View
7
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
Emésztőszervi betegségek(PEC/PEMS) járványtani és virológiai
vizsgálata pulykaállományokban
Rusvai Miklós, Demeter Zoltán, Coman Alina, Palade Alina
Emésztőszervi betegségek (entericdiseases, ED) pulykaállományokban
• PEC (Poult enteritis complex)– hasmenés, levertség,
alomevés, immunszuppresszió és megemelkedettmortalitás
– nagy gazdasági károk
• PEMS (Poultenteritis and mortality syndrome)– hasonló klinikai
tünetek és kórbonctani elváltozások
– magas (akár 100%)morbiditás ésmortalitás
A PEC/PEMS kórképben esetleg szerepet játszó kórokozók
• Pulyka astrovírus– Pulyka astrovírus 1 (TAstV-1)– Pulyka astrovírus 2 (TAstV-2)– Avian nephritis vírus (ANV)?
• Pulyka coronavírus (TCV)• Avian reovírus (ARV)• Avian rotavírus (AvRV)• Vérzéses bélgyulladás vírus (HEV)• Pulyka parvovírus (TuPV)• Enteropathogén E. coli törzsek
Pulyka astrovírus (TAstV)• Astroviridae• csillag alakú, nem burkos, 28-30 nm• egyszálú, pozitív RNs
• Avian nephritis vírus (ANV)– vesekárosodás napos
csirkékben– ragályos – eltérő pathogenitás– pulykaállományokban is
kimutatták
TCV, ARV, AvRV, HEV• Pulyka coronavírus (TCV)
– Coronaviridae– kerekded vagy pleomorf, burkos, 120 nm – ss RNs
• Avian reovírus (ARV)– Reoviridae– ikozahaedrális, 60-70 nm– ds RNs
• Avian rotavírus (AvRV)– a reovírusokhoz hasonló morfológia– a kapszidban küllőszerű rendeződés („rota”)
• Vérzéses bélgyulladás vírusa (HEV)– Adenoviridae– ikozahaedrális, 70-90 nm– ds DNs
Pulyka parvovírus (TuPV)
• újabban: az USA számos államában előfordul csirke- és pulyka-állományokban(Zsák et al., 2009)
• teljes genomszekvencia(Day and Zsák, 2010)
• Előfordul magyarországi csirke és pulykaállományok ban is(Palade et al., 2011)
• parvovírus-szerű részecskék 10 napos hasmenéses csirkék bélhomogenizátumában (Kisary et al., 1984)
• naposcsirkék kísérleti fertőzése tisztított vírussal –klinikai tünetekben megnyilvánuló RSS (Kisary et al., 1985)
• vírusazonosítás molekuláris biológiai módszerekkel: Parvoviridae (Kisary et al., 1985)
TuPV
Day and Zsák, 2010
PEC/PEMS: tünetek
Szétnövés, tollasodási zavar, fejlődésben való visszamaradás (4-5 hetes pulykapipék)
PEC/PEMS: tünetek
Hasmenéstől összetapadt tollak a cloaca körül
PEC/PEMS: kórbonctani elváltozások
Kitágult vérerek, emésztetlen, nyálkás tartalommal telt vékonybelek, enteritis
PEC/PEMS: kórbonctani elváltozások
Vékonybélgyulladás, gázos tartalommal telt vakbelek (dysbacteriosis jele)
Kórszövettan
A bélbolyhok megrövidülése és összeolvadása, a mucosaenyhe denudatioja, enteritis
Kórszövettan
A bélbolyhok megrövidülése és összeolvadása, a mucosasúlyosfokú denudatioja, enteritis
Kórszövettan
Gyulladásos sejtes beszűrődés: histiocyták, lymphocytákés granulocyták
Kórszövettan
Gyulladásos sejtes beszűrődés: histiocyták, lymphocytákés néhány granulocyta
Kórszövettan
A Lieberkühn crypták kitágulása
Kórszövettan
Kitágult Lieberkühn crypták, ellaposodott epithelium,desquamalódott sejtek
Kórszövettan
A bursa Fabricii enyhe lymphoid depletioja
Regeneratio jelei avékonybélben
jejunum, H&E
Gócos, multifocalispancreatitis pancreas, H&E
Pulykaállományok
• 18 állomány 2008 – kék
• 31 állomány 2009 – narancssárga
6 -43 napos állatok, klinikaiPEC/PEMS, megemelkedettmortalitás
Primerek Targeted virus Targeted gene Primer name and sequence (5’-3’) Size (bp) Annealing
ChPV / TuPV NS1 PVF1: TTCTAATAACGATATCACTCAAGTTTCPVR1: TTTGCGCTTGCGGTGAAGTCTGGCTCG 561 55
ANV GP1 ANV-ORF1-f: AGATACGCTTGCTCGTCTTGANV-ORF1-r: CCTCTAACCGGCGATATTCT 608 53
TAstVs ORF-1b TAPG-L1:TGG TGG TGY TTY CTC AAR ATAPG-R1:GYC KGT CAT CMC CRT ARC A 601 55
TAstV-2 capsid ORF 2 MKCAP8F:TCA TCA TCC TCT CAC ACT GGMKCAP19R:AGC AGC AGT AGG TGG CAG TG 802 53
TCV nucleocapsid TCV-NF:GGT AGC GGT GTT CCT GATCV-NR:CCC TCC TTA CCT TTA GT 598 53
HEV CP1 HEV-CP1-F: GGTTCGTGAACATTGGAGACHEV-CP1-R: CAGGCACAACAGGTGTAACT 155 48
ARV S4 S4-F13:GTG CGT GTT GGA GTT TCC CGS4-R1133:TAC GCC ATC CTA GCT GGA 1120 53
AvRV NSP4 NSP4-F30:GTG CGG AAA GAT GGA GAA CNSP4-R660:GTT GGG GTA CCA GGG ATT AA 630 55
PCR és RT-PCR eredmények
Year Farm/House TuPV ARV AvRV TastV-2 HEV TCV ANV TAstVs
B-369/4 + - - - - + - -
B-284 + - - - - - - -
B-486/2 - - + - - - - +
B-369/9 + - - - - - - +
B-23/1 + - - - - + - -
B-281 + - - - - - - -
B-122 - - - - - - - +
B-496 - - + - - - - +
B-589/4 + - + - - - - +
B-589/1 + - + - - - - +
B-547 + - - - - + - +
B-470/2 - - - - - - - +
B-288 + - + - - - - +
B-584 + - - - - - - +
B-369/1 - - + - - + - -
B-501 + + - - - - + +
B-23/8 - - - + - - - +
B-23/3 + - - - - - - +
2008
B-291/11 - - - - - - - +B-87 - - + - - - - +B-280 + - - - - - - +B-232 + - - - - - - +B-160 - - - - - - + +B-164/3 - - - - - + - -B-307/2 + - - - - - - -B-307/8 - - - - - - - +B-649 - + + + - - - +B-557 - - - + - - - +B-297 - - - + - - - +B-893 - - - + - - - +B-125 + - + - - - - +B-169/7 + - + + - + - +B-184 - + - + - - - +B-27 - - - + - - - +B-70 + - - - - - - +B-31/2 + - + - - - - +B-315 - + - + - - - +B-465/9 + - - - - - - +B-164/1 + - - - - - - +B-346 + - + - - - - +B-320/4 - - - - - - - +B-164/4 - + - - - + - -B-31/5 + - - - - - - +B121 - + - + - - - +B-648/1 - - - - - - - +B-307/6 - - + - - - - +B-546 - + - + - - - +B-671 - - + + - - - +B-648/2 - - - + - - - +
2009
TAstVsANVTCVHEVTastV-2AvRVARVTuPVFarm/HouseYear
Cleavage site recognitionenzimes emésztés
561bpChPV
415bp 146bp
enzimes emésztés
238bp
561bpTuPV
323bp
561bp
enzimes emésztés
323bp 146bp
TuPV like
92bp
RFLP-analízis
emésztetlen
enzimes emésztés
415bp 146bp
561bpChPV
enzimes emésztés
323bp 238bp
561bpTuPV
561bp
enzimes emésztés
323bp 146bp
TuPV like
92bp
PCR és RT-PCR összesítés
• TAstVs: 41/49 (83,67%) 13/49 TAstV-2 (26,53%)
• TuPV: 25/49 (51,02%)
• AvRV: 14/49 (28,57%)
• ARV: 7/49 (14,28%)
• TCV: 7/49 (14,28%)
• ANV: 2/49 (4,08%)
• HEV: 0
Statisztikai elemzés• szignifikánsan negatív értékek aTAstV-2 és TuPV
előfordulása között (p: 0.02) • pozitív, “majdnem” szignificáns korreláció a TAstV-2 és
ARV előfordulása között (p: 0.057)
P-értékek
TuPV ARV AvRV TAstV-2 TCV ANV TAstVs
TuPV NA 1 1 0.02 1 1 1ARV NA NA 1 0.057 1 1 1AvRV NA NA NA 1 1 1 1
TAstV-2 NA NA NA NA 1 1 1TCV NA NA NA NA NA 1 0ANV NA NA NA NA NA NA 1
TAstVs NA NA NA NA NA NA NA
Következtetések • a bélbolyhok megrövidülése, enyhe denudatioja és
összeolvadása• enterocyta desquamatio• 2 esetben E. coli• Legmagasabb előfordulási arány: astrovírusok• ANV pulykaállományokban• Újabban felismert kórokozó TuPV: gyakori (51,02%)• a pulykaállományokban a csirke- és pulykaparvovírus
egyaránt előfordul• létezik egy „átmeneti” (pulykaparvovírus-szerű) genotípus• negatív korreláció: TAstV-2 and TuPV• pozitív korreláció : TAstV-2 and ARV
Thank you for your attention!
Recommended