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THE SCIENCE LEARNING CENTER

THE UNIVERSITY OF MICHIGAN-DEARBORN

¿QUÉ SON LAS PIPETAS?

Las Pipetas son tubos de cristal o plásticoabiertos por ambos lados, que se usan paratransferir cantidades precisas de líquido de un recipiente a otro. Se usan normalmente para volúmenes entre1 y 100 mililitros.

TIPOS DE PIPETAS

•Volumétrica•Graduada

•Mohr•Serológica

PIPETAS VOLUMÉTRICAS

• Se usan para medidas exactas, ya que están diseñadas paradispensar sólo un volumen y están calibradas para esevolumen.

• Tienen una ampolla central que determina el volumen de la pipeta. Normalmente entre 1 y 100 ml.

• Se deben utilizar cuando la exactitud y reproducibilidadsean cruciales,

ESPECIFICACIONES DE UNA PIPETA VOLUMÉTRICA

Las especificaciones impresas en una pipeta volumétricaindican:

• cuánto líquido transfiere la pipeta si se enrasa a la líneade calibración del cuello

• la temperatura a la que se ha calibrado• Si es una pipeta TD (to deliver) o TC (to contain)

ESPECIFICACIONES DE UNA PIPETA VOLUMÉTRICA

• Cuando se vacíe una pipeta volumétrica, se dejasalir el líquido. Pero NUNCA se fuerza soplando.

• Despues de vaciada, no se no se debedebe forzarforzar ((soplandosoplando) ) la la salidasalida de la de la pequepequeññaa cantidadcantidad de de llííquidoquido quequepermanecepermanece en la en la puntapunta.

• Las pipetas volumétricas no son pipetas de vaciado por soplado (blow-out)

PIPETAS GRADUADAS

• Tubo recto de cristal o plástico con estrechamiento en uno de sus extremos. Estáncalibradas en pequeñas divisiones de maneraque se pueden medir diferentes cantidades de líquido con la misma pipeta.

• Normalmente se usan para medir cualquiercantidad entre 0.1ml y 25.0ml.

• No son tan exactas como las volumétricasdebido a que las imperfecciones de su diámetrointerno tienen mayor efecto en el volumendispensado.

PIPETAS MOHR Y SEROLÓGICAS

Las pipetas graduadas se dividen en:

• PIPETAS MOHR– La graduación en ellas

siempre termina antes de la punta

• SEROLOGICAL PIPETTES– La graduación en ellas

llega hasta la punta

ESPECIFICACIONES EN UNA PIPETA GRADUADA

Impresas en el cuello de la pipeta están lasespecificaciones, que indican:

• el volumen máximo de líquido que se puede transferir• el tamaño de las divisiones de la pipeta• la temperatura de calibración• si es una pipeta TD (to deliver) o TC (to contain)

5 in 1/10 ml TD 20oC

Las especificaciones de una pipeta como las que se muestran arriba indican que la pipeta está calibradaen divisiones 1/10ml y que dispensará hasta 5ml con los márgenes de error publicados a 20ºC.

1 ml in1/100TD 20oC

Estas especificaciones indican que la pipeta estácalibrada en divisiones 1/100 ml y que dispensaráhasta 1,00 ml con los márgenes de error publicados a 20ºC.

Si una pipeta serológica tiene una bandaesmerilada o dos anillos alrededor del cuello, entonces es una pipeta de soplado (blow out).

Esto significa que después de dejar salir el líquidopor gravedad, la última gota que queda en la puntadebe ser forzada a salir.

PIPETAS DE SOPLADO (BLOW OUT)

La banda esmerilada no se debe confundir con bandasmas gruesas de color o con puntos coloreados, que son un código del fabricante paraindicar el máximo volumende la pipeta.

Sólo se debe soplar unapipeta serológica si tiene unabanda esmerilada o dos anillos estrechos.

PIPETAS DE SOPLADO (BLOW OUT)

MANEJO Y TRATAMIENTO DE LAS PIPETAS

• Las pipetas astilladas y rotasse deben reemplazar ya queson peligrosas y puedenafectar a la precision de lasmedidas.

• NUNCA se debe pipetear con la boca.

• La pipeta se debe sostenerpor el tercio superior y evitartocar nada con la punta.

Las pipetas sucias se debendesechar colocándolas en una solucion de aguajabonosa. Las pipetas paratirar se deben colocar en un recipiente de cartón. No se deben dejar las pipetas en poyatas o fregaderos. Si se trabaja con materialesradiactivos debe asegurarsedesechar las pipetas en contenedores debidamentemarcados.

MANEJANDO PIPETAS ESTÉRILES

Cuando se usen pipetasestériles, hay que tener en cuenta las técnicas de esterilidad apropiadas. Si se usa un paquete de pipetas desechables estériles, abrir solo una esquina del paquete, empujar una pipetaa traves de esta abertura y cerrar inmediantamente paraevitar contaminacion.

Si se usan pipetasestériles en una canasta de pipetas, colocar la canasta de lado, retirarla tapa, sacar una pipetay colocar la tapainmediatamente.

TRANSFERIR UN VOLUMEN PRECISO DE LÍQUIDO

Para evitar pipetear con la bocase usa una propipeta, o pipeteador, para subir el liquido a la pipeta y asíevitar hacerlo con la boca. Hay muchos tipos de propipetas manuales y automáticas

USING THE COMMON RUBBER BULB

Hold the pipette about 8 cm below the mouthpiece with one hand. Then with your other hand squeeze the bulb and touch the opening to the mouth of the pipette.

Insert no more than one-half cm of the pipette into the bulb.

Colocar la punta de la pipetadentro del liquido. Crear presiónnegativa (succionar) con el instrumento que estemos usando.

El líquido subirá por el interior de la pipeta y formará unasuperficie curva contra el cristal.

A esta superficie se le llama menisco.

Cuando la parte inferior del menisco esté en el nivel deseado, colocamos la punta de la pipetaen el contenedor donde queramos dispensar el líquido, tocando la superficie interior del mismo para que no quede liquido retenido en la pipeta (salvo la gota típica de las pipetasnormales (no soplado). Con la pipeta de la imagen habremos dispensado 0.645 + 0.001)ml.

RESUMEN

• Colocar el pipeteador en la boca de la pipeta. • Colocar el otro extremo de la pipeta en el líquido que se quiere

transferir. Hacerlo subir lentamente por el interior de la pipetaaplicando la presión negativa necesaria a través del pipeteador queestemos usando.

• Subir el líquido por encima del nivel deseado. • Dejar caer el liquido hasta que el fondo del menisco se alinee con el

nivel deseado en la pipeta.• Tocar con la punta de la pipeta el interior del recipiente de partida

para dejar cualquier gota adherida al exterior de la pipeta. • Transferir el líquido al segundo recipiente tocando con la punta

dentro de él para facilitar la salida del líquido.