PowerPoint Presentation

KHO ST HOT TNH LIGNIN PEROXIDASE, MANGANESE PEROXIDASE,CELLULASE CA CHNG PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM KHI B X L BNG SHOCK NHIT V TIA UV

Nhm thc hin: GV hng dn: Th.S H Thin Hong1.NGUYN VN HUY10037011

2. NG TH L HUYN10035861

3. NGUYN TH THY LINH10085471

4. H NHT KHNH10042591

5. L DUY THNG10049421DANH SCH NHMIV. PHNG PHP KHO ST HOT TNH CA LIP, MNP V CELLULASE CA PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BNG TIA UV.II. KHO ST HOT TNH CA LiP, MnP V CELLULASE THEO THI GIAN NUI CY PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM I. M UIII. PHNG PHP KHO ST HOT TNH CA LIP, MNP V CELLULASE CA PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BNG SHOCK NHIT Lignin l mt polime phong ph trong t nhin c thc vt tng hp, l mt ngun cht thm ln trn tri t. Lignin to cng cho t bo thc vt, gip cho t bo ng vt trnh khi cc xm nhim ca vi sinh vt.

I. M uVi khun v nm c kh nng sinh ra enzyme phn hy lignin, ch yu l nm.

Cc enzyme c kh nng phn hy Ligin c ng dng trong thc phm v thc n gia sc.ng dng vo CN sn xut giy, ty trng bt giy bng phng php sinh hc bin tnh x si.ng dng s l cht thi, ty trng cellulose v cc cht hu c c hi: PAH, PCB, dioxin.Kh nng chuyn ha cht hu c thnh nhng sn phm c ch.Nhiu cng trnh nghin cu cho thy Phanerochaete chrysosporium l loi vi sinh vt c bit v c nghin cu nhiu do kh nng phn hy lignin bng h enzyme ca chng:Lignin Peroxidase (LiP) Manganese Peroxidase (MnP) Cellulase

Kho st hot tnh h enzyme theo thi gian chiu tia UV v nhit gy shock nhit

a)Nguyn liu:Chng nm mc trng Phanerochaete chrysosporium t nhin c phn lp t thn g mc.

II. KHO ST HOT TNH CA LiP, MnP V CELLULASE THEO THI GIAN NUI CY PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM Loi nm mc trng l nhm nm d tn thuc nhm Basidiomycetes, lp Hymenomycetes, b Aphyllomycetes, chi PhanerochaetePhanerochaete chrysosporiuml loi nm gy thi trng g.C kh nng phn gii hon ton Lignin thnh carboxyl v H2O nh vo mt h enzyme ngoi boc tnh ca Phanerochaete chrysosporium l mt loi vi sinh vt hiu kh nn chng ta nui cy lc trong mi trng PGB (lng). Mi trng PGB ( Potatos Glucose Bloth):Thnh phn mi trng (g/l):Khoai ty:200gGlucose:20gNc ct y :1000ml Phng php nh hot tnh LiP da vo s oxi ha xanh methylen lm gim s hp thu bc sng 664nm.Phng php nh hot tnh MnP da vo s oxi ha hp cht Phenol Red, gia tng hp thu bc sng 610nm. Phng php nh hot tnh cellulose: s dng CMC (Carboxylmethyl Cellulase) nh c cht, chit enzyme vi CMC trong 1 gi, pH 4,5. b. Phng phpHot tnh LiP thay i khng nhiu trong 12 ngy nui cy lc. Ta thu ch phm c hot tnh LiP cao nht l t ngy th 5 n ngy th 7.

2. KT QU V BIN LUNHot tnh ca MnP v Cellulase t c mc cao nht l ngy th 7.

Vy qua kt qu kho st hot tnh LiP, MnP v Cellulase theo thi gian nui cy lc Phanerochaete chrysosporium, nhn thy thu c ngy th 7 s cho hot tnh ca 3 loi Enzyme mc cao nht. PHNG PHP KHO ST HOT TNH CA LIP, MNP V CELLULASE CA PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BNG SHOCK NHIT v CHIU UVI. PHNG PHP SHOCK NHIT1. Nguyn liu Chng nm mc trng Phanerochaete chrysosporium

Shock nhit l s thay i nhit t ngt tng cao hoc h thp so vi nhit pht trin ti u ca sinh vt.2. Phng phpPHNG PHP KHO ST HOT TNH CA LIP, MNP V XENLULASSE CA PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BNG SHOCK NHITShock nhit i vi PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM Phng phpThc hin 3 mc nhit 50, 60 v 70 C nhit 50oC hot tnh ca LiP cha c s thay i bc ph cao, nu tng thi gian shock nhit ln th hot tnh ca LiP tng dn.Kho st hot tnh ca LiP nhit 60oC hot tnh LiP t cc i thi gian l 120 pht (0.077UI/ml) Kho st hot tnh ca LiP khi tng dn thi gian shock nhit ln ti 180 pht th hot tnh ca LiP gim ch cn 0.021UI/ml.So vi mu chun khi cha shock nhit l 0.033UI/ml nhit 70oC hot tnh LiP cao nht trong thi gian 15 pht l 0.5UI/ml v sau gim dn, khi tng thi gian ln ti 90 pht th hot tnh ch cn 0.018UI/mlKho st hot tnh ca LiP

Biu th hin s thay i hot tnh ca LiP Shock nhit i vi PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM Kho st hot tnh ca MnP nhit 50oC hot tnh ca MnP thay i khng ng k. nhit 60oC th MnP t cc i ti thi im 60 pht, tng gp i so vi khi khng sock nhit (t 60UI/ml tng ln 120UI/ml). nhit 70oC th hot tnh ca MnP gim rt thp ch 0.45UI/ml thi gian l 15 pht v 60 pht l 0.15UI/m.Kho st hot tnh ca MnP

Biu th hin s thay i hot tnh ca MnP

Kho st hot tnh ca Cellulase. nhit 50oC th hot tnh hu nh khng thay i. nhit 60oC khi sock nhit thi gian l 90 pht th hot tnh ca Cellulase t gi tr cao nht l 0.6UI/ml. cao gp 2 ln so vi hot tnh khng c sock nhit.Kho st hot tnh ca Cellulase. nhit 70oC hot tnh ca cellulose c chiu hng gim dn

Biu th hin s thay i hot tnh ca Cellulase II) PHNG PHP KHO ST HOT TNH CA LIP, MNP V CELLULASE CA PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM BNG TIA UV.1. Nguyn liu Chng nm mc trng Phanerochaete chrysosporium c Phng sinh hc phn t trng i hc Khoa hc t nhin phn lp t thn g mc.

3. Nguyn tc ca phng phpTia UV l tia t ngoi c bc sng trung gian (gia nh sng nhn thy c v tia X). Tc dng ca tia t ngoi (UV) l kim hm s sao m, phin m ca vi sinh vt, v vy n l mt tc nhn gy t bin to ging mi. George M.Savage 1949 dng nng lng tia UV v tia X lm tng kh nng to khng sinh ca chng x khun Streptomyces griseus. Do ,ngi ta cng dng tia UV tin hnh kho st hot tnh LiP, MnP v cellulase ca Phanerochaete chrysosporium.

Hot tnh ca cc enzyme LiP, MnP v cellulase thay i theo thi gian khc nhau khi chiu trn tia UV.4. Cch tin hnh Cho mt lng vi sinh vt vo a petri c kh trng v t di ngun sng n UV (n UV trong t cy v trng hiu BASSII, bc sng 253 257, cng sut gn 1kw), ti v tr cch n chiu 45cm, chiu trong nhng khong thi gian xc nh (15, 30, 45 pht). Mt s hnh nh t cy v trng thng c s dng trong phng th nghim:

Sau y l cc th biu th s thay i hot tnh ca LiP, MnP, cellulasse theo thi gian khi c chiu trn tia UV4. Cch tin hnh

Qua th trn ta nhn thy rng tia UV c nh hng n hot tnh LiP ca Phanerochaetechrysosporium. Sau cho lng vi sinh vt ny vo mi trng PGB v nui cy lc. Nu Phanerochaete chrysosporium chu tc ng ca tia UV trong 30 pht th hot tnh LiP t c cao nht l 0.0485UI/ml so vi hot tnh ban u l 0.0328UI/ml.

Hot tnh MnP , Cellulase theo thi gian chiu UV ln Phanerochaete chrysosporium4. Cch tin hnh

4. Cch tin hnh

Theo th trn, trong 3 enzyme th cellulase l enzyme chu nh hng tt t vic chiu UV. Hot tnh tng tt nht khi Phanerochaete chrysosporium c chiu UV trong thi gian l 30 pht, hot tnh t 1.51UI/ml, tng khong 5 ln so vi ban u l (0.28UI/ml). Nhng nu thi gian chiu UV tng ln n 45 pht th hot tnh cellulase gim xung gn bng 0 (0.1025UI/ml). Vy nu Phanerochaete chrysosporium chu tc ng ca tia UV th ch c hot tnh ca LiP v cellulase tng cn MnP s gim v bng 0 nu chiu tia UV trong vng 45 pht.4. Cch tin hnh Tia UV c tc dng lm tng hot tnh ca cellulase, khng c tc ng r i vi hot tnh LiP v lm gim hot tnh ca MnP: Hot tnh cellulase t 1.51UI/ml (gp 5 ln so vi ban u l 0.28UI/ml) di tc ng ca tia UV trong 30 pht. Hot tnh LiP t c 0.0485UI/ml (ban u l 0.0328UI/ml) di tc ng ca tia UV trong 30 pht. Hot tnh MnP ca Phanerochaete chrysosporium c xu hng gim dn v bng 0 di tc ng ca tia UV trong 45 pht5. Kt QuCM N THY V CC BN LNG NGHE