UNIVERSIDAD PRIVADA DE HUANCAYO ROOSEVELTFACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUIMICA

CURSO: BIOQUIMICA II

PRCTICA II UNIDADEXTRACCIN DEL ADN

Objetivos: Extraer el ADN de un tejido animal, confirmar su estructura fibrilar. Determinar la longitud de la estructura fibrilar. Confirmar o rechazar que el ncleo del ADN se encuentra replegado a la estructura

fibrilar.Muestra biolgica

Hgado de pollo 100gMateriales

Varilla de vidrio Mortero y piln Vasos de precipitado x 250ml Pipeta de 10ml Probeta de 50ml Tela o gasa para filtrar

Reactivos Alcohol 96 Agua destilada Cloruro de sodio al 9% Detergente 2mg

Otros Arena 05g

Procedimiento:1) Triturar los 100g de hgado de pollo, aadir arena 05g para que al triturar se puedanromper las membranas y queden los ncleos sueltos.2) Aadir al triturado 50ml de agua destilada, homogenizar hasta hacer una masa.

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CURSO: BIOQUIMICA II3) Filtrar 3 4 veces sobre la tela o gasa para separar los restos de tejidos que hayanquedado sin romper.4) Medir el volumen del filtrado con la probeta.5) Aadir al volumen del filtrado una cantidad igual de cloruro de sodio al 9%. Con estopretendemos producir un estallido de los ncleos de manera que queden libres las fibrasde cromatina.6) Posteriormente agregar 1mg de detergente. La intencin es formar un complejo conlas protenas y separarlas del ADN, de esta manera quedar el ADN libre de las protenasque tiene asociadas.7) Con el uso de la pipeta aadir 50ml de alcohol al 96. Hay que hacerlo de forma que elalcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interface se precipitael ADN.8) Introducir la varilla de vidrio e ir removiendo de manera lenta y homognea. En la varillase van adhiriendo unas fibras blancas que son el resultado de la agrupacin de fibras deADN.

CUESTIONARIO1.- Mediante un esquema indique la composicin nutricional del hgado de pollo.2.- Grafique una estructura fibrilar.3.- Qu forma tiene el ADN de un tejido animal. Grafique.4.- En qu casos de utiliza el cloruro de sodio al 9%.5.- De qu manera puedes desnaturalizar los cidos nucleicos.6.- Proponga un mecanismo de accin entre el contenido del (hgado de pollo + arena +cloruro de sodio al 9% + detergente + alcohol).