1. SEROLOGA DE BACTERIAS, VIRUS, PARSITOS Y HONGOS

2. SEROLOGA DE BACTERIAS Y VIRUS 3. QU ES UN DIAGNOSTICO SEROLGICO? o Anlisis que mide el nmero de anticuerpos que se producen ante la presencia de un virus o bacteria en el suero. o Valoracin de los anticuerpos (antiVHA, antiVHB y antiVHC). o Diagnstico realizado mediante examenes en el laboratorio de las reacciones antgeno-anticuerpo en suero. 4. OBJETIVOS DEL DIAGNSTICO SEROLGICO: Diagnstico de la enfermedad actual Conocimiento del estado inmunitario de un individuo previo a una vacunacin Conocimiento del estado inmunitario de una poblacin Diagnostico de infecciones por microorganismos que no se pueden cultivar Para diagnosticar infecciones en pacientes con tratamiento antibitico Diagnostico retrospectivo (seroconversin) 5. Un microorganismo patgeno contiene y produce muchos ANTGENOS diferentes que el husped reconocer como extraos, de modo que la infeccin con un agente provocar la aparicin de varios ANTICUERPOS especficos diferentes. Esta especificidad es la base de la mayora de las tcnicas inmunolgicas para deteccin de Ag o Ac. 6. Las tcnicas destinadas a la bsqueda de anticuerpos necesitan del tiempo necesario para que se produzca un aumento significativo del ttulo de anticuerpos Los antgenos en cambio, pueden ser detectados desde el comienzo de la enfermedad. Constituye una ventaja el que an durante el tratamiento con antibiticos, los antgenos sean detectables 7. Si se pretende identificar un Antgeno Un Anticuerpo especfico marcado Se utilizar Si se quiere identificar un anticuerpo especfico y se marcar el Antigeno que induce su produccin. Se utilizar 8. Entre las enfermedades infecciosas diagnosticadas por exmenes serolgicos estn sfilis, rubola, leptospirosis toxoplasmosis, mononucleosis infecciosa, entre otras. 9. TCNICAS DE DIAGNOSTICO SEROLGICO 10. Aglutinacin Se basan en la unin de antgenos particulados a los anticuerpos. Suele tratarse de pruebas muy sensibles pero con poca especificidad Ejemplos de este tipo de pruebas es la aglutinacin con rosa de Bengala empleada en el diagnstico de la brucelosis. En casos de meningitis, se puede detectar en el LCR la presencia de antgenos de Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningiditis y de Streptococcus beta hemoltico grupo B. 11. FIJACIN DEL COMPLEMENTO Se basa en la capacidad del complemento para unirse a los complejos antgeno-anticuerpo. la prueba se desarrolla en dos fases, una primera que es una reaccin antgeno anticuerpo en un medio lquido y una segunda consistente en la adicin de complemento, una hemolisina dependiente de complemento y eritrocitos. Si se ha producido reaccin antgeno-anticuerpo, es decir, si el suero analizado contena anticuerpos frente al antgeno, el complemento queda fijado y no puede activar la hemlisis de los glbulos rojos. 12. INMUNOFLUORESCENCIA Pueden utilizarse para detectar anticuerpos o para detectar la presencia de un patgeno. En ambos casos la reaccin finaliza mediante la adicin de un anticuerpo conjugado a una sustancia fluorescente, habitualmente fluorescena. Se usa en la deteccin de virus respiratorios (influenza, parainfluenza, adenovirus, virus sincicial respiratorio), virus herpes, sarampin y parotiditis, as como en bacterias como Bordetella pertussis, Rickettsia rickettsia y Chlamydia trachomatis. 13. ELISA (ENZIMOINMUNOANALISIS) Las pruebas inmunoenzimticas se basan en una reaccin antgeno anticuerpo que tiene lugar sobre un soporte slido (normalmente una microplaca de plstico) a la que se ha adsorbido un antgeno o un anticuerpo. La prueba puede desarrollarse en diferentes modalidades pero en todas ellas la reaccin final se revela mediante un enzima que modifica un substrato que adquiere color. El color que se produce es proporcional a la cantidad de anticuerpo especfico que se fija al antgeno. Se trata de pruebas muy sensibles y especficas. El mtodo se utiliza en la deteccin de virus sincial respiratorio. Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, rotavirus, adenovirus, virus hepatitis, virus varicela-zster, etctera. 14. SEROLOGIA DE PARASITOS Y HONGOS 15. Serologia Tecnica utilizada para la deteccion de anticuerpos especificos contra parasitos y hongos, constituyendo el diagnostico serologico Identificar problemas de salud Determinar la distribucion de una enfermedad Determinas la incidencia y la prevalecencia de una enfermedad calendario de vacunacion objetivos 16. Utilidad en parasitologia Establecer diagnostico diferenciales entre diferentes patologias infecciosas: paracitarias , fungicas, bacterianes. Eleccion de la mejor conducta terapeutica Establecer politicas sanitarias de prevencion Estudios epidemiologicos Algunas aplicaciones Paracitosis hemotesiduales: Toxoplasmosis Chagas Toxocariosis Hidatidosis Cistecercosis Amebiasis Leishmaniasis Paludismo 17. Parasitos como antigenos Somaticos o estructurales: superficie citoplasmaticos Metabolicos: productos de la actividad fisiologica, antigenos de secrecion excresion. Proteinas, glicoproteinas, polisacaridos, lipidos. Tecnicas Floculacion Aglutinacion Presipitacion Fluorecencia Inmunoenzimoanalisis 18. CONDICIONES PRE ANALTICAS EN SEROLOGIA Informacin Solicitud Obtencin de muestra 6hrs de ayuno, extraccin de sangre venosa, tubos secos sin anticoagulante Transporte: separadas y refrigeradas Conservacin: a 4c,-20c 19. Pruebas serolgicas : Se usan varias pruebas serolgicas para detectar anticuerpos anti-leishmania a) Prueba de inmunofluorescencia indirecta b) Enzimoinmunoensayo c) Prueba de aglutinacin directa d) Prueba inmunocromatogrfica rpida (en varilla o tira) Serologa para Leishmaniosis 20. El mtodo mas sencillo de diagnostico es el frotis y la gota gruesa, tomados preferentemente del estado febril y coloreados con derivados del Romanowsky, siendo la coloracin de Giemsa la mas usada. Este mtodo puede emplearse en postas o establecimientos de salud locales que cuenten con microscopio. se ha recomendado el uso de naranja de acridina, que tie el ncleo para detectar mejor a los parsitos. Pruebas serolgica para malaria 21. se coloca una gota de sangre en un portaobjetos limpio y con la esquina de otro, se disemina la sangre hasta llegar a un dimetro de ms o menos 1 cm. El espesor debe ser tal que permita leer a travs de la preparacin. GOTA GRUESA Las preparaciones se dejan secar y se colorean con la tcnica de Giemsa 22. DIAGNSTICO SEROLGICO: se aplican las tcnicas que detectan anticuerpos especficos contra el parsito ya que tienen la capacidad de evidenciarlos a partir de la tercera semana de ocurrida la infeccin . con por lo menos dos tcnicas de principio diferente, empleamos las tcnicas de ELISA e IFI, ratifique el resultado reactivo obtenido en el tamizaje. En conjunto ambas pruebas alcanzan el 95-98% de PRUEBA SELOGICA PARA EL MAL DE CHAGAS 23. La hemaglutinacin indirecta emplea glbulos rojos de carnero, previamente tratados con cido tnico, como soporte de extractos solubles del parsito (antgeno). Es una prueba altamente sensible y especfica. En la Los kits comerciales simplifican la ejecucin de la tcnica, proporcionando el antgeno absorbido a los glbulos rojos. HEMAGLUTINACIN INDIRECTA (HAI) 24. Las micosis profundas son enfermedades infecciosas causadas por un grupo heterogneo de hongos, que, desde su hbitat natural, el medio ambiente, penetran accidentalmente en el organismo. La puerta de entrada ms frecuente es el aparato respiratorio, especialmente en los casos de Histoplasmosis y Coccidioidomicosis en los cuales el hongo puede permanecer, originando lesiones pulmonares o puede diseminarse a travs de vasos sanguneos o linfticos al tejido cutneo, visceral y seo PRUEBAS SEROLOGICAS PARA DIAGNOSTICO DE MICOSIS PROFUNDAS 25. Pruebas serolgicas para hongos Tcnica de doble difusin en gel Se utiliz el equipo comercial fabricado por M. A. Bioproducts de Whittaker Corporation de U.S.A., basado en los principios. De inmunodifusin o doble difusin descrito por Oudin y Ouchterlony. Se utilizaron los antgenos y sueros controles de Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis y Aspergillus spp. del equipo comercial y el antgeno y suero control de Paracoccidioides brasiliensis suministrado por Yarzbal y col Antgenos y sueros controles: 26. Tcnica de aglutinacin de ltex para Criptococcus neoformans Esta es una prueba cualitativa y semi- cuantitativa que permite detectar en suero y L.C.R., la presencia del antgeno capsular polisacrido de Criptococcus neoformans. Esta tcnica utiliza partculas de ltex impregnadas con Globulinas normales, estas ltimas nos permiten detectar las aglutinaciones no especficas que pueden ocurrir debido a la presencia de ciertas Macroglobulinas (Ej: factor reumatoideo). Se utiliz el equipo comercial Crip- tococcal Antigen Latex Agglutination System de M. A. Bioproducts, Whittaker U.S.A. 27. HISTOPLASMOSIS Enfermedad de Darling, Fiebre de las cavernas, Fiebre de las minas abandonadas oreticuloendoteliosis) ----------------- Histoplasma Capsulatum Pruebas serologicas Dentro de los estudios serolgicos para histoplasmosis se encuentran: la aglutinacin de partculas de ltex, precipitacin e inmunodifusin; stas pruebas resultan positivas en 2 o 5 semanas despus de lainfeccin. La prueba de fijacin del complemento en la enfermedad positiva permanece positiva en un ttulo de 1:32 o ms; en las pruebas de inmunodifusin dos bandas de precipitacin son de valor diagnstico en ala histoplasmosis activa. Otra prueba diagnstica es 28. Histoplasmosis cutnea diseminada asociada a VIH-SIDA 29. BIBLIOGRAFA http://www.cun.es/la-clinica/servicios- medicos/departamento/microbiologia- clinica/diagnostico-serologico- Clnica Universidad de Navarra. http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs /pdf/Libro_Zoonosis_ok21.01[1].pdf-Instituto Nacional de Salud Microbiologia Medica- Jawetz