Cultura de fatias de Glândula Supra-Renal

Avaliação da qualidade estrutural pelos efeitos de

condições externas

Filipa Silva

Helena Maia

Objectivo do trabalho As GSR podem ser usadas em cultura

mas requerem condições muito particulares, uma das quais é a presença de soro.

Na ausência deste, as células perdem viabilidade o que se pode verificar pelas suas modificações estruturais.

Questão: Qual é o efeito da privação de soro acrescentado, na ultra-estrutura das GSR em

cultura?

Material e métodos

Dia 1 : Rato Wistar sacrificado por decapitação

Colheita das GSR e sua descapsulação

Material e métodos

Dia 1 :

Incubação de fragmentos da cápsula com parênquima subcapsular (CP) e de fatias da glândula restante (maioritariamente composta por ZF)

Meio: DMEM/HAM´S F-12 em estufa a 37 ºC com CO2

a 5 % durante 24h (acrescentado de antibiótico e soro bovino fetal)

Dia 2: Colheita de fragmentos e processamento

para ME. Distribuição dos fragmentos restantes por

meio semelhante ao anterior com soro bovino fetal (B1) ou sem soro (B2).

ZF + meio + soro 10% ZF + meio + antibiótico 1% + antibiótico 1%

B1ZF B2 ZF

Material e métodos

Dia 3

Colheita de fragmentos de B1 e B2 para ME;

Material e métodos

Resultados

Resultados

B1 ZF B2 ZF

Comentários

Em experiências anteriormente efectuadas os meios tinham acidificado e estavam contaminados por fungos filamentares.

Nas experiências actuais, os estudos morfológicos mostraram acentuada destruição celular. Embora não se observassem as formas filamentares referidas, admitimos que a contaminação fúngica por formas mais primitivas tenha ocorrido e privado as células dos nutrientes.

Comentários

É de admitir uma maior sensibilidade das células da ZF à variação das condições do meio.

Mais experiências serão necessárias para o confirmar.

Comentários No futuro será necessário prosseguir

com práticas laboratoriais muito precisas, a saber:

Rapidez e rigor na execução de todos os procedimentos de preparação de material biológico;

Cuidados assépticos e higiénicos rigorosos;

Minimização da possível infestação fúngica.

Autoras: