RNA : Transcrição e Processamento

Paula de Vasconcellos Golin

RNA

Transcrição“a arte de transformar”

Conceitos Gerais

DNA mRNA proteínas

tRNA acoplador transportador

rRNA estrutural ribossomos

Transcrição “a arte de transformar”

• Decisão de iniciar

- controle da situação

• Temporal / Momento

- estado fisiológico

• Específico / Seletivo

- privilégio de poucos

Transcrição “a arte de transformar”

• Complementaridade e antiparalelismo

( T = U)

• Síntese 5' 3'

• RNA Polimerase (RNAP)

Transcrição “a arte de transformar”

• RNAPs:

reconhecem e ligam-se

desnaturam DNA

mantém estável a dupla fita aberta

mantém estável DNA:RNA

terminam síntese

restauram DNA

Transcrição “a arte de transformar”

• RNAP IrRNAsnucléologenes um ao lado do outro

• RNAP IImRNA

• RNAP IIItRNA e outros

Transcrição “a arte de transformar”

• RNAPs : nunca sozinhas

proteínas acessórias = fatores de transcrição

sítio de início da transcrição

seqüências regulatórias (promotor e enhancer)

Transcrição “a arte de transformar”

• Iniciação – ligação do complexo RNAP II ao DNA

• Alongamento – adição de nt ao mRNA crescente

• Terminação – liberação de mRNA e RNAP II

Cascata de fatores

+ RNAP II

Complexo de iniciação

Promotor

promotor região transcrita

Transcrição “a arte de transformar”

Enhancers

em ação

Transcrição “a arte de transformar”

• Alongamento

CIT desfeito

Síntese do mRNA propriamente dita

Duplex híbrido DNA:RNA

Correção de erros

Transcrição “a arte de transformar”

5´ 3´

“bolha de transcrição”

Transcrição “a arte de transformar”

Transcrição “a arte de transformar”

• Terminação

regiões consenso no DNA molde – ricas em T

clivagem (corte)

CAT CAT BoxBox

unidade de transcrição

Transcrição “a arte de transformar”

Resumindo...

Transcrição “a arte de transformar”

• rRNA - RNAP I3 complexos protéicos acessórios

promotores:

-2 domínios semelhantes RNAPII

• tRNA - RNAP III

3 complexos protéicos acessórios

promotores: - 1 domínio semelhante RNAPII

- 2 regiões controladoras internas (ICRs)

RNA

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Conceitos Gerais

mRNA Proteína

pré-mRNA mRNA

DNA

traduçãotranscrição

processamento

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

• Capping - cap 5'

• Polyadenylation - cauda poly A

• Splicing – excisão de introns

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Capping – cap 5'• O que é:

– adição de grupo metil

• Local:– primeiro nucleotídeo 5'

• Funções:– proteção– facilitar transporte e splicing

• Quando:– assim que possível

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

O Cap

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Capping

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

• Polyadenylation - cauda poly A• O que é:

– adição de aprox 200 As

• Local:– na extremidade 3'

• Funções:– facilitar transporte e tradução– estabilizar

• Quando:– após terminação

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Polyadenylation

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Estrutura protegida

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

• Tornar útil:

- Exons

porção codificadora

presente no mRNA

- Intronsporção não codificadora

não presente no mRNA

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Splicing• O que é:

– retirada de introns, fusão de exons

• Local:– regra GU-AG, sinalizado por branch point A

• Função:– tornar útil

• Quando:– logo após cap e poli A

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

DNA molde

Pré-mRNA

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

• Splicing mediado por spliceossomo:

spliceossomo = vários snRNPs (U1, U2...) + ptns

- ajuda a clivar no sítio de splicing

- remove intron

- impede afastamento dos exons

- une os exons

Splicing por spliceossomo

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

• Auto-splicing

sem atuação de spliceossomos

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Auto-splicing

Processamento“a arte de proteger e tornar útil”

Bases em comum