SİSPLATİN NEFROTOKSİSİTESİNİN

ÖNLENMESİ VE TEDAVİSİNDE

PROXEED PLUS’IN ETKİSİ; DENEYSEL RAT ÇALIŞMASI

Elif Ece Doğan1, Mehmet Şerif Aydın2, Eray Metin Güler3, Abdurrahim Koçyiğit3,

Mesut Şeker4, Rümeyza Kazancıoğlu5

1Bezmialem Vakıf Üniversitesi Tıp Fakültesi İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı2Medipol Üniversitesi Rejeneratif ve Restoratif Bilimler Araştırma Merkezi

3Bezmialem Vakıf Üniversitesi Tıp Fakültesi Biyokimya Ana Bilim Dalı4Bezmialem Vakıf Üniversitesi Tıp Fakültesi Onkoloji Bilim Dalı5Bezmialem Vakıf Üniversitesi Tıp Fakültesi Nefroloji Bilim Dalı

Sisplatin

«Penicillin of Cancer»

Rosenberg B, VanCampl, Trosko J, Mansour V. Platinum compounds: A new class of potent antitumour agents. Nature 1969; 222: 385–386 2

-Michele Peyrone, 1845

-Alfred Werner, 1893

-Barnett Rosenburg, 1965

Sisplatinin Kısıtlayıcıları

dos Santos NA, Carvalho Rodrigues MA, Martins NM, dos Santos AC. Cisplatin-induced nephrotoxicity and targets of nephroprotection: an update. Arch

Toxicol 2012;86:1233-50. 3

Tümör hücre direnci

Nefrotoksisite (doza bağımlı)

Ototoksisite

Nörotoksisite

Emetojenite

Sisplatin Nefrotoksisitesi/

Patogenez

Nefrotoksisite mekanizmaları

Oksidatif stres

Apoptoz

Nekroz

İnflamasyon

Fibrozis

Mitokondriyal hasar

Yao X, Panichpisal K, Kurtzman N, Nugent K. Cisplatin nephrotoxicity: A review. Am J Med Sci.2007;334:115–124 4

Sisplatin Nefrotoksisitesi/

Histopatoloji

Aleisa AM, Al-Majed AA, Al-Yahya AA, et al. Reversal of cisplatininduced carnitine deficiency and energy starvation by propionyl-L-carnitine in rat kidney

tissues. Clin Exp Pharmacol Physiol 2007; 34: 1252-1259 5

Sitoplazmik vaküolizasyon

Apopitoz

Mitokondriyal şişme

Nükleer solukluk

Tübüler nekroz

İnterstisyel ve

periglomerüler fibrozis

İnterstisyel inflamasyon

Sisplatin Nefrotoksisitesinin

Önlemesi

Sıvı desteği

Mineraller

Antioksidan moleküller

6

Proxeed Plus Proxeed plus, sperm üretimi, gelişimi ve matürasyonunu

sağlayan bir diet desteğidir.

Yaklaşık 10 yıldır bu endikasyonda kullanılmaktadır.

7

Proxeed Plus

Proxeed Plus’ın içeriği;

-L-carnitine Fumarate (1,7 gr)

-Acetyl-L-Carnitine (0,5 gr)

-Selenyum (50 mcg)

-Çinko (10 mg)

-Koenzim Q10 (20 mg)

-Vitamin C (90 mg)

-Folik Asit (200 mcg)

-Vitamin B12 (1,5 mcg)

8

Proxeed Plus

Bir gıda desteği olan Proxeed Plus’ın içeriğindeki

maddelerin birçoğu sisplatine bağlı nefrotoksisitede etkili

bulunmuştur.

Proxeed Plus; uzun süredir kullanılıyor olması,

içeriğindeki moleküllerin ciddi antioksidan ve sitoprotektif

etkileri sayesinde sisplatin nefrotoksisitesinde etkili bir

medikal uygulama olabileceğini düşünmekteyiz.

10

Materyal ve Metod

Deney Hayvanlarının Grupları

Grup 1 (n=8): Sisplatin (7,5 mg/kg, i. p.) tek doz

Grup 2 (n=8): Sisplatin (7,5 mg/kg, i. p.) uygulamasından 15 gün önce Proxeed Plus (150mg/kg/gün) her gün gavajyoluyla uygulandı

Grup 3 (n=8) : Sisplatin (7,5 mg/kg, i. p.) uygulamasının öncesi ve sonrasında15 gün boyunca Proxeed Plus (150mg/kg/gün) gavaj yoluyla her gün uygulandı.

Grup 4 (n=8): 15 gün boyunca Proxeed Plus (150mg/kg/gün) gavaj yoluyla uygulandı.

Grup 5 (n=8): Serum fizyolojik (1 cc, i. p.) 15 gün boyunca günde tek doz olarak uygulandı.

11

12

Değerlendirme Parametreleri

Biyokimyasal Değerlendirme

COMET ASSAY (Alkali Mononükleer Hücre Elektroforezi) Yöntemi İle DNA HASAR Tayini

TAK

TOS

OSI

Proinflamatuar Sitokinler (TNF-alfa, IL-1 beta, IL-6)

Antiinflamatuar Sitokinler (IL-10)

BUN

Kreatinin

13

Değerlendirme Parametreleri

Histopatolojik Değerlendirme

Hemotoksilen Eozin ile İnceleme

Tübüler dejenerasyon, epitel ve fırça kenar kaybı,

tübüler dilatasyon, vakuolizasyon, nekroz ve intratübüler

birikinti yaygınlığı

Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP

nick-end labeling (TUNEL) boyama

Anti-Caspase3

14

Bulgular

15

Grup 1 (SİS): 64.97 ± 8.69

Grup 2 (PP+SİS): 38.05 ± 6.93

Grup 3 (PP+SİS+PP): 18.77 ± 5.37

Grup 4 (PP): 16.34 ± 5.02

Grup 5 (KNT): 15.97±4.61

Bulgular

Grup 1 (SİS): 1.63 ± 1.07

Grup 2 (PP+SİS): 0,88 ± 0.31

Grup 3 (PP+SİS+PP): 0.56 ± 0.21

Grup 4 (PP): 0.51 ± 0.11

Grup 5 (KNT): 0.48±0.1316

Bulgular

Grup 1 (SİS): 0.68 ± 0.12

Grup 2 (PP+SİS): 0.77 ± 0.21

Grup 3 (PP+SİS+PP): 0.86 ± 0.13

Grup 4 (PP): 0.88 ± 0.11

Grup 5 (KNT): 0.91 ±0.1017

Bulgular

Grup 1 (SİS): 16.414±2.19

Grup 2 (PP+SİS): 13.46 ±3.17

Grup 3 (PP+SİS+PP): 10.17 ± 1.93

Grup 4 (PP): 10.02± 4.13

Grup 5 (KNT): 9.91±1.87 18

Bulgular

Grup 1 (SİS): 25.08± 9.76

Grup 2 (PP+SİS): 16.51 ± 7.58

Grup 3 (PP+SİS+PP): 12.11 ± 5.17

Grup 4 (PP): 11.73± 4.5

Grup 5 (KNT): 11.11±2.86 19

Bulgular

Grup 1 (SİS): 61,94±14.97

Grup 2 (PP+SİS): 53.35 ±10.09

Grup 3 (PP+SİS+PP): 21.46 ± 5.46

Grup 4 (PP): 19.02 ± 6.90

Grup 5 (KNT): 18.33±4.9920

Bulgular

Grup 1 (SİS): 1234.90 ± 89.36

Grup 2 (PP+SİS): 933.12 ± 67.78

Grup 3 (PP+SİS+PP): 610.502 ± 73.09

Grup 4 (PP): 591.58 ± 65.36

Grup 5 (KNT): 552.39± 48.1321

Bulgular

Grup 1 (SİS): 1119.74± 82.9

Grup 2 (PP+SİS): 897.42 ± 62.84

Grup 3 (PP+SİS+PP): 595.28 ± 57.41

Grup 4 (PP): 552.46 ± 42.17

Grup 5 (KNT): 505.65 ± 41.1022

Bulgular

Grup 1 (SİS): 1019.85 ± 75.70

Grup 2 (PP+SİS): 858.90 ± 80.86

Grup 3 (PP+SİS+PP): 670.52 ± 59.82

Grup 4 (PP): 612.60 ± 75.73

Grup 5 (KNT): 591.89 ± 45.28

23

Bulgular

Grup 1 (SİS): 486.45 ± 60.32

Grup 2 (PP+SİS): 701.97 ± 38.43

Grup 3 (PP+SİS+PP): 854.63 ± 88.92

Grup 4 (PP): 785.81 ± 62.01

Grup 5 (KNT): 533.57 ± 48.7924

BulgularHistolojik İnceleme

25

Kontrol (A) ve PP (B) gruplarında böbrek dokusu normal morfolojisinde görülmektedir.

Bulgular

26

Histolojik İnceleme

SİS grubunda (C) tübüler dilatasyon, epitel döküntüsü, fırça kenar kaybı,

intrasitoplazmik vakuolizasyon ve intratübüler hiyalin madde birikimi görülmektedir.

SİS+PP (D) ve PP+SİS+PP (E) gruplarında hasarın iyileştiği ve kontrol grubuna

benzer bir morfolojide oldukları görülmektedir

Bulgular

27

28

TUNEL Boyama

Bulgular

TUNEL Boyama

29

30

CASPASE-3

Bulgular

CASPASE-3

31

32

TartışmaYakın zamanda Nematbakhsh ve ark.nın sisplatin

nefrotoksistesini önlemede koruyucu ajanlar üzerine olan bir

çalışmasında şu sonuca ulaşılmıştır :

« Sisplatin indüklü nefrotoksisite sadece oksidatif stresi

artırmaz aynı zamanda renal hemodinamikleri, eser element

seviyelerini, reaktif antioksidan komponentlerini vb. birçok

durumu etkiler.»

Bundan dolayı tüm problemleri çözecek tek bir antioksidan

destek bulunmamaktadır.

Nematbakhsh M, Pezeshki Z, Eshraghi Jazi F et al. Cisplatin Induced Nephrotoxicity; Protective Supplements and Gender

Differences Asian Pac J Cancer Prev. 2017;18(2):295-314. 33

Tartışma Proxeed Plus içeriğindeki farklı moleküller sayesinde kombine

etki oluşturarak sisplatine bağlı nefrotoksisiteyi önlemektedir.

Sisplatin uygulamasından önce uygulanan Proxeed Plus’ınetkinliği kısıtlı olmakla birlikte mevcuttur.

PP+SIS uygulamasında kısmi etkili olduğu biyokimyasal ve histopatolojik verilerle gösterildi.

Ancak PP+SIS+PP uygulamasına göre etkisi kısıtlı kalmaktadır.

PP+SIS+PP uygulamasında daha uzun süre Proxeed Plus uygulanmasına bağlı etkinliğinin artmış olduğunu düşünmekteyiz.

34

Sonuç

Çalışmamızda farklı özelliklere sahip molekül (Karnitin,

Koenzim Q10, Vitamin C, Vitamin B12, Folik asit) ve

mineralleri (Selenyum, Çinko) bünyesinde kombine halde

bulunduran Proxeed Plus’ın sisplatin nefrotoksisitesine

etkisi incelendi.

Proxeed Plus’ın sisplatinin indüklediği nefrotoksisiteyi

önlediği biyokimyasal ve histolojik parametrelerle

gösterilmiştir.

35

36

Teşekkür ederim