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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
RENDIMIENTO DE LA TÉCNICA DE CITO BLOQUE CON BACTO AGAR
MEDIANTE LA COMPARACIÓN DE SU CORRESPONDIENTE FROTIS
CITOLÓGICO EN LÍQUIDOS ASCÍTICOS Y PLEURALES.
Trabajo de Investigación previo a la obtención del Título de Licenciada en
Laboratorio Clínico e Histotecnológico
Autor: Angara Cadena Jessica Patricia
Tutor Académico: Dr. Jaime Ernesto Acosta Coba
Quito, septiembre 2016
ii
iii
iv
v
DEDICATORIA
Esta tesis dedico a Dios, mi fortaleza en todo este tiempo, quien me dio sabiduría,
inteligencia y perseverancia para poder culminar todo este arduo camino.
A mis padres que son un pilar importante en mi vida y me han sabido bridar su apoyo
incondicional, a mi hermana menor que supo ser aquella alegría en momentos de
angustia y a mis amigos por todos los momentos compartidos.
vi
AGRADECIMIENTO
Principalmente agradezco a Dios quien me dio la vida, sabiduría y fortaleza para
poder mantenerme firme en todos los obstáculos de este arduo camino y tomar las
decisiones correctas que me llevarían a culminar toda mi formación como
profesional.
Agradezco también a mis padres, hermana y todo familiar quien me supo dar los
ánimos para no decaer en los momentos difíciles de la vida.
A mi director de tesis Dr. Jaime Acosta que me ha orientado, poyado y corregido en
mi labor científica y cada uno de los profesionales que me guiaron a finalizar este
proyecto.
vii
ÍNDICE DE CONTENIDO
© DERECHOS DE AUTOR ...................................... ¡Error! Marcador no definido.
APROBACIÓN DEL TRABAJO DE TITULACIÓN POR PARTE DEL TUTOR
METODOLÓGICO ..................................................................................................... iii
APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL ... ¡Error! Marcador
no definido.
DEDICATORIA ........................................................................................................... v
AGRADECIMIENTO ................................................................................................. vi
LISTA DE GRÁFICOS ............................................................................................... ix
LISTA DE ANEXOS .................................................................................................... x
RESUMEN ................................................................................................................... xi
ABSTRACT ................................................................ ¡Error! Marcador no definido.
INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 1
EL PROBLEMA ........................................................................................................... 4
1.1 Planteamiento del Problema ................................................................................ 4
1.2 Hipótesis .............................................................................................................. 5
1.3 Preguntas Directrices ........................................................................................... 5
1.4 Objetivos ............................................................................................................. 6
1.4.1 Objetivo General ........................................................................................... 6
1.4.2 Objetivos Específicos ................................................................................... 6
1.5 Justificación ......................................................................................................... 7
CAPÍTULO II ............................................................................................................... 8
MARCO TEÓRICO ...................................................................................................... 8
2.1Fundamentación Teórica ...................................................................................... 8
2.1.1 Cavidad Pleural ............................................................................................. 8
2.1.1.4Derrames pleurales no inflamatorios ........................................................ 12
2.1.1.5Tumores pleurales ..................................................................................... 13
2.2.1 Cavidad Peritoneal ...................................................................................... 14
viii
2.2 Examen Citológico: ........................................................................................... 19
2.2.1 Aspecto macroscópico del líquido .............................................................. 19
2.3 DIAGNÓSTICO DEL LABORATORIO ......................................................... 21
2.3.1 Técnica de centrifugación: .......................................................................... 22
2.3.2 Tinción de Papanicolaou para la técnica de citología convencional: ......... 22
2.3.3 Tinción de May-GrünwaldGiemsa para la técnica de bloque celular con
bacto agar y citología convencional: ................................................................... 23
2.3.3 Preparación de Bacto Agar para la elaboración del bloque celular: ........... 23
2.3.4 Elaboración del bloque celular: .................................................................. 24
CAPÍTULO III ............................................................................................................ 25
METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN .......................................................... 25
3.1 Diseño Metodológico ........................................................................................ 25
3.1.1 Nivel de la Investigación ............................................................................ 25
3.1.2 Universo ...................................................................................................... 25
3.1.3 Criterios de Inclusión .................................................................................. 26
3.1.4 Criterios de Exclusión ................................................................................. 26
3.1.5 Operacionalización de las Variables ........................................................... 26
3.2 Marco Administrativo ....................................................................................... 29
3.2.1Factibilidad ...................................................................................................... 29
3.3 Técnicas para el Procesamiento de Datos y Análisis de Resultados ................ 30
3.4 Consideraciones Éticas ...................................................................................... 30
CAPITULO IV ............................................................................................................ 31
PRESENTACIÓN Y DESCRIPCIÓN DE RESULTADOS ...................................... 31
4.1 Hallazgos ........................................................................................................... 31
CAPITULO V ............................................................................................................. 37
DISCUSIÓN ............................................................................................................... 37
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .......................................................... 40
BIBLIOGRAFÍA ........................................................................................................ 42
ANEXOS .................................................................................................................... 44
ILUSTRACIONES FOTOGRÁFICAS ...................................................................... 44
ix
LISTA DE GRÁFICOS
Gráfico 1: Porcentajes de tipo de muestras estudiadas...........................….…32
Gráfico 2: Porcentajes de muestras procesadas con Bloque celular en liquidos
asciticos............................................................................................................33
Gráfico 3: Porcentajes de muestras procesadas con Frotis Citológico en liquidos
asciticos………………………………………………....................................33
Gráfico 4: Porcentajes de muestras procesadas con bloque celular en líquidos
pleurales….......................................................................................................34
Gráfico 5: Porcentajes de muestras procesadas con frotis citológico en líquidos
pleurales……………………………………………………………………..34
Gráfico 6: Porcentajes de muestras positivas en frotis citológico……….......35
Gráfico 7: Porcentajes de muestras positivas en bloque celular.......…...…...35
Gráfico 8: Porcentajes sobre la confiabilidad de la técnica…........…….……36
x
LISTA DE ANEXOS
Anexo 1: Materiales para la realización de la técnica de bloque celular con
bacto agar…………………………………………………………………….44
Anexo 2: Realización de la técnica de bloque celular con bacto agar……….45
xi
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
TEMA:RENDIMIENTO DE LA TÉCNICA DE CITO BLOQUE CON BACTO
AGAR MEDIANTE LA COMPARACIÓN DE SU CORRESPONDIENTE FROTIS
CITOLÓGICO EN LÍQUIDOS ASCÍTICOS Y PLEURALES
Autor: Jessica Angara
Tutor Académico: Dr. Jaime Acosta
Fecha: Septiembre, 2016
RESUMEN
El presente estudio tiene como objetivo comparar la técnica de bloque celular con
bacto agar obtenido a partir del sedimento de líquidos ascíticos y pleurales, con el de
su citología con el fin de determinar su aportación al diagnóstico final.
Es un estudio descriptivo de prueba diagnóstica, se llevó a cabo con muestras de
líquidos ascíticos y pleurales de 120pacientes que presentaban ascitis o derrame
pleural de cualquier causa, todas las muestras fueron procesadas con las técnicas de
bloque celular con bacto agar y frotis citológico.
De las 120 muestras procesadas con bloque celular a partir de bacto agar 104(86,6%)
fueron aptos para el diagnóstico a diferencia de que en el frotis citológico 114(95%)
muestras fueron aptas para el diagnóstico. Del total de las120 muestras procesadas
con bloque celular a partir de bacto agar se diagnosticó 29(24.1%) muestras con un
diagnóstico positivo para malignidad. Mientras que en el frotis citológico 26(21%) de
ellas tuvieron un diagnostico positivo para malignidad, no hubiera podido
diagnosticarse de no haber sido realizado el bloque celular, por lo tanto ha aportado
información diagnóstica y pronóstica adicional.
La técnica de bloque celular comparada con la técnica de citología convencional
alcanza una sensibilidad de 90% y especificidad de 96% valor predictivo positivo
90% y valor predictivo negativo 96%.
Ambas técnicas tienen un rendimiento similar, el bloque celular elaborado con bacto
agar es un método simple y de confianza, el material fijado y conservado será de
utilidad para la realización pruebas adiciones de inmunohistoquímica en los casos
que amerite, por lo tanto la técnica empleada aumenta significativamente la
efectividad diagnóstica sin alterar las características citomorfológicas de la muestra.
PALABRAS CLAVE: BLOQUE CELULAR, BACTO AGAR, FROTIS
CONVENCIONAL, LÍQUIDOS CORPORALES, ASCITIS, DERRAME PLEURAL.
xii
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
PERFORMANCE OF THE CITO BLOCK TECHNIQUE WITH AGAR BACTUS BY
COMPARING THEIR CORRESPONDING CYTOLOGIC FROTIS IN ASCLETIC AND
PLEURAL LIQUIDS
Author: Jéssica Angara
Academic Tutor: Dr. Jaime Acosta
Date: September, 2016
ABSTRACT
The present study aims to compare the cell block technique with bacto agar obtained
from the sediment of ascitic and pleural fluids with that of its cytology in order to
determine its contribution to the final diagnosis. It is a descriptive study of a
diagnostic test, carried out with samples of ascites and pleural fluids of 120 patients
who had ascites or pleural effusion of any cause, all the samples were processed using
the cell block techniques with bacto agar and cytological smears. Of the 120 samples
processed with a cell block from bacto agar 104 (86.6%) were fit for diagnosis,
whereas in the cytological smear 114 (95%) samples were suitable for diagnosis.
From the total of 120 samples processed with a cell block from bacto agar, 29
(24.1%) samples were diagnosed with a positive diagnosis for malignancy. While in
the cytological smear 26 (21%) of them had a positive diagnosis for malignancy; it
could not have been diagnosed if the cell block had not been performed, therefore it
has provided additional diagnostic and prognostic information. The cell block
technique compared to the conventional cytology technique achieves a sensitivity of
90% and specificity of 96% positive predictive value 90% and negative predictive
value 96%. Both techniques have a similar performance, the cell block made with
bacto agar is a simple and reliable method, the fixed and preserved material will be
useful for carrying out additional immunohistochemical tests when necessary,
therefore the employed technique increases the diagnostic effectiveness without
altering the cytomorphological characteristics of the sample.
KEY WORDS: CELL BLOCK, BACTO AGAR, CONVENTIONAL SMEARS,
BODY FLUIDS, ASCITES, PLEURAL EFFUSION
______________________________________________________________
I HEREBY CERTIFY THAT the foregoing information is a true and correct
translation of the original document in Spanish.
Dr. Jackie J. Metiever
ATA CERTIFIED TRANSLATOR
1
CAPÍTULO I
INTRODUCCIÓN
Se recibe en el laboratorio de patología numerosos líquidos, de todos ellos los más
frecuentes son los líquidos pleurales y ascíticos para su estudio preferentemente
citológico.
La muestra recibida es procesada inmediatamente colocándola de acuerdo con su
volumen en los tubos respectivos para la consiguiente centrifugación con la técnica
convencional, con una parte del sedimento obtenido se procederá a realizar el frotis
celular con su respectiva fijación y la otra porción se realiza en bacto agar para su
correspondiente diagnóstico citológico.
Bacto agar nos permite solidificar el botón celular obtenido de la centrifugación, sin
importar la cantidad de sedimento receptado en el que las sustancias extrañas, las
partes pigmentadas y las sales se han reducido al mínimo.
Otra aportación del procesamiento en agar y consecuentemente del bloque celular es
el hecho de que con este material se pueden realizar estudios de inmunohistoquímica,
que tiene por objeto diagnosticar con precisión el tipo histológico de la neoplasia
maligna o su metástasis.
El presente estudio compara el rendimiento diagnóstico de ambas técnicas y la
búsqueda de que el bloque celular formado a partir de coágulo con bacto agar, técnica
empleada en nuestro estudio, aumenta significativamente la efectividad diagnóstica
sin alterar las características citomorfológicas de la muestra.
2
Antecedentes
El bloque celular se obtiene del sedimento de líquidos de restos tisulares precedido
de fijación en formalina e inclusión en parafina, se tiñen con H&E, además de
técnicas histoquímicas e inmunohistoquímica.
Los bloques celulares son útiles para el diagnóstico citológico definitivo sirve para la
tipificación de las neoplasias y estudios posteriores y ofrece características
citomorfológicas similares a las estudiadas por la citología convencional.
(Gonzales, 2014-2015)
El bloque celular puede revelar células tumorales en muestras que han sido ya
analizadas por métodos citológicos convencionales y reportados como negativos para
malignidad. (Kulkarni, Prabhudesai, Desai, y Borges, 2000)
Jalal y colaboradores compararon los resultados de frotis citológicos con bloques
celulares en 600 muestras de fluidos en donde la técnica de bloque celular
incrementó en un 19.4 %para la detección de células malignas. (Jalal, Aftab, Hasan,
y Pervez, 2009).
Estudios anteriores han demostrado que, un total de 61 casos con bloque celular, y su
respectiva citología en 29 PAAF, 25 líquido pleural, 20 aspirado bronquial, 16
líquidos ascíticos, 6 esputos y 3 orinas, en la citología (14 positivo para células
malignas, y 45 sin evidencia de malignidad), y en el bloque celular (9 positivo para
células malignas, y 38 sin evidencia de malignidad).Concretandola citología es un
procedimiento diagnóstico más sensible que el bloque celular en detectar malignidad.
Rescatando así la rentabilidad diagnóstica del bloque celular y citología es muy
similar, y sólo ha resultado más sensible la citología en PAAF y líquido ascítico,
según estudios anteriores. (García, 2005)
La utilidad de los BC se debe en buena parte a su sencillez, podría afirmarse que
aporta especificidad, ya que permite valorar aspectos como la arquitectura de la
3
lesión, y realizar técnicas de citoquímica e inmunohistoquímica que ayudan a la
mejor tipificación de las neoplasias, y además aporta un diagnóstico morfológico
acertado.
Otros estudios se realizaron 47 diagnósticos de adenopatías mediastínicas mediante
ecobroncoscopía obteniendo 42 muestras representativas (89,4%) y resultados
patológicos en 24 casos (57,1%). Los principales diagnósticos fueron metástasis de
carcinoma broncogénico (66,7%) y metástasis de carcinoma extrapulmonar (20,8%).
El 23% de los casos se diagnosticaron solo por BC, y no hubiera podido
diagnosticarse de no haber sido realizado el BC. (Elsevier, 2014)
Por lo cual el presente estudio pretende determinar la eficacia diagnostica del bloque
celular preparado con bacto agar ya que dicha técnica, concentra las células,
minimiza su distorsión y permite la obtención de una monocapa de células.
4
EL PROBLEMA
1.1 Planteamiento del Problema
El análisis citológico de los líquidos ascíticos y pleurales obtenidos a partir de
centrifugación es una herramienta importante en el diagnóstico, pronóstico y
tratamiento principalmente de enfermedades neoplásicas.
“El análisis de laboratorio del líquido pleural tiene un reconocido valor diagnóstico,
ya que junto a los datos clínicos permite un diagnóstico útil en más del 75% de los
casos. Por esta misma confianza en su rendimiento, es corriente que se proceda
automáticamente.”(Edgardo Cruz, 2007).
Sin embargo en ocasiones el material obtenido luego del procesamiento no es lo
suficientemente adecuado para el diagnóstico citológico, debido principalmente a la
pobreza celular porlo que planteamos como recurso valido que se evite esta
dificultad, en la técnica de bloque celular implementado con bacto agar.
En consecuencia el presente estudio plantea evaluar los resultados de cito bloque con
bacto agar frente el frotis citológico convencional y de reconocer su utilidad
sensibilidad y especificidad.
5
1.2 Hipótesis
La utilización de la técnica de bloque celular implementada con el gel mejora la
calidad del diagnóstico citológico.
1.3 Preguntas Directrices
1. ¿Cuál es la importancia y utilidad de la técnica?
2. ¿En que mejora el diagnostico citológico?
3. ¿Cómo se aprovecha la cantidad de muestra obtenida?
4. ¿En qué se diferencia esta técnica a la observación de líquidos ascíticos y
pleurales realizados con citología convencional?
5. ¿Qué tipo de muestras pueden ser trabajadas con esta técnica, además del líquido
ascítico y pleural?
6. ¿En qué ayuda o aporta al área de citología referente a calidaddiagnóstica?
6
1.4 OBJETIVOS
1.4.1 Objetivo General
Determinar que la utilización del bloque celular a partir de bacto agar aumenta la
calidad diagnóstica con respecto a la citología convencional.
1.4.2 Objetivos Específicos
Establecer las ventajas y desventajas del uso del método de frotis convencional y
del bloque celular con bacto agar.
Demostrar que la técnica del bloque celular con bacto agar puede ser la más
empleada en el análisis de líquidos ascíticos y pleurales.
Comparar la frecuencia de muestras positivas para malignidad, diagnosticadas
con frotis citológico y bloque celular.
7
1.5 Justificación
Esta técnica pretende mejorar el diagnóstico en las muestras estudiadas a través de
bloque celular a partir de bacto agar en donde se logra disminuir el porcentaje de
reportes de muestras sin diagnóstico o con resultados de falsos negativos, utilizando
la totalidad de muestra sedimentaria y realización de pruebas adicionales de
inmunohistoquímica.
“La introducción de nuevas técnicas diagnósticas hace que la necesidad de muestras
de tejidos de alta calidad sea cada vez mayor. El bloque celular (BC) es una técnica
útil para este fin, pero no es aun ampliamente usada y existe poca información en
cuanto a su valor diagnóstico adicional.
El proceso del BloqueCelular es un procedimiento sencillo que puede realizarse en la
mayoría de los casos. Aportando información diagnóstica y pronóstica adicional
clínicamente relevante en casi una cuarta parte de los casos en los que se ha
realizado.”(Voth A. 2014).
“Varios métodos de preparación de bloques celulares están disponibles para los
especímenes con una importante cantidad de sedimentos. Principalmente, los
sedimentos concentrados son apoyados por un poco de gel o principio de la
coagulación. El botón es fácil de manejar luego incluidos en parafina después del
procesamiento, como las muestras de patología quirúrgica / biopsias. Mostrando
consistencia adecuada e inmunotinción excelentes.”(George M. Varsegi, 2009).
8
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
2.1Fundamentación Teórica
El sistema respiratorio está formado por las estructuras que realizan el intercambio de
gases entre la atmósfera y la sangre. El oxígeno (O2) es introducido en el cuerpo para
su posterior distribución a los tejidos y el dióxido de carbono (CO2) producido por el
metabolismo celular, es eliminado al exterior. Además interviene en la regulación del
pH corporal, en la protección contra los agentes patógenos y las sustancias irritantes
que son inhalados. (Merí, 2005)
2.1.1 Cavidad Pleural
Los pulmones son órganos vitales de la respiración, oxigenan la sangre poniendo el
aire inspirado en relación con la sangre venosa de los capilares pulmonares,
ocupando por completo las cavidades pulmonares, separados uno de otro por el
mediastino. Cada cavidad pulmonar (derecha e izquierda) esta revestida por una
membrana pleural que se refleja y cubre la superficie externa de los pulmones. La
pleura es una serosa de origen mesodérmico que recubre totalmente los pulmones,
los hilios pulmonares (pleura visceral), así como la cara interna de la pared torácica,
el diafragma y el mediastino (pleura parietal), quedando separadas ambas pleuras por
un espacio real (espacio pleural), no potencial, de aproximadamente 10-20 um
ocupada por una pequeña cantidad de líquido (0,1-0,2 ml/kg) que facilita el
9
movimiento entre las dos membranas, una contra la otra y posee una baja
concentración de proteínas (15 % de las plasmáticas aproximadamente).
El cúmulo de líquido se denomina derrame, que resulta del desequilibrio de la
producción y reabsorción del líquido.
Este líquido es un filtrado del plasma derivado de los capilares de la pleura parietal.
Se produce continuamente a una velocidad dependiente de la presión hidrostática del
capilar, de la presión oncónica del plasma y de la permeabilidad capilar. El líquido
pleural se reabsorbe a través de los linfáticos y vénulas de la pleura visceral.
Los derrames se clasifican en trasudados y exudados, siendo muy importante esta
clasificación debido a las implicaciones diagnósticas y terapéuticas que conlleva.
En los trasudados la membrana serosa no está alterada, no existe un proceso
inflamatorio de la membrana, originan un aumento de la presión hidrostática o
descenso de la presión oncónica plasmática de los capilares de la membrana parietal,
a diferencia de que en los exudados se originan por procesos inflamatorios de la
membrana serosa que aumenta la permeabilidad capilar de la membrana parietal o por
disminución de la absorción linfática.(López, 2012)
10
2.1.1.1 Trastornos Pleurales
Las alteraciones anatomopatológicas de la pleura suelen ser complicaciones
secundarias de una patología base.
Los trastornos pleurales primarios más importantes son:
a) Infecciones bacterianas intrapleurales primarias
b) Neoplasia primaria pleural: el mesotelioma(Robbins, 2010)
2.1.1.2 Derrame pleural
La acumulación de líquido pleural se produce en los siguientes procesos:
a) Aumento de la presión hidrostática, como sucede en la insuficiencia cardiaca
congestiva.
b) Aumento de la permeabilidad vascular, como en la neumonía.
c) Menor presión osmótica, como el síndrome nefrótico.
d) Aumento de la presión negativa intrapleural, como en la atelectasia.
e) Reducción del drenaje linfático, como en la
carcinomatosismediastínica.(Robbins, 2010)
11
2.1.1.3Derrames pleurales inflamatorios
Las pleuritis serosas, serofibrinosa y fibrinosas se deben todas a los mismos procesos
básicos.
Los exudados fibrinosos suelen reflejar una reacción exudativa más intensa y tardía
que, en una fase evolutiva previa, podría haberse manifestado como un exudado
seroso o serofibrinoso.
Las causas más habituales de pleuritis son las enfermedades inflamatorias de los
pulmones, como la tuberculosis, la neumonía, los infartos pulmonares, el absceso de
pulmón y las bronquiectasias. La artritis reumatoidea, el lupus eritematoso
diseminado, la hiperuremia, las infecciones sistemáticas difusas, otros trastornos
generalizados y la afectación metastásica de la pleura también pueden provocar una
pleuritis serosa o serofibrinosa.
Las radiaciones empleadas en los tratamientos contra los tumores de pulmón o de
mediastino a menudo generan una pleuritis serofibrinosa. En la mayoría de los casos,
la reacción serofibrinosa solo es mínima y el líquido exudado se reabsorbe con
resolución u organización del componente fibrinoso.(Robbins, 2010)
El exudado pleural purulento (empiema) se suele producir por la siembra bacteriana o
micótica del espacio pleural. Lo más frecuente es que este fenómeno se relacione con
la propagación por continuidad de los microorganismos a partir de una infección
intrapulmonar, pero a veces sucede por diseminación linfática o hematógena desde
una fuente de origen más alejada.
Más raro es que una infección situada por debajo del diafragma, como un absceso
subdiafragmatico o hepático, se extienda por continuidad a través de este musculo
hacia los espacios pleurales, sobre todo en el lado derecho.
12
El empiema se caracteriza por la presencia de pus cremoso, loculado de color
amarillo verdoso, combinado con masas de neutrófilos mezclados con otros
leucocitos. Aunque el empiema puede acumularse en grandes volúmenes (hasta 500-
1000ml), en general su cantidad es pequeña, y el pus queda circunscrito. El empiema
se puede resolver, pero esta evolución es menos habitual que la organización del
exudado, con formación de adherencias fibrosas densas y fuertes que con frecuencia
obliteran el espacio pleural o rodean a los pulmones; en cualquier caso, esto puede
limitar seriamente la expansión pulmonar.
La pleuritis hemorrágica manifestada por unos exudados inflamatorios sanguíneos es
poco frecuente y aparece en las diátesis hemorrágicas, rickettsiosis y en la afectación
neoplásica de la cavidad pleural. Cuando se encuentra una pleuritis hemorrágica,
habría que efectuar una búsqueda atenta para localizar la presencia de células
tumorales exfoliadas.(Robbins, 2010)
2.1.1.4Derrames pleurales no inflamatorios
Las acumulaciones no inflamatorias de un líquido seroso en el interior de las
cavidades pleurales reciben el nombre de hidrotórax. Su aspecto es transparente y de
color pajizo.
El hidrotórax puede ser unilateral o bilateral, según su causa subyacente. La más
habitual es la insuficiencia cardiaca y por esta razón suele ir acompañado por
congestión pulmonar y edema. A veces se reúne trasudados en cualquier otra
enfermedad sistémica asociada a un edema generalizado y por lo tanto se describen
en la insuficiencia renal y en la cirrosis hepática.
La salida de la sangre hacia la cavidad pleural se denomina hemotorax. Casi siempre
es una complicación mortal de la rotura de un aneurisma aórtico o de un traumatismo
vascular, o puede darse en el postoperatorio. El hemotorax puede ser fácil de
13
identificar debido a los grandes coágulos que acompañan al componente líquido de la
sangre.(López, 2012)
El quilotórax es una acumulación de un líquido lechoso en la cavidad pleural, en
general de origen linfático. El quilo es de color blanco lechoso porque contiene grasas
emulsionadas en partículas finas. Lo más frecuente es que el quilotorax este originado
por un traumatismo en el conducto torácico o una obstrucción que rompe de manera
secundaria los conductos linfáticos principales. Este trastorno aparece en procesos
malignos originados de la cavidad torácica que acaban por obstruir dichos conductos.
Los canceres más alejados pueden metastatizar a través de los linfáticos y crecer en
el interior del conducto linfático derecho o del conducto torácico hasta producir su
obstrucción.(López, 2012)
2.1.1.5Tumores pleurales
La pleura puede verse afectada por tumores primarios o secundarios, la afectación
metastásicas secundaria es mucho más frecuente que los tumores primarios. Las
metastásicas malignas más frecuentes proceden de neoplasias primarias del pulmón y
la mama. Aparte de estos canceres, las neoplasias malignas de cualquier órgano del
cuerpo pueden propagarse hasta los espacios pleurales. En la mayoría de los procesos
metastásicas a continuación hay un derrame seroso o serosanguinolento, que a
menudo contiene células neoplásicas. Por esta razón, el estudio citológico atento del
sedimento cobra un valor diagnostico considerable. (Robbins, 2010)
14
2.2.1Cavidad Peritoneal
El peritoneo es una membrana serosa continua resbaladiza y brillante. Recubre la
cavidad abdominopélvica y envuelve las vísceras. El peritoneo está formado por dos
hojas continúas:
El peritoneo parietal que tapiza la superficie interna de la pared abdominopélvica, y el
peritoneo visceral, que reviste viseras como el estómago y el intestino. Las dos hojas
del peritoneo están constituidas normalmentepor casi 50 ml de líquido en el espacio
virtual revestido de mesotelio en la cavidad peritoneal.(Moore, 2007)
La fina película de líquido peritoneal está compuesto por agua, electrolitos y otras
sustancias procedentes del líquido intersticial de los tejidos adyacentes. El líquido
peritoneal lubrica las superficies peritoneales y facilita así que las vísceras se
deslacen unas sobre otras sin fricciones, lo cual permite los movimientos de la
digestión. Contiene leucocitos y anticuerpos que combaten las infecciones, el líquido
peritoneal es absorbido por vasos linfáticos, sobre todo en la cara inferior del
diafragma que siempre se encuentra activo. Esta producido por un ultrafiltrado de
plasma dependiente de la permeabilidad vascular, la fuerza hidrostática y onconica de
Starling. La cavidad peritoneal está completamente cerrada en el hombre, en la mujer
hay una vía de comunicación con el exterior a través de las trompas uterinas, la
cavidad uterina y la vagina. Esta comunicación constituye una posible vía de
infección desde el interior. Un paciente con derrame peritoneal se dice que presenta
ascitis, y el líquido se conoce como liquido ascítico.(Moore, 2007)
15
2.2.1.1Tipos de derrame peritoneal:
Trasudados: elevación de la presión hidrostática o disminución de la presión
onconica del plasma.
Insuficiencia cardiaca congestiva
Cirrosis hepática
Hipoproteinemia (síndrome nefrótico)
Exudados: elevación de la permeabilidad capilar o disminución de la
reabsorción linfática.
Infecciones
Tuberculosis
Peritonitis bacteriana primaria
Peritonitis bacteriana secundaria (apendicitis)
2.2.1.2 Causas más habituales de derrame peritoneal
Neoplasias
Hepatoma
Carcinoma metastásico
Linfoma mesotelioma
Traumatismo
Pancreatitis
Peritonitis biliosa
Derrame quiloso:
Daño u obstrucción del conducto torácico (traumatismo, linfoma, carcinoma,
tuberculosis, infección parasitaria). (Robbins, 2010)
16
2.2.1.3Patologías inflamatorias, infecciosas y neoplásicas de la cavidad
peritoneal.
Las causas que la originan son trasudados (por aumento de presión hidrostáticas por
hipertensión portal, o disminución de la presión oncónica) en cirrosis hepática,
insuficiencia cardiaca congestiva o estadas hipoalbuminemicos.
Se origina como consecuencia de un exudado en las alteraciones del peritoneo, con
exudación proteica y presión portal normal, en infección, peritonitis, neoplasia,
obstrucción intestinal o mixedema. (López, 2012)
La peritonitis enfermedad inflamatoria que puede ser consecuencia de la invasión
bacteriana o de una irritación química y, con mayor frecuencia, se debe a:
Perdida de bilis o enzimas pancreáticas, que producen peritonitis estéril.
Perforación o rotura del sistema biliar que provoca una peritonitis muy
irritante, complicada normalmente por la superinfeccion bacteriana.
Pancreatitis hemorrágica aguda provocando un exudado claramente
supurativo por la diseminación bacteriana hacia la cavidad peritoneal.
Cuerpos extraños (introducidos en la cirugía), que inducen una reacción con
granulomas y cicatrización fibrosa.
Endometriosis, causa una hemorragia en la cavidad peritoneal.
Rotura de un quiste dermoide, que libera queratinas que provocan una
intensas reacción granulomatosa.
Perforación de una víscera abdominal. (López, 2012)
17
Infección peritoneal
La peritonitis bacteriana se presenta cuando las bacterias de la luz gastrointestinal se
liberan en la cavidad abdominal, normalmente tras una perforación. Tiene lugar como
complicación de la apendicitis aguda, ulcera péptica, colecistitis, diverticulitis e
isquemia intestinal. La peritonitis bacteriana espontanea se desarrolla en ausencia de
una fuente evidente de contaminación. Es un problema infrecuente que se ve
principalmente en pacientes con cirrosis y ascitis.(Robbins, 2010)
Morfología.-Las superficies serosa y peritoneal normalmente brillantes, se vuelven
mates y deslustradas y a la 2-4 h de infección comienza a acumularse un líquido
seroso o ligeramente turbio. A medida que avanza la infección, se acumula un
material cremoso supurativo que puede ser muy viscoso. El volumen del líquido es
muy variable, puede localizarse en el epiplón y vísceras de una pequeña zona, o
puede llenar toda la cavidad abdominal. El exudado puede acumularse en torno al
hígado para formar abscesos.
La respuesta celular inflamatoria está compuesta principalmente por colecciones
densas de neutrófilos y restos fibrinopurulentos que recubren las vísceras y la pared
abdominal. Una excepción es la peritonitis tuberculosa, que tachona las superficies
serosas y peritoneales con pequeños granulomas pálidos.(Robbins, 2010)
Retroperitonitisesclerosante.
También conocida como fibrosis retroperitoneal idiopática o enfermedad de Ormond,
se caracteriza por una fibrosis densa que se puede extender para afectar al mesenterio.
Aunque se desconoce la causa de la retroperitonitisesclerosante se cree que se trata de
un proceso inflamatorio.
Quistes.
Pueden aparecer dentro de la cavidad abdominal y se localizan con frecuencia en el
peritoneo.
18
Pueden ser bastante grandes, presentándose a veces como masas abdominales
palpables, pueden ser infecciones no encapsuladas o secuelas de una pancreatitis.
(Robbins, 2010)
Tumores
La mayoría de los tumores peritoneales tienen carácter maligno y se pueden clasificar
en sus formas primarias y secundarias.
Los tumores primarios
Originados en el revestimiento peritoneal son mesoteliomas similares a los tumores
de la pleura y el pericardio.
Los mesoteliomas peritoneales se asocian casi siempre a una exposición significativa
a asbestos. Se ha propuesto que las fibras de asbestos penetran a alguna forma a
través de la pared intestinal para alcanzar el peritoneo. Al igual que sucede con el
mesotelioma pleural, el diagnóstico diferencial incluye. El adenocarcinoma
metastásico que se puede distinguir del mesotelioma usando varios marcadores
inmunohistoquímicos, es uno de los tumores secundarios más frecuentes.
(Robbins, 2010).
19
2.2 Examen Citológico:
2.2.1 Aspecto macroscópico del líquido
Es recomendable informar sobre el color y turbidez de la muestra. Si el líquido en
presencia de sangre es debido a la toracocentesis, el grado de coloración durante la
aspiración no será uniforme, observándose un aclaramiento progresivo durante la
obtención del líquido.(Gonzales, 2014-2015)
La turbidez puede ser debida a un aumento de la concentración celular o lipídica.
Al realizar la punción el clínico debe observar directamente las características del
líquido, ya que ello puede, en ocasiones, adelantar la respuesta, abrir otras
alternativas diagnósticas, o indicar conductas específicas:
- Un olor fecaloideo indica infección anaeróbica del espacio pleural y, por lo
tanto, un exudado que exigirá un tratamiento agresivo rápido.
(Beorlegui, 2013)
2.2.1.1Líquidos Hemáticos:
Su origen puede deberse a múltiples causas. Cuando ocurre una punción
traumática, unos pocos milímetros de sangre dan ese aspecto, aunque suele
tener desigual distribución conforme progresa la aspiración del líquido o
pequeños coágulos que hacen sospechar su origen. Si el origen de la sangre es
patológico, se debe determinar el hematocrito/hemoperitoneo en el líquido
pleural y liquido ascítico:
- Hematocrito/hemoperitoneo > 1%: Puede deberse a neoplasia, embolia
pulmonar o traumatismo.
20
- Hematocrito/hemoperitoneo > 50%: Puede deberse al hemotorax o una
hemorragia espontanea (neoplasia, coagulopatía). ( Romero, 2011)
2.2.1.2Líquidos Turbios o Lechosos:
Al ser centrifugados y examinado el sedimento:
- Si el sobrenadante continua turbio, puede deberse a alto contenido en
lípidos, puede tratarse de un líquido quiloso, pseudoquiloso, debiendo
diferenciar ambos tipos.
- Derrame quiloso: Contiene numerosos linfocitos y una alta
concentración de triglicéridos, y al dejar la muestra en reposo, se
forma una capa superior cremosa por el alto contenido en
quilomicrones. Se origina por la rotura del conducto torácico o por su
obstrucción debido a un linfoma o carcinoma.
- Derrame pseudoquiloso: No contiene quilomicrones ni predominio de
linfocitos, se observa reacción celular mixta, pueden aparecer cristales
de colesterol y la concentración de triglicéridos es <50mg/dl. En ellos
se acumulan restos celulares y lípidos, principalmente complejos de
lecitinaglobulina, que suelen originarse en procesos inflamatorios
como, pleuritis reumatoide, tuberculosis o mixedema.(López, 2012)
21
2.3 DIAGNÓSTICO DEL LABORATORIO
El Citodiagnóstico se basa en el estudio microscópico de las células normales o
patológicas obtenidas de líquidos orgánicos, que son soluciones acuosas que
transportan sustancias imprescindibles para la vida celular y recogen las innecesarias
o nocivas para eliminarlas del organismo.
El diagnostico citológico de los líquidos corporales permite detectar infecciones,
tumores, inflamaciones y disfunciones endocrinas.(Vived, 2005)
Las técnicas empleadas para el diagnóstico citológico en el presente estudio son, la
técnica de citología convencional y la técnica de bloque celular con bacto agar.
El frotis citológico consiste en la extensión de una muestra de fluido corporal sobre
un portaobjetos para su análisis clínico. El material biológico a examinar se extiende
formando una capa muy fina sobre un portaobjetos se fija y se somete a tinciones de
May-GrünwaldGiemsa y Papanicolaou. Lo que permite su estudio clínico mediante
un microscopio.
El bloque celular es la inclusión de una pieza de tejidoen un trozo cubico de parafina
sólida, por lo que se utiliza bacto agar, que es una sustancia gelatinosa de origen
marino, solidificante. Con el fin de formar un botón sólido del sedimento de los
líquidos ascítico y pleurales,la parafina sirve como armazón del tejido para la
realización correcta de los cortes en el micrótomo y posteriormente la tinción de
May-GrünwaldGiemsa. (Beorlegui, 2013)
Para la elaboración de las técnicas de frotis citológico y el bloque celular con bacto
agar se utilizó la técnica de centrifugación y las tinciones correspondientes.
22
2.3.1Técnica de centrifugación:
a) Rotular los tubos de vidrio con los datos del paciente.
b) Describir el aspecto macroscópico del líquido: volumen, color, viscosidad y si
tiene algunas características específicas.
c) Transferir el líquido en dos tubos de vidrio (1 cm de diámetro x 7.5 cm de
largo).
d) Centrifugar los líquidos en CELL FUGE II, a 1200 rpm/ 5 min.
e) Al terminar la centrifugación sacar los tubos conservar el sedimento y
desechar el sobrenadante.
f) Del primer tubo dispensar una gota del sedimento resuspendido sobre dos
placas portaobjetos para su tinción correspondiente de May-GrünwaldGiemsa
y Papanicolaou.(Gonzales, 2014-2015)
2.3.2 Tinción de Papanicolaou para la técnica de citología convencional:
a) Fijar en alcohol 96º o spray fijador.
b) Lavar en agua corriente 10 pasajes.
c) Colocar Hematoxilina por 5 minutos.
d) Lavar nuevamente en agua corriente.
e) Realizar un baño rápido en ácido clorhídrico 0.05%.
f) Lavar en agua corriente.
g) Colocar en alcohol al 96% 10 por 2 minutos.
h) Colocar en el colorante Orange – G (OG6) 5 minutos.
i) Colocar en alcohol al 96% por 2 minutos.
j) Colocar en EA50 por 5 minutos.
k) Introducir en alcohol al 96 % 10 inmersiones por tres ocasiones.
l) Dejar secar al aire y aplicar un medio líquido transparente de montaje que
posteriormente se solidificará.
m) Observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.( Gonzales,2015)
23
2.3.3 Tinción de May-GrünwaldGiemsa para la técnica de bloque celular
con bacto agar y citología convencional:
a) Fijar el frotis con alcohol metílico de 3-4 minutos. En caso de que la
preparación delcolorante ya posea metanol, este paso queda obviado.
b) Sumergirlo verticalmente en una solución de Giemsa preparada ex
temporalmente.
c) Esperar durante 10-20 minutos.
d) Lavar el frotis con abundante agua, directamente del chorro.
e) Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en
alcoholpara eliminar cualquier resto de colorante.
f) Secar al aire y realizar el montaje con Entallan.
g) Observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.
2.3.3 Preparación de Bacto Agar para la elaboración del bloque celular:
a) Pesar la cantidad exacta del medio deshidratado y cerrar inmediatamente el
frasco contenedor.
b) Suspender 40 g del polvo en un litro de agua destilada.
c) Puesto que es un agente solidificante (agar-agar) hay que calentar el
preparado hasta la ebullición del mismo agitando de vez en cuando, para
asegurar una completa disolución del agar. Se debe tener cuidado de no
sobrecalentar.
Nota: Si se presenta algún inconveniente que impida el uso inmediato del agar
puede almacenarse por un periodo máximo de 72 horas bajo refrigeración a
temperatura de 2-4°C.
24
2.3.4 Elaboración del bloque celular:
a) Del segundo tubo base plana, conservar cuidadosamente el sedimento
(aspirando y expulsando con una pipeta el sobrenadante).
b) Añadir 5 gotas de bacto agar en el tubo que contiene el sedimento celular.
c) Dejar que se solidifique el gel con el sedimento.
d) Con la ayuda de una aguja de calibre 23 con la jeringa colocar
cuidadosamente formol al 10% dentro del tubo de tal forma de la gelatina con
el sedimento solidificado se pueda desprender de la parte inferior del tubo
base plana que lo contiene.
Al desprender el botón del tubo de vidrio, colocar en una caseta etiquetada
para su procesamiento correspondiente.(George M. Varsegi, 2009)
25
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
3.1 Diseño Metodológico
El presente estudiotuvo un alcance descriptivo, según la estrategia observacional y
según la secuencia temporal del estudio transversal, quese llevó a cabo en el Hospital
Carlos Andrade Marín - Quito, entre Febrero del 2016 y Mayo del 2016.
3.1.1 Nivel de la Investigación
Es un estudio comparativo de la utilidad de las pruebas diagnósticas, y análisis del
rendimiento de la técnica de bloque celular con bacto agar, frente a la técnica de
frotis convencional.
3.1.2 Universo
Se trabajó en el área de citología del Hospital Carlos Andrade Marín con 120
muestras de pacientes generalmente de los servicios de Cirugía General, Oncología,
Medicina Interna entre otros, que presentaban ascitis o derrame pleural de cualquier
causa, con edades entre 24 y 90 años de edad, los cuales 36 de los líquidos ascíticos
pertenecían a pacientes mujeres y 23 a pacientes hombres, en líquidos pleurales 41
muestras pertenecían a pacientes mujeres y 20 a pacientes hombres. Todas las
muestras se procesaron simultáneamente con citología convencional y con la técnica
de bloque celular con bacto agar.
26
3.1.3 Criterios de Inclusión
Pacientes hospitalizados del Hospital Carlos Andrade Marín de cualquier
edad y sexo que se realizaron estudios citológicos de líquidos corporales
(ascítico y pleural) durante el periodo Febrero del 20016 y Mayo del 2016.
Pacientes cuyas muestras tengan adecuada cantidad de sedimento de
líquidos para el estudio.
3.1.4 Criterios de Exclusión
Pacientes cuyos líquidos corporales (ascíticos y pleurales) no se
procesaron con técnica de citología convencional y bloque celular con
bacto agar simultáneamente.
Líquidos en los que el tiempo desde la toma de la muestra al tiempo de la
recepción por el laboratorio sea superior a dos horas.
Líquidos que no consten los datos completos en la solicitud del examen.
3.1.5Operacionalización de las Variables
3.1.5.1Variable dependiente:
Diagnósticos de patologías en líquidos ascíticos y pleurales.
3.1.5.2Variable independiente:
Técnicas de citología convencional y bloque celular a partir de bacto agar.
27
VARIABLE DEFINICIÓN DIMENSIÓN INDICADOR ESCALA
Variable
dependiente
Diagnóstico
citopatológico
de líquidos
ascíticos y
pleurales en
muestras
procesadas con
citología
convencional.
Reconocimiento de
la morfología
celular en líquidos
ascíticos y
pleurales con la
técnica de frotis
citológico.
Diagnóstico
Positivo para
malignidad.
Negativo para
malignidad.
Atípico
Escasa
celularidad.
Muestra
insuficiente
para
diagnóstico.
Porcentaje:
• Positivas para
malignidad.
•Negativas para
malignidad.
• Inadecuadas para
diagnóstico.
Valor
cuantitativo
Variable
dependiente
Diagnóstico
citopatológicode
líquidos
ascíticos y
pleurales en
muestras
procesadas con
bloque celular a
partir de bacto
agar.
Reconocimiento de
la morfología
celular en líquidos
ascíticos y
pleurales con la
técnica de bloque
celular a partir de
bacto agar.
Diagnóstico
Positivo para
malignidad.
Negativo para
malignidad.
Atípico
Escasa
celularidad.
Muestra
insuficiente
para
diagnóstico.
Porcentaje:
•Muestras positivas
para malignidad.
•Muestras negativas
para malignidad.
•Muestras inadecuadas
para diagnóstico.
Valor
cuantitativo
28
VARIABLE DEFINICIÓN DIMENSIÓN INDICADOR ESCALA
Variable
independiente.
Técnica de
Citología
convencional
Frotis citológico
del sedimento de
líquidos ascíticos
y pleurales con
tinción de May-
GrünwaldGiemsa
y Papanicolaou.
Apta para el
diagnostico
Inadecuada
para el
diagnóstico
Presencia de material
hemorrágico, escasa
celularidad, presencia
de artefactos.
Muestra insuficiente
para diagnóstico.
Porcentaje:
Apto para
diagnóstico.
Inadecuado
para
diagnóstico.
Valor
cualitativo
Variable
independiente
Técnica de bloque
celular a partir de
bacto agar.
Análisis de la
calidad en el
diagnóstico en
bloque celular
con bacto agar.
Apta para el
diagnóstico
Inadecuada
para el
diagnóstico
Muestra acelular.
Muestra inadecuada
por elaboración.
Porcentaje:
•Apto para diagnóstico.
•Inadecuado para
diagnóstico.
Valor
cualitativo
29
3.2 Marco Administrativo
3.2.1Factibilidad
En el área de Patología se dispone de equipos en óptimas condiciones, materiales e
insumos, instrumentos del laboratorio, colorantes etc. que facilitan la realización de
las técnicas comparadas.
El costo de bacto agar para la realización del bloque celular es reducido comparado
para el número de muestras procesadas diariamente, al igual que no conlleva
dificultad por las licenciadas del laboratorio, al procesar las muestras con la técnica
de bloque celular.
30
3.3Técnicas para el Procesamiento de Datos y Análisis de Resultados
Para la recolección de datos se utilizó el programa Excel, y el análisis de la
información fue obtenida de la solicitud del examen anátomo patológico de cada
paciente. Se analizaron y tabularon los datos, los resultados se expresaron en
porcentajes
3.4Consideraciones Éticas
La investigación se realizó con la autorización de los niveles administrativos
correspondientes de la institución HCAM.
Debido a que la presente investigación no se obtuvo el consentimiento informado.
31
CAPITULO IV
PRESENTACIÓN Y DESCRIPCIÓN DE RESULTADOS
Del 29 de Febrero al 20 de Mayo del 2016, 120 muestras fueron procesadas con
frotis citológico y bloque celular elaborado con bacto agar en los líquidos ascíticos y
pleurales las muestras fueron examinadas por la Dra. Patóloga y Licenciadas del
laboratorio, quien valoro la conservación de la morfología celular y presencia de
artificios para establecer la calidad diagnóstica morfológica de las células tanto
benignas como malignas.
Para determinar la celularidad se compararon las placas procesadas por la técnica de
citología convencional y por la técnica de bloque celular con bacto agar.
4.1 Hallazgos
De las 120 muestras procesadas con bloque celular utilizando bacto agar, 59(49.1%)
fueron de líquidos ascíticos de los cuales 7(5.6%) no fueron aptos para el diagnóstico
debido a la preparación inadecuada de la muestra, se evidencio escasa celularidad y
exceso del gel, 52(44.16%) muestras fueron aptas para el diagnóstico por lo que
presento una placa con fondo más limpio. En el frotis citológico de las mismas 59
muestras se obtuvo 3(2.5%) muestras no aptas para el diagnóstico demostró escasa
celularidad, fondos hemorrágicos, retraso en la fijación del espécimen y presencia de
otros artificios en la placa, que dificultó la lectura microscópica, 56(46.66%) fueron
aptas para el diagnóstico.
Entre las muestras de líquidos pleurales 61 (50.83%), de las cuales 9 (7.31%) no
fueron aptas para el diagnóstico presentando escasa celularidad y exceso del gel, 52
32
(43.33%) de las muestras fueron aptas para el diagnóstico. En el frotis citológico se
obtuvo 3(2.5%) muestras no aptas para el diagnóstico por escasa celularidad,fondos
hemorrágicos, retraso en la fijación del espécimen y presencia de otros artificios en la
placa que dificulto la lectura microscópica, 58(48.3%) fueron aptas para el
diagnóstico.
Del total de las120 muestras procesadas con bloque celular apartir de bacto agar se
diagnosticó 29(24.1%) muestras con un diagnóstico positivo para malignidad, 11(9%)
fueron de líquidos ascíticos y 18(15%) fueron de líquidos pleurales.
Mientras que en el frotis citológico 26(21%) de ellas tuvieron un diagnostico positivo
para malignidad, 10(8%)fueron de líquidos ascíticos y 16(13%) fueron de líquidos
pleurales.
Gráfico 1: Porcentajes de tipo de muestras estudiadas
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
61(50,83%)59(49,16%
LÍQUIDOS ASCÍTICOS Y PLEURALES
LÍQUIDOS ASCÍTICOS LÍQUIDOS PLEURALES
33
7(5,6%)
52(44,16%)
MUESTRAS PROCESADAS CON BLOQUE CELULAR EN LÍQUIDOS ASCÍTICOS
NO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO
3(2,5%)
56(46,6%)
MUESTRAS PROCESADAS CON FROTIS CITOLÓGICO EN LÍQUIDOS ASCÍTICOS
NO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO
Gráfico 2:Porcentajes de muestras procesadas con Bloque celular.
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
Gráfico 3: Porcentajes de muestras procesadas con Frotis Citológico.
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
Gráfico 4: Porcentajes de muestras procesadas con bloque celular.
34
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
Gráfico5: Porcentaje de muestras procesadas con frotis citologico
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
9(7%)
52(43%)
MUESTRAS PROCESADAS CON BLOQUE CELULAR EN LÍQUIDOS PLEURALES
NO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO
3(2%)
58(48%)
MUESTRAS PROCESADAS CON FROTIS CITOLÓGICO EN LÍQUIDOS PLEURALES
NO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO APTAS PARA EL DIAGNÓSTICO
35
Gráfico 6: Porcentajes de muestras positivas en frotis citológico.
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
Gráfico7: Porcentajes de muestras positivas en bloque celular.
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
10(8%)
16(13%)
MUESTRAS POSITIVAS PARA MALIGNIDAD DIAGNOSTICADAS CON FROTIS CITOLÓGICO
LÍQUIDOS ASCÍTICOS LÍQUIDOS PLEURALES
11(9%)
18(15%)
MUESTRAS POSITIVAS PARA MALIGNIDAD DIAGNOSTICADAS CON BLOQUE CELULAR
LÍQUIDOS ASCÍTICOS LÍQUIDOS PLEURALES
36
La población analizada corresponde a líquidos ascíticos y pleurales de 120 pacientes.
El 59 (49.17%) de muestras corresponden a líquidos ascíticos y 61 (50.83%) a
líquidos pleurales. Se realizó el análisis estadístico con las muestras que fueron
procesadas de manera adecuada obteniendo así que la sensibilidad de la técnica de
bloque celular a partir de bacto agar es de 90%, especificidad de 96%, valor
predictivo positivo 90%y valor predictivo negativo 96%.
Gráfico8: Porcentajes sobre la confiabilidad de la técnica.
Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Elaborado por: Angara Jéssica,2016
0%10%20%30%40%50%60%70%80%90%
100%
SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD VALORPREDICTIVO
POSITIVO
VALORPREDICTIVONEGATIVO
90% 96% 90% 96%
ANÁLISIS ESTADÍSTICO
37
CAPITULO V
DISCUSIÓN
En el presente estudio se ha demostrado que la técnica del bloque celular con bacto
agar puede ser empleado en el análisis de líquidos ascíticos y pleurales ofreciendo al
personal especializado un complemento útil para mejorar la calidad en el diagnostico
citológico, la ventaja de obtener material bien preservado y la posibilidad de realizar
estudios posteriores con el sobrante celular, como son las tinciones especiales y
técnicas de inmunohistoquímica.
La efectividad de la técnica se basa en formar una especie de coágulo a partir del
sedimento de los líquidos con la ayuda del agar base,al comparar el rendimiento
diagnóstico de ambas técnicas se demostró que 29(24.1%) muestras de bloque celular
con bacto agar tienen un diagnóstico positivo para malignidad, 11(9%) fueron de
líquidos ascíticos y 18(15%) fueron de líquidos pleurales. Mientras que en el frotis
citológico 26(21%) muestras tuvieron un diagnostico positivo para malignidad,
10(8%) fueron de líquidos ascíticos y 16 (13%) fueron de líquidos pleurales, 3(2,5%)
muestras no se diagnosticaron con la técnica convencional por escasa celularidad,
presencia de artefactos o material hemorrágico. Pero si fueron evaluadas como
positivas para malignidad con la técnica de bloque celular con el agar base.
Otros estudios realizados anteriormente del bloque celular en el diagnóstico de
adenopatías mediastinicas por Ana Hernandez Voth y colaboradores, obtuvieron que
de 42(89,4%) muestras representativas el 23% de los casos se diagnosticaron solo
por bloque celular, y no hubiera podido diagnosticarse de no haber sido realizado el
bloque celular, ha aportado información diagnóstica y pronóstica adicional
clínicamente relevante en casi una cuarta parte de los casos en los que se ha realizado.
(Votha, 2014).
38
En el artículo publicado por Espitia y Garzón ( Espitia A. Bloque Celular en lesiones
quísticas y solidas de glándula mamaria) anuncian que el bloque celular es
confirmatorio para lesiones metastásicas y profundas con una alta calidad de imagen
histológica obteniendo así de las 204 muestras procesadas 76 (37%) acelulares y 124
con material apto para diagnóstico en bloque celular, en citología convencional 95
(47%) muestras con material acelular insuficiente para el diagnóstico y 109(53%)
muestras aptas para el diagnóstico. El bloque celular les permitió obtener estudios
posteriores con la existencia de material celular extra, presenta una disminución de
material acelular con respecto a la citología, haciendo más confiable el
diagnostico(Espitia, 2004).
En el presente estudio, la técnica de bloque celular comparada con la técnica de
citología convencional alcanza una sensibilidad de 90% y especificidad de 96% valor
predictivo positivo 90% y valor predictivo negativo 96%. La sensibilidad caracteriza
la capacidad de la prueba para detectar la enfermedad en sujetos enfermos la
especificidad caracteriza la capacidad de la prueba para detectar la ausencia de la
enfermedad en sujetos sanos .Los valores predictivos positivo y negativo miden la
eficacia real de una prueba diagnóstica. Son probabilidades del resultado, es decir,
dan la probabilidad de padecer o no una enfermedad una vez conocido el resultado de
la prueba diagnóstica.
En estudios previos como de Saquisilí González Johanna del Rocío en el cual un
análisis publicado el 2015 realizado en SOLCA-Cuenca determinan la sensibilidad de
la técnica de bloque del 100%, especificidad de 91%, valor predictivo positivo 75%
y valor predictivo negativo 100%. La sensibilidad de la técnica de bloque tiene
valores similares a la técnica convencional, aunque algo superiores a los reportados
por la literatura; esto implica que ambas técnicas tienen un rendimiento similar. El
bloque estaría recomendado ante dudas diagnósticas y cuando se requieran técnicas
especiales de inmunohistoquímica.
“La realización de bloques celulares aportan información adicional al diagnóstico en
casos equívocos en un 75% de las veces” según Sumithran en el estudio de
enfermedades neoplasicas observo que pudo llegar a diagnósticos precisos con el
39
examen del extendido citológico, excepto en el caso del carcinomaindiferenciado,
quedando definida la histogénesis con la aplicación de técnicas de
inmunohistoquímica.
La realización de técnicas especiales e inmunohistoquímica en los bloques celulares
permite la indicación de varios estudios a un mismo caso, al obtenerse múltiples
cortes de los bloques celulares.(Rego, 2004)
Respecto al procesamiento de la técnica realizada se debe revisar los protocolos
establecidos y corregir las fallas ocurridas que pueden alterar la evaluación de la
calidad diagnostica de modo que se reduzcan ciertos errores en el pronóstico
definitivo.
40
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Las muestras de líquidos pleurales en un número de 61(50,9%), son las de
mayor parte estudiadas y 59(49,1 %) correspondieron a las de líquidos
ascíticos, el rendimiento de la técnica de bloque celular con bacto agar es
menor en los líquidos pleurales en 9 muestras representando un 7%.
En 120 muestras recibidas, 3 (2,5%) de líquidos ascíticos y 3(2,5%) de
líquidos pleurales no se diagnosticaron como positivas o negativas para
malignidad con la técnica de citología convencional.
En 120 muestras recibidas 7 (5.6%) de líquidos ascíticos y 9(7%) de líquidos
pleurales no se diagnosticaron como positivas o negativas para malignidad
con la técnica de bloque celular con bacto agar.
El rendimiento de la técnica de bloque celular con bacto agar se asemeja al
compararla con el frotis citológico, con una sensibilidad de 90% y
especificidad de 96 % versus 100% de sensibilidad y 91% de especificidad en
la técnica convencional.La citología convencional es un procedimiento
diagnóstico más sensible que el bloque celular sin embargo, el 3% de los
bloques celulares permiten hacer un diagnóstico de malignidad que se escapa
al diagnóstico citológico, por lo que es de gran utilidad emplear la técnica de
bloque celular con bacto agar ante dudas diagnósticas y cuando se requiera de
tinciones especiales de inmunohistoquímica cuya contribución es esencial
para la tipificación de neoplasias.
De las 120 muestras recibidas, 3(3,5%) fueron muestras no procesadas por
ninguna de las dos técnicas por fallas atribuidas a la fase pre analítica.
El procesamiento del bloque celular con bacto agar es un método simple y de
confianza después de haberlo comparado con los extendidos citológicos.
La recolección de sedimento para formar un coágulo con ayuda del agar base
da resultado a un citobloque brindando aporte al diagnóstico siempre y
cuando el material sea adecuado y haya un buen manejo de la técnica por
parte del personal especializado.
41
El bloque celular presenta menor material acelular con relación a la citología
convencional haciendo más confiable el diagnostico.
Por lo enunciado anteriormente se recomienda realizar la citología
convencional junto con el bloque citológico con bacto agar.
42
BIBLIOGRAFÍA
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citologicas. Recuperado el 13 de Agosto de 2016, de
https://www.seap.es/documents/228448/530517/05_Beorlegui.pdf
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07 de 2016, de
http://escuela.med.puc.cl/publ/boletin/patologiapleural/LiquidoPleural.html
Espitia, A. (2004). Bloque celular en lesiones qÍisticas y sólidas en glándula mamaria.
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GENERAL. CHILE: UNIVERSIDAD CATOLICA DE CHILE.
Garcia, & Garcia, C. S. (2005). BLOQUES CELULARES EN CITOLOGÍA:
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ANEXOS
ILUSTRACIONES FOTOGRÁFICAS
Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Anexo 1: Materiales para la realización de la técnica de bloque celular con bacto agar.
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Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
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Anexo2:Realización de la técnica de bloque celular con bacto agar.
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Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Anexo 2: Realización de la técnica de bloque celular con bacto agar.
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Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Fuente: Área Citología, HCAM,2016 Fuente: Área Citología, HCAM,2016
Fotografiado por: Angara Jéssica,2016 Fotografiado por: Angara Jéssica,2016
Anexo 2:Realización de la técnica de bloque celular con bacto agar.
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