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RESUMEN DE LAS APORTACIONES EN ELBLOQUE DE PATOLOGÍA EN EL 9ºCONGRESO MUNDIAL DE CUNICULTURA Dr. D. Juan Manuel Corpa ArenasHistología y Anatomía Patológica. Facultad de Veterinaria.Universidad CEU-Cardenal Herrera

PATOLOGÍAPATOLOGÍA

ANÁLISIS COMPARATIVOCON EL 8º CONGRESO

MUNDIAL DE CUNICULTURA(PUEBLA, MÉXICO, 2004)

Si echamos la vista atrás y comparamoslas aportaciones, en el bloque de patolo-gía, que se realizaron en el 8º CongresoMundial que tuvo lugar en Puebla (Méxi-co) en 2004, podemos comprobar que noha habido grandes diferencias en el nú-mero de aportaciones. En 2004 hubo 45(13 comunicaciones orales y 32 póste-res), mientras que este año se han pre-sentado dos más, 47 (15 comunicacio-nes orales y 32 pósteres), contabilizandola mesa redonda y la ponencia de la se-sión de patología. Gráfica 1.

En lo que respecta al número de paísesparticipantes, en 2004 intervinieron 11países y en 2008 ha participado unomás. No obstante, hay varios países queno estuvieron presentes en Puebla perohan participado en Verona, como Ruma-nia, Suiza, Reino Unido y República Che-ca) y viceversa (México, República de Be-nín y Eslovaquia). Gráfica 2.De todas las naciones participantes des-taca la anfitriona, Italia, como la que harealizado un mayor número de contribu-ciones: 17 (cuatro más que en 2004). Acontinuación estaría España con 7, qui-tándole el segundo puesto a Francia, queeste año únicamente ha llevado 4 presen-taciones, frente a las 7 del 2004. Des-pués de España estarían Hungría y Bélgi-

Gráfico 1: Aportaciones Científicas

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ca, con 5 y 4 respectivamente; China con3, Grecia con 2 y, por último, Portugal,Rumania, Suiza, Reino Unido y Repúbli-ca Checa con una única aportación.Respecto a la temática tratada, destaca,con diferencia, las aportaciones en el cam-po de la bacteriología, donde hubo 30 con-tribuciones científicas. Diez más que en elcongreso anterior. En virología hubo 6 apor-taciones, 3 en diversas técnicas comunesde biología molecular, 2 en parasitología y6 en temas diversos. Hay un claro incre-mento de las contribuciones sobre diversosaspectos relacionados con las bacterias,mientras que disminuyen los trabajos en vi-rus, biología molecular y parasitología conrespecto al 2004. Gráfica 3.

Si desglosamos las aportaciones poragentes etiológicos o procesos patológi-cos, podemos comprobar que la bacteriamás estudiada es Clostridium spp. (C.perfringens, C. spiroforme y C. difficilecon 6, 2 y 1 aportaciones respectivamen-te), seguido de Pasteurella spp., Staphy-lococcus aureus, Escherichia coli con 6,5 y 3 contribuciones respectivamente. Acontinuación, estarían tres aportacionessobre Enteritis Epizoótica (EEC) y final-mente una contribución sobre Campylo-bacter spp., Klebsiella pneumoniae, Bor-detella bronchiseptica y enfermedadesbacterianas en conejos de compañía, res-pectivamente.En cuanto a los virus, hay dos aportacio-

Gráfico 2: Participación por Países

Gráfico 3: Temática

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nes sobre la Enfermedad Hemorrágica,otras dos en Mixomatosis, una en rotavirusy la ponencia sobre virología en conejos. Finalmente, únicamente hay dos pósteressobre procesos parasitarios, uno trata sobredermatofitosis y otro sobre Eimeria spp.De forma pormenorizada, si observamosla gráfica 4 puede verse como en 2004las aportaciones centradas en E. coli eranpreponderantes, mientras que únicamen-te se presentó un trabajo sobre Clostri-dium. En 2008, sin embargo, las tenden-cias se invierten claramente, disminuyenlas contribuciones sobre colibacilosis yaumentan los estudios en Clostridium.También disminuyen las aportaciones so-bre Enfermedad Hemorrágica (RHD) ycoccidiosis.

PATOLOGÍA EN EL 9ºCONGRESO MUNDIAL DECUNICULTURA.

El bloque dedicado a la patología cuníco-la se abrió, el primer día, con una mesaredonda presidida por el Dr. Ignacio Ba-diola, que versó sobre enteropatía epizoó-tica y en la que intervinieron diversos ex-pertos en el tema, que expusieron porme-norizadamente los últimos datos que setienen hasta la fecha respecto a esta mis-teriosa enfermedad.

INFECCIÓN VÍRICA ENCONEJOS.

El segundo día los italianos Dr. Lavazza yDr. Capucci presentaron una interesanteponencia sobre los tres virus que afectande forma más frecuente a los conejos. (1)El virus Mixoma (MV), un poxvirus queproduce la Mixomatosis; (2) el calicivirus(Género Lagovirus) de la Enfermedad He-morrágica del Conejo (RHDV) y (3) el Ro-tavirus Lapine (LRV), que es un agenteentérico.Inicialmente hicieron un repaso de la Mi-xomatosis, una enfermedad que aparecióen Europa hace 50 años, y que todavíahoy representa un problema real en lasexplotaciones cunícolas industriales. Ha-blaron sobre diversos estudios centradosen proteínas del virus, que tienen unefecto inmunomodulador y que están in-

Gráfico 4: Agentes etiológicos y procesos patológicos

Las clostridiosis sedesencadenan por

problemas de manejo,como por ejemplo

cambios bruscos en ladieta, estrés,

administración deciertos fármacos, etc,

que alteran el equilibriode la flora intestinal

provocando unsobrecrecimiento de

Clostridium spp

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volucradas, por lo tanto, en la respuestadel sistema inmune del conejo frente a lainfección vírica. De hecho indicaron queel estudio en estas proteínas permitirá,en los próximos años, fabricar una nuevageneración de vacunas que inducirán unamayor protección y permitirán distinguirserológicamente aquellos animales queestán infectados de los que también tie-nen anticuerpos frente al virus pero queproceden de la vacunación.La Enfermedad Hemorrágica del Conejo fueinicialmente descrita en China en 1984La primera variante antigénica (denomina-da RHDVa) fue identificada en Italia y Ale-mania en 1997. En la actualidad está pre-sente en prácticamente toda Italia y suprevalencia en campo alcanza el 50%. EnEuropa se describió entre 1997 y 2004 enAlemania, Francia, Malta y Hungría. Fuerade Europa, ha sido diagnosticada en IslaReunión, EEUU y Sudamérica. La detec-ción de anticuerpos frente al RHDV, enmuestras tomadas diez años antes de laaparición de la enfermedad en Europa, hasugerido la hipó-tesis de la exis-tencia de una omás cepas víri-cas “no patóge-nas”, antigéni-camente rela-cionadas con elvirus patógenoque produce laEnfermedad He-morrágica. Enun estudio realizado entre 1999 y 2008en Italia se demostró que estas cepas nopatógenas se han extendido por todo el pa-ís. La implicación que la presencia de es-tas cepas no virulentas y relacionadas conel RHDV, tanto en conejos industriales co-mo silvestres, se desconoce hasta la fecha. Las enfermedades entéricas o digestivasjuegan un importante papel en la indus-tria cunícola ya que producen pérdidaseconómicas severas derivadas de la mor-talidad, disminución del crecimiento ydeterioro de los índices de conversión.Entre los diferentes patógenos que pue-

den provocar enteropatía en el conejo, losvirus parece que tienen un importanteaunque no definitivo papel. Los virus yentre ellos el Rotavirus Lapine (LRV) noproducen episodios primarios de elevadagravedad, pero actúan como patógenossecundarios, con capacidad para conver-tirse en endémicos. Los autores descri-bieron las principales características ylas habilidades patogénicas de diferentesagentes víricos e intentaron atribuirles unpapel etiológico en los síndromes entéri-cos, relacionando su presencia con lesio-nes patológicas.

PROBLEMAS DIGESTIVOS

ClostridiosisUna de las mayores causas de pérdidaseconómicas en las granjas industriales sonlos problemas digestivos o enteritis causa-dos por clostridios, entre los que destacanClostridium perfringens, C. difficile y C.spiroforme. Las clostridiosis se desenca-denan por problemas de manejo, como por

ejemplo cam-bios bruscos enla dieta (a die-tas ricas en car-bohidratos fá-cilmente fer-mentables), es-trés, adminis-tración de cier-tos fármacos,etc, que alteranel equilibrio de

la flora intestinal provocando un sobrecre-cimiento de Clostridium spp.Clostridium perfringens se clasifica encinco tipos (A, B, C, D y E) atendiendo ala producción de cuatro toxinas denomi-nadas mayores (Tabla 1). Se considera aC. perfringens tipo E como uno de losprincipales causantes de enterotoxemiaen conejos.Cocchi et al. estudiaron la distribución delos diferentes tipos de C. perfringens enconejos con enteritis. C. perfringens tipoA fue el que se aisló con mayor frecuen-cia, detectándose un nuevo tipo denomi-

Tipos de C.perfringens

DesteteAlfa( )

Beta( )

Épsilon( )

Iota( )

A + - - -

B + + + -

C + + - -D + - + -E + - - +

Tabla 1: Clasificación de C. perfringens según la producción de toxinas.

nado A+ 2. También identificó el genque codifica para la toxina 2 entre losC. perfringens tipo E aislados, por lo quese confirmó la presencia de otro toxinoti-po nuevo, denominado E+ 2, entre losconejos enfermos.En cuanto al tratamiento de las clostri-diosis, el grupo de Vancraeynest probaroncon éxito dos productos. En primer lugarla Robenidina hidroclorada (4μg/ml), unproducto habitualmente empleado en laprevención de la coccidiosis, lograndouna inhibición del crecimiento de lasbacterias in vitro. También realizaron unexperimento con varias concentracionesde bacitracina (Bacivet®-S), siendo lamás eficaz una dosis diaria de 420 UI/kgde peso. Tras 30 días de administracióncontinua, las concentraciones en sangrepermanecen por debajo del límite de de-tección (<27,5μg/l). Como consecuencia,no se encontraron residuos (<75μg/kg) entejidos comestibles desde el primer díatras la retirada del tratamiento. Este gru-po recomienda la administración conti-nua, por ejemplo en agua de bebida, debacitracina sobre todo en brotes de Ente-ropatía Epizoótica donde se aísle C. per-fringens. Siguiendo con diversas estrate-gias de tratamiento, Saggiorato et al. es-tudiaron la actividad de la tilosina en 89muestras de C. perfringens aisladas decasos clínicos de Enteropatía Epizoóticaobtenidas en Francia, Italia y España. Seestudió la farmacodinamia de la tilosina,hallándose su concentración mínima in-hibitoria (MIC), obteniendo los siguientes

resultados: MIC50=0,5μg/ml, MIC90=32μg/ml, media geométrica= 1,15 μg/ml.Por lo que se confirmó la elevada activi-dad farmacológica in vitro de la tilosinafrente a C. perfringens de conejo y se co-rroboró la utilidad terapéutica para elcontrol de Enteropatía Epizoótica y Ente-rotoxemia clostridial en granjas cunícolasintensivas. En estas mismas muestras seprobó con éxito la avilamicina, adminis-trándose a una dosis de 7mg/kg de peso,durante 4 semanas (Simjee et al.).Clostridium spiroforme es el causante deseveras gastroenteritis en conejos, princi-palmente en el destete. Su patogenicidadestá relacionada con la producción deuna toxina citotóxica, similar en estructu-ra y función a la toxina iota de C. perfrin-gens tipo E. Los brotes provocados poresta bacteria son controlados mediantefármacos, pero en condiciones de campose producen frecuentes fallos terapéuti-cos, lo que sugiere que esta bacteria esaltamente resistente a los mismos. Agno-letti et al. realizaron un estudio sobre lasusceptibilidad de C. spiroforme a un pa-nel de antibióticos: espiramicina, amoxi-cilina, doxiciclina, sulfadimetoxina, nor-floxacina y tiamulina. De todos ellos úni-camente la doxiciclina presentó una con-centración mínima inhibitoria de eficaciaterapéutica. Este hecho confirmó los ha-llazgos de campo donde se ponía de ma-nifiesto la elevada resistencia de estegermen. Por lo tanto, se recomienda unuso prudente de los antimicrobianos, dis-minuyendo su utilización, y priorizar las9

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medidas profilácticas mediante la opti-mización de las medidas de manejo, paraminimizar la creación de resistencias an-tibióticas. Por último, este grupo confir-mó mediante un estudio en 132 granjasitalianas que C. difficile estaba involucra-do ocasionalmente en brotes de enferme-dades entéricas en conejos, por lo tantodebe tenerse en cuenta en el diagnósticodiferencial de estos procesos.

ColibaciolosisComo se ha indicado anteriormente lasenfermedades digestivas son la principalcausa de mortalidad en las naves de en-gorde. El impacto económico de un epi-sodio de enfermedad digestiva se ha cal-culado en 0,78€ por conejo producido.Tonelli et al. presentaron la caracteriza-ción genética de una serie de cepas de E.coli aisladas durante dos años en ungranja con problemas de colibacilosis.Clasificaron las 23 cepas estudiadas entres grupos, atendiendo a la presencia degenes que codifican para varios factoresde patogenicidad. Cuando realizaron unacorrelación con las lesiones que se obser-vaban en la granja, vieron que únicamen-te dos de los grupos estaban representa-dos, un grupo que provocaba enterocoli-tis y otro que daba lugar a lesiones carac-terizadas por una enteropatía mucoide yconstipación.Los checos Skrivanová et al. lograron me-diante la adición en la dieta de ácido caprí-lico y triacilgliceroles de los ácidos caprílicoy cáprico, la reducción de E. coli enteropa-togénico en ciego y heces de conejos expe-rimentalmente infectados. En cuanto al tra-tamiento farmacológico, Morel et al. confir-maron, en dos estudios clínicos, que la do-sis óptima en un brote de enterocolitis aso-ciado con E. coli en conejos es 7,5 mg deapramicina por kg de peso y por día (ej.100 ppm en alimento) durante 21 días con-secutivos, lográndose la reducción de lamortalidad y los signos clínicos.

Enteropatía EpizoóticaRespecto a la Enteropatía Epizoótica,además de la mesa redonda donde inter-

vinieron varios especialistas en el tema,hubo una contribución presentada porHuybens et al. que reafirmó la hipótesisbacteriana en la etiología de esta enfer-medad. Por otro lado, el grupo de Badiolaafirmó que tras realizar un tratamiento enpienso durante 28 días, con 39 ppm detiamulina, el periodo de retirada sería de0 días, ya que los residuos detectados enmúsculo e hígado estaban por debajo delos límites cuantificables en conejos.

RotavirusEl grupo de Lavazza discutió sobre el pa-pel patogénico y la importancia de los vi-rus (principalmente rotavirus) comoagentes etiológicos primarios en la ente-ritis de los conejos, ya que detectaronpartículas víricas en el 45,3% (16% eranrotavirus) de las 243 muestras tomadasde conejos con enterotiflitis catarral, he-morrágica o necrótica, enteropatía mucoi-de e impactación cecal, obtenidas duran-te 2002-2007.

CoccidiosisLa coccidiosis es el principal proceso pa-rasitario causante de desórdenes digesti-vos en los conejos de cebo, cuyo papel esaún mayor tras la aparición de la Entero-patía Epizoótica. Vancraeynest et al. pre-sentaron un estudio donde confirmaron elefecto beneficioso de un tratamiento an-ticoccidial (robenidina hidrocloro –Cycostat® 66G), aplicado en la dieta deanimales infectados experimentalmentecon Eimeria media e Eimeria magna.

Otros agentes digestivosKlebsiella pneumoniae es una bacteriamuy resistente a los antibióticos, quepuede aislarse del tracto gastrointestinalde los conejos y donde provoca alteracio-nes digestivas. El grupo del italiano Za-noti describió una nueva especie deCampylobacter en contenido cecal de co-nejos industriales, aunque no se ha de-mostrado su efecto patogénico en cone-jos o incluso su papel zoonótico para elhombre. Finalmente, en un experimentorealizado por Saggiorato et al. observaron

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que el fármaco con mayor actividad far-macológica (in vitro) frente a esta bacte-ria era la apramicina.

PROBLEMAS RESPIRATORIOS

PasteurellosisEl grupo de Hoop realizó una caracteriza-ción fenotípica y genotípica de 228 aisla-dos de diferentes orígenes. Se comprobóque el fenotipado divergía del genotipa-do. Así, los métodos basados en la fer-mentación del sorbitol y la trehalosa fue-ron indicadores imprecisos para la clasifi-cación de Pasteurella multocida, lo quepuede dar lugar a errores diagnósticos enlos laboratorios que empleen únicamenteestas técnicas. Fabian et al. indicaron quea lo largo del tiempo y en una misma gran-ja puede observarse una elevada variabili-dad (feno y genotípica) en las cepas de P.multocida identificadas. Pueden obtener-se cepas de diferente patogenicidad tantoen animales enfermos como clínicamentesanos. Aunque las cepas obtenidas de co-nejos muertos de pasteurellosis parecenser más virulentas, al menos al inocularlasen ratones (Virag et al.).Fabian et al. demostraron que la manifes-tación de la enfermedad está claramentecondicionada por el tipo de cepa inocula-do, así como por la ruta de inoculación.Además probaron el efecto protector deuna vacuna inactivada trivalente frente aP. multocida. Aunque lograron una reduc-ción de la colonización nasal de la bacte-ria tras la vacunación, tuvieron gravesefectos adversos como una disminucióndel número total de nacidos, menor pro-porción de neonatos vivos y mayor morta-lidad de los lactantes. Este efecto negati-vo lo relacionaron con la aplicación de lavacuna unos días antes de realizar la in-seminación artificial.Los rumanos Coman et al. describieronun caso de pasteurellosis aguda en unagranja con una elevada morbilidad y mor-talidad, que afectaba a todas las edades.Tras un tratamiento con enrofloxacina yoxitetraciclina en agua de bebida el pro-ceso mejoró un día después de iniciar el

tratamiento y las muertes remitieron alcuarto día.

ENFERMEDAD VÍRICAHEMORRÁGICA

En un estudio sobre vacunación frente aesta enfermedad, Longsheng et al. sugi-rieron que la vacunación podría realizarseen animales de 35 días y que una vacunaadyuvada con hierbas chinas provocaríauna significativa mejora en la respuestainmune en comparación con el tradicio-nal adyuvante a base de aluminio.

MIXOMATOSIS

Grecia ha estado libre de mixomatosisdesde 1973 hasta el año 2007, cuandose desencadenó un brote, que relataronNtafis et al. y Kritas et al. Se sospechóque el origen estaba en una partida deanimales importados y la virulencia delproceso se atribuyó a la ausencia de pro-gramas de contención. El brote se erradi-có mediante la eliminación de los anima-les afectados.

ESTAFILOCOCOSIS

Fagnoletti et al. presentaron un estudiosobre la prevalencia de Staphylococcusaureus en varias granjas industriales ita-lianas, indicando que la prevalencia me-dia dentro de cada granja era del 77,6%.Encontraron granjas con dos biotipos di-ferentes y además señalaron que existíauna correlación entre los biotipos de S.aureus identificados en granja con losaislados en las multiplicadoras. Tambiénrealizaron un método de muestreo, enanimales clínicamente sanos, para la de-tección de animales portadores de S. au-reus. Muestreando la parte externa de laoreja, el abdomen y el espacio interdigi-tal de las patas traseras se alcanzó unporcentaje de identificación de portado-res del 88,6%. Nuestro grupo presentóun estudio sobre la relación entre anima-les portadores nasales de S. aureus y lapresencia de lesiones. Observamos que el

56% de los 116 animales muestreadosen 6 granjas industriales, eran portadoresnasales. El 84,2% de los conejos con le-siones eran portadores, mientras que delos animales clínicamente sanos, única-mente el 28,8% eran portadores. Ademásse observó una correlación del 91,7% en-tre las cepas obtenidas de las lesiones yde la cavidad nasal. Por lo que conclui-mos sugiriendo que la condición de por-tador nasal podría facilitar el desencade-namiento de infecciones clínicas en losanimales. Siguiendo con nuestros estu-dios en patología mamaria asociada a S.aureus, presentamos una clasificaciónhistopatológica de las mamitis estafilocó-cicas en conejos, asociando las lesiones,al estado inmunológico de los animales.Es decir, ante una infección mamaria elconejo reaccionará de una forma u otradependiendo de su estatus inmunológico.Por otro lado, los belgas Meulemans et al.probaron el efecto de una autovacuna enun modelo experimental. Aunque los ani-males vacunados desarrollaron abscesosde menor tamaño, la vacuna no logró pre-venir la formación de los mismos.

BIOLOGÍA MOLECULAR

En el congreso también se presentarondiversas herramientas diagnósticas de ca-rácter molecular lo que, sin duda, permi-tirá mejorar el diagnóstico laboratorial.Así, el grupo de Drigo presentaron unaPCR que permitió identificar tanto aClostridium spiroforme como a los genesque codifican para su principal toxina.Por otro lado, Wang et al. pusieron a pun-to una técnica de PCR para la detecciónde Bordetella bronchiseptica en conejos.El grupo de Badiola et al. han ajustadouna PCR anidada para la detección espe-cífica, en fluidos biológicos (semen, flui-dos del oviducto, embriones, etc), de pe-queñas cantidades de Pasteurella multo-cida, Staphylococcus aureus, virus de laMixomatosis y el virus de la EnfermedadHemorrágica del conejo. Igualmente des-cribieron un nuevo tipo de PCR (REP-PCR) para evaluar el grado de similitud

entre las diferentes cepas de Bacteroidesspp. obtenidas del aparato digestivo. Porúltimo, los chinos Kongwang et al. presen-taron una nueva técnica de PCR (RT-PCR)para la identificación del virus productorde la Enfermedad Hemorrágica con unaelevada especificidad y sensibilidad quepuede ser empleada tanto para el diagnós-tico clínico como estudios epidemiológi-cos y análisis de carne; ya que permite ladetección de pequeñas cantidades de vi-rus (3,32 ng/μl), en muestras de hígado,riñones, bazo, sangre y pulmón.

HIGIENE Y SALUD

Finalmente, dentro del bloque de patolo-gía también se incluyeron varias aporta-ciones relacionadas con la higiene y sa-lud de los animales. En este apartado po-dríamos incluir varios estudios como elde Colin et al. que estudiaron el efecto delos paneles refrigerantes y su localiza-ción, en el estado sanitario de los anima-les. Lavazza et al. intentaron definir dis-tintos parámetros relacionados con la sa-lud y el bienestar de los conejos indus-triales. Igualmente, Rosell y de la Fuentepresentaron un índice de condición cor-poral, en base a dos parámetros (canti-dad de músculo y grasa en diversas loca-lizaciones), como un indicador de saluden las conejas y, por lo tanto, como unbuen criterio de evaluación del manejo engranja. Por otro lado, Finzi et al. expusie-ron un sistema de control de enfermeda-des mediante manejo (disminución dedensidad de animales en engorde, sepa-ración de la madre y aislamiento de ani-males enfermos o sospechosos, etc), quelograba mantener la mortalidad por deba-jo de un 10%. Gualterio et al. propusie-ron realizar un control de la EnteropatíaEpizoótica racionalizando el aporte deagua de bebida en animales no tratadoscon antibióticos. Por último, Martino yLuzi presentaron un método para evaluarel estado y calidad microbiana del aire delas granjas, para así facilitarnos la tomade decisiones respecto a futuras medidashigiénicas.9

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