INTRODUCCIN

Se pueden definir como polmeros formados por la unin, mediante enlaces peptdicos, de unidades de menor masa molecular llamadas aminocidos. Son molculas muy complejas. Su masa molecular es muy elevada, normalmente est comprendida entre 6000 da y 10 6 da, son macromolculas. Algunas protenas estn constituidas por la unin de varios polmeros proteicos que en ocasiones pueden tambin contener otras molculas orgnicas (lpidos, glcidos, etc). En este ltimo caso reciben el nombre genrico de prtidos. Las protenas son las molculas orgnicas ms abundantes en las clulas, ms del 50% del peso seco de la clula son protenas. Estn constituidas, fundamentalmente, por C, H, O y N y casi todas tienen tambin azufre. Algunas tienen, adems, otros elementos qumicos y en particular: P, Fe, Zn o Cu. El elemento ms caracterstico de las protenas es el nitrgeno. Son los compuestos nitrogenados por excelencia de los seres vivos. Las protenas son molculas especficas que marcan la individualidad de cada ser vivo. Son adems de una gran importancia porque a travs de ellas se va a expresar la informacin gentica, de hecho el dogma central de la gentica molecular nos dice: DNARNAProtena

(J. L. Snchez Guilln Biomolculas)

OBJETIVOS: Reconocer protenas en las diferentes muestras. Observar la desnaturalizacin de las protenas. Reconocer la accin de la enzima catalasa en las diferentes muestras.REVISIN LITERARIA Las protenas son biomolculas formadas bsicamente por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno. Pueden contener azufre y en algunos tipos de protenas, fsforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos.Las protenas estn compuestas por una o varias cadenas de aminocidos que contienen un grupo amino (NH2), un grupo cido (COOH), un hidrgeno y un radical que es el que dar la diferencia. (Audesirk, 2008)FUNCIONES GENERALES: Las protenas estn entre las sustancias que realizan las funciones ms importantes en los seres vivos. De entre todas pueden destacarse las siguientes: - De reserva. En general las protenas no tienen funcin de reserva, pero pueden utilizarse con este fin en algunos casos especiales como por ejemplo en el desarrollo embrionario: ovoalbmina del huevo, casena de la leche y gliadina del trigo. - Estructural. Las protenas constituyen muchas estructuras de los seres vivos. Las membranas celulares contienen protenas. En el organismo, en general, ciertas estructuras -cartlago, hueso- estn formadas, entre otras sustancias, por protenas. - Enzimtica. Todas las reacciones que se producen en los organismos son catalizadas por molculas orgnicas. Las enzimas son las molculas que realizan esta funcin en los seres vivos. Todas las reacciones qumicas que se producen en los seres vivos necesitan su enzima y todas las enzimas son protenas. - Homeosttica. Ciertas protenas mantienen el equilibrio osmtico del medio celular y extracelular. - Transporte, de gases, como es el caso de la hemoglobina, o de lpidos, como la seroalbmina. Ambas protenas se encuentran en la sangre. Las permeasas, molculas que realizan los intercambios entre la clula y el exterior, son tambin protenas. - Movimiento. Actan como elementos esenciales en el movimiento. As, la actina y la miosina, protenas de las clulas musculares, son las responsables de la contraccin de la fibra muscular. - Hormonal. Las hormonas son sustancias qumicas que regulan procesos vitales. Algunas protenas actan como hormonas, por ejemplo: la insulina, que regula la concentracin de la glucosa en la sangre.- Inmunolgica. Los anticuerpos, sustancias que intervienen en los procesos de defensa frente a de los agentes patgenos, son protenas.LOS AMINOCIDOS Son las unidades estructurales que constituyen las protenas. Todos los aminocidos que se encuentran en las protenas, salvo la prolina, responden a la frmula general que se observa en la figura. A partir de ahora nos referiremos exclusivamente a los aminocidos presentes en las protenas de los seres vivos. Estos, como indica su nombre, tienen dos grupos funcionales caractersticos: el grupo carboxilo o grupo cido (-COOH), y el grupo amino (-NH2). La cadena carbonada de los aminocidos se numera comenzando por el grupo cido, siendo el carbono que tiene esta funcin el carbono nmero 1, el grupo amino se encuentra siempre en el carbono 2 o carbono . Fig. 1 Frmula general de un aminocidoPor lo tanto, los aminocidos tienen en comn los carbonos 1 (grupo carboxilo) y 2 (el del grupo amino) diferencindose en el resto (R) de la molcula. En la frmula general de la Fig. 1, R representa el resto de la molcula. R puede ser desde un simple H- , como en el aminocido glicocola, a una cadena carbonada ms o menos compleja en la que puede haber otros grupos aminos o carboxilo y tambin otras funciones (alcohol, tiol, etc.). Las protenas delos seres vivos slo tienen unos 20 aminocidos diferentes, por lo que habr nicamente 20 restos distintos. Es de destacar el hecho de que en todos los seres vivos slo se encuentren los mismos 20 aminocidos. En ciertos casos muy raros, por ejemplo en los venenos de algunas serpientes, podemos encontrar otros aminocidos diferentes de estos 20 e incluso aminocidos que no siguen la frmula general. La mayora de los aminocidos pueden sintetizarse unos a partir de otros, pero existen otros, aminocidos esenciales, que no pueden ser sintetizados y deben obtenerse en la dieta habitual. Los aminocidos esenciales son diferentes para cada especie, en la especie humana, por ejemplo, los aminocidos esenciales son diez: Thr, Lys, Arg, His, Val, Leu, Ileu, Met, Phe y Trp.

CLASIFICACIN DE LOS AMINOCIDOS En funcin de sus caractersticas qumicas, los aminocidos se clasifican en: Grupo I: Aminocidos apolares. Aminocidos cuyo resto R no es polar. Esto es, no posee cargas elctricas en R al tener en l largas cadenas hidrocarbonadas. Estos aminocidos, si estn en gran abundancia en una protena, la hacen insoluble en agua. Grupo II: Aminocidos polares no ionizables. Poseen restos con cortas cadenas hidrocarbonadas en las que hay funciones polares (alcohol, tiol o amida). Contrariamente al grupo anterior si una protena los tiene en abundancia ser soluble en agua. Grupo III: Aminocidos polares cidos. Pertenecen a este grupo aquellos aminocidos que tienen ms de un grupo carboxilo. En las protenas, si el pH es bsico o neutro, estos grupos se encuentran cargados negativamente. Grupo IV: Aminocidos polares bsicos. Son aquellos aminocidos que tienen otro u otros grupos aminos. En las protenas, estos grupos amino, si el pH es cido o neutro, estn cargados positivamente.EL ENLACE PEPTDICO

Cuando reacciona el grupo cido de un aminocido con el grupo amino de otro ambos aminocidos quedan unidos mediante un enlace peptdico. Se trata de una reaccin de condensacin en la que se produce una amida y una molcula de agua. La sustancia que resulta de la unin es un dipptido.

Fig. 4: Reaccin de formacin del enlace peptdico.

ESTRUCTURA O CONFORMACIN DE LAS PROTENAS La conformacin de una protena es la disposicin espacial que adopta la molcula proteica. Las cadenas peptdicas, en condiciones normales de pH y temperatura, poseen solamente una conformacin y sta es la responsable de las importantes funciones que realizan. La compleja estructura de las protenas puede estudiarse a diferentes niveles. A saber: primario, secundario, terciario y cuaternario. I) NIVEL O ESTRUCTURA PRIMARIA- Viene dada por la secuencia: orden que siguen los aminocidos de una protena. Va a ser de gran importancia, pues la secuencia es la que determina el resto de los niveles y como consecuencia la funcin de la protena. La alteracin de la estructura primaria por eliminacin, adicin o intercambio de los aminocidos puede cambiar la configuracin general de una protena y dar lugar a una protena diferente. Como, adems, la funcin de la protena depende de su estructura, un cambio en la estructura primaria podr determinar que la protena no pueda realizar su funcin. Veamos, a continuacin, un ejemplo de estructura primaria: H-Ala-Gly-Ser-Lys-Asp-Asn-Cys-Leu-Met-Ala Ile-Trp-Gly-......-Pro-Asn-Glu-OH.

II) NIVEL O ESTRUCTURA SECUNDARIA- Las caractersti cas de los enlaces peptdicos imponen determinadas restricciones que obligan a que las protenas adopten una determinada estructura secundaria. sta puede ser en hlice , hlice de colgeno o en conformacin . Es de destacar que las tres son configuraciones en hlice diferenciandose en el nmero de aminocidos por vuelta (n) y en el dimetro de la hlice. En la hlice , n=4; en la hlice de colgeno, n=3 y en la conformacin , n=2. A continuacin estudiaremos solo la hlice y la conformacin por ser las configuraciones ms frecuentes.a) Estructura en hlice . Se trata de la forma ms simple y comn. En este tipo de estructura la molcula adopta una disposicin helicoidal, los restos (R) de los aminocidos se sitan hacia el exterior de la hlice y cada 3,6 aminocidos sta da una vuelta completa. Este tipo de organizacin es muy estable, porque permite la formacin de puentes de hidrgeno entre el grupo C=O de un aminocido y el grupo N-H del cuarto aminocido situado por debajo de len la hlice.b) Conformacin . Se origina cuando la molcula proteica, o una parte de la molcula, adoptan una disposicin en zig-zag. La estabilidad se consigue mediante la disposicin en paralelo de varias cadenas con esta conformacin, cadenas que pueden pertenecer a protenas diferentes o ser partes de una misma molcula. De esta manera pueden establecerse puentes de hidrgeno entre grupos C=O y -N-H. Los restos van quedando alternativamente hacia arriba y hacia abajo. No obstante, si la molcula presenta prximos entre s restos muy voluminosos o con las mismas cargas elctricas se desestabilizar. Una molcula no tiene que estar constituida exclusivamente por un tipo de conformacin. Lo normal es que las molculas proteicas presenten porciones con hlices , otras partes con conformaciones y partes que no tienen una conformacin definida y que se llaman zonas irregulares. III) NIVEL O ESTRUCTURA TERCIARIA- Las protenas no se disponen linealmente en el espacio sino que normalmente sufren plegamientos que hacen que la molcula adopte una estructura espacial tridimensional llamada estructura terciaria. Los pliegues que originan la estructura terciaria se deben a ciertos aminocidos, como: la prolina, la serina y la isoleucina, que distorsionan la hlice generando una curvatura. La estructura terciaria se va a estabilizar por la formacin de las siguientes interacciones: 1) Enlaces o puentes de hidrgeno. 2) Interacciones cido base. 3) Puentes disulfuro. Estos ltimos se forman entre grupos -SH pertenecientes a dos molculas de cistena que reaccionan entre s para dar cistina. -Cis-SH + HS-Cis- ----- -Cis-S-S-CisJ. En la estructura terciaria los restos se van a disponer en funcin de su afinidad con el medio. En medio acuoso, los restos hidrfobos se sitan hacia el interior de la molcula mientras que los restos hidrfilos lo hacen hacia el exterior. Bsicamente se distingen dos tipos de estructura terciaria: la filamentosa y la globular, aunque muchos autores consideran que las protenas filamentosas son protenas que carecen de estructura terciaria. Las protenas con conformacin filamentosa suelen tener funcin estructural, de proteccin o ambas a la vez y son insolubles en agua y en soluciones salinas. Por ejemplo, tienen esta conformacin: la beta-queratina, el colgeno y la elastina. Las protenas con conformacin globular suelen ser solubles en agua y/o en disoluciones salinas. Son globulares las enzimas, las protenas de membrana y muchas protenas con funcin transportadora. Las protenas globulares suelen tener diferentes fragmentos con alfa-hlices y conformaciones beta, pero las conformaciones beta suelen disponerse en la periferia y las hlices alfa en el centro de la molcula. Adems, las protenas globulares se doblan de tal manera que, en solucin acuosa, sus restos hidrfilos quedan hacia el exterior y los hidrfobos en el interior y, por el contrario, en un ambiente lipdico, los restos hidrfilos quedan en el interior y los hidrfobos en el interior.

IV) ESTRUCTURA CUATERNARIA- Cuando varias cadenas de aminocidos, iguales o diferentes, se unen para formar un edificio proteico de orden superior, se disponen segn lo que llamamos estructura cuaternaria. Tambin se considera estructura cuaternaria la unin de una o varias protenas a otras molculas no proteicas para formar edificios macromolculares complejos. Esto es frecuente en protenas con masas moleculares superiores a 50.000 Cada polipptido que interviene en la formacin de este complejo proteico es un protmero y segn el nmero de protmeros tendremos dmeros, tetrmeros, pentmeros, etc.

PROPIEDADES DE LAS PROTENAS Las propiedades de una protena, incluso su carga elctrica, dependen de los restos o radicales de los aminocidos que quedan en su superficie y que podrn interaccionar mediante enlaces covalentes o no covalentes con otras molculas. A continuacin veremos las propiedades ms importantes: Solubilidad. Las protenas solubles en agua, al ser macromolculas, no forman verdaderas disoluciones sino dispersiones coloidales. Cada macromolcula proteica queda rodeada de molculas de agua y no contacta con otras macromolculas gemelas con lo que no puede producirse la precipitacin. Especificidad. La especificidad de las protenas puede entenderse de dos maneras. Por una parte, existe una especificidad de funcin. Esto es, cada protena tiene una funcin concreta, diferente, normalmente, de la del resto de las molculas proticas. Esta es la razn de que tenganos tantas protenas distintas, unas 100 000. Ahora bien, ciertas protenas que realizan funciones similares en los seres vivos, por ejemplo: la hemoglobina de la sangre, presentan diferencias entre las distintas especies. Estas diferencias se han producido como consecuencia del proceso evolutivo y cada especie o incluso cada individuo, puede tener sus propias protenas especficas. No obstante, estas diferencias se producen en ciertas regiones de la protena llamadas sectores variables de las que no depende directamente se funcin. Mientras que otros sectores, de los que si depende la funcin de la protena, tienen siempre la misma secuencia de aminocidos. La especificidad de las protenas depender por lo tanto de los sectores variables y a ellos se deben, por ejemplo, los problemas de rechazos en los transplantes de rganos. Por ejemplo: La insulina consta de 51 aminocidos en todos los mamferos, que estn distribuidos en dos cadenas, de 21 y 30 aminocidos respectivamente, unidas mediante dos enlaces disulfuro; de stos 51 aminocidos, la mayora son los mismos en todas las especies, pero unos pocos (tres de la cadena corta) varan de unas a otras. (J. L. Snchez Guilln Biomolculas )

MATERIALES:

Materiales del grupo: 1 huevo Semillas frescas de frijol Goteros 1 papa 1 botella pequea de agua oxigenada Pequeos trozos de carne e hgado Palitos de dientes Materiales de laboratorio: Tubos de ensayo Vaso de precipitado de 500 ml Gradilla Solucin de almidn al 1% Cocina Pipetas de 10 y 5 ml Pinzas de madera Lugol Acetona al 1% Solucin albumina Agua destilada cido ntrico concentrado NaOH al 40% cido sulfhdrico al 75% Solucin de NaCl al 20% Placas de porcelana

PROCEDIMIENTO:

1.-Desnaturalizacion de Proteinas

Albmina

1. Bao Maria2. Acetona3. Acido Sulfurico 4. Cloruro de sodio5. Acido Nitrico6. Control

2.- DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE PROTEINAS

Agua DestiladaAlbumina

1. NaOH2. Sulfato de Cobre

FRIJOL

PAPA

3.- Reconocimiento de la Enzima Catalasa

AGUA OXIGENADA

CARNE

HGADO

4.- REACCION AMILOLITICA

1. 4 Gotas de Lugol15 gotas de almidn2 gotas de lugol

15 gotas de almidn10 gotas de saliva 2 gotas de lugol

10 gotas de saliva10 gotas de H2SO410 gotas de almidon2 gotas de lugol

RESULTADOS:1. Desnaturalizacin de protenasDespus de someter a la albmina a los diferentes tratamientos se obtuvieron los siguientes resultados:

Tubo NSometer a:Observacin: Ha cambiado algo en los tubos de ensayo ? Desnaturalizacin (+) o (-), por que ?

1Bao MaraCambio a un color blanquecino, Coagulacin + Desnaturalizacin por la temperatura

2AcetonaCambio a un color blanco opaco se vuelve denso- Disminuye la solubilidad de la protena

3cido sulfuricoCambio de color a un blanco lechoso+ Desnaturalizacin por cambio de ph

4NaClSe mantuvo transparente pero se encontr partculas en suspensin Se hidrata

5HNO3Cambio de color a amarillo pastel+ Nitrificacin

6Control No ocurri cambio

De izquierda a derecha: Bao Mara, Acetona, Acido Sulfrico, NaCl, Acido Nitrico,Control2.- DETERMINACIN DE PRESENCIA DE PROTENAS ( Reaccin de Biuret )

MuestrasObservacinReaccin (+) o (-)

AlbminaPermanece trasparente al agregarle 1ml de NaOh, pero cambio de color a morado al agregarle 2 gotas de sulfato de cobre+

AguaPermanece transparente al agregarle 1ml de NaOh, pero cambio de color a azul claro al agregarle 2 gotas de sulfato de cobre.-

De izquierda a derecha: ( Color azulado es la muestra de agua destilada, Color morado la muestra de Albumina)

3.- RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASA

ActividadContenido del Tubo

Muy buena actividadHgado

Buena actividadPapa

Poca actividadCarne

Muy poca actividadFrijol

H2O2 + catalasa H2O + o2

Las muestras fueron de : Papa , Frijol, Carne e Higado.

4.REACCIN AMINOLTICA

4 gotas de lugol 15 g. de almidn + 10 g. de saliva + Despus de 10 min, 2 g. de lugol

15 g. de almidn + 10 g. de saliva+10g. de c. sulfhdrico 2 g. de lugol despus de 10min 10g. de almidn Luego de 7min 2g. de lugol

DISCUSIONES:1.- DESNATURALIZACION DE PROTEINAS:Se conoce como desnaturalizacin a la Perdida por parte de las protenas de su estructura de ordensuperior(Secundaria,Terciaria,cuaternaria),yquedaunacadenapolipeptidicareducidaaunpolmero estadstico sin ninguna estructura tridimensional fija. En una protena cualquiera, la estructura nativa y la desnaturalizada solo tienen en comn la estructura primaria, es decir la secuencia de aminocidos que la componen, los dems niveles de organizacin estructural desaparecen en la estructura desnaturalizada.La desnaturalizacin trae diversas consecuencias como: el cambio en las propiedades hidrodinmicas es decir el aumento de la viscosidad, a la vez que disminuyeelcoeficientededifusin,por otro lado se produce una disminucindesu solubilidad,debidoaquelosresiduos hidrofbicos del interior aparecen en la superficie, y finalmente se produce la perdidade las propiedades biolgicas.Una protena desnaturalizada cuenta nicamente con su estructura primaria, por este motivo, en muchos casos el proceso de desnaturalizacin es reversible, ya que es la estructura primaria la que contiene la informacin necesaria y suficiente para adoptar niveles superiores de estructuracin. (Desnaturalizacin de Protenas Jimnez Osorio David/ Clavijo Varn Yefferson Universidad Distrital Francisco Jos de Caldas Bogot 2014 )

La albmina compuesta por 587 aminocidos con 17 puentes de disulfuro entrecruzados en su molcula, peso molecular de67.000 Dalton, vida media: 15.19 das.( Dra. Mara Eugenia Jeria Moriamez, Medicina Interna- Nutricin Clnica, Hospital Base Linares)

En el 1er tubo se coloc albumina y luego se someti a bao mara por tres minutos donde el calor es el agente desnaturalizante, la agitacin trmica afecta las interacciones que estabilizan la estructura tridimensional de las protenas (puentes H, interaccin hidrofbica). El calor hace que las cadenas de protena se desenrollen y se formen enlaces que unen unas cadenas con otras.

En el 2do tubo se agreg acetona, el cual este como los alcoholes causan la deshidratacin de la protena, al competir por el agua de solvatacin, haciendo que este se precipite, donde las cadenas de protena se desenrollan y se forman enlaces que unen unas cadenas con otras.

En el 3er tubo se coloc cido sulfrico , la albumina ante el cido cambia de color a blanco lechoso se vuelve denso, se combinan con protenas con carga + formando complejos proteinatos insolubles.

En el 4to tubo se agreg una solucin de cloruro de sodio al 20% donde no se observa cambio en la protena. , esto debido a que la sal solo diluye a la protena. Sin embargo puede llegar a desnaturalizarla si se trata de un metal pesado.

En el 5to tubo se agreg cido ntrico, del cual la albmina en reaccin con el cido ntrico cambio de color amarillo al aadir cido ntrico es una prueba para la presencia de tirosina o triptfano en una protena. La adicin de base fuerte hace que el color se torne ms oscuro hacia anaranjado. Las manchas amarillas en la piel causadas por cido ntrico son el resultado de la reaccin xanthoproteca.

En el 6to tubo es una muestra control solo contiene albumina.

2.- DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE PROTEINAS (REACCION DE BIURET) La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Biuret. Debido a dicha reaccin fue que observamos que al agregar el reactivo de sulfato de cobre mas solucin de protena precipito una coloracin violeta. Quedando en el fondo del tubo una tonalidad azul cielo reaccin positiva.

En la prctica de laboratorio, notamos que se tenia 2 tubos con albumina y otro con agua destilada se observ que el tubo que contenia albumina cambio su coloracin a violeta con lo cual se determina la presencia de protenas, con el siguiente tubo se forma una coloracin azulada debido al cobre y no llega a la coloracin violeta ya que el agua destilada no contiene protenas. 3.- RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASALa catalasa es una enzima antioxidante comn que es producida naturalmente en casi todos los organismos vivos. Las reacciones en la catlisis son importantes para la vida: ayudan a descomponer el perxido de hidrgeno - un agente oxidante poderoso y daino - en oxgeno yagua, previniendo la acumulacin de burbujas de dixido de carbono en la sangre. La catalasa es una enzima muy potente: una molcula de catalasa puede descomponer millones de molculas de perxido de hidrgeno en oxgeno y agua. Tambin usa el perxido de hidrgeno para oxidar las toxinas potencialmente dainas delcuerpo, como el formaldehdo, el cido frmico, alcohol y fenol.En nuestro grupo en el momento de aadir el agua oxigenada observamos que la papa presentaba ms burbujeo de CO2 que el resto y tambin vimos que la reaccin era ms rpida, luego vimos que en el hgado tambin se presentaba burbujeo luego en la carne y finalmente en el frijol. Segn investigamos en el hgado existe un mayor nmero de peroxisomas (vesculas que contienen oxidasas y catalasas), encargadas de desintoxicar el organismo. Entonces debimos presenciar que el hgado debera presentar mayor burbujeo entonces deducimos que el hgado no estaba fresco ya que lo compramos en la maana y nuestra practica es en la tarde. La papa presento mayor burbujeo ya que contiene ms almidn.4.- REACCION AMILOLITICAEste mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugo (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico.Fundamento: La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn.No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta. Con respecto al control negativo, el lugol, un color caf rojizo, se debe a la reaccin de la amilopectina y glucgeno. Con respecto al control positivo: como los almidones son molculas de almacenamiento, existe un mecanismo para liberar glucosa del almidn, cuando el organismo necesita energa. Tanto las plantas como los animales contienen enzimas que hidrolizan los almidones. Dos de ellas son las alfa y beta amilasa, rompiendo los enlaces alfa 1,4 del almidn. Y por ello se coloro morado la reaccin, indicando la desnaturalizacin de la protena. Pero la amilo pectina no se degradara porque los enlaces ramificados no son atacados.

CONCLUSIONES: La desnaturalizacin de la albumina ocurre cuando hay un aumento de temperatura ya que el calor rompe enlaces dbiles como (fuerzas Van der Valls y puentes de hidrogeno), as va perdiendo su estructura terciaria y secundaria. Lo mismo pasa con la acetona ya que todos los compuestos orgnicos desnaturalizan protenas al igual que los cidos que son buenos agentes desnaturalizantes de protenas. En la reaccin de Biuret, el cobre(II) nos ayuda a determinar la presencia de protenas debido a la coloracin que se forma , si se forma un color morado se trata de una protena , pero si la muestra adquiere un color azulado no estaramos tratando con una protena. Para poder identificar la enzima catalasa, el perxido de hidrogeno fue un compuesto que ayudo, los materiales utilizados contena clulas vegetales y clulas animales presentan peroxisomas, con el burbujeo nos permiti reconocer la enzima catalasa. El lugol es una sustancia que ayuda a reconocer polisacridos en este caso el almidn se present del color caracterstico del lugol lo cual indicaba la presencia del almidon.

CUESTIONARIO:1. Cul es el fundamento terico de la reaccin de Biuret?La reaccin de Biuret, es una reaccin colorimtrica que se produce cuando un tomo de cobre reacciona con una amida en una solucin alcalina, genera color en presencia de protenas pero no con aminocidos con lo que se deduce que el enlace peptdico es un enlace amida que se produce entre los distintos aminocidos, tambin es utilizada para medir la concentracin de protenas.2. Describir las diferentes estructuras de las protenasEstructura primaria: secuencia de aminocidos que constituyen las protenas, los diferentes tipos de protenas tienen distintas secuencia de aminocidos.Estructura secundaria: existen dos tipos de estructuras simples. Pueden formar puente de hidrogeno entre partes de molculas polares que tiene cargas negativas y positivas, las cuales se atraen. Los puentes de hidrogeno entre aminocidos producen estas estructura. Existe una estructura denominada HLICE, es enrollada y similar a un resorte. Hay otras protenas que consiste en varias cadenas polipeptdicas se pliegan una y otra vez, los puentes de hidrogeno mantienen unidas cadenas adyacentes de polipptidos en una disposicin denominada LAMINA PLEGADA.Estructura terciaria: son tridimensionales complejas, que determinan la configuracin definitiva del polipptido. Los puentes disulfuro pueden contribuir con la estructura terciaria enlazando aminocidos cistena de las distintas regiones del polipptido.Estructura cuaternaria: polipptidos individuales se mantienen unidos mediante puentes de hidrogeno o puente disulfuro. (Audesirk, 2008)3. Cul es la diferencia entre las fuerzas de Van der Waals y las atracciones hidrofbicas?Fuerzas de Van de Walls son uniones dbiles entre tomos y molculas. Se producen porque las cargas elctricas se desplazan continuamente, haciendo que de manera instantnea la molcula presente una zona con carga positiva, estas zonas varan con mucha rapidez, dando a la sustancia una mayor cohesin.Atracciones hidrofbicas, ciertas sustancias que son insolubles en agua y se encuentran en medio acuoso se mantendrn unidas por su repulsin al medio que estn, son uniones dbiles de suma importancia en el mantenimiento de las membranas celulares y en la configuracin de protenas.

4. Qu es la energa de activacin?

Es la energa necesaria para pasar desde los reactivos al estado de transicin. La naturaleza del estado de transicin es una especie qumica intermedia en estructura entre la del sustrato y producto (enzimas).Quiere decir que tanto en las reacciones endergnicas como exergnicas, tienen una barrera energtica que se conoce como la energa de activacin (EA) que es la energa que se requiere para romper enlaces qumicos existentes e iniciar la activacin.

5. Qu es el sitio activo de las enzimas y cules son sus caractersticas?

Es el lugar de unin de un sustrato a una enzima se denomina centro activo. Normalmente en dicho lugar se encuentran restos aminocidos con sustituyentes funcionales para la catlisis. Una enzima contiene uno o ms centros activos. En general, los lugares de unin en una enzima al sustrato se encuentran en la superficie de la protena.El cual gracias a la estructura espacial del lugar de unin le da la capacidad a la protena de interaccionar de forma especfica y reversible con los ligandos.

BIBLIOGRAFA: Teresa Audersik, Gerald Audesirk. Biologa La Vida en la Tierra. Octava edicion.2008. 47 51 (J. L. Snchez Guilln Biomolculas) (Desnaturalizacin de Protenas Jimnez Osorio David/ Clavijo Varn Yefferson Universidad Distrital Francisco Jos de Caldas Bogot 2014 ) Werner Muller -Esterl .Bioqumica, fundamentos para la medicina y ciencia de la vida., editorial Reverte , ao publicacin: 2004, pag: 154,155,101,158, 159 Mar y K. Campbell y Shawn O. Farrell Bioqumica 6ta edicin, editorial: CENGAGE Learning, impreso 2009, pginas: 480,481,104,105,148,149,183