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Facultad de Medicina Escuela de Enfermería

Sede Temuco

Histoembriología

ENFB2006 2012

Introducción a la Histología Técnicas Histológicas

Dra. Paola A. Araneda Reynolds paola.araneda@umayor.cl Histoembriología 08-08-2012 Temuco, Chile

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ESTE POWERPOINT ES

UNA GUÍA PARA EL

ESTUDIO.

EL ESTUDIANTE DEBE

COMPLEMENTAR CON

LECTURA DE BIBLIOGRAFÍA

RECOMENDADA

Comprender e identificar las técnicas de

procesamiento de los tejidos.

Establecer concepto de tejido señalando sus

características y propiedades.

RESULTADOS DE APRENDIZAJES

ESPERADOS

A. CONCEPTUALES

Examinar, identificar e interpretar una

preparación histológica a través del

microscopio óptico común.

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TEMARIO

Definición de Histología

Historia

Técnicas histológicas

Interpretación

Microscopía

HISTOLOGÍA

Estudio en profundidad de la estructura y

función de componentes celulares.

Rama de la anatomía que estudia los

tejidos de animales y plantas haciendo una

descripción de estructura celular, tejidos y

órganos asociada a su función.

Definición

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Padre de la Histología: Marie F. X. Bichat

SXVIII

Publicación de libro 20 tejidos diferentes

Histología acuñado S. XIX (1806)

Historia

Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.

1. Conocimiento de la estructura y función

normal a nivel microscópico de

organización.

2. Comprensión del proceso patológico por

respuesta celular y tisular a las lesiones

relacionadas con procesos patológicos.

3. Entender a los seres vivos en estado de

salud y enfermedad.

Importancia

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Unidades de Medida

Angström (Aº) 1Aº = 10.000.000 mm

Micrómetro (µm) 1 µm = 0.001 mm 1x 10-6 m

Nanómetro (nm) 1 nm = 0.001 µm 1 x 10-9 m

Grupo de células similares, idénticas o

diferentes y sus productos extracelulares que

realizan una función específica o un conjunto

de funciones relacionadas.

HISTÓLOGOS :

4 tipos de tejidos básicos

TEJIDO DEFINICIÓN

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T. Básicos o simples : T. Epitelial

T. Conectivo - T.Adiposo*

T. Muscular

T. Nervioso

Clasificación y características de los Tejidos

Origen de los Tejidos

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Organización de los Tejidos

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TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

OBJETIVO

Preparar los tejidos para estudiarlos

asemejando su estado natural y analizarlos por

medio de microscopio óptico.

Procesamiento de Tejidos en Histología

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ubicación del tejido – identificación de muestra

rápida y con destreza

instrumentación adecuada

colocar en fijador

10 hrs

1. Obtención de la Muestra

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Detener la autólisis postmortem

Conservación

Endurecimiento de tejidos

Intensificar la tinción

Reducir la presencia de agua en tejidos

Estabilizar componentes celulares

Propiedades antisépticas

2. Fijación

OBJETIVO

1. FIJADORES COAGULANTES

Generan cambios estructurales profundos

ej : metanol, etanol

2. FIJADORES ADITIVOS

•Formalina 10%

•Fijador de Bouin

Tipos de Fijadores

Tiempo necesario para fijación ápróx. 24 hrs

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OBJETIVO

Eliminación total del agua desde el tejido.

Baño gradual en alcohol

Diferentes grados de manera ascendente

Hasta llegar al 100%.

ej: alcohol etílico, acetona

Tiempo 8 hrs

3. Deshidratación

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OBJETIVO

Eliminar el alcohol de los tejidos porque no

es compatible con parafina.

Baño gradual en xilol

ej: xilol, benzol, cloroformo, tolueno

1:1, 1:2, 2:2

Tiempo 4 hrs

4. Aclaración

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OBJETIVO

Impregnar los tejidos con parafina sustituyendo

al xilol para luego proceder a la inclusión.

Parafina purificada a 51–53ºC en moldes

56–58ºC

Tiempo 6 hrs

Autotécnico : máquina automática de 12 envases

Reloj - brazo

5. Impregnación

Autotécnico

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OBJETIVO

Colocar el tejido en moldes de parafina.

ej: Parafina purificada, paraplast

56–58ºC

• corte en forma pirámide truncada

6. Inclusión

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OBJETIVO

Obtener fragmentos delgados de tejidos

Se realiza con bloque en frío

corte en forma pirámide truncada

Micrótomo : cintas finas 5 – 7 µm

Baño de agua 45º C

7. Corte

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Criostato

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OBJETIVO

Diferenciar componentes celulares resaltando

sus cualidades.

OJO : Los colorantes son sales solubles en agua.

Pasos:

Agentes desparafinantes (xilol I y Xilol II)

Hidratación (100% - 70%)

Agua

Tiempo 40 min

8. Tinción

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OBJETIVO

Adhesión del tejido en el portaobjeto.

ej:

• bálsamo de Canadá

• albúmina de Mayer + timol

• Entellán®

• Estufa secado 20 minutos

9. Montaje

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http://www.youtube.com/watch?v=OavP

Z6hx5oA&feature=related

http://youtu.be/KyO3TT2NaKk

http://youtu.be/EMXpQzwOc_Q

TINCIONES

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1. COLORANTES BÁSICOS

Componente celular ácidos básicos

BASOFILOS

2. COLORANTES ÁCIDOS

Componente celular básicos ácidos

ACIDÓFILOS

“ Neutralización”

Tipos de Colorantes

Ejemplo

Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.

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a) TINCIÓN DE HEMATOXILINA-EOSINA

USO : diferenciar elementos celulares

H : color azul o púrpura a componentes

ácidos de células

ej: cromatina, secreciones

E : color rosa pálido a rojo a componentes

básicos de células

ej : citoplasma.

Tinciones de uso frecuente

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b) TINCIÓN DE WRIGHT-GIEMSA; MG; G

USO : diferenciar células sanguíneas

rosa : eritrocitos, gránulos de eosinófilos

púrpura : núcleos de leucocitos, gránulos

basófilos.

azul : citoplasma de monocitos y linfocitos.

Wittwer, F. UACH.

Wittwer, F. UACH.

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c) TINCIÓN DE ORCEÍNA

USO : diferenciar fibras elásticas

marrón rojizo : fibras elásticas

Sobotta, J. 1999. Histología.

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Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.

d) TINCIÓN TRICRÓMICA DE MALLORY

USO : diferenciar elementos del tejido conectivo

azul oscuro : fibras de colágeno

rojo : fibras musculares, glias

naranja : fibras de elastina

www.iqb.es

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e) TINCIÓN DE VAN GIESON

USO : diferenciar fibras de colágeno

rojo : fibras de colágeno

Sobotta, J. 1999. Histología.

Artefactos

Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.

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Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.

Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.

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Técnicas Avanzadas

1. HISTOQUÍMICA

2. INMUNOCITOQUÍMICA

3. AUTORRADIOGRAFÍA

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Importancia

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GRACIAS POR SU ATENCIÓN!!

CONSULTAS?

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