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Proteínas de fase aguda
Nombres:
Nicolás Jiménez, Gabriel Monje, Pamela Ossandón, Raúl Salazar
Docente: Marianela Arévalo
Carrera: Tecnología Medica
Objetivos yo
Identificar proteínas de fase aguda mas utilizadas.
Conocer: Sus fundamentos teóricos.Técnicas de laboratorio.Valores de referencia.
Introducción yo
Los marcadores biológicos constituyen una alternativa atractiva y potencialmente interesante para realizar diagnóstico de infección, inflamación o daño tisular y para monitorizar la evolución y la respuesta al tratamiento.Así, los marcadores se han estudiado para: Realizar el diagnóstico de infección. Evaluar la gravedad de la infección. Predecir la evolución de la infección.
Proteína C Reactiva raul
• Descubierta en 1930 • Aparece muy tempranamente en la
infección • Aumenta en diversas situaciones tales
como: -Infecciones bacterianas -Traumatismos-Patologías inflamatorias agudas-Artritis reumatoidea
Proteína de fase aguda
Proteína C Reactiva raul
Estructura
Es pentamérica
5 subunidades de 23 kDa
El gen que la codifica se localiza en el cromosoma 1.
Proteína C Reactiva raul Síntesis y función
Producida por las células del hígado.
Respuesta a las citocinas: IL-6, IL-1.
Se une a estructuras de la superficie bacteriana.
Actúa como opsonina y activa el complemento.
Proteína C Reactiva pame Clínica
Seguimiento y control de procesos infecciosos o de daño tisular.
Provee información sobre el estado inflamatorio de un paciente.
Frente al estímulo inflamatorio los valores de PCR aumentan en las primeras 4 a 6 horas alcanzando un máximo a las 36-50 horas.
Para determinar su concentración se requiere de una muestra de suero.
Hay varios métodos analíticos para determinar la PCR.
Proteína C Reactiva nicoMétodos para determinar PCR:
Turbidimetría y Nefelometría-Prueba fotométrica-turbidimetríca
para la determinación cuantitativa de proteína C-reactiva (PCR)
-Determinación cuantitativa de Proteína C-Reactiva; “PCR-Turbilátex” Técnica de aglutinación
-Prueba rápida de aglutinación en látex, para la determinación cualitativa y semi-cuantitativa de la proteína C-reactiva; “Humatex PCR”
Proteína C Reactiva nico
TURBIDIMETRÍA Y NEFELOMETRÍA Sensibles y cuantifican la reacción En la nefelometría, los complejos dispersan la luz
de un rayo incidente a una longitud de onda apropiada.
En turbidimetría, la formación de complejos obstruye el paso de luz.
Si la concentración del anticuerpo permanece constante, la cantidad de complejo formado depende directamente de la concentración del antígeno desconocido en la mezcla de reacción.
Los test de nefelometría y turbidimetría tienen buena precisión.
Proteína C Reactiva nicoTURBIDIMETRÍA Y NEFELOMETRÍA
Prueba foto-turbidimetríca para la determinación cuantitativa de PCR: -La PCR en muestras de pacientes reacciona con los Ac anti-PCR en presencia de un buffer acelerador. -El complejo inmune formado causa turbidez en la mezcla de reacción la cual es directamente proporcional a la concentración de PCR y se mide por turbidimetría.
.
Determinación cuantitativa de Proteína C-Reactiva; “PCR-Turbilátex”: -Las partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR humana, son aglutinadas por PCR presente en la muestra del paciente. -El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de PCR de la muestra.
Proteína C Reactiva nico
TÉCNICA DE AGLUTINACIÓN
Interacción entre un anticuerpo y una partícula antigénica.
Anticuerpo es conocido como aglutinina y el antígeno como el aglutinógeno.
Aglutinación en látex.
Proteína C Reactiva nicoTÉCNICA DE AGLUTINACIÓN Prueba “Humatex PCR”
CualitativaCuantitativaRESULTADO
Positivo Negativo
Marcada y visible aglutinación de las partículas de látex en el área de la lámina.
Ausencia de aglutinación de las partículas de látex en el área de la
lámina.
Se lee el título en la última dilución que presente una aglutinación visible. Determinación
cuantitativa
Proteína C Reactiva raul
Valores de Referencia:
hasta
[mg/dL] [mg/L]
Recién nacidos hasta 3 días
1.5 15
Niños desde el cuarto día 1 10
Adultos0.5 5
Proteína C Reactiva pameUtilidad diagnóstica de la PCR: Indicador precoz de inflamación Su disminución indica buena respuesta al tratamiento
antibiótico. Se usa como prueba rápida ante la presunción de
infección bacteriana (PCR alta) o contra infección vírica (PCR baja).
Es útil en detección de infecciones ocultas, particularmente, en pacientes luego de una operación.
Sugiere presencia de enfermedades crónicas (artritis reumatoidea, ).
Diagnóstico y monitoreo de infecciones cuando las pruebas son muy lentas y/o imposibles.
Rápida identificación de infecciones en pacientes de alto riesgo, neonatos, inmunosuprimidos y transplantes de médula ósea.
Proteína C Reactiva yoSignificado Clínico:-La proteína C reactiva es positiva en las siguientes situaciones:
Fiebre reumática Artritis reumatoide Infarto al miocardio Cáncer activo o diseminado Infarto pulmonar Problemas de rechazo de trasplantes Traumatismos Infecciones bacterianas Enfermedad del tejido conectivo Enfermedad intestinal inflamatoria Lupus Tuberculosis
Proteína C Reactiva yoInterferencias:
AUMENTADA DISMINUIDA
PREANALÍTICAS
Trauma, cirugía, neonatos, embarazo, trabajo de parto, trasplante renal, hemodiálisis, endotoxinas, ejercicio; fumadores, altitud. En personas de edad avanzada aumenta la frecuencia de niveles positivos elevados.
Alcohol
POR FARMACOS
Estrógenos, anticonceptivos orales (efecto de los
estrógenos).
Anticonceptivos orales (efecto de la progesterona), antibióticos, terapia antimicrobiana, antiinflamatorios no esteroidales, pentopril, budesonida, dexametasona, prednisona.
Procalcitonina raul
Marcador sensible y específico de la respuesta inflamatoria sistémica.
Permite valorar el grado de una infección bacteriana.
Su determinación esta indicada cuando exista duda diagnostica sobre la presencia de sepsis o shock séptico.
Procalcitonina
Estructura
Precursor polipeptídico de la calcitonina
Consta de 116 aminoácidosTiene un peso molecular aproximado
de 12.6 KdaEl mRNA situado en el cromosoma
11, codifica para la PCT
Procalcitonina raul
Síntesis Sintetizada en las células C de la glándula
tiroides y en células neuroendocrinas del pulmón. En situaciones de sepsis se sintetiza en tejidos y
órganos como el bazo, hígado, testículos, grasa o cerebro, por lo que sus niveles en sangre se disparan.
El principal estímulo para la liberación de PCT durante una infección es la endotoxina bacteriana.
En situaciones críticas no asociadas a infección, pueden encontrarse concentraciones elevadas de PCT.
Procalcitonina raul
Cinética
Procalcitonina pame
Clínica
Uno de los marcadores más sensible y específico
Los aumentos de procalcitonina ocurren en infecciones bacterianas, parasitarias y por hongos con manifestaciones sistémicas.
Habitualmente los niveles de procalcitonina no son detectables.
Procalcitonina nicoMétodos para determinar PCT:
Procalcitonina
B•R•A•H•M•S PCT-Q
Test inmunocromatográfico para la medición semicuantitativa de la PCT
Utiliza Ac mc (tracer) de anti-catacalcina de ratón + Ac pc (fase sólida) de anti-calcitonina de oveja.
Procalcitonina nico
B•R•A•H•M•S PCT-QModo de empleo: Abrir el envase individual antes de la realización de la
prueba. Pipetear 200 µl en la cavidad redonda de la placa. Evitar la formación de burbujas. Incubar durante 30 min. (máx..45 min.) a temperatura
ambiente.
Procalcitonina nicoB•R•A•H•M•S PCT-QLectura y evaluación: Después de 30 min. Se determina la gama de
concentración de la PCT de la prueba. LECTURA INTERPRETACIÓN
No hay banda visible o solamente banda de test visible
No son validos
Visible solamente la banda de control
Validos negativos
Bandas de control y de test visible
Validos positivos
Procalcitonina nicoB·R·A·H·M·S PCT LIA Ensayo inmunoluminométrico (ILMA) usado para
cuantificar la concentración de PCT. Se aplica en exceso dos anticuerpos monoclonales
específicos del antígeno que enlazan la PCT (antígena) en dos puntos diferentes.
Uno de los anticuerpos está marcado
por luminiscencia (el tracer), el otro está
fijado a las paredes interiores del tubo
(sistema de tubos revestido).
Procalcitonina nicoB·R·A·H·M·S PCT LIA Lectura: La magnitud de la señal de luminiscencia (RLU) es
directamente proporcional a la concentración de PCT en la prueba respectiva.
Mediante los valores de la señal de luminiscencia de los estándares es posible elaborar una curva de estándares; ahora es posible cuantificar las concentraciones desconocidas de PCT de los sueros o plasmas de pacientes comparando los valores de test con la curva.
Procalcitonina yo
Valores de referencia:
MARCADOR VALOR NORMAL
Procalcitonina < 0.05 ng/mL
Procalcitonina pameUtilidad diagnóstica de la PCT: Diagnóstico diferencial para inflamación infecciosa / no
infecciosa Pancreatitis Inmunosupresión (SIDA, neoplasia)
• Diagnóstico diferencial para infección bacteriana / no bacteriana
Meningitis Neumonia
Diagnóstico precoz en complicaciones infecciosas Pacientes quemados Pacientes traumatizados Pacientes PostQuirúrgicos Pacientes trasplantados
Procalcitonina yo
Significado Clínico:
Conclusión pame
Se puede concluir que los marcadores de la inflamación hoy en día son de mucha ayuda para el diagnóstico, pronóstico y control de procesos inflamatorios, infecciosos o daño tisular. Aunque la PCR es más sensible suele ser menos específica a diferencia de la PCT que es muy sensible y específica.Finalmente aunque la PCT muestra en general, más aplicaciones que la PCR, el uso combinado de ambas puede ser más útil que la determinación aislada de una de ellas.
Muchas gracias !!!!!
