遺伝子クローンと遺伝子ライブラリー

㈻

DNA RNA ∞

cDNA

DNA

㌹ mRNA cDNA

㈻

∞

基本概念

方法

cDNAライブラリーとゲノムライブラリーの違い (I)

cNDAライブラリーとゲノムライブラリーの違い (II)

㌹㌹

in vitro㈻㌹

㌹

3.3×109 bp ( )2×105

mRNA

1×106 PFU( 20kbp )

1×106 PFU, 1×106 CFUさ 々

λ P1YAC

λ

20 ~ 600kbp0.5 ~ 10kpa( 1.5kbp )

cDNA

々PFU:plaque forming unit; CFU: colony forming unit

ゲノムライブラリー作製法の原理

cDNAライブラリー作製法の原理

サブトラクション法（差分化法）

ある細胞や組織に特異的に発現されている遺伝子(cDNA)のみを持つcDNAライブラリーを作製する方法

ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR)PCR (Polymerase Chain Reaction)

K.B.Mullice

PCR法の原理と温度変化スケジュール

PCR法によるDNAの増幅

遺伝子クローニングにおけるPCRの応用

PCRの応用:血液試料中のウイルスゲノムの検出

PCRの法医学における応用>(I)

ヒトゲノムのいろいろな位置（遺伝子座）にはGTGTGTなどの短い反復配列が連なる領域があり、各領域の反復配列の数は４~４０の範囲で個人差がある。この反復配列は長さが多様な直列反復（VNTR）という。

DNA

PCRの法医学における応用 (II)

VNTR ↑↑

↑↑

VNTR

↓ “ ”