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川本法(cryofilm)を用いた術中迅速凍結切片作製法 ~遠隔診断での使用経験~ 株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター 金子 阿部 一之助 及川 守康 齊藤 千佳 佐藤 田中 向山 淳子 杉山 達朗 株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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川本法(cryofilm)を用いた術中迅速凍結切片作製法~遠隔診断での使用経験~

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

○ 金子 翔 阿部 一之助 及川 守康 齊藤 千佳

佐藤 伸 田中 彩 向山 淳子 杉山 達朗

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<はじめに>

当センターでは、各病院からの依頼を受け、術中迅速

組織診断を行う機会が増加している。現在、3病院と

ネット接続型デジタル顕微鏡;ニコン・クールスコープを

導入した遠隔病理診断(テレパソロジー)を行っている。

今回、我々は凍結ブロック薄切の際に精度向上を

目的として cryofilm を用いた凍結切片作製法(以下、

川本法)を実施しているが、そのテレパソロジーにおける

cryofilm の使用経験について検証したので報告する。

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<遠隔術中組織診断の件数>

施 設 件 数

A 病院

B 病院

C 病院

210

75

13

合計 298

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

2008~2013年

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<遠隔術中組織診断の臓器別内訳>

乳腺

肺・気管支

その他

リンパ節

胃・十二指腸

胆・肝・膵

臓 器 件 数

肺・気管支

乳腺

胆嚢・肝臓・膵臓

胃・十二指腸

リンパ節

その他

152

60

27

24

20

15

合 計 298

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

51.0%

8.1%

9.1%

6.7%

20.1%

5.0%

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<遠隔術中迅速診断の手順>

① 迅速診断の予約

② 臨床医と病理医のカンファレンス

③ 検体提出→切り出し及び組織マクロ写真撮影・

メールにて画像送信 ・・・5~10分

④ 細胞診捺印標本の作製 ・・・・・・・・・・・・・・ 2分

⑤ 凍結ブロック作製・薄切・染色 ・・・・10~20分

⑥ クールスコープによる診断 ・・・・・・・・5~20分

⑦ 手術室へ診断結果を電話報告

⑧ 報告書を FAX株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<ニコン・クールスコープ>ネットワーク下において組織標本の画像を遠隔操作で観察・ 診断するシステム

クールスコープ(サーバ) パソコン(Webブラウザ)

ネットワーク

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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・ 画像取り込みが不要であるため、標本設置後すぐに鏡検可能である

・ 小型で場所を取らない

・ バーチャルスライドと比較して安価である

<クールスコープの利点>

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<クールスコープの問題点>

・ 動作が緩慢なため、組織全体を鏡検するのに時間を要する

(7分前後/1cm四方角の組織)

・ 画像解像度が低いため、診断が困難な場合がある。

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<川本法>

骨などの硬い組織を薄切するために考案

された方法であり、切片支持用粘着用フィルム

を使用することによって、薄切が困難であった

試料からきれいな切片を容易に作製できる

方法である。

当センターでは凍結切片作製に技術を要する

脂肪の多い組織に応用できることに着目して

取り入れた。

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<主な使用器具>

ピンセット

Film密着用具Cryofilm(シート)

クリオモルド

土台

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

(予め2cm幅にカット)

裏(銀色)

表(金色)

Film固定用ステンレス板

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<薄切>

<Cryofilmを貼る> <しわを伸ばす>

<薄切>

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<染色・封入>

<封入>

<固定> <染色>

<両端の金色部分をトリミング>

Cut Cut

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*イメージです*cryofiilm を磁石やクリップで固定

<バットでの染色>

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<川本法の利点>

・ 組織切片の欠損やめくれなどの

アーチファクトが少ない

・ 主に脂肪組織の薄切時間の短縮

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<脂肪組織>川本法 従来法

脂肪部分が抜けてしまう

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

×40 ×40

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<リンパ節>

川本法 従来法

×40 ×40

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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<胃断端>川本法 従来法

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

×40 ×40

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・ フィルムを貼る操作や染色~封入操作が煩雑

・ キシレン透徹時にフィルムが歪むことにより、組織にひび割れを生じることがある

・ 川本法を用いて標本作製した際、フィルム特有の歪みで焦点が合わせづらい事がある

・ コストが増加する

<川本法の問題点>

株式会社株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター秋田病理組織細胞診研究センター

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<Cryofilm 使用時のアーチファクト>

×4 ×10

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拡大像

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<遠隔診断の使用経験を踏まえて>

近年、病理医不在の病院における術中迅速診断

のニーズは高く、診断可能な凍結切片作製のために

は高度な技術が必要で、技術習得にはかなりの時間

を要する。川本法を行うことによりある程度の経験で

ストレスなく短時間で質の高い標本作製が可能と

なり、使用意義が高いと考えられた

我々はこの川本法を使用したテレパソロジーの

経験を活かし品質向上に努め、遠隔迅速組織診断

を可能にして地域医療の貢献へ繋げていきたい

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター

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ご静聴ありがとうございました