Instrucțiuni de utilizare RAPIDVET H DEA 1.1 Caine 2015

Noua procedură de lucru: Kitul se pastreaza la temperature camerei!

Deoarece in medicina veterinara transfuziile sangvine au cunoscut o crestere remarcabila in ultimii ani, cunoasterea grupelor sangvine este imperios necesara. Este cunoscut faptul ca la o prima transfuzie incompatibila din punct de vedere al grupei sangvine nu apar semne clinice. Anticorpii impotriva antigenelor straine de pe eritrocitele sangelui tranfuzat apar abia in 5-7 zile, timp dupa care o noua transfuzie incompatribila va determina semne clinice de care veterinarul va trebui sa tina cont. Determinarea grupelor sangvine la caini are importanta si pentru realizarea imperecherilor si pentru o mai buna intelegere a problemelor ce pot aparea la pui ( izoeritroliza). O femela cu anticorpi impotriva unei anumite grupe sangvine nu trebuie imperecheata cu un mascul ce poseda acea grupa sangvina pentru a se evita aparitia eritrolizei neonatale la puii, mai ales daca acestia vor consuma colostru. La caini pe suprafata eritrocitelor au fost identificate 8 antigene specifice. Astfel sistemul de grup sangvin pentru caine acceptat la nivel international este DEA (Dog Erythrocyte Antigen) Conform acestui sistem grupele sangvine comune cainilor sunt :DEA1.1, DEA1.2, DEA3, DEA4, DEA5, DEA6, DEA7, DEA8. Principiul testului Testul RapidVet-H (Canine 1.1) se bazeaza pe reactia de aglutinare ce apare atunci cand eritrocite ce au pe suprafata lor antigene din tipul DEA1.1 sunt puse in contact cu un antiser liofilizat specific. Eritrocitele ce au pe suprafata lor antigene din tipul DEA1.1 vor produce aglutinarea, in timp acelea ce nu poseda aceste antigene nu vor aglutina. Aglutinarea se citeste cu ochiul liber. ! Atentie Un procent mic de indivizi prezinta o reactie auto-aglutinare. Daca apare aceasta reactie testul nu va putea fi realizat fara o procedura de spalare celulara anterioara. Realizati transfuziile numai dupa determinarea grupelor de sange a donorilor si transfuzatilor. Determinari ulterioare a grupelor de sange post transfuzional pot fi neconcludente sau arata grupa de sange a donatorului. Kit-ul de testare Rapid Vet-H(Canine 1.1) furnizeaza un card de testare fara reactivi pentru identificarea acestor indivizi. Card-urile testelor de aglutinare contin 3 godeuri: 1)Auto-aglutinare 2) Control pozitiv 3)Testare pacient Fiecare card de testare este ambalat separat si poate fi depozitat la temperatura camerei, nu direct sub actiunea razelor solare la 21 gradeC Diluantul se afla in flaconul cu picurator plastic transparent cu 2 ml solutie de 0.02mol/L PBS la pH 7,4 si trebuie depozitata la 21 grade C. Fiecare fiecarui test ai sunt destinate 2 pipete si 3 baghete pentru a nu se realiza contaminarea incrucisata a godeurilor kitului. Depozitare si valabilitate Card-urile si solutia de diluare depozitate la o temperatura corespunzatoare au o valabilitate de 19 luni de la data fabricatiei. Solutia de diluare depozitata la o temperatura corespunzatoare are o valabilitate de 2 ani de la data fabricatiei. MOD DE LUCRU

1.Prelevati proba sânge recoltat pe EDTA ca anticoagulant minim 0,5 ml.

Testul necesita doar 100 uL(microlitri),sau 2 picaturi de sange integral.

2.Scoateți cardul de testare din punga de plastic sigilata.

3.Scrieti numele câinelui și data testului pe cardul de testare.

4.Puneți cardul de testare pe o suprafață plană.

5.Distribuiti 1 picătură(50 uL) de diluant pe cardul de testare in primul godeul marcat cu "Auto-Agglutination Saline Screen ".

6.Aspirati cu pipeta din kit o1 picătură (50 uL),de sange probă a pacientului si adaugati-o pe cardul de testare in primul godeul

marcat cu "Auto-Agglutination Saline Screen ". Folosind o baghetă omogenizati picatura de diluant si cea de sange timp de 10

secunde.

7.Se repartizează cate o 1 picătură(50 uL), de diluant în fiecare dintre godeurile rămase(Positive Control si Patient Test).

Diluantul este necesar pentru a reconstitui materialul liofilizat impregnat in aceste godeuri pe cardul de testare.

8. Aspirati cu pipeta din kit o 1 picătură(50 uL), de sange probă a pacientului si adaugati-o pe cardul de testare in godeul al doi-

lea (Positive Control ) și o alta picătură în in godeul al trei-lea (Patient Test). Folosind o noua baghetă de fiecare data, pentru

fiecare godeu in parte, se omogenizeaza continutul in ambele godeuri separat cu presiune ușoară timp de aproximativ 10 secunde,

pentru a permite anticorpilor marcati aflati impregnati in carduri sa se disperseze in diluant. Aruncați pipeta și betisoarele în

containere speciale.

9.Cu miscari usoare de inclinare transaxială omogenizati, fara a amesteca

continutul godeurilor cardulului de testare timp de 2 minute.

10.Pozitionati cardul de testare la unghi de 20°grade inclinare pentru a se asigura că sângele in exces se afla la marginea

godeurilor cardulului de testare.

11.Citiți rezultatele și notati pe card unde a avut loc aglutinarea. Pentru varianta on-line accesati saitul producatorului pentru a

vedea color imaginile de mai jos.

12.După uscare introduceti cardul de testare inapoi în punga de plastic și pastrati alaturi de fisa animalului testat timp indelungat.

Notă: Utilizarea pipetei: Se ia pipeta între degete, de partea închisă și bombata, și se apasă cu presiune.Țineți proba într-o poziție verticală și introduceti putin capătul deschis al pipetei in flaconul cu proba de analizat.Reduceti presiunea degetelor, pentru a aspersa proba in interiorul pipetei.Țineți pipeta în poziție verticală direct deasupra godeului în care proba va fi distribuita. Strângeți ușor pipeta, astfel încât sa cada doar o picătură în godeu(50 uL). Pipeta este conceputa pentru distribuirea unei cantități mici de maximum 50 uL in godeu si pentru a retine surplusul de probă aspirata. Utilizați pentru fiecare pipetare si amestec pipette si baghete noi. În nici un caz nu trebuie reutilizate, deoarece se poate realiza contaminarea godeurilor aflate pe cardul de testare contaminare ce duce la rezultate contradictorii. Atenție:Pentru a obține rezultate fiabile este necesar ca procedura sa fie urmată cu atenție.Utilizați o nouă pipetă pentru fiecare probă și o noua bagheta pentru fiecare omogenizare. Reutilizarea baghetelor si pipetelor ar putea provoca contaminarea încrucișată și rezultate nesigure. Stabilitatea componentelor kitului este variabilă. Depozitarea kitul, conform indicațiilor de pe ambalaj. Nu utilizați nici un component după data de expirare. Folosirea kitului expirat poate provoca rezultate eronate. Diluantul este furnizat în 1 flacon cu picurător, pentru a minimiza contaminarea bacteriană, la depunerea diluantului pe card evitati atingerea acestuia in contact direct cu cardul. Nu trebuie utilizati alți diluanți din alte surse.

Rezultate Daca aglutinarea va fi prezenta in godeul “ Auto-Agllutination Saline Screen” va fi greu de precizat un rezultat cert al testului! Daca in godeul de testare al pacientului apar aglutinate mari si nu apare aglutinare in godeul “ Auto-Agllutination Saline Screen” pacientul are grupul sangvin DEA1.1 . Daca in godeul de testare al pacientului nu apare aglutinarea acesta nu are grupul sangvin DEA1.1.Granulatiile fine asemanatoare unei aglutinari ce apar dupa 2 min nu trebuie luate in considerare.Dimensiunile si viteza de aglutinare a eritrocitelor unui pacient tip DEA1.1 pot diferi de ca caz la caz.In cazul in care individul de testat este foarte anemic aglutinarea nu va mai avea aceleasi caractere.

DEA 1.1 negativ(http://agrolabo.it/IT/index.php?page=articolo&pop&ID=299)

DEA 1.1 pozitiv (http://agrolabo.it/IT/index.php?page=articolo&pop&ID=300)

Autoaglutinare ! (http://agrolabo.it/IT/index.php?page=articolo&pop&ID=301)

Cazul necesita un lavaj al globulelor rosii cu ser fiziologic inaintea repetarii testarii de grupa de sange!

Importat si distribuit de: SC Care For Your Family SRL –Bucuresti Pentru comenzi sunati agentul dumneavoastra de vanzari zonal,

sau la telefon: 0723318308, 0722258710, detalii tehnice complete gasiti si pe saitul: www.cyf-medical-distribution.ro

Date proba

Specia: Caine

Proba: Sangue integral

Anticoagulant EDTA

Citirea rezultatului

GODEU CARD Rezultat

Autoagglution Negativ

Control pozitiv Pozitiv

Pacient Negativ

Rezultat final

Pacientul are grupa de sange DEA 1.1 NEGATIV

Date proba

Specia: Caine

Proba: Sangue integral

Anticoagulant EDTA

Citirea rezultatului

GODEU CARD Rezultat

Autoagglution Negativ

Control pozitiv Pozitiv

Pacient Pozitiv

Rezultat final

Pacientul are grupa de sange DEA 1.1 POZITIV