Upload
hoanghanh
View
214
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
StaphylococcusStaphylococcus haemolyticushaemolyticus ttöörzsek rzsek antibiotikum rezisztenciantibiotikum rezisztenci áájjáának nak
klonklon áálislis megoszlmegoszl áása sa pulzpulz áállóó ggéélelektroforlelektrofor ééziszis alapjalapj áánn
Kardos Szilvia, Kardos Szilvia,
VolterVolter ImrImr éénnéé, Pesti , Pesti JJóózsefnzsefn éé, , GhidGhid áánn ÁÁgoston, goston,
KristKrist óóf Katalin, f Katalin,
RozgonyiRozgonyi Ferenc, Nagy KFerenc, Nagy K áárolyroly
Semmelweis Egyetem, Orvosi MikrobiolSemmelweis Egyetem, Orvosi Mikrobiol óógiai Intgiai Int éézetzet
Magyar Orvosi LaboratMagyar Orvosi Laboratóóriumi Szakdolgozriumi Szakdolgozóók Egyesk Egyesüülete (MOLSZE) lete (MOLSZE)
X. (jubileumi) NagygyX. (jubileumi) Nagygyőőlléésese
Budapest, 2007. augusztus 30 Budapest, 2007. augusztus 30 –– szeptember 01.szeptember 01.
BevezetBevezet ééssStaphylococcusStaphylococcus haemolyticushaemolyticus
Antibiotikum
rezisztencia magas
Gyakran polirezisztens
Az emberi b ır normál
baktérium flórájának
tagjai
Az ép bırön és
nyálkahártyákon fert ızést
nem okoz
Fiziológiás körülmények között Intenzív centrumok
A kolonizációt és fert ızést
okozó baktériumok eredete
nem egyértelm ően tisztázott
??
Anyagok Anyagok éés ms m óódszerekdszerekA tA t öörzsek azonosrzsek azonos ííttáása:sa:
�� katalkatal áázz, , koagulkoagul áázz, telepmorfol, telepmorfol óógiagia
�� API ID 32 API ID 32 StaphStaph ((BioMBioM éérieuxrieux ))
Az Az antibakteriantibakteri áálislis éérzrzéékenyskenys éégi vizsggi vizsg áálatoklatok�� korongdiffkorongdiff úúzizióós s éés s mikrodilmikrodil úúcici óóss mmóódszerrel dszerrel
(NCCLS/CLSI)(NCCLS/CLSI)
FenotFenot íípusospusos oxacillinoxacillin rezisztencia verifikrezisztencia verifik áálláásasa�� mecAmecA ggéén kimutatn kimutat áássáával PCR mval PCR m óódszerrel dszerrel
A sejtek adhA sejtek adh éézizióójjáéáért (rt ( biofilmbiofilm --kkéépzpzééss) felel) felel ııs gs g éének nek
jelenljelenl ééttéének kimutatnek kimutat áásasa
�� icaAicaA, , icaBicaB. . icaCicaC, , icaDicaD ,,icaRicaR , , fbnAfbnA, , fbnBfbnB
A tA t öörzsek epidemiolrzsek epidemiol óógiai vizsggiai vizsg áálatalata�� rezisztencia rezisztencia fenotfenot íípuspus meghatmeghat áározroz áássáávalval
�� ggenotipizenotipiz áálláássalssal
pulzpulz áállóó ggéélelektroforlelektrofor ééziszis PFGE (PFGE (SmaSmaII))
20012001--2005 k2005 köözzöött a Semmelweis Egyetemtt a Semmelweis Egyetemintenzintenz íív centrumaiban v centrumaiban áápoltpolt
szeptikus szeptikus áállapotllapot úú betegekbbetegekb ııl kitenyl kiteny éészett szett StaphylococcusStaphylococcus haemolyticushaemolyticus ttöörzsek rzsek
gyakorisgyakoris áágaga
9.26.47.66.83.7
0
10
20
30
40
50
60
70
2001 2002 2003 2004 2005
gyak
oris
ág (%
)
S.haemolyticus összes Gram-pozitív összes Gram-negatív
összesen 2417 izolátum
áátlagosan tlagosan ééventevente~~7 %7 %
163
98 hemokultúrából kitenyészett S. haemolyticus törzs MIC érték meghatározása
49clindamycin
87ciprofloxacin
72gentamicin
27amikacin
82
87
57
99
49
0
100
rezisztens%
moxifloxacin
levofloxacin
telithromycin
clarithromycin
teicoplanin
vancomycin
oxacillin
antibiotikum
MIC (µg/ml)
A sejtek adhA sejtek adh éézizióójjáéáért felelrt felel ııs gs g éének nek jelenljelenl ééttéének kimutatnek kimutat áásasaPCR mPCR móódszerrel dszerrel (n=149)
TapadTapad áási faktorok vizsgsi faktorok vizsg áálatalata
Nincs pozitívfbnB
Nincs pozitívfbnA
0,6 %1PozitívicaR
2 %3PozitívicaD
14 %21PozitívicaC
Nincs pozitívicaB
1,4 %2PozitívicaA
DenaturDenatur áácici óó Primerek DNS lPrimerek DNS l áánchosszabbnchosszabb ííttááss
hibridizhibridiz áácici óójaja
784 bp
icaRgén pozitív
20012001--2005 k2005 köözzöött a Semmelweis Egyetem intenztt a Semmelweis Egyetem intenz íív centrumaiban v centrumaiban áápolt betegekbpolt betegekb ııl kitenyl kiteny éészettszett
S. S. haemolyticushaemolyticus ttöörzsek rzsek (n=163) rezisztencia rezisztencia patternpattern tt íípus meghatpus meghat áározroz áásasa korondiffkorondiff úúzizióóss
mmóódszerreldszerrel
100összesen
5OX, CL, E, SXT, T, GE6d
2OX, CL, E, CIP, SXT, T6c
13OX, CL, E, GE, CIP, SXT6b
3OX, CL, E, T, GE, CIP6a
2OX, E, CL, T, GE5d
2OX, E, CIP, CL, T 5c
22OX, E, GE, CIP, CL5b
17OX, E, GE, CIP, SXT5a
4OX, E, GE, CL4e
1OX, E, GE, SXT4d
22OX, E, CIP, GE4b
1OX, E, CIP, SXT4a
3OX, E, CIP3b
3OX, E, GE3a
%rezisztencia patternpatterntípus
JelmagyarJelmagyar áázat:zat:
OX=oxacillinOX=oxacillin , , CL=clindamycinCL=clindamycin , , E=erythromycinE=erythromycin , , SXT=sulphamethoxasole/trimethoprimSXT=sulphamethoxasole/trimethoprim , , T=tetracyclineT=tetracycline , , CIP=ciprofloxacinCIP=ciprofloxacin , , GE=gentamicinGE=gentamicin
3 óra
M 1 2 3
24 óra
•Lizozim koncentráció550 µg/ml
•Proteináz K koncentráció800 µg/ml
M 1 2 3
Lysostaphinkoncentráció
1.: 40 µg/ml
2.: 80 µg/ml
3.: 120 µg/ml
HemokultHemokult úúrráábbóóll kitenykiteny éészett 98 szett 98 S. S. haemolyticushaemolyticus ttöörzs rzs klonalitklonalit ááss vizsgvizsg áálata lata
pulzpulz áállóó ggéélelektroforlelektrofor ééziszis mmóódszerreldszerrel
•SmaI•etidium-bromid
•PIV puffer5 µl
Szeptikus Szeptikus áállapotllapot úú betegek betegek hemokulthemokult úúrráájjáábbóóllkitenykiteny éészett szett S. S. haemolyticushaemolyticus ttöörzsek rzsek
epidemiolepidemiol óógiai vizsggiai vizsg áálata PFGE mlata PFGE m óódszerreldszerrel
M 1 2 3 4 5 6 M 7 8 9 10 11 12 M
Dice (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
SmaI
100
989694929088868482807876747270686664626058565452504846
116
64
86
112
113
114
132
111
63
117
44
157
3
161
109
185
75
76
162
167
104
110
121
62
170
159
26
27
12
22
24
28
31
17
23
10
11
13
14
21
8
5
137
138
124
98
133
135
139
141
147
71
72
94
43
130
122
49
175
179
180
131
81
158
68
74
154
61
32
33
105
73
97
129
106
45
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
1 PIC
I. sz. perinatálisintenzív centrum
A nA n éégy leggyakoribb rezisztencia gy leggyakoribb rezisztencia patternpattern
csoportba tartozcsoportba tartoz óó 120 120 S.S. haemolyticushaemolyticus ttöörzs rzs genotgenot íípusos megoszlpusos megoszl áásasa
Rezisztencia Rezisztencia patternpattern tt íípuspus
PFGEPFGEtt íípusokpusok
1 1 1 1 1 1 1 1 3 1 1 1 3 1 1
1 1 1 2 2 1 1 1 1 2 1 1 1 1
1 1 1 1 2 2 1 1 1 1 3 1 1 2 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
4b
5a
5b
6b
1 3 4a 5
6b 6c 7a 7c
8a 8c 8d 8e
8f 8g 8h 8i
8j 8k 9a 9b
10a 10b 10c 10d
10e 11a 11b 11c
11d 11e 11f 11h
11i 11j 12 18b
22a 23a 23b 24
25 26 27
ÖÖsszefoglalsszefoglal ááss
2001 2001 éés 2005 ks 2005 k öözzöött tt áátlagosan tlagosan éévente 7 %vente 7 % --banban tenyteny éészett ki az szett ki az
intenzintenz íív osztv oszt áályon lyon áápolt betegekbpolt betegekb ııl l S. S. haemolyticushaemolyticus
Ezek az Ezek az izolizol áátumoktumok polirezisztensekpolirezisztensek voltakvoltak
Csak Csak vancomycinvancomycin -- nelnel kezelhetkezelhet ıık a betegek k a betegek
MIC meghatMIC meghat áározroz áás javasolts javasolt
Az azonos antibiotikum rezisztencia kAz azonos antibiotikum rezisztencia k éép a p a S. S. haemolyticushaemolyticus
eseteset éében nem jben nem j áárvrváánytani nytani markermarker , mert genot, mert genot íípusosan a vizsgpusosan a vizsg áált lt
ttöörzsek krzsek k üüllöönbnb ööznekznek
��EredmEredm éényeink szerint a tnyeink szerint a t öörzsek nagyobb valrzsek nagyobb val óószszíínnőőssééggel ggel
randomrandom mmóódon vdon v áálogatlogat óódnak ki a betegek sajdnak ki a betegek saj áát flt fl óórráájjáábbóól vagy l vagy
mikro mikro éés makro ks makro k öörnyezetrnyezet éébbııll