البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

المختبر الرابع والخامس Streptococci المكورات المسبحية

المقدمة Introduction

تسبب المكورات المسبحيه )العقدي**ه( طي**ف واس**ع من الام**راض والاص**ابات حيث تعت**بر المس*****بحيات المقيح*****ه

Streptococcus pyogenes المس******بب الجرث******ومي الاساسي لالته**اب البلع**وم والنس**يج الخل**وي كما انها المحفز لمرضين مناعيين هما الحمى

الرثويه والتهاب الكبد والكليه الحاد. تضم المكورات المس**بحيه

انواع مهمه طبيا منها :

الصفات العامه المكورات المسبحيه

هي مكورات كرويه الشكل ايجابية لصبغة كرام تتشكل

على شكل سلاسل او ازواج وتتميز كل المسبحيات بكونها سالبه لفحص الكاتاليز )بعكس المكورات(. غير متحركة ، هوائية )لا هوائية

اختياريا( ولا هوائية مجبرة ، غير مكونة للسبورات :S.

pyogenesS.

agalactiaeS. bovis

نوع التحلل على اكارالفا/كامابيتابيتاالدم

ABDتصنيف لاينسفيلد---Catalaseفحص

1

مكورات مسبحيهاللاحليبيه

Streptococcus agalactiae

مكورات مسبحيهالبقريه

Streptococcus bovis

مكورات مسبحيهرئويه

Streptococcus pneumoniae

مكورات مسبحيهمقيحه

Streptococcus pyogenes

مكورات مسبحيهمعويه

Enterococcus

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

الحساسيه للbacitracin )0.04

units(+--

مقاومه صبغة الكريستال فايوليت بتركيز1:500000

+--

-+-NaCl % 6.5النمو في الحساسيه للOptochin---

يتم تصنيف المكورات المسبحيه اعتمادا على : نوع التحلل الدموي على وسط اكار الدم.1

(Hemolytic Properties)

نوع التفاعل المصلي )تصنيف لاينسفيلد.2Lancefield Grouping)

Lancefield Classification تصنيف لاينسفيلد تمتلك معقد متعددStreptococciالعديد من اجناس ال

( في جدارها الخارجي ويعرفPolysaccharideالسكرين ) ( والذي يعتبر مستضد سطحي منC-Carbohydrateباسم )

السهل اتحصاله بواسطة حامض مخفف. صنف لاينسفيلدStreptococciذات التحلل الدموي نوع بيتا الى مجاميع تبدأ

-C اعتمادا على مركب المستضدي U الى ال Aمن Carbohydrate تعتبر المجاميع المصليه نوع .A و Bذات

التحلل الدموي نوع بيتا من اهم المجاميع طبيا.

2

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

Pathogenesis الامراضيه Streptococcus pyogenes

التهاب البلعوم واللوزتين Acute Pharyngitis or Pharyngotonsillitis

الحمى الرثويه الحاده Acute Rheumatic Fever)الحمره )التهاب جلدي Erysipelasالتسمم النفاسي Puerperal Sepsis

Macrolides و Penicillin: العلاج

Streptococcus agalactiae

3

السموم الحاله للخلايا والانزيمات الخارجيه التي تفرزها المكورات المسبحيه المقيحهCytolytic Toxins & Exoenzymes produced by Streptococcus pyogenes

1.Pyrogenic Exotoxins Rashيس**بب العدي**د من الت**اثيرات ، من ض**منها الحص**ف

.Streptococcal toxic shock disease و Scarlet fever اثناء2.Streptolysin O & Streptolysin S

مسببا في تحلل الخلاياMammalian cellsيحطم خلايا .Lysosomal enzymesومحررا الانزيمات الحاله

3.Streptokinase الىPlasminogenان***زيم ل***ه القابلي***ه على تحوي***ل

Plasmin مس**ببا تحل**ل وتفك**ك الخ**ثره Clotsمس**هلا بذلك الانتشار السريع للجرثوم في نسيح المصاب.

4.C5a Peptidase C5aيقوم بتعطيل دور مكون المتمم

5.Streptodornases الل**زج فيDNA يق**وم بتحطيم DNAان**زيم ح**ال ل**ل

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

التهاب السحايا والتسمم الدموي عند حديثي الولاده Meningitis and Septicemia in Neonates.

التهاب بطانة الرحم Endometritis.اصابات القدم لدى مرضى السكري Diabetic foot

infections.التسمم الدموي وذات الرئه لدى المرضى ذوي الضعف

المناعيSepticemia and Pneumonia in individuals with

impaired immune systemAminoglycosides و Penicillin: العلاج

العينات : مسحات البلعوم والفم والاسنان ، القيح في حالات التهاب الجروح ،

الدم، القشع ، الاصابات القيحية السطحية ، نخاع العظم ، الادرار

والسائل البريتوني. الفحص المباشر :

مكورات موجبة لصبغة الكرام تتجمع بشكل سلاسل قصيرة وطويلة ،

منفردة او بشكل ازواج.الوصف المزرعي :

م ومعدل42-22البكتريا لا هوائية اختيارية ، تنمو بدرجة م تنمو في الاكار المغذي الاعتيادي وبشكل37نموها

افضل في اكار الدم او اكار المصل . تظهر مستعمرات صغيرة نصف شفافة قليلة التحدب متباعدة سطح

المستعمرة غير لماع في حالتها الطازجة اما في الزروع الثانوية يصبح السطح ناعما براقا وعند تكون الكبسولة

يصبح سطح المستعمرة لزجاً اما في الوسط السائل فتنمو بمظهر حبيبي مع تكون راسب مسحوق في القعر .

وفي وسط اكار الدم يلاحظ التحلل بصورة واضحة .

الاختباراتاختبار قابلية الذوبان البكتريا في املاح الصفراء.1

4

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

sodium مل من محلول 0.5وذلك باضافة taurocholate ( الى وسط المرق المغذي10 )تركيز%

م لاحط اختفاء العكورة خلال37وبعد حضانة في درجة دقيقة(.15فترة قصيرة )

اختبار قابلية الذوبان البكتريا في املاح الصفراء:/محلله2 /غير محلله 1

لفحص قابلية البكتريا على تكوين انزيم الستربتوكاينيز .2 مل من بلازما انسان في انبوب اختبار ، يضاف0.5يوضع

مل من محلول كلوريد الكالسيوم المخفف )يساعد على0.5 مل من زرع البكتريا في0.5تخثر البلازما( ثم يضاف

% دم انسان الى الانبوب الحاوي على7البروث الحاوي على م لاحظ37البلازما وكلوريد الكالسيوم ، يحضن في درجة

ثم ذوبان التخثر ثانياً . وقت تخثر البلازما اولا

Hippurate hydrolysisفحص الهيبيوريت .3 يجرى هذا الفحص لتحديد قدرة البكتريا على تحليل

Hippurateبواسطة انتاج انزيم Hippurate hydrolase حيث تحلل Sodium hippurate . بعد حضانهGlycine و Benzoic acidوتحوله الى

Sodium hippurate% 1الوسط الحاوي على م لمدة ساعتين.37مذاب في ماء مقطر بدرجة

الى الانبوبه الحاويهNinhydrinيضاف محلول ال دقائق،10ععلى الوسط اعلاه وتحضن لمدة

فان لون الوسطGlycineاعتمادا على وجود ال يتحول الى الازرق وبخلافه لايظهر اللون.

الفحص السيرولوجي .4 .Sيجرى هذا الفحص لتشخيص وتاكيد الاصابة الاولية ب*

pyogenesوالتهاب الحنجرة يجري الكشف عن الاجسام (ASO( والمسماة )SOLالمضادة لسموم )

5

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

Antistreptolysin Oالتي قد تتواجد في دم المريض في وحدة(200 عال )اكثر من Titerتسحيح

CAMPفحص .5:معنى هذة الحروف هى تتبع لمؤلفى هذا الفحص

C=Christie: A=Atkinase: M=Munch: P=petrson CAMPعبارة عن بروتين يتم انتاجة بواسطة بكتيري**ا تس**مى

S. agalactiaeالهدف من الفحص: يس**تخدم ه**ذا الفحص . .S فى تش***خيص وتمي***يز بكتيريا agalactiaeعن ب***اقى

Streptococcus. فكرة الفحصCAMP factorيعمل على استحثاث السموم الموجودة فى

.Sطبق اكار الدم التى تفرزه**ا بكتيري**ا auresفيتف**اعلا م**ع بعضهما البعض مكون**ا منطق**ة تش**بة الس**هم على اك**ار ال**دمكيفي******************************ة عم******************************ل الفحص

بشكلS. aureus نحضر طبق اجار الدم نعمل على زراعة .Sراس**ى نعم**ل على زراع**ة agalactiaeعم**ودى على درجة مئوية37 ساعة عند 24الزراعة الاولى حضانة لمدة

ملاحظة هامةعند عملية الزرع يجب ان لا يتم ملامسة كلا الخطين.

النتائج بع****د انته****اء

التحض********ين نلاح**ظ وج**ود منطق**ة تش**بة الس**هم وه**ذا دلي**ل على ان

S. agalactiae

له***ا الق***درة على انت*******اج

CAMP FACTOR

6

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

هذة الصورة توضح منطقة السهم التى: الصورة الاولى لها القدرة على انتاجS.agalactiaeهى دليل على ان

CAMP factor:هذة الصورة دليل على. الصورة الثانية CAMP factor على انتاج S.pyogensعدم مقدرة

ASOفحص ال* .6 يجري هذا الفحص للكشف عن الاجسام المضادة لتوكسين

المتواجدة في مصل دم)O )SLOستربتولايسين نوع يحل كرياتSLOالمريض تعتمد هذه الطريقة على حقيقة ان

مخففا منSLOالدم الحمراء في حالته المختزلة. يحضر راشح الزرع السائل الجرثومي الحال للدم .

التصنيف السيرولوجي صنفت المجموعة الاولى )تحلل دموي( الى عدة مجاميع سيرولوجية اعتماد على المستضدات الموجودة في جدار

الخلية البكترية وان التصنيف يتم بملاحظة تفاعلات الترسيب وعلى هذاSomatic antiseraمع المصول الممنعة الخاصة

مجموعة ويسمى هذا التصنيف17الاساس صنفت الى (.Lancefield Groupingبتصنيف لاينسفيلد )

S الى Aوقد عملت المجاميع المصلية ابتداء من مجموعة من المجاميعA تعتبر مجموعة I و Jمحذوفا فيها الحروف

.Sالمهمة حيث تسبب اصابات عديدة للانسان منها بكتريا pyogenes

7

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

المختبر الخامس Streptococci المكورات المسبحية

المسبحيات المعويهEnterococci

( ضمنFecal Streptococciتصنف المسبحيات المعويه ) والذي تشترك معه بالكثير منStreptococcusجنس ال

نوعا وتعتبر20الصفات والخصائص. وتضم اكثر من Enterococcus faecalis و Enterococcus faecium

من اهم اجناسها طبيا General الصفات العامه

Characteristics

8

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

مكورات موجبه الغرام تكون خلاياها بشكل ازواج او سلاسل. على وسط اكار الدم تعطي تحللا نوع الفا او بيتا. مقاومه

، تنموOptochin% ومقاومه لل* 40لاملاح الصفراء بتركيز NaCl°م. ومتحمله للاملاح )تنمو بوجود املاح 45بدرجة %(.6.5بتركيز

Viridans المسبحيات المخضره streptococci

تصنف ضمن المسبحيات والتي تحوي العديد من الجناس الممرضه ، سالبة الكاتاليز محلله للدم بنوه الفا او كاما

معضم اجناسها تكون اختياريه المعيشه ضمن الفلورا تعتبر احدىStreptococcus mutantالطبيعيه للفم.

ولها دور مهم في تسوس الاسنان، كماViridansاجناس ال لها دور رئيسي في اصابات الصمامات القلبيه في حالات

.Endocarditisاالتجرثم الدموي مسببه المسبحيات الرئويه

Streptococcus pneumoniae وكذلكPneumoniaتسبب الاصابة بمرض ذات الرئة

مسؤولة عن التهاب القصبات والتهاب السحايا والتهاب الغشاء الداخلي للقلب والتهاب الاذن الوسطى غير متحركة لا

تكون سبورات تحتوي على محفظة، لاهوائية اختيارية تشبهViridansبتحللها الدم الجزئي على وسط اكار الدم مخمرة

للانيولين وتذوب بفعل مادة الصفراء وحساسة للاوبتوكينOptochin.

9

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

Streptococcus pneumoniaeالاصابه البكتيريه الحاده بذات Acute bacterial pneumonia الرئهالتهاب الاذن الوسطى Otitis

mediaالتهاب السحايا Meningitis

Cephalosporin و Penicillin: العلاج :العينات

القشع مسحات البلعوم ، سائل النخاع الشوكي او مسحاتالاذن .

: الفحص المباشر تترتب البكترية في مجاميع ثنائية او سلاسل قصيرة جداً موجبة لصبغة

غرام. : الوصف الزرعي

لاهوائية مخيرة تحتاج الى ظروف في زرعهاCO2 % 10-5تحوي

الاولي. تبدو مستعمراتها على وسط اكار الدم صغيرة ومسطحة وذات

سطح املس وحافة مرتفعة تحل الدم جزئيا وتحدث عكورةفي الوسط السائل .

ازرع في المرق المغذي الحاوي على الانيولين اتركها.1في الحاضنة / ولاحظ التنمية .

افحص ذوبان البكتريا في املاح الصفراء ..2 .Optochinافحص حساسية البكتريا لمادة ال* .3 )فحص انتف**اخQuellung(** Neufeildاختب**ار تفاع**ل ).4

الكبسول( يج**ري ه**ذا لتفاع**ل الاختب**ار في حال**ة ت**وفر المصل المضاد لكبسولة حيث تؤخذ قط**رة من المص**ل المضاد بواسطة رأس السلك الناق**ل وتض**اف الى ج**زء من النموذج المرض**ي او الى معل**ق من الجرثوم**ة على

10

البكتريا المرضيه والفيروساتالعملي

المختبر الرابعوالخامس

سطح شريحة زجاجية ثم تغطى الشريحة بغطاء وت**ترك لم**دة رب**ع س**اعة افحص بع**دها تحت المجه**ر س**تلاحظ

انتفاخ الكبسول بعد تفاعل مادتها مع المصل المضاد.

S. pneumoniaeViridansالصفةstreptococci

بيضوية الشكل تترتبالشكلبشكل مزدوج

تظهر على شكل سلاسل من كريات

مستديرةغير موجودةموجودةالكبسولة

التحلل على وسطالفاالفااكار الدم

زرعها على الوسط نمو حبيبي يكونتعطي عكورة منتظمةالسائل

راسب ذوبانها في املاح

لا تذوب تقاومتذوب حساسةالصفراء تخميرها لسكر

غير مخمرةمخمرةالانيولين حساسيتها للمضاد

الحيوي ال*Optochin

مقاومةحساسة

11