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21-09-2019
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Cryptococcus
Dr Patricio Godoy MartínezInstituto de Microbiología Clínica
UACH
www.pgodoy.com
Cryptococcus
◼ Levadura Capsulada , identificada por primera
vez en 1894.
◼ Amplia distribución geográfica.
◼ No constituye parte de la microbiota humana.
◼ El genero Cryptococcus comprende 19 especies.
◼ Su ciclo vital involucra 2 formas: sexual y asexual.
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Género Cryptococcus
Tabla 1. Clasificación taxonómica de Cryptococcus.
División Clase Orden Teleomorfo Anamorfo Serología
Basidiomycota Hymenomycetes Tremellales Filobasidiella
neoformans
C. neoformans v. grubii
C. grubii
A
Filobasidiella
neoformans
C. neoformans v. neoformans D
Filobasidiella
bacillispora
C. neoformans v. gattii
C. gatti
C. bacillisporus
B y C
Filobasidiella
uniguttulatum
C. uniguttulatus
C. laurentii
C. albidus
Especies de Cryptococcus1. Cryptococcus aerius
2. Cryptococcus albidosimilis
3. Cryptococcus albidus
4. Cryptococcus albidus var. albidus y difluens
5. Cryptococcus amylolentus
6. Cryptococcus antarcticus
7. Cryptococcus aquaticus
8. Cryptococcus ater
9. Cryptococcus bhutanensis
10. Cryptococcus consortionis
11. Cryptococcus curvatus
12. Cryptococcus feraegula
13. Cryptococcus flavus
14. Cryptococcus friedmannii
15. Cryptococcus fuscescens
16. Cryptococcus gilvescens
17. Cryptococcus heveanensis
19. Cryptococcus huempii
20. Cryptococcus humicolus
21. Cryptococcus hungaricus
22. Cryptococcus kuetzingii
23. Cryptococcus laurentii
24. Cryptococcus luteolus
25. Cryptococcus macerans
26. Cryptococcus magnus
27. Cryptococcus marinus
28. Cryptococcus neoformans var. neoformans y grubii
29. Cryptococcus gattii
30. Cryptococcus podzolicus
31. Cryptococcus skinneri
32. Cryptococcus terreus
33. Cryptococcus uniguttulatus
34. Cryptococcus vishniacii
35. Cryptococcus yarrowii
Kwon-Chung & Bennett, 1992.
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Diferenciación entre C. neoformans y
C. gattii
Anamorfa
Cryptococcus neoformans
Cryptococcus gattii
var. grubiiHíbrido
AD
var.
neoformans
Serotipos A AD D B & C
Fenotípicas
Teleomórfa Filobasidiella neoformans Filobasidiella bacillispora
CGB NEGATIVO POSITIVO
D-Proline NEGATIVO POSITIVO
Biológicas (cruza) No producen por meiosis recombinantes haplóides verdadeiros
Filogenética
(~DNA = 55-63%)
VNI/AFLP1
VNII o
AFLP1A
VNIII
AFLP3
VNIV
AFLP2
VGI/AFLP4
VGII/AFLP5
VGIII/AFLP6
VGIV/AFLP7
Kwon-Chung. FEMS Yeast Res,
6:57,2006.
Variedades, serotipos y genotipos
◼ Cryptococcus neoformans var. grubii
❑ Serotipos A –VNI Y VNII- (y AD –VNIII-)
◼ Cryptococcus neoformans var. neoformans
❑ Serotipos D –VNIV- (y AD –VNIII-)
◼ Cryptococcus bacillisporus o C. gattii
❑ Serotipos B y C –VGI A VGIV-
Meyer W et al. Emerg Infect Dis, 2003.
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▪ Serotipo A : VNI VNII
▪ Serotipo B y C: VGI VGII VGIII VG IV
▪ Serotipo AD: VNIII
▪ Serotipo D: VNIV
▪ La mayoría de los aislamientos en pacientes
VIH corresponden a genotipo, VNI y VNIV
Emerg Infect Dis,;vol. 9:189, 2003.
Serotipos y Genotipos
Cryptococcus gattii
Chen SCA et al. Clin Microbiol Rev. 27 (4) 2014.
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Cryptococcus gattii
Chen SCA et al. Clin Microbiol Rev. 27 (4) 2014.
Nueva Taxonomía
Hagen F, Khayhan K, Theelen B, Kolecka A, Polacheck I, Sionov E, Falk R, Parnmen S, Lumbsch HT,
Boekhout T. Recognition of seven species in the Cryptococcus gattii/Cryptococcus neoformans species
complex. Fungal Genet Biol. 2015 May;78:16-48.
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Cryptococcus neoformans
◼ Reservorio más importante de C. neoformans var.
neoformans: heces de paloma (urbana o Columba
livia) o suelos contaminados.
❑ Deyecciones en aleros de edificios, áticos o
balcones de casas abandonadas (duermen las
palomas).
❑ Hábitat urbano, desecado, alcalino y rico en
nitrógeno
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Reservorio: C. gattii
◼ Eucaliptos (Eucalyptus camaldulensis, Eucalyptus tereticornis,Eucalyptus blakelyi, Eucalyptus gomphocephala, Eucalyptusgrandis, Eucalyptus haemostoma, Eucalyptus microcorys,Eucalyptus rudis)
◼ Otros árboles: almendro (Terminalia catappa –C-), higuera (Ficusmicrocarpa), Adenanthera pavonina, Angophora costata, Cassiagrandis, Erythrina velutina, Erythrina jambolanum, Guettardaacreana, Moquilea tomentosa, Syncarpia glomulifera…
◼ Cavidad nasal de koalas (Phascolarctus cinereus)
◼ Guano de murciélago (Rhinolophidae)
◼ Nido de avispas (Polybia occidentalis) (Uruguay)
Hongo
Verdaderamente
Patógeno
Hongo Oportunista
(inmunidade
celular)
Sarcoidosis
Corticoide
Ac monoclonales
DM
Cirróticos
Def. I. Humoral
Colagenosis
I. Renal/Hepat
Chayakulkeeree & Perfect, Infect Dis Clin N Am, 2006.
C. gattii → C. neoformans
¿Quién desarrolla Criptococosis?
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Características C. neoformans C. gattii
Contacto Rural 11-21% 47-69%
Inmunocompetente 20-25% 74-87%
SIDA 50% 2,1%
Inmunossuprimido no-HIV 29% 8,5%
Criptococoma Cerebral 9,3-11% 33,3-40%
Hidrocefalia 2,3% 16,7%
Criptococoma Pulmonar 22% 72-80%
Infilt.Pulm. Alveolar/Intersticial 70,4% 16,7%
Fungemia 20-63% baja
Titulación do antígeno ↑ ↓
Secuelas Neurológicas 3-22% 38-39%
Descripción R-FCZ ↓ ↑
Mortalidad 30% 15%
Chen.CID,31:499, 2000; Mitchell.CID, 20:611, 1995; Speed.CID, 21:28,
1995.
Diferencias Clínicas y Epidemiológicas
entre C. neoformans y C. gattii
Incidencia de Criptococosis, Francia,
1985-2001 (2.125 casos)
Dromer et al., AIDS; 18:555, 2004.
HAART
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Moysés Neto et al, J Bras Nefrol,
1995;17(3):162
39,0%
6,1%
29,3%
3,7%
3,7%
3,7%
14,6% Candida
Aspergillus
Criptococcus
Mucormicosis
Paracoccidioides
Histoplasma
Otros
▪ Moysés Neto et al, 1995, Ribeirão Preto – 82 episodios (66 pts)
de infecciones fúngicas en trasplante renal.
Distribución de las Micosis en Tx. Renal
en Brasil
Perfect & Casadevall, Infect Dis Clin N Am, 2002;16:875; Vilchez, Am J Transplant, 2002;2:575
▪ Sida (>80%)
▪ Transplantes
▪ Evolución tto. de cáncer
▪ Rara en inmunocompetentes
▪ HAART
▪ Fluconazol
▪ Dificultades tratamiento de SIDA en los países en desarrollo
▪ No-VIH
▪ TOS (18-65%)
Década de 70
Década de 90
Incidencia de Criptococosis
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Casos de Meningitis por Cryptococcus en
pacientes VIH a nivel mundial
Adapted from BJ Park et al., AIDS 2009;23:525-530
Causas de muerte en el África
Subsahariana, excluido HIV/AIDS
Adapted from BJ Park et al., AIDS 2009;23:525-530
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Perfect & Casadevall, Infect Dis Clin N Am, 2002;16:875; Mitchell & Perfect, Clin Micr Rer, 1995;8(4):515
Infecciónaguda
Infecciónlatente
Resolución
Inmunidad celular
Patogénesis de la Criptococosis
Infección Pulmonar
◼ Nódulo único o múltiple
◼ Infiltrado lobar
◼ Infiltrado Intersticial
◼ Cavitaciones
◼ Masa endobronquial
◼ Diagnóstico diferencial
❑ TBC
❑ Nocardiosis
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Infección SNC
◼ Meningitis o meningoencefalitis subaguda son las
formas de presentación más frecuentes.
❑ Cefalea
❑ Fiebre
❑ Alteración de conciencia
❑ Visión borrosa
❑ Fotofobia
❑ Diplopía
◼ Masa cerebral: criptococomas.
Lesiones en Piel
◼ Puede producir cualquier
tipo de lesiones.
◼ Habitualmente es una
expresión de diseminación.
(Nódulos, pápulas,
vesículas, úlceras,
granulomas, placas etc.)
◼ Biopsia y cultivo de tejido
para diagnóstico.
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Manifestación clínica en paciente
con cirrosis
◼ Peritonitis (19%–45%).
◼ Meningitis (39%–48%).
◼ Enfermedad pulmonar(18%–37%).
◼ Sepsis y enfermedad diseminada ocurre entre
el 50-70% y 19-76% respectivamente.
◼ La mortalidad está entre el 51% al 100%.
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CÁPSULA MELANINA
• Antifagocítica
• Anti-Inflamatoría
• Inmunosupresora
• Protege contra oxidantes
• Interfiere en la muerte celular
• Protege contra los antifúngicos
Por qué C. neoformans es difícil de
erradicar
C. neoformans como un patógeno intracelular in vivo e
in vitro
Día 1
Día 14
Replicación (Brote INDEX)
Intracellular 6.8
Extracellular 1.3
P = 0.0005
Feldmesser et al. 1999
In vitro en J774 células
In vivo – pulmón de ratón
Dr. Arturo Casadevall
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C. neoformans estrategia de parasitismo
intracelular
Dr . Arturo Casadevall
FLUCONAZOL (306)
(ITRACONAZOL)
(VORICONAZOL)
5-FLUORCITOCINA (129)
No AfectaAfecta
CASPOFUNGINA (1093)
ANFOTERICINA B (924)
Melanina Reduce la efectividad de
antifúngicos de mayor masa molecular
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¿Cómo hacemos el diagnóstico?
▪ Sospecha clínica
▪ Hemocultivos
▪ Detección de antígeno capsular(sérico y LCR)
▪ Cultivo de lesiones cutáneas
▪ Punción lumbar si no hay contraindicación (convulsiones, compromiso de conciencia, focalización)
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▪ Examen Directo: Tinta China de cualquier
fluido.
▪ Cultivo do LCR, Biopsia, LBA o esputo.
▪ Antígeno Criptocócico en LCR y Sangre.
▪ Examen Histopatológico.
Casadevall & Perfect. Cryptococcus neoformans, 1998.
¿Cuáles son las herramientas
diagnósticas Disponibles?
Diagnóstico por microscopía
◼ Levaduras encapsuladas (tinción con tinta o connigrosina) en el sedimento del LCR u otros líquidoscorporales.
◼ Las cápsulas pueden ser muy pequeñas e inclusoestar ausentes.
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Lavado Bronquio Alveolar de
paciente VIH – tinción negativa
Diagnóstico por cultivo micológico
◼ Cryptococcus se puede aislar de LCR, también de
muestras de sangre, esputo, orina o líquido
prostático.
◼ Los hemocultivos son positivos en alrededor del
60% de los pacientes con sida y criptococosis.
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◼ Medios más específicos (actividad
fenoloxidasa = colonias mucoides marrones o
negras – melanina):❑ agar alpiste (Guizotia abyssinica)
❑ agar con semillas de girasol (Helianthus annus)
❑ agar ácido caféico
Diagnóstico por cultivo micológico
CGB: positivo = C. gattii
Medio CGB
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Coloração de Prata - Pulmão
Tinción de Mucicarmim de Meyer
▪ LCR, Sangre, LBA y líquido pleural.
❑ Sensibilidad ±90% y especificidad ±100%.
❑ Falso + : FR, error de técnica y Trichosporon spp.
❑ Falso - : títulos bajos, inicio de la infección, IC, efecto
prozona y levaduras pobremente capsuladas.
❑ Relación con pronóstico: (↑ látex = peor pronóstico).
Perfect & Casadevall, Infect Dis Clin N Am, 2002;16:875; Judith et al, J Clin Microbiol, 1991;29(6):1260
Examen de Antígeno Criptocócico
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LF Cryptococcus
▪ Criptococosis
❑Comercialmente
disponible (tiras)
❑Immuno-Mycologics Inc,
USA
❑Costo del test en EUA
(U$2), Brasil (U$8)
Saag et al, Clin Infect Dis, 2000;30(4):710
Tratamiento de la Criptococosis
▪Depende: Sitio de Infección + Inmunidad
▪ Formulaciones de Anfotericina B
▪ Asociaciones de Anfotericina B + 5
Fluorocitosina
▪ Fluconazol, Itraconazol, Voriconazol
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Candida auris
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Taxo
no
mía
Especie auris
Genero Candida
Familia Metschnikowiacea
Orden Saccharomycetales
Clase Saccharomycetes
Reino Fungi
Dominio Eukaryota
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Satoh, K.(2009). Microbiology and
immunology, 53(1), 41-44.
Jackson, B. R.(2019). Journal of
Fungi, 5(3), 58.
Candida auris
El primer reporte de C.
auris se hizo en el Japón en
2009 a partir de la secreción de
oído.
En junio de 2016 (CDC) yeste año se decretó alertamundial de este patógenoemergente. Se hanreportados casos en Coreadel Sur, India, Reino Unido,Colombia, Venezuela,Estados Unidos, Israelentre otros (11 países).Principalmente en ITS,heridas y otitis.
Puede causarbrotes de origennosocomial, laidentificaciónrápida esfundamentalpara tomar lasprecauciones yprevenir ladiseminación
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Por The New York Times | Fuentes: Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC); las revistas Emerging Infectious Diseases,
Emerging Microbes & Infections, Clinical Infectious Diseases, Journal of Infection, Mycoses y el Instituto Doherty. Imágenes de Kazuo Satoh y otros, en la
revista Microbiology and Immunology
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Características
Identificación errónea
Resistencia múltiple
Mantenimiento fácil de la
colonización
Iguchi, S.(2019). Journal of Infection and Chemotherapy.
Difícil control de
brotes
620 Casos110 infecciones del torrente sanguíneo
40 otras infecciones
466 colonizaciones
4 no se conoce
Rhodes, J., & Fisher, M. C. (2019). Current opinion in microbiology, 52, 84-89.
Candida auris
❖A 25ºC en extracto de levadura
peptona dextrosa:
• Célula ovoide, elipsoidales o
alargadas.
• Tamaño aprox. 2,5 – 5,0 μm.
Individuales, en parejas o grupos.
❖En extracto de Malta a 25ºC por un
mes:
• Cultivo viscoso, blanco a gris, liso
y brillante
• No se producen pseudohifas
después de 59 días a 25ºC.
• C. Haemulonni si las produce
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Patrón de identificación errónea con método convencional
Presentar resistencia a uno o mas antifúngicos
Detección previa en el hospital u otras unidades clínicas
pacientes del área o país de alta prevalencia
Diagnóstico
PCR
Espectrometría de masas
Resonancia magnética T2
Baja
Disponibilidad
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Resistencia
Antifúngica
❖ Se estima que más del 90% de los
aislamientos clínicos de Candida
auris son resistentes a fluconazol
(CIM > 64 mg/L).
❖ 50% resistentes al Voriconazol
❖ Un tercio son resistentes a la
anfotericina B
❖ Se ha observado baja resistencia a
las equinocandinas
Medidas de
Prevención y
Profilaxis
❖ Es recomendable que los pacientes infectados ocolonizados por Candida auris estén enhabitaciones individuales con medidas deaislamiento.
❖ El personal sanitario, si es posible exclusivo paraestos pacientes, debe utilizar bata y guantesdesechables, y en caso de riesgo de salpicadurasde fluidos corporales, mascarilla, protector facial,calzas y gorro.
❖ El aislamiento del paciente colonizado o infectadose mantendrá hasta que los cultivos de vigilanciadiarios, de secreciones respiratorias, muestrasorofaríngeas, orina, sangre, etc., sean negativostres veces seguidas.
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Medidas de Prevención y
Profilaxis ❖ Estos pacientes realizarán medidas de
desinfección cutánea y mucosa con clorhexidina
al 2% utilizando toallas dos veces al día por 5
días, Clorhexidina al 4% para enjuague bucal, en
algunos casos se debe utilizar nistatina oral .
❖ La descontaminación ambiental se realizará
mediante limpieza extrema con agua y jabón y
posterior uso de productos clorados (1000 ppm
hasta 10.000) de suelos y superficies, tres veces
al día y vapor de H2O2. Es importante la limpieza
del material, equipo y aparatos después de la
utilización con el paciente colonizado o
infectado.
Valdivia, 20 al 24 de Enero 2020
V CURSO INTERNACIONAL DE TAXONOMÍA DE HONGOS
FILAMENTOSOS de IMPORTANCIA CLÍNICA
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