. Потатуркина-

Нестерова, О.Е.Фалова, Н.С. Онищенко) ........................................................ 18

2.1. Особенности микросимбиоценоза кожи при хронических

дерматозах ................................................................................................ 21

2.2. Видовой и количественный состав микробиоты на

пораженных участках кожи при псориазе, экземе, атопическом

дерматите ................................................................................................. 30

2.3. Видовой и количественный состав микрофлоры на интактных

участках кожи при различных клинических формах дерматоза ........ 35

2.4. Бактериальная обсемененность при сравнении различных

биотопов кожи ......................................................................................... 38

Глава 3. КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА МИКРОБИОТЫ КОЖИ В

УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ВНЕШНИХ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ

ФАКТОРОВ (Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.С. Немова) ........................ 44

3.1. Действие неблагоприятных факторов производственной

среды ........................................................................................................... 45

3.2. Микросимбиоценоз кожи людей в условиях воздействия

зерновой пыли ........................................................................................... 52

3

4

3.3. Микросимбиоценоз кожи в зависимости от продолжительности

работы на мукомольном производстве .................................................. 66

Глава 4. ПОПУЛЯЦИОННАЯ СТРУКТУРА МИКРОБИОТЫ КОЖИ

(И.С.Немова) ........................................................................................................ 81

4.1. Критерии оценки популяционной структуры микробных

сообществ ................................................................................................. 81

4.2. Характеристика популяционной структуры

микросимбиоценоза кожи на примере воздействия зерновой

пыли .......................................................................................................... 82

ЗАКЛЮЧЕНИЕ (Н.И. Потатуркина-Нестерова) .......................................... 96

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ CПИСОК ............................................................... 98

4

5

ВВЕДЕНИЕ

По результатам последних мировых исследований под пристальное

внимание в области современной микробиологии попадает так

называемый микробиом человека, под которым понимается вся

совокупность микроорганизмов, населяющих организм человека, с

многообразием установившихся взаимосвязей (Першина с соавт., 2013; Oh,

at al., 2014; Wikswo, 2014).

Действительно, организм человека представляет собой

экологическую нишу для множества разнообразных микроорганизмов,

которые в норме заселяют определенные биотопы. Микробиом тела

человека – это сложная система, отличающаяся не только чрезвычайной

многокомпонентностью, но и количественным разнообразием входящих в

нее представителей микрофлоры. При этом видовой состав

микроорганизмов формируется качественно и количественно, в

зависимости от характера микроэкологии в биотопах, который сложился

эволюционно и приобрел устойчивость применительно к видовым

особенностям макроорганизма (Бондаренко, с соавт., 2003).

Образование новой науки микроэкологии, рассматривающей

принципы организации и взаимосвязей в бактериальных сообществах,

позволило перейти на популяционный уровень изучения микробных

ассоциаций. Однако сведения о характере и выраженности системных

сдвигов в составе микробиоты, в частности кожи человека, на фоне

развития различных дисбиотических изменений или вследствие внешних

воздействий носят разрозненный, несистематичный характер, отличаются

узким подходом и произвольным толкованием различных показателей.

Особую актуальность исследование микробиоты кожи человека

приобретает применительно к социально значимым хроническим

дерматозам организма человека, однозначности в раскрытии механизмов

5

6

этиологии и патогенеза которых до сих пор нет. В данном контексте

биотоп кожи являет собой пример сложного ассоциативного

взаимодействия микроорганизмов, потенциальную этиологическую

значимость которых для кожных патологий нельзя недооценивать.

Кроме того, в условиях всевозрастающего экологического прессинга

остро стоит проблема профессиональных кожных патологий.

Неблагоприятные факторы производственной среды могут оказаться

стимулирующим фактором в развитии ряда заболеваний инфекционной

природы. В связи с этим становится очевидной роль сложных

многокомпонентных ассоциаций микробиоты кожи.

Таким образом, исследование особенностей микробиоты кожи

человека при различных условиях может послужить одним из ключевых

моментов в раскрытии и понимании механизмов взаимодействий в системе

«макроорганизм-микроорганизм».

6

7

Глава 1. НОРМАЛЬНАЯ МИКРОБИОТА КОЖИ

1.1. Общая характеристика нормальной микробиоты кожи

Человек – это уникальная экосистема, представленная огромным

количеством различных микроорганизмов, занимающих конкретный

биотоп и находящихся в состоянии динамического равновесия. Каждому

человеку присущ свой микробиологический фенотип, который

формируется под влиянием наследственной изменчивости и факторов

окружающей среды (Лобзин и др., 2003).

Многочисленные виды микробов, населяющие макроорганизм,

образуют микробиоценозы, имеющие свои особенности для каждого

биотопа (Бондаренко, Грачева, Мацулевич, 2003). Микроэкология в

биотопах эволюционно сложилась и приобрела устойчивость

применительно к физиолого-анатомическим, биохимическим и иным

особенностям данного организма и вида (Воробьев и др., 1997; Tannock,

1999).

Кожа является самым крупным органом тела человека, наиболее

подверженным неблагоприятному воздействию внешних факторов

(Мирошникова, 1995; Янчевская, 2001). Она представляет собой

своеобразную систему, тесно связанную с внутренней средой организма и

является экологической нишей для микроорганизмов (Бондаренко и др.,

1998; Воробьев, Лыкова, 1999; Крамарь, 2003).

Установлено, что микробы обсеменяют наружные покровы с первых

дней жизни. Только в чреве матери плод стерилен, но уже при рождении и

затем на протяжении ряда лет формируется микробный пейзаж

определенных биотопов организма, характеризующийся относительным

постоянством и индивидуальными различиями (Красильников, 1994;

Shenderov, 1990).

7

8

В настоящее время накоплен большой материал о роли микрофлоры

в жизнедеятельности человека (Сытник, 1989; Воробьев, Несвижский,

Липицкий, 2003; Roth, James, 1989).

Под нормальной микрофлорой понимают совокупность множества

микробиоценозов, характеризующихся определенным составом и

занимающих конкретный биотоп в организме человека (Шендеров, 1987;

1998). Формирование качественного и количественного состава

нормальной микрофлоры регулируется сложными антагонистическими и

синергическими отношениями между отдельными ее представителями в

составе биоценозов. Состав микрофлоры может меняться в зависимости от

возраста, условий внешней среды, условий труда, рациона питания,

перенесенных заболеваний, травм и стрессовых ситуаций (Аленушкина,

2003).

Сформировалась концепция постоянной и транзиторной флоры не

только кожи, но и любых других биотопов (Нобл, 1986). Каждому органу

свойственна своя относительно постоянная микробиологическая

(аутохтонная, индигенная, резидентная флора) и добавочная или случайная

флора (транзиторная, аллохтонная флора) (Перетц, 1955; Tannock, 1988;

Чахава, Горская, Рубак, 1982, Чахова, 1987; Шендеров, 1987; Fan, 1998).

Резидентная флора кожи относительно стабильна и хорошо изучена.

Ее состав в различных анатомических зонах зависит от близости к

слизистым оболочкам (рот, нос, перианальная область), особенностей

секреции, одежды. В составе постоянной микрофлоры кожи превалируют

аэробные и анаэробные дифтероиды (коринебактерии, пропионибактерии);

грамположительные аэробные спорообразующие палочки, которые

повсеместно распространены в воздухе, воде, почве; грамположительные

негемолитические и гемолитические аэробные и анаэробные

эпидермальные стафилококки, микрококки; альфа-гемолитические

8

9

стрептококки и энтерококки, а также грамотрицательные колиформные

бактерии и ацинетобактерии (Подволоцкая, 2000). В области кожных

складок часто обитают дрожжеподобные грибы. В зонах скопления

сальных желез (гениталии, наружное ухо) встречаются кислоустойчивые

непатогенные микобактерии (Джоунз, 2000; Аленушкина, 2003; Kobayashi,

1992). На поверхности кожи эти микроорганизмы образуют устойчивые

сообщества, находящиеся в состоянии динамического равновесия с

макроорганизмом (Клемпарская, 1989).

Основная функция аутохтонной микрофлоры – защитная, так как

бактерии (симбионты человека) обладают выраженной антагонистической

активностью по отношению к патогенным и условно-патогенным

микроорганизмам (Митрохин, Никушин, 1998). Индигенная микрофлора

препятствует размножению посторонних патогенных микробов и грибов

(Джоунз, 2000).

По мнению С.И. Сытника (1989), представители нормальной

микрофлоры человека выполняют физиологически важную функцию

поддержания постоянства внутренней среды организма. Микрофлора

принимает участие в формировании иммунобиологической реактивности

макроорганизма (Солнцева и др., 2000).

Известно, что кожа вследствие постоянного контакта с внешней

средой часто становится местом обитания транзиторных микроорганизмов,

которые попадают на нее в результате контаминации. Они относительно

редко встречаются на чистой, не подвергавшейся загрязнению коже. Это

микробы с различной степенью выраженности патогенности (клебсиеллы,

протеи, синегнойная палочка, кишечная палочка и др.). Такие

микрорганизмы присутствуют не постоянно и могут образовывать

временные колонии в зависимости от наличия или отсутствия

определенных факторов (Нобл, 1986). Временные микроорганизмы

9

10

находятся на коже в течение короткого периода и легко передаются от

человека к человеку, являясь потенциальным переносчиком болезней

(Джоунз, 2000; Kobayashi, 1992).

Сбалансированное состояние микробиоценоза кожи обеспечивает

колонизационную резистентность данного биотопа. В.К. Солнцева и др.

(2000) установили, что нарушение тех или иных компонентов гомеостаза,

включая кожную патологию, изменяет постоянство микроэкосистемы и

приводит к дисбактериозу кожи. По мнению В.А. Знаменского, Н.В.

Дегтяря, С.Н. Кузьминского (1986) наиболее ранним и достоверным

показателем дисбактериоза кожи является наличие гемолитических

свойств у представителей микрофлоры данного биотопа. Однако известны

лишь единичные работы, свидетельствующие об изменении патогенности

представителей микробиоценоза кожи (Пономарева, 2007).

Симбиоз макро- и микроорганизмов лабилен. Ослабление

нормальных физиологических процессов, определяющих сдерживающее

влияние иммунореактивности организма на жизнедеятельность его

сожителей- микробов, быстро приводит к их активации, проявляющейся

еще до развития каких-либо патологических процессов в увеличении их

количества (Клемпарская, 1989).

Существует очевидная взаимосвязь микрофлоры кожи с состоянием

кожи как органа (Иванов, 1989; Куцевалова, 2005). По данным

A. Weinberg, M. Swartz (1997), на 1 см² кожи в норме приходится около

80 000 микроорганизмов. Состав микрофлоры и размножение ее

представителей контролируются самим организмом с помощью

механических, бактерицидных, химических факторов (Rosenbury, 1966;

Lowbury, 1981; Lowy, Hammer, 1983). К числу таких факторов, которые

могут существенно влиять на удаление непостоянных микроорганизмов с

поверхности кожи, относятся кислая реакция среды (рН 4-5), наличие

10

11

жирных кислот в секретах сальных желез, состояние кератинизации,

присутствие лизоцима, трансферрина (Лисишникова, 1997). В связи с этим

наблюдаются значительные колебания показателя обсемененности

различных участков кожи, при этом для определенных биотопов

характерна своя микрофлора как в качественном, так и в количественном

отношении (Шендеров, 1998). Наиболее обсеменена кожа открытых частей

тела – кисти рук, шея, лицо (Никифоров, Шкарин, 2000).

В значительной мере микроорганизмы кожи у практически здоровых

людей представлены ассоциациями микрококков с эпидермальными

стафилококками, дифтероидами, стрептококками и некоторыми видами

грибов. На общей поверхности кожи из всей микрофлоры стафилококки и

микрококки составляют примерно 10%, однако, если учитывать

транзитные микроорганизмы, подлинная доля этой микробной популяции

доходит до 50–80% (Сытник, 1989; Загороднева Е.А., 2002; Kloоs, Schlifer,

1975).

Наряду с грамположительными бактериями на коже поселяются и

грамотрицательные бактерии, представители таких родов, как

Pseudomonas, Proteus, Klebsiella, Acinetobacter, Escherichia (Солнцева и др.,

2000; Neu, 1983). На коже здоровых людей грамотрицательные бактерии

встречаются относительно редко, за исключением микробов рода

Acinetobacter, которые являются частью нормофлоры в подмышечных

ямках, межпальцевых промежутках (Duma, 1985). Грамотрицательные

палочки рода Enterobacter также обнаруживаются на коже не часто, их

выявляют на биотопах с повышенной влажностью (Чахава, 1982).

Влажность является весьма существенным фактором для роста и

размножения различных видов микроорганизмов и приводит к

размягчению и мацерации кожи (Шукюров, Керимова, 1991).

11

12

Микроорганизмы, обитающие в кишечнике, безусловно встречаются

в качестве транзитных представителей микрофлоры и на коже. Так,

частота встречаемости бактерий рода Escherichia у здоровых людей

составляет 6%, при этом наиболее часто они обнаруживаются на коже

промежности (Канарейкина, Левина, Полферов, 1981; Saarela, Lahteenmaki,

Crittenden, 2002). Интенсивность рассеивания микробов тесно связана со

степенью загрязнения кожи (Solberg, 1965).

Из условно-патогенных микроорганизмов значительное место в

микропейзаже кожи занимают грибы рода Candida (Аравийский,

Горшкова, 1995). На коже здоровых людей дрожжеподобные грибы, по

данным Р.Н. Ребровой, В.В. Бирюкова, выявлены в 20–60% случаев.

Частота обнаружения их неуклонно растет в течение последних лет и

связана со снижением неспецифической резистентности практически

здоровых людей, обусловленной экологией, питанием, нерациональным

использованием антибиотиков и другими эндогенными и экзогенными

факторами.

С.Р. Резник и др. (1988), В.И. Кочеровец и др. (1992) также

отмечают, что при длительном воздействии дестабилизирующих факторов

микрофлора реагирует количественными и качественными сдвигами в

популяциях микроорганизмов. Формируются механизмы патологического

микробиоценоза (Шендеров, 1998).

На аутофлору оказывают влияние целый ряд неблагоприятных

факторов. Их воздействие вызывает накопление микробов аутофлоры в

результате изменения состояния иммунологической реактивности

организма «хозяина» (Клемпарская, 1989). Такими дестабилизирующими

факторами являются неблагоприятные условия производства,

экстремальные условия, возраст, лучевое воздействие, химиопрепараты и

другие (Никифоров, Шкарин, 2000). Влияние некоторых из них достаточно

12

13

изучено в настоящее время. Установлено, что состояние кожи с возрастом

изменяется. Наблюдается возрастание степени проницаемости кожи,

сопровождающееся нарушением барьерной функции эпидермиса

(Подволоцкая, 2000; Yarwood, Leung, Schlievert, 2000). Широкое

применение антибиотиков способствует возрастанию роли условно-

патогенных микроорганизмов (Фролов, Зарицкий, Фельдман, 1986).

Антибиотики угнетают нормальную флору кожи и слизистых оболочек

человека, что приводит к дисбактериозу, на фоне которого микрофлора

приобретает более выраженную патогенность (Воробьев, Борисова,

Моложавая, 2001). При этом эндоэкологическое состояние организма,

включающее в себя и характеристику нормоценозов различных биотопов,

является одним из основополагающих компонентов системы

саморегуляции и защиты организма, в то время как дисбиоз – первооснова

для развития донозологических изменений и большинства патологических

явлений (Несмеянова, 2007).

Так, в последнее время появились сообщения о случаях заболеваний,

вызываемых бактериями рода Corynebacterium. Эти микроорганизмы

могут приводить к развитию воспалительных процессов, а также обладают

выраженной сенсибилизирующей активностью (Романенко, Батуро,

Улиско, 2005). Имеются отдельные сообщения об этиологической

значимости Corynebacterium spp. в инфекционной патологии дыхательных

путей, особенно в ассоциации с другими микрорганизмами (Бержи, 1997).

Большой интерес представляют также данные о том, что Corynebacterium

pseudodiphthericum являются доминантным видом при аллергическом

круглогодичном рините (Романенко, Батуро, Улиско, 2005).

Количество микроорганизмов, обитающих на коже, довольно велико

и подвержено суточным, месячным и сезонным колебаниям (Подволоцкая,

2000). Сезонные изменения температуры окружающей среды оказывают

13

14

влияние на состояние баланса макроорганизма и его микробные

ассоциации. В зимне-весенний период число бактерий на коже

увеличивается, что указывает на снижение бактерицидных свойств кожи в

этот период (Петровская, Марко, 1976; Нобл, 1986).

Наличие бактерий варьирует в зависимости от профессиональных

особенностей (Карпунина, 2001). Широкий спектр воздействия физических

факторов оказывает влияние на развитие патологических изменений

кожного покрова (Малишевская и др., 1999). Вместе с тем остается

малоизученным влияние факторов производственной среды на

микробиоценоз человека.

Следовательно, человек и его микрофлора – это единая система. В

связи с расширением наших представлений о значении условно-

патогенных микроорганизмов в инфекционном процессе

бактериологическое исследование нормальной микрофлоры приобретает

характер экологического (Гаврилова, 1991).

Кожа относится к открытым экологическим системам, которые

подвержены регулярному или нерегулярному разрежению, приводящему к

утрате микроорганизмов. С.И. Сытник (1989) утверждает, что внедрение

новых видов в сообщество не сопровождается исчезновением ранее

присутствующих.

По мнению В.Ф. Коляденко, Т.Н. Каштанова, Г.А. Иванова (1988),

экологическая система макроорганизма и его нормофлора несут в себе

элементы саморегуляции и могут препятствовать изменениям среды и

резким колебаниям плотности микробных популяций.

Микрофлора кожи, с одной стороны, является одним из защитных

механизмов организма, а с другой – неисчерпаемым резервуаром

возбудителей экзогенных и эндогенных инфекций (Сытник, 1989; Акрут,

2003). Именно она образует экологический барьер, обеспечивающий

14

15

колонизационную резистентность и деконтаминацию организма,

воздействуя на иммунную систему (Трапезов, Леонтьева, Бондаренко,

1992; Ришко, 2004). По состоянию микрофлоры кожи можно судить о

здоровье человека, т. к. при заболеваниях отмечается качественное и

количественное изменение микробных ассоциаций кожного покрова

(Иванов, 1989).

Экологический «пресс» в виде химических и физических факторов

привел к выраженным сдвигам в микробных экосистемах человека.

Развивая теорию антропо-экологического напряжения и утомления

иммунной системы, многие авторы одной из главных причин

возникновения заболеваний считают нарушения в бактериально-

грибковых ассоциациях организма человека (Бухарин с соавт., 2002; 2010).

Неблагоприятные производственные факторы оказывают негативное

воздействие на организм человека и его микробиоценоз (Бугеро, 2004).

Показано, что на фоне дисбактериоза, развивающегося в результате

негативного воздействия производственной среды, микроорганизмы

приобретают более выраженную патогенность, однако роль отдельных

представителей микробиоценоза кожи в развитии заболеваний человека

остается не ясной. Известно, что характеристика микрофлоры является

весьма чувствительным индикатором воздействия неблагоприятных

факторов окружающей среды на макроорганизм. Однако этот показатель

практически не используется в промышленной экологии с целью оценки

воздействия вредных факторов на работающих, а изменения микрофлоры

кожи под действием производственных факторов до сих пор мало изучены.

15

16

1.2. Структура микробного консорциума кожи здоровых людей

В ходе проведенного обследования 80 здоровых человек в составе

микробного консорциума кожи были выделены следующие

микроорганизмы (табл. 1.1).

Таблица 1.1

Структура микробного консорциума кожи здоровых лиц

№ п/п

Вид микроорганизма

Контрольная группа

Среднее значение КОЕ/см2, М±m

Абс. шт./% (n=80 чел)

1 Staphylococcus aureus 44,3±9,4 7/8,75%

2 Staphylococcus epidermidis 47,9±4,5 57/71,25%

3 Staphylococcus saprophyticus

11,6±2,9 5/6,25%

4 Staphylococcus haemolyticus

7,8±2,13 5/6,25%

5 Staphylococcus warneri 5,0 1/1,25%

6 Staphylococcus hominis 10,76±1,4 25/31,3%

7 Staphylococcus capitis 8,75±1,3 8/10%

15 Enterococcus faecalis 43,3±15,4 6/7,5%

16 Bacillus 14,8±3,05 12/15%

18 Corynebacterium spp. 39,4±3,45 36/45%

20 Streptococcus spp. 52,5±37,5 2/2,5%

Как видно из таблицы 1.1, состав нормальной микробиоты кожи

представлен разнообразными сочленами микроорганизмов. В составе

микробиоценоза выявлены представители грамположительной флоры.

Наибольшую группу составили представители рода Staphylococcus spp.

Так, из числа условно-патогенных микроорганизмов выявлено 57 штаммов

16

17

Staphylococcus epidermidis, плотность колонизации которых составила

47,9±4,5 КОЕ/см2. На долю сапрофитного стафилококка пришлось только

6,25% с плотностью колонизации 11,6±2,9 КОЕ/см2. Незначительными по

частоте выявления и обсемененности отмечены Staphylococcus hominis,

Staphylococcus capitis (10,76±1,4 КОЕ/см2 и 8,75±1,3 КОЕ/см2

соответственно). Также обнаружены представители Staphylococcus

epidermidis и Staphylococcus saprophyticus (47,9±4,5 и 11,6±2,9 КОЕ/см2).

Следует отметить присутствие в составе нормальной микробиоты

Staphylococcus aureus. Выявлено 7 штаммов золотистого стафилококка,

плотность колонизации кожи данными микроорганизмами составила

44,3±9,4 КОЕ/см2.

В составе нормальной микробиоты обследованных лиц в 7,5%

случаев присутствовали Enterococcus faecalis с плотностью колонизации

43,3±15,4 КОЕ/см2.

Наряду со стафилококками многочисленную группу (45%) составили

представители Corynebacterium spp.

Из числа грамположительной микрофлоры обнаружены также

бактерии рода Streptococcus spp, степень обсемененности здоровой кожи

данными микроорганизмами составила 52,5±37,5 КОЕ/см2.

Полученные в ходе проведенного эксперимента результаты

обследования кожи здоровых лиц согласуются с данными литературы и

свидетельствуют о значительном разнообразии состава микробиоты и

умеренной плотности колонизации.

17

18

Глава 2. МИКРОБИОТА КОЖИ ПРИ ПАТОЛОГИИ

Особенностью второй половины ХХ века является существенное

изменение структуры заболеваемости человека. Эти изменения

характеризуются увеличением распространения в современных условиях

ряда хронических кожных заболеваний, таких как псориаз, экзема,

атопический дерматит (АД) и др., нередко сочетающихся с другими

проявлениями атопического фенотипа, такими как бронхиальная астма,

крапивница, ринит и др. (Калюжная, 1987; Ермолаев, 1996; Henseler,

Christophers, 1995).

Экзему рассматривают как хронический рецидивирующий

аллергодерматоз, характеризующийся клиническим полиморфизмом.

Удельный вес экземы в структуре кожных заболеваний человека

значителен, он составляет 30 – 40%, что определяет его высокую

социальную значимость (Скрипкин, 1995). Заболевание встречается у лиц

обоего пола и в разных возрастных группах (Фицпатрик, 1999).

Большинство авторов (Довжанский, 2001; Schatteman, Mielants, 1995)

отмечают рост заболеваемости экземой, псориазом, атопическим

дерматитом в городах и сельской местности, в различных климатических

зонах, что позволяет отнести их к «болезням цивилизации».

Значительная распространенность хронических дерматозов (АД,

экземы, псориаза) среди населения, хроническое и нередко тяжелое

течение, приводящее к инвалидности, нерешенность вопросов этиологии и

патогенеза заставляют отнести данные заболевания к наиболее важным

социальным, медицинским и экономическим проблемам (Алиева, 1992;

Дегтяр, Добродеева, 2000).

Существует много теорий механизмов развития экземы – неврогенная,

эндокринная, аллергическая, наследственная. Каждая из этих теорий берет

18

19

за основу признание какого-то одного патогенетического звена решающим

фактором патологического процесса. Эти факторы делятся на эндо- и

экзогенные. К эндогенным факторам относят антигенные детерминанты

микробного фактора из очагов хронической инфекции, очаги микробного,

чаще стрептококкового, поражения кожи. К экзогенным – местно

(контактно) воздействующие через кожу вещества, приобретающие

антигенные свойства (Скрипкин, 1995).

Очаг хронической инфекции, бактериальная сенсибилизация и

связанные с ними аутоиммунные процессы играют важную роль в

развитии дерматоза, иногда могут послужить толчком к его первой

вспышке или рецидиву (Важбин с соавт., 1995; Humbert, Bidet, 1991;

Нестеров, 2009). Так, по мнению Н.И. Рассказова, С.А. Алтухова (1997),

большое значение в течении экземы имеют очаги локальной инфекции

(тонзиллит, синусит, холецистит и др.), выступающие в качестве

источника бактериемии и снижающие естественную резистентность

организма. Работами этих авторов установлено, что при хроническом

тонзиллите, являющемся инфекционно-аллергическим заболеванием,

происходит сенсибилизация организма к β-гемолитическому стрептококку

и стафилококку. Так, по данным авторов, частота колонизации очагов при

детской экземе S. aureus, в т.ч. гемолитическими штаммами, составляет от

73 до 90% (Чернышов с соавт., 1991; Мазурина с соавт., 1996; Brockow et

al., 1999). Важное патогенетическое значение в развитии и дальнейшем

течении экземы, особенно у детей, имеет патология желудочно-кишечного

тракта, сопровождающаяся дисбиозом кишечника (Чубенко, Толмач, 1989;

Бондарь с соавт., 1992; Fry, 1970; Gardner, 1988).

По мнению ряда авторов, существует связь между развитием

аллергического процесса и изменениями микробной экологии кишечника

19

20

(Yates, Watkinson, 1982; Mielants, Veys, 1995; Pietrzak, Lecewicz-Torun,

1998; Scarpa, Manguso, 2000).

А.А. Воробьев, Л.О. Иноземцева, Ю.В. Несвижский (1996) также

считают, что возникновение кожных заболеваний в определенной мере

связано с нарушением микроэкологического баланса кишечника.

У больных микробной экземой пораженные участки колонизируются

в большей степени и могут участвовать как вторичные очаги в

распространении инфекций. Ассоциации грибов рода Candida и бактерий

усиливают воспаление. Нарушенная трофика и длительное воздействие на

кожу бактериально-грибковой ассоциации создают благоприятные условия

для развития аутоаллергического компонента, что приводит к

хроническому течению, появлению вторичных очагов на обширных

участках кожного покрова. Аллергенами являются не только патогенные,

но и условно-патогенные, а также сапрофитные бактерии и грибы.

Повреждению кожи при микробной экземе способствует распространение

микробной флоры, а проникновению антигенов – возрастная

проницаемость сосудов. Микробы потенцируют экзематозное поражение,

при этом определенное значение придается ослаблению организма

(Дегтяр, 2000).

J.R. Person и J.D. Bernhard (1986) описывая аутоинтоксикацию как

первичный патофизиологический процесс во взаимосвязи болезней кожи и

кишечника, отмечают, что болезни кожи возникают из-за поглощения

микробных антигенов из кишечника (Ernst, 1997).

20

21

2.1. Особенности микросимбиоценоза кожи при хронических

дерматозах

В ходе проведенного исследования было обследовано 288 человек с

различными хроническими дерматозами, такими как псориаз (38,19%),

экзема – (49,3%), атопический дерматит – (12,5%). В таблице 2.1

приведены данные по количественному и качественному составу

микрофлоры кожи обследованных лиц.

Таблица 2.1 Характеристика микробиоты кожи обследованных лиц

№ п/п

Вид микроорганизма

Среднее значение КОЕ/см2, М±m

Абс.шт./% (n=827 штаммов)

1 2 3 4

1 Staphylococcus aureus 572,1±55,3** 193/23,3

2 Staphylococcus epidermidis 157,4±20,3** 198/23,9

3 Staphylococcus saprophyticus 82,45±7,6** 40/4,8

4 Staphylococcus haemolyticus 85,4±9,4** 87/10,5

5 Staphylococcus warneri 124±16,5 32/3,9

6 Staphylococcus hominis 51,0±17,0 15/1,8

7 Staphylococcus capitis 37,1±4,3** 54/6,5

8 Staphylococcus xylosis 20,0 1/0,12

9 Staphylococcus simulans 79,5±31,6 8/0,85

10 Staphylococcus sciuri 52,1±12,5 10/1,3

11 Staphylococcus intermedius 234±104,5 8/0,96

12 Micrococcus luteus 125,1±18,8 62/7,5

13 Candida albicans 19,2±2,2 17/2,1

14 Enterococcus faeceum 721,1±373,9 14/1,7

15 Enterococcus faecalis 385,8±143 18/2,2

21

22

Окончание табл. 2.1 1 2 3 4

16 Bacillus spp. 63,8±18,5 7/0,8

17 Acinetobacter 69,2±32,2 12/1,4

18 Corynebacterium spp. 161,2±39,9** 27/3,3

19 Klebsiella pneumoniae 28,12±5,5 8/0,96

20 Streptococcus spp. 287,4±193,3 5/0,6

21 Pseudomonas aeruginosa 4240±1028 5/0,6

22 Proteus spp. 112,5±9,3 6/0,7

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,001; ** p<0,05; *** p<0,01.

Следует отметить, что штаммы Staphylococcus spp. представляли

самую многочисленную и разнообразную в видовом отношении

популяцию. Идентифицировано 644 штамма, принадлежащих к

Staphylococcus spp., что составляет 77,87% случаев от числа всех

выделенных штаммов (827 штаммов). Причем на долю Staphylococcus

aureus пришлось 23,3% (193 штамма от общего числа выделенных

микрорганизмов). Следует отметить, что коагулазоположительные

Staphylococcus aureus обнаружены у 50%±5,8% (144 человека)

обследованных лиц по сравнению с контрольной группой (8,75%±6,3%,

p<0,05).

Далее самую многочисленную группу составили Staphylococcus

epidermidis, которые высевались у 51,7%±5,9% пациентов на коже, что

достоверно ниже по сравнению с контрольной группой, где этот

микроорганизм обнаружен у 71,3%±10,1% (p<0,05).

Для штаммов Staphylococcus haemolyticus частота встречаемости на

коже лиц с хроническим дерматозами также оказалась существенной и

составила 25,7%±5,14%, тогда как в контроле – 6,2%±5,3% (p<0,05).

22

23

Доля лиц, у которых на коже обнаружен Staphylococcus capitis, также

достоверно отличалась от таковой в контрольной группе и составила

18,1%±4,52% и 10%±6,7% соответственно (p<0,05).

Напротив, для Staphylococcus saprophyticus достоверных различий по

частоте обнаружения у обследованных лиц и в контрольной группе не

выявлено (12,8%±3,9% и 6,25%±5,4% соответственно, p>0,05).

Анализ микрофлоры кожи осуществляли как на пораженных (1-я

группа), так и интактных участках кожи (2-я группа). Результаты

исследования видового состава микрофлоры с пораженных участков кожи

обследованных лиц представлены в таблице 2.2.

Таблица 2.2

Характеристика видового состава микробиопленки кожи обследованных

лиц на пораженных участках кожи

№ п/п

Вид микроорганизма

Обследованные лица с хроническими дерматозами

Контрольная группа

Среднее значение КОЕ/см2,

М±m

Абс. шт./% (n=288 чел)

Среднее значение КОЕ/см2,

М±m

Абс. шт./%

(n=80 чел)

1 2 3 4 5 6

1 Staphylococcus aureus 799,9±74,9*** 127/44,1 44,3±9,4 7/8,75%

2 Staphylococcus epidermidis

239,1±43,5*** 84/29,2 47,9±4,5 57/71,25%

3 Staphylococcus saprophyticus

82,5±6,4*** 31/10,7 11,6±2,9 5/6,25%

4 Staphylococcus haemolyticus

112,8±12,7*** 57/19,8 7,8±2,13 5/6,25%

5 Staphylococcus warneri 101±10,5 20/6,9 5,0

6 Staphylococcus hominis 122,5±51,2** 4/1,4 10,76±1,4 25/31,3%

7 Staphylococcus capitis 17,2±2,8** 18/6,2 8,75±1,3 8/10%

23

24

Окончание табл. 2.2 1 2 3 4 5 6

8 Staphylococcus xylosis 20,0 1/0,3 - -

9 Staphylococcus sciuri 40,8±25,1 3/1,1 - -

10 Staphylococcus intermedius

590±20,8 3/1,0 - -

11 Staphylococcus simulans 7±1,5 3/1,1 - -

12 Micrococcus luteus 192,7±33,8 30/10,4 - -

13 Candida albicans 19,2±2,2 17/5,9 - -

14 Enterococcus faeceum 830,8±430,0 12/4,2 - -

15 Enterococcus faecalis 636,0±80,1** 6/2,1 43,3±15,4 6/7,5%

16 Bacillus 102,5±6,3*** 4/1,4 14,8±3,05 12/15%

17 Acinetobacter 10,6±1,6 8/2,8 - -

18 Corynebacterium spp. 153,2±27,7*** 16/5,5 39,4±3,45 36/45%

19 Klebsiella pneumoniae 37,6±3,7 5/1,7 - -

20 Streptococcus spp. 700±300 2/0,7 52,5±37,5 2/2,5%

21 Pseudomonas aeruginosa

4240±1028 5/1,7 - -

22 Proteus spp. 112,5±9,2 6/2,1 - -

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,001; ** p<0,05; *** p<0,01.

Микробиоценоз кожи при хронических дерматозах характеризовался

значительным разнообразием видового состава. В нем присутствовали

грамположительная, грамотрицательная флора следующих семейств:

Micrococcaceae (род Staphylococcus), Streptococcaceae, Enterobacteriaceae,

и т. д.

Однако следует отметить, что по сравнению с контрольной группой

видовой состав и численность микроорганизмов отличаются в сторону

смещения нормальных сочленов микробиоценоза и заменой их

представителями транзиторной флоры.

24

25

Как видно из таблицы, наиболее многочисленную группу как по

своему количественному значению, так и по видовому составу

представляют бактерии рода Staphylococcus spp. Степень обсемененности

данными микроорганизмами на пораженных участках кожи варьируется в

широких пределах и в среднем составляет 384,3±33,9 КОЕ/см2.

Средняя плотность колонизации данных участков кожи

коагулазонегативными стафилококками составила 174,8±21,4 КОЕ/см2.

Так, наиболее частый представитель нормофлоры S.epidermidis

высевался в количестве 239,1±43,5 КОЕ/см2 (в контроле – 47,9±4,5

КОЕ/см2). Следующими по значимости микроорганизмами в составе

микробиоценоза можно отметить S.hominis – 122,5±51,2 КОЕ/см2

(в контроле 10,76±1,4 КОЕ/см2), S. haemolyticus – 112,8±12,7 КОЕ/см2

(в контроле 7,8±2,13 КОЕ/см2), S.saprophyticus – 82,5±6,4 КОЕ/см2

(в контроле 11,6±2,9 КОЕ/см2).

Особого внимания заслуживает частота обнаружения S. aureus,

который становится основным сочленом микробиоценоза кожи при

хронических дерматозах. По полученным результатам плотность

колонизации золотистого стафилококка на пораженных участках кожи

составила 799,9±74,9 КОЕ/см2 (в контрольной группе – 44,3±9,4 КОЕ/см2,

p<0,01).

При этом в результате корреляционного анализа установлено, что

плотность колонизации пораженных участков кожи S. aureus находится в

прямой взаимосвязи с плотностью колонизации этих участков

S. epidermidis (r=0,65) p<0,05.

Частота встречаемости таких видов, как S. xylosis, S. sciuri,

S. intermedius, S. simulans, оказалась незначительной и составила от 0,3%

до 1,4% случаев, с плотностью колонизации 40,8±25,1 КОЕ/см2, 590±20,8

КОЕ/см2. В группе сравнения указанные микроорганизмы не выявлены.

25

26

Следует отметить высокую частоту встречаемости бактерий рода

Enterococcus, которые обнаружены в количестве 636,0±80,1 КОЕ/см2

(Enterococcus faecalis) и 830,8±430,0 КОЕ/см2 (Enterococcus faeceum) на

пораженных участках кожи.

На коже обследованных лиц обнаруживались также

дрожжеподобные грибы рода Candida, в частности Candida albicans

(19,2±2,2 КОЕ/см2), а также бактерии рода Streptococcus (700±300

КОЕ/см2) и Pseudomonas aeruginosa (4240±1028 КОЕ/см2).

Значительный интерес представлял анализ количественного и

качественного состояния микробиоценозов кожи интактных участков

(табл.2.3).

Таблица 2.3

Видовой состав микробиоценоза кожи у обследованных лиц на интактных участках кожи

№ п/п

Вид микроорганизма Среднее значение КОЕ/см2, М±m

Абс./% (n=288)

1 2 3 4

1 Staphylococcus aureus 133,6±30,6* 66/22,9

2 Staphylococcus epidermidis 97,2±12,3 114/39,6

3 Staphylococcus saprophyticus 82,2±27,1** 9/3,1

4 Staphylococcus haemolyticus 33,3±5,04*” 30/10,4

5 Staphylococcus warneri 164,5±38^ 12/4,2

6 Staphylococcus hominis 25±3,7*^ 11/3,8

7 Staphylococcus capitis 47,0±5,6*” 36/12,5

8 Staphylococcus sciuri 58,6±14,6 7/2,4

9 Staphylococcus intermedius 20,4±1,6” 5/1,7

10 Staphylococcus simulans 123±39,1# 5/1,7

11 Micrococcus luteus 61,8±9,4” 32/11,1

26

27

Окончание табл. 2.3

1 2 3 4

12 Candida albicans - -

13 Enterococcus faeceum 62,5±37,5^ 2/0,7

14 Enterococcus faecalis 260,4±204 12/4,2

15 Bacillus 12,3±3,9” 3/1,04

16 Acinetobacter 186±67,5# 4/1,4

17 Corynebacterium spp. 172,9±92 11/3,8

18 Klebsiella pneumoniae 12,3±1,45” 3/1,04

19 Streptococcus spp. 12,3±1,5 3/1,04

20 Pseudomonas aeruginosa - -

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,01; ** p<0,05; Различия с пораженными участками кожи достоверны: ^ p<0,1; # p<0,05; “p<0,01.

На интактных участках кожи также наблюдаются изменения в

составе микробиоценоза по сравнению с контрольной группой. Так, общая

обсемененность стафилококками составила 179,7±87,7 КОЕ/см2. Так

S.aureus обнаружен только в 22,9% случаев, что в два раза реже по

сравнению с пораженными участками кожи. Обсемененность кожи

золотистым стафилококком при этом составила 133,6±30,6 КОЕ/см2, по

сравнению с пораженными участками (799,9±74,9 КОЕ/см2) р<0,05. Такие

виды коагулазонегативных стафилококков, как S. epidermidis,

S.saprophyticus, S. haemolyticus также обнаруживались, но их

количественное значение составило 97,2±12,3 КОЕ/см2, 82,2±27,1 КОЕ/см2

и 33,3±5,04 КОЕ/см2 соответственно, что достоверно значительно меньше,

чем на пораженных участках кожи (S. epidermidis – 239,1±43,5 КОЕ/см2;

КОЕ/см2; S. haemolyticus – 112,8±12,7 КОЕ/см2), р<0,01.

Обращает на себя внимание степень колонизации энтерококками

интактных участков кожи, также как и пораженных участков. Плотность

27

28

их колонизации составляет для Enterococcus faeceum 62,5±37,5 КОЕ/см2,

для Enterococcus faecalis 260,4±204 КОЕ/см2.

Следует отметить, что на интактных участках плотность

обсемененности бактериями Corynebacterium spp. не отличается от

пораженных участков (172,9±92 КОЕ/см2 против 153,2±27,7 КОЕ/см2 на

пораженных участках, p>0,05). Бактерии рода Acinetobacter значительно

больше колонизировали интактные участки кожи, и их плотность

составила 186±67,5 КОЕ/см2 против 10,6±1,6 на пораженных участках

p<0,05. Дрожжеподобные грибы рода Candida, а также Pseudomonas

aeruginosa, Proteus на чистых участках кожи не были обнаружены.

Сравнительный анализ плотности колонизации стафилококками

пораженных и интактных участков кожи при хронических дерматозах

представлен на рис. 2.1.

Рис. 2.1. Плотность колонизации стафилококками пораженных

и интактных участков кожи (КОЕ/см2)

28

29

Как видно из рисунка, доминирующим участником микробиоценоза на

пораженных участках кожи при хронических дерматозах является

золотистый, эпидермальный и сапрофитный стафилококки. На интактных

участках плотность колонизации золотистого стафилококка снижается и

соответствует плотности колонизации остальных коагулазонегативных

стафилококков. Плотность колонизации кожи другими сочленами

микробиоценоза, такими как S. epidermidis и S. haemolyticus, на

пораженных участках выше, чем на здоровых. В обнаружении

сапрофитного и остальных видов Staphylococcus spp. как на пораженной

коже, так и на интактных участках и в группе сравнения существенных

различий нет (р>0,05). Обращает на себя внимание высокая общая

обсемененность пораженных участков кожи по сравнению с интактными

участками микроорганизмами рода Enterococcus, в частности Enterococcus

faeceum (830,8±430 КОЕ/см2 p<0,1). Однако по обсемененности

пораженных и интактных участков кожи бактериями Enterococcus faecalis,

достоверных отличий не обнаружено (p>0,05, рис. 2.2).

Рис. 2.2. Плотность колонизации микроорганизмами пораженных

и интактных участков кожи (КОЕ/см2)

29

30

В результате проведенных исследований было выделено

827 штаммов, причем с пораженной кожи было выделено 349 штаммов

(42,2%), относящихся к роду Staphylococcus, со здоровой кожи –

295 штаммов (35,6%.). Частота обнаружения золотистого стафилококка

составила – 193 штамма от общего числа. При этом степень

обсемененности именно золотистым стафилококком составила на

пораженных участках 36,3% на интактных – 22,3%.

На долю остальных видов, таких как Streptococcus spp.,

Corynobacterium spp., грамотрицательную микрофлору Acinetobacter spp. и

дрожжеподобные грибы Candida albicans на пораженной коже

приходилось от 0,7% до 5,5%. На интактных участках кожи обнаружены

Corynebacterium spp., Klebsiella pneumoniae, бактерии рода Bacillus, что

составило 3,8%.

Таким образом, состав микробиоты кожи претерпевает значительные

изменения и структурные перестройки в сторону увеличения числа

представителей транзиторной микрофлоры. Нормальные сочлены

вытесняются и заменяются дополнительными видами, преобладающими

среди которых являются бактерии рода стафилококков. Значительная доля

при этом принадлежит золотистому стафилококку. Отмечается рост

обсемененности не только пораженных участков кожи, но и видимых

здоровых участков. Такая тенденция сохраняется для всех изученных

хронических дерматозов.

2.2. Видовой и количественный состав микробиоты на пораженных

участках кожи при псориазе, экземе и атопическом дерматите

Одним из этапов исследования явилось проведение сравнительного

анализа микробиоценоза кожи у больных хроническими дерматозами в

зависимости от клинической формы заболеваний.

30

31

В результате проведенных исследований (табл. 2.4) установлено, что

при псориазе обсемененность стафилококками пораженного участка кожи

составляет 77,8%. При этом средняя плотность колонизации

стафилококками пораженных участков кожи при псориазе составляет

213,9±35,9 КОЕ/см2, а коагулазонегативными стафилококками – 162,8±36,7

КОЕ/см2.

Таблица 2.4 Обсемененность пораженных участков кожи при псориазе

№ п/п

Вид микроорганизма Среднее значение КОЕ/см2, М±m

Абс./% n=167 штамм

1 2 3 4

1 S. aureus 362,7±90,1** 30/17,9

2 S. epidermidis 288,6±85,6 40/23,9

3 S.saprophyticus 66,4±7,5** 11/6,58

2 S. haemolyticus 101,3±20,1** 22/13,17

5 S.warneri 57,4±6,5 10/5,98

6 S. hominis - -

7 S.capitis 8,1±1,6 8 /4,79

8 S. sciuri 16±6,7 3/1,79

9 S. simulans 7,1±1,5 3/1,79

10 S. intermedius 590±20,8 3/1,79

11 Micrococcus luteus 250,1±54,3 16/9,6

12 Candida albicans 28,8±3,5 6/3,6

13 Enterococcus faeceum 23,3±4,4 3/1,79

14 Enterococcus faecalis - -

15 Bacillus 102,5±6,3** 4/2,39

16 Acinetobacter - -

17 Corynebacterium 215±46,7** 8/4,79

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,1; ** p<0,05; *** p<0,01.

31

32

На пораженных участках кожи при псориазе выделено 167 штаммов

различных микроорганизмов, на долю стафилококков пришлось 130

штаммов, что составило 77,84%, из них на долю золотистого стафилококка

пришлось 23,1%.

Наибольшее значение как по частоте встречаемости, так и по

плотности колонизации пораженной кожи при псориазе имеют S. aureus –

362,7±90,1 КОЕ/см2, S. epidermidis – 288,6±85,6 КОЕ/см2, S. haemolyticus –

101,3±20,1 КОЕ/см2. Доля остальных условно-патогенных стафилококков в

составе микробиоценоза незначительна. Однако при псориазе отмечается

также обсемененность кожи Micrococcus luteus (250,1±54,3 КОЕ/см2) и

Corynebacterium (215±46,7 КОЕ/см2). При этом отсутствуют Acinetobacter

и некоторые виды Enterococcus.

В целом состояние микробиоценозов пораженных участков кожи

претерпевает дисбиотические изменения.

Следующую группу для обследования кожи в зависимости от

клинической формы дерматоза составили лица, страдающие экземой (табл.

2.5). Плотность колонизации пораженных участков кожи стафилококками

при экземе составила 517,9±57,6 КОЕ/см2, что достоверно выше по

сравнению с пораженной кожей при псориазе (p<0,05). Общее количество

штаммов, выделенных с экзематозных участков кожи, составило 244,

среди которых на бактерии рода Staphylococcus приходилось 176 штаммов

(72,1%), из них на S. aureus – 81 штамм (46,0%).

На долю коагулазонегативных стафилококков приходилось

95 штаммов (53,9%) со средней плотностью колонизации 136,0±14,7

КОЕ/см2.

32

33

Таблица 2.5

Обсемененность пораженных участков кожи при экземе

№ п/п

Вид микроорганизма Среднее значение КОЕ/см2, М±m

Абс. (n=244 штаммов)

1 2 3 4

1 S. aureus 968,4±103,1** 81

2 S. epidermidis 200,2±38,9** 32

3 S.saprophyticus 108,5±10,2** 13

2 S. haemolyticus 130,7±19,4** 28

5 S.warneri 151±1,6 7

6 S. hominis 122,5±51,2 4

7 S.capitis 24,6±3,5** 10

9 Staphylococcus xylosis 20,0 1

10 Micrococcus luteus 127,4±30,9 14

11 Candida albicans 20,2±2,3 6

12 Enterococcus faeceum 1222,5±608,7 8

13 Enterococcus faecalis 636,7±80,9** 6

14 Bacillus - -

15 Acinetobacter 10,8±2,2 8

16 Corynebacterium 91,5±5** 8

17 Klebsiella pneumoniae 37,6±3,7 5

18 Streptococcus 700 2

19 Pseudomonas aeruginosa 4240±1028 5

20 Proteus 112,5±9,3 6

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,1; ** p<0,05; *** p<0,01.

Однако, как видно из таблицы, средняя плотность колонизации пораженных участков кожи золотистым стафилококком при экземе составляет 968,4±103,1 КОЕ/см2, что в три раза достоверно выше по

33

34

сравнению с аналогичными участками кожи при псориазе (p<0,05). Для таких видов Staphylococcus spp., как S. epidermidis, S. saprophyticus, S. haemolyticus, сохраняется тенденция превалирования над остальными возможными сочленами микробиоценоза (плотность колонизации 200,2±38,9 КОЕ/см2; 108,5±10,2 КОЕ/см2; 130,7±19,4 КОЕ/см2 соответственно). Среди кокковой флоры также обнаружены бактерии Micrococcus luteus с общей обсемененностью 127,4±30,9 КОЕ/см2, что значительно меньше, чем при псориазе (p<0,1) и Streptococcus (700 КОЕ/см2), которые при псориазе не были выявлены.

Следует отметить высокую плотность колонизации участков кожи бактериями Enterococcus faeceum (1222,5±608,7 КОЕ/см2) и Enterococcus faecalis (636,7±80,9 КОЕ/см2). Среди грамотрицательных микроорганизмов наибольшей плотностью колонизации на пораженных участках кожи обладали Pseudomonas aeruginosa (4240±1028 КОЕ/см2), а также бактерии рода Proteus (112,5±9,3 КОЕ/см2). Данные о результатах исследования микрофлоры кожи на пораженных участках при атопическом дерматите представлены в таблице 2.6.

Таблица 2.6

Состав микрофлоры пораженных участков кожи при атопическом дерматите

№ п/п

Вид микроорганизма Среднее значение КОЕ/см2, М±m

Абс./% (n=51 штамм)

1 S. aureus 767,2±156,9** 16/31,3

2 S. epidermidis 177,7±19,6** 12/23,5

3 S.saprophyticus 59,7±3,0** 7/13,7

2 S. haemolyticus 77,4±11,7** 7/13,7

5 S.warneri 126,6±3,3 3/5,9

6 Candida albicans 10,2±2,13 5/9,8

7 Enterococcus faeceum 120 1/1,96

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,1; ** p<0,05; *** p<0,01.

34

35

При атопическом дерматите на пораженных участках кожи средняя

плотность колонизации кокковой флорой составила 349,9±72,3 КОЕ/см2

(88,23% случаев или 45 штаммов), при этом средняя обсемененность

только коагулазонегативными стафилококками составила 119±12,9

КОЕ/см2. На долю золотистого стафилококка от числа обнаруженных

штаммов приходилось 31,3% случаев с плотностью колонизации

767,2±156,9 КОЕ/см2, что также в два раза достоверно выше по сравнению

с псориазом (p<0,05). При атопическом дерматите, в отличие от экземы,

также обнаружены дрожжеподобные грибы рода Candida (10,2±2,13

КОЕ/см2) и единичный случай выявления бактерии Enterococcus faeceum с

плотностью колонизации 120 КОЕ/см2.

Полученные результаты о составе микрофлоры кожных покровов

при различных клинических формах свидетельствуют о значительном

отличии состава микрофлоры кожи пораженных участков от данных по

контрольной группе. Все рассмотренные в ходе работы хронические

дерматозы характеризуются увеличением не только доли представителей

кокковой флоры в составе микробиоценозов, но и высоким уровнем их

плотности колонизации. Для псориаза, экземы и атопического дерматита

отмечено возрастание значимости Staphylocccus aureus и других

Staphylocccus spp. Возможно, на фоне этих микроорганизмов создаются

условия для колонизации кожи при экземе и атопическом дерматите

энтерококками и синегнойной палочкой.

2.3. Видовой и количественный состав микрофлоры на интактных

участках кожи при различных клинических формах дерматоза

Забор исследуемого материала производился с поверхности кожи на

открытых участках тела, которые не были затронуты патологическим

35

36

процессом. Данные о микробиологическом состоянии видимых здоровых

участков кожи обработаны статистически и представлены в таблице 2.7.

Таблица 2.7

Состав микрофлоры здоровых участков кожи при псориазе, экземе,

атопическом дерматите, М±m, КОЕ/см2

№ п/п

Вид микроорганизма

Псориаз Экзема Атопический дерматит

Контроль

1 S. aureus 23,1±2,9 211,3±52,7 92,3±15,2 44,3±9,4

2 S. epidermidis 38,8±5,3 150,9±24,5 93,3±12,2 47,9±4,5

3 S.saprophyticus 19,0±1,9 161,3±25,2 - 11,6±2,9

4 S. haemolyticus 19,4±2,7 49,3±8,7 - 7,8±2,13

5 S.warneri 16,7±1,6 215±7,6 213,3±60,4 5,0

6 S. hominis - 26,6±4,3 17,5±2,5 10,76±1,4

7 S.capitis 57,4±6,1 27,9±4,3 67,2±14,9 8,75±1,3

8 S. sciuri 30±2,9 80±19,6 - -

9 S. intermedius 20,4±1,6 - - -

10 S. simulans - 123±39,2 - -

11 Micrococcus luteus 66,4±14,9 57,7±12,1 - -

12 Enterococcus faeceum

62,5±37,5 - - -

13 Enterococcus faecalis

22,5±3,2 47,5±9,8 1375±1125 43,3±15,4

14 Acinetobacter 186,3±67 - - -

15 Corynebacterium 7,4±1,6 310,8±150,9 - 39,4±3,45

16 Klebsiella pneumoniae

- 12,3±1,5 - -

17 Streptococcus 12,4±1,4 - - 52,5±37,5

Примечание: различия с контролем достоверны: * р<0,1; ** p<0,05; *** p<0,01.

Таким образом, с интактных участков кожи при псориазе было

выявлено 146 штаммов, среди которых стафилококки зарегистрированы в

71,9% случаев, при этом золотистый стафилококк высевался в 21,9%

случаев. При анализе видового состава стафилококков установлено, что на

36

37

долю эпидермального стафилококка приходилось 42,8% случаев, на долю

гемолитического – 15,2%. Следует отметить, что коагулазонегативные

штаммы стафилококков обнаружены в 78,1% случаев.

При экземе на чистой коже обнаружено 174 штамма различных

микроорганизмов, при этом стафилококки составили 81,6%, из них

золотистый стафилококк – 25,35%.

При атопическом дерматите стафилококки составили 91,1% всей

флоры от общего состава, в то время как на долю золотистого

стафилококка приходилось 18,6% случаев обнаружения.

Однако, как видно из таблицы 2.7, значения плотности колонизации

микроорганизмами при различных диагнозах широко варьировали. Так,

при псориазе общая обсемененность чистой кожи всеми видами

стафилококков составила 31,8±2,6 КОЕ/см2, причем только

коагулазонегативными – 34,1±3,14 КОЕ/см2. На чистой коже также

обнаруживали золотистого стафилококка, однако плотность его

колонизации значительно меньше (23,1±2,9 КОЕ/см2), чем при экземе

(211,3±52,7 КОЕ/см2, p<0,01) и атопическом дерматите (92,3±15,2 КОЕ/см2,

p<0,01). Значимые отличия обнаружены для плотности колонизации

S. epidermidis при экземе (150,9±24,5 КОЕ/см2) по сравнению с псориазом

(38,8±5,3 КОЕ/см2) и атопическим дерматитом (93,3±12,2 КОЕ/см2).

Высокий уровень обсемененности чистых участков кожи при экземе

зарегистрирован для S.saprophyticus (161,3±25,2 КОЕ/см2) по сравнению с

данными по псориазу. S. haemolyticus показал среднюю обсемененность

при псориазе и экземе – 19,4±2,7 КОЕ/см2 и 49,3±8,7 КОЕ/см2

соответственно. На интактных участках при атопическом дерматите

данный микроорганизм не обнаружен. Для S.warneri обнаружены

существенные отличия по плотности колонизации при экземе и

атопическом дерматите (215±7,6 КОЕ/см2, 213,3±60,4 КОЕ/см2) по

37

38

сравнению с псориазом (16,7±1,6 КОЕ/см2), p<0,01. Значимых отличий по

обсемененности Micrococcus luteus при различных дерматозах не

выявлено.

Обращает на себя внимание наличие микроорганизмов Enterococcus

faeceum при псориазе на чистых участках кожи и их отсутствие при экземе

и атопическом дерматите. Однако при двух последних обнаружено

наличие Enterococcus faecalis (47,5±9,8 КОЕ/см2 и 1375±1125 КОЕ/см2

соответственно).

Среди представителей грамотрицательной микрофлоры следует

отметить наличие бактерий Acinetobacter (186,3±67 КОЕ/см2),

обнаруженных только при псориазе. Здоровые участки кожи при экземе

были колонизированы в основном стафилококками (132,4±16,8 КОЕ/см2),

причем обсемененность коагулазонегативными стафилококками составила

105,8±13,1 КОЕ/см2. При атопическом дерматите средняя степень

колонизации стафилококками на здоровых участках кожи составила

100,14±12,6 КОЕ/см2, а только коагулазонегативными стафилококками –

101,9±15,1 КОЕ/см2.

2.4. Бактериальная обсемененность при сравнении

различных биотопов кожи

К важнейшим характеристикам бактериальной популяции

принадлежит не только качественный, но и количественный критерий: это

численность и постоянное присутствие микробов в биоценозе, т. е. уровень

контаминации исследуемого биотопа.

Сравнительный анализ количественного состава микробиоты

здоровых и пораженных участков кожи у людей, страдающих экземой,

выявил значительные отличия данного критерия.

38

39

Доминирующее положение в микробиоценозе кожи при экземе

занимали стафилококки, составляющие самую многочисленную группу

грамположительных микробов, как по частоте встречаемости, так и по

плотности колонизации.

Следует отметить, что наиболее часто с кожи обследованных

высевался S. aureus, при этом в максимальных количествах были

колонизированы пораженные участки – 936,04± 295,25 КОЕ/см² (р<0,01),

на здоровом участке этот показатель составил 601,15± 171,45 КОЕ/см²

(р<0,001), в контрольной группе – 54,62± 3,14 КОЕ/см² (рис. 2.3).

Рис. 2.3. Колонизация кожи обследованных групп людей грамположительными

бактериями

Показатель обсемененности (ПО) S. epidermidis при экземе составил

301,30± 107,57 КОЕ/см² (р<0,01), на интактном участке – 221,73± 89,80

КОЕ/см² (р >0,05), в контрольной группе – 49,58± 2,69 КОЕ/см².

39

40

Показатель обсемененности S. haemolyticus на пораженном участке был в

2,5 раза больше, чем на здоровом, – 297,05± 65,38 КОЕ/см² (р<0,001), в

контрольной группе – 43,65± 1,34 КОЕ/см².

Повышенный ПО был установлен на экзематозных участках у видов

S. capitis и S. saprophyticus – 273,47± 58,14 КОЕ/см² (р<0,001) и

198,60± 27,46 КОЕ/см² (р <0,001) соответственно, в контрольной группе –

49,95± 1,34 КОЕ/см² и 39,19± 0,47 КОЕ/см² соответственно (рис. 2.3).

Аналогичные изменения были выявлены среди бактерий других

видов. Так, M. luteus в максимальных количествах встречался на

пораженном участке – 99,93± 20,80 КОЕ/см², в контроле данный вид не

обнаружен.

ПО S. pyogenis и S. mitis у больных на пораженном участке был в 1,5

раза больше, чем на здоровом участке кожи, и составил 104,96 ± 25,96

КОЕ/см² (р<0,05), 110,82± 26,17 КОЕ/см² соответственно. В контрольной

группе встречался только один вид S. pyogenis (48,76± 1,89 КОЕ/см²).

Интенсивность колонизации видов E. faecalis и E. faeceum также

увеличивалась на пораженных участках в 1,7 раза по сравнению с

интактными участками кожи (121,62± 19,98 КОЕ/см² (р<0,001) и

102,82± 18,25 КОЕ/см² соответственно). В контроле был обнаружен только

E. faecalis, ПО которого составил 41,96± 3,94 КОЕ/см² (рис. 2.3).

Достоверные отличия были получены и для показателя

обсемененности C. xerosis. На здоровом участке кожи интенсивность

колонизации C. xerosis составила 45,98± 1,34 КОЕ/см² (р<0,05), на

пораженном – 41,35± 2,87 КОЕ/см² (р<0,01), в контрольной группе –

54,87± 4,07 КОЕ/см².

Таким образом, у людей, страдающих экземой, на пораженных

участках кожи наблюдалось увеличение показателя обсемененности

микроорганизмами грамположительной флоры.

40

41

Интенсивность колонизации грамотрицательными микроорганизмами

A. calcoaceticus на пораженном участке составила 76,49± 19,19 КОЕ/см², на

здоровом – 52,07± 4,51 КОЕ/см², в контроле данный вид не встречался.

Сравнительный анализ количественного состава микробиоценоза

кожи у больных экземой на различных биотопах показал, что наиболее

обильным он оказался на поверхности руки как здоровой, так и

пораженной экзематозными очагами (рис. 2.4).

Так, ПО стафилококками у больных на пораженных участках кожи

руки составил 1062,30± 110,26 КОЕ/см², на здоровом участке –

782,77± 82,15 КОЕ/см² при р < 0,05; на пораженной поверхности кожи

ноги обсемененность была 835,52± 95,64 КОЕ/см², на здоровом участке –

590,25± 66,97 КОЕ/см² при р < 0,05; на экзематозном участке кожи лица –

568,19± 52,42 КОЕ/см², на здоровом участке – 425,14± 45,12 КОЕ/см² при

р < 0,05; на закрытом участке пораженной кожи – поверхности живота –

показатель составил 371,84± 26,56 КОЕ/см², а на здоровом – 300,71± 23,12

КОЕ/см² (р < 0,05).

ПО стрептококками у больных на тех же пораженных участках был

210,54± 38,15 КОЕ/см², 144,68± 21,17 КОЕ/см², 95,25± 14,23 КОЕ/см²,

75,32± 14,25 КОЕ/см² соответственно, а на здоровых –

110,89± 24,32 КОЕ/см², 85,64± 19,43 КОЕ/см², 55,14± 11,68 КОЕ/см²,

42,33± 3,49 КОЕ/см² соответственно (р <0,05) (рис.2.4).

При рассмотрении ПО коринеформных бактерий на экзематозных и

здоровых участках различных биотопов достоверных отличий не было

выявлено (60,23± 15,24 КОЕ/см² и 52,29± 12,65 КОЕ/см²; 49,14± 7,15

КОЕ/см² и 46,54± 2,75 КОЕ/см²; 35,02± 4,26 КОЕ/см² и 31,96± 1,56

КОЕ/см²; 32,28± 2,98 КОЕ/см² и 26,47± 0,46 КОЕ/см² соответственно при

р >0,05).

41

42

а

б

Рис. 2.4. Микробиота биотопов пораженных (а) и здоровых

(б) участков кожи при экземе

42

43

ПО энтерококками у больных на экзематозных участках кожи руки

составил 198,36± 37,85 КОЕ/см², на здоровом участке – 93,28± 21,42

КОЕ/см² при р<0,01; на пораженной поверхности кожи ноги

обсемененность была 144,22± 32,25 КОЕ/см², на здоровом участке –

62,85± 17,29 КОЕ/см² при р < 0,05; на экзематозном участке кожи лица –

92,16± 12,26 КОЕ/см², на здоровом участке – 60,47± 10,02 КОЕ/см² при

р<0,05; на закрытом участке пораженной кожи (поверхность живота)

показатель составил 49,87± 1,98 КОЕ/см², а на здоровом – 45,19± 1,03

КОЕ/см² (р < 0,05).

При изучении показателя обсемененности грамотрицательных

ацинетобактерий было установлено их наличие только на двух биотопах

пораженной кожи: руке (89,32± 16,89 КОЕ/см²) и ноге (74,23± 13,19

КОЕ/см²) (рис. 2.4).

Таким образом, при рассмотрении средних показателей

обсемененности здоровых и пораженных участков кожи при экземе

бактериями различных родов обнаружены достоверные отличия плотности

их сообществ в различных биотопах. Наибольшая плотность микробных

популяций наблюдалась на поверхности кожи руки как здоровой, так и

пораженной экзематозными очагами.

Доминирующее положение в микробиоценозе кожи при экземе

занимали стафилококки, составляющие самую многочисленную группу

грамположительных микробов как по частоте встречаемости, так и по

плотности колонизации.

43

44

Глава 3. КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА МИКРОБИОТЫ КОЖИ

В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ВНЕШНИХ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ

ФАКТОРОВ

В последние годы профессиональная патология выходит за пределы

промышленного производства, приобретая широкое экологическое

значение (Федоров и др., 2001, Онищенко, 2003). Увеличение техногенной

нагрузки на организм человека, повышение интенсивности антропогенных

факторов при неблагоприятной, подчас аварийной экологической

обстановке, обусловливают проявление неблагоприятных воздействий

промышленно-экологической среды на организм человека, ухудшение

состояния здоровья работающих (Шляхецкий, Петрук, 2000; Измеров,

2002).

Наибольшую остроту эта проблема приобретает в тех отраслях

промышленности, где уровни воздействующих вредных факторов

продолжают оставаться высокими. В значительной мере это относится к

производству сельскохозяйственных кормов (Рыжков, 2000). Ведущим

неблагоприятным фактором комбикормового завода является зерновая и

мучная пыль, содержащая микроскопические грибы (Кучук, Россинская,

Басанец, 1999; Ползик и др., 1999). К основным критериям вредности

таких воздействий относится развитие инфекционных заболеваний

(Артамонова, Шаталов, 1988). Установлено, что зерновая и мучная пыль

представляют серьезную опасность в плане возможного развития

патологий кожных покровов, верхних дыхательных путей, бронхов и

легких (Дадиани и др., 1992; Зайкиров и др., 1992; Пинигина и др., 1998).

Однако до настоящего момента отсутствуют работы, содержащие оценку

микробиоценоза кожи у людей на таких предприятиях, в то время как

известно важное значение нормальной микрофлоры кожи в поддержании

гомеостаза организма (Иванов, 1989; Крамарь, 2003; Ришко, 2004).

44

45

3.1. Действие неблагоприятных факторов производственной среды

Генетические факторы, качество жизни и условия среды обитания

являются показателями, определяющими здоровье человека. Вклад

каждого из них в этиологию развития заболеваний очень изменчив и

зависит от анализируемого вида заболеваний, состояния здравоохранения

и социально-экономического статуса общества. По мнению А.С.

Васильева, Б.А. Баландовича (1999), Г.Г. Онищенко (2003), в среднем до

20% всех заболеваний обусловлено воздействием факторов окружающей

среды.

Критериями оценки отрицательного влияния факторов среды на

организм человека являются интегральные показатели здоровья,

заболеваемости, установления причинно-следственных связей между

действием факторов и реакцией организма (Онищенко, 1999;

Гильденскиольд, Винокур, 2002).

Негативные воздействия окружающей среды проявляются в

ухудшении демографических показателей, снижении функциональных

возможностей и защитных сил организма, росте заболеваемости различных

групп населения (Капцов, Панкова, 2001; Беляев, Халитов, 1998; Потапов,

Гильденскиольд, Винокур, 2002).

По данным Н.Ф. Измерова (2002), в формировании и сохранении

здоровья населения как настоящего, так и последующих поколений играют

важную роль факторы производственной среды. Они являются частью

экологической системы для работающего населения и вносят за счет

профессиональных заболеваний существенный вклад в снижение

продолжительности жизни (Нехорошев, Захаров, Шибаев, 2003).

К вредным производственным факторам относят такие воздействия,

которые в определенных условиях приводят к заболеванию работающих

или снижению их трудоспособности. Заболевания, возникающие под

45

46

влиянием вредных производственных факторов, рассматривают как

профессиональные заболевания (Муравей, 2002). Профессиональные

болезни являются прямым отражением неблагополучных условий труда

(Селисский, 1992; Ретнев, Шляхецкий, Петрук, 2000).

Все вредные производственные факторы в соответствии с ГОСТ

12.0.003-74 подразделяют на физические, химические, биологические и

психофизиологические (Белова, 1999).

Химические факторы представляют собой вредные для организма

человека вещества в различных состояниях. Биологические факторы – это

воздействие различных микроорганизмов, а также растений и животных.

(Артамонова, Шаталов, 1988; Измеров, 2002).

Технологический процесс производства муки, состоящий из очистки,

размола, упаковки зерна и складирования готовой продукции, может

вызывать нарушения здоровья работающего населения (Рыжков, 2000;

Захаров, 2001). На производстве применяются комплексы

технологического оборудования, которые являются источником

производственных факторов риска (Глушко, 2000).

Одними из главных неблагоприятных факторов на комбикормовом

заводе считаются зерновая и мучная пыли. Данные воздействия являются

основной причиной профессиональных заболеваний, среди которых

большой удельный вес занимают пылевые заболевания легких, желудочно-

кишечного тракта и другие (Гладкова, 1990; Носов, 1994; Величковский,

1989). Следует учесть, что вредные факторы труда могут не только

являться причиной формирования профессиональных заболеваний, но и

быть патогенетическим механизмом развития и прогрессирования общих

патологий, не относящихся к категории профессиональных (Измеров,

2002).

46

47

Одновременно с неблагоприятными физическими факторами на

данном производстве оказывают вредное воздействие и химические

вещества, обладающие токсическим действием. Химические вещества в

виде органических и неорганических соединений, сложных композиций, с

которыми контактируют работающие на производстве, обладают

сенсибилизирующими свойствами и вызывают профессиональные

аллергические заболевания. Большую группу аллергенов представляют

антибиотики немедицинского назначения – фитобактеримицин,

бластицидин и другие, используемые для защиты растений от

бактериальных, грибковых и вирусных болезней (Измеров, 2002).

Основные пути поступления в организм этих веществ – кожа, органы

дыхания, желудочно-кишечный тракт (Артамонова, Шаталов, 1988;

Yshihera, Matsushiro, 1986). Токсические вещества приводят к ухудшению

соматического здоровья в форме острых и хронических заболеваний,

ослаблению иммунитета, поражению кожи, наружных и внутренних

слизистых оболочек (Измеров, Лебедева, 1993). Установлен

профессиональный характер сосудистых заболеваний кожи, вызываемых

химическими раздражителями (Федоров и др., 2001).

Известно, что нерациональное применение антибиотиков приводит к

угнетению роста или даже полному уничтожению микробов,

составляющих основу нормальной микрофлоры. Это приводит к

ослаблению защитных механизмов организма (Лещенко, 1973).

Таким образом, данные литературы свидетельствуют о том, что

рабочие мукомольного производства подвергаются воздействию

комплекса факторов, оказывающих на организм негативное влияние,

способствуя развитию профессиональной патологии.

Ведущим неблагоприятным фактором производства

сельскохозяйственных кормов, влияющим на состояние здоровья рабочих,

47

48

является зерновая и мучная пыль. Почти все процессы и операции на

предприятии сопровождаются образованием и выделением зерновой и

мучной пыли. Воздействию подвергаются значительная часть работающих

(Глушко, 2000).

Основным источником поступления пыли в воздух рабочей зоны

является технологическое оборудование. При плохой герметизации

оборудования и неэффективной работе систем аспирации количества

пылевыделений могут достигать существенных значений – до 10 кг/ч

(Штокман, 1983; Доброхотский, 2004).

По мнению зарубежных авторов зерновая и мучная пыль является

малотоксичной. J.L. Konzen (1958) установил, что содержание свободной

двуокиси кремния в пищевых продуктах составляет в среднем 2,4 – 2,8 %.

Однако по данным отечественных ученых С.А. Степанова (1969), Т.А.

Кочетковой (1976), в минеральной фракции зерновой и мучной пыли

содержится в среднем от 2,0 % до 9,5 % свободной двуокиси кремния.

Пыль представляет собой аэродисперсную систему (аэрозоль), в

которой дисперсионной средой является воздух, а дисперсной фазой –

твердые пылевые частицы. (Васильев, Баландович, 1999). Зерновая и

мучная пыль по происхождению относятся к органическим аэрозолям.

При рассмотрении вопроса о влиянии зерновой и мучной пыли на

организм работающих лиц наибольшее гигиеническое значение имеют

следующие физико-химические свойства пыли: химический состав,

дисперсный состав, растворимость (Величковский, 1992; 1994; 1999).

Токсическое действие пыли в большей степени зависит от химической

природы пыли и ее концентрации в воздухе рабочей зоны (Жилов, 1995).

Химический состав пыли определяет характер действия на организм.

Зерновая и мучная пыль осуществляет фиброгенное, аллергенное

воздействие на организм (Кислицина, Привалова, Шарапова, 1993;

48

49

Калтаев, Капцов, 2000). Пыль, содержащая двуокись кремния, может

способствовать развитию преимущественно заболеваний верхних

дыхательных путей (Lippman, Albert, 1989; Winterbhalter, 1983).

Производственная пыль может быть причиной возникновения не

только профессиональных пылевых заболеваний легких, но причиной

поражения глаз, кожи, а также острых и хронических отравлений (Perrin-

Fayolle M., 1995).

Большое гигиеническое значение имеет дисперсность пыли.

Известно, что большая часть вдыхаемой пыли задерживается на коже,

слизистой оболочке носа, глотки, трахеи и бронхов и только

незначительная часть (примерно 10%) достигает бронхиол и альвеол, где

подвергается фагоцитозу (Величковский, 1989). В настоящее время

достаточно глубоко и подробно изучен патогенез влияния пыли на

организм работающего (Намазбаева, Джангозина, Меркурьева, 1993;

Курило, 1999).

При продолжительном воздействии зерновой пыли возникают

иммунные нарушения, и развивается диффузное поражение альвеолярных

и интерстициальных структур легких аллергического генезиса с

формированием гранулем и развитием фиброза (Чучалин, 1985; Ywata,

Colby, Hitachi, 1994). Таким заболеванием является экзогенный альвеолит,

который известен под различными названиями: зерновая лихорадка или

лихорадка молотильщика, гиперчувствительный пневмонит,

ингаляционная пневмония, легкое фермера и другие (Васильева, 1995;

Konig, Baur, Albrecht, 1985; Perring-Fayolle, 1995).

Действие на организм зерновой и мучной пыли значительно

усиливается в условиях нестандартного микроклимата, например, в

сочетании с физической нагрузкой (Зингер и др., 1979). По мнению Б.А.

Кацнельсона (1994), такие «внепылевые» факторы, как физическая

49

50

нагрузка и неблагоприятный микроклимат, играют потенцирующую роль в

развитии патологических процессов в легких и бронхах. Кроме того,

физическая работа в условиях нестандартного микроклимата

сопровождается усилием легочной вентиляции, что в свою очередь

приводит к увеличению общего количества пыли, попадающей в организм.

Характер патологии в легких под влиянием зерновой и мучной пыли

чаще всего сводится к развитию бронхитов, эмфиземы и диффузного

пневмосклероза различной выраженности, причиной которого является,как

наличие свободной двуокиси кремния, так и грибковой и бактериальной

флоры, вызывающей вторичный воспалительный процесс (Шмелев, 1998;

Монаенкова, 1996; Скепьян, 1999; Гамиля, 2000).

Постоянным компонентом зерновой и мучной пыли являются

плесневые грибы и бактерии. Содержание их колеблется в зависимости от

микроклиматических условий, влажности зерна, срока и способа

обработки (Потапов, Литвиненко, Бухарбаева, 1979; Соболев, 1997).

Зерновая и мучная пыль наиболее часто содержит грибы рода Aspergillus,

Peniсillium (Львова, Шульгина, Шатилова, 1978; Сенкевич, Васильева,

1982; Iohri, Sadagoran, 1989; Mahoney, Rodriguez, 1996). Поражение зерна

во время хранения отдельными видами аспергиллов сопровождается

снижением его качества, приобретением токсичности (Билай, 1978).

Токсины плесневых грибов оказывают патогенное действие практически

на все органы и системы организма человека (Bukovjan, Hallmannova,

Karpenko, 1992; Samson, 1996).

Таким образом, в условиях трудовой деятельности на

комбикормовом производстве рабочие подвергаются комплексному

воздействию различного рода вредных промышленно-экологических

факторов с поступлением в организм через кожу, слизистые оболочки,

верхние дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт. Ведущим

50

51

неблагоприятным фактором производства сельскохозяйственных кормов

является зерновая и мучная пыль, содержащая плесневые грибы, в

частности рода Aspergillus. Данные микромицеты являются продуцентами

токсинов, обладающих широким спектром воздействия на макроорганизм.

Помимо этого, создавая преморбидный фон, они способствуют

проявлению вирулентных свойств условно-патогенных микроорганизмов.

Однако, несмотря на всю важность данной проблемы, она остается

малоизученной.

При воздействии вредных факторов окружающей среды происходит

уменьшение количества нормальных симбионтов и рост условно-

патогенных микроорганизмов, которые способны проявлять свою

патогенность при снижении резистентности организма (Сытник, 1989;

Акрут, 2003). В связи с этим в последние годы наблюдается нарастание

удельного веса заболеваний, вызванных такими микроорганизмами, в

частности плесневыми грибами рода Aspergillus, продуцирующими

токсические метаболиты – афлатоксины (Кириленко, Егорова, 1985; Moser

et al., 1994). Они оказывают тератогенное, канцерогенное и гепатотропное

воздействие (Крыстев, Васильев, Борисов, 1984; Потатуркина-Нестерова,

Гладинец, 2003; Bolton, De Matos, Groopman, 1991; Creppy, Derheimer,

1991). Микромицеты являются этиологическими агентами микотических

поражений организма при иммунодефицитах (Клясова, Петрова, Галстян,

2003). Однако в литературе отсутствуют данные о роли микромицетов в

формировании микробиоценоза кожи человека, о влиянии их на бактерии-

ассоцианты.

51

52

3.2. Микросимбиоценоз кожи людей в условиях воздействия

зерновой пыли

Исследованию подвергли 122 рабочих мукомольного производства.

У 104 человек (85,25%) обнаружены высокие показатели обсемененности

кожных покровов грибами рода Aspergillus. В контрольной группе этот

показатель не превышал 5% (4 человека) (рис. 3.1, а).

Изучение контаминации кожи микромицетами в зависимости от пола

показало, что аспергиллы были выявлены у 66 (94,29%) женщин из

70 обследованных и у 38 (73,08%) мужчин из 52 обследованных

(рис. 3.1, б).

Анализ видового состава грибов рода Aspergillus у работающих на

предприятии показал наличие следующих видов: Aspergillus flavus,

Aspergillus niger, Aspergillus candidus, Aspergillus terreus. У лиц

контрольной группы выявлен только один вид – Aspergillus flavus.

Идентификация вышеперечисленных видов аспергилл проводилась

на основании комплекса культуральных и морфологических признаков.

При микроскопии у вида Aspergillus flavus колонии были от оливкового до

зеленого цвета, конидии – шаровидные, гладкие – 3-6 мкм, шероховатые

конидиеносцы, гифы бесцветные.

Для вида Аspergillus candidus отмечались колонии от чисто белого до

бледно-желтого, конидиеносцы гладкие, конидии шаровидные – 3–4 мкм.

У грибов Aspergillus niger характерными были колонии от белого до

черного оттенка, обратная сторона желтая, конидии шаровидные и

шероховатые – 4–5 мкм. Aspergillus terreus характеризовался колониями от

бежевого до темно-желтого, конидиеносцы гладкие, конидии шаровидные,

мелкие – 2–2,5мкм.

52

53

а

б

Рис. 3.1. Встречаемость грибов рода Aspergillus среди рабочих комбикормового завода

и в контрольной группе (а), в зависимости от пола (б)

53

54

Проведенные исследования показали, что микофлора сотрудников

завода наиболее часто была представлена такими микромицетами, как

А. flavus и А. niger (табл. 3.1).

В монокультуре у рабочих чаще всего высевали А. flavus –

у 97 обследованных (93,27%), А. niger – у 50 обследованных (48,08%).

А. terreus встречался всего у 30 сотрудников (11,54%). В ассоциациях на

коже рабочих наиболее часто обнаруживали А. flavus с видом А. niger –

у 45 рабочих (36,89%). Сочетание А. flavus+А. niger+А. terreus встречалось

только у 7 сотрудников (5,74 %) (табл. 3.1).

Таблица 3.1

Микромицеты рода Aspergillus в кожном микробиоценозе рабочих комбикормового завода

Виды микромицетов

Количество носителей

Абсолютное число Процент (%)

Aspergillus flavus 97 93,27

Aspergillus niger 50 48,08

Aspergilus candidus 30 28,85

Aspergillus terreus 12 11,54

А.flavus+А.niger 45 36,89

А.flavus+А.candidus 29 23,77

А.flavus+А.terreus 14 11,48

А.flavus+А.niger+ А.сandidus 9 7,38

А.flavus+А.niger+А.terreus 7 5,74

Таким образом, установлено, что наиболее часто кожные покровы

рабочих колонизируют микроскопические грибы вида A. flavus. Выявлено,

что показатель контаминации кожи этими микромицетами в конце

рабочего дня был значительно выше, чем до начала смены.

54

55

Так, грибы A. flavus встречались до начала работы у 68 человек

(65,38%), а в конце рабочего дня – у 97 обследованных (93,27%).

В контрольной группе были выявлены у 5% (4 человека). Виды A. niger,

А. candidus в начале рабочей смены были выявлены в 25,0% (26 рабочих) и

15,38% (16 рабочих) случаев соответственно. В конце смены показатель

частоты встречаемости увеличился почти вдвое и составил – 48,08%

(50 человек) и 28,85% (30 человек) соответственно. Вид А. terreus не был

обнаружен в начале трудового дня, однако в конце смены он встречался у

12 рабочих (11,54%) (рис. 3.2, а). В контрольной группе данные виды не

были обнаружены.

В ходе исследования был изучен количественный состав

микромицетов на различных биотопах кожи рабочих в начале и в конце

трудовой смены: открытых (ладонь, лоб) и закрытых (поверхность

живота). Результаты количественной оценки грибов представлены на

рисунке 3.2, б.

Сравнительное изучение микофлоры различных биотопов кожи

показало, что в начале трудового дня ПО микромицетами на поверхности

ладони, лба, живота был практически одинаковым и составлял в среднем

44,01±3,79 КОЕ/см², 43,22±3,43 КОЕ/см² и 36,93±0,86 КОЕ/см²

соответственно при р<0,05. В конце рабочего дня интенсивность

колонизации плесневых грибов значительно возросла. Так, ПО на

поверхности ладони увеличился в 4 раза (167,57±5,59 КОЕ/см2 при р<0,05),

на коже лба – в 2,7 раза (118,26±5,24 КОЕ/см2 при р<0,05), на животе

аналогичные показатели составили 57,63±2,75 КОЕ/см2 при р<0,05

(рис.3.2, б). В контрольной группе ПО на поверхности ладони и лба был

одинаковым и составил 40,16±4,46 КОЕ/см2 на коже живота – 38,38±2,75

КОЕ/см2 (рис. 3.2, б). Анализ степени колонизации микроорганизмами

показал, что интенсивность их рассеивания тесно связана с постоянным

55

56

контактом кожи с окружающей средой, со степенью ее загрязнения,

поэтому наиболее обсемененным биотопом кожи является открытый

участок – поверхность ладони.

а

б

Рис. 3.2. Частота встречаемости и видовой состав микромицетов рода Aspergillus (а)

и контаминация отдельных участков кожи рабочих грибами

Aspergillus flavus (б)

56

57

Изучение контаминированности грибами A. flavus рабочих

комбикормового завода (КЗ) с различным стажем работы позволило

разделить всех обследованных лиц на 4 группы. Первую группу составили

работающие на заводе менее 1 года – 10 человек (8,20%), вторую группу от

1 года до 5 лет – 17 человек (13,93%), третью группу от 5 до 10 лет –

23 человека (18,85%) и четвертую группу со стажем работы 10–20 лет и

более – 72 человека (59,02%). Распределение обследованных по стажу

работы на КЗ представлены на рисунке 3.3, а.

Результаты выделения микромицетов у рабочих в зависимости от

стажа работы показали, что в 1 группе инфицированность грибами

составила 70% (7 человек), во 2 группе – 76,47% (13 обследованных),

в 3 группе – 82,61% (19 человек) и в 4 группе – 90,3% (65 человек)

(рис. 3.3, б). Таким образом, данные свидетельствуют о том, что частота

встречаемости микромицетов возрастает в зависимости от стажа работы на

заводе.

Изучение контаминированности грибами рода Aspergillus

сотрудников КЗ по профессиям позволило разделить всех обследованных

на 3 группы. Первую группу составили рабочие, имеющие постоянный

контакт с зерном (транспортировщики, зерносушильщики, лаборанты,

пекари, дробильщики, грузчики) – 58 человек (47,54%); во вторую группу

вошли рабочие, не имеющие постоянного контакта с зерном (операторы,

плотники, электрики, водители, мастера цехов, слесари, токари, механики,

мастера-наладчики) – 53 человека (43,44%); в третью группу – рабочие, не

контактирующие непосредственно с зерном (бухгалтер, инженер,

составитель, уборщица) – 11 обследованных (9,02%). Результаты

выделения микромицетов у рабочих в зависимости от продолжительности

контакта с зерном и продуктами его переработки показали, что в 1-й

группе инфицированность микромицетами значительно выше, чем в

57

58

других группах. Так, А. flavus был обнаружен в 1-й группе у 87,93%

(51 человек), во 2-й – 75,47% (40 человек) и в 3-й – 18,18% (2 человека).

Вид А.candidus был выделен только в 1-й и 2-й группах у 20 (34,48%) и у

10 (18,87%) рабочих соответственно. У рабочих, не контактирующих

непосредственно с зерном, данный вид не обнаружен. Вид А. terreus

выделен был только в группе, где наблюдается постоянный контакт с

зерном (табл. 3.2). а

б

Рис. 3.3. Распределение рабочих по стажу работы (а) и контаминации грибами

Aspergillus flavus кожи сотрудников в зависимости от стажа работы на комбикормовом

заводе (б)

58

59

Таблица 3.2

Частота встречаемости грибов рода Aspergillus у рабочих в зависимости

от продолжительности контакта с зерном

Микромицеты

Рабочие, имеющие

постоянный контакт с

зерном

Рабочие, не имеющие

постоянного контакта

с зерном

Рабочие, не

контактирующие

непосредственно с

зерном

абс. процент абс. процент абс. процент

А. flavus 51 87,93 40 75,47 2 18,18

А. niger 35 60,34 14 26,42 1 9,09

А. candidus 20 34,48 10 18,87 - -

А. terreus 12 20,69 - - - -

Наряду с грибами рода Aspergillus на коже рабочих комбикормового

завода (КЗ) были обнаружены грибы рода Candida: Candida albicans и

Candida kefyr. При анализе частоты встречаемости дрожжеподобных

микромицетов, колонизирующих кожу сотрудников завода, обнаружено,

что они занимают ведущее место в микрофлоре кожи. Грибами рода

Candida были колонизированы 64 рабочих (52,46%), в контрольной группе

– 13 человек (16,25%) (рис. 3.4, а). Анализ контаминированности грибами

Candida albicans отдельных биотопов кожи у лиц обследованных групп

людей показал, что наибольшее количество грибов у рабочих высевалось с

поверхности ладони – 141,68±7,44 КОЕ/см² (рис.3.4, б).

На коже лба данный показатель составил 107,68±6,06 КОЕ/см², тогда

как с поверхности живота высевалось минимальное количество

дрожжеподобных грибов – 62,17±3,23 КОЕ/см². В контрольной группе ПО

микромицетов на исследуемых биотопах составил 45,3±3,84 КОЕ/см²,

43,81±4,41КОЕ/см² и 42,57±3,80 КОЕ/см² соответственно при р<0,05 (рис.

3.4, б).

59

60

а

б

Рис.3.4. Встречаемость грибов рода Candida среди рабочих и в контрольной группе (а)

и контаминация отдельных участков кожи обследованных групп людей грибами

Candida albicans (б)

Установлено, что показатель контаминации Candida kefyr в конце

рабочего дня у рабочих был значительно выше, чем до начала смены (рис.

3.5).

60

61

Рис.3.5. Контаминация отдельных участков кожи рабочих комбикормового завода

грибами Candida kefyr

Наибольшее количество микроорганизмов высевалось с поверхности

ладони – 100,8±9,71 КОЕ/см2, тогда как на поверхности лба и живота

аналогичные показатели составили 83,26±8,95 КОЕ/см2 и 57,12±4,67

КОЕ/см2 соответственно (р<0,05). В начале трудового дня ПО

микромицетами на данных участках был практически одинаковым и

составлял в среднем 38,82±2,97 КОЕ/см², 36,82±1,12 КОЕ/см² и 36,82±1,12

КОЕ/см² соответственно (р<0,05). У лиц контрольной группы грибы

Candida kefyr не выявлены.

С целью изучения источника контаминации поверхности кожи

микроскопическими грибами было проведено микологическое

исследование проб зерна, с которыми контактировали рабочие.

Исследования выявили в 67,03% изученных проб те же виды

микромицетов, что и на коже, а именно A. flavus, A. niger, A. candidus,

A. terreus.

Таким образом, показано, что на коже рабочих комбикормового

завода обнаружены различные виды плесневых грибов, среди которых

61

62

преобладает A. flavus. Выявлено, что показатель обсемененности кожных

покровов этими микромицетами в конце рабочего дня был значительно

выше, чем до начала рабочей смены. Частота встречаемости аспергилл

возрастает в зависимости от стажа работы на заводе, а также от

продолжительности контакта с зерном и продуктами его переработки в

течение рабочего дня.

УУссттааннооввллеенноо,, ччттоо ннаиболее оживленным участком обмена

микрофлоры рабочих и окружающей среды является поверхность ладони.

ПО микромицетами на поверхности ладони сотрудников КЗ увеличивался

к концу смены в 4 раза.

Таким образом, у 122 рабочих комбикормового завода было

выделено и подвергнуто изучению 1872 культуры микроорганизмов. Их

идентификация позволила отнести полученные штаммы к видам,

входящим в 13 родов, 8 семейств. У рабочих на поверхности кожи

выявлено 26 видов (в контрольной группе – 19 видов). Наибольшее

видовое разнообразие было обнаружено у грибов рода Aspergillus (4 вида),

а также бактерий рода Staphylococcus (5 видов) и Corynebacterium (3 вида).

Показатель частоты встречаемости микробов у лиц, контактирующих с

вредными факторами, возрастал в течение рабочего дня (табл. 3.3).

Показатель частоты встречаемости таких грамположительных

бактерий, как S. hominis, S. haemolyticus, M. luteus, C. хerosis и B. subtilis, у

рабочих был значительно меньше, чем в контрольной группе. В то же

время частота встречаемости вида C.pseudodiphthericum, наоборот,

значительно увеличилась.

Сравнительный анализ количественного состава микрофлоры кожи у

обследованных лиц на различных биотопах в течение дня показал, что

наиболее обильным он оказался к концу смены на поверхности ладони

(рис. 3.6).

62

63

Рис. 3.6. Микрофлора биотопов кожи сотрудников завода в конце рабочего дня

Таблица 3.3

Состав микробиоты кожи обследованных групп

Микроорганизмы

Рабочие n=122 Контроль n=80 в начале

рабочего дня в конце

рабочего дня абс. процент абс. процент абс. процент

1 2 3 4 5 6 7 Staphylococcus epidermidis 103 84,43 104 85,25 54 67,50 Staphylococcus hominis 66 54,10 68 55,74 47 58,75 Staphylococcus haemolyticus 60 49,18 60 49,18 41 51,25 Staphylococcus capitis 43 35,25 46 37,70 27 33,75 Staphylococcus aureus 24 19,67 29 23,38 9 11,25 Micrococcus luteus 53 43,44 62 50,82 51 63,75 Micrococcus vаrians 15 12,30 26 21,31 15 18,75 Streptococcus viridans 28 22,30 31 25,41 15 18,75 Enterococcus faecalis 21 17,21 27 22,13 - - Bacillus subtilis 51 41,80 56 45,90 41 51,25 Bacillus megaterium 21 17,21 27 22,13 11 13,75 Corynebacterium xerosis 21 17,21 33 27,05 41 51,25 Corynebacterium pseudodiphthericum

34 27,87 37 30,33 - -

Corynebacterium minitissimum

20 16,39 17 13,93 12 15,0

Escherichia coli 19 15,57 23 18,85 3 3,75 Escherichia germani 14 11,48 18 17,75 - - Providencia alcalifaciens 15 12,30 20 16,39 - -

63

64

Окончание табл. 3.3

1 2 3 4 5 6 7 Proteus vulgaris 10 8,20 17 13,93 4 5,0 Pseudomonas aeruginosa 19 15,57 19 15,57 4 5,0 Acinetobacter calсoaceticus 14 11,48 15 12,30 5 6,25

Колонизация кожи обследованных отдельными видами

грамположительных и грамотрицательных бактерий представлена на рис. 3.7.

Рис. 3.7. Колонизация кожи обследованных групп людей

грамположительными бактериями

Показатель обсемененности такими грамотрицательными

микроорганизмов, как P.vulgaris увеличился в течение дня в 2,8 раза – от

38,64±1,6 до 106,47±29,52 КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе –

40,16±4,46 КОЕ/см². Этот показатель для E.coli, E.germani, P.aeruginosa

возрос к концу смены почти в 2 раза и составил 76,49±19,19; 87,32±14,50 и

84,20±12,59 КОЕ/см² соответственно (р<0,05). В контрольной группе был

обнаружен только один вид из рода Escherichia – E.coli (41,65±5,95

64

65

КОЕ/см²). Для P.alcalifaciens показатель увеличился 2,3 раза (от 38,03±0,69

до 87,94±20,58 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе данный вид не

выявлен. Интенсивность колонизации таких грамотрицательных бактерий,

как A. calсoaceticus повысилась в 2,4 раза и составила 92,59±27,30

КОЕ/см², в контрольной группе – 40,46±1,19 КОЕ/см² (рис. 3.8).

Рис. 3.8. Колонизация кожи обследованных групп людей грамотрицательными

бактериями

Для всех выделенных видов микроорганизмов было характерно

увеличение плотности колонизации в течение рабочего времени,

достигавшей максимума к концу рабочего дня.

Исследование контаминации кожи микромицетами рода Aspergillus

выявило их наличие у 104 человек (85,25%). В контрольной группе этот

показатель не превышал 5% (4 человека).

Показатель контаминации кожи этими микромицетами в конце

рабочего дня был значительно выше, чем до начала смены. Грибы A.flavus

встречались до начала работы у 68 человек (65,38%), а в конце рабочего

дня – у 97 обследованных (93,27%). В контрольной группе были выявлены

65

66

у 5 % (4 человека). Виды A. niger, А.candidus в начале рабочей смены были

выявлены в 25,0% (26 рабочих) и 15,38% (16 рабочих) случаев

соответственно. В конце смены показатель частоты встречаемости

увеличился почти вдвое и составил – 48,08% (50 человек) и 28,85%

(30 человек) соответственно. Вид А. terreus не был обнаружен в начале

трудового дня, однако в конце рабочего дня он встречался у 12 рабочих

(11,54%) (рис. 3.9). В контрольной группе данные виды не были

обнаружены.

0

20

40

60

80

100%

А.flavus А. niger А.candidus А.terreus

в начале смены в конце смены контроль Рис. 3.9. Частота встречаемости и видовой состав микромицетов рода Aspergillus

Таким образом, частота встречаемости аспергилл на поверхности

кожи сотрудников возрастает в зависимости от стажа работы на заводе, а

также от продолжительности контакта с зерном и продуктами его

переработки в течение рабочего дня.

3.3. Микросимбиоценоз кожи в зависимости от продолжительности

работы на мукомольном производстве

Рабочие комбикормового завода подвергаются воздействию

комплекса физических, химических и биологических факторов,

66

67

оказывающих на организм работающих широкий спектр вредных

воздействий. Как было показано выше, при воздействии неблагоприятных

факторов комбикормового производства микрофлора реагирует

качественными и количественными нарушениями в сообществах

микроорганизмов. Можно предположить, что степень выраженности этих

нарушений зависит от продолжительности контакта с

дестабилизирующими факторами предприятия.

В связи с этим следующим этапом нашей работы явилось изучение

изменения микрофлоры кожи 122 человек в зависимости от

продолжительности контакта с вредными факторами КЗ (рис. 3.10).

В таблице 3.4 показано, что частота встречаемости микрофлоры

кожи изменяется с увеличением стажа работы на комбикормовом заводе.

Так, S. hominis был выделен у 60% рабочих 1-й группы (6 человек), у

58,82% 2-й группы (10 человек), у 56,52% 3-й группы (13 человек) и у

51,39% 4-й группы (37 человек).

Вид S. haemolyticus наблюдался в группе рабочих со стажем менее

1 года у 60% (6 человек), в группе со стажем от 1 года до 5 лет – у 52,94%

(9человек), в группе со стажем 5 – 10 лет – 47,82 % (11 человек), в группе

со стажем 10–20 лет и более – 47,22% (34 человека) (табл. 3.4, рис. 3.11).

Рис. 3.10. Распределение рабочих комбикормового завода по стажу работы

67

70

Табл

ица

3.4

Част

ота

встр

ечае

мост

и ра

злич

ных

пред

став

ител

ей м

икро

флор

ы к

ожи

в за

виси

мост

и от

про

долж

ител

ьнос

ти р

абот

ы

на к

омби

корм

овом

заво

де

Вид

ы

микр

оорг

аниз

мов

Груп

пы л

юде

й по

ста

жу

(n=1

22)

Кол

ичес

тво

рабо

чих

со

стаж

ем д

о 1

года

Кол

ичес

тво

рабо

чих

со

стаж

ем

1-5

лет

Кол

ичес

тво

рабо

чих

со с

таж

ем

5-10

лет

Кол

ичес

тво

рабо

чих

со

стаж

ем

10-2

0 ле

т и

боле

е

Кон

трол

ь

Абс

. %

А

бс.

%

Абс

. %

А

бс.

%

А

бс.

%

1 2

3 4

5 6

7 8

9 10

11

S. e

pide

rmid

is

7 70

14

82

,4

19

82,6

63

87

,5

54

67,5

S. h

omin

is

6 60

10

58

,8

13

56,5

37

51

,4

47

58,8

S. h

aem

olyt

icus

6

60

9

52,9

11

47

,8

34

47,2

41

51

,3

S. c

apiti

s 3

30

6 35

,3

8 34

,7

26

36,1

27

33

,8

S. a

ureu

s -

- 2

11,8

4

17,4

18

25

,0

9 11

,3

M. l

uteu

s 7

70

10

58,5

11

47

,8

25

34,7

51

63

,8

M. v

аria

ns

2 20

3

17,7

3

13,0

7

9,7

15

18,8

St. v

irid

ans

1 10

3

17,7

5

21,7

19

26

,4

15

18,8

E. fa

ecal

is

1 10

2

11,8

4

17,4

13

18

,1

- -

68

71

Око

нчан

ие т

абл.

3.4

1

2 3

4 5

6 7

8 9

10

11

B. su

btili

s 5

50

8 47

,1

9 39

,1

29

40,3

41

51

,3

B. m

egat

eriu

m

1 10

2

11,8

4

17,4

14

19

,4

11

13,8

C. x

eros

is

3 30

3

17,7

4

17,4

11

15

,3

41

51,3

C. p

sedo

diph

ther

icum

1

10

3 17

,8

7 30

,4

23

31,9

-

-

C. m

initi

ssim

um

1 10

1

5,9

3 13

,0

15

20,8

12

15

,0

E. c

oli

- -

1 5,

9 3

13,0

15

20

,8

3 3,

8

E. g

erm

ani

- -

2 11

,8

3 13

,0

10

13,9

-

-

P. a

lcal

ifaci

ens

- -

2 11

,8

3 13

,0

11

15,3

-

-

P. v

ulga

ris

- -

1 5,

9 2

8,7

7 9,

7 4

5,0

P. a

erug

inos

a -

- 2

11,8

3

13,0

14

19

,4

4 5,

0

A. c

alсo

acet

icus

-

- 1

5,9

3 13

,0

10

13,9

5

6,3

69

72

Ри

с. 3

.11.

Час

тота

вст

реча

емос

ти б

акте

рий,

вы

деле

нны

х с

кож

и ра

бочи

х К

З с

боль

шим

ста

жем

раб

оты

(10–

20 л

ет)

020406080100

S. e

pide

rmid

isS.

hom

inis

S. h

aem

olyt

icus

St.c

apiti

s

St.a

ureu

s

M.lu

teus

M.v

аrian

s

St.v

irida

es

E.fa

ecal

isB.

subt

ilis

B.m

egat

eriu

mC.

xero

sis

C.ps

eudo

diph

ther

icum

C. m

initi

ssim

um

E.co

li

E. g

erm

ani

P. a

lcal

ifaci

ens

P.vu

lgar

is

P. a

erug

inos

aA

. calс

oace

ticus

%

рабо

чие с

о ст

ажем

10-

20 ле

тко

нтро

ль

70

Из таблицы 3.4 видно, что показатели частоты встречаемости

микрофлоры кожи рабочих в зависимости от стажа работы увеличиваются

у большинства выделенных видов, таких как S. aureus, St. viridans,

B. megaterium, C. minitissimum, E. coli, P. vulgaris, P. aeruginosa,

A. calсoaceticus. Например, обсемененность S. aureus у рабочих второй

группы составила 11,8%, в третьей группе – 11,4%, в четвертой – 25%.

Обращает на себя внимание появление в микробиоценозе кожи

рабочих таких видов, как C. pseudodiphthericum, E. faecalis, P. alcalifaciens,

E. germani (рис. 3.12, а,б).

Следует отметить, что обсемененность этими микроорганизмами

значительно возросла у сотрудников в зависимости от стажа работы на КЗ.

Чаще всего у рабочих среди бактерий в микробиоценозе кожи были

выделены C. pseudodiphthericum (рис. 3.12, а, б). Так, данный вид был

выявлен в первой группе рабочих у 10% (1 человек), во второй группе – у

17,7% (3 человека), в третьей группе – у 30,43% (7 человек) и в четвертой

группе – у 31,9% (23 человека).

Помимо частоты обнаружения микроорганизмов в зависимости от

стажа работы на комбикормовом заводе у сотрудников изменялись и

показатели плотности колонизации или обсемененности кожи

микрофлорой, которые увеличивались к концу рабочего дня.

На рис. 3.12, б видно, что у рабочих 1-й группы, которые

проработали на комбикормовом заводе менее 1 года, состояние

микробиоценоза кожи характеризовались незначительным изменением.

Так, ПО S. epidermidis у обследованных в начале смены был 49,86±6,46

КОЕ/см², а к концу рабочего дня увеличился в 2,8 раза – 140,25±60,83

КОЕ/см² (р<0,05) (в контрольной группе 54,62±3,19 КОЕ/см² (рис. 3.12,б).

71

72

а

б

Рис. 3.12. Частота встречаемости бактерий, появившихся в микрофлоре кожи рабочих

(а), и содержание грамположительной флоры у рабочих 1-й группы (б)

72

73

ПО S. hominis увеличился у рабочих 1-й группы почти в 2,3 раза к концу смены (от 55,54±10,89 до 125,46±49,73 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе – 49,98±1,34 КОЕ/см². ПО S. haemolyticus у рабочих в начале дня составил 56,44±10,84 КОЕ/см², в конце смены возрос в 2,7 раза –155,04±65,94 КОЕ/см² при р<0,05, а в контрольной группе – 49,58±2,69 КОЕ/см² (рис. 3.12, б). ПО S. capitis у обследованных утром составил 40,16±0,86 КОЕ/см², к концу трудового дня – 104,13±39,35 КОЕ/см² при р<0,05 (в контрольной группе – 49,98±1,34 КОЕ/см²). Следует отметить, что S. aureus у лиц данной группы не обнаружен. У лиц контрольной группы этот вид встречался в минимальном количестве – 39,19±0,47 КОЕ/см² (рис. 3.12 б).

M. luteus в максимальных количествах выявлен у рабочих в конце смены – 179,73±13,72 КОЕ/см², тогда как ПО в начале смены был меньше почти в 4 раза (46,11±3,94 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе – 49,42±2,47 КОЕ/см². ПО M.vаrians утром у обследованных составил 45,02±3,34 КОЕ/см², в конце дня возрос в 2,2 раза (98,38±5,16 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе – 41,96±3,94 КОЕ/см²) (рис. 3.12, б). Для вида B.subtilis ПО у рабочих увеличился в течение дня незначительно – от 49,09±4,46 до 80,13±16,57 КОЕ/см² при р<0,05. В контрольной группе – 46,33±3,13 КОЕ/см² (рис. 3.12, б).

У вида C. pseudodiphthericum ПО в течение смены повысился в 2,3 раза (от 42,15±1,31 до 98,38±5,16 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе данный вид не был обнаружен (рис. 3.12, б). Представители грамотрицательной флоры не были обнаружены у рабочих 1-й группы.

Изучение количественных изменений микрофлоры кожи рабочих 2-й группы выявило, что ПО S. epidermidis увеличился к концу дня в 4,4 раза – от 51,61±9,11 до 230,22±78,58 КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе – 54,62±3,19 КОЕ/см². ПО S. hominis возрос в 3,9 раза – от 56,0±8,21 до 217,45±58,5 КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе – 49,98±1,34 КОЕ/см². ПО S. aureus повысился в 2,7 раза – от 41,01±1,89 до 110,08±34,31 КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе 39,19±0,47 КОЕ/см² (рис. 3.13, а).

73

74

а

б

Рис. 3.13. Содержание грамположительной (а) и грамотрицательной (б)

микрофлоры у рабочих 2-й группы

74

75

Аналогичные изменения были выявлены среди представителей рода

Micrococcus. Например, ПО M. luteus увеличился от 42,17±1,98 до

177,46±55,21 КОЕ/см² при р<0,05 (в контрольной группе составил

49,42±2,47 КОЕ/см²). У вида M. vаrians повысился – от 44,63±8,92 до

119,96±19,53 КОЕ/см² при р<0,05 (в контрольной группе составил

41,96±3,94 КОЕ/см²) (рис. 3.13, а).

ПО такого вида, как B. megaterium у рабочих 2-й группы возрос в

2,6 раза – от 41,37±1,74 до 107,10±26,77 КОЕ/см² при р<0,05, в

контрольной группе – 47,05±1,62 КОЕ/см² (рис. 3.13, а). У вида

C. pseudodiphthericum ПО в течение смены повысился в 3,6 раза (от

42,15±1,31 до 149,74±45,84 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе

данный вид не был обнаружен (рис. 3.13, а).

ПО грамотрицательными микроорганизмами у рабочих этой группы

представлен на рисунке 3.13, б.

Установлено, что у рабочих показатель обсемененности

P. aeruginosa значительно выше, чем у других грамотрицательных

микроорганизмов. Данный показатель увеличился в течение дня в 2,6 раза

(от 37,57±0,68 до 99,39±27,23 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе

40,16±4,46 КОЕ/см²; р<0,05). ПО P. vulgaris увеличился к концу дня в 1,8

раза (от 44,63±8,92 до 82,31±25,49 КОЕ/см²; р<0,05), в контрольной группе

– 40,16±4,46 КОЕ/см² ПО P. alcalifaciens повысился в 2 раза (от 40,16±4,46

до 86,94±17,56 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе данный вид не

был выявлен (рис. 3.13, б).

Полученные данные свидетельствуют о том, что у лиц со стажем

работы на заводе от 1 до 5 лет (2-я группа) наблюдаются изменения в

составе микрофлоры по сравнению с контрольной группой людей, а также

появление новых симбионтов, таких как E. coli, E. germani, P. alcalifaciens,

P. vulgaris, P. aeruginosa, A. calсoaceticus (рис. 3.13, б).

75

76

В микрофлоре кожи у рабочих 3-й группы, со стажем работы на

заводе от 5 до 10 лет, обнаружены более глубокие изменения

количественного состава микрофлоры кожи (рис. 3.14, а. б).

а

б

020406080

100120КОЕ/см²

P. aeru

ginosa

E. coli

E. germ

ani

P. alca

lifacie

ns

P. vulg

aris

A. calс

oacet

icus

рабочие в начале смены рабочие в конце смены контроль

Рис. 3.14. Содержание грамположительной (а) и грамотрицательной (б) микрофлоры рабочих 3-й группы

76

77

Так, ПО S. hominis повысился у рабочих в течение дня в 5,5 раза (от

48,97±6,10 до 270,95±107,99 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе

49,98±1,34 КОЕ/см². ПО S. haemolyticus возрос в 4,6 раза (от 54,05±10,94 до

252,87±94,04 КОЕ/см² при р<0,05), в контроле – 49,58±2,69 КОЕ/см². ПО S.

аureus у сотрудников увеличился в 2 раза (от 44,63±8,92 до 90,74±25,02

КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе 39,19±0,47 КОЕ/см²

(рис. 3.14, а).

M. luteus в максимальных количествах выявлен у рабочих в конце

смены – 213,21±59,06 КОЕ/см², тогда как ПО в начале рабочего дня был

меньше в 4,4 раза – 48,20±2,31КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе –

49,42±2,47 КОЕ/см² (рис. 3.14, а). У вида B. subtilis ПО у обследованных

повысился в течение дня почти в 2 раза (от 40,13±1,13 до 89,25±19,47

КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе – 46,33±3,13 (рис. 3.14, а).

ПО C. xerosis у обследованных возрос к концу рабочего дня в 2,9

раза (от 40,72±1,98 КОЕ/см² до 117,51±38,67 КОЕ/см² при р<0,05), для

C. minitissimum – в 3,9 раза (до 44,63±8,92 до 172,55±42,91КОЕ/см² при

р<0,05). В контрольной группе – 48,76±1,89 КОЕ/см² и 49,09±2,27 КОЕ/см²

соответственно. У вида C. pseudodiphthericum ПО в течение смены

увеличился в 3 раза (от 46,61±3,57 до 140,82±42,95 КОЕ/см² при р<0,05). В

контрольной группе данный вид не был обнаружен (рис. 3.14, а).

ПО грамотрицательными, условно-патогенными микроорганизмами

у сотрудников со стажем работы на комбикормовом заводе от 5 до 10 лет

представлен на рисунке 3.14, б.

Выявлено, что у рабочих интенсивность колонизации P.aeruginosa

значительно выше, чем у других грамнегативных микроорганизмов. ПО

увеличился в течение дня в 2,5 раза (от 42,15±1,31 до 107,10±26,77

КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе – 40,16±4,46 КОЕ/см² (рис.

3.14, б).

77

78

ПО E.coli у рабочих увеличился в течение дня в 1,6 раза (от 41,49±1,58

до 67,24±19,99 КОЕ/см² при р<0,05), E. germani – в 2 раза (от 41,65±5,95 до

83,5±18,18 КОЕ/см² при р<0,05). В контрольной группе был обнаружен

только один вид из рода Escherichia – E. coli (41,65±5,95 КОЕ/см²).

Результаты исследования биотопа кожи рабочих 3-й группы

свидетельствуют о еще больших изменениях микрофлоры кожи в течение

рабочего дня, выражающиеся в увеличении количества высеваемости

таких условно-патогенных микроорганизмов, как C. pseudodiphthericum,

B. Megaterium, E. germani, P. vulgaris, A. calсoaceticus.

У рабочих четвертой группы ПО S. epidermidis увеличился в 4,5 раза

– от 60,52±10,14 до 274,33±107,24 КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе

– 54,62±3,19 КОЕ/см². ПО S. hominis возрос в 4,3 раза – от 42,16±1,48 до

180,25±56,41 КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе – 49,98±1,34

КОЕ/см². ПО S. aureus повысился в 2 раза – от 45,96±4,51 до 96,99±28,66

КОЕ/см² (р<0,05), в контрольной группе – 39,19±0,47 КОЕ/см² (рис. 3.15,а).

M. luteus в максимальных количествах выявлен у рабочих в конце

смены – 155,04±65,94 КОЕ/см², тогда как ПО в начале смены был меньше в

3,2 раза (48,97±6,10 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе –

49,42±2,47 КОЕ/см². ПО M. vаrians утром у рабочих составил 59,50±2,98

КОЕ/см², в конце дня возрос почти в 2 раза (127,39±36,41КОЕ/см² при

р<0,05), в контрольной группе - 41,96±3,94 КОЕ/см² (рис. 3.15, б).

ПО у вида B. megaterium увеличился почти в 3 раза (44,63±8,92 до

127,39±36,41 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе 47,05±1,62

КОЕ/см² (рис. 3.15, а).

Аналогичные изменения были выявлены у грамположительных

палочек. У вида C. pseudodiphthericum ПО в течение смены повысился в

3 раза (от 49,09±2,98 до 149,87±2,14 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной

группе данный вид не был обнаружен (рис. 3.15, а).

78

79

а

б

Рис. 3.15. Содержание грамположительной (а) и грамотрицательной (б)

микрофлоры у рабочих 4-й группы

79

80

ПО грамотрицательными условно-патогенными микроорганизмами у

обследованных со стажем работы на предприятии 10–20 лет и более

представлен на рисунке 19 б. Так, ПО P. aeruginosa увеличился в течение

дня в 2,8 раза (от 44,63±8,92 до 124,95±41,22 КОЕ/см² при р<0,05), в

контрольной группе – 40,16±4,46 КОЕ/см² (рис. 3.15, б).

ПО E. coli у рабочих завода повысился в течение дня в 1,8 раза (от

46,12±7,44 до 81,88±22,25 КОЕ/см² при р<0,05), в контрольной группе –

41,65±5,95 КОЕ/см².

Результаты исследования микрофлоры обследованных 4-ой группы

свидетельствуют о еще более глубоких изменениях микробиоценоза кожи,

выраженных в значительном увеличении показателя обсемененности

условно-патогенных микроорганизмов таких, как C. pseudodiphthericum,

E. germani, P. alcalifaciens, A. calсoaceticus, P. aeruginosa (рис. 3.15, б).

Таким образом, полученные данные демонстрируют зависимость

глубины дисбиотических нарушений от продолжительности контакта

рабочих комбикормового завода с профессиональными вредными

факторами, в частности с зерном и продуктами его переработки.

Показатель частоты встречаемости и плотности колонизации у

большинства представителей микрофлоры кожи изменяется в зависимости

от стажа работы на предприятии. Нарушения микробиоценоза

проявляются в расширении спектра видового разнообразия симбионтов и

повышении обсемененности большинства видов на фоне снижения

данного показателя у представителей постоянной микрофлоры кожи.

Длительный контакт с вредными факторами производственной среды

приводит к появлению в микробиоценозе кожи обследованных лиц

микроорганизмов, не встречающихся у лиц контрольной группы, среди

которых чаще всего обнаруживались C. pseudodiphthericum.

80

81

Глава 4. ПОПУЛЯЦИОННАЯ СТРУКТУРА МИКРОБИОТЫ КОЖИ

Человек и его микробиота – это единая система. В связи с

расширением представлений о значении условно-патогенных

микроорганизмов в инфекционном процессе бактериологическое

исследование нормальной микрофлоры приобретает характер

экологического (Гаврилова, 1991).

4.1. Критерии оценки популяционной структуры микробных

сообществ

Микробиоценоз кожи относится к открытым экологическим системам,

которые подвержены регулярному или нерегулярному разрежению,

приводящему к утрате микроорганизмов. С.И. Сытник (1989) утверждает,

что внедрение новых видов в сообщество не сопровождается

исчезновением ранее присутствующих.

Микрофлора кожи, с одной стороны, является одним из защитных

механизмов организма, а с другой – неисчерпаемым резервуаром

возбудителей экзогенных и эндогенных инфекций (Сытник, 1989; Акрут,

2003). Именно она образует экологический барьер, обеспечивающий

колонизационную резистентность и деконтаминацию организма,

воздействуя на иммунную систему (Трапезов, Леонтьева, Бондаренко,

1992; Ришко, 2004). По состоянию аутофлоры кожи можно судить о

здоровье человека, т.к. при заболеваниях отмечается качественное и

количественное изменение микробных ассоциаций кожного покрова

(Иванов, 1989).

Сбалансированное состояние микробиоценоза кожи обеспечивает

колонизационную резистентность данного биотопа. В.К. Солнцева с соавт.

81

82

(2000) установили, что нарушение тех или иных компонентов гомеостаза,

включая кожную патологию, изменяет постоянство микроэкосистемы и

приводит к дисбактериозу кожи.

Таким образом, представители нормальной микрофлоры выполняют

физиологически важную функцию поддержания постоянства внутренней

среды организма, принимают участие в формировании

иммунобиологической реактивности макроорганизма. Участвующие в

развитии дисбактериоза патогенные и условно-патогенные

микроорганизмы могут являться источниками инфекции. Нарушение

нормоценозов способствует хронизации патологических процессов, в

частности дерматозов.

Основными критериями оценки микробных сообществ являются:

показатели постоянства, видового разнообразия и флористической

значимости микроорганизмов в сообществе.

4.2. Характеристика популяционной структуры

микросимбиоценоза кожи на примере воздействия зерновой пыли

Характеристика частоты встречаемости и колонизации

микроорганизмов не дает полного представления о микробиоценозе.

Различные виды, входящие в структуру бактериальных

экологических систем, по-разному взаимодействуют друг с другом и

имеют присущие каждому из них типы популяционных колебаний. Для

определения доли участия разных видов в структуре биоценоза

использовали показатель постоянства на основе частоты встречаемости.

Данный показатель позволяет установить типологию доминант биоценоза.

В зависимости от полученного значения виды подразделяли на

постоянные (С<50%), добавочные (25%<C<50%) и случайные (C<25%).

82

83

Используя данный индекс, определили структуру микробиоценоза кожи

рабочих предприятия и людей, не связанных с вредными условиями

мукомольного производства (контроль).

Анализ полученных нами данных позволил считать, что доминирующими видами микробиоты кожи рабочих являются грамположительные кокки – S. epidermidis, S. hominis, M. luteus (C=85,25; C=56,56; и C=54,10% соответственно), а также условно-патогенные грибы Aspergillus flavus (C=80,33 %) и Candida albicans (C=52,42%) (табл. 4.1). В контрольной группе эти микроорганизмы в состав доминирующих видов не входили (табл. 4.2).

A. flavus становится абсолютно доминирующим видом у рабочих КЗ. Следует особо подчеркнуть появление в доминантном составе грибов C. albicans, в микрофлоре сотрудников завода они выступают в роли постоянного сочлена биоценоза, тогда как в контрольной группе микромицеты входят в состав транзиторных видов.

Значения индекса постоянства для основных представителей микрофлоры кожи людей контрольной группы представлены в таблице 4.2.

Изменения иерархии отмечали также в структуре дополнительных видов. Высокий индекс постоянства в данной категории отмечался у грибов А. niger (40,98%). В контрольной группе данный вид не встречался.

Почти все представители грамположительных палочек рода Corynebacterium в группе обследованных относились к добавочной микрофлоре: С. рseudodiphthericum (С=30,33%), С. хerosis (С=27,05%). У лиц контрольной группы вид С. хerosis (С=51,25 %) был доминирующим.

83

84

Таблица 4.1 Показатель постоянства микроорганизмов кожи рабочих КЗ

№ п/п Структура микробиоценоза кожи Показатель постоянства, % Доминирующие виды 1 Staphylococcus epidermidis 85,25 2 Aspergillus flavus 80,33 3 Staphylococcus hominis 56,56 4 Micrococcus luteus 54,10 5 Candida albicans 52,42 Добавочные виды

1 Staphylococcus haemolyticus 49,18 2 Bacillus subtilis 48,36 3 Aspergillus niger 40,98 4 Staphylococcus capitis 37,70 5 Corynebacterium

pseudodiphthericum 30,33

6 Candida kefyr 27,87 7 Corynebacterium xerosis 27,05 8 Streptococcus viridaes 25,41 9 Staphylococcus aureus 25,40 Транзиторные виды

1 Pseudomonas aeruginosa 23,77 2 Aspergillus candidus 23,77 3 Enterococcus faecalis 22,13 4 Bacillus megaterium 22,13 5 Micrococcus vаrians 21,31 6 Escherichia coli 18,85 7 Corynebacterium minitissimum 16,39 8 Providencia alcalifaciens 16,39 9 Escherichia germani 16,39 10 Proteus vulgaris 14,75 11 Acinetobacter caleoaceticus 13,11 12 Aspergillus terreus 10,66

84

85

Таблица 4.2

Структура микробиоценоза кожи в контрольной группе

№ п/п Структура микробиоценоза кожи Показатель постоянства, %

Доминирующие виды

1 Staphylococcus epidermidis 67,50

2 Micrococcus luteus 63,75

3 Staphylococcus hominis 58,75

4 Staphylococcus haemolyticus 51,25

5 Corynebacterium xerosis 51,25

6 Bacillus subtilis 51,25

Добавочные виды

1 Staphylococcus capitis 33,75 Транзиторные виды

1 Micrococcus verians 18,75 2 Streptococcus viridaes 18,75

3 Candida albicans 16,25

4 Corynebacterium minitissimum 15,0

5 Bacillus megaterium 13,75

6 Staphylococcus aureus 11,25

7 Acinetobacter caleoaceticus 6,25

8 Proteus vulgaris 5,0

9 Pseudomonas aeruginosa 5,0

10 Aspergillus flavus 5,0

11 Escherichia coli 3,75

12 Penicillum 2,5

Кроме того, у рабочих в составе микробиоценоза к дополнительным

видам относились S. haemolyticus (C=49,18%), S. capitis (C=37,70%),

S. aureus (C=25,40%), а у лиц контрольной группы в данной категории был

всего один вид S. capitis (C=33,75%).

К случайным представителям микробиоценоза кожи у рабочих и у

лиц контрольной группы, кроме перечисленных, были отнесены

85

86

энтеробактерии и другие виды бацилл, коринебактерий, микрококков, а

также грибы. Однако «случайность» энтеробактерий у обследованных лиц

различна, так как показатель постоянства микроорганизмов в группе

сравнения ниже почти в 3 раза, чем у рабочих.

Таким образом, в микробиоценозе кожи рабочих КЗ произошли

значительные изменения. В состав доминирующих видов вошли

микроскопические грибы А. flavus и C. albicans, а бактерии S. haemolyticus,

С. хerosis, B. subtilis перешли в добавочные виды. Расширился спектр

добавочных видов у сотрудников предприятия – 9 видов, в контрольной

группе – 1 вид. Следует отметить появление у рабочих в группе

добавочных микроорганизмов С. рseudodiphthericum.

В естественных условиях представители микробной флоры кожи

обитают в виде сообществ. Сочлены микробиоценоза занимают в биотопе

определенные экологические ниши и между ними существуют

разнообразные экологические связи.

Распределение видов в пространстве определяли с помощью индекса

контагиозности, который характеризуется коэффициентом вариации (табл.

4.3). При случайном распределении микроколоний на коже этот

коэффициент равен единице, в случае группового распределения – больше

единицы, а при относительно равномерном распределении – меньше

единицы (Уиттекер, 1980).

Анализ изучения горизонтальной структуры бактериальных

сообществ кожи показал, что распределение стафилококков, микрококков,

коринебактерий носит контагиозный характер (табл. 4.3). У рабочих КЗ

наблюдалось повышение степени контагиозности стафилококков до

2,34±0,12 ед., микрококков – до 2,04±0,45 ед., коринебактерий – до

1,70±0,08 ед. в начале рабочего дня и снижение этого показателя данных

микроорганизмов к концу смены (1,11±0,12; 1,98±0,39; 1,39±0,09 ед.

86

87

соответственно). В контрольной группе степень контагиозности

достоверно не изменялась (1,10±0,1; 2,04±0,45; 1,03±0,1 соответственно

при р<0,05). Упомянутые бактерии относятся к представителям

аутохтонной микрофлоры, которые способны фиксироваться к строго

определенным рецепторам кожи. С этой способностью, по-видимому, и

связан групповой характер их распределения.

Нами было отмечено достоверное увеличение данного индекса

контагиозности для таких представителей микрофлоры рабочих ЧКЗ, как

Escherichia соli, Pseudomonas aeruginosa. Для этих видов он составил в

начале рабочего дня 0,61±0,2; 0,39±0,2 ед. и повышался к концу смены до

1,54±0,64; 0,95±0,08 ед. соответственно (в контрольной группе 0,24±0,09;

0,22±0,08 ед. соответственно при р<0,05) (табл. 4.3).

Наряду с этим было выявлено достоверное увеличение показателя

контагиозности для аспергилл до 1,27±0,25 ед. к концу рабочего дня (в

группе сравнения 0,24±0,1 ед. при р<0,05).

Уменьшение частоты встречаемости и контагиозности микробов

индигенной флоры кожи рабочих по сравнению с группой контроля

приводит к освобождению экологических ниш, успешно занимаемых

представителями условно-патогенной флоры, в результате чего индекс

контагиозности ее представителей уменьшается.

Величина контагиозности не может быть эталоном всех форм

биоценотических отношений, поэтому далее дана оценка иерархической

структуры микробиоценоза с помощью индекса значимости. Используя

указанный индекс, проводили оценку значимости представителей

микрофлоры и условно-патогенных микроорганизмов у рабочих

комбикормового завода и людей, не имеющих контакта с вредными

факторами производства.

87

88

Таблица 4.3

Степень контагиозности основных представителей микрофлоры кожи у лиц обследованных групп

Микроорганизмы

Обследованные группы людей

рабочие

контроль в начале

рабочего дня

в конце

рабочего дня

Staphylococcus epidermidis 2,34±0,12+ 1,11±0,12* 1,10±0,1

Staphylococcus hominis 1,23±0,09 0,98±0,16 1,08±0,1

Staphylococcus haemolyticus 2,20±0,08+ 1,01±0,3* 0,99±0,02

Staphylococcus capitis 1,56±0,09+ 1,08±0,2* 0,98±0,19

Staphylococcus aureus 0,84±0,3 1,14±0,1+ 0,25±0,09

Streptococcus viridans 1,59±0,09+ 1,01±0,03+* 0,34±0,1

Micrococcus luteus 2,04±0,04+ 1,98±0,2+ 0,98±0,1

Micrococcus vаrians 1,53±0,04+ 1,09±0,08* 1,05±0,1

Bacillus subtilis 1,17±0,09+ 1,32±0,1+ 0,24±0,08

Bacillus megaterium 1,71±0,34+ 1,13±0,09+ 0,34±0,1

Corуnebacterium xerosis 1,22±0,4+ 1,29±0,09+ 0,31±0,07

Corуnebacterium minitissimum 1,70±0,08+ 1,39±0,09* 1,03±0,1

Escherichia coli 0,61±0,2 1,60±0,15+* 0,24±0,09

Proteus vulgaris 0,62±0,09+ 1,54±0,64+* 0,27±0,09

Pseudomonas aeruginosa 0,39±0,2 0,95±0,08+* 0,22±0,08

Acinetobacter calсoaceticus 0,38±0,11 1,24±0,2+* 0,26±0,09

Candida albicans 1,59±0,3+ 1,11±0,06+ 0,35±0,2

Aspergillus flavus 1,20±0,3+ 1,27±0,25+ 0,24±0,1

Примечание: + – достоверные отличия от контрольного значения; * – достоверные отличия от значения в начале рабочего дня (р<0,05).

Из таблицы 4.3 видно, что наиболее значимыми в обеих

сравниваемых группах были стафилококки, микрококки и коринебактерии.

Максимальные значения индекса значимости получены на коже

ладони у сотрудников завода. Так, показатель флористической значимости

88

89

для стафилококков составил у рабочих на поверхности ладони 27,81%;

на коже лба – 25,13%; на поверхности живота – 18,34%; а в контрольной

группе – 33,12; 31,04; 24,17% соответственно. У микрококков и

коринебактерий он также уменьшился на коже ладони до 18,63% и 11,06%

соответственно, в контрольной группе составил 21,72% и 14,05%

соответственно (табл. 4.4).

По-видимому, уменьшение значимости своего доминирующего

положения этих бактерий привело к увеличению значимости условно-

патогенных микроорганизмов. Наибольшее увеличение показателя

флористической значимости отмечено у грибов рода Candida и Aspergillus,

например, на поверхности ладони он составил 19,62% и 18,07%

соответственно, тогда как в контрольной группе не превышал 12,54% и

0,96% соответственно.

Вышеперечисленные параметры, такие как показатель постоянства,

индекс контагиозности и флористическая значимость косвенно

соотносятся с показателями бактериальной обсемененности, поэтому они

не могут характеризовать все разнообразие изменений в микробных

сообществах.

Существенной характеристикой микробного сообщества является

видовое разнообразие, позволяющее дополнить картину количественных

характеристик экосистемы.

Анализ полученных значений коэффициента видового разнообразия

свидетельствует о достоверном увеличении богатства видов микрофлоры

кожи рабочих ЧКЗ по сравнению с группой людей, не связанных с

вредными условиями предприятия (р<0,05). Показатель видового

разнообразия микробных ассоциаций биотопов кожи у сотрудников

комбикормового завода составил в начале рабочего дня 2,80, в конце

рабочей смены – 3,12, в то время как в контрольной группе этот показатель

89

90

не превысил 2,03. Сопоставление полученных результатов указывает на

увеличение видового разнообразия у рабочих, что связано с уравниванием

значимости членов сообщества. Следует отметить, что контаминация

условно-патогенными микроорганизмами значительно легче происходила

у рабочих в конце трудового дня.

Таблица 4.4

Флористическая значимость различных микроорганизмов

в микробиоценозе кожи у лиц обследуемых групп Биотопы кожи Ладонь Лоб Живот

микроорганизмы

Рабо

чие,

%

Кон

трол

ь,

%

Рабо

чие,

%

Кон

трол

ь,

%

Рабо

чие,

%

Кон

трол

ь,

%

Staphylococcus 27,81 33,12 25,13 31,04 18,34 24,17

Micrococcus 18,63 21,72 16,45 20,06 10,01 14,65

Corуnebacterium 11,06 14,05 10,22 12,75 7,55 10,40

Streptococcus 12,03 8,06 10,82 7,58 5,01 3,12

Грамотрица-тельные микробы

10,47 2,75 8,01 2,02 4,02 1,06

Candida 19,62 12,54 17,52 10,11 12,08 9,32

Aspergillus 18,07 0,96 15,21 0,88 7,68 0,12

Изучение структуры симбиотических взаимоотношений

микроорганизмов, формирующих микробиоценоз кожи обследованных

лиц, показало, что доминирующими видами микрофлоры кожи были

грамположительные кокки – S. epidermidis, S. hominis, M. luteus (C=85,25;

C=56,56 и C=54,10% соответственно), а также условно-патогенные грибы

A.flavus (C=80,33%) и C. albicans (С=52,42%). В контрольной группе они

в состав доминирующих видов не входили. Почти все представители рода

Corynebacterium у рабочих относились к добавочной микрофлоре:

90

91

С. рseudodiphthericum (С=30,33%), С. хerosis (С=27,05%). В контрольной

группе вид С. хerosis (С=51,25%) был доминирующим (табл.4.5).

Анализ изучения горизонтальной структуры микробных сообществ

кожи показал, что распределение стафилококков, микрококков,

коринебактерий носит контагиозный характер. У рабочих наблюдалось

повышение степени контагиозности стафилококков до 2,34±0,12 ед.,

микрококков – до 2,04±0,45 ед., коринебактерий – до 1,70±0,08 ед. в начале

рабочего дня и снижение этого показателя данных микроорганизмов к

концу смены (1,11±0,12; 1,98±0,39; 1,39±0,09 ед. соответственно при

р<0,05). В контроле показатель достоверно не изменялся (1,10±0,1;

2,04±0,45; 1,03±0,1 ед. соответственно при р<0,05).

Таблица 4.5

Показатель постоянства микроорганизмов кожи

№ п/п

Структура микробиоценоза кожи рабочие контроль

1 2 3 Доминирующие виды 1 S. epidermidis S. epidermidis 2 A. flavus M. luteus 3 S. hominis S. hominis 4 M. luteus S. haemolyticus 5 C. albicans C. xerosis Добавочные виды 1 S. haemolyticus S. capitis 2 B. subtilis 3 A. niger 4 S. capitis 5 C. pseudodiphthericum 6 C .kefyr 7 C. xerosis 8 St. viridans 9 S. aureus Транзиторные виды 1 P.aeruginosa M. vаrians 2 A. candidus St. viridans 3 E. faecalis C. albicans

91

92

Окончание табл. 4.5

1 2 3 4 B. megaterium C. minitissimum 5 M. vаrians B. megaterium 6 E. coli S. aureus 7 C. minitissimum A. calсoaceticus 8 P. alcalifaciens P. vulgaris 9 E. germani P.aeruginosa 10 P. vulgaris A. flavus 11 A. calсoaceticus E. coli 12 A. terreus

Уменьшение частоты встречаемости и контагиозности микробов

индигенной флоры кожи рабочих по сравнению с группой контроля

приводит к освобождению экологических ниш, успешно занимаемых

представителями условно-патогенной микрофлоры, в результате чего

индекс контагиозности их уменьшается.

Результаты изучения показателя заболеваемости рабочих позволили

установить, что 77,05% (94 человека) имели хронические заболевания

органов дыхания, пищеварения, болезни эндокринной системы и кожи

(табл. 4.6).

Среди заболеваний органов дыхания наиболее часто встречался

хронический бронхит – 17 человек (13,93%), в группе сравнения данный

показатель не превышал 3,75% (3 человека). Бронхиальная астма

обнаружена у 11,48% обследованных (14 человек), в группе сравнения 5%

(4 человека). Хроническая пневмония встречалась у 11,48% рабочих, в

группе сравнения – 7,5% (6 человек). Среди обследованных был выявлен

пневмокониоз – 0,82% (1 человек), в контроле ни одного случая данного

заболевания не обнаружено.

Изучение частоты встречаемости заболеваний дыхательных путей

показало, что у лиц со стажем работы менее 1 года не было

зарегистрировано ни одного случая заболевания, в группе со стажем от

92

93

1 года до 5 лет показатель заболеваемости составил 4,35 %, от 5 – 10 лет –

15,22 % и от 10 – 20 лет – 80,43 %.

Таблица 4.6

Показатели заболеваемости рабочих комбикормового завода

Заболевания

Заболеваемость рабочих

Заболеваемость лиц контрольной группы

абс. процент абс. процент 1 2 3 4 5

Болезни органов дыхания

46 37,7 14 17,5

Болезни органов пищеварения

20 16,4 11 13,8

Болезни эндокринной системы

15 12,3 2 2,5

Заболевания кожи 10 8,2 1 1,3 Болезни мочеполовых органов

6 4,9 3 3,8

Болезни системы кровообращения

5 4,1 1 1,3

Наиболее частым контаминатом кожных покровов при заболеваниях

дыхательных путей являлся вид C. рseudodiphtheriсum (табл. 4.7).

Таблица 4.7

Уровень инфицированности Corynebacterium рseudodiphtheriсum кожи рабочих комбикормового завода при различных заболеваниях

Заболевания

Количество обследованных

Количество инфицированных

абс. абс. процент

Хронический бронхит 17 6 6,38 Бронхиальная астма 14 7 7,45 Хроническая пневмония 14 10 10,64 Пневмокониоз 1 1 1,06 Простой зоб 12 4 4,26 Язвенная болезнь желудка 2 1 1,06 Хронический холецистит 9 1 1,06 Хронический пиелонефрит 4 1 1,06 Экзогенная экзема 4 3 3,19 Атопический дерматит 4 1 1,06

93

94

Выявление контаминации кожных покровов грибами рода Aspergillus

показало, что при хроническом бронхите они были обнаружены у 18,09%,

при хронической пневмонии – у 14,89% и бронхиальной астме – у 13,83%

обследованных. При хроническом холецистите показатель

контаминированности микромицетами не превышал 7,45%, при

хроническом пиелонефрите – 4,26%, а при атопическом дерматите 2,13%.

Для изучение воздействия метаболитов грибов рода Aspergillus на

вирулентность С. pseudodiphthericum в работе использовали две группы

мышей. Животных 1-й группы интраназально заражали бульонной

культурой C. рseudodiphthericum, 2-й группе предварительно вводили

фильтрат A. flavus с последующим интраназальным заражением такой же

культурой C. рseudodiphthericum.

Проведенные исследования показали, что заражение мышей

культурой C. рseudodiphthericum привело к гибели 72% животных первой

группы и 100% мышей второй группы, причем гибель наступала в более

ранние сроки. У животных обеих групп развивалась пневмония.

Интраназальное заражение видом C. рseudodiphthericum мышей,

обработанных фильтратом грибов A. flavus, вызывало у животных развитие

инфекционного процесса с более выраженными патоморфологическими

изменениями и более высокой летальностью в сравнении с контрольным

заражением мышей одной только культурой C. рseudodiphthericum.

Таким образом, изучение экологической характеристики

микрофлоры рабочих КЗ показало, что в данной группе происходят

качественные и количественные сдвиги микробиоценоза кожи. Это

проявляется увеличением общей бактериальной плотности и частоты

встречаемости условно-патогенной флоры на фоне снижения

доминирования основных симбионтов кожи у рабочих. В доминантном

составе ценотипа рабочих появились грибы рода Aspergillus, тогда как в

94

95

контрольной группе они входили в состав транзиторных видов.

Кроме того, у рабочих в группе добавочных видов появились бактерии

C. рseudodiphthericum, которые у интактных людей отсутствовали.

Следовательно, произошло увеличение видового разнообразия

микрофлоры поверхности кожи сотрудников, особенно в конце

рабочего дня.

95

96

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные авторами результаты о составе микробиоты кожных

покровов при различных клинических формах хронических дерматозов

свидетельствуют о значительном отличии состава микрофлоры

пораженных участков кожи от нормы (данных по контрольной группе).

Все рассмотренные в ходе работы хронические дерматозы

характеризуются увеличением не только доли представителей кокковой

флоры в составе микробиоты, но и высоким уровнем их плотности

колонизации.

Проведенные исследования показывают, что доминирующее

положение в микробиоте кожи при дерматозах занимают представители

Staphylococcus spp., составляющие самую многочисленную группу

грамположительных микробов, как по частоте встречаемости, так и по

плотности колонизации. Такая тенденция сохраняется для всех

рассмотренных кожных патологий: псориаз, экзема, атопический

дерматит.

Выявлены достоверные отличия по показателям плотности

обсемененности кожных покровов у обследованных лиц при сравнении

различных биотопов тела. Так наибольшая плотность микробных

популяций зафиксирована на поверхности рук обследованных лиц, причем

как на здоровых участках, так и на пораженных дерматозом.

Постоянное и длительное воздействие неблагоприятных факторов

производственной среды неизбежно сказывается на микробиоте кожи

работающих лиц, приводя к значительным изменениям в ее составе.

Степень возникающих перестроек в структуре микробиоты определяют

такие параметры, как стаж работы и длительность воздействия этих

факторов на человека. Эти изменения характеризуются появлением в

составе микробиоты представителей микроорганизмов, не встречающихся

96

97

у здоровых людей. В ходе проведенных исследований показано, что

доминирующими видами на коже у работающих на мукомольном

производстве становятся грибы рода Aspergillus, а наиболее частым

сочленом микробиоценоза – C. рseudodiphthericum.

Анализ популяционной структуры микробиоты кожи в условиях

внешних неблагоприятных воздействий показал, что такие показатели

микробного сообщества, как частота встречаемости и плотность

колонизации большинства представителей микробиоты кожи изменяются в

зависимости от стажа работы на предприятии. Нарушения состава

микробного сообщества проявляются в расширении спектра видового

разнообразия симбионтов и повышении показателя обсемененности

большинства видов на фоне снижения данного показателя у

представителей постоянной микрофлоры кожи.

В условиях ассоциативного симбиотического взаимодействия

структура микробиоты кожи представляет собой хрупкую микросистему

пары «патоген-индиген», где в зависимости от внешних условий и

внутренних изменений макрохозяина роль и значимость одних и тех же

микроорганизмов кардинально меняется. Это обстоятельство определяет

направленность дальнейших исследований микробиоты кожи.

97

98

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК 1. Акрут А.М. Микроэкология кожи при псориазе: автореф. дис. …

канд. мед. наук. – Волгоград, 2003. – 24 с.

2. Аленушкина А.В. Медицинская микробиология : учебное пособие. –

Ростов н/Д. : Феникс, 2003. – 480 с.

3. Алиева П.М. Эпидемиология атопического дерматита,

иммунологические механизмы предрасположенности и

иммунокорригирующая терапия: автореф. дис.… д-ра мед. наук / П.М.

Алиева. – М., 1992. – 22 с.

4. Аравийский Р.А., Горшкова Г.И. Практикум по медицинской

микологии. – СПб. : Медицина, 1995. – 215 с.

5. Безопасность жизнедеятельности / под ред. С.В. Белова. – М. :

Высшая школа, 1999. – 448 с.

6. Беляев Е.Н., Халитов Р.И. Влияние факторов производственной

среды на заболеваемость // Материалы VII Всероссийского съезда

гигиенистов и санитарных врачей. – М., 1998. – С. 3-8.

7. Билай В.И., Курбацкая З.А. Определитель токсинообразующих

грибов. – Киев : Наукова думка, 1990. – 237 с.

8. Бондаренко В.М., Боев Б.В., Лыкова Е.А., Воробьев А.А.

Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта // Российский журнал

гастроэнтерологии, гепатологии, колопрактологии. – 1998. – №1. – С.66-70.

9. Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериозы

кишечника у взрослых. – М. : КМК, 2003. – 224 с.

10. Бондарь С.А., Ляшенко И.Н., Луцюк Н.В. Значение

эндоинтоксикации в патогенезе экземы и ее коррекция комплексной

терапией с включением сорбента // Вестник дерматологии. – 1992. – № 8. –

С.49-52.

98

99

11. Бугеро Н.В. Влияние условий литейного производства на

микробиоценоз кишечника человека: автореф. дис. … канд. биол. наук. –

Ульяновск, 2004. – 23 с.

12. Бактериально-грибковые ассоциации кишечника в условиях

колонизации дрожжеподобными грибами рода Candida / О.В. Бухарин,

А.В. Валышев, Н.Б. Перунова, О.Е. Челпаченко, А.Р. Миронова, А.В.

Тарасевич // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. –

2002. – №5. – С. 45-48.

13. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Хлопко Ю.А. Медико-экологические

аспекты микросимбиоценоза человека // Экология человека. – 2010. – №8.

– С. 28-31.

14. Важбин Л.Б. Псориаз и очаги фокальной инфекции в лор-органах /

Л.Б. Важбин // Вестник дерматологии и венерологии. – 1995. – № 6. –

С. 39-40.

15. Васильев А.С., Баландович Б.А. Некоторые вопросы исследования

факторов производственной среды в современных условиях // Материалы

II Международной научно-практической конференции. – Пенза, 1999. –

С.52-53.

16. Васильев О.Д., Воробейчиков Е.В., Гранстрем К.О. Плесневые грибы

внутрибольничных аэрозолей г. Санкт-Петербурга // Материалы 3-го

Международного микологического симпозиума «Патогенез, диагностика и

терапия микозов и микогенной аллергии». – СПб., 1995. – С.32.

17. Величковский Б.Т. Фибригенные пыли. Особенности строения и

механизма биологического действия. – Горький, 1989. – 258 с.

18. Воробьев А.А., Иноземцева Л.О., Несвижский Ю.В. Особенности

микрофлоры толстого кишечника при инфекционном эндокардите //

ЖМЭИ. – 1996. – № 1. – С. 70-74.

99

100

19. Воробьев А.А., Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А.

Дисбактериозы – актуальная проблема медицины // Вестник РАМН. –

1997. – №3. – С.4-7.

20. Воробьев А.А., Борисова Е.В., Моложавая О.С. Иммуносупрессивное

действие патогенных грамотрицательных бактерий // Вестник РАМН. –

2001. – №2. – С.21-25.

21. Воробьев А.А., Лыкова Е.А. Бактерии нормальной микрофлоры:

биологические свойства и защитные функции // Микробиология. – 1999. –

№6. – С.102-105.

22. Воробьев А.А., Несвижский Ю.В., Липицкий Е.М. Исследование

пристеночной микрофлоры кишечника человека // Микробиология. – 2003.

– №1. – С.60-63.

23. Гаврилова А.Ю. Лактофлора и колонизационная резистентность //

Антибиотики и мед. биотехнология. – 1991. – Т.32, №3. – С.173-179

24. Гамиля М.А. Респираторные микоаллергиозы и пневмомикозы у

детей: автореф. дис. …канд. мед. наук. – СПб., 2000. – 21 с.

25. Гладков Л.С. Условия труда и состояние здоровья рабочих,

подвергающихся воздействию сложных аэрозолей современного

литейного производства: автореф. дис. … д-ра мед. наук. – М., 1990. – 51 с.

26. Дадиани К.Р., Пименова В.В., Двали Т.Н., Эллер К.И.,

Кверенгхиладзе Р.Г., Тутельян В.А. Гигиеническая характеристика

производственной среды мукомольных предприятий // Гигиена и

санитария. – 1992. – №11. – С.45-49.

27. Дегтяр Ю.С., Добродеева Л.К. Особенности гормонального статуса у

больных экземой и другими дерматозами в условиях // Вестник

дерматологии и венерологии. – 2000. – № 5. – С. 50-53.

28. Джоунз Р.Д. Действие антибактериального мыла на микрофлору

кожи // Вестник дерматологии и венерологии. – 2000. – №1. – С.9-12.

100

101

29. Довжанский С.И. Качество жизни – показатель состояния больных

хроническими дерматозами // Вестник дерматологии и венерологии. –

2001. – № 3. – С. 12-13.

30. Ермолаев Д.О. Показатели иммунитета у больных // Материалы

науч. исследований по основным направлениям вуза. – Астрахань, 1996. –

С. 144-146.

31. Жилов Ю.Д. Справочник по медицине труда. – М. : Медицина, 1995.

– 175 с.

32. Загороднева Е.А. Колонизация условно-патогенными

энтеробактериями различных биотопов тела человека при нарушении

микроэкологии кишечника: автореф. дис. … канд. мед. наук. – Волгоград,

2002. – 22 с.

33. Зайкирова М.А., Ибрагимова Т.З., Джураева М.И., Литвиненко Н.Т.,

Апполонова Г.М. Гигиеническая характеристика условий труда и

заболеваемости на современных предприятиях по переработке хлопковых

семян // Гигиена и санитария. – 1992. – №5-6. – С.72-78.

34. Захаров В.А. Факторы риска в производстве растительного масла и

оптимизация здоровья работающих: автореф. дис. … канд. мед. наук. – М.,

2001. – 21 с.

35. Зингер Ф.Х., Суханов В.В., Сорокин Е.С., Землякова Л.Ф. Влияние

нагревающего микроклимата на развитие пневмокониоза // Врачебное

дело. – 1979. – №1. – С.19-21.

36. Знаменский В.А., Дегтяр Н.В., Кузьминский С.Н.

Микробиологическая диагностика дисбактериоза. – Киев : Наукова думка,

1986. – 231 с.

37. Иванов А.А. Микроэкология кожи человека и ее взаимосвязь с

иммунным статусом организма // Материалы науч.-практ. конференции. –

М., 1989. – С.3-11.

101

102

38. Измеров Н.Ф. Медицина труда. – М. : Медицина, 2002. – 428 с.

39. Калтаев К.К., Капцов В.А. Клинико-гигиенические аспекты

асбестообусловленных заболеваний легких // Гигиена и санитария. – 2000.

– №2. – С.21-26.

40. Калюжная Л.Д. Диагностические особенности атопического

дерматита // Врачебное дело. – 1987. – № 9. – С. 91-94.

41. Канарейкина С.К., Левина Е.К., Полферов В.А. Количественный и

видовой состав условно-патогенных энтеробактерий у клинически

здоровых и больных людей // Вопросы клинической лабораторной

диагностики. – 1981. –Т.12, №2. – С.56-58.

42. Кацнельсон Б.А. Некоторые вопросы гигиенической регламентации

фиброгенных пылей в воздухе рабочей зоны // Медицина труда и

промышленная экология. – 1994. – №5-6. – С.18-20.

43. Кириленко О.А., Егорова З.Е. Влияние относительной влажности

воздуха и сопутствующей микрофлоры на образование афлатоксинов в

пищевых концентратах // Микробиология. – 1985. – Т.47, №1. – С.52-56.

44. Кислицина Н.С., Привалова Л.И., Шарапова Н.Е. О групповой

гигиенической регламентации пыли магнезиально-силикатных материалов

и огнеупорных материалов из них // Медицина труда и промышленная

экология. – 1993. – №3. – С.11-12.

45. Клемпарская Н.Н. Изменения микрофлоры кожи при действии на

организм экзогенных и эндогенных факторов // Материалы науч.-практ.

конференции. – М. 1989. – С.12-23.

46. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Галстян Г.М. Инвазивный аспергиллез у

иммуноскомпрометированных больных // Терапевтический архив. – 2003.

– Т.75, №7. – С.63-68.

47. Коляденко В.Ф., Каштанов Т.Н., Иванова Г.А. Колонизационная

резистентность верхних дыхательных путей и кишечника у детей раннего

102

103

возраста, больных острой пневмонией, отягощенной госпитальной

инфекцией // Колонизационная резистентность и химиотерапевтические

антибактериальные препараты. – М. : Медицина, 1988. – Т.1. – 215 с.

48. Кочеровец В.И., Перегудов С.И., Ханевич М.Д. Синдром избыточной

колонизации тонкой кишки // Антибиотики и химиотерапия. – 1992. – Т.37,

№3. – С.39-44.

49. Кочеткова Т.А. Сравнительная морфологическая характеристика

экспериментальных пневмокониозов от неорганической и органической

пыли // Вопросы гигиенической оценки органических и минеральных

пылей сложного химического состава. – М., 1976. – С.86-89.

50. Крамарь В.С. Пространственная структурная иерархия

микроорганизмов в биоценозе кожи // Вестник Волгоградского

государственного медицинского университета. – Волгоград, 2003. – Т.58.

Вып.9. – С.23-27.

51. Красильников А.П. Основы клинической микробиологии //

Медицина и микробиология, вирусология и иммунология. – М. :

Медицина, 1994. – С.483-496.

52. Крыстев Л.П., Васильев Т.А., Борисов Б.И. Морфологические и

морфометрические исследования печени белых крыс при недостаточном

питании и хронической афлатоксиновой интоксикации // Вопросы

питания. – 1984. – №1. – С.57-60.

53. Курило С.Н. К патогенезу хронического пылевого бронхита //

Медицина труда и промышленная экология. – 1999. – №4. – С.21-22.

54. Куцевалова О.Ю. Микробные биоценозы при гнойной

хирургической инфекции мягких тканей: автореф. дис. … канд. биол. наук.

– Ростов н /Д., 2005. – 21 с.

55. Лещенко В.М. Аспергиллез. – М. : Медицина, 1973. – С.156-157.

103

104

56. Лисишникова Л.П. Особенности микробиоценоза основных

биотопов организма человека в условиях Европейского Севера России:

автореф. дис. … канд. биол. наук. – Архангельск, 1997. – 25 с.

57. Лобзин Ю.В., Макаров В.Г., Корвякова Е.Р., Захаренко С.М.

Дисбактериозы кишечника. – СПб. : Фолиант, 2003. – 256 с.

58. Львова Л.С., Шульгина А.П., Шатилова Т.И. Биосинтез

микотоксинов грибами рода Aspergillus и Peniсillium, выделенных из зерна

// Прикладная биохимия и микробиология. – 1978. – №5. – С.735-741.

59. Мазурина Н.А. Значение стафилококковой инфекции в

манифестации и тяжелых обострениях детской экземы у детей раннего

возраста / Н.А. Мазурина, В.К. Котлуков, Н.Ю. Егорова и др. // Педиатрия.

– 1996. – № 3. – С. 60-63.

60. Мирошникова Г.И. Состояние кожи у рабочих, подвергающихся

хроническому воздействию природного газа и продуктов его переработки

с высоким содержанием сероводорода: автореф. дис. … канд. мед. наук. –

Астрахань, 1995. – 22 с.

61. Митрохин С.Д., Никушкин Е.В. Современная система мониторинга

за микробной экологией кишечника человека // Практикующий врач. –

1998. – №12. – С.42-43.

62. Намазбаева З.И., Джангозина Д.М., Меркурьев Р.В. Структурно-

биохимическая характеристика гликоньюгантов альвеолярных макрофагов

при действии фиброгенных пылей // Медицина труда и промышленная

экология. – 1993. – №1. – С.18-20.

63. Немова И.С., Потатуркина-Нестерова Н.И., Ильина Н.А. Изменение

мико-флоры кожи рабочих в условиях комбикормового завода // Вестник

Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. – 2006. – №1. –

С.29-30.

104

105

64. Несмеянова Н.Н. Оценка микробоценозов и резистентности

организма пожарных и газоспасателей, подвергающихся воздействию

комплекса токсических веществ: автореф. дис. … канд. биол. наук. –

Иркутск, 2007. – 26 с.

65. Нестеров А.С. Особенности патогенеза и терапии хронических

дерматозов при бластоцистной инвазии: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. –

СПб., – 2009. – 43 с.

66. Нехорошев А.С., Захаров А.П., Шибаев В.И. Эколого-гигиеническая

оценка влияния химического фактора производственной среды // Вестник

СПб ГМА им. И.И.Мечникова. – 2003. – №4. – С.191-192.

67. Никифоров В.А., Шкарин В.В. Медицинская микробиология. –

Н. Новгород : НГМА, 2000. – 248 с.

68. Нобл У.К. Микробиология кожи человека. – М. : Медицина, 1986. –

496 с.

69. Носов В.Б. Безопасность труда. – М. : Машиностроение, 1994. –

144 с.

70. Онищенко Г.Г. Критерии опасности загрязнения окружающей среды

// Гигиена и санитария. – 2003. – №6. – С.3-4.

71. Онищенко Г.Г. О состоянии условий труда, профессиональной

заболеваемости и мерах по их нормализации в Российской Федерации //

Эколого-гигиенические проблемы сохранения здоровья населения.–

Москва – Н. Новгород, 1999. – С.9-20.

72. Определитель бактерий Бержи / под ред. Дж. Хоулта. – М. : Мир,

1997. – 432 с.

73. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма

человека. – М.: Медгиз, 1955. – 219 с.

74. Першина Е.В. Молекулярная идентификация микробиомов //

Сельскохозяйственная биология. – 2013. – №4. – С.76-87.

105

106

75. Петровская В.Г., Марко О.П. Микрофлора человека в норме и при

патологии. – М. : Медицина, 1976. – 232 с.

76. Пинигина М.А., Черепова Е.М., Сафиуллина А.А., Петрова И.В.,

Мухамбетова Л.Х., Осипова Е.М., Веселова А.П. Эпидемиологическое

обоснование ПДК зерновой пыли в атмосферном воздухе // Гигиена и

санитария. – 1998. – №4. – С. 56-58.

77. Подволоцкая А.Б. Функциональная характеристика аутомикрофлоры

детей младшего школьного возраста в условиях техногенного загрязнения

среды: автореф. дис. … канд. мед. наук. – Владивосток, 2000. – 31 с.

78. Ползик Е.В., Шеметова М.В., Казанцева В.С., Якушева М.Ю. К

профилактике профессионального пылевого бронхита // Гигиена и

санитария. – 1999. – №6. – С.18-24.

79. Пономарева Ж.В. Особенности течения и терапии микробной экземы

у жителей Архангельской области: автореф. дис. … канд. мед. наук. – М.,

2007. – 18 с.

80. Потапов А.И., Гильденскиольд Р.С., Волкотруб Л.П. Наземно-

космический гигиенический мониторинг качества окружающей среды //

Гигиена и санитария. – 2002. – №2. – С.12-15.

81. Потапов М.П., Литвиненко В.С., Бухарбаева А.С. Загрязненность

продуктов питания афлатоксином В1 в Целиноградской области //

Материалы I Всероссийской конференции «Чужеродные вещества в

пищевых продуктах». – Алма-Ата, 1979. – С.17-18.

82. Потатуркина-Нестерова Н.И., Гладинец А.М. Микромицеты

Aspergillus flavus и их воздействие на макроорганизм. – Ульяновск : УлГУ,

2003. – 204 с.

83. Рассказов Н.И., Алтухов С.А. Показатели иммунного статуса

школьников, больных АД в стадии ремиссии // Актуальные вопросы

дерматологии и венерологии: сб. тр. РМГУ. – М., 1997. – С. 22-24.

106

107

84. Реброва Р.Н., Бирюков В.В., Коноплева В.И. Грибы рода Candida в

микробном биоценозе детей, персонала и помещений дома ребенка //

Материалы 3-го микологического симпозиума. – СПб., 1995. – С.108.

85. Резник С.Р., Смирнов В.В., Сытник С.И. Действие микробов

антагонистов на кокковые бактерии кожи // Микробиология. – 1988. – Т.50,

№4. – С.82-88.

86. Ретнев В.М., Шляхецкий Н.С., Петрук Ю.А. Методические подходы

к интегрально-сравнительной оценке условий труда и состояния здоровья

работников // Предпатология: проблемы и решения : материалы науч.-

практ. конференции – Минск : Бел. навука, 2000. – С.41-45.

87. Ришко Е.Ю. Аутофлора кожи в области биологически активных

точек как индикатор здоровья пациентов с бронхолегочной патологией и

критерий оценки эффективности их иглорефлексотерапии: автореф. дис.

… канд. мед. наук. – Владивосток, 2004. – 26 с.

88. Романенко Э.Е., Батуро А.П., Улиско И.Н. Сравнительная

характеристика микрофлоры слизистых верхних дыхательных путей при

бронхиальной астме и персистирующем аллергическом рените //

Микробиология. – 2005. – №2. – С.61-65.

89. Рыжков М.Г. Профессиональный риск ущерба здоровью работающих

на предприятиях сахарной промышленности и обоснование мер

профилактики: автореф. дис. … канд. мед. наук. – М., 2000. – 25 с.

90. Селисский Г.Д. Эпидемиология профессиональных заболеваний

кожи // Вестник дерматологии и венерлогии. – 1992. – №9. – С.45-49.

91. Сенкевич Н.А., Васильева О.С. Профессиональные заболевания

органов дыхания от воздействия основных видов сельскохозяйственной

пыли // Гигиена труда и профессиональные заболевания. – 1982. – №6. –

С.1-5.

107

108

92. Скепьян Н.А. Лечение хронического бронхита от воздействия

минеральной и органической пыли // Медицина труда и промышленная

экология. – 1999. – №8. – С.31-33.

93. Соболев А.В. Аллергические заболевания органов дыхания,

вызываемые грибами: автореф. дис. … д-ра мед. наук. – СПб., 1997. – 42 с.

94. Солнцева В.К., Быков А.С., Воробьев А.А., Иванов О.Л.

Микробиоценоз кожи больных хроническими дерматозами // Журнал

микробиологии, иммунологии и вирусологии. – 2000. – №6. – С.51-55.

95. Степанов С.А. Влияние нативной и обеспложенной зерновой пыли

на органы дыхания // Гигиена и санитария. – 1969. – № 2. – С.107-109.

96. Сытник И.А. Заселение тонкой и толстой кишок детей раннего

возраста стафиллококами в условиях стационара // Кишечные инфекции. –

Киев, 1989. – Вып.2. – С.97-101.

97. Сытник С.И. Экологический подход к оценке кожной микрофлоры //

Антибиотики и химиотерапия. – 1989. – Т.34, №6. – С.466-472.

98. Трапезов Е.В., Леонтьева Н.И., Бондаренко В.М. Микробная

экология пищеварительного тракта у больных острыми кишечными

инфекциями // Микробиология. – 1992. – №3. – С.25-29.

99. Фицпатрик Т. Дерматология / Т. Фицпатрик // Атлас-справочник /

пер. с англ. – М. : Высшая школа, 1999. – 1044 с.

100. Фролов А.Ф., Зарицкий А.М., Фельдман Ю.М. Новые принципы и

критерии оценки патогенных и условно-патогенных микроорганизмов //

Микробиология. – 1986. – №9. – С.93-97.

101. Чахава О.В. Гнотобиология о микрофлоре организма хозяина и

антибиотикотерапии // Антибиотики и медицинская биотехнология. –

1987. – Т.32, №3. – С.170-173.

108

109

102. Чахава О.В., Горская Е.М., Рубак С.З. Микробиологические и

иммунологические основы гнотобиологии. – М. : Высшая школа, 1982. –

160 с.

103. Чернышов В.Н. Характеристика микробной флоры кожи при

различных клинических вариантах аллергических дерматозов у детей /

В.Н. Чернышов, А.Е. Эссель, А.А. Лебеденко // Вестник дерматологии и

венерологии. – 1991. – № 10. – С. 35-39.

104. Чубенко С.С., Толмач Д.В. Роль заболеваний органов пищеварения в

развитии дерматозов // Врачебное дело. – 1986. – № 6. – С. 28-30.

105. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма. – М.: Медицина, 1985. –158 с.

106. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное

питание. – М. : Медицина, 1998. – Т.1. – С.14-17.

107. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора человека и некоторые

вопросы микроэкологической технологии // Антибиотики и медицинская

биотехнология. – М., 1987. – №3. – С.164-170.

108. Шмелев Е.И. Качество жизни больных хроническими

обструктивными болезнями легких // Пульмонология. – 1998. – №2. – С.23-

27.

109. Шукюров Т.Ш., Керимова Д.Д. Влияние промышленных нефтей

Апшерона на микрофлору кожи у рабочих нефтедобывающей

промышленности // Вестник дерматологии и венерологии – 1991. – № 9. –

С. 25-28.

110. Шукюров. Т.Ш., Керимова Д.Д. Влияние промышленных нефтей

Апшерона на микрофлору кожи у рабочих нефтедобывающей

промышленности // Вестник дерматологии и венерологии. – 1991. – №9. –

С.25-28.

109

110

111. Янчевская Е.Ю. Функциональное состояние кожи работников завода

по переработке газа с высоким содержанием сероводорода: автореф. дис.

… д-ра. мед. наук. – М., 2001. – 50 с.

112. Bolton M., De Matos P. Groopman G. Molecular dosimetry of aflatoxin in

chemoprevention treals with oltiprax // J. Cell Biochem. – 1991. – V.1571. –

P.28.

113. Brockow K. Effect of gentian violet, corticosteroid and tar preparations in

Staphylococcus aureus colonized atopic eczema / K. Brockow, P. Grabenhorst,

D. Abeck et al. // Dermatology – 1999. – V. 199(3). – P. 231-236.

114. Creppy E. E., Derheimer G. Toxicite de Toch-ochratoxine A, une

mycotoxine contaminant les aliments de I aminal // Cah. nutr. et diet. – 1991. –

№5. – P.342-348.

115. Duma R. Gram-negative bacillary infections. Pathogenic and

pathophysiologic correlates // Amer. J. Med. – 1985. – V.78, №6. – P.154-164.

116. Ernst E.J. Colonic irrigation and the theory of autointoxication: a triumph

of ignorance over science / E.J. Ernst // J. Clin. Gastroenterol. – 1997. – V. 24. –

P. 196-198.

117. Fan J.J. Antibacterial treatment of gastric ulcers associated with

Helicobacter pylori // N. Engl. J. Med. – 1998. – V.332, №3. – P.139-142.

118. Fry L. The gut and the skin / L. Fry // Postgrad. Med. J. – 1970. –

V. 46(541). – P. 664-670.

119. Gardner M.L. Gastrointestinal absorption of intact proteins / M.L.

Gardner // An. Rev. Nutr. – 1988. – V. 8. – P. 329-350.

120. Henseler T. Disease concomitance in psoriasis / T. Henseler,

E. Christophers // J. Am. Acad. Dermatol. – 1995. – V. 32. – P. 982-986.

121. Humbert P. Intestinal permeability in patients with psoriasis / P. Humbert,

A. Bidet // J. Dermatol. Science. – 1991. – V. 2. – P. 324-326.

110

111

122. Kloos W., Schlifer K. Isolation and characterization of staphylococci from

human skin // International J. of systematic Bacteriology. – 1975. – V.25, №1. –

P. 62-79.

123. Kobayashi H. Skin Disinfection. In: The Skin Microflora and Microbial

Skin Disease. Ed. W.C. Noble. Cambridge: Univ Press, 1992. – P.373-386.

124. Konzen J.L. Occupational exposure to dast and lung diseose amoug sheet

nutal workers // Occop. Environ. Med. – 1958. – V.51, №2. – P.141-142.

125. Lippman M., Albert R. The effect of particles size on the regional

deposition of inhaleb aerosol in the human respiratory tract // Amer. Industr.

Hyg. Ass. J. – 1989. – V.30, №3. – P.257-275.

126. Lowbury E. Topical Antibacterials: Perspectives and Issues. In: Skin

Microbiology, Relevance to Clinical Infection. Eds. H. Maibach. R. Aly. New

York: Springer-Verlag, 1981. – P.158-168.

127. Lowy F., Hammer S. Staphylococcus epidermidis infection // Ann. Intern.

Med. – 1983. – V.99, №6. – P.834-839.

128. Mielants H. The evolution of spondyloarthropaties in relation to gut

histology. Relation between gut and joint / H. Mielants, E.M. Veys //

Rheumatol. – 1995. – V. 22. – P. 2279-2284.

129. Neu N. The role of Pseudomonas aeruginosa in infections //

J. Antimicrob. Chemother. – 1983. – V.11, №13. – P.2-13.

130. Oh J., Byrd AL., Deming C., Conlan S.; NISC Comparative Sequencing

Program, Kong HH2, Segre JA3. Biogeography and individuality shape function

in the human skin metagenome // Nature. 2014 Oct 2;514 (7520):59-64. doi:

10.1038/nature13786.

131. Perrin-Fayolle M. Bronchiolits obliterans in abults // Presse - Med. –

1995. – V.24, №7. – P.54-59.

132. Person J.P. Autointoxication revisited / J.P. Person, J.D. Bernhard //

J. Am. Acad. Dermatol. – 1986. – V. 15. – P. 559-563.

111

112

133. Pietrzak A. Changes in the digestive system in patients suffering from

psoriasis / A. Pietrzak, B. Lecewicz-Torun // An. Univ. Maria Curie-

Sklodowska [Med]. – 1998. – V. 53. – P. 187-194.

134. Roht R.R., James W.D. Microbiology of the skin: resident flora, ecologi,

infection // J Am Acad Dermatol. – 1989. – V.20. – P.367-390.

135. Rosenbury T. Microorganismus indigenous to man. – N.Y.: McGraw Hill,

1966. – 203 p.

136. Saarela V., Lahteenmaki L., Crittenden R. Gut bacteria and health foods –

the European perspective // Int. J. Food Microbiol. – 2002. – V.78. – P.99-117.

137. Scarpa R. Microscopic inflammatory changes in colon of patients with

both active psoriasis and psoriatic arthritis without bowel symptoms / R. Scarpa,

F. Manguso // J. Rheumatol. – 2000. – May. – № 27(5). – P. 1241-1246.

138. Schatteman L. Gut inflammation in psoriatic arthritis: a prospective

ileocolonoscopic study / L. Schatteman, H. Mielants // J. Rheumatol. – 1995. –

V. 22. – P. 680-683.

139. Shenderov B. Microecological aspects of modern diseases in man //

Microecology ant therapy: Proceedings of the 10-th International Sumposium on

gnotobiologi. – Leiden, 1990. – V.20. – P.485-488.

140. Solberg C. A study of carriers of Staphylococcus aureus // Acta Medica

Scandinavica. – 1965. – V.1. – P.178-200.

141. Tannock G.W. The normal microflora: new concepts in health promotion

// Microbiol. Sciences. – 1988. – V.5, №1. – P.4-8.

142. Weinberg A., Swartz M. Dermatology in general medicine // Mc. Graw

Hill. – 1997. – Ch.175. – Р. 2089-2099.

143. Wikswo JP. The relevance and potential roles of microphysiological

systems in biology and medicine. // Exp Biol Med (Maywood). 2014 Sep;239

(9):1061-72. doi: 10.1177/1535370214542068.

112

113

144. Winterbhalter J. Umwelfreundliche Giessereitechik – Lufterenhaltung,

Arbeitsschutz, Recycling // Giessere Rdsch. – 1983. – V.30, №6. – P.7-11.

145. Yarwood I.M., Leung P.Y., Schlievert P.M. Evidence for the involvement

of bacterial superantigens in psoriasis, atopic dermatitis, and kanasaki syndrome

// FEMS Microbiol. Lett. – 2000. – V.192, №1. – P.1-7.

146. Yates V.M. Further evidence for an association between psoriasis,

Crohn’s disease and ulcerative colitis. / V.M. Yates, G. Watkinson // Br. J.

Dermatol. – 1982. – V. 106. – P. 323-330.

147. Yshihera N., Matsushiro T. Le aflatossine // Arch. Environ. Hlth. – 1986.

– V.41, №5. – P.324-330.

113

114

Научное издание

ПОТАТУРКИНА-НЕСТЕРОВА Наталия Иосифовна ФАЛОВА Оксана Евгеньевна НЕМОВА Ирина Сергеевна

ОНИЩЕНКО Наталья Сергеевна

МИКРОБИОТА КОЖИ В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ

Редактор Н. А. Евдокимова

ЛР № 020640 от 22.10.97 Подписано в печать 28.11.2014. Формат 60×84/16.

Усл. печ. л. 6,74. Тираж 100 экз. Заказ 1258.

Ульяновский государственный технический университет, 432027, Ульяновск, ул. Северный Венец, 32.

ИПК «Венец» УлГТУ, 432027, Ульяновск, ул. Северный Венец, 32.