I. Reactivacin de cepasSe reactivaron 12 cepas, las cuales
fueron analizadas, se inocularon en medio lquido, caldo Casoy para
Bacillus y caldo Nutritivo para Pseudomonas.-80C 12 cepas Se
descongel las 12 cepas a 4C 4C
Caldo Casoy o Caldo nutritivo50uL
5mL
Incubadora
150 RPM 24 a 48 h 28C Shaker
II. Inoculacin en medio LMC + TriptfanoLuego de 48 horas despus
de la reactivacin, se inocul las 12 poblaciones de bacterias en LMC
ms triptfano.25uLLMC + triptofanoCaldo Casoy o Caldo nutritivo
5mL5mL
Incubadora
Refrigeradora
4C 150 RPM 48 h 28C Shaker
III. Tcnica colorimtricaInculo
Dispensar en la cmara y tomar fotos.Medir primero el blanco y
ajustar. Tomar las medidas de cada
muestraEspectrofotmetroCalibrarlo a 530nmEsperar 30 minutos Despus
de la adicin.Adicionar 1mL del reactivo de Salkowski, a cada tubo
de ensayo en condiciones de oscuridad, incluyendo a nuestro
blancoHabitacin oscuraTubos de ensayo250 uL250
uLMicrocentrfugaTubos EppendorfTemperatura ambiente 12000 RPM por 5
minutosCada inculo por duplicado500 uL48 h500 uL
Inoculacin de las bacterias en LMC + triptfano C5C4C1C2C3C1:
Huaral Bac 01-25 C2: Huaral Bac 01-37 C3: Huaral Bac 01-85 C4:
Huaral Bac 01-84 C5: Huaral Bac 01-82
C6: Huacho Bac 01-37 C7: Huacho Bac 01-13 C8: Huacho Bac 01-32
C9: Huacho Bac 01-34 C10: Huacho Bac 01-36 C11: Huacho Ps 01-1 C12:
Huacho Bac 01-35
Fuente: Laboratorio de Ecologa Microbiana y
Biotecnologa-UNALM
C12C8C6
C11C10C9C7
Fuente: Laboratorio de Ecologa Microbiana y
Biotecnologa-UNALM
Comparacin de color en
cmaraControlA7A12A11A10A9A8A6A5A4A3A2A1
A1: Huacho Bac 01-37 A2: Huaral Bac 01-25 A3: Huacho Bac 01-35
A4: Huaral Bac 01-82 A5: Huaral Bac 01-84 A6: Huaral Bac 01-85
A7:Huacho Bac 01-32 A8: Huacho Bac 01-13 A9: Huacho Bac 01-37 A10:
Huacho Bac 01-34 A11: Huacho Bac 01-36 A12: Huacho Ps 01-1Control:
LMC + triptfano + SalkowskiFuente: Laboratorio de Ecologa
Microbiana y Biotecnologa-UNALM
