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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA NOMBRE: Alexander Zambrano G. CURSO: Quinto Año. PARALELO: “B” DOCENTE: Dr. Carlos García. GRUPO: Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 9 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 17 de junio del 2014
Trimestre: Primero
Práctica # 2
Título de la práctica:
INTOXICACION POR FORMALDEHIDO.
Animal de Experimentación: Cobayo. Vía de Administración: Vía Parenteral. Toxico: Formaldehido Tipo de muestra: Inyectable Tiempo de Muerte: 07:58 Am SINTOMAS:
Inyectado: 07:57
Falta de coordinación
Convulsión
Secreción ocular
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OBJETIVO DE LA PRÁCTICA:
1) Determinar la Toxicidad del Cianuro en el Cobayo.
2) Determinar los Síntomas que presentan el Cobayo después de la administración
del Cianuro.
3) Realizar las Reacciones de Identificación.
MATERIALES
Bata sanitaria
Guantes.
Mascarilla.
Gorro.
Zapatones
Tubos de ensayo.
Vaso de precipitación.
Bisturí.
Herramientas de disección
SUSTANCIAS:
Agua destilada
Formaldehido
Permanganato de potasio
Ácido sulfúrico puro
Sol. saturada de ácido oxálico
Reactivo de Schiff
Cloruro de fenilhidracina al 4%
Nitroprusiato de sodio al 2,5%
Sol. de hidróxido de sodio
Ácido clorhídrico
Cloruro de fenilhidracina
Ferricianuro de potasio
Hidróxido de potasio al 12%
Ácido cromotrópico
Leche
Cloruro férrico
Diluyente
PROCEDIMIENTO:
1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo.
2. Pesar el cobayo
3. Tomar la cantidad del toxico a inyectar en una jeringuilla.
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4. Administrar el toxico por vía peritoneal.
5. Colocar al cobayo en la campana.
6. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.
7. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir el cobayo.
8. Colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso
de precipitación).
9. Añadir la solución de ácido tartárico (25 ml) a las vísceras, con la finalidad de acidular.
10. Luego de este tiempo se filtra, y se destila.
11. El residuo de la destilación, después que se ha eliminado por completo el
formaldehido, se recoge en un Erlenmeyer, en el cual se practican las diferentes
reacciones de reconocimiento.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
1. Reacción de Schiff.- A una pequeña porción de la muestra, se añade 1 ml de
permanganato de potasio al 1%, después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido
sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y se agregan algunas gotas de solución
saturada de ácido oxálico (hasta que se decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color
madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de
ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1 ml de fushina bisulfatada (Reactivo de
Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso positivo.
2. Reacción de Rimini.- A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4%, 4 gotas de solución de Nitroprusiato de sodio al 2.5% recién
preparado y 1 ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul
intensa.
3. Con la fenilhidracina.- En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una
pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenilhidracina, 2-4
gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5-10% y algunas gotas de hidróxido de
potasio al 12%, se obtiene una coloración rojo grosella.
4. Con el Ácido Cromotrópico.- Con este acido en un medio fuertemente acidificado con
ácido sulfúrico, el formaldehído produce una coloración roja después de calentarla
ligeramente.
5. Reacción de Hehner.- Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche,
se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de
cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500 ml de ácido sulfúrico); en caso
positivo, en la zona de contacto produce un color violeta o azul violeta.
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Gráficos:
Inyectar el toxico al cobayo
Abrir el cobayo y retirar visceras
Cobayo 1. Tomar 5
ml de toxico 2. Inyectar
intraperitoneal 3. Observar
efectos
Cobayo
muerto
1. Cortar y
abrir 2. Retirar vísceras
3. Picar vísceras
3. Colocar en el balón 3. Destilar
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Pruebas de reconocimiento
Reacción de la Schiff
Reaccion de Rimini
1. Tomar 1 ml de destilado
2. Añadir 1ml de
permanganato
3. adicionar unas gotas de
H2SO4
4. Agregar unas gotas de
ácido oxálico
1. Tomar 1 ml de destilado
2. Agregar 10gts de
cloruro de
fenilhidracina
3. Añadir 4 gotas de
Nitroprusiato
de sodio
5. Decolorar con ácido
sulfúrico
4. Añadir 1 ml de reactivo de
Schiff
4. Añadir 1 ml de hidróxido
de sodio
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Reccion con la Fenilhidracina
Reaccion con Acido Cromotropico
Reaccion de Hehner
1. Tomar 1 ml de destilado
2. Agregar cloruro de
fenilhidracina
3. Añadir 2-4gts de ferricianuro
de potasio
1. Acidular con Ácido
Cromotrópico
3. Añadir ácido
sulfúrico
2. Colocar
muestra
3. Añadir algunas gotas
de hidróxido de
potasio
4. Calentar
1. Tomar 1 ml
de destilado
2. Añadir unos
ml de leche
2. Agregar 5 gotas de
cloruro férrico
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OBSERVAR CADA UNA DE LAS REACCIONES
Resultados:
Sintomas:
Falta de coordinacion
Convulsiones
Ojos llorosos
Muerte
Muerte del animal: al minuto de su administracion
Se inyecto: 07:57
Murio: 07:58
Reacciones de reconocimiento:
Reacción de Schiff
MUESTRA 1
VISCERAS
MUESTRA 2
DILUYENTE
POSITIVO NO CARACTERISTICO
NEGATIVO
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Reaccion de Rimini
Reccion con la Fenilhidracina
Reaccion con el Acido Cromotropico
MUESTRA 1
VISCERAS MUESTRA 2
DILUYENTE
NEGATIVO NEGATIVO
MUESTRA 1
VISCERAS
MUESTRA 2
DILUYENTE
POSITIVO NO
CARACTERISTICO POSITIVO
CARACTERISTICO
MUESTRA 1
VISCERAS
MUESTRA 2
DILUYENTE
POSITIVO
CARACTERISTICO
POSITIVO
CARACTERISTICO
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Reaccion de Hehner
OBSERVACIONES:
1. Afeitar bien antes el área donde se va a colocar la inyección.
2. Se pudo observar que el formaldehido es más potente que el cianuro.
RECOMENDACIONES:
1. Tener presente las reglas de bioseguridad ya que se está trabajando con
sustancias muy toxicas para el organismo
2. Evitar pérdidas de muestra al momento de extraer las viseras
3. Administrar correctamente la cantidad de formaldehido al cobayo.
CONCLUCION:
Concluimos esta práctica determinando que la intoxicación dentro del animal de experimentación (COBAYO) fue más potente que la que sufrió con el cianuro. PREGUNTAS:
1. ¿COMO ENTRA Y SALE EL FORMOALDEHIDO DEL CUERPO?
El formaldehído puede entrar a su cuerpo al usted respirarlo, ingerirlo o cuando entra en contacto con su piel. El formaldehído es absorbido rápidamente a través de la nariz y de la parte superior de las vías respiratorias. El formaldehído también se absorbe rápidamente cuando se ingiere. En cambio, solamente cantidades muy pequeñas se absorben a través de la piel.
Una vez dentro del cuerpo, el formaldehído es degradado rápidamente. Casi todos los tejidos del cuerpo tienen la capacidad para degradar formaldehído. Generalmente es convertido a una sustancia no tóxica llamada formato, que se excreta en la orina. El formaldehído también
MUESTRA 1
VISCERAS
MUESTRA 2
DILUYENTE
NEGATIVO POSITIVO NO
CARACTERISTICO
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puede ser convertido a dióxido de carbono, el cual se elimina en el aliento. También puede ser degradado para que el cuerpo lo use para fabricar moléculas más grandes que necesitan los tejidos, o puede ligarse al ácido desoxirribonucleico (ADN) o a proteínas en el cuerpo. El formaldehído no se almacena en la grasa.
2. ¿QUE ES EL FORMOALDEHIDO?
El formaldehído es un gas incoloro, inflamable a temperatura ambiente. Tiene un olor penetrante característico y en niveles altos puede producir una sensación de ardor en los ojos, la nariz y los pulmones. El formaldehído se conoce también como metanal, óxido de metileno, oximetileno, aldehído metílico y oxometano. El formaldehído puede reaccionar con muchas sustancias químicas, y a temperaturas muy altas se degradará a metanol (alcohol de madera) y monóxido de carbono.
Nuestros cuerpos producen cantidades pequeñas de formaldehído en forma natural como parte del metabolismo diario normal; estas cantidades pequeñas no son perjudiciales. También se puede encontrar formaldehído en el aire que respiramos en el hogar y el trabajo, en los alimentos que comemos y en algunos productos que usamos en la piel. Una fuente importante de formaldehído que respiramos diariamente se encuentra en el smog en la capa inferior de la atmósfera. El escape de automóviles con convertidores catalíticos o de automóviles que usan gasolina oxigenada también contiene formaldehído. En el hogar, el formaldehído es producido por cigarrillos y otros productos de tabaco, estufas de gas y chimeneas abiertas al aire. El formaldehído también se usa como preservativo en algunos alimentos tales como algunos quesos italianos, alimentos desecados y pescados. El formaldehído se encuentra en muchos productos que se usan diariamente en el hogar, por ejemplo, antisépticos, medicamentos, cosméticos, líquidos para lavar platos, suavizadores de telas, artículos para el cuidado de zapatos, limpiadores de alfombras, pegamentos y adhesivos, barnices, papel, plásticos y en algunos productos de madera. Algunas personas están expuestas a niveles altos de formaldehído si viven en una casa móvil nueva, ya que los productos de madera que se usan en este tipo de casas emiten formaldehído.
3. CONSULTAR TODO SOBRE DOSIS LETAL DEL FORNOALDEHIDO.
La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina) para seres humanos (DL50) se
encuentra entre 500 y 5000 mg/kg, que representa una cantidad total de entre 35 y 350 g para
una persona de 70 kg de peso. . En ratas y conejillos de indias las DL50 son similares que en
caso de humanos, siendo éstas de 800 y 260 mg/kg de peso para cada especie
respectivamente
Glosario:
Ácido Cromotrópico: es un compuesto orgánico de fórmula (HO) 2 C 10 H 4 (SO3H) 2, un derivado
de naftaleno disulfonado y diidroxilado , y por lo tanto también una naftalendiol , en este caso,
diidroxinaftaleno 1,8 - o 1,8-naftalendiol.
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Se puede utilizar como un reactivo para la determinación cuantitativa de la herbicida sistémico
ácido 2,4-diclorofenoxiacético .
Estratificación: La estratificación, es una herramienta estadística del control de calidad que es
aplicable a cualquiera de las restantes herramientas de Ishikawa y que, al mismo tiempo, tiene
aplicaciones directas.
Estratificar no es más que dividir el conjunto de los datos disponibles en subconjuntos que, en
principio, pueden ser más homogéneos, a cada subconjunto se le denomina estrato.
Trazas: Es un elemento presente en una muestra que posee una media de concentración
menor de 100 partes por millón, realizando la medición en un contador atómico, o menor de
100 microgramos por gramo.
Umbral: Es la cantidad mínima de señal que ha de estar presente para ser registrada por un
sistema. Por ejemplo, la mínima cantidad de luz que puede detectar el ojo humano en la
oscuridad. El umbral es la base de la exploración psicofísica de las sensibilidades (táctil,
olfatoria, visual o auditiva). Sensibilidad = 1/Umbral. Para la determinación práctica del umbral
se considera un 50% de probabilidades. Es decir, umbral es la menor cantidad de estímulo que
tiene un 50% de probabilidades de ser detectado.
El punto en que un estímulo ocasiona una transmisión de un impulso nervioso, se denomina
umbral. El estímulo debe alcanzar cierta velocidad para ocasionar el umbral o en otras
palabras, una mínima reacción, haciendo necesario el impulso nervioso. Si la velocidad no es
alcanzada, no se efectúa el impulso nervioso. Esta última explicación se conoce como la ley del
todo o nada. Un umbral también es la parte inferior o escalón que hay en la puerta o entrada
de una casa.
Anexos:
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EL FORMALDEHIDO
El formaldehido es un gas incoloro de olor penetrante que se utiliza mucho en la fabricación de
materiales para la construcción y en la elaboración de productos para el hogar, principalmente
resinas adhesivas para tableros de madera aglomerada.
Existen dos tipos de resinas de formaldehido: las de urea formaldehido y las de fenol
formaldehido. Los productos elaborados con las primeras liberan formaldehido, mientras que
los fenoles de emisión de este por parte de las resinas de fenol-formaldehido son, por lo
general menores.
¿Dónde se lo encuentra?
El formaldehido es una sustancia muy utilizada en la elaboración de productos químicos,
materiales para la construcción y productos para el hogar. Tambien se lo usa para elaborar
colas, productos para el tratamiento de la madera, preservantes, telas que no necesitan
planchado, papel de revestimiento y ciertos materiales aislantes. Los materiales para la
construcción elaborados con resinas de formaldehido liberan emanaciones de este gas. Entre
estos materiales podemos mencionar la madera aglomerada que se utiliza en contrapisos o
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estanterías, la fibra de madera prensada usada en armarios y mobiliario, la madera terciada de
tableros y la espuma de urea-formaldehido de paneles aislantes. Algunos de los materiales que
contienen formaldehido ya no se utilizan o han sido reformulados para reducir el contenido del
mismo.
La combustión incompleta, el humo de cigarrillo, la quema de madera, el kerosén y el gas
natural tambien son fuentes de emisión de formaldehido.
Efectos sobre la salud
El formaldehído normalmente se encuentra en najas concentraciones, en general menos de
0,06 ppm, tanto al aire libre como en lugares cerrados. En concentraciones de 0,1 ppm o más,
puede producir trastornos agudos, tales como ojos llorosos, náuseas, accesos de tos, opresión
en el pecho, jadeos, sarpullido, sensación de quemazón en los ojos, nariz y garganta y otros
efectos irritantes.
La sensibilidad al formaldehído es muy variable. Mientras ciertas personas muestran una alta
sensibilidad a él, otras, a un mismo grado de exposición, no presentan ningún tipo de reacción.
Las personas sensibles al formaldehído pueden experimentar síntomas a niveles inferiores a
0,1 ppm. La Organización Mundial de la Salud recomienda que los niveles de concentración no
sean mayores de 0,05 ppm.
Los resfríos, la gripe y las alergias pueden producir síntomas similares a algunos de los
causados por exposición al formaldehido.
El formaldehido ha demostrado ser cancerígeno en animales de laboratorio y tambien puede
serlo en el hombre. No se conoce el umbral por debajo del cual no existe riesgo de contraer
cáncer. Dicho riesgo depende de la concentración y del tiempo de exposición.
¿Cuáles son las soluciones posibles?
Se puede reducir la exposición al formaldehido siguiendo las siguientes recomendaciones:
a. Compre solamente productos de madera aglomerada cuya etiqueta indique un bajo
nivel de emanaciones o bien aquellos de fenol-formaldehido, tales como tableros de
partículas orientadas o de madera terciada blanca.
b. Incremente el nivel de ventilación en su casa cuando lleve productos que constituyan
fuentes de emanación de formaldehido.
c. Utilice mobiliario de otros materiales, como por ejemplo de metal y madera maciza.
d. Evite utilizar aislamiento de espuma de urea-formaldehido.
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e. Recubra la superficie de los muebles, armarios y estantes de madera aglomerada con
laminados o selladores a base de agua.
f. Lave las telas que no necesitan planchado antes de usarlas.
g. Asegúrese de que los artefactos de combustión tengan la puerta a punto adecuada
h. Evite fumar en lugares cerrados.
i. Mantenga una temperatura ambiente moderada y un bajo nivel de humedad relativa
(30 a 50 por ciento).
¿Cómo pueden medirse los niveles de formaldehído?
En aquellos casos en los cuales la precisión de la medición es importante, la misma solo deberá
ser efectuada por expertos, ya que tanto la obtención de datos exactos cuanto la
interpretación de los resultados son tareas difíciles. Existen aparatos con los que uno mismo
pueda realizar la medición.
Sin embargo, los resultados deben interpretarse con mucho cuidado, puesto que los mismos
pueden verse afectado por las condiciones climáticas, el nivel de ventilación y otros factores. Si
va a utilizar uno de dichos aparatos de medición, siga bien las instrucciones de uso.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
a. Reconocimiento en la atmosfera.
Esta investigación comprende esencialmente dos fases.
1. Captación por paso del aire a dos borboteadores conteniendo agua destilada
montados en serie.
2. Valoración propiamente dicha por medio de una reacción coloreada como la del ácido
cromotrópico en medio ácido sulfúrico.
b. Reconocimientos en medios biológicos.
Luego de haber destilado la muestra en las circunstancias anteriormente descritas, se deben
realizar las reacciones con suma rapidez a fin de evitar que el toxico se combine con otras
sustancias orgánicas, pues de no hacerse asi, sería difícil encontrar trazas de él.
1. Reacción de Schiff.- A una pequeña porción de la muestra, se añade 1 ml de
permanganato de potasio al 1%, después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido
sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y se agregan algunas gotas de solución
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saturada de ácido oxálico (hasta que se decolore la mezcla); la mezcla adquiere un
color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas
gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1 ml de fushina bisulfatada
(Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso positivo.
2. Reacción de Rimini.- A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4%, 4 gotas de solución de Nitroprusiato de sodio al 2.5% recién
preparado y 1 ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul
intensa.
3. Con la fenilhidracina.- En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a
una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenilhidracina,
2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5-10% y algunas gotas de hidróxido
de potasio al 12%, se obtiene una coloración rojo grosella.
4. Reacción de Marquis.- Se toma 1 ml de destilado y se agregan 5 ml de ácido sulfúrico
concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0,2 gr de cloruro de
morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene en seguida o después de
algún tiempo un color violeta.
5. Con el Ácido Cromotrópico.- Con este acido en un medio fuertemente acidificado con
ácido sulfúrico, el formaldehído produce una coloración roja después de calentarla
ligeramente.
6. Reacción de Hehner.- Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche,
se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de
cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500 ml de ácido sulfúrico); en caso
positivo, en la zona de contacto produce un color violeta o azul violeta.
Bibliografía:
FORMALDEHIDO. (en línea). Consultado el: 15/06/2014. Disponible en:
http://www.minambiente.gov.co/documentos/Guia15.pdf
AGENCIA PARA SUSTANCIAS TOXICAS Y EL REGISTRO DE NFERMEDADES.
Formaldehido. (en línea). Consultado el: 15/06/2014. Disponible en:
http://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs111.html
Firma de responsabilidad:
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