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1 Francisco Franceschini Neto AVALIAÇÃO DA REPARAÇÃO ÓSSEA EM MANDÍBULA DE COELHOS UTILIZANDO BIOCERÂMICA FOSFO-CÁLCICA BIFÁSICA MICRO-MACRO POROSA DE HIDROXIAPATITA E BETA TRICÁLCIO FOSFATO (Osteosynt ® ) Dissertação apresentada à Universidade de Santo Amaro UNISA (SP) como parte dos critérios de avaliação para obtenção do título de Mestre em Odontologia área de concentração em Implantodontia. Orientador Prof. Dr. Carlos Eduardo Xavier dos Santos Ribeiro da Silva SÃO PAULO – 2008

TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

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Page 1: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

1

Francisco Franceschini Neto

AVALIACcedilAtildeO DA REPARACcedilAtildeO OacuteSSEA EM MANDIacuteBULA DE

COELHOS UTILIZANDO BIOCERAcircMICA FOSFO-CAacuteLCICA

BIFAacuteSICA MICRO-MACRO POROSA DE HIDROXIAPATITA E BETA

TRICAacuteLCIO FOSFATO (Osteosyntreg)

Dissertaccedilatildeo apresentada agrave Universidade de Santo Amaro ndash UNISA (SP) como parte dos criteacuterios de avaliaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Odontologia aacuterea de concentraccedilatildeo em Implantodontia Orientador Prof Dr Carlos Eduardo Xavier dos Santos Ribeiro da Silva

SAtildeO PAULO ndash 2008

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Lista de abreviaturas

Bioceracircmica de HAβTCP ndash Bioceracircmica fosfo-caacutelcica bifaacutesica micro-macro porosa de

hidroxiapatita e beta tricaacutecio fosfato

αTCP ndash Bioceracircmica alfa tricaacutelcio fosfato

βTCP ndash Bioceracircmica beta tricaacutelcio fosfato

PRP ndash Plasma rico em plaquetas

HA ndash Hidroxiapatita

COBEA - Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal

UNISA ndash Universidade de Santo Amaro

ICLAS - International Council of Laboratory Animal Science

HE - Hematoxilina e Eosina

SF ndash Soro fisioloacutegico

RPA ndash Recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica

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Resumo

Este experimento animal avaliou o preenchimento de defeitos oacutesseos comparando a

utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita associada agrave beta tricaacutelcio fosfato (HAβTCP) com osso

autoacutegeno e coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle quanto agrave biocompatibilidade

imunogenicidade capacidade osteoindutora osteoindutora e osteogecircnica

O experimento baseou-se na realizaccedilatildeo de 3 defeitos criacuteticos na mandiacutebula de 11 coelhos

da raccedila New Zeland

Os defeitos foram preenchidos respectivamente com a bioceracircmica de HAβTCP osso

autoacutegeno coletado e triturado durante a realizaccedilatildeo dos defeitos e coagulo sanguiacuteneo

Foi realizada a eutanaacutesia dos animais apoacutes o periacuteodo de 90 dias sendo as amostras

coletadas e encaminhadas para exame histomorfoloacutegico

A luz do microscoacutepio foi observada a presenccedila de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos

associados ou natildeo com a presenccedila de osso maduro ou imaturo

Todos os materiais estudados apresentaram neoformaccedilatildeo oacutessea em todos os casos com

presenccedila de osso maduro e imaturo

Quanto agrave presenccedila de material residual de bioceracircmica de HAβTCP o mesmo foi

encontrado em 7 das 11 lacircminas

A bioceracircmica de HAβTCP mostrou ser um substituto oacutesseo biocompatiacutevel imunogecircnico

com caracteriacutesticas osteoindutoras e osteocondutoras acelerando o processo de neoformaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno poreacutem sem apresentar caracteriacutesticas osteogecircnicas sendo

indicado em casos de preenchimento de defeitos nas aacutereas de cirurgia buco maxilo facial e

implantodontia com seguranccedila e eficaacutecia

4

Abstract

5

Sumaacuterio

Lista de abreviaturas

Resumo

Abstract

1 Introduccedilatildeo6

2 Revisatildeo da literatura 10

3 Proposiccedilatildeo9

4 Material e Meacutetodo21

5 Resultados 32

6 Discussatildeo 46

7 Conclusotildees 52

8 Referecircncias Bibliograacuteficas 53

9 Anexos 57

6

Introduccedilatildeo

O conforto gerado pelos avanccedilos tecnoloacutegicos da vida moderna em todas as aacutereas leva-

nos a uma busca constante por inovaccedilotildees visando o aumento na qualidade de vida

Observando a maior preocupaccedilatildeo com o bem estar pessoal alimentaccedilatildeo e esteacutetica aleacutem do

aumento do conforto em todos os aspectos a implantodontia atual busca recursos que permitam a

reabilitaccedilatildeo dentaacuteria total ou parcial Poreacutem nem sempre o tratamento implantodocircntico pode ser

executado de imediato A partir da extraccedilatildeo dentaacuteria inicia-se um processo de reparaccedilatildeo e perda

oacutessea alveolar contiacutenua e progressiva trazendo deficiecircncia oacutessea em altura e espessura o que

tambeacutem pode agravar-se quando acompanhado por outros processos fisioloacutegicos ou patoloacutegicos

como a pneumatizaccedilatildeo do seio maxilar e cistos residuais entre outros dificultando o tratamento

implantodocircntico

Devido agrave apariccedilatildeo na miacutedia da implantodontia e a vontade das pessoas que tem essa

necessidade de restabelecer com tal teacutecnica suas perdas a demanda para este tipo de tratamento

vem aumentando levando a procura e ao desenvolvimento de teacutecnicas para reconstruccedilatildeo e

adequaccedilatildeo de rebordos alveolares atroacuteficos (Donovan et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-

Pedersen 1990 Gruber Solar e Ulm 1996 Neyt et al 1997 Nystroumlm et al 1995 Sindet-

Pedersen e Enemark 1988)

Em cirurgia buco maxilo facial e implantodontia na tentativa de recuperar o contorno

anatocircmico natural e restaurar a funccedilatildeo de aacutereas com deficiecircncia de tecido oacutesseo diversas teacutecnicas

como enxertos distraccedilatildeo osteogecircnica expansotildees oacutesseas e splits ciruacutergicos satildeo frequumlentemente

utilizadas visando em um primeiro momento substituiccedilatildeo eou regeneraccedilatildeo oacutessea alveolar nas

regiotildees de reabsorccedilatildeo oacutessea Nas teacutecnicas de enxerto utiliza-se de preferecircncia o proacuteprio osso do

paciente (autoacutegeno)

Os autoenxertos ou enxertos autoacutegenos apresentam vantagens sobre os demais pela

ausecircncia de imunogenicidade e pela presenccedila de ceacutelulas oacutesseas viaacuteveis com capacidade

osteogecircnica mesmo na ausecircncia de ceacutelulas mesenquimais indiferenciadas Por estas razotildees satildeo

largamente empregados nas mais variadas teacutecnicas de reconstruccedilatildeo de rebordos sendo inuacutemeras

as opccedilotildees de aacutereas doadoras (Schenk 1994)

A crista do iacutelio ramo e mento da mandiacutebula e tuberosidade da maxila satildeo zonas doadoras

muito utilizadas e citadas para a finalidade de captaccedilatildeo e coleta de osso autoacutegeno (Breine e

Branemark 1980 Adell et al 1990 Citardi et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-Pedersen

1990 Isaksson et al 1993)

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

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tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 2: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

2

Lista de abreviaturas

Bioceracircmica de HAβTCP ndash Bioceracircmica fosfo-caacutelcica bifaacutesica micro-macro porosa de

hidroxiapatita e beta tricaacutecio fosfato

αTCP ndash Bioceracircmica alfa tricaacutelcio fosfato

βTCP ndash Bioceracircmica beta tricaacutelcio fosfato

PRP ndash Plasma rico em plaquetas

HA ndash Hidroxiapatita

COBEA - Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal

UNISA ndash Universidade de Santo Amaro

ICLAS - International Council of Laboratory Animal Science

HE - Hematoxilina e Eosina

SF ndash Soro fisioloacutegico

RPA ndash Recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica

3

Resumo

Este experimento animal avaliou o preenchimento de defeitos oacutesseos comparando a

utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita associada agrave beta tricaacutelcio fosfato (HAβTCP) com osso

autoacutegeno e coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle quanto agrave biocompatibilidade

imunogenicidade capacidade osteoindutora osteoindutora e osteogecircnica

O experimento baseou-se na realizaccedilatildeo de 3 defeitos criacuteticos na mandiacutebula de 11 coelhos

da raccedila New Zeland

Os defeitos foram preenchidos respectivamente com a bioceracircmica de HAβTCP osso

autoacutegeno coletado e triturado durante a realizaccedilatildeo dos defeitos e coagulo sanguiacuteneo

Foi realizada a eutanaacutesia dos animais apoacutes o periacuteodo de 90 dias sendo as amostras

coletadas e encaminhadas para exame histomorfoloacutegico

A luz do microscoacutepio foi observada a presenccedila de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos

associados ou natildeo com a presenccedila de osso maduro ou imaturo

Todos os materiais estudados apresentaram neoformaccedilatildeo oacutessea em todos os casos com

presenccedila de osso maduro e imaturo

Quanto agrave presenccedila de material residual de bioceracircmica de HAβTCP o mesmo foi

encontrado em 7 das 11 lacircminas

A bioceracircmica de HAβTCP mostrou ser um substituto oacutesseo biocompatiacutevel imunogecircnico

com caracteriacutesticas osteoindutoras e osteocondutoras acelerando o processo de neoformaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno poreacutem sem apresentar caracteriacutesticas osteogecircnicas sendo

indicado em casos de preenchimento de defeitos nas aacutereas de cirurgia buco maxilo facial e

implantodontia com seguranccedila e eficaacutecia

4

Abstract

5

Sumaacuterio

Lista de abreviaturas

Resumo

Abstract

1 Introduccedilatildeo6

2 Revisatildeo da literatura 10

3 Proposiccedilatildeo9

4 Material e Meacutetodo21

5 Resultados 32

6 Discussatildeo 46

7 Conclusotildees 52

8 Referecircncias Bibliograacuteficas 53

9 Anexos 57

6

Introduccedilatildeo

O conforto gerado pelos avanccedilos tecnoloacutegicos da vida moderna em todas as aacutereas leva-

nos a uma busca constante por inovaccedilotildees visando o aumento na qualidade de vida

Observando a maior preocupaccedilatildeo com o bem estar pessoal alimentaccedilatildeo e esteacutetica aleacutem do

aumento do conforto em todos os aspectos a implantodontia atual busca recursos que permitam a

reabilitaccedilatildeo dentaacuteria total ou parcial Poreacutem nem sempre o tratamento implantodocircntico pode ser

executado de imediato A partir da extraccedilatildeo dentaacuteria inicia-se um processo de reparaccedilatildeo e perda

oacutessea alveolar contiacutenua e progressiva trazendo deficiecircncia oacutessea em altura e espessura o que

tambeacutem pode agravar-se quando acompanhado por outros processos fisioloacutegicos ou patoloacutegicos

como a pneumatizaccedilatildeo do seio maxilar e cistos residuais entre outros dificultando o tratamento

implantodocircntico

Devido agrave apariccedilatildeo na miacutedia da implantodontia e a vontade das pessoas que tem essa

necessidade de restabelecer com tal teacutecnica suas perdas a demanda para este tipo de tratamento

vem aumentando levando a procura e ao desenvolvimento de teacutecnicas para reconstruccedilatildeo e

adequaccedilatildeo de rebordos alveolares atroacuteficos (Donovan et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-

Pedersen 1990 Gruber Solar e Ulm 1996 Neyt et al 1997 Nystroumlm et al 1995 Sindet-

Pedersen e Enemark 1988)

Em cirurgia buco maxilo facial e implantodontia na tentativa de recuperar o contorno

anatocircmico natural e restaurar a funccedilatildeo de aacutereas com deficiecircncia de tecido oacutesseo diversas teacutecnicas

como enxertos distraccedilatildeo osteogecircnica expansotildees oacutesseas e splits ciruacutergicos satildeo frequumlentemente

utilizadas visando em um primeiro momento substituiccedilatildeo eou regeneraccedilatildeo oacutessea alveolar nas

regiotildees de reabsorccedilatildeo oacutessea Nas teacutecnicas de enxerto utiliza-se de preferecircncia o proacuteprio osso do

paciente (autoacutegeno)

Os autoenxertos ou enxertos autoacutegenos apresentam vantagens sobre os demais pela

ausecircncia de imunogenicidade e pela presenccedila de ceacutelulas oacutesseas viaacuteveis com capacidade

osteogecircnica mesmo na ausecircncia de ceacutelulas mesenquimais indiferenciadas Por estas razotildees satildeo

largamente empregados nas mais variadas teacutecnicas de reconstruccedilatildeo de rebordos sendo inuacutemeras

as opccedilotildees de aacutereas doadoras (Schenk 1994)

A crista do iacutelio ramo e mento da mandiacutebula e tuberosidade da maxila satildeo zonas doadoras

muito utilizadas e citadas para a finalidade de captaccedilatildeo e coleta de osso autoacutegeno (Breine e

Branemark 1980 Adell et al 1990 Citardi et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-Pedersen

1990 Isaksson et al 1993)

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 3: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

3

Resumo

Este experimento animal avaliou o preenchimento de defeitos oacutesseos comparando a

utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita associada agrave beta tricaacutelcio fosfato (HAβTCP) com osso

autoacutegeno e coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle quanto agrave biocompatibilidade

imunogenicidade capacidade osteoindutora osteoindutora e osteogecircnica

O experimento baseou-se na realizaccedilatildeo de 3 defeitos criacuteticos na mandiacutebula de 11 coelhos

da raccedila New Zeland

Os defeitos foram preenchidos respectivamente com a bioceracircmica de HAβTCP osso

autoacutegeno coletado e triturado durante a realizaccedilatildeo dos defeitos e coagulo sanguiacuteneo

Foi realizada a eutanaacutesia dos animais apoacutes o periacuteodo de 90 dias sendo as amostras

coletadas e encaminhadas para exame histomorfoloacutegico

A luz do microscoacutepio foi observada a presenccedila de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos

associados ou natildeo com a presenccedila de osso maduro ou imaturo

Todos os materiais estudados apresentaram neoformaccedilatildeo oacutessea em todos os casos com

presenccedila de osso maduro e imaturo

Quanto agrave presenccedila de material residual de bioceracircmica de HAβTCP o mesmo foi

encontrado em 7 das 11 lacircminas

A bioceracircmica de HAβTCP mostrou ser um substituto oacutesseo biocompatiacutevel imunogecircnico

com caracteriacutesticas osteoindutoras e osteocondutoras acelerando o processo de neoformaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno poreacutem sem apresentar caracteriacutesticas osteogecircnicas sendo

indicado em casos de preenchimento de defeitos nas aacutereas de cirurgia buco maxilo facial e

implantodontia com seguranccedila e eficaacutecia

4

Abstract

5

Sumaacuterio

Lista de abreviaturas

Resumo

Abstract

1 Introduccedilatildeo6

2 Revisatildeo da literatura 10

3 Proposiccedilatildeo9

4 Material e Meacutetodo21

5 Resultados 32

6 Discussatildeo 46

7 Conclusotildees 52

8 Referecircncias Bibliograacuteficas 53

9 Anexos 57

6

Introduccedilatildeo

O conforto gerado pelos avanccedilos tecnoloacutegicos da vida moderna em todas as aacutereas leva-

nos a uma busca constante por inovaccedilotildees visando o aumento na qualidade de vida

Observando a maior preocupaccedilatildeo com o bem estar pessoal alimentaccedilatildeo e esteacutetica aleacutem do

aumento do conforto em todos os aspectos a implantodontia atual busca recursos que permitam a

reabilitaccedilatildeo dentaacuteria total ou parcial Poreacutem nem sempre o tratamento implantodocircntico pode ser

executado de imediato A partir da extraccedilatildeo dentaacuteria inicia-se um processo de reparaccedilatildeo e perda

oacutessea alveolar contiacutenua e progressiva trazendo deficiecircncia oacutessea em altura e espessura o que

tambeacutem pode agravar-se quando acompanhado por outros processos fisioloacutegicos ou patoloacutegicos

como a pneumatizaccedilatildeo do seio maxilar e cistos residuais entre outros dificultando o tratamento

implantodocircntico

Devido agrave apariccedilatildeo na miacutedia da implantodontia e a vontade das pessoas que tem essa

necessidade de restabelecer com tal teacutecnica suas perdas a demanda para este tipo de tratamento

vem aumentando levando a procura e ao desenvolvimento de teacutecnicas para reconstruccedilatildeo e

adequaccedilatildeo de rebordos alveolares atroacuteficos (Donovan et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-

Pedersen 1990 Gruber Solar e Ulm 1996 Neyt et al 1997 Nystroumlm et al 1995 Sindet-

Pedersen e Enemark 1988)

Em cirurgia buco maxilo facial e implantodontia na tentativa de recuperar o contorno

anatocircmico natural e restaurar a funccedilatildeo de aacutereas com deficiecircncia de tecido oacutesseo diversas teacutecnicas

como enxertos distraccedilatildeo osteogecircnica expansotildees oacutesseas e splits ciruacutergicos satildeo frequumlentemente

utilizadas visando em um primeiro momento substituiccedilatildeo eou regeneraccedilatildeo oacutessea alveolar nas

regiotildees de reabsorccedilatildeo oacutessea Nas teacutecnicas de enxerto utiliza-se de preferecircncia o proacuteprio osso do

paciente (autoacutegeno)

Os autoenxertos ou enxertos autoacutegenos apresentam vantagens sobre os demais pela

ausecircncia de imunogenicidade e pela presenccedila de ceacutelulas oacutesseas viaacuteveis com capacidade

osteogecircnica mesmo na ausecircncia de ceacutelulas mesenquimais indiferenciadas Por estas razotildees satildeo

largamente empregados nas mais variadas teacutecnicas de reconstruccedilatildeo de rebordos sendo inuacutemeras

as opccedilotildees de aacutereas doadoras (Schenk 1994)

A crista do iacutelio ramo e mento da mandiacutebula e tuberosidade da maxila satildeo zonas doadoras

muito utilizadas e citadas para a finalidade de captaccedilatildeo e coleta de osso autoacutegeno (Breine e

Branemark 1980 Adell et al 1990 Citardi et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-Pedersen

1990 Isaksson et al 1993)

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 4: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

4

Abstract

5

Sumaacuterio

Lista de abreviaturas

Resumo

Abstract

1 Introduccedilatildeo6

2 Revisatildeo da literatura 10

3 Proposiccedilatildeo9

4 Material e Meacutetodo21

5 Resultados 32

6 Discussatildeo 46

7 Conclusotildees 52

8 Referecircncias Bibliograacuteficas 53

9 Anexos 57

6

Introduccedilatildeo

O conforto gerado pelos avanccedilos tecnoloacutegicos da vida moderna em todas as aacutereas leva-

nos a uma busca constante por inovaccedilotildees visando o aumento na qualidade de vida

Observando a maior preocupaccedilatildeo com o bem estar pessoal alimentaccedilatildeo e esteacutetica aleacutem do

aumento do conforto em todos os aspectos a implantodontia atual busca recursos que permitam a

reabilitaccedilatildeo dentaacuteria total ou parcial Poreacutem nem sempre o tratamento implantodocircntico pode ser

executado de imediato A partir da extraccedilatildeo dentaacuteria inicia-se um processo de reparaccedilatildeo e perda

oacutessea alveolar contiacutenua e progressiva trazendo deficiecircncia oacutessea em altura e espessura o que

tambeacutem pode agravar-se quando acompanhado por outros processos fisioloacutegicos ou patoloacutegicos

como a pneumatizaccedilatildeo do seio maxilar e cistos residuais entre outros dificultando o tratamento

implantodocircntico

Devido agrave apariccedilatildeo na miacutedia da implantodontia e a vontade das pessoas que tem essa

necessidade de restabelecer com tal teacutecnica suas perdas a demanda para este tipo de tratamento

vem aumentando levando a procura e ao desenvolvimento de teacutecnicas para reconstruccedilatildeo e

adequaccedilatildeo de rebordos alveolares atroacuteficos (Donovan et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-

Pedersen 1990 Gruber Solar e Ulm 1996 Neyt et al 1997 Nystroumlm et al 1995 Sindet-

Pedersen e Enemark 1988)

Em cirurgia buco maxilo facial e implantodontia na tentativa de recuperar o contorno

anatocircmico natural e restaurar a funccedilatildeo de aacutereas com deficiecircncia de tecido oacutesseo diversas teacutecnicas

como enxertos distraccedilatildeo osteogecircnica expansotildees oacutesseas e splits ciruacutergicos satildeo frequumlentemente

utilizadas visando em um primeiro momento substituiccedilatildeo eou regeneraccedilatildeo oacutessea alveolar nas

regiotildees de reabsorccedilatildeo oacutessea Nas teacutecnicas de enxerto utiliza-se de preferecircncia o proacuteprio osso do

paciente (autoacutegeno)

Os autoenxertos ou enxertos autoacutegenos apresentam vantagens sobre os demais pela

ausecircncia de imunogenicidade e pela presenccedila de ceacutelulas oacutesseas viaacuteveis com capacidade

osteogecircnica mesmo na ausecircncia de ceacutelulas mesenquimais indiferenciadas Por estas razotildees satildeo

largamente empregados nas mais variadas teacutecnicas de reconstruccedilatildeo de rebordos sendo inuacutemeras

as opccedilotildees de aacutereas doadoras (Schenk 1994)

A crista do iacutelio ramo e mento da mandiacutebula e tuberosidade da maxila satildeo zonas doadoras

muito utilizadas e citadas para a finalidade de captaccedilatildeo e coleta de osso autoacutegeno (Breine e

Branemark 1980 Adell et al 1990 Citardi et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-Pedersen

1990 Isaksson et al 1993)

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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Schiroli G Chiaramondia M Human histological 4 months findings using a

combination of purecirc-fase beta tricalcium phosphate(βTCP) and platelet rich plasma (PRP)

chair-side preparation in comparison with βTCP alone autogenous bone graft DFDBA

and Bio-OSS Poster presentation at the internatinal conference ldquoBONE 2003rdquo NL-

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Tamura K et al (2007) The use of porous β- tricalcium phosphate blocks with

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 5: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

5

Sumaacuterio

Lista de abreviaturas

Resumo

Abstract

1 Introduccedilatildeo6

2 Revisatildeo da literatura 10

3 Proposiccedilatildeo9

4 Material e Meacutetodo21

5 Resultados 32

6 Discussatildeo 46

7 Conclusotildees 52

8 Referecircncias Bibliograacuteficas 53

9 Anexos 57

6

Introduccedilatildeo

O conforto gerado pelos avanccedilos tecnoloacutegicos da vida moderna em todas as aacutereas leva-

nos a uma busca constante por inovaccedilotildees visando o aumento na qualidade de vida

Observando a maior preocupaccedilatildeo com o bem estar pessoal alimentaccedilatildeo e esteacutetica aleacutem do

aumento do conforto em todos os aspectos a implantodontia atual busca recursos que permitam a

reabilitaccedilatildeo dentaacuteria total ou parcial Poreacutem nem sempre o tratamento implantodocircntico pode ser

executado de imediato A partir da extraccedilatildeo dentaacuteria inicia-se um processo de reparaccedilatildeo e perda

oacutessea alveolar contiacutenua e progressiva trazendo deficiecircncia oacutessea em altura e espessura o que

tambeacutem pode agravar-se quando acompanhado por outros processos fisioloacutegicos ou patoloacutegicos

como a pneumatizaccedilatildeo do seio maxilar e cistos residuais entre outros dificultando o tratamento

implantodocircntico

Devido agrave apariccedilatildeo na miacutedia da implantodontia e a vontade das pessoas que tem essa

necessidade de restabelecer com tal teacutecnica suas perdas a demanda para este tipo de tratamento

vem aumentando levando a procura e ao desenvolvimento de teacutecnicas para reconstruccedilatildeo e

adequaccedilatildeo de rebordos alveolares atroacuteficos (Donovan et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-

Pedersen 1990 Gruber Solar e Ulm 1996 Neyt et al 1997 Nystroumlm et al 1995 Sindet-

Pedersen e Enemark 1988)

Em cirurgia buco maxilo facial e implantodontia na tentativa de recuperar o contorno

anatocircmico natural e restaurar a funccedilatildeo de aacutereas com deficiecircncia de tecido oacutesseo diversas teacutecnicas

como enxertos distraccedilatildeo osteogecircnica expansotildees oacutesseas e splits ciruacutergicos satildeo frequumlentemente

utilizadas visando em um primeiro momento substituiccedilatildeo eou regeneraccedilatildeo oacutessea alveolar nas

regiotildees de reabsorccedilatildeo oacutessea Nas teacutecnicas de enxerto utiliza-se de preferecircncia o proacuteprio osso do

paciente (autoacutegeno)

Os autoenxertos ou enxertos autoacutegenos apresentam vantagens sobre os demais pela

ausecircncia de imunogenicidade e pela presenccedila de ceacutelulas oacutesseas viaacuteveis com capacidade

osteogecircnica mesmo na ausecircncia de ceacutelulas mesenquimais indiferenciadas Por estas razotildees satildeo

largamente empregados nas mais variadas teacutecnicas de reconstruccedilatildeo de rebordos sendo inuacutemeras

as opccedilotildees de aacutereas doadoras (Schenk 1994)

A crista do iacutelio ramo e mento da mandiacutebula e tuberosidade da maxila satildeo zonas doadoras

muito utilizadas e citadas para a finalidade de captaccedilatildeo e coleta de osso autoacutegeno (Breine e

Branemark 1980 Adell et al 1990 Citardi et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-Pedersen

1990 Isaksson et al 1993)

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 6: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

6

Introduccedilatildeo

O conforto gerado pelos avanccedilos tecnoloacutegicos da vida moderna em todas as aacutereas leva-

nos a uma busca constante por inovaccedilotildees visando o aumento na qualidade de vida

Observando a maior preocupaccedilatildeo com o bem estar pessoal alimentaccedilatildeo e esteacutetica aleacutem do

aumento do conforto em todos os aspectos a implantodontia atual busca recursos que permitam a

reabilitaccedilatildeo dentaacuteria total ou parcial Poreacutem nem sempre o tratamento implantodocircntico pode ser

executado de imediato A partir da extraccedilatildeo dentaacuteria inicia-se um processo de reparaccedilatildeo e perda

oacutessea alveolar contiacutenua e progressiva trazendo deficiecircncia oacutessea em altura e espessura o que

tambeacutem pode agravar-se quando acompanhado por outros processos fisioloacutegicos ou patoloacutegicos

como a pneumatizaccedilatildeo do seio maxilar e cistos residuais entre outros dificultando o tratamento

implantodocircntico

Devido agrave apariccedilatildeo na miacutedia da implantodontia e a vontade das pessoas que tem essa

necessidade de restabelecer com tal teacutecnica suas perdas a demanda para este tipo de tratamento

vem aumentando levando a procura e ao desenvolvimento de teacutecnicas para reconstruccedilatildeo e

adequaccedilatildeo de rebordos alveolares atroacuteficos (Donovan et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-

Pedersen 1990 Gruber Solar e Ulm 1996 Neyt et al 1997 Nystroumlm et al 1995 Sindet-

Pedersen e Enemark 1988)

Em cirurgia buco maxilo facial e implantodontia na tentativa de recuperar o contorno

anatocircmico natural e restaurar a funccedilatildeo de aacutereas com deficiecircncia de tecido oacutesseo diversas teacutecnicas

como enxertos distraccedilatildeo osteogecircnica expansotildees oacutesseas e splits ciruacutergicos satildeo frequumlentemente

utilizadas visando em um primeiro momento substituiccedilatildeo eou regeneraccedilatildeo oacutessea alveolar nas

regiotildees de reabsorccedilatildeo oacutessea Nas teacutecnicas de enxerto utiliza-se de preferecircncia o proacuteprio osso do

paciente (autoacutegeno)

Os autoenxertos ou enxertos autoacutegenos apresentam vantagens sobre os demais pela

ausecircncia de imunogenicidade e pela presenccedila de ceacutelulas oacutesseas viaacuteveis com capacidade

osteogecircnica mesmo na ausecircncia de ceacutelulas mesenquimais indiferenciadas Por estas razotildees satildeo

largamente empregados nas mais variadas teacutecnicas de reconstruccedilatildeo de rebordos sendo inuacutemeras

as opccedilotildees de aacutereas doadoras (Schenk 1994)

A crista do iacutelio ramo e mento da mandiacutebula e tuberosidade da maxila satildeo zonas doadoras

muito utilizadas e citadas para a finalidade de captaccedilatildeo e coleta de osso autoacutegeno (Breine e

Branemark 1980 Adell et al 1990 Citardi et al 1994 Jensen Simonsen e Sindet-Pedersen

1990 Isaksson et al 1993)

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 7: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

7

Jaacute os enxertos retirados das regiotildees de costela tiacutebia e calvaacuteria satildeo referenciados com

menor frequumlecircncia apesar de apresentarem bons resultados cliacutenicos (Alonso et al 1995 Donovan

et al 1994 La Rossa et al 1995 Triplett e Schow 1996)

Breine et al em 1980 foram os primeiros a avaliar o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos e

implantes para reconstruccedilatildeo de rebordos atroacuteficos Com base neste trabalho diferentes teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo tecircm sido desenvolvidas e utilizadas na reabilitaccedilatildeo parcial ou total de pacientes que

apresentam deficiecircncia ou ausecircncia de osso alveolar

De um modo geral agrupam-se estas teacutecnicas nos seguintes procedimentos teacutecnicas de

reconstruccedilatildeo com enxerto tipo ldquoonlayrdquo baseada na fixaccedilatildeo de grandes blocos oacutesseos sobre a crista

do rebordo alveolar teacutecnica de reconstruccedilatildeo tipo ldquoveneerrdquo onde o enxerto eacute posicionado sobre a

face vestibular ou lingual envolvendo ou natildeo a crista para a obtenccedilatildeo de aumentos em altura e

espessura teacutecnica ldquoinlayrdquo onde o enxerto eacute posicionado no interior de defeitos oacutesseos

normalmente associada agrave preenchimentos de ldquoburacosrdquo oacutesseos osteotomias completas maxilares

procedimentos de levantamento de seio maxilar ou fossa nasal (Albrektsson 1980 Jensen

Simonsen e Sindet-Pedersen 1990 Neyt et al 1997 Triplett e Schow 1996 Tolman 1995)

Poreacutem visando uma menor morbidade e muitas vezes dependendo da quantidade e

tamanho do enxerto que o paciente necessita buscamos invariavelmente substituir esse tipo de

osso por outros materiais

Apesar de suas enormes vantagens bioloacutegicas os enxertos autoacutegenos apresentam tambeacutem

certos inconvenientes como a necessidade de hospitalizaccedilatildeo (quando em grande quantidade e

tamanho) intervenccedilatildeo em outra aacuterea do organismo morbidade da aacuterea doadora maior periacuteodo de

convalescenccedila susceptibilidade a infecccedilotildees e ainda estatildeo sujeitos ao risco de reabsorccedilatildeo

progressiva e constante

Devido a todos estes fatores o uso de enxertos oacutesseos autoacutegenos em casos de reabsorccedilatildeo

progressiva da maxila se torna ainda mais questionaacutevel pois a quantidade de osso necessaacuteria na

reabilitaccedilatildeo destes casos eacute ainda menor e nem sempre justifica a realizaccedilatildeo de outra intervenccedilatildeo

ciruacutergica (Toriumi et al 1991)

Por essa razatildeo diferentes materiais aloacutegenos e aloplaacutesticos tecircm sido desenvolvidos com o

objetivo de recompor defeitos oacutesseos Como exemplos a hidroxiapatita a matriz orgacircnica

calcificada e a descalcificada tanto do osso humano como bovino tecircm sido utilizadas apesar da

funccedilatildeo desses materiais na formaccedilatildeo oacutessea natildeo ser totalmente esclarecida

Os materiais utilizados para a substituiccedilatildeo de ossos enquadram-se em uma classe

denominada de biomateriais Esses biomateriais podem ser classificados de acordo com sua forma

de accedilatildeo em

-osteoindutores ndash Quando possuem a capacidade de atrair ceacutelulas mesenquimais que mais

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 8: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

8

tarde se diferenciaratildeo em ceacutelulas osteoprogenitoras (osteoblastos)

-osteocondutores ndash Quando possuem capacidade de criar um suporte estrutural para a

neoformaccedilatildeo oacutessea

-osteogecircnicos ndash Quando possuem a capacidade de viabilizar o processo pelo qual o

material se diferencia em ceacutelulas oacutesseas vivas no leito receptor com a capacidade de formar novo

tecido oacutesseo a partir das mesmas

A osteoinduccedilatildeo e a osteoconduccedilatildeo ocorre aleacutem de outros fatores em virtude da presenccedila

de arcabouccedilos estruturais que organizam e orientam a neoformaccedilatildeo celular facilitando o

crescimento oacutesseo reparador (Garrido 2003)

Vaacuterios materiais satildeo estudados para serem utilizados como este arcabouccedilo Entre eles as

bioceracircmicas ganharam um espaccedilo importante nesses estudos

As bioceracircmicas alfa(α) e beta (β) de tricaacutelcio fosfato satildeo dois desses materiais As duas

satildeo diferenciadas entre si pela composiccedilatildeo estrutural de sua cadeia quiacutemica que confere

propriedades de maior ou menor solubilidade recentemente vem sendo estudadas com grandes

avanccedilos e resultados (Wiltfang Schlegel e Merten Merten et al 2001)

A bioceracircmica de beta triclaacutecio fosfato (βTCP) tem se mostrado um material com

propriedades que podem levar a uma osteoinduccedilatildeo ou seja capacidade de armazenar as proteiacutenas

e ceacutelulas viaacuteveis especiacuteficas e proacuteprias do indiviacuteduo receptor permitindo o processo natural de

neoformaccedilatildeo oacutessea aleacutem de biocompatibilidade apresentando somente problemas devido a sua

absorccedilatildeo acelerada (Hench et al 1971 Szaboacute et al 2001)

Por possuir uma estrutura arquitetocircnica porosa a bioceracircmica de βTCP eacute indicada como

um eficaz e importante veiacuteculo osteocondutor assim como sua topografia superficial permite

atividade metaboacutelica osteoblaacutestica e expressatildeo desejaacutevel dos fenoacutetipos adequados para cada etapa

dos fenocircmenos de neoformaccedilatildeo tecidual oacutessea (Szaboacute et al 2001 Mastrogiacomo et al 2006)

As hidroxiapatitas (HA) sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as

que mais se assemelham ao osso natural sendo uma opccedilatildeo para casos onde eacute necessaacuterio a

recuperaccedilatildeo de estrutura oacutessea perdida e preenchimento de defeitos devido ao seu alto potencial

osteogecircnico e sua manutenccedilatildeo estrutural com lenta reabsorccedilatildeo (Tadic e Epple 2003 Nishikawa et

al 2004)

A composiccedilatildeo HAβTCP eacute uma bioceracircmica bifaacutesica com partiacuteculas de 100 a 200microm de

tamanho com caracteriacutesticas que ajudam estruturalmente na formaccedilatildeo oacutessea apresentando duas

fases uma mais soluacutevel e outra mais estaacutevel devido agrave associaccedilatildeo da βTCP com HA servindo

como material de osteoinduccedilatildeo (quimiotaxia) e osteoconduccedilatildeo (haptotaxia) ajudando assim no

processo osteogecircnico

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 9: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

9

Revisatildeo de Literatura

Apesar dos enxertos oacutesseos autoacutegenos possuiacuterem propriedades osteoindutivas e

osteocondutivas a quantidade limitada e a morbidade relacionada agrave sua remoccedilatildeo podem

limitar suas indicaccedilotildees conduzindo a necessidade de utilizaccedilatildeo de substitutos oacutesseos

Muito se estudou sobre fosfatos de caacutelcio bioativos nessas uacuteltimas deacutecadas tendo

atualmente uma divisatildeo em linhas de estudos como hidroxiapatitas vidros bioativos

ceracircmicas bioativas entre outras

Os materiais a base de fosfato de caacutelcio como as hidroxiapatitas e a bioceracircmica de beta

tricaacutelcio fosfato (βTCP) vem sendo amplamente estudados em aacutereas da sauacutede como na ortopedia

e na odontologia para reparaccedilatildeo de defeitos oacutesseos visando agrave cicatrizaccedilatildeo tecidual com o devido

preenchimento da aacuterea envolvida devolvendo forma e funccedilatildeo a uma determinada regiatildeo

Muitas vezes o resultado da procura de um novo material pode vir simplesmente da

associaccedilatildeo de dois materiais jaacute existentes amplamente estudados e utilizados haacute muito em

larga escala

Buscamos todos os dias diversas soluccedilotildees para melhorar o leito ciruacutergico oacutesseo e

os biomateriais satildeo de fundamental importacircncia nessa busca dentre os biomateriais

destacamos a bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP) e as hidroxiapatitas

Em 1971 Hench et al descobriram um vidro bioativo que possuiacutea uma excelente

biocompatibilidade e uma habilidade de ldquocolar ossordquo Esta propriedade adivinha da

capacidade de desenvolver uma camada de caacutelcio e de fosfato carbonado que possuiacutea uma

ligaccedilatildeo quiacutemica com o osso essa habilidade de colar osso era referida como bioatividade e

vinha sendo sendo associado agrave formaccedilatildeo do carbonato de hidroxiapatita na superfiacutecie do

vidro quando implantado em contato com um fluiacutedo bioloacutegico

Nagaha em 1992 estudou a osteogecircnese da hidroxiapatita e do fosfato tricaacutelcico como

substitutos oacutesseos observando que no periacuteodo de duas semanas ambos os materiais tinham

osteoblastos associados aos seus gracircnulos e em quatro semanas apenas os gracircnulos de

hidroxiapatita tinham ceacutelulas oacutesseas associadas

Em 1996 Ripamonti analisou a osteoinduccedilatildeo na implantaccedilatildeo de hidroxiapatita porosa em

diferentes locais em trecircs espeacutecies animais diferentes relatou que os melhores resultados foram

obtidos em babuiacutenos havendo maior vascularizaccedilatildeo no espaccedilo poroso da hidroxiapatita maior

diferenciaccedilatildeo oacutessea e maior ganho oacutesseo que em catildees e coelhos

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 10: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

10

Em 1999 MacNeill et al compararam a utilizaccedilatildeo em tiacutebia de coelhos de HA

(hidroxiapatita) sulfato de caacutelcio + osso autoacutegeno e sulfato de caacutelcio + ceracircmica bioativa e

concluiacuteram que o em todos os siacutetios houve evidecircncia de formaccedilatildeo oacutessea satisfatoacuteria

Yamamoto et al em 2000 relataram o emprego de hidroxiapatita em cavidades apoacutes a

exeacuterese de tumores benignos com alta taxa de sucesso visto que as partiacuteculas do biomaterial

incorporaram-se completamente ao osso e natildeo provocaram infecccedilatildeo afirmando ser este um

excelente substituto oacutesseo osteocondutor e neoformador oacutesseo

Al Ruhaimi em 2001 comparando seis biomateriais osteocondutores diferentes

HTR (enxerto de hidroacutexido de caacutelcio) BOP (proteiacutena biocompatiacutevel) BioGranreg

(vidro

bioativo) Laddecreg

(esponja de origem oacutessea bovina) DemBonereg

(osso desmineralizado

seco congelado) Osteografreg

(hidroxiapatita de alta densidade) em um estudo animal

concluiu que o Laddecreg

eacute o material de melhor osteocondutibilidade seguido do BioGranreg

e do Osteografreg

respectivamente

Tambeacutem em 2001 Wolf et al relataram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica e

histomorfoloacutegica da porosidade intergranular da bioceracircmica de beta tricaacutelcio fosfato (βTCP)

em relaccedilatildeo ao desenvolvimento de neovascularizaccedilatildeo em um experimento animal e uma revisatildeo

das indicaccedilotildees em humanos Realizaram defeitos de 3mm nas tiacutebias de coelhos prenchendo-os e

realizando a eutanaacutesia em 5 10 e 15 dias com posterior avaliaccedilatildeo Observou-se reduccedilatildeo do

diacircmetro vascular entre os gracircnulos de bioceracircmica de βTCP ao 15ordm dia coisa que natildeo foi

evidenciada nos periacuteodos anteriores tambeacutem uma integraccedilatildeo ossobioceracircmica de βTCP foi

evidenciada no local do defeito havendo uma interface direta do osso cortical e medular com o

material mostrando-se biocompatiacutevel Atribuiu-se o fenocircmeno de regeneraccedilatildeo oacutessea agrave raacutepida

absorccedilatildeo e iacutentimo contato dos gracircnulos de bioceracircmica de βTCP com o osso

Merten et al em 2001 realizaram um estudo comparativo intraindividual em animais

utilizando bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato alfa e beta (α e β TCP) associada a inserccedilatildeo

simultacircnea de implantes dentais com anaacutelise histomorfoloacutegica Foram utilizados 9 miniporcos

com defeitos oacutesseos nos dois lados da mandiacutebula sendo colocado de um lado bioceracircmica de

αTCP e do outro a bioceracircmica de βTCP com instalaccedilatildeo simultacircnea de implantes sendo o grupo

controle realizado em outros 2 animais Concluiacuteram histomorfomeacutetricamente que apoacutes 20

semanas ambos os materiais mostraram-se osteocondutivos facilitando a regeneraccedilatildeo oacutessea e a

orientaccedilatildeo para um novo trabeculado promovendo um pequeno atraso na neoformaccedilatildeo oacutessea e

pequena infiltraccedilatildeo tecidual no lado da bioceracircmica de αTCP Tambeacutem concluiacuteram que devido

ao acuacutemulo de macroacutefagos os implantes natildeo devem ser inseridos simultaneamente com as

bioceracircmicas devendo esperar o periacuteodo de degradaccedilatildeo do material que eacute de aproximadamente 5

a 6 semanas

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 11: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

11

Wiltfang Schlegel e Merten em 2001 relataram resultados cliacutenicos apoacutes a aplicaccedilatildeo de

bioceracircmica de βTCP (Cerasorbreg) em defeitos de 29 pacientes sendo 18 em exeacuterese ciacutestica 7

durante cirurgia ortognaacutetica e 4 preenchimento apoacutes extensa osteotomia Acompanharam por um

periacuteodo meacutedio de 16 meses (miacutenimo de 3 e maacuteximo de 20) relatando que apenas 1 paciente teve

infecccedilatildeo 4 dias apoacutes a cirurgia houve em todos os casos degradaccedilatildeo completa da ceracircmica apoacutes

67 meses grande capacidade osteogecircnica do material e apoacutes 12 meses em exame radiograacutefico

evidenciou-se completa substituiccedilatildeo do material por osso nos defeitos Concluiacuteram que o

material eacute eficaz no preenchimento de defeitos oacutesseos biocompatiacutevel e osteocondutivo

propondo ainda uma associaccedilatildeo com osso autoacutegeno na proporccedilatildeo de 21 em preenchimento de

grandes defeitos e em siacutetios com baixa capacidade osteogecircnica

Em 2001 Szaboacute et al compararam tomograficamente histomeacutetricamente e

histomorfomeacutetricamente a utilizaccedilatildeo de osso autoacutegeno e Cerasorbreg

(bioceracircmica de beta

tricaacutelcico fosfato) em levantamento de seio bilateral em quatro pacientes De um lado o

colocando o Cerasorbreg

e do outro o osso autoacutegeno como grupo controle Realizaram

dezesseis biopsias oacutesseas no momento da instalaccedilatildeo dos implantes sendo duas de cada

lado em cada paciente analisando tomograficamente histologicamente e

histomorfomeacutetricamente apoacutes seis meses da cirurgia Observaram que quando a

neoformaccedilatildeo oacutessea era lenta essa lentidatildeo era bilateral no indiviacuteduo independente do

material avaliado relatando isso como fator individual de metabolismo sendo que esse

mesmo fator individual tambeacutem influencia quando haacute uma aceleraccedilatildeo na neoformaccedilatildeo

oacutessea Observaram juntamente no estudo que o ganho dos dois materiais foi igualmente

satisfatoacuterio em todos os pacientes

Zerbo et al em 2001 realizaram avaliaccedilatildeo histoloacutegica em 2 casos cliacutenicos

utilizando bioceracircmica de βTCP na regeneraccedilatildeo oacutessea O primeiro caso foi de um

preenchimento em regiatildeo apoacutes remoccedilatildeo ciacutestica onde apoacutes 95 meses foram instalados

implantes e colhido material para anaacutelise encontrando 34 de tecido oacutesseo mineralizado

e 29 de material residual Jaacute no segundo caso onde foi realizado levantamento de seio

maxilar e colocados implantes apoacutes 8 meses colhendo tambeacutem material para anaacutelise

encontraram 20 de tecido oacutesseo mineralizado e 44 de material residual Relataram

ausecircncia de sinais inflamatoacuterios concluindo que o material apresenta imunogenicidade e

tambeacutem que o material pode ser um bom substituto oacutesseo sendo degradado e substituiacutedo

por tecido oacutesseo mineralizado apresentando-se com um material osteocondutor

Em 2002 Palti e Hoch elaboraram um conceito para tratamento de vaacuterios tipos de

defeitos oacutesseos dentais Utilizaram em sua pesquisa 267 pacientes com aproximadamente 1000

defeitos oacutesseos tratados com utilizaccedilatildeo bioceracircmica de βTCP no preenchimento Evidenciou-se

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 12: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

12

que assim que ocorre a reabsorccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP ocorre neoformaccedilatildeo oacutessea

preenchendo completamente o defeito entre 6 e 12 meses com osso vital Concluiacuteram que a

bioceracircmica de βTCP eacute totalmente indicada em tratamento de defeitos oacutesseos com alta taxa de

sucesso

Wiltfang et al 2002 relataram em um estudo utilizando microangiografia e

microradiografia as caracteriacutesticas da degradaccedilatildeo das bioceracircmicas de alfa e beta tricaacutelcio fosfato

(α e β TCP) em miniporcos apoacutes preenchimento dos defeitos oacutesseos associados agrave colocaccedilatildeo de

implantes de titacircnio Em ambos os materiais apoacutes 46 semanas houve uma osseointegraccedilatildeo

incompleta ao redor do implante tendo contato de superfiacutecie menor que 25 com grande

quantidade de biomaterial residual jaacute em 86 semanas houve um aumento da ossointegraccedilatildeo ao

redor do implante aumentando esse contato de superfiacutecie para 95-97 sendo ambos os

biomateriais reabsorvidos no decorrer desse tempo Foi evidenciado em comparaccedilatildeo ao grupo

controle uma melhor formaccedilatildeo oacutessea nos siacutetios onde foram utilizados ambos os biomateriais A

bioceracircmica de βTCP mostrou uma degradaccedilatildeo acelerada com oacutetima interaccedilatildeo com tecidos

adjacentes Ambos os biomateriais podem ser classificados como reparadores oacutesseos

Fabulo em 2003 relatou um estudo da anaacutelise da reconstruccedilatildeo de osso alveolar com

hidroxiapatita em ratos Foi observado que nos primeiros sete dias a superfiacutecie associada agrave

hidroxiapatita mostra-se delimitada por tecido de granulaccedilatildeo e por tecido oacutesseo neoformado

caracterizando uma osseointegraccedilatildeo e ao 60deg dia os gracircnulos do implante estatildeo em contato direto

com o osso e o tecido de granulaccedilatildeo foi substituiacutedo por tecido conjuntivo denso

Garrido em 2003 apresentou um estudo com 67 cirurgias de preenchimento em

falhas oacutesseas ortopeacutedicas com bioceracircmica bifaacutesica de hidroxiapatita (HA) e beta tricaacutelcio-

fosfato (βTCP) observando que houve interaccedilatildeo oacutessea das bioceracircmicas em todos os

pacientes havendo diferenccedila apenas com relaccedilatildeo ao tipo de defeito obtendo um bom

resultado em 82 dos casos um resultado regular em 104 e em 75 um excelente

resultado Concluiu que a bioceracircmica de HAβTCP eacute segura e eficaz no tratamento de

falhas oacutesseas

Schirioli e Chiaramondia em 2003 relataram uma comparaccedilatildeo feita entre PRP (plasma

rico em plaquetas) + bioceracircmica de βTCP bioceracircmica de βTCP sozinha osso autoacutegeno

DFDBA (osso humano seco congelado desmineralizado) e Bio-Oss (osso bovino liofilizado)

utilizados em um periacuteodo de 4 meses para o preenchimento de defeitos oacutesseos em 5 pacientes

diferentes Concluiacuteram apoacutes anaacutelise histoloacutegica do material colhido que no paciente onde foi

colocado PRP + bioceracircmica de βTCP o crescimento oacutesseo foi significantemente melhor

seguido de perto por bioceracircmica de βTCP sozinha e em seguida por osso autoacutegeno

Em 2003 Trisi et al fizeram uma avaliaccedilatildeo histoloacutegica da bioceracircmica de βTCP na

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 13: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

13

reparaccedilatildeo oacutessea de defeitos artificiais em mandiacutebulas de humanos Contando com 5 voluntaacuterios

foram instalados 10 cilindros intraoacutesseos bilateralmente decorticalizando a regiatildeo de contato

entre o cilindro e o osso Os cilindros foram preenchidos igualmente sendo de um lado grupo

controle com coaacutegulo sanguiacuteneo e do outro lado bioceracircmica de βTCP com partiacuteculas de 150 a

500microm de tamanho Demonstraram reparaccedilatildeo oacutessea espontacircnea nos defeitos em ambos os lados

apoacutes 6 meses com semelhanccedila estrutural entre o preenchimento interno do cilindro e o osso

externo sem interferecircncias da bioceracircmica de βTCP na formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Kovacs et al em 2003 relataram um estudo comparativo entre a bioceracircmica de βTCP

associado a PRP (plasma rico em plaquetas) e a bioceracircmica de βTCP sozinha em defeitos

alveolares bilaterais de dois dentes realizados em 20 catildees da raccedila Beagle preenchendo com um

material de cada lado analisando histoloacutegica e histomorfomeacutetricamente Concluiacuteram que o PRP

acelera a remodelaccedilatildeo do novo osso criado quando associado com a bioceracircmica de βTCP

sendo que tanto em 6 como em 12 semanas notaram uma melhor formaccedilatildeo e crescimento oacutesseo

significantemente maior nos lados da associaccedilatildeo

Tadic e Epple em 2004 analisaram as caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas de 14 substitutos

oacutesseos a base de fosfato de caacutelcio em comparaccedilatildeo ao osso natural in vitro Nesse estudo

utilizou-se na avaliaccedilatildeo difratectometria RX spectroscopia infra-vermelha termogravimetria e

microscopia eletrocircnica O estudo concluiu que as bioceracircmicas de βTCP nas duas

apresentaccedilotildees gracircnulo ou bloco poroso possuiacutea alta cristalinidade biodegradabilidade

moderada estabilidade mecacircnica baixa em gratildeos e alta em blocos quando comparadas ao osso

natural parecendo ser um material ostegecircnico Concluiu tambeacutem que as hidroxiapatitas

sinteacuteticas apesar de composiccedilatildeo e morfologia diferentes satildeo as que mais assemelham ao osso

natural sendo rapidamente degradadas devido ao seu alto potencial osteogecircnico

Nishikawa et al em 2004 analisaram quantitativamente e tomograficamente uma

combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita porosa de dois diacircmetros (150 e 300microm)

associada agrave ceacutelulas mesenquimais da medula implantados subcutaneamente em ratos

Concluiacuteram que a combinaccedilatildeo de bioceracircmica de hidroxiapatita em contato com as

ceacutelulas mesenquimais pode ser indicada como um excelente substituto no auxiacutelio de

crescimento oacutesseo devido agraves propriedades mecacircnicas e agrave capacidade de induzir a

formaccedilatildeo oacutessea

Aybar et al em 2004 estudaram o efeito da bioceracircmica de βTCP em cultura de

osteoblastos ldquoin vitrordquo utilizando 6 amostras divididas e 2 grupos iguais sendo controle

(autoacutegeno de calvaacuteria de rato) e experimental analisando analisando-as em 24 48 e 96 horas

Apoacutes anaacutelise observou que houve similaridade entre os dois grupos no nuacutemero de ceacutelulas

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 14: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

14

viaacuteveis nos trecircs periacuteodos com igual morfologia Relatou que a bioceracircmica de βTCP eacute um

material que natildeo causa efeitos adversos na contagem celular viabilidade e morfologia aleacutem de

conceber uma matriz que promove proliferaccedilatildeo celular

Artzi et al em 2004 realizaram uma anaacutelise histomorfomeacutetrica da reabsorccedilatildeo do

material e do siacutetio de cicatrizaccedilatildeo utilizando osso bovino inorgacircnico e bioceracircmica de βTCP em

catildees Relataram que nos defeitos preenchidos com osso bovino apoacutes 12 e 24 meses houve uma

reparaccedilatildeo completa poreacutem foram encontradas partiacuteculas do material nos siacutetios em ambos os

periacuteodos jaacute com a bioceracircmica de βTCP houve uma reparaccedilatildeo completa em todos os siacutetios

sendo encontradas partiacuteculas remanescentes apenas em 12 meses A bioceracircmica de βTCP

apresentou uma melhor reparaccedilatildeo no sexto deacutecimo segundo e vigeacutesimo quarto meses em

relaccedilatildeo ao outro material

Em um primeiro trabalho publicado por Zerbo et al em 2004 foi estudada a localizaccedilatildeo

de ceacutelulas osteogecircnicas e osteoclaacutesticas na bioceracircmica de βTCP utilizada em sinus lift Seis

meses apoacutes as cirurgias de sinus lift realizadas com bioceracircmica de βTCP foram colhidas

amostras da regiatildeo descalcificando-as e analisando histoloacutegicamente e por imunofluorescecircncia

Observaram crescimento oacutesseo ao redor das partiacuteculas de bioceracircmica de βTCP assim como

crescimento de tecido conjuntivo Concluiacuteram que ao sexto mecircs de implantaccedilatildeo a bioceracircmica

de βTCP atrai ceacutelulas osteoprogenitoras melhorando o tempo cicatricial aumentando essa atraccedilatildeo

conforme o tempo e a reabsorccedilatildeo do material

Jaacute em uma segunda publicaccedilatildeo tambeacutem em 2004 Zerbo et al realizaram uma anaacutelise

histomorfomeacutetrica de sinus lift em humanos utilizando bioceracircmica de βTCP poroso em um

estudo prospectivo Utilizou-se 9 pacientes divididos em 2 grupos divididos conforme o defeito

unilateral e bilateral No grupo bilateral utilizou-se em um dos lados osso autoacutegeno e do outro a

bioceracircmica de βTCP e no grupo unilateral somente a bioceracircmica de βTCP como

preenchimento Apoacutes 6 meses foi observado que o material eacute um bom substituto oacutesseo para sinus

lift sendo que eacute osteocondutivo mas natildeo osteoindutivo havendo atraso na formaccedilatildeo oacutessea

quando comparado ao osso autoacutegeno no grupo bilateral e crescimento oacutesseo semelhante entre o

do lado da bioceracircmica de βTCP do grupo bilateral e o grupo unilateral

Peters e Reif em 2004 realizaram um estudo comparando os diversos tipos de

materiais para regeneraccedilatildeo baseados em bioceracircmica de tricaacutelcio fosfato Analisaram os

materiais mostrando diferenccedilas fundamentais sendo comparados tamanho primaacuterio da

partiacutecula estabilidade porosidade solubilidade e biodegradaccedilatildeo do material Relataram

que o tamanho primaacuterio da partiacutecula estaacute conectado a estabilidade estrutural otimizando a

superfiacutecie funcional porosidade e reabsorccedilatildeodegradaccedilatildeo a biodegradaccedilatildeo do material

ocorre em dois processos 1ordm dissoluccedilatildeo fisioquiacutemica que depende da solubilidade do

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 15: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

15

produto e 2ordm degradaccedilatildeo em partiacuteculas pequenas que depende do baixo pH do material

mostraram tambeacutem que existe uma relaccedilatildeo entre o tamanho das partiacuteculas e as reaccedilotildees

inflamatoacuterias onde seu diacircmetro facilita a accedilatildeo dos macroacutefagos e fagoacutecitos sendo que

diacircmetros de ateacute 065microm satildeo fagocitados precocemente e tentando evitar esse processo

relataram que o tamanho das partiacuteculas deveria variar no miacutenimo entre 7 e 10microm a

porosidade tambeacutem foi avaliada concluindo que quanto maior for maior possibilidade de

circulaccedilatildeo sanguiacutenea fluidos corporais e ceacutelulas em geral quanto agrave solubilidade a

bioceracircmica de αTCP apresentou maior grau de dissoluccedilatildeo sendo dissolvida em

aproximadamente 2 meses enquanto que a bioceracircmica de βTCP que dissolveu-se em

meacutedia em seis meses sendo isso no caso da bioceracircmica de αTCP um fator altamente

negativo pois sua raacutepida dissoluccedilatildeo facilitaria a migraccedilatildeo de tecidos moles para o leito

enxertado Concluiacuteram que de acordo com as necessidades profissionais as diferentes

apresentaccedilotildees dos materiais podem contribuir para cada tratamento individualmente

levando em consideraccedilatildeo todos os aspectos estudados e o objetivo a ser alcanccedilado

Zerbo em 2004 realizou uma anaacutelise histoloacutegica da regeneraccedilatildeo oacutessea em sinus lift

comparando bloco oacutesseo monocortical e bioceracircmica de βTCP aleacutem do estudo histoloacutegico

do preenchimento de uma cavidade ciacutestica com bioceracircmica de βTCP O resultado em

anaacutelise histoloacutegica foi de formaccedilatildeo de tecido oacutesseo promovendo remodelaccedilatildeo no siacutetio

implantar aleacutem de natildeo apresentar nenhuma complicaccedilatildeo nem sinais de processo

inflamatoacuterio em nenhum dos siacutetios indicando o material como substituto oacutesseo com

sucesso

Hille em 2005 relatou um trabalho de reparaccedilatildeo alveolar utilizando 80 pacientes sendo

41 homens e 39 mulheres com idade entre 26 - 81 anos tendo 97 dentes removidos ao total

Realizou o preenchimento dos alveacuteolos utilizando em meacutedia 078g de bioceracircmica de βTCP com

e sem utilizaccedilatildeo de membranas Em uma primeira anaacutelise cliacutenica visual subjetiva considerou de

muito bom pra bom 87 dos casos apoacutes o enxerto Em anaacutelise radiograacutefica depois de 12 meses

relatou a presenccedila de gracircnulos de bioceracircmica de βTCP em 30 dos casos e tambeacutem reabsorccedilatildeo

em altura e espessura em 10 dos casos Considerou em 89 dos casos a eficaacutecia do tratamento

como sendo de boa a muito boa Em 100 dos casos natildeo houve reaccedilatildeo nem complicaccedilotildees com o

material Foi observado clinicamente que os casos em que foram utilizadas membranas eram os

melhores Concluiu que a teacutecnica com utilizaccedilatildeo de membranas e bioceracircmica de βTCP eacute

recomendada para maacutexima preservaccedilatildeo dos alveacuteolos para posterior reabilitaccedilatildeo implanto

proteacutetica

Szaboacute et al em 2005 realizaram uma anaacutelise histoloacutegica e histomorfomeacutetrica do osso

autoacutegeno versus bioceracircmica de βTCP sozinha em casos de sinus lift bilateral Utilizaram 20

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 16: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

16

pacientes sendo que em cada paciente foi colocado de um lado bioceracircmica de βTCP sozinha e

do outro lado osso autoacutegeno Concluiacuteram que natildeo houve significacircncia nas anaacutelises histoloacutegicas

e histomorfomeacutetricas nos grupos experimental e controle apoacutes seis meses sendo considerado um

bom material para esse tipo de tratamento

Em 2005 Plenk e Lederer relataram um estudo comparando dois diferentes tamanhos de

partiacuteculas da bioceracircmica de βTCP sendo 500 a 1000microm e 1000 a 2000 microm Realizaram

levantamento de seio bilateral preenchendo cada lado com um dos materiais realizando a coleta

do material apoacutes 4 meses e meio e concluiacuteram que natildeo houve diferenccedila significativa entre

nenhum dos lados com formaccedilatildeo oacutessea semelhante e somente uma maior vascularizaccedilatildeo do lado

de menor granulaccedilatildeo

Zijderveld et al em 2005 compararam a utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP sozinha e

enxerto de osso autoacutegeno em 10 pacientes sendo 6 com levantamento bilateral e 4 unilateral

ambos com osso residual posterior entre 4 e 8mm Utilizando nos levantamentos bilaterais de

um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno tudo a 100 nos unilaterais 100 de

bioceracircmica de βTCP Apoacutes seis meses foi recolhido o material das regiotildees enxertadas

utilizando-se uma trefina de 35mm realizando o exame histoloacutegico Nas regiotildees trefinadas

foram colocados 41 implantes 26 no lado da bioceracircmica de βTCP e 15 no lado do osso

autoacutegeno Foram notadas diferenccedilas na perfuraccedilatildeo quanto agrave resistecircncia e aparecircncia cliacutenica

durante a trefinagem e inserccedilatildeo dos implantes comparando os dois lados Observou-se que apoacutes

um ano nenhum implante foi perdido em nenhuma das aacutereas e que histologicamente

comparando a bioceracircmica de βTCP com osso autoacutegeno esta foi segura para utilizaccedilatildeo na

teacutecnica de levantamento de seio nessa populaccedilatildeo levando agrave formaccedilatildeo oacutessea

Em 2006 Horch et al relataram trabalhos de reconstruccedilatildeo mandibular com

Cerasorbreg

(bioceracircmica de βTCP) misturado ao osso autoacutegeno numa proporccedilatildeo de 30 a

50 de Cerasorbreg

dependendo do caso Foram estudados 152 pacientes com diversos

defeitos como preenchimento oacutesseo apoacutes exeacuterese ciacutestica reconstruccedilatildeo alveolar

levantamento de seio maxilar fissuras alveolares em fraturas regeneraccedilotildees periodontais

reconstruccedilatildeo apoacutes a retirada de tumores e apicectomias sendo todos os defeitos maiores

que 2cm Foi utilizada a bioceracircmica de βTCP em partiacuteculas de 500 a 2000microm e controle

poacutes-operatoacuterio de 4 12 e 52 semanas Relataram faacutecil aplicaccedilatildeo do material em 92 dos

casos houve irritaccedilatildeo local com perda de gracircnulos em 2 dos casos houve perda total do

material e em 888 dos casos houve completa reabsorccedilatildeo do material com simultacircnea

substituiccedilatildeo oacutessea observada radiograacutefica e histomorfomeacutetricamente Relataram tambeacutem

que a inserccedilatildeo de implantes dentais na regiatildeo enxertada pode ser realizada de 5 a 6 meses

apoacutes o enxerto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 17: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

17

Youzhuan et al em 2006 realizaram um trabalho avaliando a osteogecircnese e a

biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica de βTCP porosa em 20 pacientes na coluna vertebral Foi

observada neoformaccedilatildeo oacutessea em todas as amostras sendo que o maior crescimento deu-se

nas regiotildees onde as amostras encontravam-se em iacutentimo contato com o osso Com relaccedilatildeo

agrave biodegradaccedilatildeo esta foi encontrada com grande variaccedilatildeo tanto ao redor dos tecidos quanto

ao redor dos macrofagoacutecitos A bioceracircmica mostra uma homogenizaccedilatildeo com o osso

autoacutegeno na estrutura de neoformaccedilatildeo oacutessea A biodegradaccedilatildeo da bioceracircmica foi relatada

atraveacutes da atividade fagocitaacuteria

Em 2006 Vital relatou a utilizaccedilatildeo de compoacutesitos de hidroxiapatita sinteacutetica + carbono e

hidroxiapatita sinteacutetica + carbono + fosfato bi aacutecido de soacutedio em falha oacutessea na ulna de coelhos

Relatou a evidenciaccedilatildeo de regeneraccedilatildeo oacutessea precoce ausecircncia de infecccedilatildeo rejeiccedilatildeo eficiecircncia e

alta confiabilidade dos materiais

Suba et al em 2006 realizaram um estudo chamado Levantamento de seio com βTCP

densidade e arquitetura do novo osso formado Utilizou para tanto 17 pacientes edecircntulos

bilaterais enxertando de um lado bioceracircmica de βTCP e do outro osso autoacutegeno Apoacutes seis meses

foram colocados 68 implantes e o osso retirado do siacutetio foi histomorfomeacutetricamente analisado A

densidade do osso natildeo apresentou diferenccedila significativa entre os lados mas a biodegradaccedilatildeo foi

significativamente mais lenta do lado da bioceracircmica de βTCP jaacute no padratildeo de trabeculado oacutesseo

no lado da bioceracircmica de βTCP foi mais baixo que o osso autoacutegeno poreacutem sem diferenccedila

significante Concluiacuteram que apoacutes seis meses implantes podem se ancorados sem maiores

problemas em enxertia com a bioceracircmica de βTCP

Em 2006 Mastrogiacomo et al avaliaram a performance do Skelitereg

(bioceracircmica

reabsorviacutevel) utilizando como estabilizador um silicone de fosfato tricaacutelcico na

reparaccedilatildeo em defeitos extensos em ossos longos de ovelhas A avaliaccedilatildeo foi realizada

atraveacutes de radiografias sequumlenciais tomografias exames histoloacutegicos imunohistoloacutegicos

e microradiografias com o objetivo de analisar a densidade e porcentagem do crescimento

oacutesseo Concluiacuteram que houve uma excelente integraccedilatildeo e uma regeneraccedilatildeo oacutessea

significante aleacutem de uma reabsorccedilatildeo osteoclaacutestica evidente do biomaterial Ao teacutermino do

primeiro ano o remanescente do biomaterial foi de 10 a 20 e apoacutes o segundo ano este

completamente reabsorvido com o defeito completamente preenchido por novo osso

altamente mineralizado e lamelar

Scherme em 2006 realizou um estudo em reconstruccedilatildeo de defeitos e ganho oacutesseo com

uma bioceracircmica sinteacutetica de beta trifosfato de caacutelcio (βTCP) Foram 325 pacientes tratados

com bioceracircmica de βTCP sendo que em 289 utilizando-a sozinha e nos pacientes restantes

associado a osso autoacutegeno em diferentes defeitos oacutesseos com associaccedilatildeo de membranas em 84

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 18: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

18

casos Com avaliaccedilotildees em 1 semana 3 6 e 9 meses relatou que a meacutedia de reparo oacutesseo foi de

15 a 7 cm sendo que a absorccedilatildeo do material variou de entre 3 e 9 meses Relatou que o

material foi aplicado facilmente sem reaccedilotildees adversas do total em 13 pacientes houve excesso

de material exposto dos 84 casos com membrana 8 tiveram inflamaccedilatildeo sendo que 3 deles

evoluiacuteram para cicatrizaccedilatildeo normal 2 pacientes tiveram perda de membrana sem prejuiacutezo na

reparaccedilatildeo em 2 casos em que houve exposiccedilatildeo da membrana e reparaccedilatildeo deficiente os

pacientes eram fumantes inveterados em nenhum das complicaccedilotildees foi necessaacuterio remover o

material Concluiu que a bioceracircmica de βTCP eacute um material sinteacutetico ideal para praacutetica

odontoloacutegica devido agrave sua porosidade e capacidade de mimetizar o osso natural natildeo sendo

necessaacuteria exposiccedilatildeo de um novo siacutetio ciruacutergico e com grande imunogenicidade sendo

rapidamente absorvido e substituiacutedo simultaneamente por osso novo facilitando reconstruccedilotildees

oacutesseas em pacientes que necessitam de instalaccedilatildeo imediata do implante

Em 2007 Artzi et al relataram a utilizaccedilatildeo de bioceracircmica de βTCP associada ao osso

autoacutegeno em procedimentos de levantamento de seio maxilar Concluiacuteram que esta associaccedilatildeo

parece ser um excelente material ostecondutor e biocompatiacutevel aleacutem de promover formaccedilatildeo

oacutessea no periacuteodo de 6 a 9 meses

Le Nihouannen et al em 2007 publicaram um estudo onde relataram a obtenccedilatildeo de

osso ectoacutepico em muacutesculo de ovelha induzido pela bioceracircmica de HAβTCP associada a

um compoacutesito de cola de fibrina Constatou-se apoacutes seis meses da implantaccedilatildeo atraveacutes de

exame histoloacutegico e tomograacutefico a presenccedila de osso ao redor dos gracircnulos da

bioceracircmica na proporccedilatildeo de aproximadamente 12 do tamanho dos mesmos Esse osso

ectoacutepico apresentava-se histologicamente bem mineralizado com osteoacutecitos maduros e

estruturas Harversianas Concluiacuteram que esse substituto oacutesseo exibia uma propriedade

osteoindutiva podendo assim ser utilizado em reconstruccedilatildeo de defeitos em ossos longos

Tamura et al em 2007 relataram em um estudo animal realizado com 8 coelhos onde

foram colocados e comparados blocos de bioceracircmica de βTCP e blocos de bioceracircmica de

βTCP tratados com PRP para crescimento ldquoonlayrdquo Concluiacuteram apoacutes 3 meses que natildeo houve

processo inflamatoacuterio em nenhum dos blocos e que a associaccedilatildeo com PRP natildeo resultou em

nenhuma melhora significante no crescimento oacutesseo

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 19: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

19

Proposiccedilatildeo

O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfoloacutegicamente caracterizando e

comprovando a viabilidade da utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP marca comercial

Osteosyntreg

como material de preenchimento de defeitos oacutesseos comparando-a com osso

autoacutegeno e com coaacutegulo sanguiacuteneo em relaccedilatildeo a sua capacidade osteoindutora osteocondutora e

osteogecircnica

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 20: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

20

Material e Meacutetodo

A pesquisa foi aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da UNISA de acordo com as

atribuiccedilotildees da Resoluccedilatildeo 19696 atraveacutes do parecer nuacutemero 0112008 com registro no

CEPUNISA Nordm 05408 aprovado em 10 de marccedilo de 2008 (em anexo)

Esta pesquisa foi realizada de acordo com os princiacutepios eacuteticos de experimentaccedilatildeo animal

elaborado pelo COBEA (Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal) entidade filiada ao

International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) utilizando como base normas

internacionais em pesquisa que se apresentam com base na triacuteade ldquoBom senso sensibilidade e boa

ciecircnciardquo

Os coelhos utilizados nessa pesquisa foram advindos de um criadouro especializado e

mantidos no bioteacuterio da Universidade de Santo Amaro ndash UNISA sendo monitorados e medicados

pela equipe da medicina veterinaacuteria do bioteacuterio

As cirurgias foram realizadas no laboratoacuterio multidisciplinar de teacutecnicas ciruacutergicas

veterinaacuterias da UNISA

Na data da realizaccedilatildeo dos procedimentos ciruacutergicos os coelhos estavam em jejum absoluto

de 12 horas conforme orientaccedilatildeo e supervisatildeo veterinaacuteria

Os animais foram pesados e selecionados sendo que os escolhidos receberam como

medicaccedilatildeo preacute-anesteacutesica com 02 ml de Acepran 123

via intramuscular no dia dos

procedimentos

Para os procedimentos ciruacutergicos experimentais foram selecionados 11 coelhos da raccedila

New Zeland fecircmeas com idade entre quatro e seis meses e peso variando entre 30 a 35kg

Em todos os procedimentos os animais foram anestesiados com associaccedilatildeo de Cetamina

(40mgKg)15

Xilazina (5mgKg)16

e Meperidina (10mgKg)17

por via intramuscular monitorados

pela equipe veterinaacuteria responsaacutevel recebendo novas aplicaccedilotildees com metade da dose anesteacutesica

conforme necessaacuterio durante o procedimento

Apoacutes a tricotomia realizou-se anti-sepsia com iodopovidona15

no local e anestesia local

infiltrativa3 4

com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor18

Com o auxilio de um bisturi de lacircmina5

nordm15 foram realizadas duas incisotildees retiliacuteneas

acircntero-posteriormente nas bordas da mandiacutebula dos coelhos de acordo com a anatomia apreciada

pela palpaccedilatildeo local

Na sequumlecircncia foi feito um retalho de espessura total bilateral para exposiccedilatildeo do tecido

oacutesseo da mandiacutebula do animal com o auxiacutelio de descoladores de perioacutesteo3 salientando que

durante e em todos os procedimentos a frequumlecircncia cardiacuteaca e a frequumlecircncia respiratoacuteria foram

monitoradas por um meacutedico veterinaacuterio da mesma equipe

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 21: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

21

Posteriormente realizamos mecanicamente com a utilizaccedilatildeo de peccedila reta ciruacutergica2 motor

eleacutetrico ciruacutergico1 e trefinas de coleta oacutessea

8 com irrigaccedilatildeo abundante utilizando soro fisioloacutegico

(SF10

09) trecircs (3) defeitos criacuteticos oacutesseos ldquoinlayrdquo de 7mm de diacircmetro por 3mm de

profundidade na regiatildeo mandibular sendo que dois (2) defeitos foram realizados do lado esquerdo

e um (1) defeito foi realizado no lado direito do animal

Para facilitar a posterior localizaccedilatildeo e padronizaccedilatildeo na realizaccedilatildeo dos defeitos utilizamos

os dentes do animal como referecircncia Na regiatildeo do lado esquerdo o defeito anterior foi realizado

na direccedilatildeo do segundo dente posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente

posterior jaacute no lado direito o defeito foi realizado na direccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes

posteriores Todos os defeitos foram realizados 4 mm acima do bordo mandibular

Apoacutes a realizaccedilatildeo dos defeitos destacamos cuidadosamente a cortical externa da mandiacutebula

na regiatildeo dos defeitos e acondicionamos esta cortical oacutessea em SF10

09 para posterior utilizaccedilatildeo

(Torriani e Brito 1992)

O preenchimento dos defeitos foi feito respectivamente o primeiro do lado direito

mandibular com coaacutegulo sanguiacuteneo (grupo controle) o segundo do lado esquerdo anterior com

osso autoacutegeno (retirado durante a proacutepria trefinagem dos defeitos e particulado com particulador

oacutesseo3) o terceiro do lado esquerdo posterior com bioceracircmica de HAβTCP

9 mantendo sempre

uma distacircncia miacutenima de 3 mm entre os dois defeitos

Apoacutes o preenchimento os defeitos foram recobertos pelo retalho de espessura total e

suturados com fio de nylon7 30 atraveacutes de pontos simples

Os coelhos foram mantidos em gaiolas individuais por sete dias e depois passaram para

baias com trecircs indiviacuteduos possibilitando assim maior movimentaccedilatildeo e reduzindo o estresse

durante o periacuteodo de observaccedilatildeo

O ambiente teve temperatura e luminosidade controlada Foram alimentados com raccedilatildeo

Nutriara e aacutegua administrada ad libitum

A higienizaccedilatildeo das baias foi realizada diariamente Receberam medicaccedilatildeo poacutes-operatoacuteria

Enrofloxacina (5mgKg)21

via subcutacircnea Flunixin Meglumina (11mgkg)22

via subcutacircnea

Apoacutes o periacuteodo de doze semanas os coelhos foram sacrificados utilizando-se a teacutecnica

preconizada pelo COBEA overdose de anesteacutesico geral thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)20

associado agrave injeccedilatildeo intravenosa de Cloreto de potaacutessio (191)19

O tempo de avaliaccedilatildeo do

presente estudo animal foi padronizado em trecircs meses devido ao fato desse periacuteodo corresponder

em humanos haacute aproximadamente nove meses Esse periacuteodo representa o intervalo de tempo

indicado para neoformaccedilatildeo oacutessea e maturaccedilatildeo do osso na aacuterea enxertada Esse intervalo de tempo

de avaliaccedilatildeo eacute justificado pelo conhecimento preacutevio de que o metabolismo oacutesseo dos coelhos eacute

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 22: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

22

cerca de trecircs vezes mais raacutepido que o de seres humanos podendo ser usado como base para

pesquisas frente a uma escala alomeacutetrica (Roberts et al 1987 Misch 2000 Gad 2006)

Na sequumlecircncia foi realizada a retirada do material com trefinas8 de 7mm de diacircmetro no

local respectivo sendo observada clinicamente e anotada qualquer alteraccedilatildeo nos defeitos

Este material foi fixado em formol a 10 para manutenccedilatildeo da viabilidade histoloacutegica

corados com hematoxilina e eosina (HE)24

por teacutecnicos em histologia e encaminhado ao

laboratoacuterio de patologia para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

Realizadas as lacircminas as mesmas foram fotografadas e digitalizadas (foto micrografias)

sendo posteriormente interpretadas conjuntamente com o auxiacutelio do Dr Pliacutenio Santos onde foi

observada a presenccedila ou natildeo de osteoblastos osteoclastos osteoacutecitos material residual e osso

maduro ou imaturo

Colhidos os dados da anaacutelise histoloacutegica foram elaboradas anaacutelises descritivas tabelas e

anaacutelise estatiacutestica descritivas para apresentaccedilatildeo e faacutecil compreensatildeo dos resultados

Patologista Professor da Universidade Federal de Satildeo Paulo - UNIFESP

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 23: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

23

ESQUEMA ILUSTRATIVO DO LOCAL DE PREENCHIMENTO COM A SEQUumlEcircNCIA DOS MATERIAIS

UTILIZADOS

1- Osso Autoacutegeno

2- HAβTCP

3- Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

3 2 1

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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reconstructive surgery of the jaws Int J Oral Maxillofac Surg 2006 35 708-713

66

Plenk H Lederer J Histomorphology of bone regeneration after sinus floor elevation

with two types of TCP granulate ndash a case report Zeitschrift fuumlr Orale Implantologie 2005

32- 38

Schiroli G Chiaramondia M Human histological 4 months findings using a

combination of purecirc-fase beta tricalcium phosphate(βTCP) and platelet rich plasma (PRP)

chair-side preparation in comparison with βTCP alone autogenous bone graft DFDBA

and Bio-OSS Poster presentation at the internatinal conference ldquoBONE 2003rdquo NL-

Maastricht Oct 2003

Tamura K et al (2007) The use of porous β- tricalcium phosphate blocks with

platelet-rich plasma as an onlay bone graft biomaterial J Periodontol Vol 78 n 2 p 315-

321 DOI 101902jop2007060228

67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 24: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

24

FOTOS DEMONSTRATIVAS DAS CIRURGIAS REALIZADAS NAS

MANDIacuteBULAS DOS COELHOS

- Coelho jaacute anestesiado pela equipe de veterinaacuteria oxigenado tricotomizado com

realizaccedilatildeo da anti-sepsia local com iodopolvidona e colocaccedilatildeo de campos ciruacutergicos

- Anestesia infiltrativa local realizada com Mepivacaiacutena 2 sem vasoconstritor

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 25: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

25

- Regiatildeo exposta apoacutes incisatildeo retiliacutenea acircntero-posterior na regiatildeo de bordo

mandibular e descolamento do retalho de espessura total

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 26: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

26

- Demarcaccedilatildeo dos defeitos ciruacutergicos realizados com trefinas de 7mm de diacircmetro

seguindo posiccedilotildees dentaacuterias sendo o defeito anterior na direccedilatildeo do segundo dente

posterior do animal e o defeito posterior apoacutes o uacuteltimo dente posterior do animal

com 3 mm de distacircncia separando-os

Os defeitos foram realizados 4mm acima do bordo mandibular

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 27: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

27

- Destacamento cuidadoso da cortical externa do defeito sendo o material recolhido

acondicionado em SF 09 para posterior particulaccedilatildeo (trituraccedilatildeo) e utilizaccedilatildeo no

preenchimento dos defeitos como osso autoacutegeno

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 28: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

28

- Defeitos criacuteticos vazios apoacutes retirada das corticais oacutesseas vestibulares

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 29: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

29

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno coletado apoacutes a trefinagem e

particulado com moedor oacutesseo manual

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 30: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

30

- Defeito anterior preenchido com osso autoacutegeno e defeito posterior preenchido

com bioceracircmica de HAβTCP

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 31: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

31

- Defeito realizado no lado direito do animal seguindo os mesmos procedimentos

dos defeitos anteriores poreacutem com localizaccedilatildeo entre o terceiro e quarto dentes do

animal

- Coaacutegulo sanguiacuteneo preenchendo o defeito oacutesseo realizado

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 32: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

32

- Sutura terminada realizada nos dois lados com pontos simples utilizando nylon 30

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 33: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

33

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado esquerdo do animal preenchido com osso

autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP mostrando preenchimento completo do

defeito

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 34: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

34

- Reabertura da regiatildeo apoacutes 3 meses lado direito do animal preenchido coaacutegulo

sanguiacuteneo (grupo controle) mostrando falha no preenchimento do defeito oacutesseo

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 35: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

35

1 Material permanente

- 1 motor ciruacutergico eleacutetrico (1)

- 1 peccedila reta ciruacutergica 11 (2)

- Instrumentais (3)

- Seringa Carpule

- Cabo de bisturi

- Descolador de Molt 24

- Afastador de tecido Minnesota

- Cuba metaacutelica para soro

- Pinccedila dente de rato

- Tesoura Goldman-Fox

- Porta agulha

- Agulha curta (4)

- Lacircmina de bisturi ndeg 15 (5)

- Moedor oacutesseo (6)

- Fio de sutura mono nylon 30 (7)

- Trefinas de 7 mm(8)

2 Material de consumo

- Invoacutelucro contendo frasco com HAβTCP (9)

- 10 frascos de soro fisioloacutegico esteacuteril de 250 ml (SF 09)

(10)

- 11 kits de campo esteacuteril descartaacutevel

(11)

- 11 sugadores ciruacutergicos esteacutereis descartaacuteveis

(12)

- 01 frasco de soluccedilatildeo de iodopovidona 1

(13)

-15 pares de luvas ciruacutergicas esteacutereis

(14)

3 Material bioloacutegico

- osso autoacutegeno triturado advindo da confecccedilatildeo dos defeitos da mandiacutebula dos coelhos

- coaacutegulo sanguiacuteneo

4 Drogas utilizadas

- Cloridrato de Cetamina anesteacutesico geral veterinaacuterio (15)

- Cloridrato de Xilazina (16)

- Meperidina analgeacutesico opioacuteide usado na induccedilatildeo da anestesia geral e sedaccedilatildeo (17)

- Cloridrato de mepivacaiacutena sem vasoconstritor usado para anestesia local (18)

- Cloreto de potaacutessio

(19)

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 36: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

36

- Thiopental soacutedico (Thiopentaxreg)

(20)

- Enrofloxacina (21)

- Flunixin Meglumina

(22)

- Acepran

(23)

1- Driller Satildeo Paulo Brasil

2- Stryker Berlim Alemanha

3- Dulfex Satildeo Paulo Brasil

4- BD Satildeo Paulo Brasil

5- Feather Satildeo Paulo Brasil

6- Golgran Satildeo Paulo Brasil

7- Ethicon Jonhson amp Jonhson Satildeo Paulo Brasil

8- Deacuterig Satildeo Paulo Brasil

9- Osteosyntreg EINCO Biomaterial Belo Horizonte Minas Gerais Brasil

10- Aacutester Satildeo Paulo Brasil

11- Alva Doctor Satildeo Paulo- Brasil

12- Indusbello Paranaacute Brasil

13- Povidine Geyer Medicamentosoche Porto Alegre RS-Brasil

14- Madeitex Satildeo Paulo Brasil

15- Ketalar Pfizer Satildeo Paulo Brasil

16- Uniatildeo Quiacutemica Farmacecircutica Embu-Guaccedilu SP Brasil

17- Dolantina Sanofi-Aventis Satildeo Paulo Brasil

18- DFL Rio de Janeiro Brasil

19- Isofarma Industrial Farmacecircutica Satildeo Paulo Brasil

20- Cristaacutelia Satildeo Paulo Brasil

21- Schering-Plough Brasil

22- Schering-Plough Cotia Satildeo Paulo Brasil

23- Univet SA Cotia Satildeo Paulo Brasil

24- Vetec Quiacutemica Fina Duque de Caxias Rio de Janeiro Brasil

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 37: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

37

Resultados

Os resultados foram analisados levando em consideraccedilatildeo tanto a evoluccedilatildeo

cliacutenica dos animais quanto a evoluccedilatildeo cicatricial da neoformaccedilatildeo oacutessea nos defeitos

realizados na mandiacutebula dos mesmos

Em relaccedilatildeo ao aspecto cliacutenico poacutes-ciruacutergico imediato todos os animais apoacutes a

recuperaccedilatildeo poacutes-anesteacutesica (RPA) apresentaram-se hiacutegidos e com todas as funccedilotildees

mastigatoacuterias e sensoriais locais preservadas

Sendo acompanhados e monitorados diariamente natildeo foi observada nem

relatada nenhuma intercorrecircncia do periacuteodo poacutes-operatoacuterio ao periacuteodo de eutanaacutesia

levando em consideraccedilatildeo a retomada dos haacutebitos e funccedilotildees motoras normais do animal

logo apoacutes o teacutermino da anestesia considerando o resultado como positivo no aspecto

cliacutenico

Ao acessar os locais ciruacutergicos para a coleta dos materiais natildeo foram

encontradas infiltraccedilotildees teciduais nas regiotildees onde foram realizados os

preenchimentos com osso autoacutegeno em nenhum dos animais

Nas regiotildees onde foram realizados os preenchimentos com bioceracircmica de

HAβTCP tambeacutem natildeo foram encontradas infiltraccedilotildees teciduais em nenhum dos

animais evidenciando a resistecircncia mecacircnica a substituiccedilatildeo oacutessea gradativa e tambeacutem

a caracteriacutestica bifaacutesica do material

Jaacute nas regiotildees de preenchimento com coaacutegulo sanguiacuteneo foram observadas

infiltraccedilotildees teciduais que levaram agrave presenccedila de pequenos defeitos estruturais oacutesseos

em todos os animais

Na anaacutelise microscoacutepica em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi

possiacutevel observar a presenccedila das ceacutelulas consideradas viaacuteveis para a neoformaccedilatildeo

oacutessea

Osteoblastos foram encontrados em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando crescimento e metabolismo oacutesseo

Osteoclastos foram encontrados em 6 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP evidenciando tambeacutem o crescimento e metabolismo oacutesseo

Em somente 1 das lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP foi verificada a

presenccedila de um maior nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos em relaccedilatildeo agraves outras

assim como em 2 lacircminas natildeo foram encontrados nem osteoblastos nem osteoclastos

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 38: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

38

o que nos leva a crer que cada animal responde de uma forma diferente ao mesmo

material no mesmo periacuteodo de tempo

Foi observada maior presenccedila de osteoblastos e osteoclastos aleacutem de uma

maior presenccedila de osso imaturo nas lacircminas de osso autoacutegeno quando comparado agraves

lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP demonstrando uma aceleraccedilatildeo no processo de

maturaccedilatildeo oacutessea quando da presenccedila de bioceracircmica de HAβTCP

Jaacute quando comparado ao coaacutegulo sanguiacuteneo a presenccedila de osteoblastos e

osteoclastos foi maior nas lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP aleacutem da presenccedila em

menor quantidade de osso maduro sendo assim evidenciada uma formaccedilatildeo oacutessea mais

raacutepida nos defeitos preenchidos com coaacutegulo sanguiacuteneo havendo clinicamente uma

perda de estrutura de preenchimento

A presenccedila de osso maduro e osteoacutecitos foram observadas em todas as lacircminas

de bioceracircmica de HAβTCP entretanto a presenccedila de osso imaturo foi observada

com grande significacircncia apenas 1 lacircmina onde tambeacutem havia presenccedila de um maior

nuacutemero de osteoblastos e osteoclastos

Observou-se tambeacutem que em todas as lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP

houve uma maior presenccedila de osso maduro quando o material encontrava-se em

iacutentimo contato com as paredes dos defeitos

Material residual de bioceracircmica de HAβTCP foi evidenciado em 7 das 11

lacircminas poreacutem em uma quantidade baixa e sempre localizado mais ao centro do

defeito o que nos mostra que o crescimento eacute centriacutepeto comeccedilando pelas paredes em

contato com o material gradativamente em direccedilatildeo ao centro do defeito

A presenccedila de material residual nessas lacircminas tambeacutem demonstra o fator

individual em relaccedilatildeo agrave absorccedilatildeo e tempo de metabolismo nos animais tambeacutem

evidenciando a caracteriacutestica bifaacutesica do material

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 39: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

39

Tabelas divididas para anaacutelise e compreensatildeo

estatiacutestica

Osso Autoacutegeno

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

No osso autoacutegeno 55 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 40: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

40

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 9 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 NAtildeO

COELHO 2 SIM

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 41: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

41

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 18 das lacircminas apresentaram osso imaturo

Foi encontrado osso maduro em 100 das lacircminas

OSSO MADURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

OSSO IMATURO

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 NAtildeO

COELHO 6 NAtildeO

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 SIM

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 42: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

42

Osso Autoacutegeno

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

Foram encontrados osteoblastos e osteoclastos em 100 das lacircminas de osso autoacutegeno sendo

que em 64 das que apresentaram osteoblastos estes eram em maior quantidade e em 18

das que apresentaram osteoclastos estes tambeacutem eram em maior quantidade

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 SIM

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 43: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

43

Coaacutegulo Sanguiacuteneo (controle)

No coaacutegulo sanguiacuteneo (controle) 73 das lacircminas apresentaram osteoblastos sendo que em

13 das lacircminas foram observados em maior quantidade

55 das lacircminas apresentaram osteoclastos em quantidade semelhante entre elas

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 NAtildeO

COELHO 11 NAtildeO

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 44: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

44

Bioceracircmica de HAβTCP

Na bioceracircmica de HAβTCP 82 das lacircminas apresentaram osteoblastos com 9 das

lacircminas apresentando-os em uma maior quantidade e 55 das lacircminas apresentaram

osteoclastos com 17 apresentando-os em maior quantidade

OSTEOBLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 SIM

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

OSTEOCLASTOS

COELHO 1 SIM

COELHO 2 SIM

COELHO 3 SIM

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 NAtildeO

COELHO 8 NAtildeO

COELHO 9 NAtildeO

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 45: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

45

Bioceracircmica de HAβTCP

Foi encontrado material residual de bioceracircmica de HAβTCP em 64 lacircminas

MATERIAL RESIDUAL

COELHO 1 SIM

COELHO 2 NAtildeO

COELHO 3 NAtildeO

COELHO 4 NAtildeO

COELHO 5 SIM

COELHO 6 SIM

COELHO 7 SIM

COELHO 8 SIM

COELHO 9 SIM

COELHO 10 SIM

COELHO 11 NAtildeO

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 46: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

46

Tabelas gerais elaboradas pelo patologista para

leitura das lacircminas

Osso

Autoacutegeno

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 ++ + + -

Coelho 2 +++ + + +

Coelho 3 ++ + + +

Coelho 4 + + + -

Coelho 5 ++ + + +

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 + ++ + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 +++ + + +

Coelho 10 +++ + + -

Coelho 11 ++ ++ + +

Tabela 1- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo do osso autoacutegeno no experimento

Coaacutegulo

Sanguiacuteneo

Osteoblastos Osteoclastos Osso maduro Osso imaturo

Coelho 1 + + + -

Coelho 2 ++ + + +

Coelho 3 + + + -

Coelho 4 - - - -

Coelho 5 + + + -

Coelho 6 + + + -

Coelho 7 - - + -

Coelho 8 + + + -

Coelho 9 + - + -

Coelho 10 + - + -

Coelho 11 - - + -

Tabela 2- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) no grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo)

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 47: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

47

Tabela 3- Representaccedilatildeo da presenccedila (+) ou ausecircncia (-) na utilizaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP no

experimento

Bioceracircmica

de

HAβTCP

Osteoblastos Osteoclastos Osso

maduro

Osso

imaturo

Material

residual

Coelho 1 +++ ++ + + +

Coelho 2 + + + - -

Coelho 3 + + + - -

Coelho 4 + - + - -

Coelho 5 + + + - +

Coelho 6 + + + - +

Coelho 7 - - + - +

Coelho 8 + - + - +

Coelho 9 + - + + +

Coelho 10 + + + - +

Coelho 11 - - + - -

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 48: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

48

Lacircminas histoloacutegicas

Lacircmina de osso autoacutegeno em aumento de 100X

OC

A

OB

OS

C

Presenccedila de osso maduro com osteoacutecitos e osso em metabolismo com osteoclastos e

osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 49: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

49

Lacircmina de Coaacutegulo Sanguiacuteneo (grupo controle) em aumento de 100X

A

OS

C

OC OB

Presenccedila de maior quantidade de osso maduro e osso em processo de maturaccedilatildeo

com pouca presenccedila de osteoclastos e grande quantidade de osteoblastos

Legenda

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 50: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

50

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 400X

C

OC

MR

Presenccedila de material residual osteoclastos e osso maduro

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

C - Osso Maduro

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 51: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

51

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OS

OB

C

MR

OC

A

Presenccedila de osso em alta taxa de metabolismo com presenccedila de osteoblastos e

osteoclstos em iacutentimo contato com a bioceracircmica de HAβTCP e osso maduro

presenccedila de osteoacutecitos

Legenda

MR - Material residual

OC - Osteoclastos

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 52: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

52

Lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP em aumento de 100X

OB

C

A

OS

MR

Presenccedila de material residual envolto por osso em alto grau de metabolismo

circundado por osso maduro evidenciando neoformaccedilatildeo centriacutepeta

Legenda

MR - Material residual

OB - Osteoblastos

OS - Osteoacutecitos

A - Osso em metabolismo

C - Osso Maduro

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 53: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

53

Discussatildeo

Diversas alternativas ciruacutergicas existem com o propoacutesito de possibilitar o aumento de

volume oacutesseo em regiotildees que necessitam de reparo oacutesseo pois estas estatildeo inadequadas para

a reabilitaccedilatildeo com implantes osseointegrados (tratamento comum hoje em dia)

Diversos materiais sinteacuteticos e orgacircnicos tambeacutem encontram-se disponiacuteveis cada qual

com suas caracteriacutesticas propriedades custos e indicaccedilotildees especiacuteficas

Dentre estes destacam-se os enxertos oacutesseos autoacutegenos pela sua capacidade

osteogecircnica baixa imunogenicidade versatilidade e pela possibilidade de reconstruir

defeitos de extensotildees variadas

Desvantagens no entanto acompanham alguns procedimentos de reparo oacutesseo

autoacutegeno como a necessidade de se intervir cirurgicamente em outra parte do corpo

buscando-se a aacuterea doadora o que traz maiores desconfortos ao paciente Aleacutem disto

quando da necessidade de muito osso haacute a necessidade de outra equipe ciruacutergica e anestesia

geral em ambiente hospitalar onerando o procedimento e natildeo permitindo seu emprego a

todos os indiviacuteduos que dele necessitam

Aproveitando as propriedades bioloacutegicas destes enxertos procuramos aacutereas doadoras

com menor morbidade e com quantidade e qualidade de tecido oacutesseo suficientes para

garantir condiccedilotildees de reconstruccedilatildeo do rebordo o que nem sempre eacute possiacutevel Regiotildees

intrabucais oferecem tais condiccedilotildees destacando-se as aacutereas de tuacuteber da maxila retromolar e

siacutenfise mandibular pela possibilidade de manipulaccedilatildeo pela proacutepria equipe de cirurgiotildees

dentistas e passiacuteveis de serem realizadas sob anestesia local em ambiente ambulatorial

quando da necessidade de pouco osso Isto leva pacientes a aceitarem o tratamento pela natildeo

necessidade de internaccedilatildeo hospitalar Nos pacientes em que a regiatildeo de reparo oacutesseo eacute muito

grande esta opccedilatildeo natildeo se faz possiacutevel havendo a necessidade de abordagens extraorais

O aumento da demanda por este tipo de tratamento fez com que urgisse a necessidade

de materiais alternativos para suprir estes problemas de reconstruccedilatildeo oacutessea

No presente estudo comparou-se a bioceracircmica de HAβTCP osso autoacutegeno e

coaacutegulo sanguiacuteneo como grupo controle em defeitos criacuteticos realizados em mandiacutebula

de coelho

A luz do microscoacutepio no exame histoloacutegico a intenccedilatildeo foi observar a presenccedila

de algumas ceacutelulas relacionadas a atividades de metabolismo oacutesseo onde cada tipo

celular relaciona-se a um determinado estaacutegio no processo de reestruturaccedilatildeo e

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 54: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

54

maturaccedilatildeo oacutessea

A presenccedila de osteoblastos ceacutelulas responsaacuteveis por sintetizar a parte orgacircnica

(colaacutegeno tipo I proteoglicanas e glicoproteiacutenas) da matriz oacutessea e que possuem a

capacidade de concentrar fosfato de caacutelcio participatildeo ativamente da mineralizaccedilatildeo da

matriz oacutessea Essas ceacutelulas localizam-se geralmente nas superfiacutecies oacutesseas lado a lado

num arranjo que lembra um tecido epitelial simples Em intensa atividade (fase de siacutentese)

sugere a fase de neoformaccedilatildeo e crescimento oacutesseo local sendo observado nos trecircs tipos

de material poreacutem natildeo em todas as amostras

Jaacute a presenccedila de osteoclastos que satildeo ceacutelulas gigantes e possuem vaacuterios nuacutecleos

satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo do osso Quando a membrana celular dos osteoclastos

entra em contato com a matriz oacutessea formam-se prejeccedilotildees que constituem um bordo pelo

qual entram iacuteons hidrogecircnio para assim ser produzido um meio aacutecido que provocaraacute a

descalcificaccedilatildeo da matriz oacutessea Os osteoclastos degradam melhor o osso quando estatildeo em

contacto com matriz oacutessea mineralizada e isso soacute eacute possiacutevel com o auxiacutelio dos osteoblastos

Os osteoblastos produzem enzimas que degradam a camada natildeo mineralizada da matriz

permitindo assim aos osteoclastos um faacutecil acesso agrave matriz oacutessea mineralizada para a

degradaremSabendo que para uma neoformaccedilatildeo eacute necessaacuteria uma reabsorccedilatildeo

concomitante a presenccedila de osteoblastos com osteoclastos indica a presenccedila de uma

neoformaccedilatildeo de matriz oacutessea A presenccedila de osteoblastos e osteoclastos juntos foi

observada em 9 das 11 lacircminas de bioceracircmica de HAβTCP o que evidencia processo de

metabolismo oacutesseo nessas lacircminas

O osteoacutecito eacute o osteoblasto maduro que parou de secretar mateacuteria orgacircnica Os

osteoacutecitos estatildeo localizados em cavidades ou lacunas dentro da matriz oacutessea Destas lacunas

formam-se canaliacuteculos que se dirigem para outras lacunas tornando assim a difusatildeo de

nutrientes possiacutevel graccedilas agrave comunicaccedilatildeo entre os osteoacutecitos Os osteoacutecitos tecircm um papel

fundamental na manutenccedilatildeo da integridade da matriz oacutessea A presenccedila desta ceacutelula foi

observada em todas as lacircminas de todos os materiais estudados em diferentes quantidades e

algumas vezes com a presenccedila de osteoblastos ou osteoclastos evidenciando-nos a presenccedila

de um osso imaturo

A maturaccedilatildeo oacutessea ocorre e eacute evidenciada quando haacute a presenccedila de osteoacutecitos com

grande deposiccedilatildeo caacutelcica e ausecircncias de osteoblatos e osteoclastos na regiatildeo como foi

observado em todoas as amostras de coaacutegulo osso autoacutegeno e bioceracircmica de HAβTCP

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 55: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

55

Contudo pode observar-se a presenccedila de osso imaturo evidenciado pela presenccedila de

osteoblastos e osteoclastos aleacutem de pouca deposiccedilatildeo caacutelcica em 5 lacircminas de osso autoacutegeno

1 lacircmina de coaacutegulo sanguiacuteneo e 1 lacircmina de bioceracircmica de HAβTCP

Foi observada a presenccedila de material residual em 7 das 11 lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP observadas o que nos mostra que a degradaccedilatildeo do material natildeo foi a mesma em

todos os indiviacuteduos pesquisados apesar do mesmo tempo de espera no presente estudo que

foi de 90 dias Essa degradaccedilatildeo retardada tambeacutem deve-se ao fato da associaccedilatildeo de HA com

βTCP o que torna a bioceracircmica de HAβTCP bifaacutesica dando caracteriacutesticas de resistecircncia

mecacircnia e degradaccedilatildeo gradativa realizada em duas etapas sendo primeiramente o conteuacutedo

mais soluacutevel βTCP e posteriormente o menos soluacutevel HA

Foi observado que a regeneraccedilatildeo oacutessea foi melhor e mais raacutepida quando haacute um iacutentimo

contato da bioceracircmica de HAβTCP com o osso circundante devido a interface direta

resultate da integraccedilatildeo do osso cortical e medular com o material (Wolf et al 2001 Zerbo

et al 2004)

Foi evidenciada a osteocondutividade e a osteoinduccedilatildeo do material bioceracircmica de

HAβTCP o que facilita a regeneraccedilatildeo e orientaccedilatildeo de um novo trabeculado oacutesseo ( Merten

et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e Hoch 2002 Le

Nihouannen et al 2007)

O preenchimento total dos defeitos sem infiltraccedilatildeo tecidual mantendo-se estaacutevel

enquanto ocorria a substituiccedilatildeo oacutessea foi evidenciado clinicamente em todas as lacircminas de

bioceracircmica de HAβTCP levando-se em conta os atrasos na formaccedilatildeo oacutessea observados

histoloacutegicamente devido a reaccedilatildeo individual ao material que influencia tambeacutem quando haacute

aceleraccedilatildeo do processo tanto na degradaccedilatildeo das partes mais soluacuteveis quanto das menos

soluacuteveis ( Merten et al Wiltfang Schlegel e Merten Szaboacute et al Zerbo et al 2001 Palti e

Hoch Wiltfang et al 2002 Garrido Trisi et al 2003 Zerbo et al 2004 Szaboacute et al 2005

e Suba et al Mastrogiacomo et al Scherme 2006)

Outro fator que devemos levar em consideraccedilatildeo foi que clinicamente ao realizarmos a

cirurgia de coleta dos materiais para anaacutelise reparamos que a aparecircncia do osso

neoformado mesmo sem a utilizaccedilatildeo de membranas era normal sem a infiltraccedilatildeo tecidual

qualquer na regiatildeo acreditando natildeo ser necessaacuteria a utilizaccedilatildeo de membranas para obtenccedilatildeo

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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and Bio-OSS Poster presentation at the internatinal conference ldquoBONE 2003rdquo NL-

Maastricht Oct 2003

Tamura K et al (2007) The use of porous β- tricalcium phosphate blocks with

platelet-rich plasma as an onlay bone graft biomaterial J Periodontol Vol 78 n 2 p 315-

321 DOI 101902jop2007060228

67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 56: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

56

de bons resultatos com o material devido a sua resistecircncia mecacircnica e sua caracteriacutestica

bifaacutesica que manteacutem o suporte estrutural desejado ateacute o teacutermino da substituiccedilatildeo oacutessea (Hille

2005 Youzhuan et al 2006)

O material apresentou-se biocompatiacutevel e com total imunogenicidade aleacutem de natildeo

apresentar reaccedilotildees inflamatoacuterias durante todo o trabalho devido principalmente agrave natildeo

exposiccedilatildeo do material assim como ocorre quando usamos membranas em enxertos com

riscos de exposiccedilatildeo (Wolf et al Wiltfang Schlegel e Merten Zerbo et al 2001 Zerbo et

al 2004 Hille 2005 Scherme Horch 2006 Tamura et al 2007)

O material mostrou-se muito eficaz no preenchimento oacutesseo de defeitos ldquoin layrdquo

poreacutem mais estudos precisam ser realizados podendo mostrar uma capacidade osteogecircnica

do material (Tadic e Epple 2004 Le Nihouannen et al 2007)

O material mostrou ser orientador para a neoformaccedilatildeo de trabeculado oacutesseo aleacutem de

induzir essa neoformaccedilatildeo quando em contato com o osso podendo ser classificado como

osteocondutor e osteoindutor (Zerbo et al 2004)

Clinicamente o material pareceu ser mais resistente agrave perfuraccedilatildeo mostrando maior

dureza quando comparado com os outros preenchimentos isso foi evidenciado pela

dificuldade de descalcificaccedilatildeo quando do preparo para confecccedilatildeo das lacircminas histoloacutegicas

necessitando do dobro do periacuteodo para descalcificaccedilatildeo oacutessea durante o processo (Zjiderveld

et al 2005)

Poreacutem Suba et al 2006 relataram que a densidade oacutessea da regiatildeo enxertada quando

perfurada para colocaccedilatildeo de implantes natildeo apresentou diferenccedila cliacutenica quando comparado

ao siacutetio oacutesseo natrural contiacuteguo necessitando de trabalhos mais especiacuteficos para estas

conclusotildees

A associaccedilatildeo da bioceracircmica de HAβTCP com outros materiais natildeo foi estudada

devendo ser realizados estudos mais especiacuteficos para indicaccedilotildees tanto de plasma rico em

plaquetas (PRP) como silicone de fosfato de cola de fibrina ou mesmo com osso autoacutegeno

apesar de acharmos que a associaccedilatildeo de qualquer material osteogecircnico a um material

osteocondutor e osteoindutor como eacute o caso da bioceracircmica de HAβTCP deve ser beneacutefico

para um aumento na velocidade da reparaccedilatildeo assim como para uma melhora na estrutura

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 57: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

57

oacutessea neoformada (Schiroli e Chiaramondia Kovacs et al 2003 Horch et al

Mastrogiacomo et al 2006 Le Nihouannen et al Tamura et al 2007)

Alteraccedilotildees na morfologia e na quantidade das ceacutelulas viaacuteveis presentes na regiatildeo de

neoformaccedilatildeo oacutessea natildeo foi observada em nenhuma das lacircminas de bioceracircmica de

HAβTCP nem nas lacircminas de coaacutegulo sanguiacuteneo e osso autoacutegeno (Aybar et al 2004)

Sabemos que dependendo do material e do tamanho de suas partiacuteculas haacute um melhor

ou pior aproveitamento do mesmo na viabilizaccedilatildeo durante a formaccedilatildeo de matriz oacutessea

Assim sendo acreditamos que o tamanho das partiacuteculas deve influenciar na formaccedilatildeo do

trabeculado oacutesseo melhorando ou piorando sua absorccedilatildeo sabendo que a deposiccedilatildeo oacutessea

acontece simultacircneamente O tamanho das partiacuteculas de bioceracircmica de HAβTCP estudada

foi de 100 a 200microm o que facilita sua absorccedilatildeo e liberaccedilatildeo de iacuteons caacutelcio favorecendo o

processo de mitose osteoblaacutestica proporcionando osteinduccedilatildeo (Zerbo et al Peters e Reif

2004Plenck e Lederer em 2005 Youzhuan et al 2006)

Ao realizar o trabalho levamos em consideraccedilatildeo o conceito de defeitos criacuteticos em

mandiacutebulas de coelhos como relataram Torriani et al 1992 poreacutem tem de se levar em

consideraccedilatildeo que o tamanho do defeito pode necessitar de uma associaccedilatildeo do material

bioceracircmica de HAβTCP com material autoacutegeno ou outro material osteogecircnico para que se

propicie uma melhor e mais raacutepida reparaccedilatildeo oacutessea em defeitos maiores viabilizando a

criaccedilatildeo de uma nova matriz oacutessea celular na regiatildeo (Peters e Reif 2004 Horch et al

2006)

Poreacutem Le Nihouannen et al em 2007 consideraram o material ideal para utilizaccedilatildeo

em ossos longos como substituto ao osso autoacutegeno mesmo quando utilizado sozinho

A facilidade da aplicaccedilatildeo do material tambeacutem deve ser relatada como um fator

positivo em favor do material pois sabemos da dificuldade de aplicaccedilatildeo de diversos

produtos e suas formas de aplicaccedilatildeo e de apresentaccedilatildeo facilitam seu uso no dia a dia (Horch

et al 2006)

Foi observada histologicamente uma aceleraccedilatildeo no processode neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos preenchidos com bioceracircmica de HAβTCP quando comparados com os

defeitos preenchidos com osso autoacutegeno Poreacutem quando comparados ao grupo controle

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

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oral Maxillofac Surg v48 n1p27-32 Jan 1990

NEYT LF et al Reconstruction of the severely resorbed maxilla with a combination of

sinus augmentation onlay bone grafting and implants J oral Maxillofac Surg v55

n12 p1397-1401 Dec 1997

NYSTROumlM E et al Combined use of bone grafts and implants in the severely resorbed

maxilla Int J oral Maxillofac Surg v24 n1 pt1 p20-5 Feb 1995

SINDET-PEDERSEN S ENEMARK H Mandibular bone grafts for reconstruction of

alveolar clefts J oral Maxillofac Surg v 46 n 7 p533-37 July 1988

SCHENK RK Bone regeneration biologic basis In BUSER D DAHLIN C

SCHENK RK Guided bone regeneration in implant dentistry StLouis

Quintessence books 1994 p 49-100

BREINE U BRANEMARK P-I Reconstruction of alveolar jaw bone Scand J plast

reconstr Surg v14 n1 p14-48 1980

62

ADELL R et al Reconstruction of severely resorbed edentulous maxillae using

osseointegrated fixtures in immediate autogenous bone grafts Int J oral Maxillofac

Surg v5 n3 p233-46 1990

CITARDI MJ et al Nonvascularized autogenous bone grafts for craniofacial skeletal

augmentation and replacement Otolaryngol Clin N Amer v27 n5 p891-910 Oct

1994

ISAKSSON S et al Early results from reconstruction of severely atrophic (class VI)

maxillas by immediate endosseous implants in conjunction with bone grafting and Le

Fort I osteotomy Int J oral Maxillofac Surg v22 n3 p144-8 June 1993

ALONSO N et al Cranial versus iliac onlay bones grafts in the facial skeleton a

macroscopic and histomorphometric study J craniofac Surg v6 n2 p113-8 Mar

1995

LA ROSSA D et al A comparison of iliac and cranial bone in secondary grafting of

alveolar clefts Plast reconstr Surg v96 n4 p789-97 Sept 1995

TRIPLETT RG SCHOW SR Autologous bone grafts and endosseous implants

complementary techniques J oral Maxillofac Surg v54 n4 p486-34 Apr 1996

ALBREKTSSON T Repair of bone grafts A vital microscopic and histological

investigation in the rabbit Scand J plast reconstr Surg v14 n1 p1-12 1980

TOLMAN DE Reconstructive procedures with endosseous implants in grafted bone a

review of the literature Int J oral Maxillofac Surgv10 n3 p275-94 MayJune

1995

Toriumi DM Kotler HS Luxenberg P Holtrop ME Wang EA Mandibular

reconstruction with a recombinant bone-inducing factor Arch Otolaryngol Head Neck

Surg 1991117(10)1101-12

63

Artzi Z et al Histomorphometric assessment of bone formation in sinus augmentation

utilizing a combination of autogenous and hydroxyapatitebiphasic tricalcium phosphate

graft materials at 6 and 9 months in humans Clin Oral Implants Res 19686-692 2007

Nagahara K et al Osteogenesis of hydroxyapatite and tricalcium phosphate used as a

bone substitute Int J of Oral and Maxillofac Implants 772-79 1992

Ripamonti U Osteoinduction in porous hydroxyapatite implanted in heterotopic sites of

different animal modelsBiomaterials 17(1)31-35 1996

Yamamoto T et al Use of hydroxyapatite to fill cavities after excision of benign bone

tumours Clinical results The journal of bone amp joint surgery (Br) 82(8)1117-1120

2000

GAD S Animal Models in Toxicology - Escala Alomeacutetrica 1ordmed Hardcover 2006

MISCH CE In____ Implantes Dentaacuterios Contemporacircneos 2ed Satildeo Paulo

Livraria Santos 2000 Cap 17 p225-239

ROBERTS WE et al Bone physiology and metabolism Amer J Anatv15 n10

p54- 61 Oct 1987

Torriani M A Brito J H M Enxerto de hidroxiapatita em mandiacutebula de coelho ndash

avaliaccedilatildeo histoloacutegica Odonto Ciecircncia n 14 - 19922 Fac Odonto PUCRS

VITAL CC et al Biocompatibilidade e comportamento de compoacutesitos de hidroxiapatita

em falha oacutessea na ulna de coelhos Arq Bras Med Vet Zootec 58(2) 2006

Merten H A et al Intraindividual comparative animal study of α- and β- tricalcium

phosphate degradation in conjunction with simultaneous insertion of dental implants The

Journal of Craniofacial Surgery vol12 num 1 jan 2001

64

Kovacs K et al comparative study of β-triclcium phosphate mixed with platelet-rich

plasma versus β-tricalcium phosphate a bone substitute material in dentistry Acta

Veterinaria Hungarica 51 (4) PP 475-484 (2003)

Palti A Hoch T (2002) A Concept for the Treatment of Various Dental Bone Defects

Implant Dentistry 2002 11 73-78

Wolf K Hamar J Moravec S Farkas T Houmlcherl E Pfister C (2001) Analysis of the

Morphology of Intergranular Porosity of β-Tricalcium Phosphate in Relation to

Development of Vasculoneogenesis in an Animal Experiment and Overview of the

Indications for β-Tricalcium Phosphate in Human Patients Applied Cardiopulmonary

Pathophysiology 2001 10 (2) 3-12

Zerbo IR Bronckers AL de Lange G Burger EH (2004) Localisation of osteogenic and

osteoclastic cells in porous β-tricalcium phosphate particles used for human maxillary

sinus floor elevation Biomaterials 2004 April 26 (12) 1445-1451

Zerbo IR Zijderveld SA de Boer A Bronckers AL de Lange G ten Bruggenkate CM

Burger EH (2004) Histomorphometry of human sinus floor augmentation using a porous

β-tricalcium phosphate a prospective study Clin Oral Implant Res 2004 15 (6) 724-

732

Zerbo IR (2004) Histology of bone regeneration in the human maxilla Argumentation

by monocortical bone blocks or β-tricalcium phosphate particles PhD Thesis ndash Amsterdan

2004

Szabo G Huys L Coulthard P Maiorana C Garagiola U Barabas J Nemeth Z Hrabak

K Suba Z (2005) A Prospective Multicenter Randomized Clinical Trial of Autogenous

Bone Versus β-Tricalcium Phosphate Graft Alone for Bilateral Sinus Elevation

Histologic and Histomorphometric Evaluation Int J Oral Maxillofac Implants 2005 20

371ndash381

Wiltfang J Merten HA Schlegel KA Schultze-Mosgau S Kloss FR Rupprecht S

Kessler P (2002) Degradation Characteristics of α andβ Tri-Calcium-Phosphate (TCP) in

Minipigs J Biomed Mater Res 2002 63 115-121

Wiltfang J Merten HA Schlegel KA Clinical results after application of resorbable

pure-phase β ndash tricalcium phosphate ceramic Cerasorbreg in enossal bed ZWR 110 Jahrg

2001 Nr 9 p 556-559

65

Trisi P Rao W Rebaudi A Fiore P (2003) Histologic Effect of Pure-Phase Beta-

Tricalcium Phosphate on Bone Regeneration in Human Artifical Jawbone Defects The

International Journal of Periodontics amp Restorative Dentistry 2003 23 (1) 69-77

Tadic D Epple M (2004) A thorough physicochemical characterisation of 14 calcium

phosphate-based bone substitution materials in comparison to natural bone Biomaterials

2004 25 (6) 987-994

Artzi Z Weinreb M Givol N Rohrer MD Nemcovsky CE Prasad HS Tal H (2004)

Biomaterial Resorption Rate and Healing Site Morphology of Inorganic Bovine Bone and

β-Tricalcium Phosphate in the Canine a 24-month Longitudinal Histologic Study and

Morphometric Analysis Int J Oral Maxillofac Implants 2004 May-Jun 19 (3) 357-368

Schermer S (2006) Augmentation and Defect Reconstruction with a New Synthetic

Pure-Phase Beta-Tricalcium Phosphate ndash Open trial in 289 patients EDI Journal ndash

European Journal for Dental Implantology 2006 1 31-39

Zijderveld SA Zerbo IR van den Bergh JP Schulten EA ten Bruggenkate CM (2005)

Maxillary Sinus Floor Augmentation Using a β-Tricalcium Phosphate (Cerasorb) Alone

Compared to Autogenous Bone Grafts Int J Oral Maxillofac Implants 2005 20 (3) 432ndash

440

Le Nihouannen D et al Bone tissue formation in sheep muscles induced by a bifhasic

calcium phosphate ceramic and fibrin glue composite J Master Sci Master Med DOI

101007s10856-007-3206-3 July 2006

Suba Z Takacs D Matusovits D Barabas J Fazekas A Szabo G (2006) Maxillary sinus

floor grafting with β-tricalcium phosphate in humans density and microarchitecture of the

newly formed bone Clin Oral Impl Res 2006 17 102-108

Hille R (2005) Alveolar Ridge Preservation Preserving and Building up the Bony

Structures after Extraction International Magazine of Oral Implants Vol 6 2005 1 22-

28

Aybar B Bilir A Akcakaya H Ceyhan T (2004) Effects of tricalcium phosphate bone

graft materials on primary cultures of osteoblast cells in vitro Clin Oral Implants Res

2004 Feb 15 (1) 119-125

Peters F Reif D (2004) Functional Materials for Bone Regeneration from Beta-

Tricalcium Phosphate Funktionelle Materialien zur Knochenregeneration aus Beta-

Tricalciumphosphat Mat-wiss u Werkstofftech 2004 35 No 4 203-207 Article in

English

Horch HH Sader R Pautke C Neff A Deppe H Kolk A (2006) Synthetic pure-phase

beta-tricalcium phosphate ceramic granules (Cerasorbreg) for bone regeneration in the

reconstructive surgery of the jaws Int J Oral Maxillofac Surg 2006 35 708-713

66

Plenk H Lederer J Histomorphology of bone regeneration after sinus floor elevation

with two types of TCP granulate ndash a case report Zeitschrift fuumlr Orale Implantologie 2005

32- 38

Schiroli G Chiaramondia M Human histological 4 months findings using a

combination of purecirc-fase beta tricalcium phosphate(βTCP) and platelet rich plasma (PRP)

chair-side preparation in comparison with βTCP alone autogenous bone graft DFDBA

and Bio-OSS Poster presentation at the internatinal conference ldquoBONE 2003rdquo NL-

Maastricht Oct 2003

Tamura K et al (2007) The use of porous β- tricalcium phosphate blocks with

platelet-rich plasma as an onlay bone graft biomaterial J Periodontol Vol 78 n 2 p 315-

321 DOI 101902jop2007060228

67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 58: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

58

(coaacutegulo sanguiacuteneo) em ambos os materiais o preenchimento foi mais lento (Zerbo et

al2004 Scherme 2006)

Clinicamente houve uma perda de estrutura de prenchimento e neoformaccedilatildeo oacutessea

nos defeitos do grupo controle (coaacutegulo sanguiacuteneo) o que natildeo foi observado no grupo de

osso autoacutegeno nem no grupo da bioceracircmica de HAβTCP poreacutem e quantidade oacutessea

encontrada em seu siacutetio foi maior do que nos siacutetios dos outros materiais

A pesquisa do material ideal como substituto oacutesseo eacute sem duacutevida uma das maiores

buscas nos dias atuais Devido a sua enorme variedade de apresentaccedilotildees tanto no que diz

respeito ao formato tamanho das partiacuteculas como tambeacutem em relaccedilatildeo a suas caracteriacutesticas

imunogecircnicas de biocompatibilidade osteoconduccedilatildeo e osteoinduccedilatildeo a bioceracircmica de

βTCP eacute considerada quase que unanimimente como um material que pode vir a substituir os

enxertos autoacutegenos e os outros materiais de difiacutecil acesso por ser um material sineacutetico e de

faacutecil aquisiccedilatildeo e custo acessiacutevel Sua associaccedilatildeo com a HA mostra-se beneacutefica quando da

necessidade de uma resistecircncia material e um ldquoatrasordquo na absorccedilatildeo mantendo o arcabouccedilo

de suporte que eacute substituido gradativamente melhorando assim caracteriacutesticas de

preenchimento e neoformaccedilatildeo formando a bioceracircmica de HAβTCP

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

Referecircncias Bibliograacuteficas

AL RUHAIMI K A Bone graft substitutes a comparative qualitative histologic review

of current osteoconductive grafting materials Int J Oral Maxilo Facial Implants v16

n1 p105-14 Jan-Feb 2001

EL-GHANNAM A R Advanced bioceramic composite for bone tissue engineering

design principles and structure-bioactivity relationship J Biomed Mater Res v3

p490-501 Jun 2004

GARRIDO C A Uso de bioceracircmica no preenchimento de falha oacutessea de etiologia

ortopeacutedica e traumatoloacutegica Satildeo Paulo 106 p Dissertaccedilatildeo (Doutorado) -

Universidade Federal de Satildeo Paulo Escola Paulista de Medicina Curso de

Ortopedia e Traumatologia 2003

HENCH L L et al Bonding mechanisms at the interface of ceramic prosthetic materials

J Biomed Mater Res v2 p117-411971

MAC NEILL S R et al In vivo comparison of synthetic osseous graft materials A

preliminary study J Clin Periodontol a26 v4 p239-45 April 1999

MASTROGIACOMO M et al Reconstruction of extensive long bone defects in sheep

using resorbable bioceramics based on silicon stabilized tricalcium phosphate Tissue

Eng a12 v5 p1261-73 May 2006

NISHIKAWA M et Al Bone tissue engineering using novel interconnected porous

hydroxyapatite ceramics combined with marrow mesenchymal cells quantitative and

three-dimensional image analysis Cell Transplant a13 v4 p367-76 2004

SZABOacute G et al Autogenous bone versus beta-tricalcium phosphate graft alone for

bilateral sinus elevations (2- and 3-dimensional computed tomographic histologic and

histomorphometric evaluations) preliminary results Int J Oral Maxillofac Implants

61

a16 v5 p681-92 Sep-Oct 2001

YOUZHUAN X et al Evaluation of the osteogenesis and biodegradation of porous

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n12 p1397-1401 Dec 1997

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1995

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63

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β-tricalcium phosphate a prospective study Clin Oral Implant Res 2004 15 (6) 724-

732

Zerbo IR (2004) Histology of bone regeneration in the human maxilla Argumentation

by monocortical bone blocks or β-tricalcium phosphate particles PhD Thesis ndash Amsterdan

2004

Szabo G Huys L Coulthard P Maiorana C Garagiola U Barabas J Nemeth Z Hrabak

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Bone Versus β-Tricalcium Phosphate Graft Alone for Bilateral Sinus Elevation

Histologic and Histomorphometric Evaluation Int J Oral Maxillofac Implants 2005 20

371ndash381

Wiltfang J Merten HA Schlegel KA Schultze-Mosgau S Kloss FR Rupprecht S

Kessler P (2002) Degradation Characteristics of α andβ Tri-Calcium-Phosphate (TCP) in

Minipigs J Biomed Mater Res 2002 63 115-121

Wiltfang J Merten HA Schlegel KA Clinical results after application of resorbable

pure-phase β ndash tricalcium phosphate ceramic Cerasorbreg in enossal bed ZWR 110 Jahrg

2001 Nr 9 p 556-559

65

Trisi P Rao W Rebaudi A Fiore P (2003) Histologic Effect of Pure-Phase Beta-

Tricalcium Phosphate on Bone Regeneration in Human Artifical Jawbone Defects The

International Journal of Periodontics amp Restorative Dentistry 2003 23 (1) 69-77

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2004 25 (6) 987-994

Artzi Z Weinreb M Givol N Rohrer MD Nemcovsky CE Prasad HS Tal H (2004)

Biomaterial Resorption Rate and Healing Site Morphology of Inorganic Bovine Bone and

β-Tricalcium Phosphate in the Canine a 24-month Longitudinal Histologic Study and

Morphometric Analysis Int J Oral Maxillofac Implants 2004 May-Jun 19 (3) 357-368

Schermer S (2006) Augmentation and Defect Reconstruction with a New Synthetic

Pure-Phase Beta-Tricalcium Phosphate ndash Open trial in 289 patients EDI Journal ndash

European Journal for Dental Implantology 2006 1 31-39

Zijderveld SA Zerbo IR van den Bergh JP Schulten EA ten Bruggenkate CM (2005)

Maxillary Sinus Floor Augmentation Using a β-Tricalcium Phosphate (Cerasorb) Alone

Compared to Autogenous Bone Grafts Int J Oral Maxillofac Implants 2005 20 (3) 432ndash

440

Le Nihouannen D et al Bone tissue formation in sheep muscles induced by a bifhasic

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101007s10856-007-3206-3 July 2006

Suba Z Takacs D Matusovits D Barabas J Fazekas A Szabo G (2006) Maxillary sinus

floor grafting with β-tricalcium phosphate in humans density and microarchitecture of the

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Hille R (2005) Alveolar Ridge Preservation Preserving and Building up the Bony

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28

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2004 Feb 15 (1) 119-125

Peters F Reif D (2004) Functional Materials for Bone Regeneration from Beta-

Tricalcium Phosphate Funktionelle Materialien zur Knochenregeneration aus Beta-

Tricalciumphosphat Mat-wiss u Werkstofftech 2004 35 No 4 203-207 Article in

English

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beta-tricalcium phosphate ceramic granules (Cerasorbreg) for bone regeneration in the

reconstructive surgery of the jaws Int J Oral Maxillofac Surg 2006 35 708-713

66

Plenk H Lederer J Histomorphology of bone regeneration after sinus floor elevation

with two types of TCP granulate ndash a case report Zeitschrift fuumlr Orale Implantologie 2005

32- 38

Schiroli G Chiaramondia M Human histological 4 months findings using a

combination of purecirc-fase beta tricalcium phosphate(βTCP) and platelet rich plasma (PRP)

chair-side preparation in comparison with βTCP alone autogenous bone graft DFDBA

and Bio-OSS Poster presentation at the internatinal conference ldquoBONE 2003rdquo NL-

Maastricht Oct 2003

Tamura K et al (2007) The use of porous β- tricalcium phosphate blocks with

platelet-rich plasma as an onlay bone graft biomaterial J Periodontol Vol 78 n 2 p 315-

321 DOI 101902jop2007060228

67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 59: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

59

Conclusatildeo

1 A bioceracircmica de HAβTCP pode ser classificada como um substituto oacutesseo para

defeitos oacutesseos ldquoInlayrdquo podendo ser aplicado sem maiores riscos para esse tipo de

reconstruccedilotildees

2 A bioceracircmica de HAβTCP eacute um material com capacidade osteoindutiva e

osteocondutiva devido agrave suas caracteriacutesticas fiacutesico-quiacutemicas

3 O material manteacutem-se estaacutevel preenchendo e mantendo o defeito protegido contra

migraccedilatildeo epitelial

4 O material acelera o processo metaboacutelico de neoformaccedilatildeo oacutessea quando

comparado ao osso autoacutegeno

5 O material possui biocompatibilidade eacute totalmente soluacutevel e reabsorviacutevel e de

faacutecil manipulaccedilatildeo e aplicaccedilatildeo

60

Referecircncias Bibliograacuteficas

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of current osteoconductive grafting materials Int J Oral Maxilo Facial Implants v16

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bilateral sinus elevations (2- and 3-dimensional computed tomographic histologic and

histomorphometric evaluations) preliminary results Int J Oral Maxillofac Implants

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Yamamoto T et al Use of hydroxyapatite to fill cavities after excision of benign bone

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2000

GAD S Animal Models in Toxicology - Escala Alomeacutetrica 1ordmed Hardcover 2006

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Livraria Santos 2000 Cap 17 p225-239

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Torriani M A Brito J H M Enxerto de hidroxiapatita em mandiacutebula de coelho ndash

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VITAL CC et al Biocompatibilidade e comportamento de compoacutesitos de hidroxiapatita

em falha oacutessea na ulna de coelhos Arq Bras Med Vet Zootec 58(2) 2006

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phosphate degradation in conjunction with simultaneous insertion of dental implants The

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64

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66

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

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67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

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interesse no presente manuscrito

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Ripamonti U Osteoinduction in porous hydroxyapatite implanted in heterotopic sites of

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Yamamoto T et al Use of hydroxyapatite to fill cavities after excision of benign bone

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p54- 61 Oct 1987

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interesse no presente manuscrito

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Development of Vasculoneogenesis in an Animal Experiment and Overview of the

Indications for β-Tricalcium Phosphate in Human Patients Applied Cardiopulmonary

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Zerbo IR Bronckers AL de Lange G Burger EH (2004) Localisation of osteogenic and

osteoclastic cells in porous β-tricalcium phosphate particles used for human maxillary

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Zerbo IR Zijderveld SA de Boer A Bronckers AL de Lange G ten Bruggenkate CM

Burger EH (2004) Histomorphometry of human sinus floor augmentation using a porous

β-tricalcium phosphate a prospective study Clin Oral Implant Res 2004 15 (6) 724-

732

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by monocortical bone blocks or β-tricalcium phosphate particles PhD Thesis ndash Amsterdan

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371ndash381

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Minipigs J Biomed Mater Res 2002 63 115-121

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65

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Tricalcium Phosphate on Bone Regeneration in Human Artifical Jawbone Defects The

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Artzi Z Weinreb M Givol N Rohrer MD Nemcovsky CE Prasad HS Tal H (2004)

Biomaterial Resorption Rate and Healing Site Morphology of Inorganic Bovine Bone and

β-Tricalcium Phosphate in the Canine a 24-month Longitudinal Histologic Study and

Morphometric Analysis Int J Oral Maxillofac Implants 2004 May-Jun 19 (3) 357-368

Schermer S (2006) Augmentation and Defect Reconstruction with a New Synthetic

Pure-Phase Beta-Tricalcium Phosphate ndash Open trial in 289 patients EDI Journal ndash

European Journal for Dental Implantology 2006 1 31-39

Zijderveld SA Zerbo IR van den Bergh JP Schulten EA ten Bruggenkate CM (2005)

Maxillary Sinus Floor Augmentation Using a β-Tricalcium Phosphate (Cerasorb) Alone

Compared to Autogenous Bone Grafts Int J Oral Maxillofac Implants 2005 20 (3) 432ndash

440

Le Nihouannen D et al Bone tissue formation in sheep muscles induced by a bifhasic

calcium phosphate ceramic and fibrin glue composite J Master Sci Master Med DOI

101007s10856-007-3206-3 July 2006

Suba Z Takacs D Matusovits D Barabas J Fazekas A Szabo G (2006) Maxillary sinus

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English

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beta-tricalcium phosphate ceramic granules (Cerasorbreg) for bone regeneration in the

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66

Plenk H Lederer J Histomorphology of bone regeneration after sinus floor elevation

with two types of TCP granulate ndash a case report Zeitschrift fuumlr Orale Implantologie 2005

32- 38

Schiroli G Chiaramondia M Human histological 4 months findings using a

combination of purecirc-fase beta tricalcium phosphate(βTCP) and platelet rich plasma (PRP)

chair-side preparation in comparison with βTCP alone autogenous bone graft DFDBA

and Bio-OSS Poster presentation at the internatinal conference ldquoBONE 2003rdquo NL-

Maastricht Oct 2003

Tamura K et al (2007) The use of porous β- tricalcium phosphate blocks with

platelet-rich plasma as an onlay bone graft biomaterial J Periodontol Vol 78 n 2 p 315-

321 DOI 101902jop2007060228

67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 65: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

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Maastricht Oct 2003

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321 DOI 101902jop2007060228

67

DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

Page 66: TESE MESTRADO - Dr. Francisco Franceschini Neto

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Plenk H Lederer J Histomorphology of bone regeneration after sinus floor elevation

with two types of TCP granulate ndash a case report Zeitschrift fuumlr Orale Implantologie 2005

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Maastricht Oct 2003

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321 DOI 101902jop2007060228

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DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito

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DIVULGACcedilAtildeO DE POTENCIAL CONFLITO DE INTERESSES

Eu Francisco Franceschini Neto declaro natildeo ter nenhum potencial conflito de

interesse no presente manuscrito