I.
TUJUAN 1. Membuat kurva absorbsi campuran dua zat. 2. Menentukan
panjang gelombang pengukuran. 3. Menentukan absortivitas molar
kedua zat pada setiap panjang gelombang pengukuran. 4. Menentukan
kadar zat campuran secara simultan.
II. 2.1
DASAR TEORI Spektrofotometri UV-Vis Spektrofotometri UV-Vis
termasuk salah satu metode analisis instrumental yang frekuensi
penggunaannya paling banyak serta merupakan instrumental yang
banyak ditemukan dalam laboratorium kimia analisis.
Spektrofotometri UV-Vis melibatkan energi elektronik yang besar
pada molekul yang dianalisis, sehingga spektrofotometri UVVis lebih
banyak dipakai untuk analisis kuantitatif dibandingkan kualitatif
(Widjaja dkk., 2008). Prinsip pengukuran dengan spektrofotometri
adalah interaksi antara sumber radiasi elektromagnetik dengan
analat. Semua bahan dapat menuyerap radiasi elektromagnetik karena
memiliki elektron yang dapat menyebabkan transisi elektronik ke
tingkat energi yang lebih tinggi. Transisi elektronik pada analat
menyebabkan intensitas sumber radiasi elektromagnetik menurun.
Intensitas sumber radiasi yang keluar dari analat dibaca oleh
detektor sebagai transmitan dan berdasarkan hukum Lambert-Beer
dirubah ke dalam bentuk absorban dan ditampilkan dalam spektrum
ultraviolet. (Herlina, 2008). Analisis dengan spektrofotometri
UV-Vis selalu melibatkan pembacaan absorban REM oleh molekul atau
REM yang diteruskan. Keduanya dikenal dengan istilah absorban (A)
tanpa satuan dan transmitan dengan satuan persen (%T) (Widjaja
dkk., 2008).
Kadar larutan campuran dua zat dapat ditentukan dengan metode
spektrofotometri tanpa harus dipisahkan terlebih dahulu. Kedua zat
harus memiliki panjang gelombang maksimum yang tidak berhimpit.
Absorpsi larutan sampel/campurannya pada panjang gelombang
pengukuran merupakan jumlah absorpsi dari masing-masing zat
tunggalnya. Kadar masing-masing zat ditentukan menggunakan metode
simultan (Widjaja dkk., 2012). Bila diinginkan pengukuran 2 senyawa
berbeda secara bersamasama dengan spektrofotometri, maka dapat
dilakukan pada 2 panjang gelombang dimana masing-masing komponen
tidak saling mengganggu atau gangguan dari komponen yang lain yang
paling kecil. Dua buah kromofor yang berbeda akan memberikan
kekuatan absorpsi cahaya yang berbeda pula pada satu daerah panjang
gelombang . Pengukuran dilakukan pada beberapa panjang gelombang
sehingga nantinya didapatkan dua panjang gelombang maksimum. Pada
dua panjang gelombang maksimum ini akan didapatkan dua persamaan
hubungan antara dihitung. absorbansi dengan dipilih konsentrasi
panjang masing-masing gelombang yang panjang mana gelombang.
Akibatnya konsentrasi masing-masing komponen dapat Mula-mula
perbandingan absortivitas maksimum, yaitu : (a1/a2) maksimum pada 1
dan (a2/a1) pada 2 . Hal tersebut dapat dilihat dari gambar di
bawah ini (Gandjar dan Rohman, 2007)
Gambar 2. 1. Spektra dua buah senyawa, senyawa I dan senyawa II
(Sumber : Pescok et al, 1976)
Pengukuran campuran 2 senyawa baik pada panjang gelombang
1(1
) mapun panjang gelombang 2 (2) , oleh absorbansi pada kedua
panjang
gelombang tersebut merupakan jumlah dari absorbansi senyawa1 dan
absorbansi senyawa 2 (perhatikan gambar diatas yang menggambarkan
spektra dua buah senyawa,senyawa I dan II), yang secara matematis
dapat dituliskan sebagai berikut: A1 = (a1c 1) 1 + (a2c 2) 1
.............................................(1.5) A2 = (a1c 1) 2 +
(a2c 2) 2 .............................................(1.6)
Keterangan : nilai a (absorptivitas) dapat juga diganti dengan
absorptivitas molar.Yang mana: c1 c2 : konsentrasi senyawa 1 :
konsentrasi senyawa 2 : absorptivitas senyawa 1 pada panjang
(a1) 1
Apabila suatu REM dikenakan kepada suatu larutan dengan
intensitas radiasi semula (I0), maka sebagian radiasi tersebut akan
diteruskan (It), dipantulkan (Ir) dan diabsorpsi (Ia), sehingga: I0
= It + Ir + Ia Harga Ir ( 4%) dapat diabaikan karena pengerjaan
dengan metode Spektofotometri UV-Vis menggunakan larutan pembanding
sehingga: I0 = It + Ia Bouguer, Lambert dan Beer secara matematis
menghubungkan antara transmitan dan absorban dengan intensitas
radiasi sehingga didapatkan:
Dimana : T = persen transmitan Io = Intensitas radiasi yang
datang It = Intensitas radiasi yang diteruskan ??? absorbansi molar
(L.mol-1 cm-1) = c = konsentrasi (mol.L-1) b = tebal larutan (cm) A
= absorban (Widjaja, 2008).
2.2
Parasetamol Pemerian paracetamol, antara lain berupa kristal
putih atau terdiri dari serbuk kristal. Titik didihnya dalam air
berkisar antara 169.0 to 170.5. Paracetamol sedikit larut dalam air
dingin, sangat larut dalam air panas, larut dalam etanol, metanol,
dimetilformamide, etilene diklorida, aseton, dan etil asetat;
sedikit larut dalam eter dan kloroform; serta tidak larut dalam
petroleum eter, pentane dan benzene (Anonim, 1995).
Gambar 4. Rumus Struktur Paracetamol (Bogusz, 2000)
Paracetamol memiliki absorbansi maksimum pada panjang gelombang
245 (pada suasana asam) dan 257 (pada suasana basa). Kurva
absorbansi paracetamol pada larutan asam serta basa dapat dilihat
pada gambar di bawah. Larutan asam encer245 (A11=668a); Larutan
basa encer257 nm (A11=715a) (Anonim, 2005).
Gambar 5. Spektrum Paracetamol (Moffat et al, 2005)
2.3
Teofilin Pemerian Teofilin, yaitu serbuk hablur, putih; tidak
berbau; rasa pahit; stabil di udara. Teofilin mengandung satu
molekul air hidrat atau anhidrat. Mengandung tidak kurang dari
97,0% dan tidak lebih dari 102,0% C7H8N4O2 dihitung terhadap zat
yang telah dikeringkan. Teofilin sukar larut dalam air, tetapi
mudah larut dalam air panas; mudah larut dalam larutan alkali
hidroksida dan dalam ammonium hidroksida; agak sukar larut dalam
etanol, dalam kloroform dan dalam eter (Anonim, 1995).
Gambar 2.3.1. Rumus Struktur Teofilin (Moffat et al, 2005)
Teofilin berupa serbuk kristal putih dengan titik lebur 270 274.
1 bagian teofilin terlarut dalam 120 bagian air, 80 bagian etanol
dan 110 bagian kloroform; terlarut sebagian dalam eter; larut dalam
asam encer, ammonia, dan larutan alkali hidroksida.
Absorbansi teofilin pada max 270 nm dalam Larutan asam adalah
sebesar 536 a sedangkan dalam larutan alkali atau basa absobansinya
sebesar 650a pada max 275 nm. Kurva absorbansi teofilin pada
larutan asam serta basa dapat dilihat pada gambar di bawah (Moffat
et al, 2005).
Gambar 2.3.2. Spektrum Teofilin (Moffat et al, 2005)
III. 3.1 -
ALAT DAN BAHAN Alat Spektrofotometri UV-Vis Kuvet Labu takar 25
mL; 100 mL Pipet volume 1 mL; 5 mL; 10 mL Gelas viala 100 mL Pipet
tetes Botol semprot Tissue Lap pel
3.2 -
Bahan Larutan stok baku parasetamol 1 mg/1 mL Larutan stok baku
teofilin 1 mg/1 mL Sampel larutan parasetamol dan teofilin
Aquades
IV. 4.1
PELAKSANAAN PERCOBAAN Penyiapan Larutan 4.1.1 Larutan stok baku
parasetamol dan teofilin Ditimbang masing-masing 10 mg parasetamol
dan 15 mg teofilin Dimasukkan masing-masing ke dalam labu takar 100
mL Dilarutkan dalam aquades dan diisi volume sampai tanda batas
4.1.2 Larutan siap ukur baku parasetamol dan teofilin Dipipet 0,1
mL larutan stok parasetamol dan 1,0 mL teofilin Dimasukkan
masing-masing ke dalam labu takar 25 mL Ditambahkan aquades sampai
tanda batas 4.1.3 Larutan blanko = aquades 4.2 Pengukuran 4.2.1
Menghidupkan spektrofotometer GENEYSTM 10 Dihidupkan alat dengan
menekan tombol ON/OFF (1 = ON;
0=OFF) 4.2.2 Pengukuran larutan blanko dan larutan sampel Diukur
absorban larutan baku tunggal pada rentang panjang gelombang 300
nm
Ditentukan panjang gelombang maksimum parasetamol dan teofilin
Diukur absorban larutan sampel pada kedua panjang gelombang
maksimumnya DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Depkes RI
Anonim. 2005. Clarkes Analysis of Drug and Poison. London:
Pharmaceutical Press Bogusz, MJ. 2000. Handbook of Analytical
Separation. Netherlands: Elsevier Science Gholib Gandjar I. &
Abdul R. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Herlina, Satria. 2008. Penentuan Simultan Kadar Kafein, Vitamin B1,
B2, dan B4 dengan Teknik Spektroskopi UV-Vis melalui Pendekatan
Kalibrasi Multivariat. Available at :
http://repository.ipb.ac.id/bitstream/handle
/123456789/50329/G08she.pdf?sequence=1 Opened at : 31 Maret 2012
Moffat, A.C., Osselton, D.M., Clarke, E.G.C. and Widdop, B. 2005.
Clarkes Analysis of Drugs and Poisons. 3rd Edition. Michigan:
Pharmaceutical Press Widjaja, INK. K.W. Astuti., N.M.P. Susanti.,
& I.M.A.G. Wirasuta. 2008. Buku Ajar Kimia Analisis. Jimbaran :
Jurusan Farmasi FMIPA Universitas Udayana Widjaja, INK. Ni Made
Pitri Susanti. Ni Putu Linda Lasmiani. Kadek Duwi Cahyadi. 2012.
Petunjuk Praktikum Kimia Analisis. Jimbaran : Udayana University
Press
