Sản xuất kháng thể đơn dòng
Kháng nguyên
• Kháng nguyên ( antigen) : là những phân tử ( protein,
polysaccharide…) có nguồn gốc từ vi khuẩn, virus….có khả
năng gây bệnh cho vật chủ
• Phải có tính miễn dịch và tính đặc hiệu
• Điều kiện:
– Tính lạ
– Khối lượng phân tử lớn ( thường có khối lượng
phân tử lớn hơn 10000 dalton
– Cấu trúc phân tử phức tạp
Kháng thể
• Là các phân tử immunoglobulin ( bản chất là
glycoprotein) do lympho B cũng như các tương bào
tiết ra để hệ miễn dịch nhận biết và vô hiệu hóa các
tác nhân lạ ( vi khuẩn hoặc virus)
• Có khả năng nhận diện và liên kết đặc hiệu với kháng
nguyên
Cấu trúc
• Trên kháng nguyên có một hoặc nhiều vị trí gắn với một kháng thể gọi là epitope ( antigenic determinants)
• Một kháng thể chỉ nhận diện được
một epitop kháng nguyên duy nhất
Có hai loại kháng thể:
Kháng thể đơn dòng liên kết với một epitope đặc hiệu.
Kháng thể đa dòng là một tập hợp các kháng thể đặc hiệu
với các epitope khác nhau trên cùng một kháng nguyên
Kháng thể đơn dòng
• Các kháng thể giống hệt
nhau,được sản xuất bởi cùng
một dòng tương bào
• Nhận biết một epitope trên
một kháng nguyên
Kỹ thuật lai tạo kháng thể đơn dòng
• Năm 1975, Kohler và Milstein đã phát
triển kỹ thuật cho phép tương bào
được hòa vào các tế bào ung thư
myeloma để tạo ra các tế bào lai và
lớn lên.
• Các tế bào này có khả năng lớn lên
không hạn chế mà vẫn sản xuất ra
kháng thể đặc hiệu gọi là kháng thể
đơn dòng
Quy trình
• Kháng nguyên: tế bào myeloma ( u
tủy)
– là một loại ung thư của các tế
bào huyết tương.
– Bình thường các tế bào huyết
tương mới được sinh ra để thay
thế các tế bào cũ bị già đi theo
một cách có kiểm soát.
Ứng dụng của kháng thể đơn dòng trong NTTS
Ứng dụng trong chẩn đóan và điều trị bệnh ở động vật thủy sản chủ yếu là sử dụng kháng thể để phát hiện protein kháng nguyên của vi-rút, vi khuẩn, ký sinh trùng hay nấm trong mẫu huyết thanh.• Kháng thể đơn dòng kháng nguyên VP28 của virus
WSSV giúp phát hiện nhanh bệnh đốm trắng trên tôm nuôi.
• Kháng thể đơn dòng kháng virus gây bệnh đầu vàng (YHV)