Quels marqueurs d’activation pour le suivi thérapeutique

des patients VHC + traités par PegINF-alpha ?

E TuaillonVirologie

CHU LAPEYRONIEMontpellier

Marge thérapeutique = dose EI / dose ETMarge thérapeutique grande = 10Marge thérapeutique faible = 2

L’interferon-alpha pégylé une marge thérapeutique étroite

Toxicité Inefficacité

Marge thérapeutique

InterferonInterferon

TransductionTransduction

Jak-Stat (tyrosine)Jak-Stat (tyrosine) 2’5’ Oligo A synthetase Oligo A synthetase

Activation du gene

mRNA

Complexe Complexe protéique protéique D’inhibitionD’inhibition

ARN Viral

Rnase L

Mode d’action de l’INF : Cellulaire direct

CD4

CD8 Th1INF

INF

TCR

HLA-1

INF

Cellulaire indirect, activation des lymphocytes T CD8+

Sur les LT CD8+ l’expression du CD38 est augmentée par la présence de certains antigènes viraux, VIH, EBV, CMV

glycoprotéine transmembranaire 45-kDa sur les T CD4+ et CD8+, les B les NK

marqueur d’activation

Le CD38 un marqueur d’activation cellulaire

Le CD38++ : un marqueur simple d’utilisation et d’expression,

day 0 day 1 day 2 day 3 day 4

92.3%

CD38-PE fluorescence intensity

(a)

4.2% 14.8% 32.6% 55.4%

0

4000

8000

12000

16000

20000

0

20

40

60

80

100

0

4000

8000

12000

16000

20000

0 20 40 60 80 100

CD8+/CD38bright T cells %

0

4000

8000

12000

16000

20000

0 20 40 60 80 1000 20 40 60 80 100

20 000

12 000

8 000

4 000

16 000

0

CD8+/CD38+ T cells %

CD

38 s

urfa

ce m

olec

ules

per

CD

8+ T

cel

ls

0 1 2 3 4 0 20 40 60 80 100

CD

8/C

D38

+ a

nd C

D38

bri

gh

t T c

ells

%

20 000

12 000

8 000

4 000

16 000

0

20 000

12 000

8 000

4 000

16 000

0

(b)

Days of polyclonal activation

R=0.71 R=0.94

Standardisation in vitro du CD38++ et comparaison au gold standard

anti-CD8-FITC

anti-

CD

38-P

E

Cord blood HIV-1 prime infection Healthy control

CD38bright, 85.4%

CD38+

CD38bright, 77.1% CD38bright, 5.4%

CD38+ CD38+

(c)

Contrôles biologiques

0

10

20

30

40

50

60

70

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Groups: healthy control HIV** HCV HCVµ HIV/ HCV HBV

HIV/HBV

% C

D38

++

T C

D8+

L’expression du CD38++ dans différents groupes de patients

Percentage C38bright expression on T CD8+ .

* HIV-1 RNA undetectable (< 50 copies /ml) since more than 6 months

** HIV-1 RNA 1019-9920 copies /ml (median : 4020 copies/ml)

µINF treated

HIV*

PegINFα

Suivi d’un patient infecté par le VHC, avant et après initiation d’un traitement par PegINFα

1

HCV RNA viral load

T CD8+/CD38bright expression

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

2 3 4 5 6 7 8 9 10

23.11.2004 12. 10.2005 06.12.2005

27.10.2005Initiating INFalpha

1 420 000 copies/ml

25 000 copies/ml

Résultats préliminaires

6,8 %

26%

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

0 1 2 3

Patients ARN VHC+ nontraités

Patients ARN VHC+ trairtés

Médiane

Design de l’étude

Objectif de l’étude : Évaluer l’expression du

CD38++ (CD38 fort) comme marqueur de :

* L’efficacité thérapeutique de l’Interféron

* L’observance

Design de l’étude

Étude de la cinétique d’activation des T CD8+ par PegINFα chez les sujets sains

Étude du phénotype d’activation des T CD8+ (CD38++, HLA-DR, CD69) avant et au cours des 12 premières semaines de traitement par PegINFα chez les sujets infectés.

Exploration en parallèle de l’ARN VHC plasmatique et dosage de l’INFα par ELISA

Évaluation de l’observance par questionnaire

Rendez vous en 2008….