ANALISIS KUANTIFIKASI NITROFURAN

Kuantifikasi” (quantification) merupakan prosedur yang secara sederhana digunakan

dalam sebuah penelitian, dengan tujuan untuk mempertegas berbagai macam data tertentu, atau

menguatkan interpretasi-interpretasi melalui sampel data yang berupa angka-angka.( kurniawan ,

2005).

Kuantifikasi mengacu pada proses menggunakan angka untuk mengekspresikan

pengamatan daripada mengandalkan hanya pada deskripsi kualitatif .Proses ini memiliki dua

nilai utama . Pertama , dengan mengungkapkan sesuatu dalam hal angka agar penerjemahan

makna verbal berkurang . Kedua , penggunaan nomor memungkinkan logika matematika untuk

diterapkan pada upaya untuk mengeksplorasi , menggambarkan dan memahami

alam( Jinks.1997)

Dalam analisa Kuantifikasi dikenal pula batas kuantifikasi yang didefenisikan sebagai

konsentrasi analit terendah dalam sampel yang dapat ditentukan dengan presisi dan akurasi yang

dapat diterima pada kondisi operasional metode yang digunakan. Batas kuantifikasi juga

dinyatakan dalam konsentrasi analit dalam sampel.

Nitrofuran adalah kelompok obat hewan yang bersifat sebagai antibakteri. Antibiotika

utamanya adalah nitrofurazon (NFZ),nitrofurantoin (NFT) furazolidon (FZD) dan furaltadon

(FTD). Antibakteri ini efektif melawan Salmonella spp., coliform, Mycoplasma spp., Coccidia

spp. dan berbagai protozoa lainnya. Nitrofuran biasanya digunakan secara tunggal maupun

kombinasi dengan obat hewan lain secara oral maupun topikal dan dapat digunakan sebagai

pemicu pertumbuhan atau meningkatkan efisiensi pakan. (MCCRACKEN et al., 2001).

Antibiotik Nitrofuran secara in vivo memiliki metabolisme yang cepat yang merupakan

karakteristik dari senyawa ini.Hal tersebut membuat deteksi terhadap senyawa induk kurang

efektif. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Kevin M dan Michael (2004) Metode

LC/MS/MS (Liquid Chromatography-Mass Spektrometri) digunakan untuk quantifikasi

metabolit nitrofuran dalam sampel yang berupa madu.

LC/MS/MS merupakan suatu metode Liquid Chromatography yang dikombinasikan

dengan detektor MS. Kandungan nitrofuran dengan LC/MS/MS didasarkan pada pemisahan

sampel hasil preparasi (ekstraksi fasa padat/ SPE) pada kolom berdasarkan perbedaan interaksi

analit dengan fasa diam (packing material column) dan fasa bergerak (mobile phase) yang

berbeda dengan komponen lainnya di dalam sampel. Metode analisa dengan LC/MS/MS ini

menggunakan detektor Spektrometer Massa (MS) dalam hal identifikasi. LC/MS/MS memiliki

keunggulan yaitu memberikan hasil analisa kuantitatif yang akurat dan presisi sekaligus

konfirmasi, memiliki selektivitas yang sangat tinggi ,bekerja sebagai filter massa, Metode yang

handal dan sangat memungkinkan digunakan untuk analisis sampel dalam jumlah banyak dari

matriks yang kompleks. . Konfirmasi ini diperoleh dengan membandingkan rasio kedua ion dan

waktu retensi terhadap hasil yang diperoleh dari standar nitrofuran(F. Fendi,2011)

Cara Lain untuk kuantifikasi nitrofuran yaitu dengan menggunakan LC/ESI/MS ( liquid

chromatography-electrospray ionization- Mass spectrometry). Liquid Chromatograpy – mass

spectroscopy adalah dua  alat yang digabungkan menjadi satu, dimana berfungsi untuk

memisahkan beberapa senyawa atau campuran senyawa berdasarkan kepolarannya (prinsip kerja

kromatograpi), dimana setelah campuran senyawa tersebut terpisah, maka senyawa yang murni

tersebut akan diidentifikasi berat molekulnya. ESI adalah salah satu methode untuk mendapatkan

berat molekul yang digunakan dalam LC-MS dimana jika pada metode biasanya (lupa-red)

menggunakan fragmentasi (pemecahan molekul), maka pada metode ESI menggunakan spray

(Penyemprotan). AKibatnya tidak akan ditemukan fragmen –fragmen dari molekul

tersebut.Adapun cara kerjanya yaitu :

1. Analyte bersama dengan eluent dari syringe pump atau LC masuk ke dalam cappilary.

Di dalam kappilary terdapat anoda (kutup negatif) pada taylor cone dan katoda (kutup

negatif) didekat masukkan analyte dan eluent. Kutup ini berfungsi agar muatan yang

berkumpul pada taylor cone adalah muatan positif sehingga nantinya saat terjadi

penyemprotan dan terbentuk droplet (tetes – tetes) tidak bergabung – gabung menjadi

droplet yang lebih besar lagi.

2.  Analylet dan solven(eluent) di semprotkan (spray) melalui taylor cone.

Akan terbentuk droplet – droplet dimana droplet – droplet itu akan mengalami tahap

evaporasi solven untuk mengurangi solven yang menempel di analyte. Karena suatu saat ,

apabila terjadi evaporasi secara terus menerus maka solven yang meliputi analyte

terkungkung dalam muatan positif yang berlebih, dalam bahasa inggris tahap seperti ini

disebut the ‘rayleigh’  limit is reached, maka akan terjadi explosion yang disebut

coulombic explosion dimana akan terjadi pemecahan droplet (tetesan) tadi. Ada beberapa

kemungkinan yang terjadi pada droplet – droplet tersebut .

a. Yang pertama analyte akan tertambahi satu muatan positif

b. yang kedua analyte akan tertambahi beberapa muatan positif

c. yang ketiga analyte akan tertambahi satu muatan positif dan satu molekul solven

d. yang keempat analyte akan tertambahi satu muatan positif dan beberapa molekul

solven

e. yang kelima analyte akant tertambahi beberapa muatan positif dan beberapa

molekul solven.

3. Droplet yang mengalami coulombic exsploison tersebut akan masuk ke dalam cone

dimana di sisi kiri dan kanannya sudah mengalir gas Nitrogen (N2). Gas ini berfungsi

agar analyte yang terjadi tadi stabil dalam bentuknya dan tidak terganggu oleh pengaruh

gas oksigen. Droplet masuk ke dalam cappilary transfer lalu akan di analisis melalui mass

spectrometer ( wibowo, 2010).

Kesimpulan

Struktur, Sifat fisikokimia , penggunaan, analisis kuantifikasi dan kualifikasi senyawa Nitrofuran

dapat dipahami dan dipelajari dengan menggunakan metode dan analisis khusus untuk senyawa

nitrofuran.

Daftar Pustaka

Kurniawan, hendra. 2005. KUANTIFIKASI DAN PENGUKURAN DALAM PENELITIAN

ANTROPOLOGI.F.FISIP UI

Jinks, Jerry. 1997. The science proses http://my.ilstu.edu/~jdpeter/THE%20SCIENCE%20PROCESSES.htm

MCCRACKEN R.J., D.E. SPENCE, S.D. FLOYD and D.G. KENNEDY. 2001. Evaluation of

the residues of furazolidone and its metabolite, 3-amino-2-oxazolidinone (AOZ) in eggs. Food

Addit Contam. 18(11): 954 – 959.

M.Kevin, Michael. 2004. LC/MS/MS determination of nitrofuran metabolit residues in honey.

http://www.waters.com/webassets/cms/library/docs/oasis203.pdf

F. Fendi .2011. Screening Cepat dan Konfirmasi Residu Melamin. http://www.bercaniaga.co.id/88-

news/139-residu-melamin.

Wibowo, 2010. LC-MS-ESI .Available online at http://ithengcemani.blog.ugm.ac.id/2010/12/04/liquid-

cromathograpy-mass-spectroscopy-with-electrospray-ionization-methode-lc-ms-esi-2/