Patología molecular, ¿cómo se me ocurrió…?

Julián Sanz Ortega

Datos personales

Formación universitaria

Zaragoza, 1982-83 Universidad Complutense, 1983-88

Médico especialista en

Anatomía Patológica

1990-

1993

National Cancer Institutes,

Bethesda

• Beca MEC (FIS)

“Ampliación de

estudios”: 1994

(1 año)

• NIH Guest

researcher: enero

1995-abril 1996

1994-

1995

• Curso NIH “Concepts in

molecular biology”, Mark

Sobel

• Múltiples cursos y

conferencias

• Técnicas:

– PCR

– Northers blot

– Secuenciación

– Clonación

– Restricción

enzimática

– Microdisección

• Molecular Pathology Fellowship (Dr. Sobel):

– Cursos y Seminarios.

– Proyectos investigación y técnicas.

• Anatomía Patológica (Dra. Merino):

– Investigación.

– Asistencia.

• Investigación propia.

Infraestructura

• Laboratorio 5, Unidad de investigación

(1996-7) Anatomía Patológica 1 (1997-).

• Personal: 2 biólogos (uno desde 1997, otro desde

2000), 1 técnico Anatomía Patológica, 1 becario

(2004-). Patólogos del servicio.

• Inventariable:

– Propio: Termocicladores, baños, congeladores,

electroforesis, estufas, balanzas, pHmetros, campana

UV, transiluminadores, Tissue-arrayer…

– Compartidos: Secuenciador AB, Microarrays….

CURSOS Y SEMINARIO RECIBIDOS:

• Symposium Internacional de Neuropatología- Madrid 1990.

• Curso Internacional de Patología- San Sebastián 1990.

• I Curso de Iniciación a la investigación y Estadística. Hospital Clínico. Madrid 1991.

• I Curso de Biología Molecular. Hospital Clínico. Madrid 1992.

• IV Curso Internacional de la Fundación Ramón Areces- Madrid 1993.

• Curso Internacional de Patología-San Sebastián 1993.

• "Radiation Safety course" , NCI, NIH, Bethesda, USA, 1994.

• "Concepts in Molecular Biology". NCI; NIH, Bethesda ,USA, 1994.

• "Working safely with HIV and other pathogens in the research Laboratory", NIH,, USA 1995.

• "Radiation safety refresher training", NCI, NIH, Bethesda, USA, 1996.

• II INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON MOLECULAR DIAGNOSIS IN MEDICINE (Dr. García Foncillas), Madrid, Noviembre 1998.

• EUROPEAN SEQUENCING TOUR, Amersham Pharmacia Biotech, Madrid Octubre 1998.

• SEMINARIO DE DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES GENETICAS, PE, Madrid 2000.

• “Los bancos de tumores y la investigación oncológica”, CNIO, Noviembre 2000.

• “Tissue arrays 2002”; CNIO, 2002.

• CNIO_NCI MEETING: “Advances in cancer research”, CNIO, 2003.

• “Patología Molecular en el contexto de la morfología celular y tisular”, DAKO, Madrid 2004..

• Agilent 2100 bioanalyzer user meeting, 2005

• “Linfomas claves para el diagnóstico en la práctica diaria”; SEAP, Madrid 2006.

• BIOMED2/EUROCLONALITY: Clonality asessment in Pathology, Barcelona 2006.

• “Simposio de Investigación traslacional en Cáncer”. CNIO, Madrid, 2006,

• CURSO DE ESTADISTICA SPSS, HCSC, 2006.

• XXX REUNION ANUAL DE LA SEAP. Simposio mama. Curso de Patología Uterina, Madrid 2007.

Técnicas

• Citometría de flujo (estómago, colon)

• Morfología (colon)

• Inmunohistoquímica (todos)

• Hibridación in situ (todos)

• Cuantificación vascular (estómago, colon).

• Tissue-microarrays (pulmón, colon, estómago, GIST, meningiomas..)

• Microarray de cDNA (pulmón)

Técnicas

• Supervisor de instalaciones radiactivas

desde 1997.

• PCR a tiempo real, desde 20010

• Secuenciación SANGER desde 1994

• FISH, CISH, SISH desde 2000

• NGS 2012…

ANATOMIA PATOLOGICA 1

PATOLOGÍA MOLECULAR

SOLICITUD DE ESTUDIO MOLECULAR Nº:

DATOS DE IDENTIFICACIÓN DEL PACIENTE

Paciente

Nombre y Apellidos:

Historia : Fecha nacimiento:

MATERIAL REMITIDO

Nº de Anatomía Patológica.......................................

Tipo de muestras (indicar número):

DATOS CLÍNICOS DE INTERÉS PARA EL DIAGNÓSTICO

ANATOMOPATOLÓGICO

Resumen de la historia clínica y antecedentes:

Otras datos:

ESTUDIOS QUE SE SOLICITAN

Petición tejido Microdisección Macrodisección

Reordenamiento inmunoglobulina IgH

FISH (especificar EWS, SYT, HER2/NEU, BCL2, CICLINA, EBERS..):

Solicitud de ESTUDIO DE INESTABILIDAD DE MICROSATELITES

Inmunohistoquímica genes reparadores (MLH1, MSH2, MSH6, PMS2)

mutaciones – secuenciación: EGFR (Exón, 18,19,20,21)

mutaciones – secuenciación: c-kit y PDGFR (Exón, 9, 11,13)

PCR infeccioso (especificar virus bk, Whipple, HBV, EBERS..):

Otras (especificar):

RESULTADO Firma médico responsable:

Fecha de solicitud:

Tfno información: 913303822, Anatomía Patológica, Hospital Clínico San Carlos

Responsable sección: Dr Sanz Ortega

Año 2006: 180 solicitudes

(excluyendo Her2/neu)

Docencia en Pregrado

• Asignaturas troncales- obligatorias:

– Anatomía Patológica (3ºMedicina).

– Clínica Integrada (6ºMedicina) Coordinador (2003-).

– Anatomía Patológica general (2º Odontología) (1996-2005)

• Nuevas herramientas:

– Asignaturas de libre elección: “Metodología básica de

investigación en ciencias de la salud.” (MBI) desde 1998-99 ,

“Met. Investigación avanzada..” (MIA), desde 2005-06

– Red de Tutores.

– Congresos de investigación en Pregrado.

1996-

COORDINADOR-RESPONSABLE

PROYECTO DE INNOVACION EDUCATIVA (P120)

Universidad Complutense de Madrid: “Desarrollo y virtualización de la

asignatura Metodología básica de investigación en ciencias de la

salud”. Vicerrectorado de Innovación y Espacio Europeo de

Educación Superior, (convocatoria 2005).

Red de tutores y temas de

investigación

• A.- Departamento de Medicina Preventiva

• B.- Hospital Central de la Defensa.

• C. Hospital Clínico San Carlos

• D. Hospital 12 de Octubre

• E. Hospital Gregorio Marañón.

• F. Diplomatura de Nutrición. Humana y Dietética ( Medicina)

• G. Diplomatura de Terapia Ocupacional. (Fac Medicina)

• H. E. Enfermería y Fisioterapia

• I. E. Podología

• I. Escuela de Óptica

• J. Facultad de Biológica

• K. Facultad de Farmacia

• L. Facultad de Odontología

• M. Facultad de Veterinaria

Juan Rosai

Darryl Carter

Maria Merino

“Update in surgical

pathology”

2005 2006 2007

December, 2007

Director: Julián Sanz Ortega

Acreditado por SEAFORMEC con 1.6 créditos.

180 asistentes: Autoevaluación 80% puntuó 5 (0-5).

Ponentes: Maria Merino, Mark Sobel, Mark Stoler, Manuel

Sobrinho-Simoes, Fátima Carneiro, Miguel A Piris,

Enrique de Alava, Antonio Cardesa, Dolores Lozano,

Luis Ortega, Jose A Asenjo, Eduardo Díaz Rubio,

Julián Sanz Ortega y Julián Sanz Esponera.

2005

Tumores de partes blandas:

Diagnóstico y Patología

molecular

Director: Julián Sanz Ortega

Madrid, 14-15 de Diciembre, 2006

Acreditado por SEAFORMEC con 1.6 créditos.

Se inscribieron 150 asistentes.

Ponentes: Markku Miettinen (AFIP), Jean M Coindre, Henryk Domanski,

Xavier García Muro (GEIS), Mark Sobel (ASIP), Miguel A Piris (CNIO),

Enrique de Alava (CIC), Luis Ortega, Juan Corona, Antonio Casado, Julián

Sanz Ortega y Julián Sanz Esponera.

2006

“Update in surgical

pathology”

Director: Julián Sanz Ortega

Juan Rosai

Darryl Carter

Maria Merino

Técnicas moleculares en

diagnóstico

• Morfología como control de calidad.

• Banco de tumores. ISO 2000:9000.

• Control de sensibilidad y especificidad.

• Protocolos y Controles.

• Especificidad 100%,

• sensibilidad 70% en gel,

• 85% en secuenciador.

Reordenamientos de IgH

(Fragmentos V-J):

Consejo genético:

Inestabilidad a Microsatelites y expresión de genes reparadores. Cáncer de Colon.

Bat

25

Bat

26

346

(APC)

Tejido

Normal.

CN32

Tejido

Tumoral.

CT32

Estudio de Filiación: Microsatélites:

Errores de filiación

Metástasis de laboratorio

Confirmación de identidad

Dos bloques de parafina con el

mismo número:

A B

Aplicaciones TMA:

genómica y proteómica

• Inmunohistoquímica

• Hibridación in situ:

genotipo

(amplificaciones,

delecciones,

translocaciones)

– FISH

– CISH P16

Tranlocación gen

EWS (FISH separación)

www.ensembl.org (SNPs) K

ACTTCCTTATGATCACAAATGGGAGTTTCCCAGAAACAGGCTGAGT --

L--P--Y--D--H--K--W--E-=F=-P--R--N--R--L--S--F--G--K--T--

Mutaciones c-KIT (exón 11) y EGFR

(exón 18,19, 20, 21)

Gestión

Equipo

• Julián Sanz Esponera

Catedrático, jefe de servicio

• Julián Sanz Ortega.

• Elena Sierra (becaria)

• Carmen Saez (TTS, bióloga)

• Susana Hernández (TTS,

Bióloga)

• Técnicos: Mª Angeles

Bermúdez

José A López Asenjo, FEA

• Luis Ortega Medina, FEA

• Armando Martínez, Prof.

Titular, jefe de sección.

• Residentes: Melchor Saiz;

Juan Ruiz