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Composición química de una bacteria (E. coli) 100% Total 1 Iones inorgánicos 0.5 Nucleótidos y precursores 2 Azucares y precursores 0.5 Aminoácidos y precursores 3 Monómeros totales 20.5 ARN 3.1 ADN 9.1 Lípidos 5 Polisacáridos 55 Proteínas 96 Macromoléculas totales % del peso seco (2.8x10 -13 g ) Molécula

Composición química de una bacteria ( E. coli)depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3a... · •Agar eosina azul de metileno (EMB) •Agar XLD •Agar Endo •Agar McConkey. Uso. Medios

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Composición química de una bacteria (E. coli)

100%Total

1•Iones inorgánicos

0.5Nucleótidos y precursores

2Azucares y precursores

0.5Aminoácidos y precursores

3•Monómeros totales

20.5ARN

3.1ADN

9.1Lípidos

5Polisacáridos

55Proteínas

96•Macromoléculas totales

% del peso seco (2.8x10-13 g)Molécula

Microorganismos

Fuente de energía

Oxido-reducciónQuimiótrofas

LuzFotótrofas

Compuestos orgánicosQuimioheterótrofos

Fuente de carbono

Compuestos orgánicosQuimioheterótrofos

CO2

Compuestos orgánicosFotoheterótrofos

CO2

Fotoautótrofos

Compuestos inorgánicosQuimiolitótrofos

Compuestos OrgánicosMixótrofos

CO2

Litoautótrofos

Fuente de carbono

Fuente de carbono

Clasificación

Macronutrientes en los medios de cultivo

Inorgánicos: NH4Cl, (NH4)2SO4, KNO3, N2

Orgánicos: Aminoácidos, bases nitrogenadas de nucleótidos y otros

compuestos de nitrógeno

NH3, NO3, N2, compuestos orgánicos nitrogenados

Nitrógeno (N)

H2O, O2, compuestos orgánicos

H2O, O2, compuestosorgánicos

Oxígeno (O)

H2O, compuestos orgánicosH2O, compuestos orgánicosHidrógeno (H)

Glucosa, malato, acetato, piruvato, cientos de otros compuestos o en mezclas complejas (extracto de levadura, peptona y

otros)

CO2, compuestos orgánicosCarbono (C)

Forma química en los medios de cultivo

Forma encontrada en el medio ambiente

Elemento

Macronutrientes en los medios de cultivo

MgCl2, Mg2SO4Mg2+ en solución o varias sales de Mg

Magnesio (Mg)

KCl, KH2PO4K+ en solución o varias sales de K

Potasio (K)

Na2SO4, Na2S2O3, Na2S, cisteína u otros compuestos

orgánicos con azufre

H2S, compuestos orgánicos de S, metales (FeS, CuS,

ZnS, NiS y otros)

Azufre (S)

KH2PO4, Na2HPO4PO43-Fósforo (P)

Forma química en los medios de cultivo

Forma encontrada en el medio ambiente

Elemento

Macronutrientes en los medios de cultivo

FeCl3, FeSO4 y otras soluciones de fierro (o Fe3

+ EDTA, Fe2+ citrato)

Fe2+ o Fe3

+ en solución como FeS, Fe(OH), otras muchas sales de Fe

Fierro (Fe)

CaCl2Ca2+ en solución o como CaSO4 y otras sales de

Ca

Calcio (Ca)

NaClNa+ en solución o como NaCl y otras sales de Na

Sodio (Na)

Forma química en los medios de cultivo

Forma encontrada en el medio ambiente

Elemento

Micronutrientes en los medios de cultivo

Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa.Zinc

Nitrogenasa de vanadioVanadio

Formato deshidrogenadaTungsteno

Hidrogenasas, aminoácido seleniocisteina.Selenio

Hidrogenasa, monóxido de carbono deshidrogenasa. Níquel

Enzimas, nitrogenasa de molibdeno, nitrato reductasa.Molibdeno

Activador enzimático, SOD.Manganeso

Proteínas, citocromo c oxidasa, SODCobre

Vitamina B12, transcarboxilasaCobalto

Función celularElemento

Factores de crecimiento

Transportadores de electrones (ubiquinonas, menaquinonas, etc.)

Grupo Vitamina K, quinonas

Transformaciones de aminoácidos y cetoácidos.

Complejo B6 (piridoxal, piridoxamina)

Alfa descarboxilaciones, transcetolasas.Tiamina (B1)

Precursor de la CoAÁcido pantoténico

Precursor de FAD, FMN, transporte de electrones.

Riboflavina

Reducción y transferencia de fragmentos de un solo carbono.

Cobalamina (B12)

Precursor del NAD; transferencia de electrones en reacciones redox

Niacina (ácido nicotínico)

Biosíntesis de ácido grasos, beta descarboxilaciones, fijación de CO2

Biotina

Metabolismo de un carbono, transferencia de grupos metilo

Ácido fólico

Precursor del ácido fólicoÁcido p-amino benzoico (PABA)

FunciónVitamina

Medios de Cultivo

Pruebas Bioquímicas

De mantenimiento o conservación

De transporte

Diferenciales

Selectivos

De enriquecimiento

Enriquecidos o nutritivosUso

Sólido 1.5 a 2% de agar

Semisólido 0.2 a 0.8% de agar

Fluido 0.1% de agar

LíquidoEstado

Sintéticos

Naturales o ComplejosComposición

Clasificación por composición de los medios de cultivo

Naturales o complejos. Son medios que no tienen una composición definida. Sangre, suelo, frutas, etc. o medios que contengan ingredientes cuya composición no esté completamente definida como el extracto de levadura, peptonas o el agua de la llave.

Los medios sintéticos son aquellos cuya composición en completamente conocida, sus componentes son extrapuros, como en los medios empleados para investigación.

Medios de cultivo deshidratados

Clasificación por estado de los medios de cultivo

Medios líquidos. Generalmente tienen componentes completamente solubles. Son útiles en la propagación de microorganismos pero tienen la desventaja de que no se pueden detectar contaminaciones.

AgarExtraído a partir de un tipo de algas rojas (de los géneros Gelidium y Gracilaria), Agar es un gelificante que se emplea en Japón desde el siglo XV. En 1859 se introdujo en Europa como alimento característico de la cocina china y a principios del siglo XX se empezó a aplicar en la industria alimentaria. Es una fuente de fibra y tiene capacidad de formación de gel en proporciones muy bajas. Permite la elaboración de gelatinas calientes.

Clasificación por estado de los medios de cultivo

Los medios fluidos contienen agar en una concentración aproximada a 0.1%, el medio tiene una consistencia líquida pero la presencia de agar disminuye la velocidad de disolución de O2 ambiental. Se emplea generalmente en el cultivo de microorganismos anaerobios y microaerofílicos.

Medio fluido de tioglicolatocon resarzurina (indicador de oxido/reducción)

Clasificación por estado de los medios de cultivo

Los medios de cultivo semisólidos contienen de entre el 0.2 y el 0.8% de agar, son suaves y permiten observar la movilidad de los microorganismos. Esta consistencia es utilizada en los medios de transporte, las pruebas de movilidad, pruebas biquímicas y pruebas genéticas.

Clasificación por estado de los medios de cultivo

Los medios sólidos contienen entre 1.5 a 2.0% de agar, esto los hace tener una consistencia dura y forman un soporte para el crecimiento microbiano. Se emplean para cultivo, aislamiento, diferenciación, cuantificación, pruebas de sensibilidad y en algunos casos para conservación (inclinados).

Uso. Medios enriquecidosContienen componentes ricos nutritivamente y permite el crecimiento de microorganismos no exigentes. Ejemplos:

•Agar cuenta estándar (cuenta en placa)•Infusión cerebro y corazón (BHI)•Agar Soya Tripticaseína (TSA)•Agar nutritivo (AN)•Agar sangre (AS)

Buscador de medios de cultivohttp://www.joseacortes.com/microbiologia/buscamedios/index.htm

Uso. Medios de enriquecimiento

Contiene componentes y condiciones que permiten el desarrollo de un tipo microbiano y disminuyen la velocidad de crecimiento de la flora acompañante. Ejemplos:

•Caldo selenito Detección de Salmonella,

Enterobacter sakazakii y Yersinia enterocolitica

•Agua peptonada pH 9Detección de V. cholerae

•Caldo tetrationatoPre-enriquecimiento para Salmonella

Uso. Medios selectivosContiene componentes que permiten el desarrollo de un tipo microbiano e inhiben el crecimiento de los demás microorganismos. Ejemplos:

•Agar cetrimida•Caldo bilis verde brillante•Agar Bacillus cereus•Agar Sabouraud cicloheximida

Uso. Medios diferencialesContiene componentes que permiten diferenciar las actividades metabólicas de los microorganismos inoculados. La presencia de indicadores o el uso de reveladores después de la incubación ponen de manifiesto la actividad. Ejemplos:

•Agar DNAsa•Agar almidón•Agar cromogénico para Candida

Uso. Medios diferenciales y Selectivos

•Agar sal y manitol•Agar eosina azul de metileno (EMB)•Agar XLD•Agar Endo•Agar Mc Conkey

Uso. Medios de conservación

Algunos medios de cultivo son empleados para la conservación temporal de microorganismos, como son:

•Medio sólido en caja a 4ºC (hasta 1 semana).

•Medio de agar inclinado 4ºC (hasta 2 semanas) con sello de glicerol estéril a 4ºC(varios meses dependiendo del microorganismo).

•Medio fluido de tioglicolato con carne molida con sello de aceite mineral estéril a temperatura ambiente (varios meses dependiendo del microorganismo).

En la liofilización también se emplea la leche descremada (años).

Son medios que se emplean para el transporte de muestras sin alterar la viabilidad y la proporción de microorganismos. Tienen consistencia semisólida, con amortiguador de pH y reducidos en nutrientes para preservar la proliferación de microorganismos por varias horas.

Las muestras se recolectan con asas o con hisopos de alginatos que no inhiben a los microorganismos.

•Medio Amies

•Medio de Stuart

Uso. Medios de transporte

Uso. Pruebas Bioquímicas

Son medios de cultivo que tienen los nutrientes para poner en evidencia la actividad metabólica de un microorganismo puro. Pueden emplear reveladores y/o indicadores.