13
A loss of resistance to avirulent bacterial pathogens in tobacco is associated with the attenuation of a salicylic acid-potentiated oxidative burst Luis A.J. Mur 1 , Ian R. Brown 2 , Robert M. Darby 1 , Charles S. Bestwick 2 , Yong-Mei Bi 1,² , John W. Mans®eld 2 and John Draper 1,* 1 Institute of Biological Sciences, University of Wales, Aberystwyth, Edward Llwyd Building, Penglais Campus, Aberystwyth, Ceredigion SY23 3DA, UK, and 2 Department of Biological Science, Wye College, University of London, Wye, Ashford, Kent TN24 5AH, UK Received 22 February 2000; revised 12 May 2000; accepted 5 June 2000. *For correspondence (fax +44 1970 621981; e-mail [email protected]). ² Present address: Department of Molecular Biology and Genetics, University of Guelph, Guelph, Ontario, Canada, N1G 2W1. Summary The role of salicylic acid (SA) in events occurring before cell death during the hypersensitive reaction (HR) was investigated in leaves of wild-type tobacco Samsun NN and in transgenic lines expressing salicylate hydroxylase (35S-SH-L). Challenge of 35S-SH-L tobacco with avirulent strains of Pseudomonas syringae gave rise to symptoms resembling those normally associated with a compatible response to virulent strains in terms of visible phenotype, kinetics of bacterial multiplication, and escape from the infection site. Compared with responses in wild-type tobacco, both the onset of plant cell death and the induction of an active oxygen species-responsive promoter (AoPR1-GUS) were delayed following challenge of 35S-SH-L plants with avirulent bacteria. The oxidative burst occurring after challenge with avirulent bacteria was visualized histochemically and quanti®ed in situ.H 2 O 2 accumulation at reaction sites was evident within 1 h after inoculation in wild-type tobacco, whereas in 35S-SH-L plants the onset of H 2 O 2 accumulation was delayed by 2±3 h. The delay in H 2 O 2 generation was correlated with a reduction in the transient rise in SA that usually occurred within 1±2 h following inoculation in wild-type plants. Our data indicate that an early transient rise in SA potentiates the oxidative burst, with resultant effects on accumulation of H 2 O 2 , plant cell death and also defence-gene induction, factors that together may determine the outcome of plant±pathogen interactions. Keywords: salicylic acid, potentiation, oxidative burst. Introduction The resistance of plants to pathogens is often crucially dependent on the recognition, by a plant-encoded resis- tance (R) gene product, of an avirulence (avr) gene product encoded by the potential pathogen (Flor, 1946; Keen, 1990). Such `gene-for-gene' recognition initiates a cascade of events that neutralize the potential pathogen, and phenotypically leads to formation of a necrotic lesion, the hypersensitive response (HR). One of the earliest events following pathogenic challenge is the generation of active oxygen species (AOS), the so-called `oxidative burst' (Doke, 1983; reviewed by Lamb and Dixon, 1997), consisting primarily of superoxide anions (O 2 ± ) and H 2 O 2 . AOS have been reported to be generated in two phases: a transient, early, non-speci®c rise, followed by a persistent rise which appears to be dependent on avr/R recognition (Baker and Orlandi, 1995; Levine et al., 1994). Certain evidence has suggested that the oxidative burst arises from the activation of a plant version of the NADPH oxidase complex which generates a `respiratory burst' in neutrophil cells (Auh and Murphy, 1995; Low and Dwyer, 1994; Mehdy, 1994; Murphy and Auh, 1996; Segal and Abo, 1993). Antisera raised against components of the mam- malian NADPH oxidase have been used to detect equiva- lently sized proteins in plant cells (Dwyer et al., 1996; The Plant Journal (2000) 23(5), 609±621 ã 2000 Blackwell Science Ltd 609

A loss of resistance to avirulent bacterial pathogens in tobacco is associated with the attenuation of a salicylic acid-potentiated oxidative burst

Embed Size (px)

Citation preview

� ���� �� �������� � ������ ������ ������� ������� �� ������� ��� �� ������ �� ������������������� ����� � ����

���� ���� ����� �� �� ����!� ����� �� "����� #����� $� �����%!� &������� ���'� ���� (� ���)���! ��

���� "������*

���������� ��� ���� ��������� ���������� ������ ������������ ������ ����� ������� � ��� ���� �� !���

������������ ������ �� �"#$ $%�� �&� ���#%�!��� ��� ��� ���� �������� ��� ���� �� ���������� ����� ���� ������ &��� '(#) *�+� �&

�������� �� ���� ����� ������ �� �� ����� �������� � ���� �������� ������������ ���� ��� � !� "�� #�� �$%��& '(�)�������*+�,-����� ������. /����%��� �� ��&���&� 0��&�1 ��� 2�������3 4������� �� 2��&�(3 2��&�(3 5�����3 6�����3 7�2 �8��

$�++��

,�� ���� �� �������� ��� -$�. �� � ��� ��������� ������ ���� ��� ������ �� ����������� � ������

-/�. �� �� ������ �� �� �� �� �������� ����� $+��� 00 �� �� �������� ����� ����������

������� ���������� -12$�$/��.� #������� �� 12$�$/�� ����� ��� ������ ����� �� ����������

���� � � � ���� � ��+��+� ����+����� ���� ���+��� ������� ��� ��+����� �������� �

������ ����� �� ��+� �� ������ ��������� %������ �� ������ +����������� �� ����� ���+ ��

�������� ���� #�+���� ��� ��������� �� �������� ������ ��� �� ���� �� ��� ���� ��� �� ��

�������� �� � �� � ������ ���������������� � ���+��� -��3���45$. ���� ������ ���������

�������� �� 12$�$/�� ���� ��� ������ ������ ,�� ����� � ���� ��������� ��� �������� ���

������ ����� �� �����6�� �������+����� �� 7���)�� �� ����� /!8! ���+����� ������

���� �� � ���� ����� � � ��� ��������� �� �������� ������ ������ �� 12$�$/�� ���� �� ����

�� /!8! ���+����� �� ������ �� !91�� ,�� ���� �� /!8! �������� �� �������� ���

�������� �� �� ������ ���� �� $� � ������ �������� ����� �9!� ��������� ��������� �� ��������

����� 8�� � ������ � � ���� ������ ���� �� $� ������� �� ����� � ����� ��� ������

������ �� ���+����� �� /!8!� ��� ���� ��� �� ��� ������������ ��������� ����� � ������

+� ����+��� �� ����+� �� ���9������ ����������

:�������; �������� ���� ��������� ����� � �����

����������

9(� ��������� �� �&���� �� ���(�1��� �� ����� �����&&

��������� �� �(� ���1������3 � �&���$������� ����$

����� �,+ 1��� ������3 �� �� ����&���� ����+ 1��� ������

������� �(� ��������& ���(�1�� ��&�3 � �"� :���3

� �+- ;��( <1���$��$1���= ���1������ ��������� � �������

�� ������ �(�� �����&�>� �(� ��������& ���(�1��3 ���

�(���� ����&& &���� �� ��%����� �� � ������� &�����3

�(� ( ����������� ������� �?�+� 5�� �� �(� ��&����

������ ��&&�@��1 ���(�1���� �(�&&��1� �� �(� 1��������

�� ������ �� 1�� ������� �A5;+3 �(� ��$��&&�� <���������

���= �/�*�3 � #B� ����@�� C�% ��� /����3 � !+3

���������1 ��%��& �� ��������� ������ �5�D+ ��� ?�5��

A5; (��� ��� ������ �� � 1������� �� �@� �(����. �

��������3 ��& 3 ���$�����E� ���3 ��&&�@�� � ���������

��� @(��( ������ �� � ��������� �� ���F, ���1������

�0�*� ��� 5&����3 � �� C����� �� ���3 � �+� 6�����

�������� (�� ��11����� �(�� �(� ��������� ��� �����

��% �(� ���������� �� � �&��� ������ �� �(� 7A/-?

������� ��%�&�� @(��( 1������� � <������� ���= ��

������(�& ��&&� �A�( ��� ���( 3 � �� C�@ ��� /@ �3

� �� ��(� 3 � �� ���( ��� A�(3 � "� ;�1�& ��� A�3

� B+� A������ ����� �1����� ��%������� �� �(� %�%$

%�&��� 7A/-? ������� (��� ��� ���� �� ������ �G����$

&���& ��>�� ������� �� �&��� ��&&� �/@ � �� ���3 � "�

'�� ����� .����� �����+ !1��+3 "� D"��

����� 0&��*@�&& ;������ C�� "�

C����� �� ���3 � �+ @(��( ����� �� ��������� �� ��% ��

������ ��%�&�� �� � %���� ��%�&� �� �(� %�%%�&���

������� �H��1 �� ���3 � !+� ���(�%��3 1���� @��(

��G����� ��%�&��� �� �(� 7A/�-+? ������� ��%������

!/�!�0 (��� ��� ������E�� �� ��� �2��% �� ���3 � "+

��� ������!��� �:�&&� �� ���3 � #� 9��� �� ���3 � #+� 9(�

1�������� �� A5;3 ������&�& ?�5�3 (�� �%�1�� �� �

*� ����� �� �&��� �������� I� �������� �� ��� �����&

����%�����& �&� �-��1 ��� :��3 � �+3 ?�5� ����� �� �

��$������� �� ���������� ����&��� �� ��&&$@�&& ����$

&��*��1 �0��&� �� ���3 � �+ ��� ������� ������ �������

1����3 ���&����1 ��%� ���(�1������$�&���� �-�+ �������

�6(�� �� ���3 � B+3 �(� -��� �&��� �� ������&&�&� -�

������� �0� �� ���3 � �+3 ��� �����& �(�� &�&�����

�%%���� & ��� �-AC� A�����& �� ���3 � # +� -AC �� �(� *�

�1�&��� ��> %� �� �(� �(�� &�������� ���(@� �0���

�� ���3 � �+ @(��( ����&��� ������� �� %�� �( ���$

&�����3 ��& %�� ����&��� �� ��&&$@�&& ����1�(����1 ���1�

&�1���3 C�% �� ���3 � # + ��� �&�� ��>��� ����3 �(�

�%%������ ������ �� �(� �%������ ������� ��1��&

��&�� &�� ���� �;A+� ?�5� �� ���(� �%�&������ �� ;A

� ��(���� �� �(� ��������� �� ��>��� ���� �� ;A ��

����& ��� �(� ?�5�$%������� ���������� �� ��>���$����$

�$( ��� &��� �C��� �� ���3 � �+� ?�5� (�� �&�� ���

������� �� �&� � ������& �&� �� <��(�������1= �(� ?�3

@��( (�1( &���&� ���������1 �&��� ��&& ����(3 @(���� &�@�

&���&� ������ 1���� �����1 �� ������� ���������� @��(

����������� �������� ���( �� 1&����(����$;$���������

��� 1&����(���� ���������3 @(��( %� ��� �� ��E�� �(�

&����� %�1�� �C����� �� ���3 � �3 � "+�

��&&�@��1 ���������� �� &���&�>�� ��������� ����������

@��( �(� ?�3 �&���� ����&� � ���%�� ��G���� ���������

�;A�+ @(�� ���(� ���(�1���� ���������� ����&�

������ ���&���� �����@�� � �&� �� ���3 � "+� ;A

(�� �%�1�� �� � *� ��1��& �� �(� ����&��(%��� ��

;A�� J��1����� ���&������� �� ;A (�� ��� ����� ��

%�%�� ;A�3 �� @�&& �� �������1 ����������� �� -�

������ 1���� @(��( �� ���1��>�� %�*� 1���� ��

�(� � ���%�� ������� �8�� �� ���3 � �+� J���1�����

���� �� ;A (��� ��� ������ ����� &������ ��

������ ���&�% �� ���3 � �+3 ����%� ������� �� ���3

� �+ ��� ������!��� �������� �4*��� �� ���3 � B+3 ���

;A %� � %��&�>�� �(��1(��� �(� �&��� �� ����&��(

;A� ����*��3 � �+� I������1����� �� �(� �&� �� ;A ��

�&��� ������� @�� ���&������>�� �(� ����&��%��� ��

����1���� �&���� ��������1 ��&�� &��� ( ��� &��� ��$

����� �(� ���1 1��� ��% ����� ��� !�����

�2����� �� ���3 � B+� 9(�� ��> %� ������� ;A ��

�����(�&3 @(��( ������ �� (��� &���&� ������ �� �&���

�������� �� ��������� �0� �� ���3 � �� ������( �� ���3

� �� �� �� ���3 � !+� J�������� �� ��&�� &��� ( ��$

� &��� �� ����1���� �&���� (�� ��������� �(�� ;A

����%�&����� �� ��������& �� ;A� �/�&��� �� ���3 � ��

2����� �� ���3 � B+ ��� �(� ?�$&��*�� ��������� �� ���&

��� ���1�& ���(�1��� �� ������ � ������!���

�/�&��� �� ���3 � �� �� �� ���3 � !+� 8� (��� ��$

�����& ���&�>�� ������ �&���� ��������1 � ����&

��&�� &��� ( ��� &��� ���> %� �;?$C+ &��*�� �� ��������

��%����3 �� ��� �� �(�@ �(�� ��������� �� ������

%����� ���� �9�K+ ��� (���$��&& ����( @�� ���������

�� ;A ����%�&����� �� �(� ��&���� ���1� ���� &�����

��%����� � �����& �� ��������� ������ ��� �� ���3

� !+� ?�� @� ���&�>� �����&������ �� �(� ������ &���

����&��� @��( ?�$�&������1 ���(���� �� ����� ���

����� �� �� ����&����� �(� ���& ��� �� ��������� �������

8� ������ � &��� �� ��������� �� ����&��� ������&

���(�1��� �� B�;$;?$C ������ �&����3 ���������� @��(

�� ���������� ��������� ���3 &�����1 �� ��@�����%

������� �� ��&& ����( ��� �������$1��� ���������� 9(��

�(� ;A$%������� ������������ �� �(� ��������� ���3

������1 �� ��������� ������3 ���&� ������� �

%��(����% �(��1( @(��( ��������� �� ���(�1�� �����*

%� � ������� ����1 �(� ?��

������

������� � $*�2�+2� ����� ���� ��������� ��������

!������ ������ ���� ���� ���� ��!���� ��������

��������

5� ���& ��� �� �(� �&� �� ;A �� ������ ����1���1 �(�

?� @�� ���� �� �(� �����&����� �� ������ &�����

@��( ����&��� ��� ���&��� ���(���� �� ����� ���

����� ��- A� ?� ��%��1 �� @�&�$� �� ;�%��� 77

������ ��&&�@��1 �(�&&��1� ����&��� ������ �� �- �-

��� ����� �� ���1�� ��+ ��� �- �- ��� !���������

���1�� ��3 �+ �%����� ���E��� �� �(� ��E&����� >���3

���%��1 ������� ��� ����& ��( ������ A��� �����$

&���� @��( �(� @�&�E� ���(�1�� �- �- ��� ������ @��

������&& �(&�����3 �(�� ��G������&& @���$���*�� ���

�������3 ��� ���( � %���%� ����G����& ����� ����

�������&���� ���� ���1�� �+� I����&����� �� B�;$;?$C

;�%��� 77 @��( �(� ����&��� ������ �- �- ��� ����� ��

� �- �- ��� !��������� ���1�� ��+ ������� � %���%�

���%&��1 &������ �����1 ��% �- �- ��� ������ �����&�$

���� �� @�&�$� �� �&���� ���%��� ��1�� �� ��� +� C���

������� �� ��( @�&�$� �� ��� B�;$;?$C ������ �����$

&���� @��( �� ��!C %����� �� �- �- ��� !��������� @��

� %���%&��� ���%��� ��1�� ��3 �� ��� �3 ��+�

0������& ����&����� ��>��3 ��( @��(�� �(� &������ ��� ��

�(� ��������1 �������3 @�� ����%���� ��� ��%� ��

@�&�$� �� ��� B�;$;?$C ;�%��� 77� I� @�&�$� �� �&����

���1�� ��+3 ����&������ �� �(� ����&��� ������3 �- �- ���

����� �� ��� �- �- ��� !���������3 @�� ������ B�� �

@��(�� �(� &�����3 @(�&�� �� ����� �����&���� @��( ���&���

����� �- �- ��� ������ ������& ��%�� ���&���� ��& ����

! �� �� 0������ @�� �������� �� ���� ��������1 �(�

&����� ��& �� &����� �����&���� @��( �- �- ��� ������-

"�� ���� 3�� �� �&�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

6�%���� @��( @�&�$� �� �&����3 �� B�;$;?$C ������ ��(

����&��� ������ %��������� ��1��E����& ��L�����+ 1���$

� ��%�� �� ���&� ������ ��� ������� ���� ������$

��1 ������ ���1�� �+� ��&���&������� �� �(� ��%�&&

����&��� ���(���� @�� �(����� �� ��%�&� �� �(��

��(����� ���&��� ������ �� @�&�$� �� �������

<����� �� C������ ������� ��&&�@��1 ��������� �� @�&�$� �� ��� ;?$C$��������1 ������ ;�%��� 77 @��( ����� ��� ����� �� ���(�����C����� �(���� ��� !�� � ���� �����&����� ���# ���%&D�+ �� @�&�$� �� ������ @��( ��+ �- ����� �� ���(��� ��- �- ���+ ����� �� � �+ �- �- ��� ������3 �����+ �� B�;$;?$C ������ @��( �- �- ��� ����� �� ��� �- �- ��� !���������- ��+ /����& �� � &����� �&������ ����&��� ������& ������ �� B�;$;?$C �������I�������� �� �+ ��� ��+ �� ���� �� ������� ��3 ����������1 �� �(� ��1���&& �������� ���+� �(&����� ��+� �������1$������� ���+� ��� �� %���%�����1���� ���+� C��� ����&� �� ��+ @�&�$� �� ��� ��+ B�;$;?$C ������3 ! �� � ���� ��E&������ @��( �- �- ��� !��������� ��+ � �- �- ��� !��������� ��!C ���+��1+ 6�&& ����( �� &��� ���� ���@��+ �� @�&�$� �� �&���+ ��� B�;$;?$C ��1(�+ ������ �&���� �� #( ��&&�@��1 ��E&������ @��( �- �- ��� !����������

�� !��������� ��� 0������� ����� �� +, "��

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

-���&������ �� �- �- ��� !��������� ��!� �� B�;$;?$C @��

���(��1�� ��%���� �� @�&�$� �� ������ ����� ���

�(�@�+�

$*�2�+2� ����� �0������ ������� 4������� !���� ����

����� ����� �� ��� !������ ���������� ���� -� �� !�-

� ��1��

-������ �����%���� ��11����� �(�� �(� *������� �� 9�K$

�&������ ��&& ����( ���&� � ��M������ ;A ����%�&�����

��� �� ���3 � !+� 5�������� � � ��11����� �(�� ��&&

����( @�� �&�� ��&� �� �� ?� �&������ ������&

���(�1��� �� B�;$;?$C ������3 @(�� �(� ��& ��%�1�

�� #( @�� ��� �� ������� �(� � ��1� ���� �� �����&���

�(� ���(�1��� ���1�� ��+� 9(�� �(��1� �� �(� ?� @��

G�����E�� %������1 ��( �(� ��� �� �&����& ��

&��*�1� ��� �(� J���� 0&�� �������� �� &��� ���&����� I�

@�&�$� �� ������ ������� ��E&����� @��( �- �- ��� !����2

�����3 �� ������� �� �&����& �� &��*�1� ������ �( ����

�����&�����3 ��%���� @��( # ( �� ��%�&�& �����&���� B�;$

;?$C �&���� ���1�� B�+� I������� J���� 0&�� �������1 ��

���� �(�&&��1�� @��( �- �- ��� !���������3 ������1

���� ��( @��( ���&���� �� @�&�$� �� ������3 @�� ���

������ ����& ��( �� ���&���� ��%�&�� ��% &����� ��

B�;$;?$C �����&���� @��( �(� ��%� ����� ���1�� B+�

A&�(��1( �&�����& ��&� ��3 �(� *������� �� ��&& ����( ��

B�;$;?$C ������3 �� ��������� ���(� �&����& ��

&��*�1� � J���� 0&�� �������13 @�� %�� ���� �(��

����( ���������� @��( ��������� �� @�&�$� �� ������ @��(

���&��� ������ �� �- �- ��� ������ ���1�� B�33 ������+�

��&&�@��1 ��������� @��( ����&��� ������ �(�� �� �

�������� �����3 �(� ��������� ��%�3 ����1 @(��( ������&

������ � ��(���� �� ������� �� �&���� �(� ?� �0���@��*

�� ���3 � !+� 9(� ��������� ��%� %� � ����&��(��

��������&& ��E&�����1 �����&���� ���� @��( ������$

% ��� �����1%&D�+� I� ��( @�&�$� �� ��� B�;$;?$C

������ &���� �(� ��������� ��%� @�� ��������&3 ��������1

�� �( ��&&�@��1 �����&����� ���1�� B�+�

<����� !� ����� ��� ����� �� ����&������(��1�� �� @�&�$� �� ��%���� @��( ;?$C$��������1 ;�%��� 77 ������ �&�������+ 0������& ����&������ @�� ���� ��@��(�� &������ �&�����+ ��� �%%������& ��'����� ���� �������+ �� @�&�$� ��;�%��� 77 ������ �&���� ��N ��%�&���� ��%� �����+ ��&&�@��1 �����&����� @��(������& ����������� ��� ��# ���%&D�+ �� �-�- ��� ����� �� ��+3 �- �- ��� !�����������+3 �- �- ��� ������ ��+ � �- �- ���!��������� ��!� ��+��+ 0������& ��%�� @�� ����%���� ��@�&�$� �� ;�%��� 77 ��+ ��� B�;$;?$C������ ��+ �� ���&���� ��N ��%�&�� ����%�$�����+ ��% &����� ��� ��������1������ ��&&�@��1 �����&����� @��( ��&������� ��# ���%&D�+ �� �- �- ��� ����� �� ��� �-�- ��� !���������� A&& ���&�� �� 1���� ��%��� ���%&D��;J�

"�� ���� 3�� �� �&�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

�������� ��� ��� ��2 ��� �5�2���!����� ���

!� ���� �� ��!!������ �� $*�2�+2� !�����

2��� ������� ���������1 �� �$1&���������� �24;+ ���$

������ &��*�� �� ��%���� ��������� �� ?�5� �A�-��D

24;� 0� �� ���3 � �+ ��� ;A �-���D24;� 4*��� �� ���3 � B+

@�� ���� �� %����� ������� �� ������� ��1��&� �� �(� B�;$

;?$C ��*1����� A�-��D24; ��� -���D24; ����1����

�&���� @�� ������ @��( B�;$;?$C �;?$C+ �&����3 ��� �&��

������ @��( @�&�$� �� �@�+ ������ �� ���� �� �����&�� I�

A�-��D24;�@� 6� (�%�> 1���� �(�&&��1�� @��( �- �- ���

!���������3 �&������ 24; ������� @�� E�� ������

@��(�� ��E&����� ������ B( ���������&����� ��� ����$

G����& ��������3 ��& �� ���&��� ���� ��&& ����( �� (

���1�� ��+� I� A�-��$24;�;?$C (�%�> 1����3 24;

��������� @�� ������ �� �&& ��%� ������ �� �� ��( ����

�����&������ I� ��%������3 �&������ 24; ���������� ��

A�-��D24;�@� �&���� �����&���� @��( �- �- ��� ������

@�� E�� �������� �� ��( ��� �(��� ��������� �� �������

�� &���� � ���(� ��( ���1�� ��+� 8��( @��-���D24;

������3 ����� 1��� ������� @�� E�� �������� �� (

��&&�@��1 �(�&&��1� @��( �- �- ��� !���������3 �� �(��

������� �� 24; ������� @�� ��� ������ �� �(� B�;$;?$C

��*1���� ���1�� �+� A� @��( A�-��D24;3 �(�&&��1��1

-���D24; ����1����� @��( �- �- ��� ������ �&������ 24;

������� @(��(3 �(��1( �&�����& ��&� �� ��%���� �� �(��

<����� 1� -&��� ��&& ����( �� @�&�$� �� ���B�;$;?$C ;�%��� 77 ��&&�@��1 �����&�����@��( ����� ��� ����� �� ���(�����6�&& ����( @�� %������� ��+ %�������1�&����& �� &��*�1� ��� �+ J���� 0&���������1 �� &��� ����&� �� @�&�$� �� ��3 @(�����+ ��� B�;$;? ;�%��� 77 ��3 &��*��+ &����� ��E&����� @��( �- ����� �����(���� !��������� ��� ��# ��� �%DB+�6(��1�� �� �&����& �� &��*�1� @�� ���� �� %������1 �(��1�� �� �(� ����������� ���(� ��(��1 ��&����� ���%� �(���(������� �? !+ �� ���� ��E&����� @��( ��������N +- ����&�� �� 1���� �� ����������� �(��1� �� (��3 %��� �;�%D� (D��;J��N +� 8��( J���� 0&�� �������13 ���&����@�� ��%�&�� ��% �������� ���� ��N" ����%� �����+ ��� ����� �������� ��%���� ��%��*$�����&���� �����&�� ����&�� �� 1������ %��� ��&� ������� �� J���� 0&���������� ��� &���&� �� %��*$�����&���������&� �;J� I�����. ��&& ����( ��&&�@��1��������� �� @�&�$� �� ������ @��( �- �- ��������� �� ����%���� �&����& �� &��*�1���+ � J���� 0&�� �������1 ��(�G���� ��+���+ C����� �(���� ��� ��N� �� �&���+ @������� �����&& �� (��& ������&�3 �� ���(��� %���%���� ������� ��+ � ��������&&����� ��(�G���� ��+ ��&&�@��1��E&������ �� @�&�$� �� ��� B�;$;?$C;�%��� 77 ������ �&���� ��N B �&�������(+� 9(� ����� �(�� ?� @�� ����������� &����1 ������ ���������� ��%�3 1��������+ @�� �������� ��E&�����1 ������������ ��N� �� �&���+ @��( ����1%&D�

������% ��� �� (��& ������&� �� " ( ������������� �� @�&�$� �� ��� B�;$;?$C ��������NB �&���� ���(+� I�E&����� ���� @������� �� ������ ��&&���� ���������� @��(?� �� �� ( ���� �����&������

�� !��������� ��� 0������� ����� �� +, "�B

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

��(����� @(�� �(�&&��1��1 @��( �- �- ��� !���������3

����G����& ���(�� (�1(� &���&� ���1�� �+� ��������

�����%����3 ���&����1 ���� � �� ����1����� -�� ������

����%�&����� ����1 8����� &�����13 ��&��� ��%�&�

����� ����� ��� �(�@�+�

���� ������ �� ��� ���� �� !��0��� �����

������� � ���� ��������� !��� ��� �� ������� ��

$*�2�+2� �����

����&�� ������� @��( �(� A5;$��������� ����� 1���

��11����� �(�� �%���& �� ;A �� B�;$;?$C �&����

��M������ �(� ��������� ��� ����1 �(� ?�� 8� �(�����

���1(� �� ���&��� �(� �(��1�� �� ;A ����%�&����� ��

B�;$;?$C ������ ��%���� �� @�&�$� �� ������ @��(

%�����%���� �� �(� ��������� ��� ��&&�@��1 ���(�1��

�(�&&��1�� /���%������� �� ;A &���&� �� ����&����1

&������ �� @�&�$� �� ;�%��� 77 ���� �����&����� @��(

�- �- ��� !��������� ��%�������� �(�� ;A ����%�&����

�� � ��������& ��(���� %���� ���1�� �+� A ��������

��� @�� ������ @��(�� �D�(3 @��( � ������ �������

������1 "( ���� �����&����� ��� ��������1 ����& �&��� ��&&

����(� I� ����1���� B�;$;?$C ������3 ��( �������� ���

��������� ���� �� ;A &���&� @�� ��1��E����& ������

��L�����+�

9(� ��&&�&� &���&�>����� �� ?�5� @�� ���� �� ��

������� �������& 0���@��* �� ��� �� !+� /������� ��

����% ��( �������3 ���������� �� �(� ������� �� ?�5�3

@�� ��& ������ �� �������&���� ������ ���1�� "�+�

/���1 �(� ?� �� @�&�$� �� �&����3 �������� ����%�&����

��'����� �� ����&��� ������ ��� ����� �� �������� ��

�(�@� �� ��1�� "3�� O����������� ������%��� ���E%��

�(�� �������1 ���������� �� ?�5� ����%�&����� @�� %��(

%�� %�*�� �� @�&�$� �� �(�� �� B�;$;?$C ������

<����� =� ;�&�� &���$ ��� ������ �� 1���������$��������� �������$1��� ����������� @�&�$� �� ��� B�;$;?$C ;�%��� 77��&&�@��1 ��������� @��( ����� �������� �� ���(�������+ 6� �&���� �(�%�> 1����+ �� A�-��D24;������� �� 1�� �������$��������� ����$1���+ ������ @��( @�&�$� �� � B�;$;?$C;�%��� 77 @�� �(�&&��1�� @��( �- �- ���!��������� �A�-��D24;�@�3 �� A�-��D24;�B�;$;?$C3 �+ � �- �- ��� �������A�-��D24;�@�3 �+��+ ;�%�&� ������ �� ������ 6� �&�����(�%�> 1����+ �� -���D24; ���&�� &���$��������� ����1���+ @�� �(�&&��1�� @��(�- �- ��� !��������� �-���D24;�@�3 ��-���D24;� B�;$;?$C3 �+ � �- �- ��� �������-���D24;�@�3 �+� 24; ���������� @����������&& ���� ��3 ��� ���&�� �� 1������ %��� �%�& �$�4 %��D� �� ���&�����N��+�;J�

"�� ���� 3�� �� �&�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

�9�&� �+� A� ���( ��%� ����� ���� ��������� �(� <?�5� ����=

@�� ��&��&���� �� ������ �� ����%��� �� �(� �������� ��

�(� ��������� ��� ���� ���(���+� A �&�� <���= �� ?�5�

����%�&����� @�� ������ �� @�&�$� �� �&���� ��@��� �

��� �( ���� �����&����� ���1�� "�� 9�&� �+� I� �������3

�(� ������� @�� ��&� �� ��1��E����& �� B�;$;?$C

����1���� �&����� ;�1��E���� ����%�&����� �� ?�5� @��

��� ������ ����& # ( ���� ��������� @��( �- �- ��� ������

����� ��� �(�@�+�

"���������

,��������� � ��������� -� � ��1�� !������� �� �����

�� ��!������ � ��������� ����

9(� ��� �� ����1���� �&���� ��������1 ��&�� &���

( ��� &��� (�� �(�@� �(�� ;A ����%�&����� �� �����$

���& �� ��������� �� %�� ���(�1��� ���1� /�&���

�� ���3 � �+� ?�@���3 ���( ������� (��� ���&�� ��

������ �(� �������1 �&�� ;A %� �&� �� �(� &�����

����&���� 0 �����1 ��&�� &��� ( ��� &��� �;?$C+ ��

��%���� ������ �� �� ��1 ���1�� �� &����� ����&��$

%���3 @� ����� �(�� ($1���$%������� ��������� ��

9�K @�� ��������� �� ;A � ��(���� ����1 � ��$

������� �(��� � �� ��& ��&&�@��1 ��&& ����(�

;�1��E����& 3 -� ������� ����%�&���� �� �G����&���

&���&� �� &���� ��(�����1 ���(� ��%�& &����� ����&��$

%��� � ��������� ��*��13 ��11�����1 �(�� -� �������

�� ��� %�'� ��������� �� ��������� �� 9�K�

;�%�&�& 3 ������ �� ������!��� ;A$��1��& �����������

%������ (��� ��11����� �(�� -� ������� %� �&�� �&�

� %��� �&� �� ��������� �� ������& ���(�1��� �6&�*�

�� ���3 � #+� I� ����%����1 �� �������1��� @(�� %� �

�(� �����& %��(����% �� ;A$%������� ��������� ��

���(�1���3 ���& ��� �� ������ �� ��������� 9�K$

�������� ������ @�� ���E��&�3 �� �� @�� �%�����&� ��

������ �������& �(� ����� �� &����� ��%������ 0

�������3 ��E&������ �� ������&&�&� &��� ������ @��(

��&���� �� ����&��� ������ �&����� � @�&& ��E��� ?�

������1 ��& @��(�� �(� �����&���� ���3 ��� �(��

�&&�@��1 ������� ��%�&��1 �� �(� ���& ��� �� ������&

��������� ������ �:����� �� ���3 � +� 9(� ������ ��

<����� 2 ;�&�� &�� ���� ����%�&����� ������&����1 ?� &������ ������� ����� ��� ����� �� ��� !��������� ��@�&�$� �� ;�%��� 77 ��� B�;$;?$C;�%��� 77�8�&�$� �� ;�%��� 77 ��� ����1���� B�;$;?$C ;�%��� 77 �&���� ��N� ���(+ @�������&���� @��( �- �- ��� !��������������#%&D�+� ;�%�&�� ���������1 �� �����&���� �������%���& ��� 1+ @����%�&�� ����%& ��% ��E&����� ������ �����( ������ 1���� �� ��� ���� �� �����$ ������� ��+ ��� ���'�1��������1���&& �(���� ��+ ��&�� &�� ���� �;A+������� ?-C63 �� �� J����%����&��������� ����&�� �� 1���� �� %��� �1;A 1D� �8 ��NB+�;J�

�� !��������� ��� 0������� ����� �� +, "��

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

<����� >� ?�5� ����%�&����� �� @�&�$� �� ;�%��� 77 ��� B�;$;?$C ;�%��� 77 ��&&�@��1 �����&����� @��( ����� ��� ����� �� ��� !���������-��D�+ J&����� %���1��(� �&&�������1 �(� �������� ����1���� �� ?�5� ����%�&����� �� ������ &��� ������ �� ����� �� �����&����� @��( �- �- ���!���������3 �� �����&�>�� �(� ��%����� �� �&�����$����� �������� �� ����% ��( ������� �� @�&�$� �� ���������+ 6���1� �3 � ����& ������ �� �������1 ��% ��&& @�&& �� � ��&& '������� ���@��+ �� �������&���� ��������+ 6���1� �3 ����� ��� ����( ���������� ���@��+ �� �(� ��&& @�&& ��'����� �� ������ � ( ���� �����&��������+ 6���1� �3 ����%�&����� �� ����� �������� �� �(� ��&& @�&& ��� %���&� &�%�&&� ��'����� �� ������ ���@��+ � ( ���� �����&������ /���� �������1 ��(�1(& &���&�>�� @��(�� �(� @�&& �� ���� �� ������� @��( ������ ���&& ���������� ������+� 03 ������%� 63 �(&���&���� 6K3 �����& �����&�� I;3 ������&&�&������� 0��3 ��%���+ 6���% ��( ������ ���������� @�� ����� �� ����� @(�� �- �- ��� !��������� @�� ������ �� ������&&�&� ������ ��'����� �� �&��� ��&& @�&&� ���&&���������� ������� �N%���%�% ��+ �� @�&�$� �� ��(���� ��+ ��� B�;$;?$C ;�%��� 77 �&��* ��+ ������ ��NB �&���� ���(� ���� �������� �� 9�&� �+�9(� � �(�� �(�@� �� ����&& ���� �� ?�5� ���������� �� �������� ��%� ������ ���� �����&�����3 ��&��&���� �� ������� 0���@��* �� ��� �� !+� A�?�5� ����%�&����� %� �������� ����1 �(�� ��������� E���1 ���1�3 �������1 ���&� �M��� ������ ������1 �� �� �( ���� ��%�&��1�

"�" ���� 3�� �� �&�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

�@� �- ����� �� ���(���� ���� �� ������� �� �&������1 �

<���$(���= ?� �� ������3 @(��( %���� �(�� ��&�*�

������� 1���$��$1��� �����������3 �(� �&�%���� 1����$

��1 �(� �����%� �� �(�� ���������� (��� �� �� � ��E����

5� ���� �(�@ �(�� �� ��&�� &��� ( ��� &���$��������1

������ �&����3 ��( ���%�&�� �� � ���$(��� ?� @��

��%��%����3 �&��& ���������1 ��������� �� � ������$

��� �� ;A� 6(�&&��1� �� B�;$;?$C @��( ����&��� ������ ��

�- �- ��� ����� �� ��� �- �- ��� !��������� 1��� ��� �� �&&$

��E���3 �(&����� &������ �(�� ����� � ��� �(� ��1���&&

��E&����� ���3 �&���& ���%&��1 &������ �(�� ����&����

��&&�@��1 �����&����� �� @�&�$� �� ������ @��( �- �- ���

������� A ��*��@� �� ��������� @�� ���(� ��11�����

��% �(� �������� ������& �� ������ @��(�� �(� &�����3

��� ��&���>����� �� ��������1 �������&���� ���� �� B�;$

;?$C ������3 @(��( ������� ��%�&� �� ���&�� �������

��&&�@��1 �(� �����&����� �� @�&�$� �� ������ @��( �- �- ���

������- ������!��� %������ �� �(� ;A ���$���������

�&&�&�� �����3 �!��3 �� � ��� ���� �6�� �� ���3 � ��

/�&��� �� ���3 � �+3 �� @�&& �� �(� ��%�&����$ ��� ;A$

��E����� !��) ����1� �� ���3 � � P(�� �� ���3 � #+3 ��������

�(� �%������� �� ;A �� ���������1 � %���%� ����������

@��( �(� ������� �� ���&��� ������ �� �- ����� ���

;�%�&�& 3 /�&��� �� ��� �� �+ ��%�������� �(�� ��

������3 �����&������ �� �- �- ��� ������ ��(����� ��������

���&����� 9(� �&� �� ;A �� ��������� �� ����&��� ������&

���(�1��� �� &��� �&��� A� �&���� ������� �� ����&���

������ @�� ��� ������ �� �(� ������!��� %������ ��

�!�� �6�� �� ���3 � �+ ��� !��2) �P(�� �� ���3 � #+� I�

�������3 ��( (��1 ��������1 ������!��� ��� �� ����

��� ���# %������ @(�� ;A �� ��� ��%�&���� &���&� ��

������ ��(����� �������� �� !����� 1�@�( �� ����&���

������ �7�@��( ��� ������3 � +� 9(��3 �� �����$

�����3 �� � �������� �&��� �������3 ����������� �(� ��%���

�(�� ;A �&� � � *� �&� �� ;A �� ?�$%������� ��������� ��

������& ���(�1����

���� ����� ��� !��������� ������2 ��� �0!������

��� � !� ���� ����� ��� +, �� $*�2�+2�

0���� �� �&���� *������� �� &����� ��%�����3 @� ��$

�����& ( ���(���>�� �(�� �(� ��������� ��� ���&� �

��%��%���� �� 9�K$�������� B�;$;?$C ������ ���

�� ���3 � !+� ?���� �� ���& ��� �� ��������� ������

��&&�@��1 �(�&&��1� @��( ����&��� ������ �����������

�� ?�5�$���������� �(���%���� 9(� *������� �� ��&& ����(

@�� ���� �� �� B�;$;?$C ��&&�@��1 �����&����� @��(

����&��� ������ �� ��� �� ����%��� @(��(� �(� ?�

�&������ �� ������&&�&� ���(�1�� @�� ��M������ ;A3

�� ��%�������� �������& �� �(� ������&&�&� ���&

���(�1�� 9�K� 4���1 �@� �������� %������ �� ��&& ����(

���� &��*�1� ��� %�%��� ���������+3 �(� ?� @�� �&��&

��&� �� �� B�;$;?$C ��� �(����� @�� ��M������ ;A�

A� �� ����������� %����� �� ?�5� ��1��&&��13 �(�

��������� �� �(� ?�5�$������&� A�-��D24; ����1���

@�� ���� �� �� � B�;$;?C �&���� 6����& %�����%���� ��

����&��� ������$�&������ -���D24; ��������� �� �(� ;?$

C ��*1���� 1��� �(� �������� ���������� ��3 �� &���

@��( �� ( ���(����3 A�-��D24; ��������� @�� �&��

������� 9(�� ��������� (�� ���(� �%�&��������3 �� ;A

���� �� <����������= ��������� �� A�-��D24; ��� �� ���3

� "+ ���3 ������3 � ����� �� ������� 1���� ���&����1

�(��� �������1 ��> %�� ����&��� �� �(�� &��������

� ��(���� �:���� �� ���3 � �� �� �� ���3 � "+ ��� ����

�(�������� �7��&��� �� ���3 � �+� 9(� ������������ ��

A�-��D24; @�� ���������� @��( ;A� ��� �� ���3 � "+3

�� �� ��@ ���� ��11��� �(�� ;A � ��(���>�� ����1 �(�

?� �&�� ����������� �������$1��� ��������� @��(�� ����&$

����1 &������� 9(�� �(� ����%�&���� ���� ��11��� �(�� ��

;A$��1%����� ��������� ��� ������ �� � �����& ��

1��� �������������

'�� 7��� ���� �� � ��!����� ��������� ��������� ����

����� ������� � ���� ��������� �������� !���������

��� 0������� �����

J��1����� ���&������� �� ;A (�� ��� ������ ��

%���&��� ?�5� ����%�&����� ��&&�@��1 ����%��� �� �&���

,��� �� O����������� ������%��� �� �������1 @��( 6�6&B ������& ?�5� ����%�&����� @��(�� �(� ��&& @�&& ��'����� ������� ��� ����� �� ��� !��������� ������

-������1� �� ����� �� ���( ����$1� �� �������1�

9����� 1���� �� �����%� ���� �����&����� � � �

;�%��� 77� ! �� �� � #� ��B �� #� B� �! �� �B# �# B" "

;�%��� 77 B�;$;?$C� # �� �� "� �� �B !� B� �� �� B" �B# !" �� �

�A� &���� �� ����� @�� ���%���� �� ���( ��%� ��% �(����&����� &��� ��%�&��� ����%�% ��������� �� ������� ����1����� ���( ����1� �� �������1 @��. �3 ����� �3 ����� �������( � �3 ������� �������1 ��1��1 ��% ����( �� ���M�������1�� "�D�+�9�%� � �������� �������1 ������ �� ��&& '�������� ���������&���� �������6(� ����������& ���& ��� ����1 �� ������1��� ����� �(�@�� �(���(� ��%� �� ����� �� ����1���� � ��� � @�� ��1��E����& (�1(� �� �(� @�&� � �� ��%���� �� B�;$;?$C ��L�����+ �� ���� B( ���� �����&������ 7� ��1��E���� ���������� ��Q ����+@�� ������ �� ��(� ��%���

�� !��������� ��� 0������� ����� �� +, "�!

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

��&&$���������� ��&���� @��( �&������ �:���� ��� ��&��*3

� �+ � ����&��� ������ �;(���� �� ���3 � !+� ?�@���3

�(�� �(���%���� (�� ��� ��� ������ @��(�� ������

������ �� ��*�� �� @��( ;A %�����%����� 5� �����

%�����%���� �� ;A ����1 &����� ����&��(%��� ����$

����� �(�� ;A � ��(���� @�� ��(���� �� � %����

�%�������� �� �(� ��������� ��� �C�% ��� /����3

� !+� I� �������� �� �(� ������ ��� ������1 ��( ����

�����&����� �;�&��%�� �� ���3 � B+3 �(�� @�� �� ��&��

�������� ��� �� ;A &���&� �D�( ��&&�@��1 �����&�����3

@(��( @�� �����& ������ �� B�;$;?$C ������ �&�����

9� ����%��� � �����& �&������(�� ��@��� ;A ����%�&�$

���� ��� �(� ��������� ���3 �(� &���� @�� ����%���� ��

��( @�&�$� �� ��� B�;$;?$C ������3 ����1 �&�����

%������� �� ������ �&�����$����� �������� �� ����%

��( ������� ��&&�@��1 ������� �� ?�5� @��( 6�6&B�

/���� ����% ��( ������ �������� @�� ����&� �D

�( ���� ��������� �� @�&�$� �� �&����3 �� �� B�;$;?$C

������ �(� ����%�&����� �� ?�5� @�� ��������� ����& � (

��&&�@��1 �(�&&��1�� /���%������� �� �(� ��������� ��%�

��11����� �(�� ��&��� �� �(� ��1��& �&������1 �&��� ��&&

����( @�� ���������� �� B�;$;?$C ������� 9(�� ��

���&�� �&��& ��������� �(�� �(� ������& �� !����� ��� ��

;A ��M������ �(� *������� �� �(� ��������� ����

9(� �%������� �� ;A � ��(���� @��(�� �(� E�� (���

��&&�@��1 ��������� (�� �����& ��� (�1(&�1(���

;(���� �� ��� �� !+ �� �����%���� ���&�>��1 �� ���

��&&$���������� ��&����� A&�(��1( ���&� �� %����� ;A

�����& 3 �(� ��%�������� �(�� �(� �������� �� �� ���

��&���� �� A5-- �� -AC ��(���� ��� �(����� ���&

�&�� �� �� �� ;A � ��(����+ ������ ?�5� 1�������� ��

���&��� @��(�� �( ��&&�@��1 �(�&&��1� @��( �� ����&���

������& ������ 9(��� ���(�� ������� �(�� ���8, 1���$

����������� ?�5� ����%�&����� ������1 @��(�� �(

��&&�@��1 �(�&&��1� ������� ;A � ��(����3 @(��( ���� ��

��1%��� �(� ����G���� ���8, 1���$��������� ?�5�

����%�&����� �(�� ����� ��@��� � ��� "(� 0 �����&

%������1 ��( ;A ��� ?�5� �� �������� &�����3 �� ����

1���& ����������� �(�� %���&� ������3 @� (���

��������� �(� ��& ��� �� A5; @��( ����&��� ���

��%�������� ��@�����% ������� �� ��&& ����( ��� �(�

����G���� ��� �� ?�5� �� ����&����1 &������ ��� ��� ��$

@�*��3 ����&��(�� ���&��+�

I� �(��&� �&�� � ����� �(�� �� �D�( ��&&�@��1 ���������3

;A &���&� ����DB���11D� �8+ @�� �� ��%�&� �� �(�

&���&� �� ;A ����� �� ������ &��� ������ ��(�����1 ;A�

�K�����' �� ���3 � �+� 9(�� ��11���� �(�� �(� &���& �����$

������1 ������ �� ;A ����1 &����� ��%����� %�1(� �

��������& �� �(� �&� �� ��$�������1 ;A ����1 ;A�� I�

������!���3 � ���%�� &���&� �� ;A ���&� ���� ��% %���$

��������� ���� ���������� @��( �(� ��%����� �� %���$

&������ �(�� ���������� ;A� �A&���> �� ���3 � #+�

?�@���3 �� ���� ��11��� �(�� �(� ����%�&����� �� ?�5�

@�� ��� ���&���& ��������� �� ;A ����%�&������ I� B�;$

;?$C ������3 &���&� �%����� �� ���&��� ����& # ( ����$

�����&����� ��3 �&�(��1( �&��& ��&� ��3 ���(�� @�&�$

� �� &���&� �� ?�5� ����%�&����� �(� ���%���� ���� ��A+

��� ���������� ��1��&� (��� �&�� ��� ������ �� �������$

��� �(� ��������� ��� �� ����������$��&���� ��&&� �:����

�� ���3 � �� ;������ �� ���3 � #+3 ��� @� (��� �����&

�������� � ��� �� �A &���&� ������1 ��@��� B ��� (

@��(�� � ����&����1 ?� &����� �� ������ �:����� �� ���3

� +� 9(�� �(� ��������� �� �(� ��������� ��� �� � ( %�

���� ��% � �A$%������� ������������ %��(����%�

�� !��������� ��� 0������� ����� � �9� ����� �����

���������� � !���� !��� ���:

5� ���� ��1��E����& ����&�� �(� ������������ %���&

����������1 � ��%��%���� ��������� ��� �� B�;$;?$C

�&���� @��( � &��� �� ������� ���������� 9(�� �1��� @��(

�� ������� ��������� �(�� �� ��& ����� �� ��������&

�� �&��� ��������� ��� �� ���3 � !+� 9(��3 �� �(� ���������

��� �� �(� <��(������= �� �(� ?� �C����� �� ���3 � �+3 ���

��&� ���&� �&&�@ �(� ���(�1�� �� ����� �����&�>������

��������� �� ���&��� ���������� @�� ���& ��%�&� ��

�(��� �� ����&��� ������ �� B�;$;?$C ������3 �� @��

��&� �� �� ��%������� 5�(� �� !����� ���& ��� (��� �&��

�(�@� �(�� A5; �&���� ��&& ����( �6(�%���1��& �� ���3 � #�

:�>�� �� ���3 � #+ ��� �������� �� �&��� ��������� ��

���(�1��� �����&� �� ���3 � � 8� �� ���3 � "+� ?�@���3

��(� ������� ���� �� ��&&$���������� ��&���� (���

G��������� �(� &��* ��@��� �(� ��������� ��� ��� ��&&

����( ���1� /�� �� ���3 � � 2&�>��� �� ���3 � "+� 5� ��

!����� %�����%���� �� ?�5� ����%�&����� ����1 ��%$

����&� ����������� �� ��11��� �(� ��������� �� ���$

��������� ��� �����& A5;$����������� ��&&$����( %�$

�(����%� �� �(� �&��������� �� ?� ����� ��� �(�@�+� I� %�

� �(�� ����&��(��1 �(� ����� �&� �� �(� ��������� ��� ��

������� ���������3 �� @�&& �� ����������1 �(� �&� �� ��(�

��1��&� ���1� ����� �����3 /�&&������ �� ���3 � #� /���

�� ���3 � #+3 �@���� �(� ���&����� �� �����&� ������!���

%������� 7����(�&���3 �(� ���� �������� (�� ���G��$

����&& ��%������� �(�� ;A ���� �(� ��%�� �� �������

�������� �� ��M����� �&��� ��������� �� ���(�1����

?�����+��� ����������

3�������� ��� ����� ���� ����� �����

A&& �(�%���&� @�� ������� ��% ;�1%� C�� �-��&�3 4:+� 9(�1�������� �� ����1���� ;�%��� 77 &���� (�� �&��� ����������. A�-��D24; ��� �� ���3 � "+3 -���D24; ��� B�;$;?$C �0� �� ���3 � �+� ?�%�> 1���� @�� 1������� �%����1 �(����(�� �� �(� %�����& &��� ��� �� ��&&�� ��(�������3 ��&&�@��1@(��( ��&&�� ��% �(� ������& &��� @�� ���&��� �� �(� ���1%�� 6���1�� @�� ������ �� �(� ������� �� ���( ����1��� -6��%�&�E������� J��( �����%��� @�� ������� ����1 6� ��1�� ��N�� ���������&�+ ��% �(�� ������ �� 1������ �(� ���&���(�@��

"�# ���� 3�� �� �&�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

��������� �������

����%�����$�������� ���+ ������ @�� ������ ��% @�&�$� ������� ��� ����� �� ��� ����� �� ������ ���� ��� �!!� �������� ��� ����� �� ��� ������ ������ �B#�$�3 � �B ��� ������&& ����&��� ��(� 9� &�3 ?�I3 8�&&������+� I��&���� ������� ��� ����� �� ��� !��������� ���� @�� ��� " ��������#A ��� �(� �������� %����� ���#A..��!C3 ��( �� @(��( �� ��

�����E�&� �� ���3 � �+�

��������� ������;��� ��� �� !���

I����&������ @�� ����� ��� �� ������� 0� �� ��� �� �+ ����1�����&� �� ��# ���%&D�3 ����%���� �������(���%�����&& �5/�"�

���3 ;�% &�� �� ���3 � ##+� J��&���� ��% ��E&����� ���� @����%�&�� @��( � � �% ���%��� ��* �� �� ��� N ��!#� �%�+�-&���� @�� %��������� �� �B�6 @��( � ��( �(���������

���� ���� ��������� !!�������

0������& ����&������ @�� ����%���� �� ���1&� ���� ��% �(�����������& &������ ��� ������� �� �(�� �������� �&���� �� N +�;��1&� ���� @�� 1���� ��@� �� ����& ����&� ��%� �(���(������� ��? !+ ����1 � ����&� -���� 2�&��� ���3 �������& %��&��� %�&� (�����1 �� E� � ���%& %����������1� ���� ;���&��&������ �� �(� �&� @�� �&���� ��� ���� ������� �1� �5����C�%����3 0����1���*�3 4:+ ����&�%����� @��( �� �1%&D� ���%��$���� ��&&�@��1 ��������� �� �#�6 �� ��� �3 ��&����� @��������� ��� �(� ��1���& ����&����� ��>� �������� -���&�������� �������� �� ��&�� $��%��1 ����� ����+ �%D� &��� &�%����������

���� ����� ���� ��������� ��� ��� �������� �� � � ���

+,

J&����& �� &��*�1� @�� ����%���� �� ������� �� �� ����� !+� 6�&& ����( @�� ����%���� J���� 0&�� �������1��������&& �� ������� 0�*� ��� ���* �� �+3 ������ �(������������ @�� ����� ��� �� ��$@�&& �&���� �7�&1� 7���I����������&3 ���(����3 7R3 4;A+� 9(� ����� ���� �������������1 @(��( �(� ?� @�� ��������� �� ������& ������� ��(���� ��(� ��������� ��%�+ @�� ����%���� ��������&& ��E&�����1 �������� ���� @��( ����1%&D� ������% ���� 7� &��������� ���&� � ������� ��% ��E&����� ���� �(�� @������� �� ��&& ����( �(���������� �� �(� ?�3 ��( ���� ����������

%���� ������ 1�� ��������

24; ���������� @�� ���� �� �� ������� 8��� �� ��� �� B+���3 ��� �� ���� �(��1�� �� ������ ������� ���������� @��(�����&���� ������3 �������� �� �%�& �$�4 %��D� �� ���&����

����� �� ������

;�&�� &�� ���� ������� @�� ����%���� �� ���&���� ?-C6 ��������� 0� �� ��� �� �+� 9� ��%������� �� @��� ��� ������&��� ����1 &����� ��%�����3 ;A &���&� @�� ����%���� ����� � �% ���%��� ���&��� ����3 @(��( �� ���������� ������@�� �G����&��� �� ��� 1 �8� ?���� ;A ������� @�� �������� ���1 �� 1 ��1���& �8�

������� �����!� ��� �������<���� +#5#���� ������

9(� �����&�>����� �� ?�5� ����%�&����� @�� ��(����� �������1 @��( 6�6&B3 ��� %�������1 ����% ��( ������ ������$���� �� ���&���� �� &������ 0���@��* �� ��� �� !+� I� �(� ���������� ��& �(�� ����1���� �� ����% ��( ������ ������������� @�� ����1���. �3 �� ��������� �3 ����� ��� ����( � ����3 ������� �������1 ��1��1 ��% ����( �� ���M����� A �&���������%��� �� ?�5� ����%�&����� �� �������� ��%� ������ ���������&�����3 �(� ?�5� ����3 @�� ��&��&���� �� � �������1� ������� �� ���( ����1� � ����1� ����F�3 �(� %���%�% �������1 ����

��%��������+���

8� @��( �� �(��* ��(� 9� &� �?I3 8�&&������3 4:+ �� (�� 1����� ������ �� ����� ��� ����� �� ���(����� 8� �&�� ������$��� �(� ������ �� 2�(�% 0���*�� ��� ���� ;�����1��� ��1�@��1 ��� %���������1 ������ &����� ����� ��� ����� �����(���� �� (�&� ���� �A�� &������ -?� ��B!AF�#B"� C�A����3R�$��0� ��� ��/� @�� �������� 00;�6 1���� I6��!���3I6;��!"� ��� -5�#!�3 ���������& �

����������

�� ��6� ��?�� 3������� ����� ���@��� 3���� ����%�� ��� "����� ������ �+�� #� �� #+ �������� �� 1�� ����%������� %������ �� ���%�� ��1��& ���@�* �� �(� ����&��(%��� �� �&����%%���� � ����3 A!3 !!BD!#��

������� ��� /�������� 3�<� �� ���� 3�$� �� # + ����� ���%�&������� �� ��������� ��� ����1 �&��������� �� ��&���� �&��� ��&&������� ������- AB3 �� D��"�

���� #��:� �� ������� ,��� �� �+ -&��%� %�%��� ������> %� �� ����&��� �� �(� � ��(���� �� 5�

D ��� ?�5� ����!����� �&�����$���%�&���� ��� ��&&�� ����� ������- �BC3����D���!�

%��� #��� �� ���%� 0��� �� �+ A� �%����� %��(�� ��%�������1 ��&& ����( �� ��&& ���������� ��� &��� ���� ���� �����1 J���=� 0&��� ����� ���� '���- 5� �� ����- 1A3 !D���

%��� #��� �� 8������ ?�(� �� �+ A����� �� 1�� �� �&������(�1������� ���- ,��- ����!����- 113 � DB���

�� 0���� 8��� ��� 0�� (�,�� ����+�� ��� 0��������� ,�� "�������3�(�� "����� ����� �+�� #��� �� ?�%���� &� �� �+ O������������&������(�� ��@��� �(�� &�&����� �%%���� &���&� ����(�� &�������� ����%�&����� �� ����1���� ������������E�� � ���$����%����1 ���� �� �����& ������ � ��(��������- (��� ����- ���- ���3 A�3 !"�#D!"���

�����%� #�$�� ����� ����� ����� ��/� �� ���)���� ��(�

�� !+ C���&������� �� ( ��1�� ������� ����%�&����� ����1�(� ( ����������� ������� �� &������ ��&&� �� ����� �������� �� ��� !���������� ����� ����3 A3 �� D����

�� &����� :����� 3�� ���� ��� "���� �� �� "����� �� �� �+? ��1�� ������� ���� ��� �������� ��@�����% �� ��&�� &������ �� �(� ��������� �� -� ������ ���������� ����� .- D3 �B�D����

������ "���� :@�����+� 3� �� �+�� #��� �� �+ J&�����$ ���@����$������� ��������� ����$&��*��1 �� � ��&���$��( �&�����&& @�&& ������. � ����&3 ���� ������� �������� ����� ����3 CB3��DB��

#�� /�� ������� $���� 4������ ��$� �� "���� E� �� �+6(������������ �� �� A�������� %����� �(�� �� ���$

�� !��������� ��� 0������� ����� �� +, "�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

��������� �� ������� �� � ���%�� ��G���� ���������� ���������3 >3 ��#BD�� ��

#�+�������� $�� (����%���� /�� ������� (�� ���������� #��$����+��� /�� ��� F� ������ ��� ��6�� "� �� F� #+��(� �� #+ /������ ���������� ��� ��(����� ���(�1�� ��&������������ ?�5� �� ����1���� ������� ���- (��� ����- ���-���3 A23 �#�#D�#�B�

#���� G�E�� $�� � /� �� :������� "�<� �� B+ A����� �� 1��������� �� �(� ��������� �� �&��� � ���%�� ��G���� ��������� ��&� &�� ����� �������3 !>!3 �##BD�##"�

#��%�� ��"�� ���� &�� :������� "�<� �� "���� E� �� #+ 4�����&��1-� 1��� ��������� ��% 7-�� ��� ������& ���������.�(������>����� �� �(� ��%����� A�������� ��"$� %����������� ����3 �B3 ��!D�" �

"������ ,�3�� <��������� �� �� ����� ���� �� �+ ������!�����1��&$����������� %����� ��������� �� �(�%���&& �����&�1���&& ������� ������� ���������� ���- (��� ����- ���-���3 A!3 ""��D""�"�

"������ ,�3�� 5%���� $�� F������@� � �� �� �� �+ A �����& �&� ����&�� &�� ���� �� �&��� ������� ���������� �������3 !>>3 ���!D�����

"���������� ��� E�� &�� "����� ���� �� �+�� #� �� #+ 7��������� ��������� �� � ��1��& �� �&��� ������� ���������� (�����31A=3 �#�D�##�

"�%�� 0� �� #B+ I���&��%��� �� ��������� ����� 1�������� ���(� ( ����������� ������� �� ������ ��� ������ �� ���������@��( �� ����%����&� ��� �� ����!����� �������� ��� �� �(�( �(�& @�&& ��%�������� ������- ����� �����- !13 B��DB�!�

"����� $�� :���� ��� 4�������� 3�� <����� � �� :���+��� $��� + ? ��1�� ������� ��% �(� ��������� ��� �� ����(�������� �� ���E����� �� ( ����������� ��&& ����( ���������3�(�� &�&����� �%%���� & ��� ���%�&�����3 ��&�� &�� ��������%�&�����3 � �����&���� �����%����� �� ��&���� ��������&&� ������ @��( �&������� ����� ������- �!�3 �"BD�!��

"������ ��� (���������� "� �� :������� "�<� �� #+ /������ 1������������ �� ������ ����� �����3 � �&�� 2�-3 ��� � �&��A/-$����� ���- (��� ����- ���- ���3 A23 ��B�#D��BBB�

"����� $�#�� ��������� ��� ���� 3�$� �� ���� ,��� �� "+ -&������ (�%�� ������(�& ��������� ��� ��%�&���� ��������%%���&�1���&& �&���� �������� ����� - ��!���- ����3�!DA3 �B�D�B!�

<���� /�/� �� �"+ 2������� �� ������� �� ��� �� M��� .- � ���- ,��-C13 "#�D"#��

<��������� ��� F������@� �� 4������ ,�� ������ �� �� ����� ���� �+ 6(������������ �� ������ �&���� ��������1 � ������&( ��� &��� 1���� ����� 3�- ���- !A3 � D "#�

4������ ,�� <��������� ��� F�����@�� �� 0������ "�� 0��� 4��5%���� $�� (��� ?�� :���+��� /� �� ����� �� �� B+��G���%��� �� ��&�� &�� ���� �� �(� ��������� �� � ���%����G���� ���������� �������3 !>�3 !��D!�"�

4�6����� ����� 8������ ?�(� �� %��� #��� �� "+ 9(� �������� 1�� ������� �� ��&& ����������� �� ����%����&� ������ ����� ���E����� �� ����� ( ����������� ��&& ����(� ����� ������-��B3 !� D!"B�

4���+� H���� ,������ ����� <����+�$%����� ��3�� /++����:���%� :�?�� ��������� 0��� �� ������ ��"�4� �� "+ ,���3 ���� (�%�&�1�� �� �(� %�%%�&��� !/� !�0 ������� ���������� 1���� ����� .- �B3 ���D����

������ "�� ,����� ,���� ������� ,���� <���� ��0�� <���� ���� 3�%�����?�� �������� <��� �� 4�6�����%� �� �� + ������!����������� -A/� ������� � &�����$&�*� 1��� �(�� �� �%������ ����&�� &�� ���� ��1��&��1� ���- (��� ����- ���- ���3 A>3 �B�#BD�B�##�

:���� /� �� ������%� (� �� �+ -�����%��� �� ���&�

���������� ��&���� @��( ��&�� &�� ���� ��(����� �������������� �&������ ��������� �� ?�5�� ����� ������- �BD3 ��!�D��!#�

:���� /�� ,����������/��%��� ?�� ������+��� �� �� #����� 5��� �+ /��(&����������������� ���� ��� ��&�� &�� ����3 ��������� � ���%�� ��G���� ���������3 ��(���� ���1�& �&������������� �� ���&� � ����� .- !3 "!�D"���

:���� /�� ������%� (�� G������� �� �� :����� (� �� �+-�����%��� �� ���&� ������������ ����!� C�+���������� ��&���� @��( %��( &'��%����� ��(����� �(��&��������� �� ������ �� 1�� �������� ����� ������- �B23 # D ��

:6�� :�� ������ <���� 4������ :�#�� ���������� "��� ��������� ���� �� #+ I�������� �� ��&& ����( �� ����1�����&���� ��������1 � ���1�& 1&����� �������- 3�- �����=3�������������- ��3 ���D�"��

:���� 0�,� �� �+ 2���$��$1��� ��%�&�%������ �� �&���D���(�1�� ������������ ���- ,��- 1����- !=3 ��!D�"B�

:������ ,�� "+���� /�4�� (������ "�� "������� 3�� "����� ���� ���+�� #� �� #+ A �&��� (�%�&�1 �� �(� ������(�& 7A/-?������� !/� �!�0+ ������ 1��� ������� � �&��%�%�%��� ������ @��( 6��� �����1 %������ ����� ����3 �B3���D�""�

:����� 3�� ���� ������� �6���� ��� (�����%� #� �� "����� ���� + �$+$���%���� ���� ����%�&����� �� ������( ����������� ������� &������� 3�- �����=3����� ��������-�!3 !�D!#�

�+�� #� �� "����� ���� �� !+ 9(� ��������� ��� �� �&���������� ���������� ���- ,��- ����� ������- =D3 ���D�!��

�+�� #�� ����� ����� "���� �� �� "����� ���� �� # + ;�1��&���� ����������� %��(����%� �� ���������� �� �&��� ���������1����� %�����& �����*� ����3 2>3 ���D����

����� ��� ����� ���� �� ��%��� �� �� �+ ? ��1�� ����������%�&���� ��&�� &�� ���� ��� ��(���� �� ������� ����� ������-�BD3 �"!BD�"!#�

�� ���� ��� ,���%��� ��� "����� �� �� �+�� #� �� �+ ?�5� ��%�(� ��������� ��� ��(������� �(� �&��� ( ������������������ ��������� �������� ����3 CA3 �D���

�� ���� ��� 3������ ����� �� ��6� ��?�� 3�+��� �� �� �+�� #��� "+ 6�&���%$%������� ��������� �� � �&��� ( ������������������ ��������� �������� ������� ���- >3 ��!D�B!�

���� 3�$� �� "����� $�#� �� �+ 6�%������ �� �(� ������������ ��1��&&��1 ���(@� �� �&���� ��� (�%�� ������(�&�� I�.�������� �� 3������� 1������� �����=3����� ������������$ �/����&�3 ���� �� ���3 ���+� /����(�. :&�@� A����%��-�&��(��3 ��� B"�DB" �

��+�� ��� #��� ��3�� :������� "�<� �� ��%��� �� �� �+ ;�&�� &������. � &�*�& ����1����� ��1��& �� �(� ��������� ������� �������� �� ���& ���������� �������3 !2B3 ����D�����

���)���� ��� ������� #�� /��%������� ��� ����� ���� ��$���� �� �� �+ 6(������>����� �� ����!��� � 1��� ����&����$�����E� ����&���� ��% ����� ��� ����� �� ���!��������� @(��( �� �( ����&& &��*�� �� ��!R3 � ��@ ��! 1���������E�� �� �(� (�&�$&�1(� ������%� 3�- �����=3�������������- C3 !�"D!B �

������ �� �� �+ A����� �� 1�� ������� �� �&��� ������� �1��������(�1���� ����� ������- �B23 �"!D�!��

������ ��3�� $������ /�� ����� �� �� �� �� �+ I������ �� ��&�� &������ �� �(� ����� �� � ���%�� ��G���� ��������� �� ����%���������3 !2B3 ����D���"�

������ ��� /���� ?�/�� 8� �� ���� � #+�� (�� (����%���� /����6�� "� �� ?����� �?� �� + 9���1���� ������ �&���� @��(������ �����&�� �� ������� ������� �� 1�� ����%��������� ( ����������� �� ���(�1�� ���������� ���- (��� ����- ���-���3 A>3 ���"�D���!��

���� ������� 0����� 4�� (����� $������ $����� ����� (���� ��<�

"�� ���� 3�� �� �&�

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��

�� "����� �� �� "+ ;�&�� &�� ���� ����������� ������� 1������������ �� ������ ��(�����1 ��G���� ��������� �� ���(�1�������*� ����� .- A3 �� D�!��

���� ������� �� &�� �� "���� ����� <���%� $� �� "����� �� �� !+6�%��%����1 ��& ;A ����%�&����� ��&� � �(�( ����������� ������� ��� �������� ���& �������& ����1&����� ����&��(%��� �� 9�K$�������� ������� ����� .- �!3���BD���"�

������� ,��� �� ���� #��:� �� "+ 9(� ��������� � ��(���� ���&��%� %�%��� ���������� ��% ��&���� ��� ��&&�� �����������- ��B3 "��D"� �

0���� #� �� ������ ��3� �� + ;�&�� &�� ���� ���������$��E����� %������ �� A�������� ������ -�$� ��� -�$� �������%�&��� (�1( &���&� �� ��%�&���� ���� ���(�1�������&������ ����� ����3 ��3 �B BD�����

0������� :�:�� �@���� :�� #�������� "� � �� ��%%������ ��"� �� �+I������ ��������� �� ��1� ��� �1����� �����!�� �������.��������� ���(&�������������� ���� �� ����������� ���(������� ��� �$�3B$1&������� �������� ����%�&������������- ����� �����- =23 # D �

3���� �� �� :��� �� �� �+ -��������$1������� ( ��1��������� �� � ����� �� �������1�& ������� �� ���� ��� �������� &��� ���*�� ����!���� �3 D!3 " "D" �

��%��� �� �� �+ ��&� �� ��&�� &�� ���� �� �&����� ���- ,��- �����������- =13 �B D�"B�

����� ����� 0������������� 5�/�� (������ ��4�� ������ ���$������ /��&� �� /��� ��"� �� "+ ; ���%�� ��G�������������� ����� ����3 D3 �#� D�#� �

$���� ��(� �� ���� �� �� B+ 9(� ���(�%���& ���� �� �(�7A/-? ������� �� �(�1�� ���� '����� ����� - ���- �D3�BD�!�

$������ :�� 0%@�+� /�� �@��%��� F�:�� "����� ���� �� �+��#� �� !+ ;�&�� &�� ���� ����������� �� �1�����$��������� 1��������& �(�� �%�&�E�� ���(�1�� ��1��&� �� �(� ���������� ��������� %��(����%�� ����� ����3 A3 �"�D�!��

$�� ��+�� 3�� 0��%���� ?�� &�� $�� :��� �� �� ��%��� �� �� B+

;�&�� &�� ����3 ��( &��� ��� ���(�1�� ��������� �� �������3�- �����=3����� ��������- >3 !!�D!#��

$�+���� 4�� $��� ��� /� ���� ��� ?��:��� $�� :��+��� G� �� :���#� �� ##+ 9(� �&������(�� ��@��� �(� 1�@�( ��� ������� ��� ����� �� ���(���� ��� �(� ( ������������������ �� ������� ������- 3�- ����� �����- 113 �!BD�#��

$������ ����� #����� $�� ���� #��� �� ���� 3�$� �� #+; ���%�� ����������� �(� ��������� ��� �� ��&���� ��%�����&&�� ����� ������- ��C3 ��B�D��B"�

,������ ����� 8������� /�� /+�� $�� ������ #�� /++����:���%� :�?� �� ������ ��"� �� #+ ;�� ������!��� ��������(�%�&�1��� �� �(� (�%�� ������� ��� �������� !/�!�0+� ����� .- �=3 B"�DB!��

5%���� $�� (����� ����� "������ ,� �� �� �� B+ 0��&�1���&��������� �� � ���%�� ��G���� ��������� �� ������!���� 3�-�����=3����� ��������- >3 " �D" #�

F������@� �� <��������� ��� ������ ��� ����� ��� :����6������ ���(��� ?�� 5%���� $�� :���+��� /� �� ����� �� �� �+ ;�&�� &������ �� ��� �(� ����&������ ��1��& �������&� �� �������1� ���%�� ��G���� ��������� �� �� �G���� �� ��1��&������������ ����� ����3 >3 � D "��

(��� ?���� 5%���� $���� (����+�� $�#�� "������� $�$�� (����������"���� ��������� "�#�� ����4��� 3�� ��I ���� ���3� �� ����� ������ �+ 6�������� 1��� ������� �� ������� �� �1���� �(�������� � ���%�� ��G���� ���������� ����� ����3 13 ��#�D�� ��

(����� $������ $��� �� �� "����� �� �� B+ I��&����� �� �������1�� ������&&�&� -� 1��� �A�-��+ @����$�����������%��� �(� ������ ��& %���� �(��� ������� ��� ����(������������ �� ����1���� ������� ����� .- 13 � �D����

E���� ,�� /������� F��� �� ��+���� ?� �� !+ ����$�����E��&������ �� �����!��� ���� ��%��� ����&������� ��� ����&�� ��%������� �� 7A/-? ������� �� �(� �&��%�%�%��� �� ��%��� ��&&�� ����� ����3 A3 �� D�� �

G���� 0�� ,����� ,���� ,���� <�� :������� "�<� �� 4�6�����%� ���� #+ -A/� ��������� ������% ��% ��&�� &�� ���� �� �����&������� �������� �� A��������- ����� ����3 �B3 ����D��B��

�� !��������� ��� 0������� ����� �� +, "��

� 0&��*@�&& ;������ C��3 '�� ����� .������ �����+3 !1� "� D"��