8/19/2019 Practica Reductasa

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PRUEBA DE LA REDUCTASA

I. INTRODUCCIÓN

Prueba rápida y sencilla para determinar la calidad de leche mediante laPrueba de Reductasa. Esta prueba consiste básicamente en la incubación de 10ml de leche, adicionado con 1 ml del reactivo Azul de Metileno en un tubo deensaye en un bao mar!a a "#.$ o% &' ( o%) re*istrando el tiempo inicial, as! como el tiempo +ue la leche dura en perder el color azul, lo cual nosproporciona el tiempo de reductasa. Esta enzima se encuentra solo en la lechede vaca.

Para estimar el nmero apro-imado de microor*anismos en la leche cruda seutiliza el mtodo indirecto basado en la reducción del color azul de metileno+ue es un indicador de ó-ido/reducción &es azul cuando esta o-idado e incoloro

cuando está reducido).

Para estimar el nmero apro-imado de microor*anismos en la leche cruda seutiliza un mtodo indirecto basado en la reducción del colorante azul demetileno +ue es un indicador de ó-ido/reducción &es azul cuando está o-idadoe incoloro cuando está reducido). a actividad reductora de losmicroor*anismos se maniesta por el tiempo de la reducción del colorante auna temperatura de "# a "2 *rados cent!*rados la cual se indica en elsi*uiente cuadro3

Objetivos

4eterminar la calidad hi*inica de la leche 5resca empleando azul demetileno como indicador de ó-ido reducción.

6amiliarizar al estudiante con la realización de la prueba de la reductasa.

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II. MATERIAL

1. 789:;8%93/Muestra3 eche

(. 4E A79RA<9R893/<ubos de 1$0-1$mm con tampones de =ebe o tapa rosca/ Pipetas de 1 y 10 m./;radilla de acero ino-idable

". E>?8P9@3/7ao mar!a re*ulado a "$% a "#%

888.   PROCEDIMIENTO 

8.1. %9B<R9 P9@8<8C9Pipetear 1m de a*ua destilada estril y 10 m de leche

hervida o cruda a un tubo estril. 8nvertir el tubo

suavemente sin a*itar.8.(. %9B<R9 BE;A<8C9

Pipetear 1m de azul de metileno y 10 m de leche hervida

a un tubo estril.8nvertir el tubo suavemente sin a*itar.

8.". <?79 %9B M?E@<RA PR97EMA

1. Pipetear 1m de azul de metileno y 10 m de leche cruda aun tubo estril. 8nvertir el tubo suavemente sin a*itar.

(. %olocar todos los tubos en una *radilla y llevarlos a bao

mar!a a "$/"#%.". Realizar la primera lectura a las ( horas. Cer si hay

decoloración &reducción) de azul de metileno.

IV. ESQUEMA DE TRABAJO

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 <ubo 13 Problema 3 Azul de metileno

 <ubo (3 %ontrol 3 eche D azul de metileno

 <ubo "3 <esti*o3 eche

V. RESULTADOS

 <ubo problema cambio de color

VI. COMENTARIO

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%on la aplicación periódica de la Prueba de Reductasa, es posible determinar lacalidad de la leche de los termos y de los productores de manera individual,con el ob=eto de establecer pro*ramas sanitarios y de mane=o de los hatos, locual se ree=ará en la calidad de la leche entre*ada a las %ompa!as

8ndustrializadoras.

a prueba de Reductasa puede ser establecida 5ácilmente en cual+uiere-plotación lechera promedio, ya +ue se re+uiere nicamente de un 7aoMar!a, tubos de ensaye, pipetas, un termómetro y el indicador FAzul deMetilenoG. <odo este material es relativamente económico y de 5ácilad+uisición.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Adams, M. y M. Moss. 1HH#. Microbiolo*ia de los alimentos. Edit. Acribia,

@.A. Iara*oza, Espaa.

;arcia, M., R. >uintero y A. opez J Mun*ia. 1HH". 7iotecnolo*!aAlimentaria. imusa Borie*a Editores. M-ico 4.6.