•al 14° giorno di norma si ha l’ovulazione •la cellula uovo, rivestita dalla membrana pellucida e dalla corona radiata, estromessa dalla superficie ovarica è proiettata verso la cavità addominale• di solito viene captata dall’estremità addominale delle tube uterine •è la porzione infundibulare della tuba dilatata ad imbutoo infundibulo •presenta lunghe digitazioni che vengono dette fimbrie • La cellula uovo inizia così il suo tragitto all’interno delle tube

cenni sull’anatomia delle tube uterine• le tube uterine hanno una lunghezza di circa 10

cm• procedendo verso l’utero in senso latero-

mediale le tube presentano 4 porzioni:• 1) porzione infundibolare (già vista)• 2) porzione ampollare

– ha un lume ampio– la mucosa si solleva in pieghe– la cellula uovo soggiorna al suo interno 48 -72 ore – a questo livello può avvenire la fecondazione

• 3) porzione istmica – caratterizzata da una riduzione del diametro del lume

• 4) porzione intramurale – è l'ultima porzione – è contenuta nello spessore della parete dell'utero

Descrizione delle tube uterineIn una sezione istologica della parete si trovano:• tonaca sierosa• tonaca muscolare formata da tessuto muscolare liscio • tonaca propria costituita da tessuto connettivo lasso• Epitelio di rivestimento formato da due tipi cellulari– 1) cellule dotate di ciglia vibratili : • le ciglia aumentano di numero sotto l’azione degli

estrogeni– 2) cellule secernenti: producono un fluido che

contiene nutrienti• la secrezione aumenta sotto l’azione del

progesterone• I nutrienti sono utilizzati da:– cellula uovo al suo passaggio nelle tube– spermatozoi: nel caso si impegnino nelle tube

per dare luogo alla fecondazione

Dalla fecondazione all’inizio della seconda settimana

• la fecondazionee le prime divisioni dello zigote avvengono lungo il tragitto della cellula uovo all'interno delle tube uterine

prime divisioni dello zigote, morula• dopo che i cromosomi si sono disposti sulla

piastra equatoriale inizia la prima divisione mitotica dello zigote che da vita a 2 cellule dette blastomeri

• le successive divisioni formano 4,8,16 cellule (blastomeri)

• le divisioni non perfettamente sincrone possono dare anche numero dispari di cellule

• si costituisce una struttura che prende il nome di morula, costituita da un gruppo di circa 16-32, cellule che all’inizio mantengono la forma sferica

Differenziamento iniziale delle cellule embrionali

• Il microambiente delle tube influenza l’espressione di alcuni geni nelle prime cellule embrionali o blastomeri–OCT4 (Octamer-binding Transcription Factor 4):– NANOG– SOX2 (Sry related HGM-box 2)

• Questi geni codificano per enzimi capaci di mantenere le cellule nello stato indifferenziato (cellule staminali embrionali dotate di totipotenza differenziativa)

Ulteriore differenziazione delle cellule della morula

• Le cellule periferiche si differenziano e diventano le cellule del trofoblasto

• Queste modificazioni sono sostenute da BMP4 (BoneMorphogenetic Protein 4):• inibisce l’espressione dei geni della staminalità (OCT4 , NANOG e

SOX2)

• fa esprimere CDX2 (Caudal type homeobox trancription factor 2)

• Le cellule del trofoblasto esprimono molecole di adesione intercellulare come:

• I-CAM (Inter Cellular Adhesion Molecule)

• Selettine

• Integrine

• Ridistribuiscono altre molecole di adesione: E-CADERINE

compattazione• La ridistribuzione delle molecole di adesione (E-

Caderine) determina un cambiamento di forma delle cellule:

• Le E-caderine mediano interazioni omofiliche tra cellula e cellula con la costituzione di giunzioni tra le superfici cellulari

• le E-caderine si legano al citoscheletro interno di actina dei blastomeri mediante catenine

• nelle cellule più periferiche della morula le E-caderinesono espresse prima su tutte le superfici e in seguito solo sulle superfici baso-laterali

• ciò determina riorganizzazione dell’architettura cellulare dei blastomeri e conseguente cambiamento della forma cellulare (da sferica a poliedrica)

• Le cellule adattano le proprie superfici le une con le altre

• tale modificazione viene definita compattazione

istologia delle cellule della morula• in questa fase è possibile distinguere uno strato di

cellule periferiche che appaiono più chiare e un gruppo di cellule più scure all’interno

• è più evidente in sezioni della morula colorate con metodi istochimici

• le cellule periferiche sono unite da giunzioni strette (occludens)

• le cellule più scure interne costituiscono la massa cellulare interna (ICM)

• le cellule interne più scure stabiliscono contatti tra le loro superfici laterali mediante specializzazioni del tipo nexus

• la presenza delle giunzioni nexus determina una integrazione funzionale tra le cellule della massa cellulare interna

modificazioni della morula• all’interno della tuba uterina si hanno ulteriori

trasformazioni della morula che portano alla costituzione della blastocisti

• tra le cellule della morula cominciano a comparire piccole cavità ripiene di liquido richiamato dall’esterno

• Il liquido è trasportato dalle cellule periferiche più chiare che dispongono di pompe Na/K ATP dipendenti, e aquaporine (canali per il passaggio dell’H2O)

• le cellule della massa cellulare interna si distaccano dalle cellule periferiche

Si costituisce la BLASTOCISTI

dalla morula alla blastocisti• le cavità ripiene di liquido confluiscono tra di loro• danno luogo ad un’unica cavità più grande chiamata

blastocele• la cavità del blastocele è delimitata dalle cellule più

chiare del Trofoblasto che si trovavano alla periferia nella morula

• le cellule del trofoblasto formano l’involucro della blastocisti

• le cellule più scure della massa cellulare interna (IMC) dal centro della morula vengono spostate ad un polodella blastocisti

• galleggiano al di sopra del liquido contenuto nella blastocele

• rimangono applicate alla superficie interna del trofoblasto

LA BLASTOCISTI• la blastocisti è costituita dall’involucro (trofoblasto) che

delimita una cavità contenente liquido (blastocele) • le cellule della massa cellulare interna sono applicate ad

un polo della blastocisti (nodo embrionale)• la parte della blastocisti che contiene il nodo embrionale

viene detta polo embrionale della blastocisti• la parte della blastociti opposta a quella che contiene il

nodo embrionale viene detta polo abembrionale• il nodo embrionale (cellule staminali embrionali) sarà la

sede di origine del nuovo essere • il trofoblasto costituirà gli involucri esterni all’embrione • la blastocisti si è costituita nell’ arco di 4-5 giorni dopo la

fecondazione

annidamento della blastocisti• la blastocisti giunge nella cavità uterina 5-6 giorni dopo la

fecondazione• gli enzimi proteolitici prodotti dal trofoblasto provocano la

rottura della membrana pellucida (schiusa della blastocisti)• l'annidamento si verifica a partire dalla fine della prima -

inizio della seconda settimana (21° giorno del ciclo uterino) • continua per tutto l’arco della seconda settimana dello

sviluppo embrionale • sede dell'annidamento: normalmente l’annidamento si

verifica in prossimità del fondo o del corpo dell’utero in una zona compresa tra lo sbocco di due ghiandole uterine adiacenti

ANNIDAMENTO ECTOPICO• si possono verificare annidamenti in sedi diverse

da quella abituale • questa evenienza dà luogo ad una patologia

ostetrica definita gravidanza ectopica• gravidanze ectopiche possono avvenire nella

cavità addominale sulle anse intestinali, sull’ovaio, nella tuba uterina

• una sede ectopica si può verificare a livello del collo dell’utero: – in questo caso la placenta si forma nel futuro canale

del parto – La conseguenza di questo annidamento ectopico si

definisce placenta previa (quando il feto si impegna nel canale del parto comprime la placenta)

zona compatta e zona spongiosadell'endometrio

• di solito la blastocisti prende contatto con la superficie dell’endometrio per mezzo del polo al quale è applicato il nodo embrionale

• l’endometrio si trova in piena fase secretoria o progestinica : è nelle condizioni ottimali per garantire l’annidamento

• la porzione funzionale dell’endometrio, in questa fase può essere suddiviso in due zone che sono dette compatta e spongiosa.– compatta uterina : zona in cui avviene l’annidamento della blastocisti

• a questo livello le arterie spiraliformi e i dotti escretori delle ghiandolehanno decorso più rettilineo

• in una sezione, il tessuto è più regolare e compatto da cui il nome– zona spongiosa : si trova al di sotto della compatta, tra essa e la zona

basale • è caratterizzata dalle irregolarità delle arterie e delle ectasie delle

ghiandole uterine• in una sezione, il tessuto appare più irregolare e ripieno di ampi spazi per

questo si parla di zona spongiosa

Interazioni trofoblasto-endometrio• le cellule del trofoblasto esprimono L-selectine che

interagiscono con oligosaccaridi espressi dalle cellule dell’endometrio uterino

• le cellule del trofoblasto che ricoprono il polo embrionale cominciano a inserirsi tra le cellule epiteliali dell’endometrio

• a ciò segue l’interazione tra molecole espresse sulla superficie delle cellule trofoblastiche (integrine: aVb3) e molecole espresse nella matrice connettivale dell’endometrio (laminina, fibronectina)

• il legame integrina-laminina favorisce l’attacco • il legame integrina-fibronectina stimola la migrazione

cellulare• l’interazione integrina – molecole della matrice avvia

la trasduzione del segnale per la proliferazione e differenziazione delle cellule trofoblastiche

modificazioni del trofoblasto• le cellule del trofoblasto della zona di

contatto cominciano a proliferare e costituiscono il sincizio-trofoblasto

• Il sincizio-trofoblasto deriva dalla unione (sinciziale) delle membrane cellulari delle cellule che proliferano dal trofoblasto

• all’interno del sincizio-trofoblasto rimane un singolo strato di cellule dotate di propria individualità che viene detto citotrofoblasto

• nella zona dell’endometrio che accoglie la blastocisti il connettivo va incontro a modificazioni che si definiscono reazione deciduale o decidualizzazione

Reazione deciduale• si tratta di una serie di modificazioni necessarie per:

– creare un microambiente nutritivo attorno all’embrione– impedire l’eccessiva estensione dell’azione erosiva degli enzimi

prodotti dal sinciziotrofoblasto– isolare immunologicamente l’embrione nei confronti delle

difese materne (produzione linfocitaria di molecole immunosoppressive àDSF =Decidual Suppressive Factors)

• le modificazioni consistono in:– arricchimento dei fibroblasti in acqua e contenuti

energetici (glicogeno)– disposizione epitelioide dei fibroblasti– liberazione di sostanze e atteggiamento della matrice

connettivale e dei vasi simili alle reazioni infiammatorie – la reazione sarebbe in primo luogo dovuta ad attivazione

di COX2 (cyclossigenasi 2)à sintesi di prostaglandine

proprietà del sincizio-trofoblasto• Il sincizio-trofoblasto è dotato di attività ameboide• produce una discreta quantità di enzimi proteolitici (metalloproteasi,

urochinasi attivatore del plasminogeno)• produce HCG insieme al citotrofoblasto• si insinua tra le cellule epiteliali • dopo aver scompaginato l’epitelio si inserisce nel connettivo sottostante • la blastocisti si apre un percorso nella compatta uterina grazie al sincizio-

trofoblasto• mano a mano che la blastocisti si introduce nella compatta il sincizio-

trofoblasto si estende dalla zona di primitivo contatto alla periferia di tutta la blastocisti

• quando tutta quanta la blastocisti è inserita all’interno del connettivo della compatta uterina presenta sincizio trofoblasto su tutta la sua circonferenza

• il sincizio trofoblasto è più esteso nella zona che è penetrata per prima e che corrisponde al polo embrionale al cui interno si trova il nodo embrionale

stadio lacunare del sincizio-trofoblasto • il sincizio-trofoblasto comincia a presentare delle cavità

che tendono ad aumentare di dimensioni e numero.• le cavità non confluiscono tra di loro ma si mettono in

comunicazione per mezzo di canalicoli• le cavità si chiamano lacune del sincizio • quando sono presenti le lacune, il sincizio si trova nello

stadio lacunare• l’azione erosiva degli enzimi proteolitici determina la

distruzione del tessuto connettivo e delle ghiandole che il sincizio trova nella sua progressione

• I detriti tissutali derivati da questa digestione enzimatica vanno a finire nelle lacune

• I detriti tessutali servono a garantire fin dalla prime fasi un certo grado di nutrizione per tutta quanta la blastocisti

• si parla di nutrizione istotrofica

nutrizione emotrofica• una settimana dopo che la blastocisti ha iniziato

l’annidamento, questo si completa • ciò avviene quando l’azione erosiva del sincizio

incontra le arterie spiraliformi• gli enzimi idrolitici e proteolitici erodono le pareti

dei vasi che si rompono • di conseguenza il sangue prorompe all’ interno

delle lacune• quando ciò avviene siamo passati dalla nutrizione

istotrofica alla nutrizione emotrofica

Tappo di fibrina• la superficie epiteliale dell’endometrio era stata

interrotta • presenta un’apertura dove era iniziato l’annidamento• l'epitelio non ricostituisce immediatamente la propria

continuità • l’interruzione viene riparata da materiale di

coagulazione cioè dalla fibrina (proteina del plasma necessaria per la riparazione tissutale)

• la fibrina costituisce il tappo di fibrina• Il tappo di fibrina viene successivamente sostituito

dall'epitelio di rivestimento dell’endometrio che ristabilisce la propria continuità

• siamo giunti al 28° giorno del ciclo uterino che corrisponde alla fine della seconda settimana dello sviluppo embrionale

• riassunto animato 1), 2) 3)

test di gravidanza

• il test più precoce è la ricerca nel sangue di EPF (Early Pregnancy Factor) costoso e poco sensibile

• usualmente si fa la ricerca di HCG nel sangue o nelle urine mediante test immunologici

durata della gravidanza–280 giorni – 40 settimane dall’ultima

mestruazione–266 giorni – 38 settimane dalla fecondazione