Citogenetica I

By NA

Citogenetica I

La citogenetica e` lo studio dei fenomeni genetici attraverso l’analisi citologica dei cromosomi al microscopio. Ferguson-Smith

By NA

1-3 gruppo A 4-5 gruppo B

X-6-12 gruppo C

13-15 gruppo D 16-18 gruppo E

19-20 gruppo F Y-21-22 gruppo G

Cariotipi a confronto

By NA

G-bande

By NA

Selezione delle metafasi

Ottimama…..

By NA

Selezione delle metafasi

Puo’essere anche cosi’...Cromosomi non ben riconoscibili, difficili anche dacontare.Scartare! (potendo)

By NA

.. O cosi’

Selezione delle metafasi

Troppo contrattipero’ si puo’ usareper contarli.Scartare! (potendo)

By NA

Selezione delle metafasi

Sufficiente Si possono contarePuo’ essere utile peranalizzare i cromosominon sovrapposti

By NA

Discreta Si possono contare, e anchese ci sono alcunesovrapposizioni,si possono analizzare

Selezione delle metafasi

By NA

Selezione delle metafasi Buona

Si possono contare, e anchese ci sono alcunesovrapposizioni,la morfologia deicromosomi e’buona

By NA

1. SI CONTANO I CROMOSOMI : IMPORTANTE PER SOSPETTARE LA PRESENZA DI ALTERAZIONI NEL NUMERO CROMOSOMICO

2. SI APPAIANO GLI OMOLOGHI PER SIMILARITA’

3. SI METTONO IN ORDINE SECONDO LA CONVENZIONE

Come si fa il cariotipo?

By NA

10

1611

9

46

Fare il cariotipo

By NA

CARIOTIPO IN QM (indicare il bandeggio)

Cariotipo ordinato

By NA

Diagramma

By NA

Diagramma

By NA

46,XX - cariotipo normale Femminile

46,XY - cariotipo normale Maschile

Questo modo di scrivere ci da’ due informazioni:- numero totale dei cromosomi (46)- sesso dell’organismo

47,XY,+21Maschio con 47 cromosomi (invece di 46) ed un cromosoma 21 in piu’ (sindrome di Down)

46,XX,del(14)(q23) del=delezione

46,XY,dup(14)(q22q25) dup= duplicazione

46,XX,r(7)(p22q36) r=ring (cromosoma ad anello)

Terminologia

By NA

FISH

By NA

doppia elicadi DNA

A T C G G T A T C C T AT A G G C A T A G G A T

osservazionedel vetrino

A T C G G T A T C C T A

T A G G C A T A G G A T

denaturazione

cromosomasul vetrino

sintesi di una sonda complementare marcata con un fluorocromo

ibridazione della sonda suicromosomi denaturati sul vetrino

AT C G G

TAT C C T A

A T C G G T A T C C T AT A G G C A T A G G A TTT A GG C A T A G G A

FISH

A T C G G T A T C C T AT A GG C A T A G G A T

A T C G G T A T C C T A

T A GG C A T A G G A T

denaturazione

By NA

Principio della fluorescenza

By NA

filtro di emissione

specchio dicroico

filtro

di e

ccitazio

ne

obiettivo/condensatore

fotografiaCCD camera

Lampada a vaporidi mercurio

Elaborazione alcomputer

FISH : microscopio a fluorescenza

Osservazioneal microscopio

By NA

Cromosomi 1. denaturati2. colorati con DAPI

FISH: metafase in DAPI

By NA

Sonde puntiformifluorescenti

FISH: segnali

By NA

Sovrapposizione dell’immagine della sonda sull’immagine del DAPI

FISH: merge

By NA

SONDE PER FISH

By NA

DAPIDAPI

SONDASONDA

MERGEMERGE

WCP

By NA

DAPIDAPI

SONDASONDA

MERGEMERGE

PCP

By NA

2 SONDE PUNTIFORMI 2 SONDE PUNTIFORMI 3 SONDE PUNTIFORMI 3 SONDE PUNTIFORMI

COIBRIDAZIONI

By NA

Duplicazione braccio corto del cromosoma Y

crom Ynormale

Yp duplicato

Alfoide crom Y

SRY

46X -Y + mar(dupYp)

Individuo di sesso maschile azospermico

By NA

Inversione pericentrica:4(inv)

liquido amniotico

4 inv(4)

By NA

Traslocazione 1/15 in diagnosi prenatale

Prelievo di villi corialiSangue periferico madre

1 1/15 15/1 1546,XY,der(1)t(1;15)(1pter,15q23)matishder(1)t(1p;15q)(p36.33;q24.2)mat(pcp1p36;pcp15q)

By NA

Traslocazione(3/22)

3 3/22 22/3 22

By NA

Traslocazione 5/11

Liquido amnioticoSangue periferico padre

By NA

Traslocazione 5/11

5 5/11 11/5 11

By NA

insinv6/7

6 6del 7/6 y

By NA

isocromosoma 21

21 isodic21