Upload
others
View
3
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
IVD Sadece in Vitro Diagnostic Kullanım için
Trichomonas vaginalis Real-TM
El Kitabı
Kalitatif Tespiti için Real Time PCR kiti Trichomonas vaginalis
REF B6-100FRT
REF TB6-100FRT
100
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
İSİM
Trichomonas vaginalis Real-TM
AÇIKLAMA
STDs (cinsel yolla bulaşan hastalıklar) cinsel aktivite yoluyla edinilen bakteriyel, viral ve parasitik
enfeksiyonların çeşitlerine bakınız. HIV gibi bazıları sadece son birkaç on yıl içinde tespit
edilmişken, frengi, bel soğukluğu gibi bazı cinsel yolla bulaşanlar (STDs) yüzyıllardır
bilinmektedir. STDs'ye, 25'ten fazla enfeksiyonlu organizma sebep olur. Daha fazla organizmanın
tanımlanması ile STDs sayısı devamlı artmaktadır. Yaygın STDs 'ler içinde; chlamydia,
gonorrhea, herpes, HIV, HPV, syphilis, gardnerella ve trichomoniasis yer almaktadır.
Nükleik asit amplifikasyon teknolojisine dayanan testlerin geliştirilmesi, STD'nin tanısı
alanındaki en önemli ilerleme olmuştur. Nükleik asit amplifikasyon oldukça hassas ve spesifik
olması nedeniyle, normalde klinik bakım talep olmayan asemptomik kişilerde , enfeksiyonların
taranması için, invaziv olmayan örnekleme tekniklerini kullanmak için fırsat sunar.
KULLANIM AMACI
Trichomonas vaginalis Real-TM kiti, ürogenital swablar,idrar, prostat sıvısı ve diğer biyolojik
malzemelerde Trichomonas vaginalis 'in kalitatif tespiti için bir testtir.
TAHLİL PRENSİBİ
Trichomonas vaginalis Real-TM kiti, iki ana proses esasına dayanmaktadır: Örneklerden DNA
izolasyonu ve Real time Amplifikasyon. Trichomonas vaginalis DNA, Real Time amplifiye
örneklerden ekstrakte edilir ve Internal (iç) kontrol ve Trichomonas vaginalis için spesifik floresan
reporter boya probları kullanılarak tespit edilir. Internal (iç) Kontrol, olası inhibasyon reaksiyonunu
tanılamak için ve her biri tek tek işlenen numuneler için bir amplifikasyon kontrolü olarak hizmet
vermektedir. IC, Trichomonas vaginalis DNA'dan farklı bir kanalda tespit edilir.
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
SAĞLANAN MALZEMELER
Modül No.1: Real Time PCR kit (B6-100FRT)
Part N° 2 – “T.vaginalis Real-TM”: Real Time Amplifikasyon
PCR-mix-1-FL, 1,2 ml;
PCR-mix-2-FRT, 2 x 0,35 ml;
TaqF Polymerase, 2 x 0,03 ml;
Pos C+, 0,2 ml;
Negative Control C-, 1,2 ml;*
Internal Control IC, 1,0 ml;**
DNA-buffer, 0,5 ml;
110 test için reaktifler içerir
Modül No.2: DNA purifikasyon kiti (TB6-100FRT) ile Komple Real Time PCR testi
Part N° 1 – “DNA-sorb-A”: Numune Hazırlama
Lysis Solution, 2 x 15 ml;
Sorbent, 2 x 1,0 ml;
Washing Solution, 2 x 50 ml;
DNA-eluent, 2 x 5 ml;
Transport medium , 30 ml.
100 test için reaktifler içerir
Part N° 2 – “T.vaginalis Real-TM”: Real Time Amplifikasyon
PCR-mix-1-FL, 1,2 ml;
PCR-mix-2-FRT, 2 x 0,35 ml;
TaqF Polymerase, 2 x 0,03 ml;
Pos C+, 0,2 ml;
Negative Control C-, 1,2 ml;*
Internal Control IC, 1,0 ml;**
DNA-buffer, 0,5 ml;
110 test için reaktifler içerir
*izolasyon prosedürü esnasında Ekstraksiyon Negatif Kontrolü olarak kullanılmalıdır. **10 µl Internal Kontrol DNA izolasyonu esnasında doğrudan numune/lysis karışımına eklenir ( DNA-Sorb-A REF K-1-1/A protokolüne bakınız).
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
SAĞLANMAYAN GEREKLİ MALZEMELER
Alan 1 : Numune Hazırlama
DNA ekstraksiyon kiti (Modül No.
1) Biyolojik kabin
"eppendorf" tip tüpler için masaüstü mikrosantrifüj
Kuru hava
bloğu, Vorteks
mikser,
Pipetler
Filtreli steril pipet uçları
1,5 ml'lik polipropilen steril tüpler,
Biyolojik tehlikeli atıklar için atık
kabı, buzdolabı, dondurucu
Alan 2: Real Time Amplifikasyon
Real Time Thermal cycler
Reaksiyon Tüpleri
Çalışma İstasyonu
Pipetler (ayarlanabilir)
Filtreli steril pipet uçları
Vorteks mikser
Dondurucu, buzdolabı
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
MUHAFAZA KOŞULLARI
Trichomonas vaginalis Real-TM PCR kitinin tüm bileşenleri (polimeraz (TaqF) ve PCR-mix-2-FRT
hariç) kullanılmadıkları zaman, 2–8 ºC'de muhafaza edilir. Trichomonas vaginalis Real-TM PCR
kitinin tüm bileşenleri , etiketlerinde belirtilen son kullanım tarihlerine kadar stabildir. Reaktiflerin raf
ömrü, aksi belirtilmedikçe ilk kullanım öncesi ve sonrası aynıdır.
PCR-mix-1-FL ışıktan uzak tutulmalıdır.
Polymerase (TaqF) ve PCR-mix-2-FRT, ≤ –16 °C'de muhafaza edilmelidir.
STABİLİTE
Trichomonas vaginalis Real-TM, etiketinde belirtilen son kullanım tarihine kadar stabildir. Ürün
etiketinde basılı kontrol tarihine kadar performansını koruyacaktır . Işık, ısı veya neme maruz
kalma kitin bazı bileşenlerinin raf ömrünü etkileyebilir, bunlardan kaçınılmalıdır. Hassasiyet
azalabileceğinden, reaktiflerin tekrarlanan çözülme ve dondurma işlemlerinden kaçınılmalıdır.
KALİTE KONTROL
Her lot , tutarlı ürün kalitesini sağlamak için; Sacace ISO 13485-Sertifikalı Kalite Yönetim
Sistemine uygun olarak, önceden belirlenmiş özelliklere karşı test edilmektedir.
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
UYARILAR VE ÖNLEMLER
In Vitro Diagnostic Medikal Cihaz
Sadece In Vitro Diagnostic Kullanım için
Kullanıcı her zaman aşağıdakilere dikkat etmelidir:
Lysis Solution guanidine thiocyanate içerir*. Guanidin tiyosiyanat solunduğunda veya
yutulduğunda veya deri ile temas halinde zararlıdır. Asit ile temasında toksik gaz oluşturur.
(Xn; R: 20/21/22-36/37/38; S: 36/37/39).
Aeresol bariyerli steril pipet ucuları kullanın ve her prosedür için yeni pipet ucu kullanın.
Ekstrakte pozitif malzemeleri (numuneler, kontroller ve amplikonlar) diğer reaktiflerden uzak
tutun/mufaza edin ve bunları reaksiyon karışımına ayrı bir alanda ekleyin.
Bütün bileşenleri tahilile başlamadan önce oda sıcaklığında iyice çözün.
Bileşenler çözündüğünde karıştırın ve kısa bir süre santrifüjleyin.
Reaktif ve örnekler ile çalışırken , atılabilir eldiven, laboratuar önlüğü ve göz koruyucu
kullanın. İşlem sonrası ellerinizi iyice yıkayın.
Laboratuar çalışma alanlarında, sigara içmeyin, herhangi birşey yemeyin- içmeyin, kozmetik
uygulamayın veya kontakt lenslere elle dokunmayın. Son kullanım tarihlerinden sonra kitleri
kullanmayın.
Tüm numuneleri ve kullanılmayan reaktifleri ,yerel yönetim kurallarına uygun olarak imha edin.
.
Örnekler potansiyel enfeksiyöz olabilir , işlemleri uygun biyogüvenlik uygulamaları ile bir
güvenlik kabini içerisinde gerçekleştirin.
Dökülen/ saçılan tüm numune veya reaktifleri temizleyin ve %0.5 lik sodyum hipoklorit veya
diğer uygun dezenfektanlarla dezenfekte edin.
Numune veya reaktiflerin deri, göz veya mukoza zarları ile temasından kaçının. Deri, göz veya
mukoza zarları ile temas olması halinde, hemen su ile yıkayın ve acilen tıbbi yardım alın.
Malzeme Güvenlik Bilgi Formları (MSDS) istek üzerine verilebilir.
Bu ürünün kullanımı, DNA amplifikasyonu teknikleri konusunda eğitimli personel ile sınırlı olmalıdır.
Laboratuvar süreci tek yönlü olmalı; Ekstraksiyon Alanında başlamalı ve sonra
Amplifikasyon ve Tespit alanlarına gidilmeli/ yönlenmelidir. Örnekleri, ekipmanları ve
reaktifleri önceki adımın yapıldığı bölgeye/alana geri döndürmeyin.
Bu kitteki bazı bileşenler koruyucu olarak sodyum azid içerir. Reaktif transferi için metal
tüp kullanmayın.
* Sadece Modül No.2
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
ÜRÜN KULLANIM SINIRLARI
Tüm reaktifler sadece in vitro diagnostik kullanılabilir. Bu ürünün kullanımı, DNA amplifikasyonu
teknikleri konusunda eğitimli personel ile sınırlı olmalıdır (UNI EN ISO 18113-2:2012). Kullanım
kılavuzu ile tam uyum, optimum PCR sonuçları için gereklidir. Kutu üzerinde ve tüm bileşenlerin
etiketlerinde yazılı olan son kullanma tarihlerine dikkat edilmelidir. Kiti, son kullanım tarihinden
sonra kullanmayın.
NUMUNE TOPLAMA, MUHAFAZA VE TAŞIMA
Trichomonas vaginalis Real-TM , aşağıdakilerden ekstrakte DNA analizi yapabilir:
selvikal, uteral swablar: Swabı nükleaz içermeyen 1,5 ml'lik tüpe yerleştirin ve 0,2 ml
Transport medium ekleyin. Swabları medium içimde 15-20 sn. çalkalayın.
idrar sedimenti: 10-20 ml ilk idrar steril kap içerisine alınır. 3000 x g 'de 30 dk. santrifüjleyin,
200 µl solüsyon bırakarak süpernatantı dikkatlice ayırın. Sedimenti resüspanse edin.
Süspansiyonu DNA ekstraksiyon için kullanın.
prostatik sıvı , “Eppendorf” tüpte muhafaza edilir.
seminal sıvı: semen sıvılaşana kadar 40 dk. karanlıkta bekletin. DNA ekstraksiyon için 100 µl 'sini kullanın.
Prosesin, numuneler alındıktan hemen sonra gerçekleştirilmesi önerilir. Numuneler 24 saatten
fazla olmamak koşulu ile 2–8 °C ‘de muhafaza edilir ya da–20/80°C dondurulur. Klinik
örneklerin taşınması, etiyolojik ajanların taşınmasına yönelik ülke , federal , eyalet ya da yerel
yönetmeliklere, uymak zorundadır.
DNA İZOLASYON
Herhangi bir ticari RNA / DNA izolasyon kiti, burada belirtilen IVD-CE "NUMUNE TOPLAMA,
MUHAFAZA VE TAŞIMA" paragrafındaki örnek türleri için valide ise, kullanılabilir.
Sacace Biotechnologies aşağıdaki kitleri kullanmanızı önerir:
DNA-Sorb-A (Sacace, REF K-1-1/A);
SaMag STD DNA Extraction kit (Sacace, REF SM007).
Lütfen, DNA ekstraksiyonunu, üreticinin talimatlarına uygun olarak gerçekleştirin. 10
Internal (iç) Kontrol 'ü DNA izolasyon prosedürü esnasında doğrudan numune/lysis
karışımına ekleyin. (Not: Sacace Internal Control tüm ürogenital enfeksiyon Real Time
kitleri için aynıdır.)
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
NUMUNE VE RAKTİF HAZIRLAMA (modül no.2 ile sağlanan reaktifler)
1. Lysis Solution ve Washing Solution (+2-8°C de muhafaza edildikleri için) buz kristalleri yok
olana kadar 60–65°C' ye kadar ısıtılmalıdır. Bir tüp te Ekstraksiyon Negatif Kontrolü için
olmak üzere, gereken miktarda 1,5 ml'lik polipropilen tüpleri hazırlayın.
2. Her tüpe 10 µl Internal Control ve 300 µl Lysis Solution ekleyin.
3. Uygun tüpe 100 µl numunelerden ekleyin.
4. Kontrolleri aşağıdaki gibi hazırlayın :
Cneg etiketli tüpe 100 µl of C– (Neg Control) ekleyin.
5. Bütün tüpleri vorteksleyin ve 5 dk. 65°C'de inkübe edin. 5-7 sn. santrifüjleyin. Eğer numune
tamamen çözünmezse, tüpün maksimum (12000-16000 g.) hızda 5 dk. yeniden
santrifüjlenmesi önerilir. Süpernatantı DNA ektraksiyon için, yeni bir tüpe aktarın.
6. Sorbenti kuvvetlice vorteksleyin ve her tüpe 20 µl ekleyin.
7. 5-7 sn. vorteksleyin ve bütün tüpleri, oda sıcaklığında 3 dk. inkübe edin. Bu adımı tekrarlayın.
8. Bütün tüpleri 30 sn. 5000 g'de santrifüjleyin ve tıkaçlı aerosol bariyer uçlu mikropipet
kullanarak, her tüpten pelleti dağıtmadan, süpernatantı dikkatlice ayırın ve kaldırın. Tüpler
arasında pipet uçlarını değiştirin.
9. Her tüpe 500 µl Washing Solution ekleyin. Çok kuvvetli vorteksleyin ve 30 sn 10000 g'de
santrfifüjleyin. Her bir tüpten süpernatantı ayırın ve kaldırın.
10. 9. adımı tekrarlayın ve bütün tüpleri kapakları açık halde 65°C'de 5-10 dk. inkübe edin.
11. Pelleti, 100 µl DNA-eluent 'te resüspanse edin. 65°C 'de 5 dk. inkübe edin ve periyodik
olarak vorteksleyin.
12. Tüpleri, 12000 g'de 1 dk. inkübe edin.
13. Süpernatant, amplifikasyon için hazır DNA içerir. Eğer amplifikasyon ekstraksiyon ile aynı
gün gerçekleştirilmezse, işlenmiş numuneler 5 günden fazla olmamak koşulu ile 2-8°C'de
muhafaza edilebilir veya –20°/-80°C'de dondurulabilir.
PROTOKOL
Toplam reaksiyon hacmi 25 µl, DNA örnek hacmi ise 10 µl 'dir.
1. Numuneler(N) ve kontroller (N+2) için reaksiyon tüplerini, gereken sayıda hazırlayın.
2. Yeni steril tüpte 10*N µl PCR-mix-1-FRT, 5*N µl PCR-mix-2-FRT ve 0,5*N µl TaqF DNA Polymerase hazırlayın.
Vorteksleyin ve kısaca santrifüjleyin.
3. Her tüpe 15 µl Reaction Mi ve 10 µl ekstrakte DNA ekleyin. Pipetlemeyle karıştırın.
4. Her panel için 2 kontrol hazırlayın:
● NCA (Amplifikasyon Negatif Kontrol) etiketli tüpe , 10 µl DNA-buffer ekleyin;
● C+ (PCR Pozitif Kontrol) etiketli tüpe , 10 µl Positive Control ekleyin;
5. Tüpleri thermalcycler'a yerleştirin.
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
Rotor-tip Enstrümanlar1
Plate- veya modüler tip Enstrümanlar2
Adım Sıcaklık
°С
Süre
Tekrarlar
Sıcaklık °С
Süre
Tekrarlar
1 95 15 min 1 95 15 dk. 1
2
95 5 sn. 5
95 5 sn. 5 60 20 sn. 60 20 sn.
72 15 sn. 72 15 sn.
3
95 5 sn.
40
95 5 sn.
40
60 20 sn floresan sinyal tespiti
60
30 sn. floresan sinyal
tespiti
72 15 sn. 72 15 sn.
Amplifikasyon
1. Enstrümanınızda aşağıdaki gibi bir sıcaklık profili oluşturun:
1 Örneğin; Rotor-Gene™ 3000/6000/Q (Corbett Research, Qiagen)
örneğin,SaCycler-96™ (Sacace), CFX/iQ5™ (BioRad); Mx3005P™ (Agilent), ABI® 7300/7500/StepOne Real Time PCR (Applied Biosystems), SmartCycler® (Cepheid), LineGeneK® (Bioer)
Floresan, 2.Cycling evresinde (60 °C) , FAM/Green ve JOE/Yellow/Hex/Cy3 floresan kanallarda tespit edilir.
Trichomonas vaginalis FAM (Green) kanalda, IC DNA
JOE/Yellow/HEX/Cy3 kanalda tespit edilir.
ENSTRÜMAN AYARLARI Rotor-tip enstrümanlar
Kanal Calibrate/Gain Optimisation…
Eşik Çizgisi Diğer Ayarlar/
Outlier Removal
Slope Correct
FAM/Green 5 FI ila 10 FI 0,1 %5 Açık
JOE/Yellow 4 FI ila 8 FI 0,1 %5 Kapalı
Plate -tip enstrümanlar
Eşik çizgisi, yalnız pozitif örneklerin sinyal birikiminin sigmoid eğrilerini geçmeli ve taban
çizgisini geçmemelidir; aksi takdirde eşik çizgi seviyesi yükseltilmelidir. Eşik çizgisini , floresan
eğrilerinin linear ve negatif numunelerin eğrilerinin geçmediği yerde ayarlayın.
Cycle eşik çizgisi sınır değeri, Ct
Numune
Florofor için kanal
Ct sınır değeri
Rotor-tip enstrümanlar
Plate-tip enstrümanla
r
C+ FAM/Green 33 36
JOE/Yellow/HEX/Cy3 30 33
Klinik numuneler, C- JOE/Yellow/HEX/Cy3 30 33
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
Kontrol
Kontrol Evresi
Ct kanal Fam
Ct kanal Joe
Yorumlama
NCE
DNA izolasyon
NEG
POS
Geçerli sonuç
NCA
Amplifikasyon
NEG
NEG
Geçerli sonuç
C+
Amplifikasyon
POS
POS
Geçerli sonuç
VERİ ANALİZLERİ
Floresan sinyal yoğunluğu iki kanalda tespit edilir:
Trichomonas vaginalis DNA amplifkasyon ürününün siyali, FAM/Green kanalda tespit edilir.
Internal Control amplifikasyon ürününden gelen sinyal, JOE/Yellow/HEX/Cy3 kanalında tespit edilir.
Sonuçların Yorumlanması
Sonuçlar, eşik çizgisi ile floresan eğrinin geçişi (veya geçmeyişi) ile, enstrüman yazılımı
vasıtası ile yorumlanır.
Yorumlama Prensibi
Trichomonas vaginalis DNA, FAM kanalda Ct değeri var ise, numune içinde tespit edilir.
Floresan eğrisi, üstel floresan artış alanında eşik çizgisini geçmelidir.
Ct değeri JOE kanalda 33'ten daha küçükken, Ct değeri FAM kanalda yoksa (floresan eğrisi
eşik çizgisini geçmiyor), numunede Trichomonas vaginalis DNA tespit edilmez.
JOE kanaldaki CT değeri, belirtilen sınır değerden (Ct>33) daha büyük veya yok iken,
numunenin Ct değeri FAM kanalda yoksa, sonuç geçersizdir.
Bu gibi numunelerin PCR analizinin tekrar edilmesi gereklidir. Eğer , sadece Ekstraksiyon Kontrol (Tablo 2)doğruysa ve bunun yanı sıra sonuçlar amplifikasyon Pozitif ve Negatif kontroller için elde edilmişse , analiz sonuçları güvenilir kabul edilir.
Tablo 2. Kontrol Sonuçları
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
KALİTE KONTROL PROSEDÜRÜ
Internal Kontrol (IC) tanımlanmış miktarı,her bir numunenin ekstraksiyon prosesini kontrol etmek
ve olası inhibasyon reaksiyonunu tanımlamak için , her numune ve kontrolün numune hazırlama
prosedürünün başlangıcından itibaren işleme konulur.
Ekstraksiyon Negatif Kontrol (NCE), aplifikasyon negatif kontrol (NCA), pozitif amplifikasyon
kontrol (C+) , numune hazırlama, amplifikasyon ve tespit adımlarının doğru gerçekleştirilip
geçekleştirilmediğini doğrulamak için her çalışmada gereklidir.
Eğer kontroller beklenilen aralıkların dışındaysa ( Kontrol Sonuçları tablosuna bakınız), bu
çalışmadaki numuneler ve kontroller , numune hazırlama adımından itibaren yeniden işlenmelidir.
SPESİFİKASYONLAR
Hassasiyet Trichomonas vaginalis Real-TM PCR kitinin analitik hassasiyeti, aşağıdaki tabloda
belirtilmiştir.
Klinik malzeme DNA ekstraksiyon kiti Analitik hassasiyet, GE/ml*
Urogenital swablar DNA-sorb-A 5 x 102
İdrar DNA-sorb-A 1 x 103
* Belirtilen transport mediumda yer alan klinik numunenin 1 ml başına mikroorganizmanın Genom eşdeğerleri (GE).
Özgüllük Trichomonas vaginalis Real-TM PCR kitinin analitik özgünlüğü, kitinin analitik özgünlüğü, sıkı reaksiyon koşullarıyla birlikte spesifik primerler ve probların seçimiyle sağlanır Primerler ve problar, sekans karşılaştırma analizi ile gen bankalarında yayınlanan tüm sekanslara mümkün olan homolojiler açısından kontrol edilmiştir. İnsan DNA'sının yanı sıra aşağıdaki mikroorganizmaların DNA panelinin de , inceleme esnasında nonspesifik tepkileri yok idi: Gardnerella vaginalis, Lactobacillus spp., Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Candida albicans, Neisseria gonorrhoeae, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma genitalium, Neisseria flava, Neisseria subflava, Neisseria sicca, Neisseria mucosa, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, HSV tip1 ve 2, CMV, ve HPV.
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
SORUN GİDERME
1. Ekstraksiyon Negatif Kontrol için, zayıf ya da olmayan IC (Joe/Hex/Cy3 kanal) sinyali.
PCR inhibe edilmiştir.
Önerilen DNA ekstraksiyon metodunu kullandığınızdan ve üreticinin
talimatlarını izlediğinizden emin olun.
Bütün tüpleri ekstrakte DNA pipetlemeden önce, 2 dk. maksimum
(12000-16000 g) hızda yeniden santrifüjleyin ve süpernatantı dikkatlice
alın. Pelleti dağıtmayın, sorbent reaksiyonu inhibe eder.
Reaktif muhafaza koşulları talimatlara uygun değil.
Muhafaza koşullarını kontrol edin.
Yanlış DNA ekstraksiyonu
DNA ekstraksiyon aşamasndan başlamak üzere analizi tekrarlayın.
PCR koşulları talimatlara uygun değil.
Protokolde belirtilen IC tespit floresan kanalını seçin ve PCR koşullarını
kontrol edin.
IC, reaktif pipetleme esnasında numuneye eklenmemiş.
DNA ekstraksiyon prosedürü esnasında dikkatli olun.
2. Zayıf ya da olmayan Pozitif Kontrol sinyali.
PCR koşulları talimatlara uygun değil.
Manuelde belirtilen floresan kanalını seçin ve aplifikasyon prosedürünü
kontrol edin.
3. Ekstaksiyon Negatif Kontrolü ile Fam (Green) sinyal.
DNA ekstraksiyon prosedürü esnasında kontaminasyon. Tüm sonuçlar geçersizdir.
Bütün yüzeyleri ve enstrümanları sodyum hipoklorid ve etanol ile
dekontamine edin.
Ekstraksiyon prosedürü esnasında sadece filtre pipet uçlarını kullanın.
Tüpler arasında pipet uçlarını değiştirin.
Yeni reaktif setleriyle DNA ekstraksiyonunu tekrarlayın.
4. PCR Negatif Kontrol (DNA-buffer) ile herhangi bir sinyal yok.
PCR hazırlama prosedürü esnasında kontaminasyon. Tüm sonuçlar geçersizdir.
Bütün yüzeyleri ve enstrümanları sodyum hipoklorid ve etanol veya özel
DNA dekontaminasyon reaktifleriyle dekontamine edin.
Pozitif Kontrolü en son pipetleyin.
Yeni reaktif setleriyle PCR hazırlamayı tekrarlayın.
Sacace™ Trichomonas vaginalis Real-TM VER. 21.03.2013
KULLANILAN SEMBOLLERİN ANLAMLARI
Liste Numarası Dikkat!
Lot Numarası <n> testleri için
yeterlilik içerir
in Vitro Diagnostic için
Kullanım Versiyon
..'de muhafaza NCA Amplifikasyon Negatif
Kontrol Amplifikasyon
Üretici NCE Ekstraksiyon Negatif
Kontrol .
Kullanım için talimatlara bakınız C+
Pozitif Kontrol Amplifikasyon
Son Kullanım Tarihi IC Internal (iç) kontrol
* SaCycler™ Sacace Biotechnologiestescilli markasıdır. * CFX™ and iQ5™Bio-Rad Laboratories tescilli markasıdır. * Rotor-Gene™ Qiagen tescilli markasıdır. * MX3005P® Agilent Technologies tescilli markasıdır. * ABI® Applied Biosystems tescilli markasıdır. * LineGeneK® Bioer tescilli markasıdır.
* SmartCycler® Cepheid tescilli markasıdır.
Sacace Biotechnologies Srl via Scalabrini, 44 – 22100 – Como – Italy Tel +390314892927 Fax +390314892926
mail:
[email protected] web: [email protected] web: www.sacace.com