遺伝子クローンと遺伝子ライブラリー
㈻
DNA RNA ∞
cDNA
DNA
㌹ mRNA cDNA
㈻
∞
基本概念
方法
cDNAライブラリーとゲノムライブラリーの違い (I)
cNDAライブラリーとゲノムライブラリーの違い (II)
㌹㌹
in vitro㈻㌹
㌹
3.3×109 bp ( )2×105
mRNA
1×106 PFU( 20kbp )
1×106 PFU, 1×106 CFUさ 々
λ P1YAC
λ
20 ~ 600kbp0.5 ~ 10kpa( 1.5kbp )
cDNA
々PFU:plaque forming unit; CFU: colony forming unit
サブトラクション法(差分化法)
ある細胞や組織に特異的に発現されている遺伝子(cDNA)のみを持つcDNAライブラリーを作製する方法
ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR)PCR (Polymerase Chain Reaction)
K.B.Mullice
PCR法の原理と温度変化スケジュール
遺伝子クローニングにおけるPCRの応用
PCRの応用:血液試料中のウイルスゲノムの検出
PCRの法医学における応用>(I)
ヒトゲノムのいろいろな位置(遺伝子座)にはGTGTGTなどの短い反復配列が連なる領域があり、各領域の反復配列の数は4~40の範囲で個人差がある。この反復配列は長さが多様な直列反復(VNTR)という。
DNA
PCRの法医学における応用 (II)
VNTR ↑↑
↑↑
VNTR
↓ “ ”