1

Exit Modified Hodge Test?

Toepassing Carba NP test op

Nederlandse isolaten

28-05-2013

Kim van der Zwaluw

01-11-2012

WK van der Zwaluw

2

Carbapenemases

● Verschillende resistentiegenen en mechanismen

– Ambler class A (KPC)

– Ambler class B (NDM, VIM, IMP)

– Ambler class D (OXA48)

● Verder nog: SPM, AIM, BIC, DIM, SIM, GIM, OXA-23, IMI, GES……

Genotype vs Fenotype

● Genotypisch

– PCR “gouden standaard”

– Epidemiologisch relevant

– Detecteert alleen bekende targets

● Fenotypisch

– MIC bepaling

– Klinisch relevant

– Detecteert alles met die eigenschap

28-05-2013

WK van der Zwaluw

3

28-05-2013

WK van der Zwaluw

4

Fenotypisch test: Etest en combinatiedisks

● Etest

● Combinatiedisks

Modified Hodge Test

28-05-2013

WK van der Zwaluw

5

28-05-2013 WK van der Zwaluw

6

Modified Hodge Test

Modified Hodge Test

MHT carbapenemasegen + geen gen

+ 92 50

- 5 160

d 9 53

28-05-2013

WK van der Zwaluw

7

Sensitiviteit: 94,8% Specificiteit: 76,2% Typeerbaarheid: 83,2%

d=-? Sensitiviteit: 86,8% Specificiteit: 81,0%

Carba Nordmann / Poirel (NP) test

● fenolroodoplossing + imipenem pH7.8

● 2 h 35 °C met eiwitextract van testisolaat

● hydrolyse imipenem -> zuurvorming -> omslag fenolrood naar geel

28-05-2013

WK van der Zwaluw

8

Carba NP test: eiwitextract

28-05-2013

WK van der Zwaluw

9

30’ kt

28-05-2013

WK van der Zwaluw

10

Carba NP test: imipenem-fenolrood oplossing

2h 35°C

Carba NP test: nadelen

● Kosten

● Gebruiksgemak

● Aflezen

28-05-2013

WK van der Zwaluw

11

Alternatief: Antibiotic Hydrolysis Bio-assay

● Eiwitextract testisolaat toevoegen aan tablet meropenem

● Gevoelige stam incuberen met tablet

● Carbapenemase activiteit -> remmingszone verdwijnt

28-05-2013

WK van der Zwaluw

12

Antibiotic Hydrolysis Bio-assay

28-05-2013 WK van der Zwaluw

13

2h 35°C

Antibiotic Hydrolysis Bio-assay

28-05-2013

WK van der Zwaluw

14

on 35°C

Resultaten:

28-05-2013

WK van der Zwaluw

15

Acinetobacter

Enterobacter

Escherichia coli

Klebsiella

Morganella morganii

Proteus

Pseudomonas

overige

n

KPC 9

NDM 12

OXA-48 21

VIM 12

IMP 6

SIM 1

GIM 1

SPM 1

BIC 1

DIM 1

AIM 1

OXA-23 3

OXA-40 1

OXA-58 1

OXA-143 1

geen 63

totaal: 135

Resultaten n CarbaNP+ AHB+

KPC 9 9 9

NDM 12 10 11

OXA-48 21 20 21

VIM 12 12 12

IMP 6 6 6

SIM 1 1 1

GIM 1 1 1

SPM 1 1 1

BIC 1 1 1

DIM 1 1 1

AIM 1 1 1

OXA-23 3 2 3

OXA-40 1 1 1

OXA-58 1 0 0

OXA-143 1 1 1

geen 63 3 2

28-05-2013

WK van der Zwaluw

16

Resultaten

Carba NP + -

+ 67 3

- 4 61

28-05-2013

WK van der Zwaluw

17

AHB + -

+ 70 2

- 1 62

Sensitiviteit: 94,4% 98,6% Specificiteit: 95,3% 96,9%

Conclusies Carba NP vs AHB

● Modified Hodge Test

● Carba NP test

› + betere specificiteit & typeerbaarheid

› + sneller (<3 h)

› - kosten

› - gebruiksgemak

● Antibiotic Hydrolysis Bioassay

› + hoge sensitiviteit, specificiteit & typeerbaarheid

› + lage kosten

› + eenvoudig uitvoeren & aflezen

› + breder toepasbaar

› - tijdsduur (overnacht incubatie)

28-05-2013 WK van der Zwaluw

18

Met dank aan:

● Alle medewerkers IDS-BSR

● Angela de Haan

● Han de Neeling

● Max Heck

● Henk Bijlmer

● Alle inzendende laboratoria

28-05-2013

WK van der Zwaluw

19